Thực hành hóa sinh học

Dựa vào tính chất hóa học đặc trưng của từng loại monosaccarit andoz hoặc xetoz mà có thể thực hiện các phản ứng hóa học để định tính hoặc định lượng chúng.. Dụng cụ, hóa chất và cách ti

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NHA TRANG

BÀI 1 SACCARIT

Saccarit (hay còn gọi là glucid hay cacbohydrat) là một trong những thành phần quan trọng của cơ thể sinh vật Nó vừa cung cấp năng lượng vừa có vai trò cấu trúc và bảo vệ cơ thể

Dựa vào cấu trúc người ta phân saccarit thành các nhóm: monosaccarit; disaccarit; polisaccarit Dựa vào tính chất hóa học đặc trưng của từng loại monosaccarit (andoz hoặc xetoz) mà có thể thực hiện các phản ứng hóa học để định tính hoặc định lượng chúng Trong đó phản ứng quan trọng được dùng nhiều là phản ứng khử các ion kim loại Polisaccarit là do các monosaccarit liên kết với nhau tạo thành Do đó tính chất hóa học của các đơn phân, sự liên kết giữa các đơn phân quyết định tính chất hóa học của các loại polisaccarit

Có nhiều phương pháp để định tính và định lượng saccarit, trong giáo trình này sẽ giới thiệu một số phản ứng định tính và định lượng quan trọng của saccarit

I MỤC TIÊU

Sau khi học xong bài sinh viên cần đạt được các mục tiêu sau:

- Biết cách pha hóa chất, thao tác thí nghiệm thành thạo

- Biết tự bố trí thí nghiệm, giải thích các hiện tượng thí nghiệm

- Áp dụng quy tắc của thí nghiệm vào các trường hợp thực tế cụ thể

II CÔNG VIỆC SINH VIÊN CHUẨN BỊ TRƯỚC KHI LÊN LỚP

- Đọc kỹ lại phần lý thuyết có liên quan

- Đọc trước các thao tác và cách bố trí thí nghiệm

III MỘT SỐ THÍ NGHIỆM GIỚI THIỆU

1 Phản ứng của Glucose với thuốc thử Fehling

1.1 Nguyên lý

Trong thuốc thử fehling Cu2+ ở dạng kết hợp với muối kali natritactrat sẽ

bị monosaccarit hoặc disaccarit khử thành Cu+

1.2 Dụng cụ, hóa chất và các bước tiến hành thí nghiệm

* Hóa chất:

- dung dịch Glucoz 1%

- Thuốc thử Fehling

* Cách pha hóa chất: Thuốc thử Fheling gồm 2 thành phần: Fehling A và

Fehling B Cách pha như sau:-

- Dung dịch Fehling A: Hòa tan 40g CuSO4.5H2O trong nước cất, định mức đến

* Các bước tiến hành thí nghiệm

Lấy 2 ống nghiệm, cho vào mỗi ống: 1ml glucoz 1% + 1ml thuốc thử Fehling

Đun ống 1 khoảng 10 phút trên nồi cách thủy đang sôi (hoặc đun đến vừa sôi trên ngọn lửa đèn cồn) Ống 2 để ở nhiệt độ phòng

Quan sát kết quả, so sánh hiện tượng và giải thích

2 KIỂM TRA TÍNH KHỬ CỦA MỘT SỐ DISACCARIT

2.1 Nguyên lý

Disaccarit gồm 2 monosaccarit cấu tạo nên Tùy vào công thức cấu tạo (cách kết hợp giữa hai monosaccarit) mà các disaccarit có tính chất hóa học khác

nhau, có tính khử hoặc không có tính khử Một số disaccarit phổ biến là: saccarose, lactose, mantose

Saccarose là disaccarit gồm 2 monosaccarit cấu tạo nên là -D-Glucose

và -D-Fructose Mantoz (đường mạch nha), được cấu tạo từ 2 phân tử Glucoz Lactoz (đường sữa) là disaccarit được cấu tạo nên từ một phân tử -D-galactoz và -D-Glucoz Bằng cách tiến hành thí nghiệm hãy kết luận disaccarit nào có tính khử

-D-2.2 Dụng cụ, hóa chất và cách tiến hành thí nghiệm

* Dụng cụ: chuẩn bị ống nghiệm sạch, pipet, nồi cách thủy

* Hóa chất: thuốc thử Fehling (pha như trên), dung dịch HCl đặc, dung dịch

saccarose 1%, mantose 1%, lactose 1%

* Cách tiến hành thí nghiệm

Thí nghiệm 1:

Lấy 3 ống nghiệm sạch, đánh số để nhận biết, cho vào mỗi ống 1ml dung dịch disaccarit tương ứng + 1ml dung dịch Fehling Đun 3 ống nghiệm trên nồi cách thủy đang sôi khoảng 10 phút Lấy ra quan sát, so sách hiện tượng, kết luận đường nào có tính khử? giải thích?

