CÁC XÉT NGHIỆM ĐÁNH GIÁ ĐÔNG – CẦM MÁU

CÁC XÉT NGHIỆM ĐÁNH GIÁ ĐÔNG – CẦM MÁU Đánh giá CMBĐ có yếu tố thành mạch + Cồn 70o: tgian cồn bay hơi lâu  làm giãn mạch  máu chảy nhiều hơn  tgian máu chảy kéo dài + Ete: độc, mùi g

CÁC XÉT NGHIỆM ĐÁNH GIÁ ĐÔNG – CẦM MÁU

Đánh giá CMBĐ có yếu tố thành mạch +) Cồn 70o: tgian cồn bay hơi lâu  làm giãn mạch  máu chảy nhiều hơn  tgian máu chảy kéo dài

+) Ete: độc, mùi ghê, làm co mạch  tgian máu chảy rút ngắn +) Cồn 90o: cồn bay hơi nhanh, ko ảnh hưởng mạch máu xung quanh vị trí chọc

Bước 2: Dùng kim chích tạo 1 vết thương ( sâu 2mm, dài 5mm) Bước 3: Sau khi rạch bấm đồng hồ bấm giây

Cứ 30s hứng giọt máu 1 lần đến khi máu ngừng chảy thì dừng lại Tính kết quả tại mốc khảo sát

4 Kết quả

Thường vết giọt máu đầu tiên có đường kính 5 – 10 mm Vết giọt 2,3 lớn hơn, sau đó nhỏ và nhạt dần

+) Bình thường: 1-4p +) Kéo dài: > 6p

+) Nghi ngờ: 4 – 6p  khi đó làm lại với tai đối diện hoặc dùng phương

pháp Ivy: tạo vết thương mặt trước cẳng tay duy trì với áp suất P=40mmHg, đo

thời gian từ lúc tạo vết thương đến lúc máu ngừng chảy

2 Thời gian máu

đông trên lam

hồ bấm giây

Bước 4: Dùng bông khô lau bỏ giọt máu đầu, nhỏ lên 2 lam kính, đậy đĩa

petri Lau bỏ giọt máu đầu là lau bỏ mô tổn thương và do chọc lần 1 TC ra nhiều nhất  lau đi lấy giọt máu tiếp theo thì khảo sát đều hơn như trong

cơ thể

Bước 5: Đợi đến 3p (để máu ổn định nhiệt độ) thì bắt đầu khảo sát

+) Lam 1: nghiêng 45o ( để khởi động các yếu tố đông máu) Cứ 30s khảo sát 1 lần đến khi xuất hiện sợi fibrin (dùng kim chích kều được màng) thì tiếp tục khảo sát lam 2

+) Lam 2: làm giống lam 1 và đến khi xuất hiện sợi fibrin thì bấm đồng

hồ dừng lại

4 Kết quả

Lấy thời gian đông của lam 2 do:

Lam 1: khảo sát từ đầu nhiều lần tác động đến nó, lam 2: ta giữ nguyên trong qáu trình khảo sát nên quá trình ĐM giống như trong cơ thể

+) bình thường: 5-10p +) kéo dài: > 15p +) nghi ngờ: 10-15p  khi đó làm lại bằng phương pháp Howell hoặc APTT

2 Mục đích ý nghĩa

Khảo sát quá trình đông máu nội sinh

3 Qui trình Bước 1: Đánh dấu 2 ống nghiệm Bước 2: Lấy 2 – 3 ml máu TM  bấm đồng hồ bấm giấy  tháo kim

phân phối đều 2 ống ( 1 – 1,5ml/ ống)  nhét bông mỡ đặt vào nồi cách thủy

Bước 3: Đợi đến 3p (để máu ổn định nhiệt độ) thì bắt đầu khảo sát

+) Ống 1: nghiêng 45o ( để khởi động các yếu tố đông máu) Cứ 30s khảo sát 1 lần đến khi nghiêng 90o mà máu không chảy ra nữa thì thì tiếp tục khảo sát ống 2

