Nghiên cứu kỹ thuật nhân nhanh giống cây Xạ đen (Ehretia asperula Zoll. Mor). tại trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên bằng phương pháp in vitro.

HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ THU HẰNG Tên đề tài: “NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT NHÂN NHANH GIỐNG CÂY XẠ ĐEN (Ehretia asperula Zoll & Mor.) TẠI TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÁI NGUYÊN BẰNG PHƢƠNG PHÁP IN VITRO” KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo: Chính quy Chun ngành: Cơng nghệ sinh học Khoa: CNSH - CNTP Khóa học: 2011 - 2015 Thái Nguyên - năm 2015 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ THU HẰNG Tên đề tài: “NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT NHÂN NHANH GIỐNG CÂY XẠ ĐEN (Ehretia asperula Zoll & Mor.) TẠI TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÁI NGUYÊN BẰNG PHƢƠNG PHÁP IN VITRO” KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo: Chuyên ngành: Khoa: Lớp: Khóa học: Chính quy Cơng nghệ sinh học CNSH - CNTP K43 - CNSH 2011 - 2015 Giáo viên hƣớng dẫn: PGS TS Ngơ Xn Bình Bộ Khoa học Cơng nghệ ThS Nguyễn Thị Tình Khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm Thái Nguyên - năm 2015 i LỜI CẢM ƠN Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban giám hiệu Trường Đại học Nông lâm, Ban chủ nhiệm Khoa thầy cô giáo môn tạo điều kiện giúp đỡ suốt thời gian qua Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: thầy giáo Ngơ Xn Bình giáo Nguyễn Thị Tình tận tình bảo, hướng dẫn em trình học tập thực đề tài Em xin gửi lời cảm ơn tới Ks Lã Văn Hiền giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho em suốt q trình thực đề tài Tơi xin cảm ơn bạn phịng thí nghiệm giúp đỡ tơi q trình thực đề tài Cuối cùng, em xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè hết lòng động viên, giúp đỡ tạo điều kiện vật chất tinh thần để em hồn thành đề tài Do thời gian thực đề tài có hạn nên đề tài khơng tránh khỏi sai sót Em mong nhận đóng góp ý kiến thầy bạn để đề tài em hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn ! Thái Nguyên, ngày 05 tháng 06 năm 2015 Sinh viên thực Nguyễn Thị Thu Hằng ii DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1: Các nguyên tố đa lượng dạng sử dụng .11 Bảng 3.1: Thiết bị, dụng cụ hóa chất ni cấy mơ .19 Bảng 3.2: Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng NaOCl 1% đến khả tạo vật liệu vô trùng phục vụ tái sinh in vitro Xạ đen 21 Bảng 3.3: Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng HgCl 0,1% đến khả tạo vật liệu vô trùng phục vụ tái sinh in vitro Xạ đen 22 Bảng 3.4: Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường nuôi cấy MS, ½MS, WPM, B5 đến khả tái sinh chồi Xạ đen 23 Bảng 3.5: Nghiên cứu ảnh hưởng BA đến khả nhân chồi Xạ đen .23 Bảng 3.6: Nghiên cứu ảnh hưởng BA + KIN đến khả nhân chồi 24 Bảng 3.7: Nghiên cứu ảnh hưởng BA + TDZ đến khả nhân chồi .24 Bảng 3.8: Nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ chồi Xạ đen in vitro 25 Bảng 3.9: Nghiên cứu ảnh hưởng IBA đến khả rễ chồi Xạ đen in vitro 25 Bảng 3.10: Nghiên cứu ảnh hưởng số giá thể đến khả sinh trưởng Xạ đen giai đoạn vườn ươm 26 Bảng 4.1: Ảnh hưởng thời