3 Kiểm tra tính khử của tinh bột

3.1 Nguyên lý

Tinh bột thuộc nhóm polisaccarit, đơn phân cấu tạo nên nó là Glucoz Khi

có tác nhân xúc tác thích hợp tinh bột sẽ bị thủy phân tạo thành các đơn phân

Tinh bột có thể bị thủy phân trong môi trường axit khi đun nóng hoặc bởi xúc tác của các enzyme đặc hiệu

3.2 Dụng cụ, hóa chất và cách tiến hành thí nghiệm

* Dụng cụ: chuẩn bị 3 ống nghiệm sạch, pipet, nồi cách thủy

* Hóa chất: thuốc thử Fehling (pha như trên), dung dịch HCl đặc, dung dịch tinh

bột 1%.: hòa tan 1g tinh bột trong một ít nước cất, thêm vào nước cất khoảng

800C, khuấy đều, tiếp tục đun sôi, để nguội, thêm nước cất đến 100ml

* Cách tiến hành thí nghiệm

Cho vào 3 ống nghiệm, mỗi ống 1 ml dung dịch tinh bột 1% Ống 1 cho thêm 3 giọt nước cất, ống 2 cho thêm 3 giọt HCl đặc, ống 3 cho thêm 1ml dịch enzyme (nước súc miệng) Đun ống 1, 2 trên nồi cách thủy đang sôi khoảng 30 phút; ống 3 để ở nhiệt độ phòng (hoặc ủ ở 370C) 30 phút Lấy 2 ống nghiệm ra, cho vào cả 3 ống, mỗi ống 1ml dung dịch Fehling Đun 3 ống trên nồi cách thủy

10 phút Quan sát hiện tượng, kết luận và giải thích hiện tượng

4 PHẢN ỨNG CỦA TINH BỘT VỚI IOD

4.1 Nguyên lý

Tính chất hóa học đặc trưng của tinh bột là tạo phức màu xanh với iod Tính chất này do thành phần amiloz của tinh bột quyết định Màu xanh này có thể bị mất đi khi đun nóng và được hồi phục lại sau khi làm lạnh Tuy nhiên nếu đun nóng quá mạnh đến mức dung dịch trắng hoàn toàn thì màu xanh đó sẽ không hồi phục được dù có làm lạnh dung dịch

4.2 Dụng cụ, hóa chất và cách tiến hành thí nghiệm

* Dụng cụ, hóa chất

* Dụng cụ: 1 ống nghiệm sạch, đèn cồn

*Hóa chất: thuốc thử Liugon, dung dịch tinh bột 1%

* Cách làm: cho vào ống nghiệm 1 ml dung dịch tinh bột, thêm vài giọt thuốc

thử Liugon, quan sát màu và giải thích

Đun nóng hỗn hợp trên trên đèn cồn đến khi dung dịch vừa mất màu xanh đen, lấy ra làm lạnh, quan sát và giải thích

Tiếp tục đun trên ngọn lửa đèn cồn, lần này kỹ hơn (sau khi dung dịch mất mầu đun tiếp khoảng 5 phút hoặc đun trên nồi cách thủy đang sôi khoảng 40

phút), lấy ra làm lạnh, quan sát màu và giải thích Tiếp tục cho thêm 1- 2 giọt Liugon vào ống nghiệm  quan sát màu và giải thích hiện tượng

5 ĐỊNH LƯỢNG ĐƯỜNG KHỬ THEO PHƯƠNG PHÁP BERTRAND a) Cơ sở lý thuyết của phương pháp

Tất cả các đường có nhóm andehit hay nhóm xeto tự do, trong những điều kiện nhất định có khả năng tham gia vào phản ứng oxi hóa – khử với ion kim loại được gọi là đường khử

Phương pháp này dựa trên khả năng khử dung dịch Cu2+ trong môi trường kiềm để định lượng các loại andoz hay xetoz hay các disaccarit có tính khử Quá trình định lượng đường khử được tiến hành lần lượt theo các bước sau:

- Đun dung dịch kiềm của Cu2+ (dung dịch Fehling) với dung dịch đường

để tạo thành Cu2O

- Sau khi rửa sạch, kết tủa Cu2O được hòa tan bằng dung dịch sắt III sunfat Phản ứng xảy ra như sau:

Cu2O +Fe2(SO4)3 + H2SO4 = 2CuSO4 + 2FeSO4 + H2O

- Chuẩn độ Fe2+ bằng dung dịch KMnO4 0,1N:

10FeSO4 + 2KMnO4 +8H2SO4 = 5 Fe2(SO4)3 + K2SO4 + MnSO4 + 8H2O Chuẩn độ Fe2+ bằng dung dịch KMnO4 0,1N Từ lượng KMnO4 chuẩn độ tính được lượng đồng (Cu2O) Đối chiếu vơi bảng Bertrand sẽ tính được lượng đường tương ứng Bảng Bertrand đã được thành lập dựa vào thực nghiệm

b) Tiến hành thí nghiệm

- Nguyên liệu và hóa chất: Dung dịch Fehling đã có công thức pha trong

dung dịch KMnO4 0,1N; dung dịch Fe2(SO4)3 trong H2SO4

- Cách làm:

 Chuẩn bị dịch đường khử: Cân một lượng chất thử đã nghiền nhỏ (ghi lại

khối lượng cân được), cho nước tiếp tục nghiền Sau đó dồn tất cả vào cốc thủy tinh và đun cách thủy ở 800C trong 15 phút, thỉnh thoảng lắc đều trong khi đun, đem ra kết tủa protein bằng chì axetat Loại axetat bằng Na2HPO4 hoặc Na2SO4 Sau đó lọc qua giấy lọc và đo thể tích dịch lọc thu được Dịch này được sử dụng

để định lượng đường khử

 Cho vào bình tam giác 10ml dịch lọc + 20ml hỗn hợp Fehling Đậy bình bằng một miếng kính và đặt trên bếp điện đun sôi nhanh và đều Đun đúng 3 phút kể từ khi xuất hiện bọt đầu tiên

 Làm lạnh, lọc qua giấy lọc Buchner với 2 lớp giấy lọc dày Chú ý giữ kết tủa lại trong bình và trên lớp oxit (ở trên giấy lọc cũng như trong bình) phải luôn

có lớp nước để Cu2O không bị oxi hóa bới oxi không khí

 Đặt phễu Buchner trên bình nón có chứa kết tủa Đổ vào phễu 15ml dung dịch Fe2(SO4)3 trong H2SO4 để cho chảy từ từ xuống bình, lắc, quan sát xem kết tủa trong phễu và trong bình đã hòa tan hết chưa, nếu chưa tiếp tục thêm một ít dung dịch Fe2(SO4)3 Sau khi phản ứng kết thúc, rửa phễu bằng nước nóng cho đến khi nước rửa không còn phản ứng axit trên giấy quỳ

 Chuẩn độ dung dịch trong bình (Fe2+) bằng dung dịch KMnO4 cho đến khi xuất hiện màu hồng bền trong 30 giây

- Tính kết quả: Từ lượng KMnO4 dùng để chuẩn độ tìm ra lượng đồng Từ lượng đồng tra bảng tìm thấy lượng đường tương ứng Từ kết quả đó tính % đường theo dung dịch:

X(mg%)

20

100

a



a- Số mg đường nhận được

IV VIẾT BÁO CÁO

SV viết báo cáo trình bày quá trình làm thí nghiệm, kết quả thu được, tính toán và giải thích hiện tượng

BÀI 2 : LIPIT (Glyceride)

Lipit là hợp chất hữu cơ có trong tế bào sống, không tan trong nước, tan trong các dung môi hữu cơ không phân cực như: clorofom, ete, xăng, benzen… Lipit được chia thành 2 nhóm chính là Lipit đơn giản và lipit phức tạp Sau đây

- Hóa chất: dầu thực vật, etanol, xăng, dung dịch xà phòng

- Cách tiến hành thí nghiệm: đánh số thứ tự cho các ống nghiệm Lần lượt cho

vào mỗi ống 2ml nước, 2ml etanol, 2ml xăng, 2ml dung dịch xà phòng Thêm vào mỗi ống vài giọt dầu thực vật, lắc đều, quan sát hiện tượng, so sánh tính tan

và sự tạo nhũ tương của dầu thực vật trong các loại dung môi và giải thích

2 Phản ứng phân biệt các thành phần cấu tạo của mỡ

a) Phản ứng xà phòng hóa

Dưới tác dụng của kiềm, mỡ bị thủy phân tạo thành glixerin và axit béo Các axit béo sẽ phản ứng với xút để tạo thành xà phòng

