Dụng cụ, hóa chất và các bước tiến hành thí nghiệm* Hóa chất: - dung dịch Glucoz 1% - Thuốc thử Fehling * Cách pha hóa chất: Thuốc thử Fheling gồm 2 thành phần: Fehling A và Fehling B..
Trang 1BÀI 1 SACCARIT
Saccarit (hay còn gọi là glucid hay cacbohydrat) là một trong những thànhphần quan trọng của cơ thể sinh vật Nó vừa cung cấp năng lượng vừa có vai tròcấu trúc và bảo vệ cơ thể
Dựa vào cấu trúc người ta phân saccarit thành các nhóm: monosaccarit;disaccarit; polisaccarit Dựa vào tính chất hóa học đặc trưng của từng loạimonosaccarit (andoz hoặc xetoz) mà có thể thực hiện các phản ứng hóa học đểđịnh tính hoặc định lượng chúng Trong đó phản ứng quan trọng được dùngnhiều là phản ứng khử các ion kim loại Polisaccarit là do các monosaccarit liênkết với nhau tạo thành Do đó tính chất hóa học của các đơn phân, sự liên kếtgiữa các đơn phân quyết định tính chất hóa học của các loại polisaccarit
Có nhiều phương pháp để định tính và định lượng saccarit, trong giáotrình này sẽ giới thiệu một số phản ứng định tính và định lượng quan trọng củasaccarit
I MỤC TIÊU
Sau khi học xong bài sinh viên cần đạt được các mục tiêu sau:
- Biết cách pha hóa chất, thao tác thí nghiệm thành thạo
- Biết tự bố trí thí nghiệm, giải thích các hiện tượng thí nghiệm
- Áp dụng quy tắc của thí nghiệm vào các trường hợp thực tế cụ thể
II CÔNG VIỆC SINH VIÊN CHUẨN BỊ TRƯỚC KHI LÊN LỚP
- Đọc kỹ lại phần lý thuyết có liên quan
- Đọc trước các thao tác và cách bố trí thí nghiệm
III MỘT SỐ THÍ NGHIỆM GIỚI THIỆU
1 Phản ứng của Glucose với thuốc thử Fehling
1.1 Nguyên lý
Trong thuốc thử fehling Cu2+ ở dạng kết hợp với muối kali natritactrat sẽ
bị monosaccarit hoặc disaccarit khử thành Cu+
Trang 21.2 Dụng cụ, hóa chất và các bước tiến hành thí nghiệm
* Hóa chất:
- dung dịch Glucoz 1%
- Thuốc thử Fehling
* Cách pha hóa chất: Thuốc thử Fheling gồm 2 thành phần: Fehling A và
Fehling B Cách pha như
sau: Dung dịch Fehling A: Hòa tan 40g CuSO4.5H2O trong nước cất, định mức đến500ml
- Dung dịch Fehling B: Hòa tan 200g kalinatritactrat (C4H4O6NaK.4H2O) và 50gNaOH bằng nước cất, định mức đến 500ml
Pha thuốc thử A với thuốc thử B theo tỷ lệ 1:1, lắc đều thu được dungdịch trong, màu xanh biếc Đó là thuốc thử Fehling (chú ý chỉ pha thuốc thửngay trước khi dùng)
* Các bước tiến hành thí nghiệm
Lấy 2 ống nghiệm, cho vào mỗi ống: khoảng 2-3 ml glucoz 1% + khoảng1-2ml thuốc thử Fehling
Đun ống 1 khoảng 10 phút trên nồi cách thủy đang sôi (hoặc đun đến vừasôi trên ngọn lửa đèn cồn) Ống 2 để ở nhiệt độ phòng
Quan sát kết quả, so sánh hiện tượng và giải thích
2 KI M TRA TÍNH KH C A M T S DISACCARIT ỂM TRA TÍNH KHỬ CỦA MỘT SỐ DISACCARIT Ử CỦA MỘT SỐ DISACCARIT ỦA MỘT SỐ DISACCARIT ỘT SỐ DISACCARIT Ố DISACCARIT
2.1 Nguyên lý
Disaccarit gồm 2 monosaccarit cấu tạo nên Tùy vào công thức cấu tạo(cách kết hợp giữa hai monosaccarit) mà các disaccarit có tính chất hóa học khácnhau, có tính khử hoặc không có tính khử Một số disaccarit phổ biến là:saccarose, lactose, mantose
Saccarose là disaccarit gồm 2 monosaccarit cấu tạo nên là -D-Glucose
và -D-Fructose Mantoz (đường mạch nha), được cấu tạo từ 2 phân tử Glucoz Lactoz (đường sữa) là disaccarit được cấu tạo nên từ một phân tử -D-
Trang 3-D-galactoz và -D-Glucoz Bằng cách tiến hành thí nghiệm hãy kết luận disaccaritnào có tính khử.