gian khử trùng NaOCl 1% đến khả tạo vật liệu vô trùng phục vụ tái sinh in vitro Xạ đen (sau tuần nuôi cấy) 29 Bảng 4.2: Ảnh hưởng thời gian khử trùng HgCl2 0,1% đến khả tạo vật liệu vô trùng phục vụ tái sinh in vitro Xạ đen (sau tuần nuôi cấy) 30 Bảng 4.3: Ảnh hưởng ảnh hưởng môi trường MS, ½MS, WPM, B5 đến khả tái sinh chồi Xạ đen (sau tuần nuôi cấy) 31 Bảng 4.4: Ảnh hưởng BA đến khả nhân chồi Xạ đen tái sinh từ đoạn thân (sau tuần nuôi cấy) .33 Bảng 4.5: Ảnh hưởng BA + KIN đến khả nhân chồi Xạ đen tái sinh từ đoạn thân (sau tuần nuôi cấy) 34 Bảng 4.6: Ảnh hưởng BA + TDZ đến khả nhân chồi Xạ đen tái sinh từ đoạn thân (sau tuần nuôi cấy) 36 iii Bảng 4.7: Ảnh hưởng NAA đến khả rễ chồi Xạ đen in vitro (sau tuần nuôi cấy) 38 Bảng 4.8: Kết nghiên cứu ảnh hưởng IBA đến khả rễ chồi Xạ đen in vitro sau tuần nuôi cấy .39 Bảng 4.9: Ảnh hưởng số loại giá thể đến khả sinh trưởng phát triển Xạ đen giai đoạn sau nuôi cấy mơ ngồi vườn ươm (sau tuần theo dõi) 41 iv DANH MỤC HÌNH Hình 2.1: Cây Xạ đen Hình 2.2: Cây Xạ vàng Hình 2.3: Lá Xạ đen .5 Hình 2.4: Hoa Xạ đen Hình 4.1: Chồi tái sinh từ đoạn thân Xạ đen tái sinh môi trường (sau tuần nuôi cấy) 32 Hình 4.2: Chồi Xạ đen môi trường MS bổ sung nồng độ BA đến khả nhân chồi Xạ đen (sau tuần ni cấy) .34 Hình 4.3: Chồi Xạ đen môi trường MS bổ sung BA mg/l với nồng độ KIN khác (sau tuần nuôi cấy) 35 Hình 4.4: Chồi Xạ đen mơi trường MS bổ sung BA mg/l với nồng độ TDZ khác (sau tuần nuôi cấy) 36 Hình 4.5: Rễ Xạ đen mơi trường MS có bổ sung NAA nồng độ 39 Hình 4.6: Rễ Xạ đen mơi trường MS có bổ sung IBA nồng độ 40 Hình 4.7: Cây Xạ đen vườn ươm giá thể 42 v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT B5: Gamborg’s BA: 6- Benzylaminopurin Cồn: C2H5OH Cs: Cộng CT: Công thức CV: Coefficient of Variation Đ/C: Đối chứng HSN: Hệ số nhân KIN: 6- Furfuryaminopurin LSD: Least Singnificant Difference Test MS: Murashige and Skoog’s MT: Môi trường NAA: Naphlene axetic acid Nxb: Nhà xuất RE: Robert Ernst TDZ: Thidiazuron TLMC: Tỉ lệ mẫu chết TLMSKN: Tỉ lệ mẫu sống không nhiễm TLMSN: Tỉ lệ mẫu sống nhiễm WPM: Wood Plant Medium vi MỤC LỤC Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài 1.3 Yêu cầu đề tài 1.4 Ý nghĩa đề tài Phần TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu Xạ đen 2.1.1 Nguồn gốc phân loại 2.1.2 Sự phân bố Xạ đen 2.1.3 Đặc điểm hình thái Xạ đen 2.2 Giá trị Xạ đen 2.2.1 Giá trị kinh tế 2.2.2 Giá trị dược liệu .6 2.3 Khái quát nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.3.1 Cở sở nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.3.2 Một số yếu tố ảnh hưởng tới q trình ni mơ tế bào thực vật .9 2.3.3 Các giai đoạn nhân giống vơ tính in vitro .14 2.4 Tình hình nhân giống sử dụng Xạ đen 15 2.5 Tình hình nghiên cứu Xạ đen ngồi nước .16 2.5.1 Tình hình nghiên cứu Xạ đen nước .16 2.5.2 Tình hình nghiên cứu Xạ đen ngồi nước 18 Phần ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 3.