Nghiên cứu xác định dư lượng thuốc trừ sâu nhóm lân hữu cơ và cúc tổng hợp trong một số rau quả tươi tại tp cao lãnh, tỉnh đồng tháp bằng phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ (GC MS)

TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH LÊ VĂN THOẠI NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG THUỐC TRỪ SÂU NHÓM LÂN HỮU CƠ VÀ CÚC TỔNG HỢP TRONG MỘT SỐ RAU QUẢ TƯƠI TẠI TP.CAO LÃNH, TỈNH ĐỒNG THÁP BẰNG PHƯƠNG PHÁP S

TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH

LÊ VĂN THOẠI

NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG THUỐC TRỪ SÂU NHÓM LÂN HỮU CƠ VÀ CÚC TỔNG HỢP TRONG MỘT SỐ RAU QUẢ TƯƠI TẠI TP.CAO LÃNH, TỈNH ĐỒNG THÁP BẰNG PHƯƠNG PHÁP

SẮC KÝ KHÍ GHÉP KHỐI PHỔ (GC/MS)

LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC

NGHỆ AN, 2014

TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH

LÊ VĂN THOẠI

NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG THUỐC TRỪ SÂU NHÓM LÂN HỮU CƠ VÀ CÚC

TỔNG HỢP TRONG MỘT SỐ RAU QUẢ TƯƠI TẠI TP.CAO LÃNH, TỈNH ĐỒNG THÁP BẰNG PHƯƠNG PHÁP

SẮC KÝ KHÍ GHÉP KHỐI PHỔ (GC/MS)

Chuyên ngành : Hóa phân tích

Mã số : 60.44.0118

LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC

Người hướng dẫn khoa học:

PGS TS Nguyễn Khắc Nghĩa

NGHỆ AN, 2014

Trước tiên, e in g i ời i t n s u s c nh t n th PGS TS Nguyễn Khắc Nghĩa ã tận tình hướng dẫn, h t ng tru n t ki n th c v

gi p cho e trong su t thời gian thực hiện uận văn t t nghiệp

Em c ng in ược g i ời cả n ch n th nh n t t cả quý th cô hoa h a - Trường Đ i học Vinh ã dìu d t v trang ki n th c cho e trong hai nă học v a qua

Em c ng in ch n th nh cả n n ãnh o Trung t thuật Th nghiệp v ng d ng hoa học ông nghệ Đ ng Th p v c c ng nghiệp ã

t o i u kiện thuận ợi, h t ng gi p v chia s nh ng kh khăn trong thời gian i học

Sau cùng ời cả n s u s c nh t n ẹ v vợ ã uôn t o i u kiện

t t nh t trong su t qu trình học c ng như thực hiện uận văn này!

Nghệ An ng th ng n m

Người thực hiện

L V n Tho i

- ADI (Acceptable Daily Intake): ượng ăn v o h ng ng ch p nhận ược

- BVTV: Bảo vệ thực vật

- CI (chemical ionization): h ộ ion h a h a học trên GC/MS

- DSPE (Dispersed Solid Phase Extraction): hi t pha r n ph n t n

- ECD (Electron Capture detector): Đ u d t iện t

- EI (Electron Ionization) : Ion h a ằng iện t trên G /MS

- FID (Flame Ionization detector): Đ u d ion h a ngọn a

- GC (Gas chromatography): S c ký kh

- HPLC (High Performance Liquid Chromatography): S c ký ỏng hiệu năng

cao

- LD50 (Letal Dois) : i u g ch t trung ình

- LC50 (Letal Concentration): N ng ộ g ch t trung ình

- LOD (Limit of detection): Giới h n ph t hiện

- LOQ (Limit of Quantification): Giới h n nh ượng

- MRL (Maximum Residue Level): Giới h n t i a dư ượng

- MS (Mass Spectrometry): Đ u d kh i phổ

- NPD (Nitrogen Phosphorous detector): Đ u d c nh g c Nit v

Phospho

- QuEChERS (Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged, and Safe): Nhanh, dễ,

rẻ, hiệu quả, ổn nh, và an toàn

- RF (Fluorescence): Đ u d huỳnh quang

- RSD (Relative Standard Deviation): Độ ệch chuẩn tư ng i

- SEC (Size Exclusion): Phư ng ph p s c ký o i tr theo k ch thước

- SD (Standard Deviation): Độ ệch chuẩn

- TTS: Thu c tr s u

- UV-VIS: Đ u d t ngo i – khả ki n

Bảng 1.1: Tên, công th c c u t o v dung ôi h a tan ột s hợp ch t nh

n h u c

Bảng 1.2: Tên, công th c c u t o v dung ôi h a tan ột s hợp ch t nh

c c tổng hợp

Bảng 1.3: Ion dư ng t c nh n trong ion h a h a học

Bảng 1.4: Hướng dẫn ẫu rau tư i ể ph n t ch dư ượng thu c BVTV Bảng 3.1: Thời gian ưu, ion nh ượng v ion c nhận

Bảng 3.2: S iệu n ng ộ v tỷ ệ diện t ch peak

Bảng 3.3: Phư ng trình ường chuẩn v hệ s tư ng quan (R2

)

Bảng 3.4: t quả ộ ặp i trên chuẩn ở a c n ng ộ

Bảng 3.5: t quả ộ ặp i trên n n ẫu cải ngọt

Bảng 3.6: t quả ộ ặp i trên n n ẫu cải anh

Bảng 3.7: t quả ộ ặp i trên n n ẫu rau ng t

Bảng 3.8: t quả ộ ặp i trên n n ẫu rau u ng

Bảng 3.9: t quả ộ ặp i trên n n ẫu dưa eo

Bảng 3.10: Hiệu su t thu h i trên ẫu cải ngọt

Bang 3.11: Hiệu su t thu h i trên ẫu cải anh

Bảng 3.12: Hiệu su t thu h i trên ẫu rau ng t

Bảng 3.13: Hiệu su t thu h i trên ẫu rau u ng

Bảng 3.14: Hiệu su t thu h i trên ẫu dưa eo

Bảng 3.15: Gi tr OD v OQ theo ường chuẩn

Bảng 3.16: Gi tr OD v OQ theo kh i ượng

Bảng 3.17: t quả ph n t ch ẫu rau quả

H nh 1.1: Hệ th ng s c ký kh gh p kh i phổ – GC/MS

H nh 1.2: Bình kh he iu

H nh 1.3: utosa p er c ng với Headspace

H nh 1.4: Bu ng tiê ẫu sp it/sp it ess

H nh 1.5: cột

Hình 1.6 u t o cột s c ký kh

Hình 1.7 u t o u d kh i phổ

H nh 1.8: Khoảng tuy n tính và khoảng làm việc

Hình 1.9: Đường chuẩn trên n n mẫu thực

Hình 1.10: Đường chuẩn s d ng ch t nội chuẩn

Hình 1.11: M i quan hệ gi a LOD, LOQ và khoảng tuy n tính Hình 2.1: S qu trình ý ẫu rau quả