2.2 Dụng cụ, hóa chất và cách tiến hành thí nghiệm
* Dụng cụ: chuẩn bị ống nghiệm sạch, pipet, nồi cách thủy
* Hóa chất: thuốc thử Fehling (pha như trên), dung dịch HCl đặc, dung dịch
saccarose 1%, mantose 1%, lactose 1%
* Cách tiến hành thí nghiệm
Thí nghiệm 1:
Lấy 3 ống nghiệm sạch, đánh số để nhận biết, cho vào mỗi ống 2-3mldung dịch disaccarit tương ứng + 1-2ml dung dịch Fehling Đun 3 ống nghiệmtrên nồi cách thủy đang sôi khoảng 10 phút Lấy ra quan sát, so sách hiện tượng,kết luận đường nào có tính khử? giải thích?
3 Kiểm tra tính khử của tinh bột
3.1 Nguyên lý
Tinh bột thuộc nhóm polisaccarit, đơn phân cấu tạo nên nó là Glucoz Khi
có tác nhân xúc tác thích hợp tinh bột sẽ bị thủy phân tạo thành các đơn phân.Tinh bột có thể bị thủy phân trong môi trường axit khi đun nóng hoặc bởi xúctác của các enzyme đặc hiệu
3.2 Dụng cụ, hóa chất và cách tiến hành thí nghiệm
* Dụng cụ: chuẩn bị 3 ống nghiệm sạch, pipet, nồi cách thủy
Trang 4* Hóa chất: thuốc thử Fehling (pha như trên), dung dịch HCl đặc, dung dịch tinh
bột 1%.: hòa tan 1g tinh bột trong một ít nước cất, thêm vào nước cất khoảng
800C, khuấy đều, tiếp tục đun sôi, để nguội, thêm nước cất đến 100ml
* Cách tiến hành thí nghiệm
Cho vào 3 ống nghiệm, mỗi ống 2-3 ml dung dịch tinh bột 1% Ống 1 chothêm 3 giọt nước cất, ống 2 cho thêm 3 giọt HCl đặc, ống 3 cho thêm 1ml dịchenzyme (nước súc miệng) Đun ống 1, 2 trên nồi cách thủy đang sôi khoảng 30phút; ống 3 để ở nhiệt độ phòng (hoặc ủ ở 370C) 30 phút Lấy 2 ống nghiệm ra,cho vào cả 3 ống, mỗi ống 1-2ml dung dịch Fehling Đun 3 ống trên nồi cáchthủy 10 phút Quan sát hiện tượng, kết luận và giải thích hiện tượng
4 PHẢN ỨNG CỦA TINH BỘT VỚI IOD
4.1 Nguyên lý
Tính chất hóa học đặc trưng của tinh bột là tạo phức màu xanh với iod.Tính chất này do thành phần amiloz của tinh bột quyết định Màu xanh này cóthể bị mất đi khi đun nóng và được hồi phục lại sau khi làm lạnh Tuy nhiên nếuđun nóng quá mạnh đến mức dung dịch trắng hoàn toàn thì màu xanh đó sẽkhông hồi phục được dù có làm lạnh dung dịch
4.2 Dụng cụ, hóa chất và cách tiến hành thí nghiệm
* Dụng cụ, hóa chất
* Dụng cụ: 1 ống nghiệm sạch, đèn cồn
*Hóa chất: thuốc thử Lugon, dung dịch tinh bột 1%.
