Báo cáo thực hành môn Vi sinh y học

MỤC LỤCA.KỸ THUẬT KHÁNG SINH ĐỒ3I.Phương pháp Kirby Bauer:3II.Phương pháp MIC:5B.QUY TRÌNH ĐỊNH DANH CẦU KHUẨN GRAM DƯƠNG7I.Thử Catalase:7II.Thử Coagulase:8III.Thử nghiệm kháng Novobiocin:9IV.Xác định kiểu tiêu huyết:10V.Thử nghiệm Bile esculin:10VI.Thử Bactrim:11VII.Thử nghiệm dung nạp NaCl 6.5%12C.KỸ THUẬT ĐỊNH DANH PHẨY KHUẨN TẢ VIBRIO CHOLERAE13I.Khảo sát kính hiển vi13II.Cấy phân lập trên môi trường MC và TCBS14III.Thử nghiệm sinh hóa161.Thử nghiệm Oxidase162.Thử nghiệm KIA173.Thử nghiệm IMViC174.Thử nghiệm Urea215.Thử nghiệm khả năng lên men các loại đường Mannitol, Succrose226.Thử nghiệm khả năng di động25D.KỸ THUẬT ĐỊNH DANH TRỰC KHUẨN MỦ XANH (PSEUSOMONAS AERUGINOSA)27I.Đặc tính hình thể và nhuộm:27II.Đặc tính nuôi cấy:27III.Đặc tính sinh hóa và định danh:281.Thử nghiệm KIA:282.Thử nghiệm sinh hóa trên bộ Kit IDS 14 GNR:303.Thử nghiệm trên bộ Kit.314.Thử nghiệm MOB:325.Thử nghiệm LDC:33E.KỸ THUẬT ĐỊNH DANH VI KHUẨN THƯƠNG HÀN SALMONELLA TYPHI35I. Khảo sát trực tiếp:35II.Cấy phân lập:36III.Thử nghiệm sinh hóa:38IV.Tiến hành định danh bằng bộ kit IDS 14 GNR:40 PHA MÔI TRƯỜNG: Pha 100ml môi trường MHA Cách pha: Cân 2,2g Muller histon brot cho vào 100ml nước cất.Lắc đều, sau đó bổ sung thêm 2g agar vào, đun trên lò viba đến khi tan agar và phòng thí nghiệm tiến hành hấp khử trùng ở nhiệt độ 1210C20phút.A.KỸ THUẬT KHÁNG SINH ĐỒI.Phương pháp Kirby Bauer:Dụng cụ:Đĩa môi trường MHA.Dịch vi khuẩn thử nghiệm: Staphylococcus aureus (12.108CFUml).Nước muối 0,85%Tăm bông vô trùng để trải dịch khuẩn.Đĩa kháng sinh: Az: Azithromycin; Ge: Gentamocin; Ak: Amikacin; Bt : Trimethoprime; Ci: Ciprofloxacin; Nv: Novobiocin.Ống Mc Farland 0,5. Cách tiến hành:Pha dịch khuẩn thử nghiệm (Staphylococcus aureus) trong NaCl 0.85%, so với ống đục chuẩn 0,5Mac Farland.Tiến hành votex. Điều chỉnh độ đục của ống nước muối chứa vi khuẩn tương đương với ống 0,5 Mc Farland.Dùng tăm bông vô trùng trải dịch khuẩn lên mặt thạch MHA:Dùng tăm bông vô khuẩn nhúng vào dịch vi khuẩn rồi lấy lên ép và xoay nhẹ tăm bông trên thành ống nghiệm, trải đầy vi khuẩn từ tăm bông lên mặt thạch MHA.Đặt các đĩa kháng sinh lên mặt thạch đã trải vi khuẩn (3đĩa kháng sinh đĩa môi trường),sau đó ủ 370C1824h.Giải thích: Khi tiến hành thí nghiệm pha loãng mẫu đúng nồng độ yêu cầu, mặt thạch MHA khô , đĩa kháng sinh được đưa về nhiệt độ phòng trước khi làm thí nghiệm => chỉ có một vòng vô khuẩn rõ ràng.Tuy nhiên, trang mẫu chưa đẹp và khi thực hiện thao tác vẫn bị nhiễm vi sinh vật khác, nhưng không ảnh hưởng đến vòng vô khuẩn.Từ kết quả thử kháng sinh đồ trên ta thấy Staphylococcus aureus nhạy với tất cả các loại kháng sinh thử nghiệm.

