Theo dự báo của Uỷ ban Dân số và Phát triển của Liên hợp quốc, vào giữa thế kỉ XXI dân số thế giới sẽ tăng thêm khoảng 3 tỉ người. Dân số ngày càng tăng nhanh đã tạo ra gánh nặng cho nền sản suất nông nhiệp lương thực, vì cùng với một diện tích canh tác nhất định và đang có xu hướng bị thu hẹp lại phải cung cấp đủ số lượng lương thực cho số đầu người luôn gia tăng. Để tăng năng suất lao động, người ta đã sử dụng nhiều biện pháp đan xen như: thâm canh tăng vụ, cải tiến giống…một trong những biện pháp không thể thiếu là sử dụng thuốc bảo vệ thực vật. 10Hóa chất bảo vệ thực vật (HC BVTV) được coi là một vũ khí có hiệu quả của con người trong việc phòng chống dịch hại, bảo vệ cây trồng. Bên cạnh ưu điểm là bảo vệ năng suất cây trồng, HC BVTV còn gây ra nhiều tác hại khác như làm ô nhiễm môi trường, gây độc cho người và gia súc, tăng chi phí sản xuất và nhất là để lại tồn dư trong nông sản gây ảnh hưởng đến chất lượng nông sản và sức khỏe người tiêu dùng. Tác động tiêu cực của HC BVTV càng trở nên nghiêm trọng khi con người sử dụng không đúng cách và quá lạm dụng vào thuốc.Thiết bị sắc ký khí ghép khối phổ có khả năng phân tích cùng một lúc hàng trăm chất cho độ chính xác cao, rất hiệu quả trong phân tích HC BVTV trong các mẫu rau bởi 1 lần bơm mẫu sẽ có sàng lọc được nhiều chất. Phân tích định tính, định lượng chính xác các thành phần của HC BVTV trong mẫu rau bằng phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ là việc rất cần thiết, giúp cho quá trình sàng lọc sản phẩm sạch có giá trị kinh tế cao có được kết quả xét nghiệm chính xác hơn, nhanh hơn. Lượng mẫu phân tích lấy ít hơn do độ nhạy của thiết bị cao.
Trang 1MỞ ĐẦU
Theo dự báo của Uỷ ban Dân số và Phát triển của Liên hợp quốc, vào giữa thế
kỉ XXI dân số thế giới sẽ tăng thêm khoảng 3 tỉ người Dân số ngày càng tăngnhanh đã tạo ra gánh nặng cho nền sản suất nông nhiệp lương thực, vì cùng vớimột diện tích canh tác nhất định và đang có xu hướng bị thu hẹp lại phải cung cấp
đủ số lượng lương thực cho số đầu người luôn gia tăng Để tăng năng suất laođộng, người ta đã sử dụng nhiều biện pháp đan xen như: thâm canh tăng vụ, cảitiến giống…một trong những biện pháp không thể thiếu là sử dụng thuốc bảo vệ
thực vật [10]
Hóa chất bảo vệ thực vật (HC BVTV) được coi là một vũ khí có hiệu quả củacon người trong việc phòng chống dịch hại, bảo vệ cây trồng Bên cạnh ưu điểm làbảo vệ năng suất cây trồng, HC BVTV còn gây ra nhiều tác hại khác như làm ônhiễm môi trường, gây độc cho người và gia súc, tăng chi phí sản xuất và nhất là
để lại tồn dư trong nông sản gây ảnh hưởng đến chất lượng nông sản và sức khỏengười tiêu dùng Tác động tiêu cực của HC BVTV càng trở nên nghiêm trọng khicon người sử dụng không đúng cách và quá lạm dụng vào thuốc
Thiết bị sắc ký khí ghép khối phổ có khả năng phân tích cùng một lúc hàngtrăm chất cho độ chính xác cao, rất hiệu quả trong phân tích HC BVTV trong cácmẫu rau bởi 1 lần bơm mẫu sẽ có sàng lọc được nhiều chất Phân tích định tính,định lượng chính xác các thành phần của HC BVTV trong mẫu rau bằng phươngpháp sắc ký khí ghép khối phổ là việc rất cần thiết, giúp cho quá trình sàng lọc sảnphẩm sạch có giá trị kinh tế cao có được kết quả xét nghiệm chính xác hơn, nhanhhơn Lượng mẫu phân tích lấy ít hơn do độ nhạy của thiết bị cao
Với những lí do trên, chúng tôi đã thực hiện đề tài: “Xác định dư lượng một số hóa chất bảo vệ thực vật nhóm Pyrethroid và Lân hữu cơ trong một vài loại rau bằng phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ”.
Trang 2Với mục tiêu thực hiện đề tài là: Tiến hành phân tích định tính và xác định dưlượng 5 loại hóa chất bảo vệ thực vật (Cypermethrin, Permethrin, Chlorpyriphos,Metalaxyl, Malathion) trong mẫu rau
Để hoàn thoành mục tiêu trên, chúng tôi đã tiến hành nghiên cứu các nội dung,bao gồm:
Đánh giá điều kiện phân tích và độ ổn định GC-MS trong phân tíchhóa chất bảo vệ thực vật
Đánh giá phương pháp phân tích
Tiến hành phân tích thực nghiệm và xác định dư lượng một số hóachất bảo vệ thực vật nhóm Pyrethroid và Lân hữu cơ có trong 10 loạirau trên địa bàn Hà Nội
Trang 3CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan về hóa chất bảo vệ thực vật
1.1.1 Khái niệm về hóa chất bảo vệ thực vật
Tổ chức Nông nghiệp và Lương thực của Liên Hiệp Quốc (FAO) đã đưa rađịnh nghĩa khá hoàn chỉnh về hóa chất bảo vệ thực vật (HC BVTV) như sau:
“ HC BVTV là bất kì hợp chất hay hỗn hợp được dùng với mục đích ngănngừa, tiêu diệt hoặc kiểm soát các tác nhân gây hại bao gồm vật chủ trung giantruyền bệnh của con người hoặc động vật, các bộ phận không mong muốn củathực vật hoặc động vật gây hại hoặc ảnh hưởng đến các quá trình sản xuất, chếbiến, bảo quản, vận chuyển, mua bán thực phẩm, nông sản, gỗ và các sản phẩm từ
gỗ, thức ăn chăn nuôi hoặc hợp chất được phân tán lên động vật để kiểm soát côntrùng, nhện hay các đối tượng khác trong cơ thể chúng HC BVTV còn được dùnglàm tác nhân điều hòa sinh trưởng thực vật, chất làm rụng lá, chất làm khô cây, tácnhân làm thưa quả hoặc ngăn chặn rụng quả sớm Cũng có thể dùng HC BVTVcho cây trồng trước cũng như sau khi thu hoạch để bảo vệ sản phẩm không bị
hỏng trong quá trình vận chuyển” [18].
