Xác định tỉ lệ nhiễm vi rút viêm gan B (HBsAg) và viêm gan C (Anti HCV) trong huyết thanh người tại một xã vùng đồng bằng Bắc Bộ Việt Nam năm 2011

Xác định tỉ lệ nhiễm vi rút viêm gan B (HBsAg) viêm gan C (Anti HCV) huyết người xã vùng đồng Bắc Bộ Việt Nam năm 2011 Ngô Thị Quỳnh Trang Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Khoa Sinh học Luận văn ThS Chuyên ngành: Vi sinh vật học; Mã số:60 42 40 Người hướng dẫn: TS.BS Nguyễn Văn Tiến Năm bảo vệ: 2012 Abstract: Hệ thống hóa vấn đề cần nghiên cứu: đặc điểm sinh học vi rút viêm gan B viêm gan C; Bệnh học viêm gan B viêm gan C; Dịch tễ học vi rút viêm gan B, C Xác định tỉ lệ người mang HBsAg(+) anti HCV(+) xã vùng đồng Bắc Bộ Việt Nam số yếu tố liên quan Tìm hiểu đặc điểm dân cư, nghề nghiệp nhận thức học sinh trung học sở (THCS) viêm gan B viêm gan C Keywords: Vi sinh vật học; Virus viêm gan B; Virus viêm gan C; Đồng Bắc Bộ; Bệnh Content Theo thống kê ta ước tính 1/3 dân số giới bị nhiễm vi rút viêm gan B( HBV) với khoảng 350 triệu người mang HBsAg mạn tính triệu người chết năm HBV Có khoảng 5-20% dân số Châu Á Châu Phi mang HBsAg mạn khoảng 30% người mang HBsAg mạn tính trở thành viêm gan mạn ung thư gan [109] Người mang HBsAg mạn tính Việt Nam khoảng 12-20 Viêm gan C (HCV) trở thành mối quan tâm xã hội Tổ chức y tế giới (WHO) cho biết đến tháng 3/2011 có 170 triệu người toàn cầu 3-4 triệu người nhiễm bệnh năm[61], [81] Tại Việt Nam, theo thống kê chưa đầy đủ Bộ Y tế, tình trạng nhiễm vi rút C báo động tính đến có triệu người mắc bệnh nguy hiểm này, tỷ lệ tử vong chiếm gần 6% Nguy hiểm có 85% trường hợp nhiễm HCV diễn biến thành viêm gan C mạn số bệnh nhân có tới khoảng 20-25% chuyển qua giai đoạn xơ gan, ung thư gan [64], [95], [102] Với tính cấp bách đặt vấn đề nghiên cứu:” xác định tỉ lệ nhiễm vi rút viêm gan B(HBsAg) viêm gan C(Anti HCV) huyết người xã vùng Đồng Bằng Bắc Bộ Việt Nam năm 2011’’ với mục tiêu đề tài: Xác định tỉ lệ người mang HBsAg(+) anti HCV(+) xã vùng đồng Bắc Bộ Việt Nam số yếu tố liên quan Tìm hiểu đặc điểm dân cư, nghề nghiệp nhận thức học sinh trung học sở ( THCS ) viêm gan B viêm gan C Chƣơng I - TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đặc điểm sinh học vi rút viêm gan B viêm gan C: 1.1.1 Lịch sử phát vi rút viêm gan B viêm gan C: 1.1.1.1 Lịch sử phát vi rút viêm gan B: Năm 1964 Baruch Blumberg mô tả loại kháng nguyên (KN) đặc trưng thổ dân châu Đại Dương gọi “KN Australia”.Đến năm 1968, phát thấy máu bệnh nhân viêm gan B mãn tính có tiểu thể hình cầu hình sợi, đường kính 27nm không chứa ADN Đó KN bề mặt HBsAg ( hepatitis B surface antigen) Hai tiểu thể HBV(Hepatitis B virus) hoàn chỉnh thiếu genom Năm 1970, người ta phát thấy máu bệnh nhân viêm gan B hình cầu, đường kính 42nm, bên chứa ADN kép gọi tiểu thể Dane Sau xác định tiểu thể Dane HBV thực sự[47] 1.1.1.2 Lịch sử phát vi rút viêm gan C: Vào năm 1970 Harvay J Alter chứng minh nhiễm virus sau truyền máu phần lớn virus viêm gan A B đặt tên virus không A không B 17 năm sau Michael Houghton, qui-lim Choo tập đoàn, Gorge K dùng sinh học phân tử định clon để định tính virus không A không B Năm 1989 xác định vi rút không A không B có tên thức viêm gan virus C công bố báo Science.