H nh 3.1: Phổ Scan chuẩn TTS ở i u kiện 1, 2, 3, 4

H nh 3.2: Phổ Scan chuẩn TTS ở i u kiện 5, 6, 7, 8

H nh 3.3: Phổ Si c a peak trif ura in

H nh 3.4: Phổ Si c a peak diazinone

H nh 3.5: Phổ Si c a peak disu foton

H nh 3.6: Phổ Si c a peak ch orp rifos

H nh 3.7: Phổ Si c a peak phenothrin 1

H nh 3.8: Phổ Si c a peak phenothrin 2

H nh 3.9: Phổ Si c a peak per ethrin 1

H nh 3.10: Phổ Si c a peak per ethrin 2

Hinh 3.11: Đ th ường chuẩn c c ho t ch t TTS

Hinh 3.12: Phổ ường chuẩn c c ho t ch t TTS

Hình 3.13: Phổ ộ ặp i trên chuẩn 500μg/

Hình 3.14: Phổ ộ ặp i peak phenothrin 2 trên ẫu rau ngót Hình 3.15: Phổ hiệu su t thu h i ẫu cải ngọt ở 3 c n ng ộ

MỞ ĐẦU

Ở nước ta, rau quả tư i r t a d ng v phong ph Nhìn chung ta c thể chia rau quả tư i th nh nhi u nh : nh rau anh như rau cải, rau u ng, rau ch, rau c n,… nh rể c như c r t, c cải, c su h o, c ậu,…

nh cho quả như c chua, dưa chuột, khổ qua,… nh h nh c c o i

Rau quả tư i thực phẩ không thể thi u trong a ăn h ng ng c a

h u h t ọi gia ình N ngu n ổ sung c c vita in v kho ng ch t Nhu

c u v vita in v kho ng ch t c a con người ược cung c p trong a ăn hàng ngày qua rau quả tư i Rau quả tư i c t c d ng k ch th ch nh ch c năng nhu ộng ruột v ti t d ch c a ruột tăng khả năng tiêu ho Ăn nhi u rau quả tư i gi p c thể tr nh ược c c ệnh v ti ch, ột quỵ, ổn nh

hu t p v ngăn ng a ột s ệnh ung thư, h n ch hiệu quả c c ệnh iên quan n ường ruột, ặc iệt viê ruột th a, g p ph n giả ớt ch ng t o bón

Theo o c o c a c Bảo vệ Thực vật, nh rau ăn như rau

u ng, rau ng t, cải anh, cải thảo, cải ngọt, p cải,… c c o i rau ược

d ng phổ i n trong a ăn hằng ng ở nước ta vẫn c ngu c cao t an

to n thực phẩ do nhiễ dư ượng thu c ảo vệ thực vật vượt ngư ng cho

ph p Ngu ên nh n ch u dẫn n tình tr ng trên do người sản u t chưa thực hiện t t qu nh trong s d ng thu c ảo vệ thực vật, công t c qu

ho ch, tổ ch c sản u t, tiêu th rau an to n c n nhi u ặt u k , công t c quản ý uôn n, s d ng thu c ảo vệ thực vật, ặc iệt trên rau c n uông ỏng ở nhi u a phư ng.[20]

H ng nă , Bộ Nông nghiệp v Ph t triển Nông thôn u ẫu gi

s t với nh ng nông sản ch ực như th t, rau, quả, th sản t quả cho th

tỷ ệ rau quả nhiễ thu c ảo vệ thực vật vượt qu giới h n cho phép là 6,44% trong nă 2009, 6,17% trong nă 2010, 4,43% trong nă 2011 v khoảng trong 4,5% nă 2012 Theo nh gi thì c vẫn c n cao so

với c c nước ph t triển, vì vậ c quan ch c năng c ng ang c g ng tăng cường công t c quản ý v kiể so t ể nhằ giả tỷ ệ n [20]

Hiện na theo danh c ã c 1643 ho t ch t thu c ảo vệ thực vật (BVTV) ược ph p s d ng, 13 ho t ch t h n ch s d ng v 29 ho t ch t

c s d ng t i Việt Na [8] Đ ng Th p ột tỉnh nông nghiệp, sau a các sản phẩ rau, quả cho nên nhu c u s d ng c c o i thu c BVTV ể

ph ng v tr c c o i d ch ệnh r t ớn nhưng việc kiể so t ch t ượng c c

o i rau, quả vẫn c n ỏng ẻo v ỏ ngõ, ên c nh năng ực kiể nghiệ

t i c c ph ng th nghiệ trong tỉnh vẫn chưa p ng H n n a nh ng sản phẩ rau tư i c thời gian ảo quản r t ng n, dễ ng, c n tiêu th nga sau khi thu ho ch ể ả ảo t nh tư i c a sản phẩ Vì th c n c c c phư ng

ph p ph n t ch dư ượng thu c BVTV nhanh ch ng v ch nh c

Các thi t ph n t ch thu c BVTV phổ i n hiện na S c ký kh (GC/FID/E D/NPD), S c ký kh ghép kh i phổ (GC/MS, GC/MS/MS,…),