1.1.2 Phân loại thuốc bảo vệ thực vật theo nguồn gốc hóa học
Có nhiều cách phân loại HC BVTV như: Phân loại theo công dụng, theo nhóm
độc, theo thời gian phân hủy… [25] Tuy nhiên trong phạm vi nội dung Đồ án
chúng tôi xin phân loại HC BVTV theo nguồn gốc hóa học Căn cứ vào bản chấthóa học của các loại HC BVTV, chúng được phân chia thành các nhóm khác
nhau.
+ Nhóm hợp chất clo hữu cơ (cơ clor):
HC BVTV Clo hữu cơ là hợp chất hữu cơ được hình thành khi thay thế cácnguyên tử hydro của phân tử hydrocarbon và dẫn xuất bằng các nguyên tử clo.Trong phân tử các hợp chất này tồn tại vòng benzen hoặc dị vòng (O, N, S…),thường là các dẫn xuất clo của một số hợp chất như Diphenylethane, Cyclodiene,
Trang 4Benzene, Hexane… Đặc điểm quan trọng của các hợp chất này là độc tính cao,phổ tác động rộng nhưng kém chọn lọc và rất bền vững trong môi trường, thờigian phân hủy dài, do đó chúng ít bị đào thải và tích lũy vào cơ thể sinh vật quachuỗi thức ăn Chính vì dư lượng HC BVTV trong nông sản, sự tích lũy và đầuđộc cao với cơ thể con người, động vật mà ngày nay đa số các HC BVTV Clo hữu
cơ đã bị cấm sử dụng
Điển hình cho các chất bị cấm sử dụng như: DDT, Chlordane, Toxaphene,Dieldrin, Aldrin, Endrin ; một số chất còn dùng nhưng giới hạn như: Difocol,Methoxychlor
Hình 1.1: Công thức cấu tạo của DDT + Nhóm hợp chất Lân hữu cơ (phosphor hữu cơ)
HC BVTV nhóm lân hữu cơ chủ yếu là hợp chất của Photpho hóa trị V, chúng
là các este của acid phosphoric (H3PO4) và dẫn xuất Các hợp chất cơ phosphor cóđộc tính rất cao nên hiệu lực diệt trừ sâu hại cao và nhanh chóng, phổ tác dụngrộng, kém bền vững trong môi trường kiềm và axit Cơ chế hoạt động của nhómnày dực trên nguyên tắc: ức chế enzyme Cholinesterase (ChE) không phục hồi doenzyme ChE bị phosphoryl hóa (WHO, 1996) Hậu quả là làm ứ độngAcetylcholine gây rối loạn dẫn truyền hệ Cholonergic Nhiễm độc Lân hữu cơ lànhiễm độc Acetylcholine nội sinh Acetylcholine là một trong số các chất dẫntruyền luồng thần kinh quan trọng chi phối sự truyền dọc các xung thần kinh quacác chỗ nối synaptic và một số trường hợp qua các chỗ nối cơ thần kinh
Điển hình của nhóm chất này bao gồm: Methyl Parathion, Ethyl Parathion,Diethyl phosphorofluoridate, Dimefox, Tetraethyl pyrophosphat (TEPP),…Cho
Trang 5đến nay đã có khoảng 100 chất khác nhau được đem vào thương mại hóa Đây lànhóm thuốc hữu cơ thông dụng nhất hiện dùng.
Hình 1.2: Công thức cấu tạo của Dimefox
+ Nhóm hợp chất Carbamat
Đây là nhóm thuốc được dùng rộng rãi bởi thuốc tương đối rẻ tiền, hiệu lực cao
mà ít tồn lưu trong môi trường Thuốc là dẫn xuất của axit cacbamic Có chứa cácnhóm phụ Dithiocacbamates, Thiocarbamates mang Lưu huỳnh Ngoài dạng thuốctrừ sâu còn có thuốc trừ nấm bệnh, trừ cỏ, trừ ốc sên… Đối với động vật, thuốcCarbamat gây tổn thương cho hệ thần kinh và một số khác gây độc cho động vật
có vú bao gồm cả con người Hợp chất nhóm này không tích lũy trong mô mỡ dovậy tính độc của chúng thường ngắn và sinh vật có thể phục hồi Các hóa chấtnhóm carbamat thông dụng như: Carbaryl (Sevin), Aldicarb (Temik) và MethomylEster cacbamat là dẫn xuất của acid carbamic (H2N-COOH) không bền vững và dễphân hủy thành CO2 và NH3
Hình 1.3: Công thức cấu tạo của Carbaryl
+ Nhóm hợp chất Pyrethroid
Là những thuốc trừ sâu có nguồn gốc từ tính sát trùng của hoa thủy cúc
Crysanthemum thường gặp nhất là C.cineraraefolium cùng với tính diệt côn trùng
Trang 6mạnh mẽ, Pyrethrin có ưu điểm là ít tồn lưu trong môi trường Pyrethrin và cácchất Carbamat là những chất độc kênh muối (sodium channel) của màng thầnkinh Các Pyrethroids thực chất là các chất gây độc chức năng, hậu quả xấu củathuốc mang tính thứ cấp là hậu quả của sự kích thích quá độ hệ thần kinh Một sốchất thuộc nhóm này như: Allethrin, Barthrin, Bioallethrin, Bioresmethrin,Cismethrin, Fenfluthrin, Cyhalothrin, Cypermethrin…
Hình 1.4: Công thức cấu tạo của Allethrin
1.1.3 Tác hại của hóa chất bảo vệ thực vật [10]
Hầu hết hóa chất bảo vệ thực vật đều độc với con người và động vật máu nóng
ở các mức độ khác nhau Theo đặc tính, HC BVTV được chia làm hai loại: chấtđộc cấp tính và chất độc mãn tính
- Chất độc cấp tính: mức độ gây độc phụ thuộc vào lượng thuốc xâm nhập vào
cơ thể Chúng không đủ khả năng gây tử vong, dần dần bị phân giải và bài tiết rangoài Loại này bao gồm các chất: Pyrethroid, những hợp chất Photpho hữu cơ,Carbamat, thuốc có nguồn gốc sinh vật
- Chất độc mãn tính: có khả năng tích lũy lâu dài trong cơ thể vì chúng rất bền,khó bị phân giải và bài tiết ra ngoài Những chất này gồm nhiều hợp chất chứa Clohữu cơ, thạch tím (Asen), chì (Pb), thủy ngân (Hg) Đây là những loại rất nguyhiểm
Hóa chất bảo vệ thực vật có thể xâm nhập vào cơ thể người và động vật bằngnhiều con đường khác nhau Ba con đường chính đó là: hô hấp, tiêu hóa và tiếp
Trang 7xúc trực tiếp Khi tiếp xúc với hóa chất bảo vệ thực vật con người có thể bị nhiễmđộc cấp tĩnh hay mãn tính, tùy thuộc vào phạm vi ảnh hưởng của thuốc.
