1 CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU CATT Card Agglutination Test for Trypanosomiasis cDNA DNA bổ xung (complementary DNA) DNA Deoxyribo Nucleic Acid dNTP Deoxynucleotid triphotphat EDTA Ethylen Diamin Tetra Acetic IFAT Indirect Fluorescent Antibody Test IPTG Isopropyl β – D - thiogalactoside PBS Phosphat Buffered Saline PCR Polymerase Chain Reaction RNA Ribonucleic acid SDS Sodium Dodecyl Sulfat SDS – PAGE Sodium Dodecyl Sulfat Poly Acrylamide TEA Tris – axit acetic – EDTA T.evansi Trypanosoma evansi VAT Variant Antigen Tupe VSG Variant Surface Glucoprotein v/p Vòng/phút 2 DANH MỤC CÁC BẢNG 3 DANH MỤC CÁC HÌNH 4 ĐẶT VẤN ĐỀ 1. Tính cấp thiết củacủa đề tài Bệnh tiên mao trùng hay còn gọi là bệnh ngã nước trâu bò do Trypanosoma evansi (T.evasi) gây ra. Theo số liệu của Phạm Sỹ Lăng (1982), Phan Địch Lân và cs (2004)[9], Phan Văn Chinh (2006)[3], bệnh tiên mao trùng xuất hiện ở nhiều vùng trên cả nước, với tỷ lệ mắc khá cao: trên trâu là 13 – 30%, trên bò là 7 – 14%, trong đó tỷ lệ gia súc chết/gia súc mắc lên tới 6,3 – 20%. Hậu quả là bệnh gây thiệt hại lớn cho ngành chăn nuôi do ảnh hưởng đến sản lượng thịt và sức kéo. Trong các hệ thống chẩnđoánbệnh tiên mao trùng hiện nay ở nước ta như: phương pháp chẩnđoán truyền thống, phương pháp chẩnđoán huyết thanh học, phương pháp chẩnđoán sinh học phân tử thì phương pháp chẩnđoán huyết thanh học được đánh giá là có độ nhạy và độ đặc hiệu cao, cho kết quả nhanh và có khả năng chẩnđoán với số lượng mẫu lớn trong thời gian ngắn. Tuy nhiên hiện tại chúng ta vẫn phải sử dụng Kít nhập ngoại nên giá thành cao, chưa có khả năng cho phép sử dụng rộng rãi để chẩnđoánbệnh tiên mao trùng. Ở Việt Nam, vấn đề sản xuất Kít huyết thanh học chẩnđoánbệnh tiên mao trùng còn khá mới mẻ. Hầu hết chỉ tập chung vào xác định hiệu quả chẩnđoáncủa một số phương pháp phát hiện tiên mao trùng và phương pháp huyết thanh học. Để sản xuất Kít chẩnđoán cần phải có một lượng lớn kháng nguyên RoTAT 1.2, nguồn kháng nguyên này có thể được sản xuất bởi 2 phương pháp: tự nhiên và tái tổ hợp. 5 Kháng nguyên tự nhiên được tách từ ký sinh trùng sau khi tăng sinh trên động vật thí nghiệm. Ưu điểm của phương pháp này là có thể đồng thời tạo ra một lượng lớn kháng nguyên, tuy nhiên kháng nguyên này không tinh khiết, thành phần đa dạng, vì vậy có khả năng gây phản ứng dương tính giả với các kháng thể khác. Trong khi kháng nguyên tái tổ hợp có thể khắc phục được những hạn chế đó. Theo nghiên cứu của Urakawa và cs năm (2001)[32], kháng nguyên tái tổ hợp RoTAT 1.2 được sản xuất dựa trên chức năng biểuhiện gen mã hóa kháng nguyên vào tế bào côn trùng dòng Sf 9. Dòng tế bào tái tổ hợp có khả năng tổng hợp và tiết kháng nguyên vào dịch nuôi cấy tế bào. Khi ứng dụng kháng nguyên RoTAT 1.2 vào sản xuất Kít chẩn đoán, kháng nguyên tái tổ hợp có độ nhạy tương tự như với kháng nguyên RoTAT 1.2 tự nhiên, nhưng có độ đặc hiệu cao hơn tương ứng là 99% và Nhìnbiểubànchân đốn bệnhsứckhỏe Mặc dù bạn chưa ý đến đến đơi chân thực tế lại số nói tình trạng sứckhỏe tổng thể bạn Dưới biểubànchân