+) Ống 2: làm giống ống 1 và đến khi nghiêng 90o mà máu không chảy

thì bấm đồng hồ dừng lại

4 Kết quả

+) bình thường: 5-12p +) kéo dài: > 15p + nghi ngờ : 12 -15p làm lại với XN Howell hoặc APTT

5 Nhận xét

- Thời gian máu đông trên lam chịu nhiều ảnh hưởng bởi yếu tố bên ngoài: nhiệt

độ, lượng máu ít không đều, bụi, gió,…

- Thời gian máu đông ống nghiệm có nhiều ưu điểu hơn máu đông trên lam:

+) thực hiện ở 370C gần với nhiệt độ cơ thể +) ít chịu tác động của yếu tố môi trường xung quanh +) chia máu bằng bơm tiêm nên lượng máu đồng đều

- Tuy nhiên, nhược điểm của XN máu đông nói chung là đều dùng máu toàn phần, chịu ảnh hưởng của các TP hữu hình  Chỉ cần 1 bất thường cũng có thể làm thời gian máu đông kéo dài nhưng ta lại không biết được là bất thường ở yếu

tố và giai đoạn nào

4

Thời gian Howell

( thời gian hồi

phục Canxi)

1 Nguyên lý

Máu toàn phần được chống đông bằng Natricitrat 3.8% được ly tâm lấy huyết tương giàu tiểu cầu thêm 1 lượng Canxi tối ưu để khởi động ĐM nội sinh Đo thời gian từ khi thêm canci đến khi huyết tương đông chặt thành khối

Bước 2: Phân phối 0,2ml huyết tương vào mỗi ống rồi đem BP và hóa chất

vào nồi cách thủy để ổn định nhiệt độ

Bước 3: Khảo sát từng ống

+) Ống 1: thêm 0,2ml CaCl2 và bấm đồng hồ bấm giây  lắc tới 9s  đặt vào nồi cách thủy đến 1p thì khảo sát  1p30 nghiêng quan sát nếu chưa đông thì để xuống và cứ 15s nghiêng 45o quan sát đến khi huyết tương đông chặt thành khối thì bấm đồng hồ dừng lại

+) Ống 2: tương tự ống 1

Cách pha CaCl 2 M/40: đem pha 100g CaCl 2 với 1000ml nước cất được CaCl 2

0,1M  đem pha với nước cất tỷ lệ 1: 3  bảo quản lạnh ở 3-8 o C

4 Kết quả

Howell = ống 1+ống 2

2

+) bình thường: 1p30s – 2p30s +) > 60s so với chứng là kéo dài

+) Thời gian Howell có thể dùng để theo dõi điều trị Heparin

5 Biện luận

Thời gian Howell kéo dài khi:

+) thiếu hụt yếu tố đông máu: yếu tố tiếp xúc, VIII, IX, X +) thiếu hụt số lượng và/hoặc chất lượng tiểu cầu

+) bệnh nhân đang điều trị heparin hoặc uống thuốc Aspirin +) bệnh nhân Hemophili A/B, bệnh lupus ban đỏ, bệnh lý gan,…

2 Mục đích-Ý nghĩa

APTT khảo sát đông máu nội sinh, giai đoạn hoạt hóa yếu tố XXa XN APTT không phụ thuộc vào yếu tố 3 – phospholipid tiểu cầu nên đây là XN tối ưu khảo sát đông máu nội sinh

APTT phụ thuộc các yếu tố: yếu tố VIII, IX

3 Qui trình Bước 1: Đánh dấu 2 ống nghiệm Bước 2: Phân phối 0,1 ml huyết tương vào 2 ống nghiệm Bước 3: Đặt hóa chất và BP vào nồi cách thủy để ôn định nhiệt độ Bước 4: Khảo sát từng ống

+) Ống 1: thêm 0,1ml thuốc thử aPTT vào lắc, ủ 3 – 5p ( trong khi ủ thì thỉnh thoảng lắc để Kaolin phân bố đều trong hỗn dịch vì nó rất dễ bị lắng xuống đáy ống nghiệm ) thêm 0,1ml CaCl2 M/40 đồng thời bấm đồng hồ  lắc tới 9s nhấc lên qun sát khi nào xuất hiện màng đông thì bấm đồng hồ dừng lại