+ Nhiễm độc cấp tính: Là nhiễm độc tức thời khi có một lượng đủ lớn hóa chấtxâm nhập vào cơ thể Triệu chứng của bệnh tỉ lệ với việc tiếp xúc và trong một sốtrường hợp nặng có thể dẫn tới tử vong Biểu hiện bệnh lí của nhiễm độc cấp tính:mệt mỏi, ngứa da, đau đầu, buồn nôn, hoa mắt chóng mặt, khô họng, mất ngủ, tăngtiết nước bọt, yếu cơ, chảy nước mắt, sảy thai, đặc biệt có thể gây tử vong
+ Nhiễm độc mãn tính: Là nhiễm độc gây ra do tích lũy dần dần trong cơ thể.Thông thường không có biểu hiện nào sau mỗi lần nhiễm Sau một thời gian dài,một lượng chất độc lớn tích tụ trong cơ thể sẽ gây ra các triệu chứng lâm sàng.Biểu hiện bệnh lí của nhiễm độc mãn tính là: kích thích các tế bào ung thư pháttriển gây quái thai, dị dạng, suy giảm trí nhớ và khả năng tập trung, suy nhượcnghiêm trọng, ảnh hưởng đến hệ thần kinh, gây tổn hại cho gan, thận và não
1.1.4 Tình hình tồn dư các loại HC BVTV trong rau
Theo báo cáo của cục bảo vệ thực vật, có 23% số hộ dân vi phạm quy định về
sử dụng thuốc bảo vệ thực vật, dẫn đến tồn dư hóa chất bảo vệ thực vật trên nôngsản Một số loại hóa chất đã bị cấm nhưng hiện vẫn có nhiều người tìm cách đưa
về nông thôn Số mẫu rau tươi có lượng hóa chất chiếm 30-60%, trong đó số mẫu
có dư lượng vượt quá giới hạn cho phép chiếm từ 4-16%, một số HC BVTV bị
cấm sử dụng như Methamidophos vẫn còn dư lượng trong rau [7]
Trong năm 2013, Cục Bảo vệ thực vật đã lấy 25 mẫu rau và 5 mẫu quả tại cáctỉnh phía bắc (TP Hà Nội và tỉnh Vĩnh Phúc) để kiểm định Kết quả có 11 mẫu rau
có dư lượng thuốc bảo vệ thực vật ở mức độ khác nhau Ở các tỉnh phía Nam, trên
35 mẫu rau và 5 mẫu quả ở Tp Hồ Chí Minh, Bình Dương, Tiền Giang kết quả làtrên 50% mẫu có dư lượng thuốc bảo vệ thực vật ở mức độ khác nhau
Trang 8Tại TP Hồ Chí Minh đầu năm 2013, kết quả kiểm nghiệm hơn 2.200 mẫu rau,quả tại chợ đầu mối (Bình Điền, Hóc Môn, Thủ Đức) phát hiện 50 mẫu dương tính(tỉ lệ 2,4%) cao hơn so với cùng kì năm 2012 là 1,3% Còn tại Bình Dương, phântích 310 mẫu rau lấy ở các chợ, vùng sản xuất, bếp ăn tập thể trong tám tháng đầu
năm 2013 có gần 80 mẫu có dư lượng thuốc bảo vệ thực vật [11]
Trên thế giới, tại Ấn Độ, cuộc điều tra được Bộ Nông nghiệp Ấn Độ tiến hànhđược tiến hành trong 1 năm từ tháng 11 năm 2013 đến tháng 10 năm 2014 trêntoàn đất nước Ấn Độ Kết quả là 18% rau và 12% quả nội địa và nhập khẩu đều có
dư lượng thuốc trừ sâu, kể cả những loại thuốc trừ sâu bị cấm, trong đó 4% lượngrau và 2% lượng quả có dư lượng thuốc trừ sâu cao hơn mức cho phép Khoảng18% (664 mẫu) trong tổng số 3.648 mẫu rau như mướp tây, cà chua, bắp cải vàsúp lơ đều có dư lượng thuốc trừ sâu Các loại rau như bắp cải, cà chua có dưlượng thuốc trừ sâu lớn nhất Các loại thuốc trừ sâu được tìm thấy chủ yếu là
Chlorpyriphos, Monocrotophos, Profenophos và Cypermethrin [1]
1.2 Tổng quan về các HC BVTV trong nghiên cứu
1.2.1 Nhóm hợp chất Pyrethroid
1.2.1.1 Cypermethrin [4,10]
Theo IUPAC, Cypermethrin còn có tên gọi khác phenoxyphenyl)methyl]3-(2,2-dichloroethenyl)-2,2-dimethylcyclopropane-1-carboxylate, có công thức phân tử C22H19Cl2NO3, khối lượng phân tử: 416,3 g/mol
Cyano-(3-Có công thức cấu tạo như sau:
Hình 1.5: Công thức cấu tạo của Cypermethrin
Trang 9Đặc tính kỹ thuật: Ít tan trong nước, tan tốt trong dung môi hữu cơ như aceton(620g/L), xylen (351 g/L) và cyclohexanone (515 g/L) ở 250C Tương đối bềntrong môi trường trung tính và axit nhẹ, thủy phân trong môi trường kiềm, quanggiải kém; không ăn mòn kim loại; thuộc nhóm độc II.