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 19 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành nghiên cứu 19 3.3 Thiết bị, dụng cụ hóa chất ni cấy mơ 19 3.4 Nội dung nghiên cứu 20 3.5 Phương pháp nghiên cứu 20 vii 3.5.1 Nội dung 1: Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng ng NaClO 1% HgCl2 0,1% đến khả tạo vật liệu vô trùng phục vụ tái sinh Xạ đen 20 3.5.2 Nội dung 2: Nghiên cứu ảnh hưởng mơi trường ni cấy MS, ½MS, WPM, B5 đến khả tái sinh chồi Xạ đen 22 3.5.3 Nội dung 3: Nghiên cứu ảnh hưởng chất kích thích sinh trưởng đến khả nhân chồi từ Xạ đen 23 3.5.4 Nội dung 4: Nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ tạo hoàn chỉnh chồi Xạ đen in vitro 24 3.5.5 Nội dung 5: Nghiên cứu ảnh hưởng số giá thể đến khả sinh trưởng Xạ đen giai đoạn vườn ươm 25 3.6 Phương pháp đánh giá xử lý số liệu 26 Phần KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng hóa chất thời gian khử trùng NaOCl 1% HgCl2 1% đến khả tạo vật liệu vô trùng phục vụ tái sinh Xạ đen (sau tuần nuôi cấy) 28 4.1.1 Kết ảnh hưởng thời gian khử trùng NaOCl 1% đến khả tạo vật liệu vô trùng phục vụ tái sinh in vitro Xạ đen (sau tuần nuôi cấy) 28 4.1.2 Kết ảnh hưởng thời gian khử trùng HgCl2 0,1% đến khả tạo vật liệu vô trùng phục vụ tái sinh in vitro Xạ đen (sau tuần nuôi cấy) 29 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng mơi trường ni cấy MS, ½MS, B5, WPM, đến khả tái sinh chồi Xạ đen (sau tuần nuôi cấy) 31 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng chất kích thích sinh trưởng đến khả nhân nhanh chồi Xạ đen tái sinh từ đoạn thân (sau tuần nuôi cấy) 32 4.3.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA đến khả nhân nhanh chồi Xạ đen tái sinh từ đoạn thân (sau tuần nuôi cấy) 33 4.3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp với KIN đến khả nhân nhanh chồi Xạ đen tái sinh từ đoạn thân (sau tuần nuôi cấy) 34 4.3.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp với đến khả nhân nhanh chồi Xạ đen tái sinh từ đoạn thân (sau tuần nuôi cấy) 35 viii 4.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số Auxin đến khả rễ tạo hoàn chỉnh (sau tuần nuôi cấy) .37 4.4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ chồi Xạ đen in vitro (sau tuần nuôi cấy) .37 4.4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng IBA đến khả rễ chồi Xạ đen in vitro (sau tuần nuôi cấy) .39 4.5 Kết ảnh hưởng số loại giá thể đến khả sinh trưởng phát triển Xạ đen giai đoạn sau ni cấy mơ ngồi vườn ươm (sau tuần theo dõi) 41 Phần KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 43 5.1 Kết luận 43 5.2 Kiến nghị 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO 44 I Tiếng Việt 44 II Tiếng Anh .45 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tiếng Việt Tạ Như Thục Anh, Nguyễn Thị Bích Thu (2012), Nghiên cứu nhân nhanh Xạ đen, Tạp chí Dược liệu, tập17 (số 4) Lê Trần Bình, Hồ Hữu Nhị, Lê Thi Muội (1997), Công nghệ sinh học cải tiến giống trồng, Nxb Nông nghiệp Hà Nội Nguyễn Huy Cương, Viện Hóa học (2008), Nghiên cứu thành phần hố học thăm dị hoạt tính sinh học xạ đen (Celastrus hindsii benth & hook ) cùm rụm (Ehretia dentata courch), tạp chí Hóa học Danh mục loài thực vật Việt Nam (2005) Nguyễn Khắc Hải, Nguyễn Thị Minh Huệ, Hồng Thị Thắm, Trần Đình Mạnh, Giáo trình mơ đun trồng Xạ đen, Bộ Nông nghiệp phát triển nơng thơn Hồng Quỳnh Hoa, Bùi Hồng Quang (2007), Bước đầu nghiên cứu thực vật dược dân tộc học hai loài thuốc chi Cườm rụng (Ehretia P