tiết lộ tình trạng sứckhỏebạn Đôi chân giúp bạn di chuyển, lại, chạy, leo trèo, đứng hay đơn giản giữ vững thể Tuy nhiên giúp bạn dự đốn tình trạng sứckhỏeBànchân phù Bạn cảm thấy bànchân nặng nề căng tức Điều bạn đứng ngồi lâu, đặc biệt bạn mang thai Các bệnh thường gặp suy tim phải, xơ gan, giãn tĩnh mạch chân tắc mạch bạch huyết chi Đau ngón Gút nguyên nhân chủ yếu gây chứng đau đột ngột, tấy đỏ sưng khớp ngón chân Bên cạnh đó, bệnh viêm xương khớp thủ phạm khác gây đau sưng Móng chân vàng Chứng nhiễm nấm thường gây tình trạng móng chân có màu vàng dày Móng có màu vàng xỉn, ố, độ bóng, sần sùi vùng viền xung quanh móng Đây dấu hiệu bệnh tiềm ẩn bệnh phổi viêm khớp VnDoc - Tải tài liệu, văn pháp luật, biểu mẫu miễn phí dạng thấp Nấm móng chân thường phát triển điều kiện ẩm, nóng, bẩn da vệ sinh Ngón chân sưng to Đầu ngón chân sưng to, phù nề triệu chứng bệnh gút Căn bệnh hầu hết người có chế độ ăn uống giàu protein, thừa cân không uống đủ nước Chân lạnh Bạn bị suy giáp nên lưu thơng máu đến chân so với phận thể khác Loét chân Những vết mẩn đỏ loét chân dấu hiệu bệnh tiểu đường tuýp Bạn nên kiểm tra xuất triệu chứng Bànchân bị chuột rút Bànchân bị đau đột ngột dội dấu hiệu chuột rút, kéo dài nhiều phút Tình trạng bạn làm việc sức bắp mệt mỏi Các nguyên nhân khác bao gồm nước, cân kali, canxi nồng độ vitamin D thể Mức độ hc-mơn thay đổi rối loạn tuyến giáp mang thai đóng góp vai trò vấn đề VnDoc - Tải tài liệu, văn pháp luật, biểu mẫu miễn phí Móng chân thay đổi Móng chân nhiên thay đổi hình dạng bất thường báo hiệu bạn gặp vấn đề tim mạch, phổi hệ tiêu hóa Các ngón chân khơng có lơng Các chun gia nói dấu hiệu bệnh mạch máu ngoại biên Đau gót chân Nguyên nhân phổ biến đau gót chân chứng viêm dây chằng gót chân, vốn gắn liền vào xương gót chân Cơn đau có đặc điểm đau nhói cường độ mạnh, gây khó chịu bạn vừa thức dậy Viêm khớp, vận động sức mang giày chật gây đau gót Móng chân rỗ Vết rỗ hay lõm nhỏ xuất móng chân dấu hiệu bệnh vẩy nến, eczama, viêm khớp phản ứng bệnh da mạn tính gây hệ thống miễn dịch hoạt động mức Với tình trạng này, chân viêm nhiều mảng trắng Kéo lê bước chân: Đây tình trạng thay đổi dáng Nguyên nhân tổn thương thần kinh ngoại vi gây dần cảm giác bình thường bànchân Tình trạng có liên quan đến bệnh tiểu đường; tổn thương thần kinh liên quan đến VnDoc - Tải tài liệu, văn pháp luật, biểu mẫu miễn phí nhiễm trùng, thiếu hụt vitamin; tổn thương dây thần kinh chày trước liên quan đến tượng co chân Ngón chân hình dùi trống Nếu móng chân không mọc thẳng mà mọc nhô lên quắp vào mơ thịt đầu dùi trống, bạn mắc bệnh khí phế thũng, phổi tắc nghẽn mãn tính, ung thư phổi hay suy tim Móng trắng Nếu phần tồn móng tách khỏi nền, móng trắng chấn thương, nhiễm trùng vảy nến Nếu móng nguyên vẹn trắng, bệnh gan, suy tim sung huyết tiểu đường Móng chân vàng, bong tróc: Đây dấu hiệu bệnh nấm móng chân Đây bệnh gọi onchomycosis, thường bệnh lành tính Tuy nhiên khơng chữa trị, chứng nhiễm trùng gây thẩm mỹ gây lây nhiễm vi khuẩn từ móng vào thể VnDoc - Tải tài liệu, văn pháp luật, biểu mẫu