Cypermethrin tác dụng gây độc nhanh với hệ thần kinh của côn trùng Cơ chế
tác động của Cypermethrin gây ảnh hưởng đến sự vận chuyển của Na qua màng tế bào thần kinh Cypermethrin làm tăng độ thấm của của Na qua màng tế bào thần
kinh, kết quả gây nên sự lặp đi lặp lại và kéo dài xung động thần kinh trong cơquan cảm giác và làm đình trệ xung động trong sợi thần kinh Ngoài ra,cypermethrin còn gây nên các hiện tượng xung huyết (congestion), xuất huyết(haemorrhage), hoại tử (necrosis), teo nhân (pyknosis) trên một số cơ quan nhưnão, gan, thận và mang của cá
1.2.1.2 Permethrin
Theo IUPAC, Permethrin còn có tên gọi khác là 3-Phenoxybenzyl cis,trans-3-(2,2-dichlorovinyl)-2,2-dimethylcyclopropanecarboxylate, có côngthức phân tử C21H20Cl2O3, khối lượng phân tử là 391,29 g/mol Có công thức cấutạo như sau:
(1RS)-Hình 1.6: Công thức cấu tạo của Permethrin
Permethrin ở dạng tinh thể không màu, nóng chảy ở 34oC, sôi ở 200oC hầu nhưkhông tan trong nước, tan tốt trong các dung môi không phân cực như Hexane,Xylene Bền trong môi trường axit, thủy phân trong môi trường kiềm
Permethrin là một hóa chất diệt côn trùng thông dụng, sinh vật ký sinh Hóachất này như là một chất gây độc tố cho thần kinh, làm tăng độ thấm của Na qua
Trang 10màng tế bào thần kinh, kết quả gây nên sự lặp đi lặp lại và kéo dài xung động thầnkinh trong cơ quan cảm giác và làm đình trệ xung động trong sợi thần kinh Hóachất này không gây hại nhanh động vật có vú và chim, nhưng hóa chất rất độc đối
O-3,5,6-Hình 1.7: Công thức cấu tạo của Chlorpyriphos
Chlorpyriphos tồn tại ở dạng tinh thể, nóng chảy ở 42oC, mật độ 1,4 g/cm3.Chlopyriphos tác động lên hệ thần kinh côn trùng thông qua việc ức chế men ChE(Cholinesterase), ngăn cản quá trình hình thành nên Acetylcholinesterase gây nhiễmđộc côn trùng chủ yếu bằng sự phosphoryl hóa Acetylcholinesterase (AChE) ở đầutận cùng thần kinh Liều gây độc LC50 với cá vàng 0,18 mg/l
Trang 11Hình 1.8: Công thức cấu tạo của Metalaxyl
Metalaxyl có màu nâu nhạt, tồn tại nhiều dạng khác nhau như: bột mịn, đôngđặc, dạng tuyết hay dạng viên; nóng chảy ở 295,9oC, mật độ 1,20g/cm3
Hoạt chất Metalaxyl có tác dụng nội hấp và lưu dẫn mạnh, thuốc được hấp thuqua lá, thân, rễ cây trồng, sau đó vận chuyển, lưu dẫn trong cây, ức chế tổng hợpprotein, can thiệp vào quá trình tổng hợp ARN Ribosome của tế bào nấm Phòngtrừ hiệu quả các loại nấm phát sinh từ đất và các loại nấm phát tán bào tử trongkhông khí Thuốc không độc hại với các loài chim, cá và ong, LD50 qua miệng
669mg/kg, LD50 qua da 3100 mg/kg [10]
1.2.2.3 Malathion
Theo IUPAC, Malathion còn có tên khác là: 2-(dimethoxyphosphinothioylthio)butanedioic acid diethyl ester, có công thức phân tử C10H19O6PS2, khối lượng phân
tử 330,36 g/mol và công thức cấu tạo như hình vẽ:
Hình 1.9: Công thức cấu tạo của Malathion
Malathion là một chất lỏng có màu hổ phách ở nhiệt độ phòng, có mùi khóchịu giống mùi chồn hôi hoặc tỏi, độ tan trong nước 130 mg/l, tan hầu hết trongcác dung môi hữu cơ Nhiệt độ sôi 156 – 157oC
Malathion liên kết với enzyme Acetylcholinesterase (AChE) của côn trùng.Trong những trường hợp bình thường, AchE liên kết với các chất dẫn truyền thầnkinh Acetylcholine (ACh) ở ngã ba thần kinh, chấm dứt sự kích thích của tế bàothần kinh tiếp theo Khi AchE liên kết với malaoxon, chất chuyển hóa củaMalathion, AChE tích lũy ở đầu dây thần kinh, kết quả kích thích hệ thần kinh.Tác động sinh học của Malathion do enzyme trung gian cytochrome P450 tronggan, tạo ra chất chuyển hóa hoạt động malaoxon Malaoxon độc gấp 22 lần so vớimalathion bằng con đường tiếp xúc và gấp 33 lần bằng con đường vị độc Các
Trang 12enzyme trong gan có thể chuyển hóa Malathion dẫn đến sự hình thành củaisomalathion, là chất ức chế men AChE mạnh.
Liều gây độc LD50 qua miệng ở chuột đực là 5400 mg/kg và chuột cái là 5700
mg/kg; qua da ở chuột là 4000mg/kg và thỏ là 4100-8800 mg/kg [4]
1.3 Tình hình sản xuất và tiêu thụ rau ở Việt Nam [11]
Rau quả thuộc loại thực phẩm không thể thiếu được trong bữa ăn hàng ngày vàchúng có vai trò dinh dưỡng đặc biệt quan trọng Về lượng protein và lipid rau quảkhông so sánh được với những thực phẩm có nguồn gốc động vật nhưng giá trịchính của rau quả là ở chỗ chúng cung cấp cho cơ thể nhiều chất có hoạt tính sinhhọc Một số chất sinh học quan trọng có trong rau quả như caroten, phức chấtpolyphenol (chất màu, hương vị ) chứa các bionavanoit đang là đối tượng nghiêncứu về vai trò chống ôxy hoá cũng như tác dụng làm giảm nguy cơ đối với bệnhtim mạch và phòng ngừa ung thư Vitamin C có nhiều trong các loại rau xanh vàquả họ cam quýt Một số quả có màu vàng như bí đỏ, gấc hoặc các loại rau lá màuxanh thẫm như rau ngót, rau khoai lang chứa nhiều beta-caroten Lượng vitaminnhóm B lớn, kích thích chức năng tiết dịch và nhu động ruột, bài xuất cholesterol
ra khỏi cơ thể Các loại vitamin và chất khoáng có trong rau quả là các yếu tố vilượng rất cần cho sự phát triển của trẻ em, góp phần phòng chống các bệnh nhiễmtrùng, tim mạch và ức chế sự phát triển khối u ác tính Một số loại rau quả có chứacác cấu tử kháng đột biến, chống ôxy hoá, chức năng hoại tử tế bào ung thư, kíchthích và tăng cường việc sản xuất kháng thể Rau quả là nguồn dinh dưỡng cầnthiết cho sức khoẻ, song nó cũng tiềm ẩn nguy cơ bị ô nhiễm hoá học
Sản xuất rau ở Việt Nam, tạo nhiều việc làm và thu nhập cao cho người sảnxuất so với một số cây trồng hàng năm khác Cùng với nhu cầu tiêu dùng về cácsản phẩm rau ngày càng cao đã kéo theo sản xuất rau trong những năm vừa quatăng lên cả vệ số lượng, chất lượng và vệ sinh an toàn thực phẩm Việt Nam cókhả năng sản xuất rau quanh năm với số lượng, chủng loại rau rất phong phú đa
Trang 13dạng 60-80 loại rau trong vụ đông xuân, 20-30 loại rau trong vụ hè thu đáp ứngnhu cầu tiêu dùng nội địa và xuất khẩu.
