Tính hiệu suất kết bông (harvesting efficiency): HE =(OCSC)OC100 160. OC: mật độ tảo trước kết bông SC: mật độ tảo sau kết bông ở dung dịch nổi trên mặt • Xác định tỷ lệ tế bào sống sau quá trình kết bông bằng cách nhuộm màu Evan’s Blue • Xác định số lượng tế bào được phân tách trở lại bằng buồng đếmBurker, từ đó tính tỷ lệ % tế bào thu hoạch được (tế bào phân tách riêng lẻ trở lại).
Trang 19/30/2015
1
Khoa thủy sản
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ
BÁO CÁO
PHƯƠNG PHÁP THU HOẠCH,
BẢO QUẢN VÀ SỬ DỤNG VI TẢO
Trần Sương Ngọc
1
GiỚI THIỆU
- Làm thức ăn cho động vật phiêu sinh
- Làm thức ăn cho ấu trùng động vật thủy sản
- Chiết suất một số chất dùng trong thực phẩm, hóa phẩm
- Làm thực phẩm chức năng
- Sản xuất dầu sinh học
Nuôi dưới nhiều hình thức, qui mô khác nhau Sử dụng trực tiếp
Khó khăn, chi phí cao
- thu hoạch
- bảo quản
2
Trang 29/30/2015
2
NỘI DUNG
• Phương pháp bảo quản tảo N oculata
• Phương pháp thu hoạch tảo
• Sử dụng tảo trong thủy sản
3
1 Phương pháp thu hoạch tảo
1 Thí nghiệm 1: Thu hoạch tảo C calcitrans bằng FeCl3
HCl pH=5
80 vòng/phút
trong 2 phút 20 vòng/phút trong 30 phút Để lắng trong 30 phút
4
Trang 39/30/2015
3
2 Thí nghiệm 2: Thu hoạch tảo C calcitrans bằng NaOH
• NT 1: pH 10
• NT 2: pH 11
• NT 3: pH 12
5
Các thông số theo dõi
• Tính hiệu suất kết bông (harvesting efficiency):
OC: mật độ tảo trước kết bông SC: mật độ tảo sau kết bông ở dung dịch nổi trên mặt
• Xác định tỷ lệ tế bào sống sau quá trình kết bông bằng cách nhuộm màu Evan’s Blue
• Xác định số lượng tế bào được phân tách trở lại bằng buồng đếmBurker, từ đó tính tỷ lệ % tế bào thu hoạch được (tế bào phân tách riêng lẻ trở lại)
6
Trang 49/30/2015
4
Kết quả
38.42%
86.69%
95.35%
0%
20%
40%
60%
80%
100%
120%
FeCl3 =90mg/l FeCl3 =120mg/l FeCl3 =150mg/l
Hiệu suất kết bông Tỉ lệ chết
Thu hoạch tảo C calcitrans bằng FeCl3
7
Kết quả
Hiệu suất kết bông Tỉ lệ chết
Thu hoạch tảo C calcitrans bằng NaOH
8
Trang 59/30/2015
5
ỨNG DỤNG
3 Thí nghiệm 3: Ứng dụng tảo C calcitrans thu hoạch
bằng các phương pháp khác nhau nuôi Artemia
• Artemia giai đoạn mới nở
• Thể tích nuôi: 1lít
• Mật độ: 200 con/lít
• Cho ăn: 4 lần/ngày (cho ăn theo nhu cầu)
• Thời gian nuôi: 2 tuần
9
Thí nghiệm bố trí 3 nghiệm thức, 6 lặp lại
• NT 1: Tảo ly tâm
• NT 2: Tảo cô đặc bằng FeCl3 150mg/L
• NT 3: Tảo cô đặc bằng NaOH =12
Phương pháp tách chùm
10mL tảo kết chùm +100mL nước 35‰ chỉnh về pH 5,0 bằng dung dịch acid HCl 0,1 M khuấy từ
10
Trang 69/30/2015
6
Kết quả
85,3± 7,5 89,2±6,6
84,7±6,4
75
80
85
90
95
100
T
I
L
S
O
N
G
NGAY
FeCl3 150 mg/L NaOH 15 Ly tâm
11
Kết quả
FeCl3 150 mg/L 7,2±0,6 9,0±0,8 NaOH pH=15 6,8±0,9 9,2±0,9
Ly tâm 6,7±0,8 9,1±0,9
Bảng: Ảnh hưởng của tảo thu hoạch bằng các biện
pháp khác nhau lên tăng trưởng của Artemia
franciscana VC
12
Trang 79/30/2015
7
pháp bảo quản tảo
Tảo sau khi ly tâm với vận tốc 2500 rpm (Molina
Grimma, 1994), tảo đạt mật độ 567,78±22,27 triệu
tb/mL bảo quản ở 3 điều kiện sau:
• NT1: bảo quản ở điều kiện 4oC
• NT2: bảo quản ở nhiệt độ -2oC
• NT3: bảo quản ở nhiệt độ -2oC có bổ sung
glycerol theo tỉ lệ 10% v/v
Với thời gian bảo quản 15, 30 và 45 ngày