miễn phí Những biểuhiệncủa mắt trong các bệnhcủa hệ thần kinh trung ương Những biểuhiệncủa mắt trong các bệnhcủa hệ thần kinh trung ương Võng mạc là sự phát triển ra trước, là một ăng ten của não bộ. Qua trung gian của đường dẩn truyền thị giác, mổi điểm trên võng mạc liên kết với một điểm tương ứng của vỏnão thị giác. Mặt khác, lớp màng bọc nhãn cầu và lớp màng bao thị thần kinh chẳng qua là sự nối dài của lớp màng não. Tuần hoàn của võng mạc thuộc hệ thống tận cùng ( không nối kết với nhau) giống như của não bộ. Hệ thống thị giác như vậy có thể xem như là một bộ phận phụ thuộc không thể tách rời của não bộ. Trên lâm sàng, có rất nhiều Bệnhcủa hệ thần kinh trung ương (TKTU) có biểuhiệnBệnh lý ở mắt. Sự kết hợp các dấu hiệu mắt và liên kết chúng với các dấu hiệu thần kinh khác có giá trị khu trú cho phép chúng ta trình bày, thường là đúng đắn, cái nơi chính xác có sang thương gây Bệnh và tiên đoánbản chất sang thương đó. Đó là lý do tại sao khám mắt đem lại một lợi ích lớn lao trong sự nghiên cứu phần lớn Bệnhcủa hệ thần kinh trung ương. Điều đó chỉ thực sự đem lại khi việc khám được định hướng và được thực hiện bởi một sự hiểu biết sâu về giải phẫu và Bệnh học của hệ thần kinh trung ương. Sự nghiên cứu những biểuhiện mắt liên quan đến Bệnhcủa hệ TKTU, để tiện lợi, được khái quát trên ba tiêu mục sau: triệu chứng học đường dẩn truyền thị giác, triệu chứng học đồng tử, và liệt vận nhãn. BỊNH LÝ HỌC CỦA ĐƯỜNG DẨN TRUYỀN THỊ GIÁC 1- TRIỆU CHỨNG HỌC: Bao gồm các biến đổi Bệnh lý trên thị trường của đường dẩn truyền thị giác (xem lại bài cách khám thị trường). 2- CÁC BỊNH CẢNH ĐIỂN HÌNH: a- Tại thần kinh thị: HỘI CHỨNG FOSTER- KENNEDY biểuhiện bằng dấu hiệu teo gai nguyên phát một bên với phù gai phía bên kia (do tăng áp lực sọ não). Có thể kể những nhuyên nhân sau đây: bứơu hoặc áp-xe mặt trước của thùy não trán, bứơu màng não của rảnh khứơu, cánh bé xương bướm hay sàn hố sọ giửa, bứơu sọ hầu, hiếm hơn trong Bệnh não nước nội kết hợp với bứơu của hố sọ sau. VIÊM THẦN KINH THỊ HẬU CẦU nguyên nhân thường nhất do viêm nhiểm từ các xoang lân cận (xoang sàng sau và xoang bướm). TỔN THƯƠNG GIÁN TIẾP THẦN KINH THỊ sau một chấn thương ở vùng quanh hốc mắt (vùng trán hay thái dương). Vị trí tổn thương thường được cho là xảy ra ở kinh thị giác vì nơi đây thị thần kinh dính chắc vào xương qua trung gian màng cứng. b- Tại giao thoa thị (H1&2) H1. Giãi phẫu học vùng giao thoa thị H2. Vị trí tổn thương vùng giao thoa thị và khuyết thị trường tương ứng Bên trên và phía trước (H3) MẠCH LỰU CUNG WILLIS H3. Hình minh hoạ tổn thương giao thoa thị từ phía trước và kiểu mất thị trường tương ứng Bên trên và phía sau (1) NÃO NƯỚC NỘI có thể bẩm sinh do khiếm khuyết phát triển ( teo cống Sylvius, hẹp lổ Magendie và Luschka) hay chấn thương lúc sinh (xuất huyết mảng não); hoặc thụ dắc : nghẽn tắc cơ học lưu thông thủy dịch do bứơu, áp- xe hay ký sinh trùng. (2) BỨƠU SỌ HẦU đây là bứơu có nguồn gốc di tich phôi thai (tồn tại túi Rathke). Độ tuổi xuất hiện từ 10-25 tuổi; bứơu thường có vị trí phía trên yên, hiếm khi ở