ĐỊNH TÍNH VÀ KHẢO SÁT GLUCID

ĐỊNH TÍNH và KHẢO sát GLUCID I. Xác định tính khử của đường đơn bằng phản ứng Fehling. II. Xác định tính khử của đường đôi bằng phản ứng Fehling. III. Chiết xuất glycogen. IV. Thủy phân tinh bột. nguyên tắc, cách tiến hành tính toán sơ đồ thực hiện thí nghiệm hình ảnh biểu diễn kết quả thí nghiệm, bàn luận, nhận xét

Bài số: Tên bài: ĐỊNH TÍNH VÀ KHẢO SÁT GLUCID Ngày TN: thứ ngày 16 tháng 01 năm 2017 I Xác định tính khử đường đơn phản ứng Fehling Nguyên tắc - Trong phân tử monosaccait có nhóm –CHO, -C=O mang tính khử nên chúng khử ion kim loại Cu, Fe… Khi đun với dung dịch Fehling cho tủa màu đỏ Cu 2O monosaccarit khử Cu(OH)2 thành Cu2O 2 Tiến hành Dùng ống nghiệm cho chất vào theo thứ tự sau: Ống nghiệm Glucose 1% 2mL Fehling A 1mL Fehling B 1mL 2mL 1mL 1mL Gia nhiệt Đun cách thủy cho xuất kết tủa Kết Ống 1: xuất kết tủa đỏ gạch Ống 2: xuất kết tủa đỏ gạch - Ống nghiệm - Fructose 1% Ống nghiệm Bàn luận Do ống có Glucose ống có Fructose hai monosaccarit có nhóm –CHO, -C=O mang tính khử nên đun với dd Fehling cho tủa màu đỏ Cu2O II Xác định tính khử đường đôi phản ứng Fehling Nguyên tắc Khi phân tử monosaccarit kết hợp với tạo disaccarit, nhóm OH glucozit đường đơn thứ kết hợp với nhóm OH alcol đường đơn thứ hai đường đôi tạo thành mang tính khử (như maltose), nhóm OH glucozit đường đơn thứ kết hợp với nhóm OH glucozit đường đơn thứ hai đường đôi tạo thành không mang tính khử (như saccarose) Tiến hành Ống nghiệm Maltose 2% 2mL Lactose2 % Saccarose 2% Fehling A Fehling B Gia nhiệt 1mL 1mL Đun cách 2 2mL 3 - 2mL 1mL 1mL 1mL 1mL thủy Kết Ống 1: xuất kết tủa đỏ gạch Ống 2: xuất kết tủa đỏ gạch Ống 3: kết tủa (Từ trái sang phải số thứ tự ống nghiệm 1, 2, 3) - Bàn luận Ống 1:Maltose đường đôi tạo thànhtừ nhóm OH glucozit đường đơn thứ với nhóm OH alcol đường đơn thứ Nên maltosemang tính khử nên - tham gia phản ứng Fehling có gia nhiệt xuất kết tủa đỏ gạch Cu2O Ống 2: Lactose đường đôi gốc OH glucozit linh động nên mang tính khử nên - khitham gia phản ứng Fehling có gia nhiệt xuất kết tủa đỏ gạch Cu2O Ống 3: Saccarose đường đôi kết hợp từnhóm OH glucozit đường đơn thứ với nhóm OH glucozit đường đơn thứ Nên không mang tính khử nên tham gia phản ứng Fehling có gia nhiệt không xuất kết tủa đỏ gạch III Chiết xuất glycogen Nguyên tắc Glycogen polysaccarit dự trữ người động vật, có nhiều gan, óc, nhộng, tằm… có mô Ở ta làm quen với cách chiết suất glycogen Tiến hành 5g gan tươi (đã nghiền nát) + 20mL KOH 30% đun nóng Cho vào cốc thủy tinh Đun khuấy liên tục gan tan hết Để nguội, thêm 2mL Na2SO4 10% +50mL cồn 960 Tủa hình thành Để lắng gạn bỏ phần nước Thu tủa, hòa vào 1-2mL H2O + 20mL cồn 960 Để lắng, gạn bỏ phần dịch bên (lặp lại lần) Thu tủa dồn vào lọ sấy khô Kết Thu kết tủa trắng đục glycogen Bàn luận + Glycogen có cấu tạo α – D – glucose liên kết 1,4 1,6 giống với cấu tạo amylopectin mức độ phân nhánh glycogen nhiều + Các hóa chất cho vào để điều chế glycogen có vai trò - Cho KOH 30% đun nóng vào để làm môi trường kiềm mạnh để phá hủy mô gan, để glycogen giải phóng - Thêm Na2SO4 có vai trò tăng hiệu suất qúa trình hình thành tủa glycogen - Thêm cồn 960 nhằm tạo điều kiện hình thành tủa glycogen - Sau thu tủa cho H2O cồn 960 để rửa tủa + Glycogen tác dụng với iod cho màu tím hay đỏ nâu tan nước nóng + Khi thể bị đói hay mệt mỏi lượng glycogen giảm nhanh chóng + Khi thủy phân glycogen acid hay men tạo α – D – glucose IV Thủy phân tinh bột Nguyên tắc Khi đun nóng tinh bột môi trường acid acid phân giải tinh bột Sự phân giải lúc đầu qua sản phẩm trung gian sau tạo maltose glucose Các sản phẩm dextrin trung gian có phân tử lượng khác tác dụng với iod cho màu khác nhau: Tinh bột + Iod màu xanh Amylodextrin + Iod màu tím Eritodextrin + Iod màu đỏ nâu Achrodextrin + Iod màu vàng nâu Maltose glucose + Iod Màu vàng Iod Dựa vào thay đổi màu với hồ tinh bột mà xác định phản ứng xảy giai đoạn hay nói cách khác kiểm tra mức độ bị thủy phân tinh bột đánh giá phần phân tử lượng sản phẩm bị thủy phân Tiến hành o Thủy phân tinh bột: cho vào cốc thủy tinh 10ml tinh bột 1% + 5ml HCl 10% đun cách thủy khoảng 7-10 phút (đậy nắp miệng cốc mặt kính đồng hồ) o Kiểm tra dịch thủy phân: sau kết thúc phản ứng thủy phân, làm nguội tiến hành sau: Ống nghiệm Dịch thủy phân Dung dịch I2/KI 1mL giọt 1mL Fehling A Fehling B Gia nhiệt 0,5mL 1,5mL Đun Kết - Ống 1: dung dịch có màu vàng Iod Ống 2: lúc đầu đun tượng cho dư Fehling B tiếp tục đun dd xuất kết tủa đỏ gạch Ống nghiệm Ống nghiệm Bàn luận - - Ống 1: thủy phân tinh bột cho sản phẩm trung gian : Tinh bột + Iod màu xanh Amylodextrin + Iod màu tím Eritodextrin + Iod màu đỏ nâu Achrodextrin + Iod màu vàng nâu Maltose glucose + Iod Màu vàng Iod Khi tinh bột thủy phân hoàn toàn cho màu vàng Iod Ống 2:Lúc đầu đun dd ko có kết tủa cho dư 0,5mL Fehling B dd xuất kết tủa đỏ gạch dd cu(OH)2 tác dụng với Fehling B tạo thêm ion cu2+ làm phản ứng xảy nhanh dd thủy phân hoàn toàn gồm có maltose glucose mang tính khử nên cho phản với Fehling có gia nhiệt dd có kết tủa đỏ gạch Cu2O ... + 20 mL KOH 30% đun nóng Cho vào cốc thủy tinh Đun khuấy liên tục gan tan hết Để nguội, thêm 2mL Na2SO4 10% +50mL cồn 960 Tủa hình thành Để lắng gạn bỏ phần nước Thu tủa, hòa vào 1-2mL H2O + 20 mL... nghiệm Maltose 2% 2mL Lactose2 % Saccarose 2% Fehling A Fehling B Gia nhiệt 1mL 1mL Đun cách 2 2mL 3 - 2mL 1mL 1mL 1mL 1mL thủy Kết Ống 1: xuất kết tủa đỏ gạch Ống 2: xuất kết tủa đỏ gạch Ống... màu vàng nâu Maltose glucose + Iod Màu vàng Iod Khi tinh bột thủy phân hoàn toàn cho màu vàng Iod Ống 2: Lúc đầu đun dd ko có kết tủa cho dư 0,5mL Fehling B dd xuất kết tủa đỏ gạch dd cu(OH )2 tác