Br.) thuộc họ Vòi voi (Boraginaceae Juss.) Việt Nam, Báo cáo khoa học Sinh thái Tài nguyên sinh vật, Hội nghị khoa học toàn quốc lần thứ hai Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật, (Số 1) Phần Tài nguyên sinh vật-Đa dạng sinh học bảo tồn, 42-49 Hoàng Quỳnh Hoa (2010), Nghiên cứu số thuốc chi Cườm rụng (Ehretia P.Br.), họ Vòi voi (Boraginaceae) miền Bắc Việt Nam, Tạp chí dược liệu, tập 17 (số 4) Nguyễn Như Khanh, Nguyễn Văn Đính (2011), Giáo trình chất điều hòa sinh trưởng thực vật, Nxb Giáo dục Việt Nam Nguyễn Thị Vân Khanh, Triệu Duy Điệt, Nguyễn Văn Minh, Vũ Bình Dương, Nguyễn Tuấn Quang, Lương Quang Anh, Phạm Quốc Long (2007), Kết ban đầu nghiên cứu cấu trúc hoá học chất phân lập từ xạ đen (Ehretia asperula Zoll & Mor.), Tuyển tập cơng trình hội nghị khoa học cơng nghệ hố học hữu tồn quốc lần thứ tư, Hà nội 45 10 Trần Thị Lệ, Trương Thị Bích Phượng, Trần Thị Triêu Hà (2008), Giáo trình Công nghệ sinh học Thực vật, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 11 Nguyễn Kim Thanh, Nguyễn Thuận Châu (2005), Giáo trình sinh lý học thực vật, Nxb Giáo dục, Hà Nội, 12 Trịnh Thị Thủy, Nguyễn Huy Cương, Phạm Thị Ninh, Trần Văn Sung (2008) Phân lập xác định cấu trúc hợp chất tritecpen từ xây xạ đen, Viện Hóa học, Viện Khoa Học Việt Nam 13 Lê Thế Trung cs (1999), Nghiên cứu Xạ đen hiệu điều trị ung thư, học viện Quân y 103 14 Nguyễn Văn Thuận (2014), Đánh giá vi nhân giống Ehretia asperula Zoll & Mor, Đại học Quốc gia thành phố Hồ Chí Minh 15 Trung tâm liệu Thực vật Việt Nam 16 Đỗ Năng Vịnh (2002), Công nghệ sinh học trồng, Nxb Nông nghiệp Hà Nội 17 Vũ Văn Vụ, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Hồng Điệp (2008), Công nghệ sinh học, Nxb Giáo dục 18 Vũ Văn Vụ, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Hồng Điệp (2009), Công nghệ sinh học tập 2-Công nghệ sinh học tế bào, Nxb Giáo dục II Tiếng Anh 19 Avula B, Sagi S, Wang YH1, Zweigenbaum J2, Wang M1, Khan IA3 Characterization and screening of pyrrolizidine alkaloids and N-oxides from botanicals and dietary supplements using UHPLC-high resolution mass spectrometry, Food Chem 2015 Jul 1;178:136-48 doi: 10.1016/j foodchem.2015.01.053 Epub 2015 Jan 14 20 Chien-Chang SHEN, Chieh-Fu CHEN, Yang-Chang WU, and Yao-Haur KUO, A Novel Agarofuran Sesquiterpene, Celahin D from Celastrus hindsii BENTH Hui-Chi HUANG, 21 Faviszia Freitas de Oliveira,1 Michael S Engel,2 and Thiago Mahlmann, A new Chlerogelloides from northeastern Brazil and French Guiana, with a key to the species (Hymenoptera, Halictidae), Zookeys (2012), (185): 41-53 46 22 Ning, Li, Fu Wu Chun, Yue Xu Xin, Yang Liu Zhen, Li Xian, and Qing Zhao Yu, Triterpenes possessing an unprecedented skeleton isolated from hydrolyzate of total saponins from Gynostemma pentaphyllum, European Journal of Medical chemistry, (2012), (50), pages 173-178 23 Yao-Haur Kuo, Li-Ming Yang Kuo (1997), Phytochemisty, 1275-1281 Phụ lục 1: Môi trƣờng Table 1: Preparation of modified Murashige & Skoog’s MS medium Bottle I II III Component NH4NO3 KNO3 MgSO4 7H2O MnSO4 4H2O ZnSO4 7H2O CuSO4 5H2O CaCl2.2H2O KI CoCl2.6H2O IV KH2PO4 H3BO3 Na2MoO4.2H2O V FeSO4 7H2O Na2EDTA 2H2O Stock Solution (g/l) 82,5 95 37,0 