Theo số liệu Tổng cục Thống kê bình quân sản lượng rau trên đầu người thu ởđất nông nghiệp ở Việt Nam khá cao so với các nước trong khu vực, năm 2009đạt 141,49 kg/người/năm Tuy nhiên, phân bố không đều có những tỉnh như LâmĐồng bình quân sản lượng rau trên đầu người đạt từ (800-1.100) kg/người trênnăm Đây là vùng sản xuất rau hàng hoá lớn nhất cả nước Hưng Yên là tỉnh cóbình quân cao hơn bình quân cả nước có khả năng cung cấp rau tiêu dùng nội địa
và một phần cung cấp rau cho chế biến xuất khẩu Sơn La bình quân rau trên đầungười thấp chỉ khoảng (40-55) kg/người/năm đáp ứng nhu cầu nội tỉnh và mộtphần cung cấp rau trái vụ cho thị trường Hà Nội
Theo số liệu điều tra năm 2010 cho thấy tất cả các hộ đều tiêu thụ rau và 93%
số hộ tiêu thụ quả, bình quân lượng rau tiêu thụ của các hộ điều tra dao động từ(1,791-1,817) kg/hộ/ngày Các loại rau quả được tiêu thụ rộng rãi nhất là raumuống (95% số hộ tiêu thụ), cà chua (88%) và chuối (87%) Mức tiêu thụ rau quảbình quân của Việt Nam là 71 kg/người/năm Rau chiếm 3/4 (54 kg), trong khi quảchỉ chiếm phần còn lại (17 kg) Giá trị tiêu thụ rau quả hàng tháng (bao gồm cảtiêu thụ rau quả nhà tự trồng) là 126.000 đồng/người hoặc 529.000 đồng/hộ Mặc
dù quả chỉ chiếm 1/4 khối lượng rau quả tiêu thụ, nhưng thường có giá cao hơn,nên chiếm gần 40% tổng giá trị Tiêu thụ rau quả chiếm khoảng 4% tổng giá trị chiphí tiêu dùng Rau được sử dụng với số lượng lớn trong bữa ăn hàng ngày Dovậy, vấn đề kiểm soát chất lượng và vệ sinh an toàn thực phẩm để đảm bảo dinhdưỡng và sức khỏe người dân đang được quan tâm, trong đó nhu cầu về rau xanhđạt tiêu chuẩn an toàn ngày càng tăng, đặc biệt là các thành phố lớn như Hà Nội,
TP Hồ Chí Minh Thực tế các thành phố lớn trong cả nước mới chỉ tự cung cấpkhoảng 50 – 60% nguồn rau sạch cho thị trường, phần còn lại phụ thuộc vào cáctỉnh lân cận và rau từ Trung Quốc Song do lượng rau đó gần như không kiểm soátđược nguồn gốc,chất lượng… nên rau còn dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật từ
Trang 14lâu đã trở thành vấn đề bức xúc của hầu hết người tiêu dùng tại các thành phố lớnnói riêng và cả nước nói chung.
1.4 Tổng quan về phương pháp chiết tách HC BVTV trong mẫu rau
Xử lý mẫu là định nghĩa thường được dùng để chỉ các bước tách chiết, làm
sạch chất phân tích ra khỏi nền mẫu [4-6]
Tách chiết:
Tách chiết là bước quan trọng trong quá trình phân tích, trong bước này cầnphải lựa chọn dung môi để chuyển chất cần xác định từ mẫu phân tích ra dung môichiết Có nhiều loại dung môi khác nhau được lựa chọn để chiết mẫu Dung môiđược lựa chọn cần phải hòa tan tốt các chất cần thiết nhằm đạt được hiệu suất thuhồi cao nhất Với những mẫu có hàm lượng nước cao, dung môi chiết có thể làacetone, ethyl acetate, acetonitrile, hoặc hỗn hợp các dung môi như hỗn hợpacetone : n-hexane, hỗn hợp acetone : dichloromethane Đối với những mẫu cóhàm lượng nước thấp, dung môi chiết có thể dùng hỗn hợp acetone : nước, thể tíchdung môi có thể thừ 100 – 200ml tùy phương pháp
Làm sạch:
Yêu cầu của bước tách chiết mẫu trong phương pháp phân tích đa dư lượng các
HC BVTV phải tách chiết được nhiều loại HC BVTV cùng một lúc Tuy nhiên,trong quá trình chiết xuất có rất nhiều tạp chất đi kèm theo vào dịch chiết, bướclàm sạch được thực hiện với mục đích loại bỏ các tạp chất đi kèm mà vẫn giữđược chất cần phân tích Có 2 phương pháp làm sạch thường được sử dụng đó là:
1.4.1 Kỹ thuật chiết lỏng- lỏng
Chiết lỏng – lỏng là kỹ thuật đã được sử dụng rất lâu trong phòng thí nghiệm
Là kỹ thuật được dùng rất phổ biến để chuyển chất phân tích hòa tan trong mộtdung môi hoặc mẫu dạng lỏng sang dung môi hoặc hỗn hợp dung môi khác Dung
Trang 15môi dùng để chiết không hòa tan với mẫu hoặc dung môi chứa chất cần thiết Lựachọn dung môi chiết phụ thuộc vào tính tan của chất phân tích ở trong dung môi
đó và vào sự dễ dàng tách được chất cần tách ra khỏi mẫu
Các dung môi thường được sử dụng để chiết các HC BVTV là ethylacetate,chloroform, diclomethane, acetone…hoặc có thể kết hợp nhiều dung môi theo tỉ lệthích hợp làm tăng hiệu suất chiết Hiệu quả của phương pháp chiết phụ thuộc vào
hệ số phân bố và tỉ số thể tích của mẫu với dung môi chiết Hệ số có thể cải thiện
nhờ thay đổi pH mẫu, khử muối hoặc sử dụng ion đối… [2,14-16]
Chiết lỏng – lỏng không nhất thiết phải thực hiện bằng phễu chiết, có thể tiênhành chiết lỏng – lỏng bằng cách thêm dung môi chiết vào ống nghiệm chứa mẫu
1.4.2 Kỹ thuật chiết pha rắn
Chiết pha rắn là quá trình chiết bao gồm một pha rắn và một pha lỏng Các cấu