- Hóa chất: dầu ăn, dung dịch NaOH 40% trong cồn

- Cách tiến hành thí nghiệm: cho vào cốc mỏ 50ml: 2ml dầu ăn + 10ml

dung dịch NaOH 40% trong cồn Vừa đun vừa khuấy khoảng 15 – 20 phút đến khi thấy váng màu vàng nhạt Lấy đũa thủy tinh vớt một ít váng cho vào ống nghiệm, thêm nước cất, lắc mạnh thấy bọt xà phòng

b) Sự tạo thành axit béo tự do

Xà phòng là muối của axit béo Dưới tác dụng của axit vô cơ đặc, axit béo được giải phóng, không tan trong nước mà nổi trên mặt nước

- Hóa chất: Dung dịch xà phòng 2%, H2SO4 đặc hoặc HCl đặc

- Cách tiến hành thí nghiệm: cho vào bình tam giác 20ml dung dịch xà

phòng, thêm H2SO4 đặc hoặc HCl đặc cho tới khi môi trường có pH axit (thử bằng giấy quỳ) Dung dịch trở nên đục do axit béo được giải phóng

Đun dung dịch tới sôi axit béo sẽ nổi trên mặt nước (hoặc đun dung dịch trong nồi cách thủy khoảng 30 phút)

3 Xác định một số chỉ số của lipit

a) Xác định chỉ số axit

- Chỉ số axit là tổng số mg KOH cần thiết để trung hòa các axit béo tự do có trong 1g lipit Chỉ số này đánh giá độ tươi của mỡ, dầu Chỉ số này tăng theo thời gian bảo quản dầu mỡ

- Cách làm: Cân chính xác 1g dầu ăn vào ống thủy tinh, thêm 10ml cồn để hòa tan axit béo tự do (có thể đun hỗn hợp trên trong nồi cách thủy để hòa tan hoàn toàn axit béo tự do) Sau đó cho vài giọt phenolphtalein rồi chuẩn độ axit béo tự

do bằng KOH 0,01N cho đến khi có màu hồng nhạt

- Hóa chất: Dầu ăn; dung dịch KOH 0,5N; phenolphtalein; HCl 0,5N

- Cách làm: Lấy một bình tam giác 50ml, cho vào đó 1g dầu ăn, thêm 10ml KOH 0,5N trong cồn Đậy bình bằng tấm kính, đun bình trên nồi cách thủy khoảng 50 – 60 phút Phản ứng được xem như kết thúc khi dung dịch trong bình trở nên trong suốt Sau khi xà phòng hóa xong, lấy bình ra làm nguội và cho thêm vào bình vài giọt phenolphtalein và chuẩn độ bằng dung dịch HCl 0,5N

- Tính kết quả: 1ml dung dịch KOH 0,5N tương ứng với 28mg KOH Lượng mg KOH đã dung để trung hòa tất cả các axit béo trong 1g dầu đã thí nghiệm là:

a: Khối lượng dầu lấy làm thí nghiệm (tính bằng g) (trong

TN trên a=1)

4 Định lượng Liptit bằng phương pháp Soxlet

- Nguyên liệu và hóa chất: Mẫu cần định lượng Lipit; Ete ethylic đã loại nước và Peroxyd

- Dụng cụ: Cối xay sứ, giấy Whatman số 1, bộ Soxlet, cân, bình hút ẩm

- Cách làm: Nguyên liệu được xấy khô đến trọng lượng không đổi ở

100-1050C Cân chính xác mg mẫu (VD m=5, có thể thêm 5-10g Na2SO4 hoặc

Na2HPO4 đã được sấy khô ở nhiệt độ 100-1050C trong 6-8h) Giã nhỏ và chuyển vào bột mẫu vào trong túi giấy Cho dung môi vào bình cầu (khoảng 1/3 thể tích bình cầu), đặt gói nguyên liệu vào bộ phận chính trong Sexlet Lắp ống sinh hàn, sau đó đặt thiết bị vào nồi cách thủy (34-360C) cho đến khi chiết rút hết lipit ra khỏi mẫu (6-8h) Sau khi chiết rút xong, lấy gói mẫu ra sấy ở 20 -300C để loại dung môi, rồi sấy ở 100-1050C cho đến khi trọng lượng không đổi