+) Ống 2: tương tự ống 1

4 Kết quả

APTT kéo dài khi :

+) Bệnh hemophili thiếu hụt yếu tố VIII, IX +) Có chất kháng đông : điều trị heparin, mảnh FDP, kháng đông lupus +) bệnh gan, bệnh hội chứng thận hư,…

nồi cách thủy để ổn định nhiệt độ

Bước 3: Khảo sát từng ống

+) Ống 1: thêm 0,2ml hóa chất đồng thời bấm đồng hồ bấm giây  lắc tới 9s rồi đưa lên quan sát khi nào xuất hiện màng đông thì bấm đồng hồ dừng lại

+) Ống 2: tương tự ống 1

 Sản xuất Thromboplastin từ óc thỏ:

 Chặt đầu thỏ 1 phát đứt đầu , dùng cưa cưa ngang não tách xương để lấy phần sọ

 Cho óc thỏ vào NaCl 0,9% bóc hết phần mạch máu, đổ nước đi

 Cho aceton nồng độ cao vào thì lipid sẽ nổi lên và chắt đi ( làm như vậy đến khi nào cho aceton vào mà không còn lipid nổi lên thì dừng lại)

 Dùng cối sứ giã nghiền phần óc thỏ sau khi loại bỏ lipid

 Pha 50mg óc thỏ + 1ml NaCl 0,9%  khuấy tan trong nồi cách thủy 30p

 XN PT phụ thuộc nhiều vào hóa chất thromboplastin

Do có nhiều hãng sản xuất khác nhau và sản xuất từ nhiều nguồn khác nhau (óc thỏ, phổi, óc lợn,…) Vì vậy WHO đưa ra chỉ số INR đòi hỏi các NSX đưa chỉ

số ISI để có 1 quy chuẩn nhất định

 Trên lâm sàng, INR dùng để theo dõi điều trị thuốc chống đông kháng VTM

K (coumarin) và BN đang dùng van tim nhân tạo Để an toàn người ta duy trì INR = 2-4 Nếu < 2 nguy cơ huyết khối và > 4 nguy cơ chảy máu

5 Biện luận

PT kéo dài khi:

 Thiếu hụt yếu tố đông máu ngoại sinh: II, V, VII, X

 Thiếu VTM K hoặc dùng thuốc kháng VTM K theo đường uống

cục đông

2 Mục đích-Ý nghĩa

XN khảo sát con đường đông máu chung, đánh giá giai đoạn đầu chuyển FibrinogenFibrin hòa tan (chưa có sự tham gia của yếu

tố XIII-ổn định sợi huyết)

TT phụ thuộc : nồng độ Fibrinogen trong máu , chất lượng Thrombin

3 Qui trình Bước 1: Đánh dấu 2 ống nghiệm Bước 2: Hút 0,1ml huyết tương + 0,1 ml NaCl 0,9% vào mỗi ống  đem

BP và hóa chất vào nồi cách thủy để ổn định nhiệt độ

Bước 3: Khảo sát từng ống

+) Ống 1: thêm 0,1ml Thrombin đồng thời bấm đồng hồ bấm giây  lắc tới 9s rồi đưa lên quan sát khi nào xuất hiện cục đông thì bấm đồng hồ dừng lại

+) Ống 2: tương tự ống 1

Sản xuất Thrombin từ dạng bột: pha thrombin 1 đơn vị ( thrombin bột +

hóa chất pha)  pha loãng thành 0,2 (1: 3) – 0,25 (1:4) đơn vị

TT kéo dài khi:

 Thiếu hụt yếu tố đông máu chung: I, XIII , bất thường fibrinogen

Tạo 1 áp lực lên mạch máu ngăn cản dòng máu chảy về, các mạch máu nhỏ yếu

sẽ vỡ làm hồng cầu thoát ra ngoài tạo nên các nốt xuất huyết dưới da Đếm các nốt xuất huyết để đánh giá sức bền thành mạch

cho nồi cách thủy  sau 2-4h đem quan sát

 Bình thường: cục máu co hoàn toàn

+) tạo cục máu tách biệt rõ ràng và nổi lên trên Phần trên cục máu dính vào thành ống