2,23 1,058 0,0025 44,0 0,083 0,0025 17,0 0,62 0,025 2,784 3,724 Amount to take preparation (ml) 20 10 10 Final concentratic (mg/ l) 1.650,0 1.900,0 370,0 22,3 10,6 0,025 440,0 0,83 0,025 10 170,0 6,2 0,25 10 27,85 37,25 0,5 2,0 0,1 0,5 0,5 2,0 0,1 0,5 mg/100ml Vitamin Nicotinic acid Glycine ThiamineHCl PyridoxineHCl 100 100 100 100 Inositol 100,0 Sucrose 30.000,0 Agar 6.000,0 pH 5,8 Table 2: Preparation of modified Gamborg’s B5 medium (E-24medium ) Bottle Component Stock Solution (g/l) Amount to take preparation (ml) Final concentratic (mg/ l) KNO3 250 20 2500,0 (NH4)2SO4 13,4 10 134,0 MgSO4.7H2O 15,0 NaH2PO4.H2O 15 10 150,0 MnSO4.H2O 1,0 10 10,0 H3BO3 0,3 3,0 ZnSO4.7H2O 0,2 2,0 KI 0,075 10 0,75 Na2MoO4.2H2O 0,025 10 0,25 CuSO4.5H2O 0,0025 0,025 CoCl2.6H2O 0,0025 0,025 FeSO4.7H2O 2,785 Na2EDTA 3,725 37,25 CaCl2.2H2O 15,0 150,0 10 Inositol 27,85 160 mg/100ml Vitamins Nicotinic acid 100 1,0 Thiamine HCL 100 10 10,0 Pyridoxine HCL 100 1,0 Sucrose 8000,0 Agar 6000,0 pH 5,6 - 5,8 Table 3: Preparation of modified Wood Plant medium NH4NO3 Final Concentratic (mg/ l) 400 Ca(NO3)2.4H2O 556 Component CaCl2.2H2O 96 Component H3BO3 ZnSO4.7H2O FeSO4 7H2O Final concentratic (mg/ l) 6,2 8,6 27,8 370 Na2EDTA 2H2O 37,2 K2SO4 990 MgSO4 4H2O 22,3 KH2PO4 170 CuSO4.5H2O 0,25 Na2MoO4.2H2O 0,25 MgSO4 7H2O mg/100ml Myo-inositol Thiamine HCL Pyridoxine HCL 100 Glycine 2,0 1,0 Nicotinic acid 0,5 0,5 Agar 6,0 Sucrose 20 pH 5,6 - 5,8 Phụ lục 2: Kết xử lý số liệu Thí nghiệm 1: Kết ảnh hƣởng thời gian khử trùng NaClO 1% đến khả tạo vật liệu vô trùng tái sinh in vitro BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE A1 20/ 5/** 6:10 PAGE VARIATE V003 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 11106.7 2776.67 208.25 0.000 * RESIDUAL 10 133.336 13.3336 * TOTAL (CORRECTED) 14 11240.0 802.857 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMN FILE A1 20/ 5/** 6:10 PAGE VARIATE V004 TLMN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 17106.7 4276.67 641.49 0.000 * RESIDUAL 10 66.6676 6.66676 * TOTAL (CORRECTED) 14 17173.3 1226.67 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMC FILE A1 20/ 5/** 6:10 PAGE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 1066.67 266.667 40.00 0.000 * RESIDUAL 10 66.6667 6.66667 * TOTAL (CORRECTED) 14 1133.33 80.9524 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE A1 20/ 5/** 6:10 PAGE MEANS FOR EFFECT CTHUC$ -CTHUC$ NOS TLMS TLMN TLMC 0.000000 100.000 0.000000 40.0000 60.0000 0.000000 3 53.3333 46.6667 0.000000 76.6667 10.0000 13.3333 70.0000 10.0000 20.0000 SE(N= 3) 2.10820 1.49072 1.49071 5%LSD 10DF 6.64302 4.69732 4.69729 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE A1 20/ 5/** 6:10 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ | (N= 15) SD/MEAN | | NO BASED ON BASED ON % | | OBS TOTAL SS RESID SS | | TLMS 15 48.000 28.335 3.6515 7.6 0.0000 TLMN 15 45.333 35.024 2.5820 5.7 0.0000 TLMC 15 6.6667 8.9974 2.5820 38.7 0.0000 Thí nghiệm 2: Kết ảnh hƣởng thời gian khử trùng HgCl2 0,1% đến khả tạo vật liệu vô trùng tái sinh in vitro BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE ANGHETN1 17/ 5/** 3:19 PAGE VARIATE V003 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 