Slide thuyết trình chiết xuất và phân lập CAPSAICIN từ cây ớt

L/O/G/O CHIẾT XUẤT VÀ PHÂN LẬP CAPSAICIN TỪ CÂY ỚT LỚP ĐH DƯỢC 7B NHÓM – TIỂU NHÓM www.trungtamtinhoc.edu.vn www.themegallery.com ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT 1.1 Định danh dược liệu Tên khoa học: Capsicum frutescens (L.) Bail Họ: Cà (Solanaceae) Tên thường gọi: Ớt Tên khác: Lạt tiêu, Ớt tàu, Ớt thiên, Ớt địa www.trungtamtinhoc.edu.vn ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT 1.2 Mô tả Cây ớt thuộc loại thân thảo, mọc hàng năm nước ôn đới, sống lâu năm thân phía hóa gỗ nước nhiệt đới www.trungtamtinhoc.edu.vn ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT Cây có nhiều cành, nhẵn Lá mọc so le, mềm, hình thuôn dài, đầu nhọn, phiến dài 2-4cm, rộng 1.5-2cm www.trungtamtinhoc.edu.vn ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT • Hoa màu trắng, mọc đơn mộc kẽ lá, mùa hoa gần quanh năm nhiều vào tháng 5-6 www.trungtamtinhoc.edu.vn ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT • Quả mọc rủ xuống hay quay lên trời (chỉ thiên), hình dáng thay đổi, có thứ tròn, có thứ dài, chín có màu đỏ, vàng hay tím Trong chứa nhiều hạt dẹt trắng www.trungtamtinhoc.edu.vn ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT 1.3 Thành phần hóa học Trong ớt có 0.04 – 1.5% dẫn chất benzylamin, vị cay Trong đó: •Capsaicin C18H27NO3 (chiếm khoảng 70%) •Dihydrocapsaicin (khoảng 20%) •Nordihydro-capsaicin (7%) •Homocapsaicin homodihydrocapsaicin www.trungtamtinhoc.edu.vn ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT 1.3 Thành phần hóa học Ngoài có: •Các chất carotenoid: chất capsaithin có màu đỏ •Flavonoid •Vitamin C, tỷ lệ chừng 0.8%-1.8% ớt nước ta •Chất đường tới 7% •Ngoài có acid hữu acid citric, acid malic… www.trungtamtinhoc.edu.vn ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT 1.3 Thành phần hóa học •Capsaicin alcaloid, phần lớn tập trung biểu bì giá noãn, vị cay, gây nóng đỏ Nếu bị oxy hóa Kali bicromat Kali permanganat tính cay bị Trong tính chất cay gốc –CO-NH-CHCH2- định www.trungtamtinhoc.edu.vn ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT www.trungtamtinhoc.edu.vn PHẦN THỰC NGHIỆM 2.2.5 Quá trình tách - Lắp đầy cột xoắn với pha nằm hệ dung môi - Vận tốc quay 800 vòng/phút, tốc độ dòng 2ml/phút - Sau pha động phía trước trạng thái cân động học thiết lập cột, khoảng 6ml dung dịch mẫu chứa 150mg mẫu thô tiêm vào - Kết ghi lại detector UV bước sóng 254nm www.trungtamtinhoc.edu.vn PHẦN THỰC NGHIỆM 2.2.6 Phân tích HPLC xác định cấu trúc phân đoạn HSCCC • Từng phân đoạn sau tách HSCCC phân tích HPLC với cột Shimpack VP-ODS (250mm x 4.6mm, I.D.) bước sóng 254nm, nhiệt độ 250C Pha động, dung dịch methanol acid phosphoric (70:30,v/v), rửa giải với tốc độ dòng 0.8ml/phút Kết ghi lại dectector quang kế • Quá trình xác định phân đoạn từ HSCCC tiến hành EI-MS, sắc kí lỏng hiệu cao phổ NMR với dung môi chloroform chất chuẩn nội tetramethylsilane www.trungtamtinhoc.edu.vn PHẦN THỰC NGHIỆM 2.2.7 Kết • Từ 150mg mẫu thô hòa tan 6ml gồm pha Dung dịch mẫu tách tinh khiết hóa HSCCC • Pha phía pha tĩnh, pha nằm pha động • Độ lưu giữ pha tĩnh 65% tổng thời gian cho trình tách 4.5h Từng phân đoạn HSCCC phân tích HPLC, đo bước sóng 254nm www.trungtamtinhoc.edu.vn PHẦN THỰC NGHIỆM Sắc ký đồ HPLC trình chiết thô từ Capsicum frutescens www.trungtamtinhoc.edu.vn PHẦN THỰC NGHIỆM • Các peak 1, 2, dihydrocapsaicin, capsaicin, nordihydrocapsaicin xác định 1H NMR, 13C NMR DEPT-NMR, ESI-MS, EI-MS • Chỉ bước HSCCC, ta thu 33mg dihydrocapsaicin, 68mg