+) phần huyết thanh còn lại chiếm 50 – 65% thể tích ban đầu Có ít cặn

HC lắng xuống đáy ông nghiệm, lớp này cao < 5mm

 Bất thường

 Cục máu co không hoàn toàn: khối máu hầu như bám dính hoàn

toàn vào thành ống, không co hoặc co rất ít, phần huyết thanh còn lại ít (<40%) và còn HC tự do

 Cục máu không co: huyết tương vàng không tạo riêng phần huyết

thanh ở trên và cặn HC lắng xuống đáy

 Cục máu bị nát: Hầu hết HC tự do trong huyết thanh

 Huyết tương đông trước và co cục huyết tương

5 Biện luận

 Giảm SL và CL TC, xuất hiện kháng thể kháng TC

 Thiếu hụt fibrinogen , bệnh gan

 Thiếu hụt yếu tố XIII ( tạo sợi fibrin không tan)

 Tăng thể tích khối HC (Ht): đa hồng cầu ( Khối HC quá lớn  sợi fibrin

không thể ôm hết)

 Điều trị Haparin

Máu đông 5 – 12’ ko có hóa chất Máu toàn phần

Howell 1’30 – 2’30 Ca2+ Huyết tương giàu TC

PTT 70 – 82s Cefalin, Ca2+ Huyết tương nghèo TC

aPTT 30 – 40s Cefalin, Kaolin, Ca2+ Huyết tương nghèo TC

1 Chỉ định làm xét nghiệm đông máu:

 Mục đích làm xét nghiệm đông máu:

+) Kiểm tra xem hệ thống đông-cầm máu bình thường hay bất thường

+) Nếu bất thường thì xảy ra ở giai đoạn hay yếu tố nào, mức độ bất thường ra sao

 Do đó XN đông máu thường được chỉ định trong các trường hợp sau:

 Chỉ định xét nghiệm nhằm sàng lọc, phát hiện nguy cơ chảy máu trước can thiệp-phẫu thuật

Đây là các XN đông máu cơ bản gồm: APTT, PT, TT, SLTC

 Chỉ định khi bệnh nhân có triệu chứng lâm sàng, tiền sử gợi ý rối loạn đông cầm máu

 Chỉ định khi bệnh nhân điều trị thuốc chống đông

- Thuốc chống ngưng tập tiểu cầu: XN thời gian máu chảy, đo độ ngưng tập tiểu cầu

- Thuốc kháng VTM K: XN PT và điều chỉnh bằng chỉ số INR

- Điều trị bằng heparin: XN APTT hoặc Howell

2 Những lưu ý khi lấy bệnh phẩm làm xét nghiệm cầm máu – đông máu

Trước khi lấy máu cần nắm được tiền sử gia đình, tiền sử bản thân bệnh nhân về chảy máu, hỏi xem hiện tại hay gần đây nhất bệnh nhân có dùng thuốc như Heparin, Aspirin, Wafarin,… ảnh hưởng đến hệ thống đông máu hay không?

 BN không được ăn chất béo trong 12 giờ trươc khi lấy máu nhằm hạn chế sai số do huyết tương đục

 Trừ trường hợp cấp cứu, bệnh nhân phải được nghỉ ngơi 10-15 phút trước khi lấy máu vì mọi vận động đều làm tăng nồng độ yếu tố đông máu Phụ nữ đang hành kinh thì tránh làm các xét nghiệm đông máu

 - Tiền sử bệnh tật:

+ Tiền sử chảy máu: Xuất huyết dưới da, chảy máu chân răng kéo dài (đặc biệt sau nhổ răng), chảy máu mũi, đái máu, đi ngoài phân đen, sưng cơ, khớp, kinh nguyệt kéo dài…, tiền sử chảy máu kéo dài sau mổ, sau đẻ…

+ Các bệnh cấp và mạn tính khác: sốt xuất huyết, viêm gan, xơ gan, mổ thay van tim, suy dinh dưỡng, suy thận…

- Tiền sử dùng thuốc: Trong vòng 2 tuần có dùng Aspirin hoặc thuốc chống viêm giảm đau không steroid, thuốc chống đông: wafarin, heparin, streptokinase, urokinase…

- Tiền sử gia đình: Có ai bị xuất huyết, chảy máu kéo dài không?