trong yên; dấu chứng thường gặp như phù gai, hẹp thị trường thường không đều do bứơu đè vào giao thoa thị hay dải thị Nếu bứơu đè vào tuyến yên sẽ gây hội chứng thiểu năng tuyến yên, nếu đè vào vùng dưới đồi sẽ gây hội chứng đa niệu nhạt. Bên dưới và phía trước VIÊM MÀNG NÃO , VIÊM MÀNG NHỆN, BỨƠU TUYẾN YÊN. Bên dưới và phía sau BỨƠU TUYẾN YÊN về mặt giải phẫu Bệnh có 2 loại: bứơu lành tuyến kỵ màu ( gây hội chứng phì đại) và bứơu lành tuyến ái màu (gây hội chứng thiểu năng tuyến yên). Độ xuất hiện các dấu chứng như sau: biến đổi Bệnh lý thị trường (90%), soi mòn hố yên (80%) , rối loạn chức năng não thùy (60%) liệt vận nhãn (10%), phù gai hiếm gặp. Bên cạnh MẠCH LỰU hay XƠ CỨNG ĐỘNG MẠCH CẢNH, BỨƠU MÀNG NÃO c- Sau giao thoa thị: phần lớn do Bệnh mạch máu não và u bứơu. - Từ dải thị tới thể gối bên: nguyên nhân thường gặp như chấn thương ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC GIÁO DỤC ĐẶNG THỊ THANH TÙNG MỐI QUAN HỆ GIỮA NHẬN THỨC CỦA CHA MẸ VỀ BIỂUHIỆN VÀ NGUYÊN NHÂN TỔN THƢƠNG SỨCKHỎE TÂM THẦN TRẺ EM VỚI HÀNH VI ỨNG XỬ CỦA HỌ LUẬN VĂN THẠC SỸ TÂM LÝ HỌC HÀ NỘI – 2015 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC GIÁO DỤC ĐẶNG THỊ THANH TÙNG MỐI QUAN HỆ GIỮA NHẬN THỨC CỦA CHA MẸ VỀ BIỂUHIỆN VÀ NGUYÊN NHÂN TỔN THƢƠNG SỨCKHỎE TÂM THẦN TRẺ EM VỚI HÀNH VI ỨNG XỬ CỦA HỌ LUẬN VĂN THẠC SỸ TÂM LÝ HỌC Chuyên ngành: Tâm lý học lâm sàng trẻ em vị thành niên Mã số: Thí điểm Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS Amie Polack TS Trần Thành Nam HÀ NỘI – 2015 LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình học tập hoàn thành luận văn, nhận hướng dẫn, giúp đỡ quý báu, nhiệt tình thầy cô, anh chị, em bạn Với lòng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin bày tỏ lời cảm ơn chân thành tới: Ban giám hiệu, phòng ban, khoa, thầy cô cán Trường Đại học Giáo dục – Đại học Quốc gia Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ trình học tập hoàn thành luận văn Đặc biệt xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới Tiến sĩ Trần Thành Nam Tiến sĩ Amie Polack dành nhiều thời gian quý báu hướng dẫn, bảo tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình học tập trình hoàn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn tập thể thầy giáo, cô giáo ban giám hiệu, Ban phụ huynh trường đặc biệt cha mẹ em học sinh thuộc trường tiểu học: Kim Giang, Định Công, Đoàn Thị Điểm, Thăng long Kidsmart tạo điều kiện giúp đỡ trình thu thập số liệu, phục vụ cho trình nghiên cứu đề tài Xin cảm ơn cô bác, anh chị Trung tâm tư vấn, điều trị tâm bệnh tự kỷ - Bệnh viện đa khoa Quốc tế Vinmec giúp đỡ nhiều công việc tạo điều kiện cho có thời gian để hoàn thành đề tài Cuối cùng, xin chân thành cảm ơn bạn đồng môn lớp Tâm lý học lâm sàng trẻ em Vị thành niên Khóa – Đại học giáo dục người thân bên cạnh tôi: giúp đỡ, ủng hộ mặt để hoàn thành luận văn Xin trân trọng cảm ơn! Hà nội, ngày 25 tháng năm 2015 i DANH MỤC TÊN VIẾT TẮT ADHD Attention Deficit Hyperactivity Disorder – Tăng động giảm ý CFA Confirmation factor analysis – Phân tích nhân tố khẳng định