* Cách làm: cho vào ống nghiệm 1 ml dung dịch tinh bột, thêm vài giọt thuốc
thử Lugon, quan sát màu và giải thích
Đun nóng hỗn hợp trên trên đèn cồn đến khi dung dịch vừa mất màu xanhđen, lấy ra làm lạnh, quan sát và giải thích
Tiếp tục đun trên ngọn lửa đèn cồn, lần này kỹ hơn (sau khi dung dịchmất mầu đun tiếp khoảng 5 phút hoặc đun trên nồi cách thủy đang sôi khoảng 40phút), lấy ra làm lạnh, quan sát màu và giải thích Tiếp tục cho thêm 1- 2 giọtLugon vào ống nghiệm quan sát màu và giải thích hiện tượng
5 ĐỊNH LƯỢNG ĐƯỜNG KHỬ THEO PHƯƠNG PHÁP BERTRAND
Trang 5Tất cả các đường có nhóm andehit hay nhóm xeto tự do, trong những điềukiện nhất định có khả năng tham gia vào phản ứng oxi hóa – khử với ion kimloại được gọi là đường khử
Phương pháp này dựa trên khả năng khử dung dịch Cu2+ trong môi trườngkiềm để định lượng các loại andoz hay xetoz hay các disaccarit có tính khử Quátrình định lượng đường khử được tiến hành lần lượt theo các bước sau:
- Đun dung dịch kiềm của Cu2+ (dung dịch Fehling) với dung dịch đường
để tạo thành Cu2O
- Sau khi rửa sạch, kết tủa Cu2O được hòa tan bằng dung dịch sắt III sunfat.Phản ứng xảy ra như sau:
Cu2O +Fe2(SO4)3 + H2SO4 = 2CuSO4 + 2FeSO4 + H2O
- Chuẩn độ Fe2+ bằng dung dịch KMnO4 0,1N:
10FeSO4 + 2KMnO4 +8H2SO4 = 5 Fe2(SO4)3 + K2SO4 + MnSO4 + 8H2O.Chuẩn độ Fe2+ bằng dung dịch KMnO4 0,1N Từ lượng KMnO4 chuẩn độtính được lượng đồng (Cu2O) Đối chiếu vơi bảng Bertrand sẽ tính được lượngđường tương ứng Bảng Bertrand đã được thành lập dựa vào thực nghiệm
b) Tiến hành thí nghiệm
- Nguyên liệu và hóa chất: Dung dịch Fehling đã có công thức pha trong
dung dịch KMnO4 0,1N; dung dịch Fe2(SO4)3 trong H2SO4
- Cách làm:
Chuẩn bị dịch đường khử: Cân một lượng chất thử đã nghiền nhỏ (ghi lại
khối lượng cân được), cho nước tiếp tục nghiền Sau đó dồn tất cả vào cốc thủytinh và đun cách thủy ở 800C trong 15 phút, thỉnh thoảng lắc đều trong khi đun,đem ra kết tủa protein bằng chì axetat Loại axetat bằng Na2HPO4 hoặc Na2SO4.Sau đó lọc qua giấy lọc và đo thể tích dịch lọc thu được Dịch này được sử dụng
để định lượng đường khử
Cho vào bình tam giác 10ml dịch lọc + 20ml hỗn hợp Fehling Đậy bìnhbằng một miếng kính và đặt trên bếp điện đun sôi nhanh và đều Đun đúng 3phút kể từ khi xuất hiện bọt đầu tiên