MỤC LỤC

A KỸ THUẬT KHÁNG SINH ĐỒ 3

I Phương pháp Kirby Bauer: 3

II Phương pháp MIC: 5

B QUY TRÌNH ĐỊNH DANH CẦU KHUẨN GRAM DƯƠNG 7

I Thử Catalase: 7

II Thử Coagulase: 8

III Thử nghiệm kháng Novobiocin: 9

IV Xác định kiểu tiêu huyết: 10

V Thử nghiệm Bile esculin: 10

VI Thử Bactrim: 11

VII Thử nghiệm dung nạp NaCl 6.5% 12

C. KỸ THUẬT ĐỊNH DANH PHẨY KHUẨN TẢ VIBRIO CHOLERAE 13

I Khảo sát kính hiển vi 13

II Cấy phân lập trên môi trường MC và TCBS 14

III Thử nghiệm sinh hóa 16

1 Thử nghiệm Oxidase 16

2 Thử nghiệm KIA 17

3 Thử nghiệm IMViC 17

4 Thử nghiệm Urea 21

5 Thử nghiệm khả năng lên men các loại đường Mannitol, Succrose 22

6 Thử nghiệm khả năng di động 25

D KỸ THUẬT ĐỊNH DANH TRỰC KHUẨN MỦ XANH (PSEUSOMONAS AERUGINOSA) 27

I Đặc tính hình thể và nhuộm: 27

II Đặc tính nuôi cấy: 27

III Đặc tính sinh hóa và định danh: 28

1 Thử nghiệm KIA: 28

2 Thử nghiệm sinh hóa trên bộ Kit IDS 14 GNR: 30

3 Thử nghiệm trên bộ Kit .31

4 Thử nghiệm MOB: 32

5 Thử nghiệm LDC: 33

E. KỸ THUẬT ĐỊNH DANH VI KHUẨN THƯƠNG HÀN SALMONELLA TYPHI 35

I Khảo sát trực tiếp: 35

II Cấy phân lập: 36

III Thử nghiệm sinh hóa: 38

IV Tiến hành định danh bằng bộ kit IDS 14 GNR: 40

* PHA MÔI TRƯỜNG: Pha 100ml môi trường MHA

- Cách pha:

Cân 2,2g Muller histon brot cho vào 100ml nước cất.Lắc đều, sau đó bổ sung thêm 2g agar vào, đun trên lò viba đến khi tan agar và phòng thí nghiệm tiến hành hấp khử trùng ở nhiệt độ 1210C/20phút

A KỸ THUẬT KHÁNG SINH ĐỒ

I Phương pháp Kirby Bauer:

- Dụng cụ:

 Đĩa môi trường MHA

 Dịch vi khuẩn thử nghiệm: Staphylococcus aureus (1-2.108

CFU/ml)

 Nước muối 0,85%

 Tăm bông vô trùng để trải dịch khuẩn

 Đĩa kháng sinh: Az: Azithromycin; Ge: Gentamocin;

Ak: Amikacin; Bt : Trimethoprime; Ci: Ciprofloxacin;

 Dùng tăm bông vô trùng trải dịch khuẩn lên mặt thạch MHA:

 Dùng tăm bông vô khuẩn nhúng vào dịch vi khuẩn rồi lấy lên ép và xoay nhẹ tăm bông trên thành ống nghiệm, trải đầy vi khuẩn từ tăm bông lên mặt thạch MHA

 Đặt các đĩa kháng sinh lên mặt thạch đã trải vi khuẩn (3đĩa kháng sinh/ đĩa môi trường),sau đó ủ 370

C/18-24h

- Kết quả:

Hình: Thử nghiệm kháng sinh đồ bằng phương pháp Kirby Bauer

- Dựa theo bảng các chuẩn mực biện luận đường kính vòng vô khuẩn của

- Giải thích:

Khi tiến hành thí nghiệm pha loãng mẫu đúng nồng độ yêu cầu, mặt thạch MHA khô , đĩa kháng sinh được đưa về nhiệt độ phòng trước khi làm thí nghiệm => chỉ có một vòng vô khuẩn rõ ràng.Tuy nhiên, trang mẫu chưa đẹp

và khi thực hiện thao tác vẫn bị nhiễm vi sinh vật khác, nhưng không ảnh hưởng đến vòng vô khuẩn.Từ kết quả thử kháng sinh đồ trên ta thấy

Staphylococcus aureus nhạy với tất cả các loại kháng sinh thử nghiệm

II Phương pháp MIC:

 Pha dịch khuẩn thử nghiệm có nồng độ 106

tế bào /mltương tự như pha dịch vi khuẩn ở phương pháp Kirby Bauer

 Cho vào mỗi ống từ ống 1-10, mỗi ống 0,5ml dịch vi khuẩn có nồng

độ 106

tế bào /ml.Lắc đều ống nghiệm và ủ trong 370C /18-24h

- Kết quả và giải thích:

 Kết quả:Nồng độ kháng sinh tối thiểu ức chế vi sinh vật là 0,125µg/ml

Hình: Kết quả thử kháng sinh đồ bằng phương pháp MIC

 Giải thích: Dãy ống từ 1-10 được sắp xếp theo nồng độ kháng sinh giảm dần với ống đầu tiên có nồng độ 64µg/ml, không có chứa môi trường đây là ống đối chứng để chứng tỏ dịch kháng sinh có thể ức chế được vi sinh vật,các ống từ 2-9 có chứa môi trường và kháng sinh để xác định nồng độ kháng sinh có thể ức chế được vi sinh vật , ống số 10 chỉ chứa dịch vi khuẩn để chứng minh vi khuẩn có thể mọc được.Từ kết quả thí nghiệm ta thấy khi sắp xếp theo độ đục tăng dần từ ống 1-10 thì ống MIC là ống trong cuối cùng trong dãy và ở đây là ống số 8: nồng độ kháng sinh ở ống số 8 là 0,125µg/ml và đây là nồng độ tối thiểu của kháng sinh có khả năng ức chế sự tăng trưởng của vi khuẩn Còn ở ống số 9 vi khuẩn vẫn mọc và phát triển nên ống nghiệm đục màu, chứng tỏ ở nồng độ này kháng sinh này không thể ức chế được sự tăng trưởng của vi khuẩn

B QUY TRÌNH ĐỊNH DANH CẦU KHUẨN GRAM DƯƠNG:

Thực hiện thử nghiệm với ống cầu khuẩn Gram dương được PTN làm thuần sẵn từ mẫu bệnh phẩm (1BP và 3BP)

 Kết quả: có hiện tượng sủi bọt khí  Catalase (+), tiến hành định danh

theo hướng Staphylococci

 Giải thích hiện tượng: do Staphylococci tiết enzyme Catalase phân giải

H2O2 thành H2O và O2 làm xuất hiện bọt khí

- Làm tương tự với mẫu 3BP

 Kết quả: không có hiện tượng  Catalase (-), tiến hành định danh theo

hướng Streptococci

 Giải thích hiện tượng: do Streptococci không tiết enzyme Catalase phân

giải H2O2 thành H2O và O2 nên không xuất hiện bọt khí

II Thử Coagulase:

- Mẫu 1BP có kết quả Catalase dương tính ,thực hiện thử nghiệm

coagulase trong ống nghiệm:

 Cho 0,5ml huyết tương thỏ cho vào ống nghiệm vô trùng, lấy 1vòng vi khuẩn từ ống 1BP cho vào ống nghiệm chứa huyết tương thỏ, ủ 370C trong vòng 4h

 Kết quả: Phản ứng Coagulase âm tính Định danh Staphylococcus theo

nhóm SCN

Hình : Thử Coagulase

- Giải thích hiện tượng: Vì Staphylococcus có hơn 20 loài, nhưng trong

đó có 2 nhóm , 1 nhóm có khả năng làm đông huyết tương vì có khả năng tiết ra enzyme coagulase có tác dụng làm đông huyết

tương(enzyme coagulase là protein enzyme được sinh ra bởi vi sinh vật,nó có khả năng chuyển hóa fibrinogen thành fibrin gây đông huyết

tương), nhóm còn lại không tiết enzyme coagulase nên không thể làm đông huyết tương