CMC Chống mù chữa phổ cập giáo dục tiểu học DSM- IV Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, 4th Edition – Sổ tay chẩnđoán thống kê rối loạn tâm thần, phiên DTTK Dẫn truyền thần kinh ICD – 10 International Statistical Classification of Disease and Related Mental Health Problem 10th Revision – Bảng phân loại bênh quốc tế Sứckhỏe tâm thần lần thứ 10 SDQ25 Strength and Difficulties Questionnaire – Bảng hỏi điểm mạnh điểm yếu trẻ SKTT Sứckhỏe tâm thần TB Trung bình TH Tình ii MỤC LỤC Lời cảm ơn i Danh mục tên viết tắt .ii Mục lục .iii Danh mục bảng MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1: CƠ SỞ LÝ LUẬN CỦA VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU .Error! Bookmark not defined 1.1 Quan niệm tổn thương SKTT tiếp cận nguyên nhân gây tổn thương SKTT Error! Bookmark not defined 1.1.1 Quan niệm tổn thương SKTT Error! Bookmark not defined 1.1.2 Các tiếp cận nguyên nhân gây tổn thương SKTTError! Bookmark not defined 1.1.3 Tổng quan kết nghiên cứu trước liên quan đến nhận thức cộng đồng biểu hiện, nguyên nhân tổn thương SKTT hành vi ứng xử Error! Bookmark not defined 1.2 Các khái niệm công cụ đề tài Error! Bookmark not defined 1.2.1 Khái niệm SKTT Error! Bookmark not defined 1.2.2 Khái niệm tổn thương SKTT nguyên nhânError! Bookmark not defined 1.2.3 Những vấn đề SKTT thường gặp trẻ em Error! Bookmark not defined 1.2.4 Khái niệm chăm sóc SKTT Error! Bookmark not defined 1.2.5 Vệ sinh dự phòng tổn thương SKTT Error! Bookmark not defined CHƢƠNG 2: TỔ CHỨC VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Error! Bookmark not defined 2.1 Khái quát địa bàn nghiên cứu Error! Bookmark not defined 2.1.1 Trường tiểu học Kim Giang: Error! Bookmark not defined 2.1.2 Trường tiểu học Định Công: Error! Bookmark not defined 2.1.3 Trường tiểu học dân lập Đoàn Thị Điểm : Error! Bookmark not defined iii 2.1.4 Trường tiểu học Dân lập Thăng Long Kidsmart :Error! Bookmark not defined 2.2 Qui trình nghiên cứu Error! Bookmark not defined 2.3 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC GIÁO DỤC ĐẶNG THỊ THANH TÙNG MỐI QUAN HỆ GIỮA NHẬN THỨC CỦA CHA MẸ VỀ BIỂUHIỆN VÀ NGUYÊN NHÂN TỔN THƢƠNG SỨCKHỎE TÂM THẦN TRẺ EM VỚI HÀNH VI ỨNG XỬ CỦA HỌ LUẬN VĂN THẠC SỸ TÂM LÝ HỌC HÀ NỘI – 2015 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC GIÁO DỤC ĐẶNG THỊ THANH TÙNG MỐI QUAN HỆ GIỮA NHẬN THỨC CỦA CHA MẸ VỀ BIỂUHIỆN VÀ NGUYÊN NHÂN TỔN THƢƠNG SỨCKHỎE TÂM THẦN TRẺ EM VỚI HÀNH VI ỨNG XỬ CỦA HỌ LUẬN VĂN THẠC SỸ TÂM LÝ HỌC Chuyên ngành: Tâm lý học lâm sàng trẻ em vị thành niên Mã số: Thí điểm Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS Amie Polack TS Trần Thành Nam HÀ NỘI – 2015 LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình học tập hoàn thành luận văn, nhận đƣợc hƣớng dẫn, giúp đỡ quý báu, nhiệt tình thầy cô, anh chị, em bạn Với lòng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin bày tỏ lời cảm ơn chân thành tới: Ban giám hiệu, phòng ban, khoa, thầy cô cán Trƣờng Đại học Giáo dục – Đại học Quốc gia Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ trình học tập hoàn thành luận văn Đặc biệt xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới Tiến sĩ Trần Thành Nam Tiến sĩ Amie Polack dành nhiều thời gian quý báu hƣớng dẫn, bảo tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình học tập nhƣ trình hoàn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn tập thể thầy giáo, cô giáo ban giám hiệu, Ban phụ huynh trƣờng đặc biệt cha mẹ em học sinh thuộc trƣờng tiểu học: Kim Giang, Định Công, Đoàn Thị Điểm, Thăng long Kidsmart tạo điều kiện giúp đỡ trình thu thập số liệu, phục vụ cho trình nghiên cứu đề tài Xin cảm ơn cô bác, anh chị Trung tâm tƣ vấn, điều trị tâm bệnh tự kỷ - Bệnh viện đa khoa Quốc tế Vinmec giúp đỡ nhiều công việc nhƣ tạo điều kiện cho có thời gian để hoàn thành đề tài Cuối cùng, xin chân thành cảm ơn bạn đồng môn lớp Tâm lý học lâm sàng trẻ em Vị thành niên Khóa – Đại học giáo dục ngƣời thân bên cạnh tôi: giúp đỡ, ủng hộ mặt để hoàn thành luận văn Xin trân trọng cảm ơn! Hà nội, ngày 25 tháng năm 2015 i DANH MỤC TÊN VIẾT TẮT ADHD Attention Deficit Hyperactivity Disorder – Tăng động giảm ý CFA Confirmation factor analysis – Phân tích nhân tố khẳng định CMC Chống mù chữa phổ cập giáo dục tiểu học DSM- IV Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, 4th Edition – Sổ tay chẩnđoán thống kê rối loạn tâm thần, phiên DTTK Dẫn truyền thần kinh ICD – 10 International Statistical Classification of Disease and Related Mental Health Problem 10th Revision – Bảng phân loại bênh quốc tế Sứckhỏe tâm thần lần thứ 10 SDQ25 Strength and Difficulties Questionnaire – Bảng hỏi điểm mạnh điểm yếu trẻ SKTT Sứckhỏe tâm thần TB Trung bình TH Tình ii MỤC LỤC Lời cảm ơn i Danh mục tên viết tắt ii Mục lục iii Danh mục bảng MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1: CƠ SỞ LÝ LUẬN CỦA VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Quan niệm tổn thƣơng SKTT tiếp cận nguyên nhân gây tổn thƣơng SKTT BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC MỞ TP.HCM BÁO CÁO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Tên đề tài: ĐÁNH GIÁ SỰ BIỂUHIỆNCỦA microRNA-122 Ở BỆNH UNG THƢ BIỂU MÔ TẾ BÀO GAN (HEPATOCELLULAR CARCINOMA) KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC CHUYÊN NGÀNH: VI SINH – SINH HỌC PHÂN TỬ GVHD: PGS TS LÊ HUYỀN ÁI THÚY ThS LAO ĐỨC THUẬN SVTH: TRẦN KIẾN ĐỨC MSSV: 1153010181 Khóa: 2011 – 2015 Tp Hồ Chí Minh, tháng 05 năm 2015 LỜI CẢM ƠN Để có kết ngày hôm nay, suốt khoảng thời gian thực đề tài thực tập tốt nghiệp, nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ, dìu dắt, góp ý chân thành tất người Đầu tiên, xin gửi lời biết ơn sâu sắc đến ông, bà, ba, mẹ sinh cực khổ nuôi khôn lớn, lo cho ăn học thành ngƣời, sát cánh, động viên vƣợt qua khó khăn sống Em xin gửi lời cảm ơn đến quý Thầy, Cô khoa Công nghệ sinh học, trƣờng Đại học Mở Thành phố Hồ Chí Minh tận tình giảng dạy, bồi đắp kiến thức cho em suốt bốn năm đại học Đặc biệt, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến cô PGS TS Lê Huyền Ái Thúy thầy ThS Lao Đức Thuận – Ngƣời tận tình hƣớng dẫn, truyền