S c ký ỏng hiệu năng cao (HP /UV-VIS/RF), S c ký ỏng ghép kh i phổ (LC/MS, LC/MS/MS,…) Với hai o i thi t n c thể ph n t ch ược h u

h t c c thu c BVTV hiện na , t thuộc v o u d c a ỗi thi t b c ộ

nh v ộ chọn ọc kh c nhau nhưng u d kh i phổ ược e c ộ chọn ọc, ộ nh cao song chi ph u tư an u r t t t k Nhìn chung, việc ph n t ch c c thu c BVTV nh c o h u c , n h u c v c c tổng hợp ằng s c ký kh gh p kh i phổ ột n (MS) p ng t t c c êu c u v giới

h n theo qui nh V ưu iể c a u d kh i phổ n c thể chư ng trình

h a ph n t ch ược nhi u nh thu c BVTV c ng c Song c ng với ng n

h ng phổ cho ph p nh danh ch nh c c c o i thu c khi chưa c chuẩn, chi

ph vận h nh thi t n c ng th p như t t n dung ôi, h a ch t, ch t chuẩn,

kh c p v iện

Xu t ph t t nh ng lý do trên chúng tôi chọn t i: “Nghiên cứu xác

định dư lượng thuốc trừ sâu nhóm lân hữu cơ v cúc tổng hợp trong một số rau quả tươi tại Th nh phố Cao Lãnh, tỉnh Đồng Th p bằng Phương ph p

sắc ký khí ghép khối phổ (GC/MS)” ể nghiên c u v ảo vệ uận văn th c sĩ

c a ình

Thực hiện đề tài này, chúng tôi tập trung giải quyết các vấn đề sau:

- Tổng quan v thu c tr s u (TTS) g c n h u c , c c tổng hợp và phư ng ph p c nh ch ng

- hảo s t i u kiện t ch hỗn hợp 02 chuẩn TTS g c n h u c v c c tổng hợp trên s c ký kh gh p kh i phổ với k thuật ion h a e ectron (EI)

- hảo s t khoảng tu n t nh cho hỗn hợp 02 chuẩn TTS g c n h u c

và c c tổng hợp

- X c nh ộ ặp i trên dung d ch chuẩn t i 03 iể trên ường chuẩn

- X c nh ộ ặp i trên dung d ch ẫu cho 05 n n: cải ngọt, cải anh, rau ng t, rau u ng, dưa eo

- Đ nh gi hiệu su t thu h i trên 05 n n ẫu: 03 iể n ng ộ cho n n cải ngọt, cải anh v 01 iể n ng ộ cho n n rau ng t, rau u ng, dưa eo

- Tì gi tr giới h n ph t hiện ( OD) v giới h n nh ượng ( OQ) cho thi t X c nhận i gi tr n trên n n ẫu thực

- ng d ng c c k t quả nghiên c u phân tích dư ượng TTS g c n h u

c v c c tổng hợp trên 25 ẫu rau quả tư i ở th trường Th nh ph ao ãnh, tỉnh Đ ng Th p

NỘI DUNG CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN

1.1 GIỚI THIỆU VỀ THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT

1.1.1 Định nghĩa: [3]

1.1.1.1 Thuốc bảo vệ thực vật:

- Thuốc bảo vệ thực vật (sản phẩm nông dược) : là nh ng ch phẩm

có ngu n g c hóa ch t, thực vật, ộng vật, vi sinh vật và các ch phẩm khác

d ng ể phòng tr sinh vật gây h i tài nguyên thực vật G m các ch phẩm

d ng ể phòng tr sinh vật gây h i tài nguyên thực vật; các ch phẩ i u

h a sinh trưởng thực vật; ch t làm r ng hay khô lá; các ch phẩm có tác d ng

ua uổi hoặc thu hút các lo i sinh vật gây h i tài nguyên thực vật n ể tiêu diệt

- Tài nguy n thực vật: g c , sản phẩ c a c , nông sản, th c ăn

gia s c, sản khi ảo quản

- Sinh vật gây h i tài nguy n thực vật: ao g côn tr ng, n , vi

khuẩn, cỏ d i, chuột v c c t c nh n g h i kh c

1.1.1.2 Dư lượng thuốc bảo vệ thực vật (BVTV):

Dư ượng thu c BVTV ph n c n i c a c c ho t ch t hoặc c c sản phẩ chu ển ho c a ch ng v c c th nh ph n kh c nhau c trong thu c BVTV t n t i trên c tr ng, nông sản, t, nước sau khi s d ng thu c BVTV

1.1.1.3 Lượng n vào hàng ngày chấp nhận được (ADI):

ADI ượng c a ột o i h a ch t ược ưa v o c thể h ng ng không g ảnh hưởng c t c h i n s c khỏe con người n v t nh là mg/kg thể trọng

1.1.1.4 Giới h n tối đa dư lượng (MRL) thuốc bảo vệ thực vật:

ượng t i a cho ph p (Ma iu Residue i it- MR ) ượng t i a

ột o i thu c BVTV ch p nhận t n t i trong nông sản, thực phẩ không

g h i cho con người v vật nuôi khi s d ng nông sản th c ăn Giới han t i a dư ượng ược t nh ằng g/kg theo công th c sau:

(1)

BM : Thể trọng trung bình/người

F : ượng th c ăn tiêu th trung bình/người/ngày

ADI : ( ccepta e Dai Intake) ượng thu c BVTV c thể ăn h ng ngày t nh ằng g/kg/ng

Gi tr MR c a ỗi ho t ch t trong thu c BVTV i với t ng o i c

tr ng, nông sản ược qui nh kh c nhau tuỳ theo ỗi nước

1.1.2 Phân lo i thuốc bảo vệ thực vật: [3]

1.1.2.1 Dựa vào đối tƣợng phòng chống:

+ Thuốc trừ sâu (Insecticide): g c c ch t ha hỗn hợp c c ch t c

t c d ng tiêu diệt ua uổi ha di chu ển t kỳ o i côn tr ng n o c ặt trong ôi trường h ng ược d ng ể diệt tr ha ngăn ng a c c t c h i c a côn tr ng n c tr ng, c r ng, nông sản, gia s c v con người

+ Thuốc trừ bệnh (Fungicide): g c c hợp ch t c ngu n g c h a

học, sinh học c t c d ng ngăn ng a ha diệt tr c c o i vi sinh vật g h i cho c tr ng v nông sản ằng c ch phun ên ặt c , ý gi ng v