Tốt nhất là lấy máu tĩnh mạch, chỉ lấy máu động mạch-mao mạch khi không thể lấy máu tĩnh mạch

 Lấy máu đảm bảo hạn chế tối đa việc khởi động con đường đông máu:

+) ĐM nội sinh: dùng bơm tiêm nhựa hoặc tráng silicon +) ĐM ngoại sinh: dùng kim sắc cỡ 21, chọc đúng tĩnh mạch, không chọc vào vết thương nơi tụ máu, vết chọc trước

 Máu lấy ra cho vào ống chống đông Natricitrat 3.8% đúng đến vạch 2 ml (1,8ml máu + 0,2 ml Natri citrate), trộn đều, không lắc ngang tránh tan máu

+) Nếu lấy lượng máu nhiều hơn thì sẽ làm máu bị đông ( thường đông giây) do lượng chống động mặc định 0,2ml

+) Nếu lấy máu ít hơn thì làm dư lượng Na  khi làm XN (phục hồi Ca) thì lượng Na dư sẽ ức chế một phần lượng Ca2+ cho vào ( mà lượng Ca cho vào là cố định 0,1ml)  giảm nồng độ Ca2+  thời gian đông kéo dài hơn

Các xét nghiệm được tiến hành trong 4 giờ kể từ khi lấy máu, vì một số yếu tố đông máu bị giảm nếu

để lâu (I, V, VIII, XIII), nếu không làm ngay thì bảo quản ống máu ở 40C, với huyết tương giàu tiểu cầu

là 22oC

Các mẫu bệnh cần được tiến hành cùng mẫu chứng trong cùng điều kiện, cùng kỹ thuật, cùng do 1 người làm

Mẫu chứng là hỗn hợp huyết tương trộn của nhiều người khỏe mạnh, tốt nhất 15 người, ít nhất 5 người

3 Một số bệnh lý đông máu thường gặp

 BỆNH HEMOPHILIA

- Hemophilia là bệnh di truyền do gen lặn trên NST giới tính X Bệnh biểu hiện ở nam giới mang gen bệnh (XaY) và nữ giới thể đồng hợp (XaXa) (TH này khó sống đến tuổi trưởng thành)

- Bệnh do thiếu hụt yếu tố VIII (Hemophilia A), yếu tố IX (Hemophilia B), yếu tố XI (Hemophilia C) Trong

đó hay gặp nhất là Hemophili A (80 - 85%) và Hemophili B (15 – 25%)

- Đặc trưng lâm sàng của bệnh:

1 Khởi phát lúc 1-5 tuổi – lúc tập đi và có va chạm

2 Xuất huyết kéo dài , hay gặp nhất là tụ máu ở cơ-khớp, nơi chịu áp lực lớn

3 Tái phát nhiều lần gây teo cơ cứng khớp, dẫn đến tàn phế suốt đời

- Phân độ bệnh Hemophilia dựa vào nồng độ yếu tố VIII, IX: Nồng độ yếu tố VIII, IX bình thường 0,5 – 2 U/ml ~ 50-200%

 Thể nặng < 1% ~ < 0.01 U/ml: chảy máu tự nhiên, thường xảy ra ở trẻ tập đi và có va chạm, ở trẻ mới đẻ (TH chảy máu cuống rốn) – tỷ lệ: 60%

 Thể vừa 1-5 % ~ 0.01 – 0,05 U/ml : số ít chảy máu tự nhiên, đa số liên quan đến chấn thương nhỏ như đứt tay,… - tỷ lệ: 30 – 40%