Trang 6 Làm lạnh, lọc qua giấy lọc Buchner với 2 lớp giấy lọc dày Chú ý giữ kếttủa lại trong bình và trên lớp oxit (ở trên giấy lọc cũng như trong bình) phải luôn
có lớp nước để Cu2O không bị oxi hóa bới oxi không khí
Đặt phễu Buchner trên bình nón có chứa kết tủa Đổ vào phễu 15ml dungdịch Fe2(SO4)3 trong H2SO4 để cho chảy từ từ xuống bình, lắc, quan sát xem kếttủa trong phễu và trong bình đã hòa tan hết chưa, nếu chưa tiếp tục thêm một ítdung dịch Fe2(SO4)3 Sau khi phản ứng kết thúc, rửa phễu bằng nước nóng chođến khi nước rửa không còn phản ứng axit trên giấy quỳ
Chuẩn độ dung dịch trong bình (Fe2+) bằng dung dịch KMnO4 cho đếnkhi xuất hiện màu hồng bền trong 30 giây
- Tính kết quả: Từ lượng KMnO4 dùng để chuẩn độ tìm ra lượng đồng Từ
lượng đồng tra bảng tìm thấy lượng đường tương ứng Từ kết quả đó tính %đường theo dung dịch:
X(mg%)a.20100a- Số mg đường nhận được
IV VIẾT BÁO CÁO
SV viết báo cáo trình bày quá trình làm thí nghiệm, kết quả thu được, tínhtoán và giải thích hiện tượng
Trang 7BÀI 2 : LIPIT (Glyceride)
Lipit là hợp chất hữu cơ có trong tế bào sống, không tan trong nước, tantrong các dung môi hữu cơ không phân cực như: clorofom, ete, xăng, benzen…Lipit được chia thành 2 nhóm chính là Lipit đơn giản và lipit phức tạp Sau đây
- Hóa chất: dầu thực vật, etanol, xăng, dung dịch xà phòng.
- Cách tiến hành thí nghiệm: đánh số thứ tự cho các ống nghiệm Lần lượt cho
vào mỗi ống 2ml nước, 2ml etanol, 2ml xăng, 2ml dung dịch xà phòng Thêmvào mỗi ống vài giọt dầu thực vật, lắc đều, quan sát hiện tượng, so sánh tính tan
và sự tạo nhũ tương của dầu thực vật trong các loại dung môi và giải thích
2 Phản ứng phân biệt các thành phần cấu tạo của mỡ
a) Phản ứng xà phòng hóa
Dưới tác dụng của kiềm, mỡ bị thủy phân tạo thành glixerin và axit béo Cácaxit béo sẽ phản ứng với xút để tạo thành xà phòng
- Hóa chất: dầu ăn, dung dịch NaOH 40% trong cồn
- Cách tiến hành thí nghiệm: cho vào cốc mỏ 50ml: 2ml dầu ăn + 10ml
dung dịch NaOH 40% trong cồn Vừa đun vừa khuấy khoảng 15 – 20phút đến khi thấy váng màu vàng nhạt Lấy đũa thủy tinh vớt một ít vángcho vào ống nghiệm, thêm nước cất, lắc mạnh thấy bọt xà phòng
b) Sự tạo thành axit béo tự do
Xà phòng là muối của axit béo Dưới tác dụng của axit vô cơ đặc, axit béođược giải phóng, không tan trong nước mà nổi trên mặt nước
- Hóa chất: Dung dịch xà phòng 2%, H2SO4 đặc hoặc HCl đặc.