Chú ý: Thí nghiệm phải thực hiện trong tủ hút Sau khi thí nghiệm xong, ete

dư sẽ được chưng cất thu hồi để sử dụng lần sau

- Kết quả: Lượng chất béo có trong 100g nguyên liệu tính theo công thức:

A- Trọng lượng gói nguyên liệu trước khi chiết rút lipit (g)

B- Trọng lượng gói nguyên liệu sau khi chiết rút lipit (g)

C- Lượng nguyên liệu lấy ra để xác định Lipit

Bài 3 VITAMIN

Vitamin hay còn gọi là sinh tố, bao gồm các chất hữu cơ với khối lượng phân tử thấp, có bản chất hóa học rất khác nhau, có hoạt tính sinh lý, dù với một lượng rất nhỏ nhưng nó đảm bảo hoạt động sống bình thường của cơ thể

Dựa vào tính tan của Vitamin có thể chia thành các nhóm: Vitamin tan trong nước, Vitamin tan trong chất béo…

Do có bản chất hóa học khác nhau nên mỗi Vitamin có phản ứng hóa học đặc trưng, những phản ứng đó dùng để phân tích định tính và định lượng Vitamin

A Vitamin hòa tan trong chất béo

1 Vitamin A (Retinol)

a) Phản ứng với H 2 SO 4 Khi tác dụng với H2SO4 đặc, Vitamin A bị mất nước tạo thành sản phẩm có màu xanh tím không bền, sau đó chuyển thành sản phẩm

có mầu nâu đỏ (mầu đặc trưng của lipocrom)

- Nguyên liệu và hóa chất: Dầu cá, H2SO4 đặc, clorofom hoặc benzen hoặc xăng

- Cách tiến hành thí nghiệm: cho vào ống nghiệm khô 2 giọt dầu cá, 2ml

benzen hoặc clorofom hoặc xăng, lắc tan, thêm một vài giọt H2SO4 đặc, lắc, quan sát hiện tượng và giải thích

b) Phản ứng của Vitamin A với FeSO 4

Trong môi trường axit Vitamin A tác dụng với FeSO4 tạo thành hợp chất màu xanh, chuyển sang màu hồng đỏ Chất tiền Vitamin A (carotenoit) cũng cho phản ứng này nhưng sản phẩm có màu xanh lục

- Nguyên liệu và hóa chất: dầu cá, H2SO4 đặc, axit axetic đặc có chứa FeSO4 bão hòa

- Cách tiến hành thí nghiệm: Cho vào ống nghiệm vài giọt dầu cá, thêm 5

-10 giọt axit axeitc đặc chứa FeSO4 bão hòa; 1-2 giọt H2SO4 đặc, quan sát màu và giải thích

c) Phản ứng của Vitamin A với SbCl 3

Vitamin A tác dụng với SbCl3 bão hòa trong clorofom bị mất nước tạo thành sản phẩm ngưng tụ có mầu không ổn định

- Nguyên liệu và hóa chất: dầu cá, SbCl3 bão hòa trong Clorofom không ngậm nước

- Cách làm: Cho vào ống nghiệm khô 2 giọt dầu cá, 1ml SbCl3 bão hòa trong Clorofom Quan sát sự biến đổi màu trong ống nghiệm, giải thích kết quả

2 Vitamin D

a) Phản ứng của Vitamin D với anilin

Vitamin D trong môi trường axit sẽ tác dụng với anilin tạo thành hợp chất

có màu đỏ đặc trưng

- Nguyên liệu và hóa chất: dầu cá, clorofooc, anilin Chuẩn bị thuốc thử

anilin như sau: trộn anilin với HCl đặc theo tỷ lệ 15:1

- Cách làm: cho 4 giọt dầu cá vào ống nghiệm sạch, khô, cho thêm 1ml

clorofom, vài giọt anilin, lắc đều, quan sát sự tạo thành các thể nhũ có màu trong ống nghiệm Đun sôi hỗn hợp phản ứng trong 30 giây, dung dịch sẽ chuyển thành màu đặc trưng

b) Phản ứng của Vitamin D với SbCl 3

- Nguyên liệu và hóa chất: dầu cá 10% tan trong Clorofooc, dung dịch

SbCl3 21-23% trong clorofooc, anhidrit axetic (CH3CO)2O

- Cách làm: Cho vào ống nghiệm sạch khô 3 – 5ml dung dịch dầu cá, thêm

vào 8-10 giọt anhidrit axetic, lắc đều và thêm vài giọt SbCl3 Lắc đều và quan sát sự xuất hiện màu vàng hoặc vàng da cam