ý t,…

+ Thuốc trừ chuột (Rodencide hay Raticide): nh ng hợp ch t vô c ,

h u c ; hoặc c ngu n g c sinh học c ho t t nh sinh học ược d ng ể diệt chuột g h i trên ruộng, trong nh v kho t ng v c c o i gậ nh h ng

t c ộng n chuột ch u ằng con ường v ộc v ông h i

+ Thuốc trừ nhện (Acricide hay Miticide): nh ng ch t ược d ng

ch u ể tr nhện h i c tr ng v c c o i thực vật kh c, ặc iệt nhện

ỏ

+ Thuốc trừ tuyến trùng (Nematocide): c c ch t ông h i v nội h p

ược d ng ể ý t trước tiên tr tu n tr ng rễ c tr ng trong t, h t

gi ng v cả trong c

+ Thuốc trừ cỏ (Herbicide): c c ch t ược d ng ể tr c c o i thực

vật cản trở sự sinh trưởng c tr ng, c c o i thực vật ọc hoang d i, quanh

c c công trình ki n tr c, s n a , ường s t, V g cả c c thu c tr rong rêu trên ruộng, kênh ư ng Đ nh thu c dễ g h i cho c tr ng

+ Con đường vị độc: nh ng thu c g ộc cho ộng vật khi thu c

nhập qua ường tiêu h a c a ch ng Độ pH d ch ruột v thời gian t n t i

c a thu c trong d d v ruột non ảnh hưởng r t nh n hiệu ực c a thu c

+ Con đường xông hơi: nh ng thu c c khả năng a h i/ i, u

ộc u không kh ao quanh d ch h i v g ộc cho sinh vật khi thu c nhập qua ường hô h p

+ Con đường thấm sâu: nh ng thu c c khả năng nhập qua

iểu ì thực vật, th v o c c t o ph a trong, diệt d ch h i s ng trong c

v c c ộ phận c a c c thu c n chỉ c t c ộng theo chi u ngang, không c khả năng di chu ển trong c

+ Con đường nội hấp: nh ng o i thu c c khả năng nhập qua

th n, , rễ v c c ộ phận kh c c a c ; thu c d ch chu ển ược trong c , diệt ược d ch h i ở nh ng n i a v ng ti p c với thu c

1.1.2.3 Dựa vào nguồn gốc hóa học:

+ Thuốc có nguồn gốc thảo mộc: c c thu c BVTV t c cỏ ha

c c sản phẩ chi t u t t c cỏ c khả năng tiêu diệt d ch h i

+ Thuốc có nguồn gốc sinh học: c c o i sinh vật (c c o i ký sinh

thiên ch), c c sản phẩ c ngu n g c sinh vật (c c o i kh ng sinh,…) c khả năng tiêu diệt d ch h i

+ Thuốc có nguồn gốc vô cơ: c c hợp ch t vô c (dung d ch ooc ô,

ưu huỳnh, ưu huỳnh vôi,…) c khả năng tiêu diệt d ch h i

+ Thuốc có nguồn gốc hữu cơ: c c hợp ch t h u c tổng hợp c khả

năng tiêu diệt d ch h i (c c hợp ch t g c c o h u c , n h u c , c c tổng hợp,

v car a at,…)

1.1.3 Độc tính và độ độc [3]

1.1.3.1 Độc tính: là khả năng g ộc c a ột ch t i với c thể sinh vật ở

một ượng nh t nh c a ch t ộc

1.1.3.2 Độ độc: là biểu hiện m c ộ c a t nh ộc, là i u ượng nh t nh c a

ch t ộc c n c ể g ược ột t c ộng n o trên c thể sinh vật khi

ch ng nhập v o c thể sinh vật ác ch t ộc c ộ ộc khác nhau và thường ược biểu th là miligam ch t ộc trên kilogam trọng ượng c thể (mg/kg) hoặc µg/mg với nh ng ộng vật nhỏ Độ ộc ược biểu th qua li u gây ch t trung bình (Letal Dois – LD50) hoặc n ng ộ gây ch t trung bình (Letal Concentration – LC50) n ượng thu c ít nh t có thể gây ch t 50% s

cá thể vật thí nghiệ ược tính bằng mg/kg, nên các lo i thu c BVTV có

LD50 hoặc LC50 càng th p thì ộ cao càng cao

1.2 THUỐC BVTV NHÓM LÂN HỮU CƠ VÀ CÚC TỔNG HỢP: [3]

Thu c BVTV c ngu n g c h u c thông thường ao g 04 nh :

nh c o h u c , nh n h u c , nh c c tổng hợp, nh carbamat nhưng trong nh n, c c, car a ate c c c ho t ch t ược s d ng rộng rãi v phổ i n Riêng nh c o h u c a ph n c c ho t ch t cẩ s

d ng t i Việt Na v nhi u nước trên th giới, nên trong t i chúng tôi chỉ nghiên c u 02 nh thu c BVTV n h u c v c c tổng hợp vì ch ng c ng ược s d ng kh phổ i n trong nông nghiệp, ặt kh c 02 nh n c thể

ph n t ch c ng c trên thi t s c ký kh gh p kh i phổ (GC/MS)

1.2.1 Nhóm lân hữu cơ (Organophosphorus) [3]

1.2.1.1 Định nghĩa:

Thu c tr s u nh n h u c (vi t t t OP) h ng dẫn u t c a

c c este trung t nh ha a id c a a it phosphoric, c công th c c u t o chung dưới , trong iên k t P=S dễ ph n huỷ v t ộc h n iên k t P=O

Bảng 1.1: T n, công thức cấu t o và dung môi hòa tan

một số hợp chất nhóm lân hữu cơ [15], [17]

Tên

ho t chất

Công thức cấu t o

Dung môi hòa tan

Chlorfenvinphos

- Tan trong H2O: 145 mg/L (23oC)

- Tan trong acetone, ethanol, propylen glycol

Chlorpyrifos-Ethyl

- Tan trong H2O: 2 mg/l (25oC)

- Tan trong isooctane: 79% w/w; methanol: 43% w/w

- Tan nhanh trong các

dung môi h u c kh c

Chlorpyrifos-methyl

- Tan trong H2O: 5 mg/l (25oC)

- Tan trong isooctane: 79% w/w; methanol: 43% w/w

- Tan nhanh trong các dung môi h u c kh c

Diazinone

- Tan trong H2O: 0,004% (20oC)

- Hòa tan trong alcohol, ether, petrolium ether, cyclohexane, benzene, hydrocarbons

Disulfoton

- Không tan trong H2O

- Tan trong các dung môi

h u c

1.2.1.2 Đặc điểm chung:

Thu c tr s u n h u c ột nh ớn g nhi u o i thu c kh c nhau ược d ng phổ i n nh t ể tr d ch h i Thu c c phổ t c d ng rộng, diệt ược nhi u o i s u h i, tu n tr ng, nhện, diệt cả tr ng, s u non v s u trưởng th nh T c ộng n côn tr ng nhanh ằng con ường: ti p c, v