- Cách tiến hành thí nghiệm: cho vào bình tam giác 20ml dung dịch xà
phòng, thêm H2SO4 đặc hoặc HCl đặc cho tới khi môi trường có pH axit(thử bằng giấy quỳ) Dung dịch trở nên đục do axit béo được giải phóng
Trang 8Đun dung dịch tới sôi axit béo sẽ nổi trên mặt nước (hoặc đun dung dịchtrong nồi cách thủy khoảng 30 phút)
3 Xác định một số chỉ số của lipit
a) Xác định chỉ số axit
- Chỉ số axit là tổng số mg KOH cần thiết để trung hòa các axit béo tự do cótrong 1g lipit Chỉ số này đánh giá độ tươi của mỡ, dầu Chỉ số này tăng theothời gian bảo quản dầu mỡ
- Cách làm: Cân chính xác 1g dầu ăn vào ống thủy tinh, thêm 10ml cồn để hòatan axit béo tự do (có thể đun hỗn hợp trên trong nồi cách thủy để hòa tan hoàntoàn axit béo tự do) Sau đó cho vài giọt phenolphtalein rồi chuẩn độ axit béo tự
do bằng KOH 0,01N cho đến khi có màu hồng nhạt
Chỉ số: XA = A.f.0,56
Trong đó: 0,56 : Số mg KOH tương ứng với 1ml KOH 0,01N
A : Số ml dung dịch KOH đã dùng
f : Hệ số hiệu chỉnh dung dịch KOH 0,01N
b) Xác định chỉ số xà phòng hóa
- Chỉ số xà phòng hóa là số mg KOH cần thiết để trung hòa axit béo tự do vàaxit béo có trong liên kết este của gliceride
- Hóa chất: Dầu ăn; dung dịch KOH 0,1N; phenolphtalein; HCl 0,1N
- Cách làm: Lấy một bình tam giác 50ml, cho vào đó 1g dầu ăn, thêm Aml KOH0,1N trong cồn Đậy bình bằng tấm kính, đun bình trên nồi cách thủy khoảng 50– 60 phút Phản ứng được xem như kết thúc khi dung dịch trong bình trở nêntrong suốt Sau khi xà phòng hóa xong, lấy bình ra làm nguội và cho thêm vàobình vài giọt phenolphtalein và chuẩn độ bằng dung dịch HCl 0,1N
- Tính kết quả: Lượng mg KOH đã dung để trung hòa tất cả các axit béo trong1g dầu đã thí nghiệm là:
X(mg) = Aa B.mTrong đó: A- Lượng KOH 0,1N ban đầu
B- Lượng HCl 0,1N đã dùng để chuẩn độm: Khối lượng KOH có trong 1ml dung dịch KOH 0,1N
Trang 9a: Khối lượng dầu lấy làm thí nghiệm (tính bằng g) (trong
TN trên a=1)
4 Định lượng Liptit bằng phương pháp Soxlet
- Nguyên liệu và hóa chất: Mẫu cần định lượng Lipit; Ete ethylic đã loại
nước và Peroxyd
- Dụng cụ: Cối xay sứ, giấy Whatman số 1, bộ Soxlet, cân, bình hút ẩm.
- Cách làm: Nguyên liệu được xấy khô đến trọng lượng không đổi ở
100-1050C Cân chính xác mg mẫu (VD m=5, có thể thêm 5-10g Na2SO4 hoặcNa2HPO4 đã được sấy khô ở nhiệt độ 100-1050C trong 6-8h) Giã nhỏ và chuyểnvào bột mẫu vào trong túi giấy Cho dung môi vào bình cầu (khoảng 1/3 thể tíchbình cầu), đặt gói nguyên liệu vào bộ phận chính trong Sexlet Lắp ống sinh hàn,sau đó đặt thiết bị vào nồi cách thủy (34-360C) cho đến khi chiết rút hết lipit rakhỏi mẫu (6-8h) Sau khi chiết rút xong, lấy gói mẫu ra sấy ở 20 -300C để loạidung môi, rồi sấy ở 100-1050C cho đến khi trọng lượng không đổi
Chú ý: Thí nghiệm phải thực hiện trong tủ hút Sau khi thí nghiệm xong, ete