III Thử nghiệm kháng Novobiocin:

- Dụng cụ:

 Đĩa môi trường MHA

 Dịch vi khuẩn thử nghiệm (Mẫu 1BP) pha trong nước muối có nồng độ

108 CFU/ml

 Đĩa kháng sinh Novobiocin

- Cách tiến hành: Dùng tăm bông vô khuẩn nhúng vào dịch vi khuẩn rồi lấy lên ép và xoay nhẹ tăm bông trên thành ống nghiệm, trải đầy vi khuẩn từ tăm bông lên mặt thạch MHA.Dùng kẹp gắp,gắp đĩa kháng sinh Novobiocin đặt lên đĩa MHA đã trải dịch vi khuẩn Ủ 370C/18-24h

 Giải thích: Staphylococcus có phản ứng Coagulase âm tính có thể là

Staphylococcus aureus hoặc là Staphylococcus nhóm SCN, để định

danh tiếp ta tiến hành thử nghiệm kháng Novobiocin , nếu kết quả

kháng Novobiocin là Staphylococcus saprophyticus, còn nhạy với

Novobiocin thì không phải S.saprophyticus.Từ kết quả thí nghiệm ta thấy vi khuẩn nhạy với Novobiocin, đây không phải là S.saprophyticus

nên cho vòng kháng khuẩn lên đến 40mm

IV Xác định kiểu tiêu huyết:

- Lấy ống nghiệm vi khuẩn cho kết quả Catalase âm tính (mẫu 3BP)cấy phân lập trên đĩa BA để xác định kiểu tiêu huyết, ủ 370C/18-24h

- Kết quả: không có hiện tượng tiêu huyết=> mẫu 3BP có kiểu tiêu huyết 

- Giải thích: Strept ococci nhóm D, và Streptococci nhóm khác không có khả năng tiết enzyme hemolysin làm tan máu như Streptococci nhóm A, nhómB Ta tiến hành định danh tiếp theo hướng Streptococci có kiểu tiêu huyết 

V Thử nghiệm Bile esculin:

- Dùng que cấy vòng lấy vi khuẩn Streptococci tiêu huyết  trên thạch máu

BA, cấy zic-zac trên mặt thạch Bile esculin, ủ trong t ủ CO2 trong v òng 18-24h

 Kết quả: môi trường chuyển màu nâu đậm dương tính Streptococci

tiêu huyết gama thuộc nhóm D

Hình: Thử nghiệm Bile esculin

VI Thử Bactrim:

- Dùng tăm bông vô trùng lấy vi khuẩn Streptococci tiêu huyết  trên thạch

máu BA, cấy zic- zac với các đường cấy dày và sát nhau trên mặt thạch,

dùng kẹp vô khuẩn lấy 1 đĩa Bactrim đặt lên giữa vùng cấy, ủ trong t ủ

 Giải thích: Streptococci nhóm D có khả năng

thủy phân Esculin (dưới điều kiện môi trường chứa 4% muối mật) để cho ra Glucose và Esculetin Esculetin sẽ phản ứng với muối Fe cho ra màu nâu đậm trên môi trường

VII Thử nghiệm dung nạp NaCl 6.5%

- Dùng que cấy vòng lấy vi khuẩn Streptococci tiêu huyết  trên thạch máu

BA cấy vào môi trường TSB bổ sung 6.5% NaCl, ủ tủ CO2trong vòng 24h

18- Kết quả: Trên môi trường TSB bổ sung NaCl 6.5% có vi khuẩn mọc và làm đục môi trường

 Giải thích: Một số Streptococci có khả năng chịu được muối cao nên có thể sinh trưởng và phát triển trong môi trường có bổ sung muối

 Streptococci tiêu huyết  được nhóm định danh là Streptococcus faecalis

C KỸ THUẬT ĐỊNH DANH PHẨY KHUẨN TẢ VIBRIO CHOLERAE

Từ ống pepton kiềm đã tăng sinh bệnh phẩm mẫu số 4BP

+ Cách ăn màu: mẫu BP4 sau khi nhuộm ăn màu hồng => Gram âm

Hình: Kết quả nhuộm gram mẫu BP4 xem dưới kính hiển vi

II Cấy phân lập trên môi trường MC và TCBS

1 Cấy phân lập mẫu 4BP trên môi trường MacConkey Agar sau đó mang đi ủ

370C/18-24h:

 Mục đích: Đây là môi trường chọn lọc cho vi khuẩn thuộc họ vi khuẩn đường ruột và các trực khuẩn Gram âm

 Kết quả: Môi trường phân lập từ màu hồng chuyển sang màu vàng

Khuẩn lạc có màu cùng màu với môi trường

Hình: Kết quả cấy phân lập mẫu 4BP trên môi trường MC

 Giải thích kết quả:

+ Ta thấy ban đầu màu môi trường MC là màu hồng, vi khuẩn ở mẫu 4BP thật ra có lên men được đường lactose trong môi trường MC => Cho khuẩn lạc hồng và môi trường vẫn giữ màu hồng

+ Nhưng kết quả của tổ 10 cho môi trường màu vàng rất có thể do vi khuẩn ở mẫu 4BP đã sử dụng hết nguồn Carbohydrat duy nhất là đường lactose nên nó đã tiếp tục sử dụng nguồn Nitơ đó là peptone qua

đó giải phóng NH3 làm môi trường trở nên kiềm

+ Lúc này, Neutral red đóng vai trò là chất chỉ thị màu, nếu pH môi trường = 6.8 thì môi trường màu hồng/đỏ; nếu pH môi trường = 8 thì môi trường màu vàng Do môi trường MC lúc này đã trở nên kiềm (giải thích trên) nên màu môi trường là màu vàng

 Như vậy, thực chất là vi khuẩn ở mẫu 4BP có lên men đường lactose, cho khuẩn lạc màu hồng nhạt => Có thể là trực khuẩn Gram âm, khả năng lên men lactose (+)

2 Cấy phân lập mẫu 4BP trên môi trường TCBS (Thiosulphate Citrate Bile salts Sucrose) sau đó mang đi ủ 370C/18-24h:

 Mục đích: đây là môi trường chọn lọc để phân lập các loài Vibrio Các

loài Vibrio khác nhau được phân biệt bằng khuẩn lạc sinh ra trong môi trường, cụ thể là chúng có lên men hay không lên men đường Succrose

 Kết quả: Môi trường TCBS chuyển từ màu xanh lá cây chuyển sang màu vàng Khuẩn lạc màu vàng, lồi tròn

Hình: Kết quả cấy phân lập mẫu 4BP trên môi trường TCBS

 Giải thích kết quả:

+ Nhờ vào chất chỉ thị màu là Bromothymol blue và Mothymol blue, có thể nhận biết được vi khuẩn trong mẫu 4BP có lên men đường Succrose hay không

+ Môi trường màu vàng tương ứng với môi trường acid; pH = 6 =>

Nghi ngờ là Vibrio cholerae

+ Môi trường màu xanh nước biển tương ứng với môi trường kiềm; pH

= 9.6 => Nghi ngờ là Vibrio parahemolyticus

+ Ban đầu môi trường ở pH = 8.6 có màu xanh lá cây Sau quá trình nuôi cấy, vi khuẩn ở mẫu BP4 có khả năng lên men đường Succrose làm môi trường acid nên màu môi trường là màu vàng

 Có thể nghi ngờ mẫu 4BP là Vibrio cholerae

 Chọn khuẩn lạc điển hình từ môi trường phân lập trên TCBS cấy thử nghiệm sinh hóa

III Thử nghiệm sinh hóa

1 Thử nghiệm Oxidase

- Tiến hành: Dùng que cấy vòng lấy vi khuẩn của mẫu 4BP trong đĩa vi khuẩn

đã nuôi cấy trên TCBS phết lên đĩa thử Oxidase Đọc kết quả trong 30-1 phút

- Kết quả: Phản ứng Oxydase dương: đĩa thử Oxidase chuyển sang màu tím đen (Hình)

2 Thử nghiệm KIA

- Môi trường thử nghiệm: KIA chứa 2 loại đường 0.1 % glucose, 1% lactose Thao tác: Dùng que cấy thẳng lấy sinh khối ở mẫu 4BP cấy thẳng sâu vào ống nghiệm, tránh chạm đáy ống, sau đó cấy ria trên bề mặt thạch nghiêng