capsaicin, 4mg nordihydrocapsaicin với độ tinh khiết 97.4%, 99% 94.5% www.trungtamtinhoc.edu.vn PHẦN THỰC NGHIỆM Sắc kí đồ trình chiết HSCCC • www.trungtamtinhoc.edu.vn PHẦN THỰC NGHIỆM • Điều kiện thử nghiệm: + Cột Shim-pack VP-ODS (250mm x 4.6mm,I.D) + Nhiệt độ cột: 250C + Pha động: methanol-acid phosphoric 0.1% (70:30, v/v) + Tốc độ dòng: 0.8ml/phút + Phát hiện: 254nm + Thể tích tiêm: 10µl www.trungtamtinhoc.edu.vn PHẦN THỰC NGHIỆM • Từ ớt Capsicum frutescens (L) Bail: Bằng thực nghiệm capsaicinoid chiết xuất phương pháp ngâm, Soxhlet, UAE Kết thu sau: Phương pháp Ngâm Soxhlet UAE UAE UAE Thời gian 15h 5h 3h 3h 3h Nhiệt độ (0C) 45 78.1 45 45 45 Dược liệu:dung môi 1:8 1:8 1:8 1:6 1:5 Tỷ lệ phục hồi (%) 79.4 92 87.4 84.5 84.3 Bằng sắc ký cột cổ điển, phân lập capsaicin www.trungtamtinhoc.edu.vn PHẦN THỰC NGHIỆM • Bằng HSCCC: từ 150g mẫu bột ớt thô phân lập 33mg dihydrocapsaicin, 68mg capsaicin, 4mg nordihydrocapsaicin với mức độ tinh khiết tương ứng 97.4%, 99% 94.5% www.trungtamtinhoc.edu.vn Các chế phẩm có chứa capsaicin www.trungtamtinhoc.edu.vn Các chế phẩm có chứa capsaicin www.trungtamtinhoc.edu.vn Tài liệu tham khảo Sumate Boonkird, Chada Phisalaphong, Muenduen Phisalaphong (2008),“Ultrasound-assisted extraction of capsaicinoids from Capsicum frutescens on a lab- and pilot-plantscale”, Ultrasonics Sonochemistry 15, p.1075–1079 • Santamarıa et al (2000), “Selective Enzyme-Mediated Extraction of Capsaicinoids and Carotenoids from Chili Guajillo Puya (Capsicum annuum L.) Using Ethanol as Solvent”, J.Agric.FoodChem., vol 48, p 3063−3067 • Pakit Kumboonma et al., “Isolation and structural modification of Capsaicin and Dihydrocapsaicin from Capsicum annuum sp.” www.trungtamtinhoc.edu.vn Tài liệu tham khảo F.Lietal (2009), “Preparative isolation and purification of capsaicinoids from Capsicum frutescens Using high-speed counter-current chromatography”, Separation and Purification Technology, Vol 64, p 304–308 F Nazari et al (2007), “Multivariate Optimisation of Microwave-assisted Extraction of Capsaicin from Capsicum frutescens L and Quantitative Analysis by H-NMR”, Phytochemical Analysis, vol 18, p 333–340 “Bài giảng dược liệu”, Bộ môn Dược Liệu, Trường Đại Học Y Dược Thành Phố Hồ Chí Minh Đỗ Tất Lợi (1995), “Cây thuốc vị thuốc Việt Nam”, NXB KHKT, Hà Nội Võ Văn Chi (1997), “Từ điển thuốc Việt Nam”, NXB Y học www.trungtamtinhoc.edu.vn DANH SÁCH NHÓM Lê Thạnh Phúc Nguyễn Thị Ngọc Minh Nguyễn Lý Thảo Nguyễn Tú Trinh Trần Tố Quyên Mai Trần Quế Phương Tô Minh Phong www.trungtamtinhoc.edu.vn L/O/G/O www.trungtamtinhoc.edu.vn [...]... ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT 1.4 Phân bố và sinh thái Cây ớt có nguồn gốc Nam Mĩ, bắt nguồn từ một số loài hoang dại, được thuần hóa và trồng ở Châu Âu, Ấn Độ cách đây hơn 500 năm •Tuy nhiên ở nước ta chưa phát triển lắm •Hiện nay, Ấn Độ là nước sản xuất ớt lớn nhất thế giới với khoảng 1 triệu tấn mỗi năm www.trungtamtinhoc.edu.vn 1 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT 1.4 Phân bố và sinh thái Ớt có biên độ thời vụ rộng,... bệnh nhân bị viêm khớp mạn tính và các bệnh ung thư www.trungtamtinhoc.edu.vn 1 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT • Ngoài ra, ớt còn giúp  Ngăn ngừa bệnh tim  tránh được tình trạng đông vón tiểu cầu dễ gây tai biến tim mạch  Ngăn ngừa tình trạng huyết áp tăng cao www.trungtamtinhoc.edu.vn 2 PHẦN THỰC NGHIỆM 2.1 Phương pháp 1: Chiết xuất capsaicinoid toàn phần, sau đó phân lập và tinh khiết hóa capsacin www.trungtamtinhoc.edu.vn... Đau bụng kinh