 Thể nhẹ 5-30 % ~ 0.05 – 0,3 U/ml: chỉ chảy máu sau chấn thương hoặc phẫu thuật, nhổ răng –

tỷ lệ: 10 – 20%

 Phụ nữ mang gen bệnh, biểu hẹn nhẹ 20-50% ~ 0,2 – 0,5 U/ml: biểu hiện bệnh nhẹ

- XN :

o Thời gian máu chảy, SLTC bình thường

o Thời gian máu đông, Howell, aPTT kéo dài

o Thời gian PT, TT bình thường

o Định lượng yếu tố VIII, IX < 30% (tiêu chuẩn vàng)

 RỐI LOẠN ĐÔNG MÁU MẮC PHẢI

a Thiếu vitamin K

- Cơ chế bệnh sinh: VTM K là yếu tố cần thiết cho sự tổng hợp của các yếu tố II, VII, IX, X, Protein C

và S Thiếu vitamin K làm các yếu tố trên không được tổng hợp hoàn chỉnh gây ra rối loạn đông máu

- Nguyên nhân:

 Cung cấp thiếu: chế độ ăn không đủ chất, BN được chăm sóc kém,…

 Rối loạn hấp thu: suy gan, viêm gan tắc mật, tắc ruột

Dịch mật đc gan tạo ra có vai trò nhũ tương hóa lipid tạo điều kiện cho các VTM tan trong dầu (A, D, E, K) được hấp thu Suy gan (giảm chức phận tạo mật), viêm gan tắc mật, tắc ruột (mật không xuống được khúc II tá tràng)  Giảm lượng mật tham gia tiêu hóa  giảm lượng vitamin K được hấp thu

 Giảm tổng hợp: do điều trị kháng sinh kéo dài  tiêu diệt một số vi khuẩn đường ruột có khả năng tổng hợp vitamin K

 Bệnh xuất huyết ở trẻ em: trẻ sơ sinh khả năng tạo mật của gan và hệ vi sinh vật đường ruột chưa hoàn thiện đầy đủ  nếu chế độ ăn thiếu vitamin K có thể xuất huyết nặng

- XN:

o Thời gian PT kéo dài, TT bình thường

o Giảm các yếu tố II, VII, IX, X

o Thời gian PTT bình thường (giảm nhẹ) hoặc kéo dài(giảm nặng)

 Gan là nơi tổng hợp hầu hết các yếu tố ĐM và tiếu sợi huyết  bệnh gan làm gan giảm tổng hợp  RLĐM

 Gan là nơi thanh lọc các yếu tố ĐM đã hoạt hóa  hạn chế sự đông máu lan tràn Bệnh gan làm chức năng gan suy giảm hôi chứng đông máu rải rác trong lòng mạch

- XN:

o SLTC giảm < 100 G/L, Thời gian máu chảy kéo dài

o Thời gian aPTT, PT, TT kéo dài

o Các yếu tố ĐM giảm, fibrinogen <1g/L (bt: 2-4 g/L)

c Thiếu yếu tố ĐM do các chất ức chế đông máu

- Do dùng thuốc : Aspirin, Heparin, Wafarin, …

+) Heparin: làm biến đối cấu trúc IIa và Xa  hình thành phức hợp IIa – Xa – ATII – Heparin  mất tác dụng yếu tố IIa, Xa, đồng thời gia tăng hđ của các yếu tố ức chế ĐM sinh lý AT III, HC II  ức chế hđ của IIa +) Aspirin: ức chế men clo – oxygenase  ngăn cản hình thành Throboxan A2 là yếu tố giải phóng ra TC giúp thu hút các TC khác đến ngưng tập hình thành nút TC  ức chế ngưng tập TC

+)Wafarin – dẫn xuất của Coumarin: thuốc này kháng vitamin K  ức chế vitamin K  ức chế tổng hợp các yếu tố phụ thuộc vitamin K

- Chất chống đông Luput ( bệnh Luput ban đỏ)

 Là bệnh tự miễn do cơ thể tự sinh ra kháng thể chống lại các cơ quan cú chính mình

 Cơ chế: bệnh Luput sinh ra các kháng thể IgM, IgG  làm tủa yếu tố photpholipid  ức chế hoạt hóa yếu tố X, II và không hình thành phức hệ prothrombinase  RLĐM