[36] 1.1.2 Hình thái cấu trúc vi rút viêm gan B viêm gan C: 1.1.2.1 Hình thái HBV HCV  Hình thái HBV: Dưới kính hiển vi điện tử người ta thấy có tiểu thể khác vi rút: -Tiểu thể hình cầu nhỏ -Tiểu thể hình ống( hình que) -Tiểu thể hình cầu lớn Hình thái HCV: HCV loại vi rút hướng gan kính hiển vi điện tử người ta phát HCV có hình cầu, đa diện hình que, kích thước nhỏ 55-65nm 1.1.2.2 Cấu trúc HBV HCV:  Cấu trúc HBV: Genom HBV ADN có cấu trúc mạch kép không hoàn toàn, kích thước 3200 bazo cấu tạo sợi có chiều dài không Chuỗi dài nằm có tính cực âm, tạo nên vòng tròn liên tục có chiều dài cố định 3,2 Kb mã hóa cho thông tin di truyền virus Chuỗi ngắn nằm có cực tính dương thay đổi 5080% chiều dài sợi âm HBV có cấu trúc đặc biệt nhỏ gọn có genom chồng lớp gồm khung đọc mở S, C, P X  Cấu trúc HCV: HCV có genome vòng ARN(+) có khung đọc mở (ORF) Hệ gen HCV có vùng: Vùng cấu trúc nằm đầu 5’ phần không mã hóa, gồm gen: C, E1, E2, P7 Vùng không cấu trúc: nằm đầu 3’ phần không mã hóa có ge NS2, NS3, NS4, NS5 gen mã hóa cho protein chức :protease, RNA-polymerase tham gia trình chép virut cắt đọan polyprotein peptit 1.1.3 Quá trình nhân lên HBV HCV: 1.1.3.1 Quá trình nhân lên HBV: Trước tiên HBV gắn đặc hiệu vào thụ thể dành cho IAg nằm bề mặt tế bào gan Sau cởi vỏ capsid, ADN kép với sợi không chui vào nhân để chuyển hóa thành dạng ADN kép khép vòng, siêu xoắn (cccADN) Dạng dùng làm khuôn để tổng hợp loại ARN 3,5; 2,4; 2,1 0,7 kb ARNm 3,5kb gọi ARN tiền genom dùng để tổng hợp genome ARN tiền genom đóng gói với ADN- polymerase virus protein kinase để tạo thành hạt lõi Ở đây, tiền genome dùng làm khuôn để tổng hợp chuỗi ADN (-) (sợi L) theo chế chép ngược Polymerase HBV phân giải ARN tiền genom để lại đoạn nhỏ( 29 cặp bazo đầu 5’) dùng làm mồi tổng hợp ADN (+) khuôn ADN tiếp thành phần vi rút lắp ráp hoàn chỉnh nảy chồi để lặp lại chu trình nhân lên tế bào gan khác 1.1.3.2 Quá trình nhân lên HCV: Bước đầu HCV xâm nhập vào tế bào Protein E2 có lực mạnh với CD81, có thêm đồng tiếp nhận lớp B typ1 SR-B1 CLDN1 Bước HCV giải phóng sợi ARN(+) có chứa IRES, IRES gắn trực tiếp vào tiểu phần 40s ribosom đơn vị độc lập với yếu tố tiền khởi động cần thiết cho trình dịch mã Bước 3: Sự xâm nhập ergoplasme đa protein tự cắt đoạn để sinh protein cấu trúc C, E1, E2 protein không cấu trúc NS, đặc biệt tạo sợi ARN (-) làm khuôn để HCV sinh trưởng tạo lại ARN (+) Bước 4: Là bước đóng gói xuất Sau tổng hợp thành phần HCV đóng gói xuất khỏi tế bào gan 1.1.4 Dấu ấn miễn dịch HBV HCV: 1.1.4.1 Dấu ấn miễn dịch HBV: - Kháng nguyên bề mặt VRVGB ( HBsAg) - Kháng thể kháng HBs (Anti-HBs) - Kháng nguyên lõi vi-rút viêm gan B (HBcAg) - Kháng thể kháng HBc (Anti-HBc) - Kháng nguyên HBe (HBeAg) - Kháng thể kháng HBe (Anti-HBe) - HBV DNA: 1.1.4.2 Các dấu ấn HCV: Hiện người ta chưa tìm kháng nguyên HCV huyết người dấu ấn vi rút viêm gan C huyết người thường sử dụng anti HCV, Sự có mặt anti HCV huyết người chứng tỏ người nhiễm vi rút viêm gan C Ngoài dấu ấn anti HCV ARN- HCV dấu ấn chứng tỏ vi rút giai đoạn nhân lên 1.2 Bệnh học viêm gan B viêm