niên: Rễ cây ớt, rễ chanh, rễ hoàng lực, mỗi thứ khoảng 10g Sao vàng, sắc uống ngày 1 thang - Chữa đau lưng, đau khớp: Ớt chín 15 quả, lá đu đủ 3 cái, rễ chỉ thiên 80g Tất cả đem giã nhỏ ngâm cồn với tỷ lệ 1/2, dùng để xoa bóp sẽ mau khỏi www.trungtamtinhoc.edu.vn 1 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT - Chữa mụn nhọt: Lá ớt giã nát với ít muối, dùng đắp vào nhọt đang mưng mủ sẽ bớt đau nhức, dễ vỡ mủ,... pH=5,5-7 • Chăm sóc: Tưới giữ ẩm cho cây sau khi trồng, nên bón thúc đạm vào giai đoạn quả bắt đầu phát triển • Tỉa cành: 3-4 cành/ cây, thường xuyên tỉa bỏ lá già • Tưới tiêu: tưới vào buổi trưa khi cây bắt đầu héo, đặc biệt cần tháo kiệt nước sau khi trời mưa www.trungtamtinhoc.edu.vn 1 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT 1.5 Tác dụng dược lý của ớt 1.5.1 Y học cổ truyền: Ớt có vị cay, nóng •Tác dụng khoan trung,... THỰC NGHIỆM 2.1.1.2 Chiết bằng Soxhlet www.trungtamtinhoc.edu.vn 2 PHẦN THỰC NGHIỆM • 2.1.1.2 Chiết bằng Soxhlet • Chuẩn bị dụng cụ chiết: Soxhlet dung tích 250ml www.trungtamtinhoc.edu.vn 25g dược liệu nghiền nhỏ 2 PHẦN THỰC NGHIỆM 2.1.1.2 Chiết bằng Soxhlet • Cho dược liệu đã nghiền nhỏ vào Soxhlet • Lắp dụng cụ trên bếp cách thủy • Dùng phễu rót ethanol 95% vào bình đựng dịch chiết • Kiểm tra lần... phần, sau đó phân lập và tinh khiết hóa capsacin www.trungtamtinhoc.edu.vn 2 PHẦN THỰC NGHIỆM 2.1.1 Chiết xuất capsacinoid toàn phần • Chuẩn bị: Ớt khô Dược liệu được đóng gói trong túi nhựa đã được tẩy với nitơ, và được lưu trữ ở 4 0C trước khi sử dụng www.trungtamtinhoc.edu.vn 2 PHẦN THỰC NGHIỆM 2.1.1 Chiết xuất capsacinoid toàn phần 2.1.1.1 Ngâm • 25g bột dược liệu được ngấm kiệt với 200ml ethanol 95%... (eczema): lá ớt tươi 1 nắm, mẻ chua 1 thìa Hai thứ giã nhỏ, lấy vải sạch gói lại, đắp lên nơi bị chàm đã rửa sạch bằng nước muối www.trungtamtinhoc.edu.vn 1 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT - Chữa tai biến mạch máu não: lá ớt (loại ớt chỉ thiên quả nhỏ) đem giã nhỏ, thêm nước và ít muối, chắt nước cho người bệnh uống, bã đắp vào răng sẽ tỉnh www.trungtamtinhoc.edu.vn 1 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT - Chữa rắn rết cắn: lá ớt giã... thuốc Nam thông dụng có ớt: -Chữa rụng tóc do hóa trị liệu: Ớt trái 100g, ngâm với rượu trắng trong 10-20 ngày Dùng rượu này bôi lên da đầu có tác dụng kích thích mọc tóc -Giảm đau do ung thư, đau khớp: ăn 5-10g ớt mỗi ngày www.trungtamtinhoc.edu.vn 1 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT - Chữa ăn uống kém tiêu do ung thư: ớt 100g, hắc đậu xị 100g, tán bột ăn hàng ngày - Chữa ăn uống chậm tiêu: ớt trái dùng làm gia... Chữa rắn rết cắn: lá ớt giã nhỏ, đắp vào nơi bị thương, băng lại Ngày làm 1-2 lần cho đến khi hết đau, 2-3 giờ là khỏi www.trungtamtinhoc.edu.vn 1 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT - Chữa bệnh vẩy nến: Lá ớt cay 1 nắm to (1 nắm chặt tay và đem sao chín nhưng không cháy), tinh tre đằng ngà cạo lấy 1 bát, lá sống đời (lá thuốc bỏng) 7-9 lá, thiên niên kiện khoảng 300g Tất cả cho vào nồi với 2 lít nước, đun sôi kỹ,... tiêu: ớt trái dùng làm gia vị, ăn hàng ngày - Chữa đau thắt ngực: ớt trái 2 quả, đan sâm 20g, nghệ đen 20g Sắc uống ngày 1 thang www.trungtamtinhoc.edu.vn 1 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT - Chữa đau dạ dày do lạnh: ớt trái 1-2 quả, Nghệ vàng 20g, tán bột uống ngày 2-3 lần www.trungtamtinhoc.edu.vn 1 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT - Chữa viêm khớp mãn tính: ớt trái 1-2 quả; Dây đau xương, thổ phục linh (củ khúc khắc) mỗi