dư sẽ được chưng cất thu hồi để sử dụng lần sau
- Kết quả: Lượng chất béo có trong 100g nguyên liệu tính theo công thức:
XA C B.100
A- Trọng lượng gói nguyên liệu trước khi chiết rút lipit (g)
B- Trọng lượng gói nguyên liệu sau khi chiết rút lipit (g)
C- Lượng nguyên liệu lấy ra để xác định Lipit
Trang 10Bài 3 VITAMIN
Vitamin hay còn gọi là sinh tố, bao gồm các chất hữu cơ với khối lượngphân tử thấp, có bản chất hóa học rất khác nhau, có hoạt tính sinh lý, dù với mộtlượng rất nhỏ nhưng nó đảm bảo hoạt động sống bình thường của cơ thể
Dựa vào tính tan của Vitamin có thể chia thành các nhóm: Vitamin tantrong nước, Vitamin tan trong chất béo…
Do có bản chất hóa học khác nhau nên mỗi Vitamin có phản ứng hóa họcđặc trưng, những phản ứng đó dùng để phân tích định tính và định lượngVitamin
A Vitamin hòa tan trong chất béo
1 Vitamin A (Retinol)
tạo thành sản phẩm có màu xanh tím không bền, sau đó chuyển thành sản phẩm
có mầu nâu đỏ (mầu đặc trưng của lipocrom)
- Nguyên liệu và hóa chất: Dầu cá, H2SO4 đặc, clorofom hoặc benzen hoặc
xăng
- Cách tiến hành thí nghiệm: cho vào ống nghiệm khô 2 giọt dầu cá, 2ml
benzen hoặc clorofom hoặc xăng, lắc tan, thêm một vài giọt H2SO4 đặc, lắc,quan sát hiện tượng và giải thích
b) Phản ứng của Vitamin A với FeSO4
Trong môi trường axit Vitamin A tác dụng với FeSO4 tạo thành hợp chấtmàu xanh, chuyển sang màu hồng đỏ Chất tiền Vitamin A (carotenoit) cũng chophản ứng này nhưng sản phẩm có màu xanh lục
- Nguyên liệu và hóa chất: dầu cá, H2SO4 đặc, axit axetic đặc có chứa
FeSO4 bão hòa
- Cách tiến hành thí nghiệm: Cho vào ống nghiệm vài giọt dầu cá, thêm 5
-10 giọt axit axeitc đặc chứa FeSO4 bão hòa; 1-2 giọt H2SO4 đặc, quan sátmàu và giải thích
c) Phản ứng của Vitamin A với SbCl3
Trang 11Vitamin A tác dụng với SbCl3 bão hòa trong clorofom bị mất nước tạothành sản phẩm ngưng tụ có mầu không ổn định.
- Nguyên liệu và hóa chất: dầu cá, SbCl3 bão hòa trong Clorofom không
ngậm nước
- Cách làm: Cho vào ống nghiệm khô 2 giọt dầu cá, 1ml SbCl3 bão hòa
trong Clorofom Quan sát sự biến đổi màu trong ống nghiệm, giải thíchkết quả
2 Vitamin D
a) Phản ứng của Vitamin D với anilin
Vitamin D trong môi trường axit sẽ tác dụng với anilin tạo thành hợp chất
có màu đỏ đặc trưng
- Nguyên liệu và hóa chất: dầu cá, clorofooc, anilin Chuẩn bị thuốc thử
anilin như sau: trộn anilin với HCl đặc theo tỷ lệ 15:1
- Cách làm: cho 4 giọt dầu cá vào ống nghiệm sạch, khô, cho thêm 1ml
clorofom, vài giọt anilin, lắc đều, quan sát sự tạo thành các thể nhũ cómàu trong ống nghiệm Đun sôi hỗn hợp phản ứng trong 30 giây, dungdịch sẽ chuyển thành màu đặc trưng
b) Phản ứng của Vitamin D với SbCl3
- Nguyên liệu và hóa chất: dầu cá 10% tan trong Clorofooc, dung dịch
SbCl3 21-23% trong clorofooc, anhidrit axetic (CH3CO)2O