13
• Tỉ lệ sống của tế bào tảo được xác định bằng cách sử dụng Evan’s blue nhuộm màu tế bào chết (Harrison, 1988 được
mô tả bởi Molina Grimma, 1994)
• Các tế bào tảo còn sống không bắt màu của thuốc nhuộm, các tế bào chết, màng
tế bào bị vỡ nên bắt màu xanh tím của thuốc nhuộm
14
Trang 89/30/2015
8
Tỉ lệ sống của tảo bảo quản 15 ngày sau
thu hoạch
95.5 d 95.0c d 95.2 d
94.6 c d 94.7 c d
94.6c d
93.2 c 94.0 c d
91.1 b
87.1a
91.1 b
90.4 b
82
84
86
88
90
92
94
96
98
15
Tỉ lệ sống của tảo bảo quản 30 ngày
sau thu hoạch 94.4 d e
94.3 d e
95.3 e
92.9 d 92.9 d
94.9 e
87.0 b
89.0 c
86.4 b
83.6a 84.2a 83.6a
76 78 80 82 84 86 88 90 92 94 96 98
16
Trang 99/30/2015
9
Tỉ lệ sống của tảo bảo quản 45 ngày
sau thu hoạch 91.8 c 92.4 c 92.6 c 92.7 c 92.9 c 92.8 c
82.7a 86.2 b
88.1 b
80.4a 81.5a 81.2a
74
76
78
80
82
84
86
88
90
92
94
17
SỬ DỤNG TẢO BẢO QUẢN ĐỂ NUÔI CẤY
• Tảo sau khi bảo quản theo thời gian và điều kiện bảo quản khác nhau được nuôi cấy
- Thể tích 1L
- môi trường dinh dưỡng Walne (Coutteau, 1996)
- Điều kiện phòng thí nghiệm:
Độ mặn 25 ppt, nhiệt độ
26-29 o C, ánh sáng cung cấp từ 3 ngọn đèn 1,2m
18
Trang 109/30/2015
10
SO SÁNH SỰ PHÁT TRIỂN CỦA TẢO
KHÔNG BẢO QUẢN VÀ BẢO QUẢN THỜI
GIAN 15 NGÀY
Mật độ cao nhất 49,99±1,42 x 10 6 tb/mL
Max (4 o C) =38,04±0,97 b -2 o C =35,8±0,86 a
- 2 o C+G =38,96±0,2 b
- Tốc độ phát triển của tảo vào những ngày
đầu ở NT đối chứng cao hơn so với tảo bảo
quản Tỉ lệ sống của tảo bảo quản +
sự thích nghi với điều kiện môi trường
17-19 tr
000
010
020
030
040
050
060
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
Ngày
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
6 ct/
Ngày
Nanno 4 Nanno -2 Nanno -2 G
17-19 tr
25 tr
19
SO SÁNH SỰ PHÁT TRIỂN CỦA TẢO KHÔNG BẢO QUẢN VÀ BẢO QUẢN THỜI
GIAN 30 NGÀY
Max (4 o C) = 37,77±2,42
-2 o C = 34,18±1,9
- 2 o C+G = 37,17±1,14
- Tốc độ phát triển của tảo vào những ngày đầu ở NT đối chứng cao hơn so với tảo bảo quản Tỉ lệ sống của tảo bảo quản +
sự thích nghi với điều kiện môi trường
000 010 020 030 040 050 060
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
Ngày
25 tr
20
Trang 119/30/2015
11
SO SÁNH SỰ PHÁT TRIỂN CỦA TẢO
KHÔNG BẢO QUẢN VÀ BẢO QUẢN THỜI
GIAN 45 NGÀY
Max (4 o C) = 34,87±1,48 b
-2 o C = 29,74±0,53 a
- 2 o C+G = 34,66±0,12 b
- Tốc độ phát triển của tảo vào những ngày
đầu ở NT đối chứng cao hơn so với tảo bảo
quản Tỉ lệ sống của tảo bảo quản +
sự thích nghi với điều kiện môi trường
000
010
020
030
040
050
060
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
Ngày
25 tr
0 5 10 15 20 25 30 35 40
6 ct/
Ngày
Nano 4 Nano -2 Nano -2/G
17-21 TR
21
KẾT LUẬN
• Sử dụng FeCl3 150 mg/L có thể thu hoạch tảo với hiệu suất kết bông 95%, tỉ lệ sống của tảo 71%
• Sử dụng NaỌH ở pH=12 thu hoạch tảo với hiệu suất kết bông 87%, tỉ lệ sống của tảo 84%
• Tảo sau khi thu hoạch bằng FeCl và NaOH có thể
tách chùm và sử dụng cho Artemia ăn mà không
ảnh hưởng đến tỉ lệ sống và tăng trưởng
• Tỉ lệ sống của tảo giảm theo thời gian bảo quản
• Tảo Nannochloropsis bảo quản ở các điều kiện
4oC, -2oC và -2oC +G có thể sử dụng để nuôi cấy
22
Trang 129/30/2015
12 XIN CHÂN THÀNH CẢM ƠN
23