- Cách làm: Cho vào ống nghiệm vài giọt Vitamin E, sau đó thêm từ từ

8-10 giọt HNO3 đặc và lắc nhẹ ống nghiệm Sau 1-2 phút quan sát sự đổi màu

b) Phản ứng với FeCl 3

Vitamin E có thể khử FeCl3 thành FeCl2 sau đó ion Fe2+ phản ứng với phenantrolin để tạo thành ion Fe(C12H8N2)32+, do đó dung dịch chuyển thành màu đỏ

o Hóa chất: Vitamin E 0,15% trong etanol tuyệt đối, FeCl3 0,2% trong etanol, o-phenantrolin 0,5% trong etanol

- Cách làm: Cho vào ống nghiệm 1ml dung dịch Vitamin E, thêm vào 1ml

dung dịch o-phenantrolin và 1-2 giọt FeCl3, lắc quan sát màu tạo thành, giải thích kết quả

4 Vitamin K

Về mặt cấu tạo Vitamin K đều có chứa 2-metyl-1,4-naphtoquinon (metinon), vì vậy các phản ứng của Vitamin K đều dựa trên phản ứng của nhân này

a) Phản ứng với anilin

Metinon tác dụng với anilin tạo thành naphtoquinon có màu đỏ đặc trưng Phản ứng xảy ra như sau:

2-metyl-3-phenylamino-1,4 Hóa chất: Dung dịch Vitamin K 0,1% trong etanol tuyệt đối, thuốc thử anilin

- Cách làm: Cho vào ống nghiệm 1ml Vitamin K, thêm 6-8 giọt thuốc thử anilin, lắc đều Quan sát màu của hỗn hợp và giải thích

b) Phản ứng với xistein

- Nguyên liệu và hóa chất: dung dịch Vitamin K 0,1%, xistein 0,03%,

NaOH 5%

- Cách làm: Cho vào ống nghiệm 1ml Vitamin K, thêm vài giọt xistein

0,03% và 5-6 giọt NaOH 5%, lắc đều Quan sát màu của dung dịch và giải thích

B CÁC VITAMIN HÒA TAN TRONG NƯỚC

1 Vitamin B 1 (Tiamin)

a) Phản ứng tạo thành tiocrom

Trong môi trường kiềm, dưới tác dụng của ferixianua K3[Fe(N)6], tiamin

bị oxi hóa thành tiocrom Hợp chất này sẽ phát huỳnh quang có màu đặc trưng dưới ánh đèn tử ngoại Phản ứng xảy ra như sau:

- Nguyên liệu và hóa chất: Dung dịch Vitamin B1 1%, NaOH 10%,

K3[Fe(N)6] 1%, cồn izobutylic

- Cách làm: Cho vào ống nghiệm 20 ml dung dịch Vitamin B1, thêm 10 giọt dung dịch NaOH 10% và 5 giọt, K3[Fe(N)6] 1%, để yên, hỗn hợp trong ống tạo thành hai lớp ngăn cách Để ống nghiệm dưới ánh sáng mặt trời hoặc dưới ánh đèn tử ngoại Quan sát sự tạo thành huỳnh quang Giải thích kết quả nhận được

b) Phản ứng với thuốc thử diazobenzensunfonic (thuốc thử diazo)

Vitamin B1 phản ứng với axit diazobenzensunfonic sẽ tạo thành hợp chất

có màu da cam hoặc màu đỏ

- Nguyên liệu và hóa chất: Dung dịch Vitamin B1 1%, thuốc thử diazo, NaOH 10%

- Cách làm: Cho vào ống nghiệm 1ml thuốc thử diazo, thêm vài giọt dung

dịch Vitamin B11% và 5-7 giọt NaOH10%, lắc đều Quan sát màu và giải thích

2 Phản ứng của Vitamin B 2 (riboflavin)

a) Phản ứng khử

Riboflavin tồn tại ở dạng oxi hóa và dạng khử Ở dạng khử có tên là

lowcoflavin không mầu, dễ bị oxi hóa thành Riboflavin