 XN:

+) SLTC giảm, máu chảy kéo dài

+) aPTT, PT, TT kéo dài

+) XN huyết thanh giang mai : BW (+) giả

d Truyền máu dự trữ khối lượng lớn

- Các yếu tố tiểu cầu, I, V, VIII, XIII bị giảm dần trong máu lưu trữ Truyền máu dự trữ lâu ngày dẫn đến các yếu tố trên giảm và gây thiếu hụt khi truyền vào cho bệnh nhân  Biến chứng chảy máu cấp sẽ xảy ra sau truyền máu

- Sau truyền máu thường giảm tiểu cầu, các yếu tố đông máu bị pha loãng, tiêu thụ, mất Do đo khi truyền máu

> 10 đơn vị, có biểu hiện suy giảm cầm máu thì cần phải truyền máu tươi

 HỘI CHỨNG ĐÔNG MÁU RẢI RÁC LÒNG MẠCH (DIC)

-DIC là bệnh lý đông máu tiêu thụ, đặc trưng bởi sự hoạt hóa quá mức các yếu tố đông máu tạo ra nhiều cục huyết khối nhỏ rải rác trong lòng mạch Sự tăng hoạt hóa quá trình đông máu, cùng với tăng quá trình tiêu sợi

huyết dẫn đến tiêu thụ quá mức các yếu tố đông máu và tiểu cầu Hậu quả đông máu gồm huyết khối và chảy

máu

-Các xét nghiệm tiến hành chẩn đoán:

1 CMBĐ: đếm số lượng tiểu cầu giảm + thời gian máu chảy kéo dài > 6p + định lượng Fibrinogen giảm < 1g/l

2 ĐMCB: APTT-PT-TT kéo dài

3 Định lượng yếu tố V,VIII,XIII, AT III, Protein C/S  giảm nặng

4 Tiêu sợi huyết: nghiệm pháp Ethanol (+), thời gian tiêu Euglobulin < 30p, định lượng D-dimer và FDPs tăng

4 Nguyên lý của các máy xét nghiệm đông máu

a Nguyên lý định giờ

 Kỹ thuật điện từ

Hỗn hợp thuốc thử và mẫu được lắc trộn nhờ 1 viên bi từ hoặc 1 thanh nam châm Khi sợi Fibrin hình tạo 1 dòng điện nhỏ giữ 2 điện cực làm ngừng đồng hồ đo giờ Việc phát hiện cục đông dựa vào 1 trong 3 nguyên tắc sau:

+) Sự chuyển động của viên bi từ dừng lại khi cục đông hình thành

+) Một màng nhựa dao động sẽ ngừng dao động khi cục đông hình hình thành

+) Thay đổi điện trở giữ 1 cực cố định và 1 cực di động khi có xuất hiện sợi Fibrin làm ngưng đồng hồ tính giờ

 Kỹ thuật quang học

Dựa vào nguyên tắc tán xạ-phản xạ-hấp thụ ánh sang khi có sự chuyển FibrinogenFibrin:

Ánh sang đơn sắc đi qua hỗn hợp phản ứng, sự truyền ánh sang bị giảm khi có cục đông hình thành Bộ phận cảm quang ghi nhận, phân tích để xác định điểm cuối phản ứng đông máu Đồng hồ tính từ lúc thêm thuốc thử tới lúc xác định được điểm cuối phản ứng đông máu thì ngừng

405 nm theo thời gian, MĐQ tỷ lệ với hoạt độ yếu tố cần định lượng Đối với định lượng chất ức chế protease thì thay đổi MĐQ tỷ lệ nghịch với hoạt độ của nó trong huyết tương

5 Cơ chế các chất chống đông trong phòng XN

 Ống Natricitrat 3.8% ( màu xanh lá cây)

+) Natricitrat tạo phức có hồi phục với Ca2+ , làm giảm Ca2+ trong máu Ca2+ là yếu tố cần thiết cho sự hoạt hóa của yếu tố : VII , X , V , II các yếu tố này không được hoạt hóaĐM bị ức chế