12360.0 3090.00 231.75 0.000 * RESIDUAL 10 133.334 13.3334 * TOTAL (CORRECTED) 14 12493.3 892.381 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMN FILE ANGHETN1 17/ 5/** 3:19 PAGE VARIATE V004 TLMN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 16840.0 4210.00 315.75 0.000 * RESIDUAL 10 133.333 13.3333 * TOTAL (CORRECTED) 14 16973.3 1212.38 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMC FILE ANGHETN1 17/ 5/** 3:19 PAGE VARIATE V005 TLMC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 826.667 206.667 15.50 0.000 * RESIDUAL 10 133.333 13.3333 * TOTAL (CORRECTED) 14 960.000 68.5714 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE ANGHETN1 17/ 5/** 3:19 PAGE MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS TLMS TLMN TLMC 0.000000 100.000 0.000000 40.0000 56.6667 3.33333 3 53.3333 46.6667 0.000000 83.3333 10.0000 6.66667 70.0000 10.0000 20.0000 SE(N= 3) 2.10819 2.10818 2.10819 5%LSD 10DF 6.64299 6.64296 6.64297 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE ANGHETN1 17/ 5/** 3:19 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLMS TLMN TLMC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 49.333 15 44.667 15 6.0000 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 29.873 3.6515 7.4 0.0000 34.819 3.6515 8.2 0.0000 8.2808 3.6515 60.9 0.0003 | | | | Thí nghiệm 3: Kết nghiên cứu ảnh hƣởng mơi trƣờng ni cấy MS, ½MS, WPM, B5 đến khả tái sinh chồi Xạ đen BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTS FILE MTTS 20/ 5/** 6:36 PAGE Anh huong cua moi truong den kha nang tai sinh doan than cay Xa den VARIATE V003 TLTS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 3933.33 1311.11 78.67 0.000 * RESIDUAL 133.333 16.6667 * TOTAL (CORRECTED) 11 4066.67 369.697 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MTTS 20/ 5/** 6:36 PAGE Anh huong cua moi truong den kha nang tai sinh doan than cay Xa den MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 TLTS 100.000 83.3333 73.3333 50.0000 SE(N= 3) 2.35702 5%LSD 8DF 7.68601 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MTTS 20/ 5/** 6:36 PAGE Anh huong cua moi truong den kha nang tai sinh doan than cay Xa den F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLTS GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 76.667 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 19.228 4.0825 5.3 0.0000 | | | | Thí nghiệm 4: Kết nghiên cứu ảnh hƣởng BA đến khả nhân chồi Xạ đen từ đoạn thân tái sinh BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE ANHANBA 20/ 5/** 15:28 PAGE Anh huong cua BA den kha nang nhan choi Xa den VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 8.23333 2.05833 110.27 0.000 * RESIDUAL 10 186666 186666E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 8.42000 601429 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE ANHANBA 20/ 5/** 15:28 PAGE Anh huong cua BA den kha nang nhan choi Xa den MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 HSN 1.00000 2.03333 2.56667 2.76667 3.13333 SE(N= 3) 0.788810E-01 5%LSD 10DF 0.248557 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE ANHANBA 20/ 5/** 15:28 PAGE Anh huong cua BA den kha