ộc, ông h i, nội h p v th s u Thời gian t n dư thu c trong ôi trường không d i không g t ch u trong c thể khi nhiễ ộc n ược thải qua nước tiểu

1.2.1.3 Cơ ch tác động:

c t c ộng c a thu c n h u c i với c thể sinh vật c c ung ộng

th n kinh ược dẫn tru n dọc theo d th n kinh qua c c iể th n kinh (s napses) ể n c c c quan T i ti p iể n u ng th n kinh ược dẫn tru n iên t c nhờ ch t trung gian dẫn tru n acet cho ine ( ch) ược tổng hợp t i chỗ Sau khi u ng th n kinh tru n qua thì acet cho ine thuỷ

ph n ởi en acet cho inesterase ( che) Do u ng th n kinh ch d t dẫn tru n v trở v tr ng th i ình thường c n h u c c t nh c ch r t

nh en che, nghĩa n ngăn cản t c d ng thuỷ ph n acet cho ine

hi nhập v o c thể sinh vật, n h u c nhanh ch ng k t hợp với en cholinesterase ( hE) v kì hã ho t t nh c a en n qu trình n gọi phosphor qu trình thuận ngh ch c c thể sinh vật khi tr ng ộc s

tê iệt th n kinh, r i o n trao ổi ch t, g ộng d ch trong khoang ph

t ng v u t hu t qua iệng dẫn n t vong

1.2.2 Nhóm cúc tổng hợp (Pyrethroid): [3]

1.2.2.1 Định nghĩa:

Nhóm cúc tổng hợp (Pyrethroid) là hỗn hợp c a các este có c u trúc

ng phân quang học c a một g c axit, 1 hoặc 2 nguyên t cac on không i

x ng với một g c rượu có ch a một hoặc không ch a nguyên t cacbon không i x ng Các hợp ch t n ược tổng hợp dựa trên các hợp ch t tự nhiên có trong cây cúc sát trùng

Dựa vào tính b n v ng i với nh s ng người ta chia nhóm pyrethroid thành 3 nhóm:

+ Không b n với ánh sáng: allethrin, resmethrin

+ Tư ng i b n với ánh sáng: deltamethrin, permethrin, fenvalerat + B n với ánh sáng: cypermethrin, bifethrin, cyhalothrin, cyfluthrin Một s hợp ch t nhóm cúc tổng hợp nghiên c u trong t i ược trình bày trong bảng 1.2:

Bảng 1.2: T n, công thức cấu t o và dung môi hòa tan

- Không tan trong H2O

- Tan trong MeOH, acetone, xylene, CH2Cl2

- Tan trong các dung môi

h u c tr ethylene glycol

Phenothrine

- Không tan trong H2O

- Tan trong acetone, xylene

1.2.2.2 Đặc điểm chung:

Nhóm cúc tổng hợp có nhiệt ộ sôi cao, áp su t h i th p, ít phân cực tan

t t trong dung môi h u c

Thu c tr sâu nhóm cúc tổng hợp có phổ tác d ng rộng diệt ược các

lo i côn trùng có cánh bằng con ường ti p c v vi ộc không tác d ng

th m sâu và nội h p, ngoài ra nhóm cúc tổng hợp còn có tác d ng ua uổi

Độ ộc c a thu c i với côn trùng ph thuộc vào tính phân cực và c u

t o ng phân quang học, nó có tính quy t nh hiệu lực c a thu c m nh h n

là sự tha ổi thành ph n hoá học có trong chúng, vì nhóm cúc tổng hợp là hỗn hợp c a các este có c u tr c ng phân quang học khác nhau mỗi ng phân có ho t tính sinh học r t khác nhau nên việc t ch c c ng phân này ra

i hỏi k thuật ph n t ch c ộ phân giải cao

1.2.2.3 Cơ ch tác động:

c ho t ch t thuộc nh c c tổng hợp t c ộng nh d n t o th n kinh trung ư ng v ngo i vi, n ph v sự vận chu ển c c ung ộng th n kinh c a ộng vật, cho sinh vật co th t giã d a v ch t hi ới tr ng

ộc n s t c ộng v o h c P v Retizius c trong t o th n kinh, k ch th ch

ho t ộng c a c c c côn tr ng t khả năng gi thăng ằng, g thi u

ô cho c c t o th n kinh

Trong c thể ộng vật máu nóng nhóm cúc tổng hợp b phân huỷ và thải

ra bên ngoài nên không gây tích lu trong c thể

1.3 ĐẠI CƯƠNG VỀ PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ [1], [2]

1.3.1 Khái niệm và Phân lo i sắc ký :

S c ký phư ng ph p t ch c c ch t dựa v o sự ph n kh c nhau c a

ch ng gi a hai pha ộng v tĩnh M c ộ tư ng t c với c c pha ph thuộc v o

t nh ch t c a ch t ph n t ch tư ng ng với t nh ch t c a ch ng c o i ực

tư ng t c ao g tư ng t c van der Waa s, ư ng cực- ư ng cực, ư ng cực- ư ng cực cả ng, tĩnh iện h t ph n t ch tư ng t c c ng nh với pha tĩnh thì c ng di chu ển chậ v s r a giải ra sau Trong qu trình chu ển ộng dọc theo cột s c ký ch t ph n t ch s gặp h t ớp pha tĩnh n

n ớp pha tĩnh kh c, c n ằng h p ph /giải h p ph diễn ra nhi u n Nhờ

ặc iể n người ta c thể t ch c c ch t trong hỗn hợp, s n ả ra

c n ằng trong cột c ng nhi u thì khả năng ph n t ch c c ch t ph n t ch c

t nh ch t g n nhau c ng cao

Tr ng th i vật ý kh c nhau c a pha ộng ( ỏng ha kh ) dẫn n sự kh c nhau c ản v thi t , t người ta ph n s c ký th nh hai o i, s c ký ỏng (Liquid Chromatography- ) v s c ký kh (Gas Chromatography- GC)

1.3.2 Phương pháp sắc ký khí

phư ng ph p d ng ể ph n t ch c c ch t tư ng i dễ a h i (c nhiệt ộ sôi nhỏ h n 5000 ) v n nhiệt Pha ộng c c kh tr như H2, N2,