- Cách làm: Cho vào ống nghiệm sạch khô 3 – 5ml dung dịch dầu cá, thêm
vào 8-10 giọt anhidrit axetic, lắc đều và thêm vài giọt SbCl3 Lắc đều vàquan sát sự xuất hiện màu vàng hoặc vàng da cam
Trang 12- Cách làm: Cho vào ống nghiệm vài giọt Vitamin E, sau đó thêm từ từ
8-10 giọt HNO3 đặc và lắc nhẹ ống nghiệm Sau 1-2 phút quan sát sự đổimàu
b) Phản ứng với FeCl3
Vitamin E có thể khử FeCl3 thành FeCl2 sau đó ion Fe2+ phản ứng với phenantrolin để tạo thành ion Fe(C12H8N2)32+, do đó dung dịch chuyển thành màuđỏ
o Hóa chất: Vitamin E 0,15% trong etanol tuyệt đối, FeCl3 0,2% trong
etanol, o-phenantrolin 0,5% trong etanol
- Cách làm: Cho vào ống nghiệm 1ml dung dịch Vitamin E, thêm vào 1ml
dung dịch o-phenantrolin và 1-2 giọt FeCl3, lắc quan sát màu tạo thành,giải thích kết quả
4 Vitamin K
Về mặt cấu tạo Vitamin K đều có chứa 2-metyl-1,4-naphtoquinon(metinon), vì vậy các phản ứng của Vitamin K đều dựa trên phản ứng của nhânnày
a) Phản ứng với anilin
Metinon tác dụng với anilin tạo thành naphtoquinon có màu đỏ đặc trưng Phản ứng xảy ra như sau:
Trang 132-metyl-3-phenylamino-1,4 Hóa chất: Dung dịch Vitamin K 0,1% trong etanol tuyệt đối, thuốc thử
anilin
- Cách làm: Cho vào ống nghiệm 1ml Vitamin K, thêm 6-8 giọt thuốc thử
anilin, lắc đều Quan sát màu của hỗn hợp và giải thích
b) Phản ứng với xistein
- Nguyên liệu và hóa chất: dung dịch Vitamin K 0,1%, xistein 0,03%,
NaOH 5%
- Cách làm: Cho vào ống nghiệm 1ml Vitamin K, thêm vài giọt xistein
0,03% và 5-6 giọt NaOH 5%, lắc đều Quan sát màu của dung dịch và giảithích
B CÁC VITAMIN HÒA TAN TRONG NƯỚC
1 Vitamin B 1 (Tiamin)
a) Phản ứng tạo thành tiocrom
Trong môi trường kiềm, dưới tác dụng của ferixianua K3[Fe(N)6], tiamin
bị oxi hóa thành tiocrom Hợp chất này sẽ phát huỳnh quang có màu đặc trưngdưới ánh đèn tử ngoại Phản ứng xảy ra như sau:
Trang 14- Nguyên liệu và hóa chất: Dung dịch Vitamin B1 1%, NaOH 10%,
K3[Fe(N)6] 1%, cồn izobutylic
- Cách làm: Cho vào ống nghiệm 2 ml dung dịch Vitamin B1, thêm 10 giọt
dung dịch NaOH 10% và 5 giọt K3[Fe(CN)6] 1%, để yên hỗn hợp trongống tạo thành hai lớp ngăn cách Để ống nghiệm dưới ánh sáng mặt trờihoặc dưới ánh đèn tử ngoại Quan sát sự tạo thành huỳnh quang Giảithích kết quả nhận được
b) Phản ứng với thuốc thử diazobenzensunfonic (thuốc thử diazo)
Vitamin B1 phản ứng với axit diazobenzensunfonic sẽ tạo thành hợp chất
có màu da cam hoặc màu đỏ
- Nguyên liệu và hóa chất: Dung dịch Vitamin B1 1%, thuốc thử diazo,
NaOH 10%
- Cách làm: Cho vào ống nghiệm 1ml thuốc thử diazo, thêm vài giọt dung
dịch Vitamin B11% và 5-7 giọt NaOH10%, lắc đều Quan sát màu và giảithích
2 Phản ứng của Vitamin B 2 (riboflavin)
a) Phản ứng khử
Riboflavin tồn tại ở dạng oxi hóa và dạng khử Ở dạng khử có tên là lowcoflavin không mầu, dễ bị oxi hóa thành Riboflavin