nang nhan choi Xa den F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 2.3000 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.77552 0.13663 5.9 0.0000 | | | | Thí nghiệm 5: Kết nghiên cứu ảnh hƣởng BA kết hợp với Kinetin đến khả nhân chồi Xạ đen từ đoạn thân tái sinh BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE NHANBA 9/ 3/** 0:40 PAGE Anh huong cua BA ket hop voi Kinetin den kha nang nhan choi VARIATE V003 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 1.15067 287667 8.14 0.004 * RESIDUAL 10 353333 353333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.50400 107429 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NHANBA 9/ 3/** 0:40 PAGE Anh huong cua BA ket hop voi Kinetin den kha nang nhan choi MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS HSNC 3.06667 2.90000 3 3.60000 3.03333 2.80000 SE(N= 3) 0.108525 5%LSD 10DF 0.341968 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NHANBA 9/ 3/** 0:40 PAGE Anh huong cua BA ket hop voi Kinetin den kha nang nhan choi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE OBS HSNC GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ (N= 15) SD/MEAN | NO BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | | 15 3.0800 0.32776 0.18797 6.1 0.0037 | | | Thí nghiệm 6: Kết nghiên cứu ảnh hƣởng BA kết hợp với TDZ đến khả nhân chồi Xạ đen từ đoạn thân tái sinh BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE ATDZ 3/ 6/** 5:11 PAGE Anh huong cua to hop BA + TDZ den kha nang nhan choi VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 2.11333 528333 13.90 0.001 * RESIDUAL 10 380000 380000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.49333 178095 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE ATDZ 3/ 6/** 5:11 PAGE Anh huong cua to hop BA + TDZ den kha nang nhan choi MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 HSN 3.06667 3.23333 4.00000 3.03333 3.00000 SE(N= 3) 0.112546 5%LSD 10DF 0.354637 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE ATDZ 3/ 6/** 5:11 PAGE Anh huong cua to hop BA + TDZ den kha nang nhan choi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.2667 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.42201 0.19494 6.0 0.0005 | | | | Thí nghiệm 7: Kết nghiên cứu ảnh hƣởng NAA đến khả rễ tạo hoàn chỉnh chồi Xạ đen in vitro BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLRR FILE RRNAA 20/ 5/** 16:18 PAGE Anh huong cua NAA den kha nang re cuachoi XD in vitro VARIATE V003 TLRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 1026.67 256.667 9.62 0.002 * RESIDUAL 10 266.667 26.6667 * TOTAL (CORRECTED) 14 1293.33 92.3810 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SORE FILE RRNAA 20/ 5/** 16:18 PAGE Anh huong cua NAA den kha nang re cuachoi XD in vitro VARIATE V004 SORE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 9.30933 2.32733 105.79 0.000 * RESIDUAL 10 220001 220001E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 9.52933 680667 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RRNAA 20/ 5/** 16:18 PAGE Anh huong cua NAA den kha nang re cuachoi XD in vitro MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 TLRR 73.3333 93.3333 