He, r; pha tĩnh ch t ỏng hoặc r n n nhiệt, c c pha tĩnh phổ i n nh t hiện na c ngu n g c po si o ane với c c nh th tha ổi ể t o ra

ột o t c c pha tĩnh c ộ ph n cực tha ổi t không ph n cực, t ph n cực

n ph n cực Với khả năng t ch v ộ nh r t cao c ng với nh ng detector

c t nh chọn ọc cao, phư ng ph p G ột phư ng ph p ph n t ch ược

ng d ng r t nhi u trong c c ĩnh vực ph n t ch ôi trường v an to n thực phẩ

1.3.3 Cấu t o máy sắc ký khí gh p khối phổ:

M s c ký kh gh p kh i phổ ược c u t o g c c ộ phận: kh mang, ộ phận tiê ẫu tự ộng, u ng tiê ẫu, cột, cột ao quản v

u d kh i phổ ược trình ở c c hình 1 1 n hình 1 7

H nh 1.1: Hệ thống sắc ký khí gh p khối phổ – GC/MS

1.3.3.1 Khí mang (Carrier gas): Thông thường

khí Helium h ang ng vai tr pha ộng

Tiê ẫu c 02 d ng ằng ki tiê

(S ringe) hoặc ộ tiê ẫu tự ộng ( uto

sa p er) Bộ phận tiê ẫu c t c d ng tiê

ch nh c ột ượng ẫu ph n t ch v o u ng

tiêm

H nh 1.3: Autosampler c ng với Headspace

1.3.3.3 Buồng ti m (Injector):

H nh 1.4: Buồng ti m mẫu split/splitless

T i u ng tiê , ẫu ược ho h i v theo d ng kh ang v o u cột

s c ký Để ưa ẫu v o u ng tiê c 2 c ch d ng ki tiê ể tiê ta

hoặc ộ tiê ẫu tự ộng N u s d ng cột nh i, ki tiê s ưa ẫu trực

ti p v o cột, trong khi ở cột ao quản ẫu phải ược ho h i trước, ột ph n

ha to n thể ượng h i ẫu ược ưa v o cột tư ng ng với 2 c ch tiê chia dòng và không chia dòng

- Phương pháp ti m chia dòng (split injection): hỉ ột ph n nhỏ

ẫu ược ưa v o cột, ph n c n i ược dẫn qua ngã chia d ng v thải ra ngo i theo ột tỉ ệ chia d ng ặt trước, tỷ ệ chia d ng cao ả ảo cột không qu tải

- Phương pháp ti m không chia dòng (spitless injection): Mẫu ược

tiêm vào bu ng tiêm nóng (nhiệt ộ bu ng tiêm phải cao ể toàn bộ dung

d ch ho h i) Nhiệt ộ cột an u th p h n t 100C- 300C so với nhiệt ộ sôi

c a dung ôi ể t o hiệu ng dung môi (solvent effect) nhằm gi các ch t nằm ở u cột mà không di chuyển trong thời gian ưa ẫu vào cột (t 30- 60 giây) Sau thời gian n , ngã chia d ng ngược mở ra và quá trình phân tích

b t u cùng với nhiệt ộ cột tăng d n Thường thể tích mẫu không quá 2 µL ược tiêm vào bu ng tiê ể tránh nhiễm bẩn các bộ phận khác

1.3.3.4 Lò cột (Column oven)

nhiệ v ổn nh nhiệt ộ theo chư ng trình

nhiệt ã ập s n trên ph n thi t

H nh 1.5: Lò cột

1.3.3.5 Cột sắc ký (Column)

ột s c ký kh ặc iệt r t d i Thường c o i : o i cột nh i pha tĩnh thường c ường k nh trong 2-6 v d i 1 – 3 t v o i cột ao quản thường c ường k nh trong 0,2 – 0,7 v d i 10 – 100 Với việc ph n t ch a

dư ượng thu c BVTV trên s c ký kh ta c n ột cột c

s ĩa ý thu t r t ớn ể c thể t ch ược ng thời nhi u

ch t thì chỉ c cột ao quản ới p ng ược êu c u n

Hình 1.6 Cấu t o cột sắc ký khí

1.3.3.6 Đầu dò khối phổ (MS Detector)

Hình 1.7 Cấu t o đầu dò khối phổ

S c ký kh gh p kh i phổ ượng (Mass Spectro etr - MS) ột phư ng ph p ph n t ch công c quan trọng trong ph n t ch Sự ph n ảnh c c

ph n t trung h a th nh c c ion ph n t ang iện t ch dư ng, hoặc ph v

c c ảnh ion, c c g c theo s sau:

+ B[ABC]+ , [AB]+, [A]+ gọi c c ion ảnh

Năng ượng n ph ph n t th nh ion ph n t khoảng 40eV – 80eV,

sự ph v n ph thuộc c u t o ch t, phư ng ph p v năng ượng n ph nhi u phư ng ph p ion h a kh c nhau nhưng phổ i n phư ng ph p va

ch e ectron, ion h a h a học

- Phư ng ph p va ch e ectron (E ectron impact - EI): Phư ng ph p phổ i n, d ng kh c a ẫu i v o u ng ion h a, va ch với d ng e ectron

t ột sợi t (catod) chu ển ộng vuông g c với d ng ph n t ẫu Áp

su t u ng ion h a t 0,005 torr, nhiệt ộ 200±0.25o

C Các electron va

ch với ph n t trung hoà t o c c ảnh ion, ảnh g c ha ph n t trung

h a nhỏ Sau c c ion i qua ột iện trường 400 – 4000V ể tăng t c, vận

t c ion tỷ ệ với kh i ượng c a ch ng

- Phư ng ph p ion h a h a học (che ica ionization - CI): Ion hóa hóa học cho d ng ph n t kh va ch với ột d ng ion dư ng hoặc ể

i n ph n t trung hòa thành ion phân t ha ion ảnh D ng ion n ược hình th nh t ph n t d ng kh H2, CH4, H2O, CH3OH, NH3… qua sự ion h a như n ph ch ng ằng d ng e ectron ang năng ượng cao Mỗi ph n t

d ng kh c thể t o ra c c ion dư ng kh c nhau t c nh n trong ion hóa

h a học

Bảng 1.3: Ion dương làm tác nhân trong ion hóa hóa học

H3 +

CH4 +

,CH3 +

, CH5 +

Bước1: phân t trung hòa (CH4) va ch m với dòng electron mang năng

lượng cao trở thành ngu n ion

1.4 CÁCH XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG THUỐC BVTV

1.4.1 Cách lấy mẫu rau tươi d ng cho phân tích dư lượng [5]

Theo qui nh c a tiêu chuẩn Việt Na c c ộ phận rau tư i d ng cho

ph n t ch dư ượng ược theo hướng dẫn ảng 1 4:

Bảng 1.4: Hướng dẫn ẫu rau tư i ể ph n t ch dư ượng thu c BVTV Phân lo i rau tươi Cách lấy mẫu

Nh rau 1: rau ăn rễ v

rau ăn c : c r t, khoai t ,

c cải, khoai ang,…

to n ộ sản phẩ sau khi c t ỏ cu ng, r a

ỏ ph n t v o ằng nước sau d ng

gi th khô

Nh rau 3: rau ăn (tr

p cải): cải ngọt, cải

p cải ruse thì ngọn v cu ng tước ỏ , i với ngọn ông cải anh thì chỉ ỏ ph n n hoa Nhóm rau 5: rau ăn quả: c

chua, dưa chuột, ướp, ớt,

u,…

To n ộ sản phẩ sau khi o i ỏ cu ng

1.4.2 Các phương pháp chi t và làm s ch mẫu:

1.4.2.1 Phương pháp chi t tách mẫu: [4], [12], [13], [14], [16], [18]

a Chi t bằng dung môi

c dung ôi chi t ược s d ng phổ i n nh t acetonitri , dich o etan aceton, eth acetat, eter d u hoả v etano Bên c nh người

ta thường c khu nh hướng d ng nhi u dung ôi t o th nh ột hỗn hợp dung ôi chi t ẫu ặc iệt trong ph n t ch a dư ượng thu c BVTV vì như vậ s ho tan t t c c ho t ch t ph n cực c ng như k ph n cực

Vì ẫu rau, quả c h ượng nước r t ớn nên c n ột dung ôi c khả năng ho tan với nước như acetonitri e v aceton, c thể dễ d ng th nhập sau v o n n ẫu Sau khi chi t, nước s ư c o i ra khỏi dung d ch chi t ằng c ch s d ng ột ượng ớn u i khan như Na , MgSO4 hay

Na2SO4 Bằng hiệu ng n acetonitri c thể dễ d ng t ch ra khỏi hỗn hợp với nước t o th nh hai pha, pha nước ch a n ng ộ u i ảo ho , pha h u c

ch a ch t ph n t ch

Ngo i việc chọn hệ dung ôi th ch hợp ể chi t triệt ể h n c c ho t

ch t ra khỏi dung ôi thường ược hỗ trợ thê ột s k thuật sau

b Chi t phân tán pha rắn (Matrix Solid Phase Dispersion Extraction)

Đ ột phư ng ph p d ng cho c c o i ẫu r n trong qu trình chi t t ch v s ch ược thực hiện trong c ng ột công o n Mẫu sau khi

xa nhu ễn ược trộn u với ột ch t h p ph như 18, C8, f orisi ,… t o

th nh d ng ột t i, sau hỗn hợp ược nh i v o cột nhỏ, t p ch t v dư ượng thu c BVTV h p ph s ược r a giải với nh ng dung ôi th ch hợp

hu t iể c a phư ng ph p n ượng ẫu ph n t ch giới h n v kh

gi u ẫu

c Phương pháp QuEChERS (Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged, and Safe)

QuE hERS phư ng ph p chi t t ch v s ch d ng cho ph n t ch

a dư ượng thu c BVTV trong thực phẩ ới ph t triển trong thời gian g n Như tên gọi c a n ột phư ng ph p ý ẫu nhanh, dễ, rẻ ti n, hiệu quả, ổn nh v an to n QuE hERS chi t c ng ột c ược nhi u ho t

ch t thu c BVTV nhưng c thể cung c p ột d ch chi t tư ng i s ch v hiệu su t thu h i cao Vì vậ QuE hERS thường i kè c c ộ its chọn

ọc /MS ha G /MS Qui trình t u ằng việc chi t ẫu với acetonitri ,

ch t ph n t ch sau ược t ch qua ớp dung ôi h u c ằng c ch s d ng

ột ượng ớn u i khan Na , MgSO4, cu i c ng d ch chi t ược s ch

ằng c ch c d ch chi t với c c ch t h p ph r n như 18, than ho t tính,

a ine nh c p Ngu ên t c c a qu trình s ch chi t pha r n ph n t n (Dispersed Solid Phase Extraction- DSPE)

1.4.2.2 Phương pháp làm s ch [4], [14]

D ch chi t ẫu ngo i ch t c n thi t c n nhi u ch t kh c t n n ẫu c ng cộng chi t theo, do qu trình s ch ể o i ỏ c c ch t cộng chi t

s ảnh hưởng trong qu trình ph n t ch c n thi t ể nhằ n ng cao ộ nh

c a ph p ph n t ch Nhi u k thuật s ch ã ược s d ng trong ph n t ch

b Chi t pha rắn (Solid Phase Extraction- SPE)

Ngu ên ý ho t ộng c a cột chi t pha r n dựa v o tư ng t c c a c c ch t

c trong d ch chi t với pha ộng (dung ôi), v pha tĩnh (ch t h p ph r n) Pha tĩnh c c h t nhỏ v p ường k nh 40- 70 µ ược nh i trong ng tiê ằng nhựa, pha tĩnh SPE c ng a d ng tư ng tự như pha tĩnh c a s c ký ỏng như 18, po st renedivin ezen, a in, nhựa trao ổi anion, nhựa trao

ổi cation, car on graphite, f orisi , si ica ge , v a u ina 2 hướng ể

s ch với SPE: cô ập ch t ph n t ch hoặc cô ập n n ẫu

1.4.3 Các thông số nhận giá trị sử dụng của phương pháp [9]

1.4.3.1.Định nghĩa v khoảng tuy n tính:

- Khoảng tuyến tính c a ột phư ng pháp phân tích là khoảng n ng

ộ ở ó có sự ph thuộc tuy n tính gi a i lượng o ược và n ng ộ

ch t phân tích

- Khoảng làm việc c a một phư ng pháp phân tích là khoảng n ng

ộ gi a giới h n trên và giới h n dưới c a ch t phân tích (bao g m cả các giới h n này), t i ó ược ch ng minh là có thể xác nh ược bởi phư ng pháp nh t nh với ộ úng, ộ chính xác và ộ tuy n tính như ã nêu