tử cần thiết và các chất cản trở (tạp chất) nằm trong pha lỏng [19] Trong trường
hợp lý tưởng, khi cho chảy qua cột nhồi chứa chất hấp phụ chuyên dụng, các cấu
tử cần chiết được lưu giữ lại trên chất hấp phụ, còn các tạp chất không bị lưu giữ,được thải ra khỏi cột theo dòng chảy hoặc ngược lại các chất cản trở được lưu giữtrên chất hấp phụ, còn các cấu tử cần thiết không bị lưu giữ chảy ra khỏi cột.Trong đa số các trường hợp, các cấu tử cần thiết và tạp chất cùng bị lưu giữ trênchất hấp phụ Khi đó cần rửa chọn lọc bằng những dung môi (dung dịch) đủ mạnh
để loại các tạp chất, nhưng lại đủ yếu để các cấu tử cần thiết nằm lại sau, hoặc rửagiải chọn lọc chất cần chiết trong dung môi và để các tạp chất bị lưu giữ mạnh trênchất hấp phụ
Chiết pha rắn làm việc dựa trên nguyên tắc của sắc ký lỏng Nhờ những tươngtác mạnh nhưng bất thuận nghịch giữa chất phân tích (chất cần thiết) và bề mặt củapha tĩnh (chất hấp phụ), còn sự tương tác của pha tĩnh và các tạp chất trong mẫu
có thể không xảy ra hoặc xảy ra ở mức độ khác với chất cần phân tích Do sự khácnhau trong tính chất hóa học và vật lý giữa chất cần phân tích với tạp chất mà
Trang 16chúng được lưu giữ lại ở những phạm vi khác nhau Điều này cũng có thể đạt đượcnhờ thay đổi pH hoặc lực ion của dung dịch mẫu.
Kỹ thuật này dùng để chiết trực tiếp mẫu lỏng hoặc làm sạch chất phân tích đãđược chiết bằng dung môi theo kỹ thuật khác Kỹ thuật SPE cũng được dùng đểlàm giàu mẫu Thông thường nếu nồng độ chất phân tích trong mẫu quá thấp làmthiết bị phân tích khó phát hiện, cần sử dụng kỹ thuật SPE để làm giàu chất phântích để thiết bị có thể phát hiện đồng thời các chất cần phân tích cũng như loại bỏ
- Các chất hấp phụ pha thuận là pha tĩnh phân cực, khi cho mẫu phân tích chảyqua sẽ giữ lại các chất phân tích phân cực và cho các chất không phân cực chảyqua cột Nhờ vậy, các chất hấp phụ pha thuận được dùng để chiết các chất phântích phân cực từ mẫu không phân cực
- Chất hấp phụ là nhựa trao đổi ion được sử dụng hoặc là hệ pha thường hoặc là
hệ pha ngược, các chất phân tích là ion điện tích ngược dấu với ion trên nhựa traođổi ion được giữ lại trong cột Các dung môi hữu cơ hoặc dung môi chứa ion đối
có ái lực ion mạnh hơn được sử dụng để rửa giải chất cần phân tích ra khỏi cột.Các chất hấp phụ nhựa trao đổi ion cho phép tách các chất phân tích ion từ cácmẫu phân cực và không phân cực
Để làm sạch mẫu bằng SPE thường sử dụng các bước sau:
Trang 17Bước 1 – Điều kiện hoạt hóa cột (luyện cột): Luyện cột chiết pha rắn nhằm hoạt
hóa cột chuẩn bị nhận mẫu
Bước 2 – Chuyển mẫu vào cột chiết: Chuyển mẫu chiết lên cột, sau đó sử dụng áp
suất hoặc để mẫu tự chảy với tốc độ khoảng 1-3 m/phút tùy thể tích cột
Bước 3 – Loại tạp chất: Sử dụng dung môi hoặc hỗn hợp dung môi thích hợp để
rửa giải tạp chất bẩn ra trước
Bước 4 – Rửa giải hợp chất cần phân tích: Sử dụng lượng nhỏ dung môi hữu cơ
mà nó chỉ rửa giải hay chiết các hợp chất quan tâm và để lại tạp chất không loạiđược trong quá trình rửa
1.5 Tổng quan về phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ
Phương pháp phân tích sắc ký khí ghép khối phổ là một phương pháp phântích hóa lý được sử dụng rộng rãi trong nhiều ngành khoa học hiện nay như y dượchọc, hóa học, môi trường… Đây là phương pháp phân tích hiện đại, có độ chínhxác cao thường dùng để khẳng định các kết quả cuối cùng của phép phân tíchlượng vết
Thiết bị phân tích sắc ký khí khối phổ gồm có thiết bị sắc ký khí ghép nốivới detector khối phổ Mẫu sau khi được tách trên cột phân tích của thiết bị sắc kýkhí sẽ được detector khối phổ (MSD) nhận biết và cho ra kết quả dưới dạng sắc ký
đồ và khối phổ Kết quả nhận biết của detector khối phổ có ưu điểm hơn so với cácdetector khác là ngoài việc cho thông tin về thời gian lưu, diện tích peak của chấtthì còn cho thông tin về khối lượng chất, từ đó sẽ giúp cho định tính các chất chính
xác hơn hay so sánh với thư viện phổ để phát hiện ra các chất cần thiết khác [3]
Như vậy đề tài sử dụng phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ sẽ giúp cho việcđịnh tính, định lượng các HC BVTV một cách chính xác dựa vào kỹ thuật phântích lựa chọn các mảnh khối phổ của từng chất (SIM), mảnh phổ lựa chọn để phântích phải có tính chất đặc trưng và là mảnh có tín hiệu cao nhất Kỹ thuật phân tích
Trang 18Scan của khối phổ cho phép thu nhận toàn bộ các mảnh khối phổ của chất phântích thể hiện trên từng peak, dựa vào so sánh thư viện phổ sẽ cho chúng ta biếtđược peak đó là chất gì.