gan C: 1.2.1 Triệu chứng bệnh viêm gan B viêm gan C: 1.2.1.1 Triệu chứng bệnh viêm gan B: Viêm gan B bệnh có tần suất mắc tử vong cao Viêm gan B chia làm nhiều loại: cấp tính, mãn tính hay thể kéo dài [19], [28],[35] Tuy dạng có đặc trưng riêng, có chung số triệu chứng sau: Người bị viêm gan vi rút B cấp, thường bị sốt nhẹ ngày đầu bệnh Bệnh nhân có cảm giác người mệt mỏi, rối loạn tiêu hoá ,nước tiểu vàng Có nhiều bệnh nhân bị viêm gan B triệu chứng mà có hai triệu chứng mệt mỏi tiểu vàng Một số bệnh nhân có biểu đau tức vùng gan 1.2.1.2 Triệu chứng bệnh viêm gan C: Viêm gan C cấp tính Ðau ốm bị cúm Sình bụng Buồn nôn Mệt mỏi (nhẹ đến nặng) Đau vùng bụng Nôn mửa Ăn không ngon (biếng ăn) Sốt Đổ mồ hôi vào đêm Tiêu chảy Vàng da Khó tiêu Nhức bắp thịt, khớp Nhức đầu Viêm gan C mạn tính Mệt mỏi (nhẹ đến nặng) "Brain fog" (Rối trí) Tâm thần bất thường Ăn không ngon (biếng ăn) Buồn nôn Khó tiêu Nhức bắp thịt, khớp Đau vùng bụng Sốt Nhức đầu Trầm cảm Giai đoạn cuối viêm gan C với tình trạng xơ gan Mệt mỏi (nhẹ đến nặng) Sốt Buồn nôn Ăn không ngon (biếng ăn) Nôn mửa Tiểu nhiều Vàng da Khó tiêu Nhức đầu Nhức bắp thịt, khớp Đau vùng bụng Sình bụng Trầm cảm Tâm thần bất thường Nhận thức chậm chạp Không tập trung Rối loạn tinh thần Chóng mặt 1.2.2 Chẩn đoán bệnh viêm gan B viêm gan C Có nhiều kỹ thuật giúp phát vi rút viêm gan B viêm gan C như: Kỹ thuật test nhanh HBsAg an ti HCV: Kỹ thuật ELISA: Kỹ thuật Sequencing: 1.2.3.Vắc xin tiêm phòng: Vắc xin tiêm phòng viêm gan B: Hiện có vắc xin tiêm phòng vi rút viêm gan B mà chưa có vắc xin tiêm phòng vi rút viêm gan C: Thuốc chủng ngừa Viêm gan siêu vi B thật cho phép sử dụng vào năm 1981 Hoa Kỳ Thế hệ 1: Có nguồn gốc từ huyết tương Thế hệ 2: Vacxin sản xuất thông qua DNA tái tổ hợp từ Saccharomyces cerevisiae tế bào động vật Thế hệ 3: Được cải tiến từ hệ thứ Sử dụng chủng vi sinh vật khác có hiệu 1.3 Dịch tễ học vi rút viêm gan B, C: 1.3.1 Tình hình nhiễm vi rút viêm gan B, C giới: 1.3.1.1 Tình hình nhiễm vi rút viêm gan B giới: Nhìn chung tình hình nhiễm HBV thay đổi vùng địa lí phổ biến nước giới, có xu hướng gia tăng Tuy nhiên tỉ lệ nhiễm bệnh người dân nước khác tùy thuộc vào điều kiện kinh tế vệ sinh môi trường Trên giới có tỷ người nhiễm vi rút viêm gan B có 350 triệu người nhiễm HBV mạn tính, ¾ số người Châu Á, 25% người nhiễm HBV mạn chuyển biến thành viêm gan mạn, xơ gan, ung thư gan nguyên phát [123] Trong viêm gan B yếu tố nguy cao truyền máu, tiêm chích, quan hệ tình dục, quan hệ nghề nghiệp…Tỷ lệ HBsAg người cao gấp 10 lần so với quần thể dân cư nói chung khả trở thành người mang vi rút tiếp sau tăng đáng kể đáp ững miễn dịch bị suy giảm Ở Trung Quốc, Senegal, Thái Lan, Đài Loan, tỉ lệ nhiễm HBV cao trẻ nhỏ thời kì thơ ấu với tỷ lệ HBsAg (+) đến 25% [88], [124] * Các vùng dịch tễ HBV giới: -Vùng lưu hành dịch cao: Là vùng có tỉ lệ người mang HBsAg (+) > 8% : Châu Á, Châu Phi hầu Trung Đông, vùng lưu vực sông Amazon -Vùng lưu hành trung bình: Là vùng có tỉ lệ người mang HBsAg (+) từ 2-7: Ấn Độ, phần Trung Đông, Nhật Bản, Đông Âu hầu Nam Mỹ, Trung Mỹ -Vùng lưu hành dịch thấp: Là vùng có tỉ lệ người mang HBsAg (+)