Để n giản h n, hai kh i niệ n ược ô tả theo hình 1 8 dưới :

H nh 1.8: Khoảng tuy n tính và khoảng làm việc

1.4.3.2 Xây dựng đường chuẩn

Trong phân tích thực t , có thể xây dựng các ường chuẩn ng n, trùm lên vùng n ng ộ trong mẫu, không nh t thi t phải lập ường chuẩn toàn bộ khoảng tuy n tính N ng ộ trong mẫu không ược vượt ra ngoài giới h n cao nh t và th p nh t c a ường chuẩn và t t nh t phải nằm ở vùng gi a ường chuẩn

a ây dựng đường chuẩn ngo i:

Chuẩn b dãy n ng ộ chuẩn (t i thiểu 6 n ng ộ) Xác nh các giá

tr o ược y theo n ng ộ x N u sự ph thuộc tuy n tính, ta có khoảng khảo sát ường biểu diễn là ột phư ng trình:

) (

) )(

(

2

Y y X

x

Y y X x R

i i

i i

(3)

N u 0,995 ≤ R ≤ 1 hay 0,99 ≤ R2 ≤ 1: có tư ng quan tuy n tính rõ rệt

b ây dựng đường chuẩn trên mẫu thực

Phân tích mẫu thực có cho thêm các n ng ộ chuẩn khác nhau tư ng

tự như trong ph n làm với mẫu tr ng V ường cong tín hiệu o (tr c tung y) ph thuộc vào n ng ộ chuẩn thêm (tr c hoành x) D ng ường chuẩn trên n n mẫu thực thường có d ng như hình 1.9:

Hình 1.9: Đường chuẩn trên n n mẫu thực

Khi s d ng ường chuẩn trên n n mẫu thực có thể lo i tr ược các ảnh hưởng c a n n mẫu n k t quả phân tích Sau khi lập ược phư ng trình ường chuẩn: Y = aX + b, có thể dễ dàng tính ược n ng ộ: x = b/a

c Đường chuẩn có sử dụng nội chuẩn

Một phư ng pháp r t h u ích trong phân tích, ặc biệt trong phân tích hiện i là s d ng nội chuẩn Nội chuẩn ược thêm vào dung d ch chuẩn ể

o máy, với n ng ộ phù hợp và gi ng nhau V ường cong ph thuộc

gi a tỷ lệ tín hiệu ch t ngo i chuẩn chia cho nội chuẩn (tr c tung y) ph thuộc vào n ng ộ ngo i chuẩn (tr c hoành x) Tính các hệ s h i quy (a, b trong phư ng trình h i quy y = ax + b) và hệ s tư ng quan (R) tư ng tự như phư ng ph p ngo i chuẩn trên, k t quả thể hiện ở hình 1 10:

Hình 1.10: Đ ƣờng chuẩn sử dụng chất nội chuẩn

1.4.3.3 Giới h n phát hiện (LOD)

a Định nghĩa

Giới h n phát hiện là n ng ộ mà t i ó giá tr xác nh ược lớn h n

ộ không ảm bảo o c a phư ng pháp Đây là n ng ộ th p nh t c a ch t phân tích trong mẫu có thể phát hiện ược nhưng chưa thể nh lượng ược ( i với phư ng pháp nh lượng)

b Cách xác định

Chỉ áp d ng ược cho các phư ng pháp có xây dựng ường chuẩn LOD có thể ược xác nh dựa vào ộ d c c a ường chuẩn và ộ lệch chuẩn c a tín hiệu o

(4) (5)

Trong đó: SD : Độ lệch chuẩn c a tín hiệu;

a : Độ d c c a ường chuẩn Giá tr a có thể dễ dàng tính ược t ường chuẩn, giá tr SD có thể ược tính theo nhi u cách khác nhau, bao g m:

- Dựa trên ộ lệch chuẩn c a mẫu tr ng: Phân tích ẫu tr ng lặp l i

10 l n và tính SD tư ng ng;

- Dựa trên ộ lệch chuẩn c a mẫu thêm chuẩn ở n ng ộ nhỏ g n LOD, ặp l i 10 l n và tính SD;

- Dựa trên hệ s chặn c a ường chuẩn, làm nhi u l n ể tính SD c a giá tr b (intercept);

- Dựa trên ộ lệch chuẩn c a khoảng cách các giá tr o thực với ường chuẩn

1 4 3.4 Giới h n định lƣợng (LOQ)

a Định nghĩa

LOQ là n ng ộ t i thiểu c a một ch t có trong mẫu th mà ta có thể

nh lượng bằng phư ng pháp khảo sát và cho k t quả có ộ ch m mong

mu n

LOQ chỉ áp d ng cho các phư ng pháp nh lượng

LOQ trong nhi u trường hợp có thể là iểm th p nh t c a khoảng tuy n tính Hình 1 1 1 d ư ớ i mô tả m i quan hệ gi a LOD, LOQ và khoảng tuy n tính

Hình 1.11: M i quan hệ gi a LOD, LOQ và khoảng tuy n tính

1 4.3.5 X ác định đ ộ lặp l i (repeatability)

Ti n hành làm thí nghiệm lặp l i 10 l n (ít nh t 6 l n) trên cùng một mẫu (mỗi l n b t u t cân hay ong mẫu) Mẫu phân tích có thể là mẫu chuẩn, hoặc mẫu tr ng có thêm chuẩn, t t nh t là làm trên ẫu th hay mẫu

th thêm chuẩn

Nên ti n hành ở n ng ộ khác nhau (trung bình, th p, cao) trong khoảng làm việc, ỗi n ng ộ làm lặp l i 10 l n (ít nh t 6 l n) Tính ộ lệch chuẩn SD và ộ lệch chuẩn tư ng i RSD hay hệ s bi n thiên CV

- Cm+c: N ng ộ ch t phân tích trong ẫu thêm chuẩn

- Cm: N ng ộ ch t phân tích trong ẫu th

- Cc: N ng ộ chuẩn thêm (lý thuy t)

- Ctt: N ng ộ ch t phân tích trong mẫu tr ng thêm chuẩn

Sau ó tính ộ thu h i chung là trung bình c a ộ thu h i các l n làm lặp l i