1.5.1 Cấu tạo của hệ thống sắc ký khí ghép khối phổ
Cấu tạo của hệ thống sắc ký khí (GC) ghép khối phổ (MS) gồm các bộ phận
như sau: [3,20]
1 Nguồn khí mang
2 Bơm chân không
3 Buồng bơm mẫu
4 Lò điều nhiệt
5 Cột tách sắc ký
6 Detector MS
7 Thiết bị thu nhận và xử lý tín hiệu
Hình 1.10: Cấu tạo thiết bị GC-MS
Nguồn khí mang: Thiết bị sắc ký khí kết nối detector khối phổ sử dụng khí trơ
là heli hoặc hydro Các khí này có độ tinh khiết cao (99,999%), nguồn khí phải cóvan điều chỉnh áp suất và phải được nối với hệ thống lọc khí trước khi nào thiết bịsắc ký Với khí hydro hiện nay thường có máy sinh khí, còn khí heli vẫn được nạp
Trang 19trong chai Nguồn khí mang này dùng để tách các cấu tử trong cột sắc ký và tốc độdòng khí được điều khiển bằng điện.
Bơm chân không: Có nhiệm vụ tạo môi trường chân không trong buồng ion
hóa mẫu đạt khoảng 10-5 torr trong MSD Thiết bị sắc ký trước đây sử dụng 2 bơmgồm sơ cấp và thứ cấp do đó thời gian đạt được áp suất làm việc mất dài hơn 2giờ Hiện nay các nhà sản xuất sử dụng bơm turbo do đó thời gian đạt được áp suấtlàm việc nhanh hơn rất nhiều
Cột tách sắc ký: Là bộ phận rất quan trọng của thiết bị sắc ký, được thể hiện
thông qua khả năng lưu giữ và tách các chất trong mẫu phân tích Cột phân tíchhay được ví như trái tim của hệ thống sắc ký khí Có 2 loại cột phổ biến là cột nhồi
và cột mao quản Cột nhồi thường có kích thước và đường kính lớn hơn nhưng độdài lại ngắn hơn cột mao quản, do đó khả năng tách chất cũng như hiệu quả phântích của cột nhồi thấp hơn cột mao quản rất nhiều Do vậy, ngày nay phần lớn cáccột GC được sử dụng là cột mao quản
Các thông số quan trọng của cột phân tích mao quản gồm có: thành phần và độdày pha tĩnh, đường kính trong của cột, chiều dài cột.Tùy theo tính chất của cácchất phân tích mà sẽ lựa chọn cột sai cho phù hợp Cột phân tích có độ phân cựccao như HP-inomax, DB-wax… thường là các loại cột chứa pha tĩnh làpolyethylene gycol, hoặc có thêm các thành phần khác như nitroterephthalic…Cácloại cột có độ phân cực thấp như HP-1, HP-5… thường là chứa pha tĩnhdemethylpolysiloxane hoặc có thêm các thành phần là phenyl,…
Lò điều nhiệt: là bộ phận gia nhiệt cho cột tách sắc ký, có thể thay đổi chương
trình nhiệt độ làm tăng khả năng phân tách và độ nhạy của quá trình sắc ký khí
Detector khối phổ (MSD): Hoạt động của detector khối phổ hoạt động trên
nguyên tắc bẻ gãy phân tử chất phân tích thành các mảnh ion có tỷ số m/z xác định
và đặc trưng cho chất phân tích Có 2 loại kỹ thuật ion hóa mẫu là ion hóa điện tử(EI) và ion hóa hóa học Kỹ thuật EI được sử dụng phổ biến, đơn giản hiện nay
Trang 20Khi mẫu ở dạng khí đi vào vùng ion hóa, tại đây mẫu tương tác với chùmelectron có nguồn năng lượng cao cỡ 70eV để tạo ra electron thứ cấp mang điệntích dương và một số phân mảnh nhỏ hơn của phân tử Sau quá trình ion hóa, cácion sẽ được thu nhận bởi một lăng kính mang điện dẫn vào trong bộ phân tíchkhối Các ion khác nhau sẽ được phân tách do sự khác nhau về tỷ số khối lượnghạt trên điện tích (m/z) Sau khi các ion tạo thành đã được tách, detector được sửdụng để “đếm” các ion, hình thành nên khối phổ Ion từ bộ phân tích khối va chạmvào bề mặt bán dẫn của detector giải phóng các điện tử, cứ như thế sẽ nhân lênthành dòng thác điện tử, dẫn tới hệ số khuếch đại có thể tới 1 triệu lần.