đạt, dạy, theo dõi tạo điều kiện tốt cho em suốt trình làm khóa luận tốt nghiệp Thầy dạy cho em kiến thức bổ ích, tinh thần thái độ làm việc mà dạy bảo, động viên em nhiều công việc học tập Đó điều cần thiết cho em trình học tập làm việc sau Kính gửi lời tri ân đến Thầy, Cô, anh chị, bạn phòng thí nghiệm Sinh học phân tử, Trƣờng Đại học Mở Thành phố Hồ Chí Minh nhiệt tình, quan tâm, giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi suốt thời gian thực đề tài khóa luận tốt nghiệp Cuối lời xin chân thành cảm ơn gửi lời chúc sứckhỏe đến tất ngƣời! Sinh viên thực Trần Kiến Đức Báo cáo khóa luận tốt nghiệp DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT AFB1 Aflatoxin B1 AFP Alpha-fetoprotein CT Computed Tomography – Chụp cắt lớp vi tính DCP Descarboxy Prothrombin DNA Deoxyribonucleic Acid HBV Hepatitis B virus HCC Hepatocellular carcinoma – Ung thƣ biểu mô tế bào gan HCV Hepatitis C virus IDT Integrated Device Technology miRNA microRNA MRI Magnetic Resonance Imaging - Chụp cộng hƣởng từ mRNA Messenger ribonucleic acid nucleic OD Optical density NCBI National Center for Biotechnology Information PCR Polymerase Chain Reaction pH Potential of Hydrogen RISC Ribonucleic acid-Induced Silencing Complex RNA Ribonucleic acid Tm Temperature melting – Nhiệt độ nóng chảy TRBP TAR RNA binding protein WHO World Health Organization SVTH: Trần Kiến Đức Trang i Báo cáo khóa luận tốt nghiệp DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 3.1 Thống kê loại ung thƣ phổ biến với tác động miRNA-122 Bảng 3.2 Thống kê tính chất biểu miRNA-122 ứng với nguồn mẫu sử dụng nghiên cứu bệnh ung thƣ biểu mô tế bào gan Bảng 3.3 Thống kê số lƣợng báo sử dụng phƣơng pháp phát bệnh ung thƣ biểu mô tế bào gan miRNA-122 Bảng 3.4 Trình tự pre-miRNA-122 Bảng 3.5 Các thông số vật lý cấu trúc kẹp tóc pre-miRNA-122 Bảng 3.6 Trình tự miRNA-122 trƣởng thành Bảng 3.7 Các thông số vật lý miRNA-122 trƣởng thành Bảng 3.8 Thông số khảo sát cặp mồi theo IDT SVTH: Trần Kiến Đức Trang ii Báo cáo khóa luận tốt nghiệp DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Giải phẩu vị trí gan Hình 1.2 Tóm tắt tác động HBV HCV dẫn đến bệnh ung thƣ biểu mô tế bào gan Hình 1.3 Quá trình hình thành phân tử miRNA Hình 2.1 Một số mẫu huyết tƣơng dùng thí nghiệm Hình 2.2 Bộ kit sử dụng cho tách chiết RNA phản ứng Reverse Transcription Hình 3.1 Cấu trúc kẹp tóc pre-miRNA-122 Hình 3.2 Trình tự vị trí miRNA-122 trƣởng thành Hình 3.3 Kết BLAST nucleotide mồi GAPDH-F Hình 3.4 Kết BLAST nucleotide mồi GAPDH-R Hình 3.5 Kết kiểm tra vị trí bắt cặp cặp mồi trình tự gen GAPDH ngƣời Hình 3.6 Kết phản ứng Real-time PCR SVTH: Trần Kiến Đức Trang iii Báo cáo khóa luận tốt nghiệp MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan ung thƣ 1.2 Tổng quan ung thƣ biểu mô tế bào gan 1.2.1 Cấu tạo giải phẫu gan chức gan 1.2.2 Ung thƣ biểu mô tế bào gan (HCC – Hepatocellular carcinoma) 1.2.3 Nguyên nhân ung thƣ biểu mô tế bào gan 1.2.4 Tình hình ung thƣ biểu mô tế bào gan giới Việt Nam 10 1.3 microRNA 11 1.3.1 microRNA gì? 11 1.3.2 Sinh tổng hợp miRNA