83.3333 76.6667 70.0000 SORE 0.766667 3.20000 1.80000 1.73333 1.53333 SE(N= 3) 2.98142 0.856350E-01 5%LSD 10DF 9.39458 0.269839 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RRNAA 20/ 5/** 16:18 PAGE Anh huong cua NAA den kha nang re cuachoi XD in vitro F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLRR SORE GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 79.333 15 1.8067 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 9.6115 5.1640 6.5 0.0020 0.82503 0.14832 8.2 0.0000 | | | | Thí nghiệm 8: Kết nghiên cứu ảnh hƣởng IBA đến khả rễ tạo hoàn chỉnh chồi Xạ đen in vitro BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLRR FILE RRIBA 20/ 5/** 16:29 PAGE Anh huong cua IBA den kha nang re choi Xa den in vitro VARIATE V003 TLRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 3693.33 923.333 46.17 0.000 * RESIDUAL 10 200.001 20.0001 * TOTAL (CORRECTED) 14 3893.33 278.095 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SORE FILE RRIBA 20/ 5/** 16:29 PAGE Anh huong cua IBA den kha nang re choi Xa den in vitro VARIATE V004 SORE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 20.8107 5.20267 159.26 0.000 * RESIDUAL 10 326669 326669E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 21.1373 1.50981 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RRIBA 20/ 5/** 16:29 PAGE Anh huong cua IBA den kha nang re choi Xa den in vitro MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS TLRR SORE 76.6667 1.53333 100.000 4.50000 3 86.6667 3.03333 70.0000 1.83333 53.3333 1.36667 SE(N= 3) 2.58199 0.104350 5%LSD 10DF 8.13595 0.328811 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RRIBA 20/ 5/** 16:29 PAGE Anh huong cua IBA den kha nang re choi Xa den in vitro F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLRR SORE GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 77.333 15 2.4533 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 16.676 4.4721 5.8 0.0000 1.2287 0.18074 7.4 0.0000 | | | | Thí nghiệm 9: Kết nghiên cứu ảnh hƣởng số giá thể đến khả sinh trƣởng phát triển cây Xạ đen giai đoạn sau nuôi cấy mô vƣờn ƣơm BALANCED ANOVA FOR VARIATE SONG FILE RâCY 20/ 5/** 17: PAGE VARIATE V003 SONG LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 333.333 111.111 6.67 0.015 * RESIDUAL 133.333 16.6667 * TOTAL (CORRECTED) 11 466.667 42.4242 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHET FILE RâCY 20/ 5/** 17: PAGE VARIATE V004 CHET SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CTHUC$ 333.333 111.111 6.67 0.015 * RESIDUAL 133.333 16.6667 * TOTAL (CORRECTED) 11 466.667 42.4242 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RâCY 20/ 5/** 17: PAGE MEANS FOR EFFECT CTHUC$ CTHUC$ NOS 3 3 SONG 80.0000 76.6667 86.6667 90.0000 CHET 20.0000 23.3333 13.3333 10.0000 SE(N= 3) 2.35702 2.35702 5%LSD 8DF 7.68601 7.68601 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RâCY 20/ 5/** 17: PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SONG CHET GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 83.333 12 16.667 STANDARD DEVIATION C OF V |CTHUC$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 6.5134 4.0825 4.9 0.0148 6.5134 4.0825 24.5 0.0148 | | | |