1.5.2 Kỹ thuật phân tích và ưu nhược điểm của sắc ký khí ghép khối phổ
Có hai chế độ trong phân tích GC – MS là quét toàn bộ các ion như SCANhoặc chỉ lựa chọn một số ion giàu hay đặc trưng để quét (SIM) Chế độ SCANthường dùng để định tính các chất chưa biết nhờ việc so sánh với thư viện phổhoặc chất chuẩn hoặc dùng để xác định thời gian lưu của chất Hiện tại, các thiết bị
GC - MS sử dụng máy tính có thể cập nhật trong thư viện phổ 350.000 chất Domất một khoảng thời gian nhất định để quét toàn bộ các ion, độ nhạy trong chế độSCAN thường thấp hơn chế độ SIM Ở chế độ SIM, chỉ vài ion được lựa chọn đểquét, tốc độ thu thập số liệu sẽ nhanh hơn, tương ứng với khoảng thời gian củamột peak sắc ký (1 giây), như vậy kết quả định lượng sẽ tốt hơn và độ nhạy được
cải thiện nhiều [3,21]
Ứng dụng: GC – MS thường được sử dụng để phân tích các chất hữu cơ có khả
năng bay hơi dưới 350oC, có khối lượng phân tử nhỏ hơn 600 đvC [1,21]
Ưu điểm: Kết hợp ưu điểm của cả GC và MS, tính năng phân tích nhanh và độ
phân giải cao của sắc ký khí được bảo toàn MS cung cấp độ nhạy cả phân tíchđịnh tính và định lượng ở mức ppb đến ppt Dữ liệu phân tích được lưu giữ đầy đủ
ở dạng khối phổ
Trang 21Nhược điểm: GC – MS là thiết bị phân tích đắt, vận hành phức tạp hơn sắc ký khí
so với một chất nội chuẩn) Tuy nhiên, cũng phân tích sắc ký khí nếu sử dụngdetector khối phổ (MSD) thì ngoài dấu hiệu định tính được sử dụng là thời gianlưu, còn sử dụng thêm dấu hiệu thứ hai là so sánh sự có mặt và tỷ lệ mảnh phổ củachất chuẩn với chất cần tìm trong mẫu Như vậy, khi sử dụng phương pháp phântích GC – MS thì độ chính xác của kết quả phân tích là cao hơn và phương pháp
này thường được sử dụng để khẳng định kết quả phân tích cuối cùng [1,3]
Đề tài nghiên cứu sử dụng phương pháp phân tích là GC – MS Do đó việcđịnh tính sự có mặt của HC BVTV trong mẫu phân tích dựa vào 2 dấu hiệu là sosánh thời gian lưu của HC BVTV trong mẫu chuẩn với mẫu phân tích và tỷ lệmảnh phổ chất chuẩn HC BVTV được xác định sau khi phân tích mẫu trên GC-
MS ở chế độ SIM Hiện nay việc định tính thông thường sử dụng khoảng 3 mảnhphổ cho mỗi chất phân tích
Định lượng:
Một số kỹ thuật dùng để định lượng trong phân tích sắc ký khí là chuẩn hóa
diện tích peak, ngoại chuẩn, thêm chuẩn và chuẩn nội [1,3]
Trang 22Chuẩn hóa diện tích peak: Kỹ thuật tính toán này coi tỷ lệ phần trăm diện tích
peak trong sắc ký đồ tương ứng với tỉ lệ phần trăm lượng chất Kỹ thuật này đượcdùng chủ yếu phân tích các mẫu tinh dầu, không được sử dụng trong phân tíchlượng vết
Ngoại chuẩn: Kỹ thuật này tính toán dựa trên đường ngoại chuẩn được xây
dựng biểu diễn tương quan tuyến tính giữa nồng độ chất chuẩn trong dung dịchvới diện tích peak Đường ngoại chuẩn được xây dựng thường dựa vào từ 3 điểmnồng độ trở lên
Trong nghiên cứu của đề tài thì định lượng HC BVTV dựa vào phương trìnhhồi quy tuyến tính được đưa ra sau khi xây dựng đường chuẩn trên 6 điểm nồng
độ Đường chuẩn được xây dựng dựa trên mối tương quan giữa tỷ lệ diện tích peakvới nồng độ của từng HC BVTV
Nồng độ của từng HC BVTV trong mẫu rau phân tích thực tế giám định đượctính theo công thức:
V (ml): Thể tích dung dịch trước khi bơm mẫu
m (g): Khối lượng rau
1.6 Tổng quan về đánh giá phương pháp
Xác định khoảng tuyến tính và đường chuẩn
Để xác định khoảng tuyến tính cần khảo sát khoảng 6 điểm nồng độ khác nhau,thực hiện, thực hiện đo các dung dịch chuẩn có nồng độ thay đổi và khảo sát sựphụ thuộc của tín hiệu vào nồng độ Vẽ đồ thị phụ thuộc giữa tín hiệu đo vào nồng
độ và quan sát sự phụ thuộc cho đến khi không còn tuyến tính Khoảng tuyến tính
Trang 23dài hay ngắn phụ thuộc vào nhiều yếu tố trong đó quan trọng nhất là bản chất củachất phân tích và kỹ thuật sử dụng Các chất khác nhau có khoảng tuyến tính khácnhau do sự khác nhau về tính chất hóa lý.
Sau khi xác định khoảng tuyến tính cần xây dựng đường chuẩn và xác định hệ
số hồi quy tương quan Trong phân tích thực tế, có thể xây dựng các đường chuẩnngắn, trùm lên vùng nồng độ trong mẫu, không nhất thiết phải lập đường chuẩntoàn bộ khoảng tuyến tính Nồng độ trong mẫu không được vượt ra ngoài giới hạncao nhất và thấp nhất của đường chuẩn và tốt nhất phải nằm ở đường giữa đườngchuẩn có nhiều loại đường chuẩn khác nhau tùy thuộc vào các phương pháp và kỹthuật khác nhau như: Đường chuẩn với chất chuẩn tinh khiết, đường chuẩn trênnền mẫu trắng, đường chuẩn trên nền mẫu thực…
Giới hạn phát hiện LOD
Giới hạn phát hiện (LOD) là nồng độ nhỏ nhất của chất phân tích có thể xác định được trong điều kiện thí nghiệm cụ thể Đây là nồng độ thấp nhất của chất phân tíchtrong mẫu mà hệ thống có thể phát hiện được nhưng chưa thể định lượng được Tùythuộc vào phương pháp phân tích và điều kiện thí nghiệm có thể tính LOD theo nhiều cách khác nhau Trong sắc ký LOD thường được xác định là nồng nồng độ của chất phân tích mà tại đó tỉ lệ giữa tín hiệu của chất phân tích và tín hiệu nền bằng 3 (S/N=3)
Giới hạn định lượng LOQ
Giới hạn định lượng (LOQ) là nồng độ tối thiểu của chất phân tích trong dung môi
mà tại đó ta có thể định lượng được bằng phương pháp phân tích và cho hết quả có
độ chính xác mong muốn Giống như LOD, có nhiều cách khác nhau xác định LOQ phụ thuộc vào từng phương pháp, kỹ thuật và điều kiện trang thiết bị cụ thể Ta có thể xác định dựa vào tỷ lệ tín hiệu chất phân tích so với nhiễu đường nền (S/N) LOQ có thể xác định bằng nồng độ của chất phân tích mà tại đó chiều cao peak của
nó bằng khoảng 10 lần chiều cao của nhiễu đường nền (S/N=10)
Khảo sát độ chính xác của phép đo
Trang 24Theo ISO, độ chính xác của phép đo được đánh giá qua độ đúng và độ chụm.
Độ chụm là mức độ gần nhau của các giá trị riêng lẻ của các phép đo lặp lại Độđúng là mức độ gần nhau của giá trị phân tích với giá trị thực Độ đúng được biễudiễn dưới dạng sai số tuyệt đối hoặc sai số tương đối
Sai số được tính theo công thức:
X X
n
Trong đó: %X: Sai số phần trăm tương đối
Si: Gía trị diện tích peak đo được
St: Gía trị diện tích peak thựcn: Số lần đo
Độ lặp lại của phép đo được xác định theo các đại lượng SDvà RSD