+) Natricitrat phù hợp cho các XN ĐM , vì nó chỉ ức chế tạm thời quá trình đông máu , khi cho lượng tối ưu

Ca2+ vào thì Ca2+ sẽ phục hồi, quá trình lại diễn ra bình thường và XN tốc độ máu lắng

+) Không dùng xét nghiệm hóa sinh vì:

 Giảm giả tạo Ca2+, tăng giả tạo Na+

 Ức chế ALP, ALT

 Thay đổi kết quả định lượng phosphate

 Ống EDTA (màu xanh da trời)

+) EDTA là 1 loại hợp chất hữu cơ, có tương tác gọng kìm gắp mất Ca2+ trong máu làm ảnh hưởng tới

cả con đường nội sinh và ngoại sinh

+) Dùng cho XN tế bào máu vì nó giữ ổn định hình dạng TB do giữ nồng độ dd ở đẳng trương

+) Ko dùng XN hóa sinh vì nó ảnh hưởng đến kết quả điện giải đồ: tăng K+, Na+ có trong TPcủa EDTA

và giảm giả tạo Ca2+, Fe do tạo phức với chúng

 Ống heparin (màu đen)

+) Heparin tác động chủ yếu lên con đường ĐM nội sinh : tác động lên yếu tố thrombin (IIa) và yếu tố Xa làm biến đổi cấu trúc yếu tố IIa ,Xa  tạo phức Xa-AT III-IIa-heparin Mất tác dụng yếu tố IIa , Xa Phức hợp sinh ra giữa Heparin-AT III còn gia tốc hoạt động cho các yếu tố ức chế ĐM sinh lý và tăng phân hủy thrombin (Tác động của AT III tăng gấp 2000-3000 lần khi có mặt heparin)

+) Thường dùng cho XN hóa sinh

+) Không dùng cho XN tế bào máu vì nó làm thay đổi hình dạng TB máu do muối liti – heparin và không dùng

cho XN đông máu vì nó gây ức chế đông máu

6 Các yếu tố tham gia CMBĐ, ĐM, TSH

Cấu tạo bởi các sợi collagen, đóng vai trò như

là “lớp diện tích gây đông” hoạt hóa tiểu cầu + yếu tố tiếp xúc khi thành mạch tổn thương

1 Nghiệm pháp dây thắt

2 Xét nghiệm tiểu cầu:

SL, CL và kháng thể kháng TC

3 Xét nghiệm thời gian

co cục máu

4 Định lượng yếu tố Willebrand và Fibrinogen

5 Xét nghiệm thời gian máu chảy

2 Tiểu cầu

 Cấu tạo:

+) Màng TC (glucoprotein) : lớp photpholipd kép và hệ thống kênh mở

+) NSC: hạt đặc ( ADP, Ca2+, serotonin) , hạt α(Ca2+, Willebrand, fibrinogen,

thrombosthenin – 1 loại pr giúp TC có thể co lại được)

 Chức năng:

+) Tham gia quá trình CMBĐ : nhờ khả năng dính, ngưng tập, giải phóng các hạt bên trong tiểu cầu

+) Tham gia quá trình co cục máu nhờ protein thombobosthenin, hình thành sợi fibrin làm cục máu co được

+) Tham gia đông máu nhờ yếu tố III của tiểu cầu, cần thiết cho sự hoạt hóa các yếu tố phụ thuộc VTM K: II, VII, IX, X

+) Bảo vệ thành mạch Yếu tố tăng trưởng PDGF bên trong tiểu cầu giúp làm non hóa TB nội mạch, củng cố lớp nội mạch

3 Yếu tố đông máu huyết tương

1 Von Willebrand Willebrand được sản xuất bởi tế bào nội mạch

nó như chất keo sinh học gắn tiểu cầu với collagen cửa lớp dưới nội mạch Trong máu Willebrand kết hợp với yếu tố VIII để ổn định

và bảo vệ yếu tố VIII do nó dễ bị hủy

2 Fibrinogen Được sản xuất tại gan, tham gia củng cố nút tiểu cầu nhờ hình thành sợi Fibrin không tan bao quanh nút tiểu cầu