- Kết quả: Không có kết quả Vi khuẩn lấy ở mẫu 4BP không lên trên môi trường KIA, cả ở phần thạch sâu và thạch nghiêng (Hình)

3 Thử nghiệm IMViC

 Khả năng tạo Indol:

- Môi trường: môi trường NB, thuốc thử Kowac’s

- Thao tác: Cấy vi khuẩn từ mẫu 4BP vào canh NB, ủ 370C/24h

- Kết quả:

 Đọc kết quả: Nhỏ 3-5 giọt Kowac’s

 Phản ứng Indol âm tính: môi trường có màu vàng nhạt.(-) (Hình)

- Giải thích kết quả: Do vi khuẩn trong mẫu 4BP không có khả năng tiết

ra enzyme Trytophan thành Indol Nếu Indol sẽ kết hợp với para – dimethylaminobenzaldehyd trong thuốc thử Kowac’s tạo phức chất Rosindol màu đỏ

 Phản ứng Methyl Red:

- Môi trường: MT Clark – Lubs, thuốc thử Methyl Red

- Thao tác: Cấy vi khuẩn ở mẫu 4BP vào MT Clark – Lubs, ủ 370C/48h

- Kết quả:

 Đọc kết quả: Lấy ra nhỏ 5-10 giọt Methyl Red

 Phản ứng Methyl Red âm tính: dd Methyl Red trong môi trường chuyển từ đỏ sang vàng (-) (Hình)

- Giải thích kết quả:

 Do vi khuẩn trong mẫu 4BP không có khả năng chuyển hóa glucose thành acid pyruvic, acid pyruvic sẽ không chuyển hóa thành ethanol, acid acetic, acid lactic được Dẫn đến pH môi trường không đổi => Methyl red không chuyển màu

 Chất chỉ thị màu Methyl Red:

diacetyl Diacetyl phản ứng với nhân guanidine có trong pepton để cho hợp chất màu hồng đỏ

 Khả năng sử dụng Citrate:

- Môi trường: MT Simomns Citrat, chỉ thị màu Bromothymol blue

- Thao tác: Cấy vi khuẩn tron g mẫu BP4 vào MT theo đường zích – zắc, ủ 370C/24h

- Kết quả: Phản ứng citrate âm (-): xanh bromothymol vẫn giữ màu xanh lục

- Giải thích kết quả:

+ Do vi khuẩn trong mẫu 4BP không có enzym citrat permease có

khả năng sử dụng citrat trong môi trường có Natri citrat làm nguồn các bon duy nhất Khi sử dụng citrat chúng làm kiềm hóa môi trường khi giải phóng ion Na+ và sử dụng NH4H2PO4 làm nguồn Nito sinh ra NH3 cũng làm kiềm hóa môi trường Do đó không có sự thay đổi pH của MT nên xanh bromothymol vẫn giữ màu xanh lục

- Môi trường: MT Christesen’s Urea bổ sung ure, chỉ thị màu Phenol Red

- Thao tác: Cấy vi khuẩn trong mẫu 4BP vào MT, ủ 370C/24h

- Kết quả: MT không đổi màu (-) (Hình)

- Giải thích kết quả: Do vi khuẩn ở mẫu 4BP không có khả năng phân giải urê thành NH3 Sự giải phóng NH3 làm tăng pH MT, từ đó làm thay đổi màu của chất chỉ thị

 Phenol red chuyển từ hồng sang đỏ cánh sen (+)

 MT không đổi màu (-)

 Chất chỉ thị màu Phenol Red:

pH

6.8 7.0 7.2

5 Thử nghiệm khả năng lên men các loại đường Mannitol, Succrose

- Khả năng lên men các loại đường Mannitol:

+ Môi trường: MT Mannitol, chỉ thị màu Phenol Red, pH = 7 (Ở pH này chất chỉ thị màu màu đỏ)

+ Tiến hành: Cấy vi khuẩn trong mẫu 4BP lên môi trường Mannitol, ủ

 Chất chỉ thị màu Phenol Red:

pH

6.8 7.0 7.2

- Khả năng lên men các loại đường Succrose:

+ Môi trường: MT Succrose, chỉ thị màu Phenol Red, pH = 7

+ Tiến hành: Cấy vi khuẩn ở mẫu 4BP vào môi trường Succrose, ủ

350C/24h

+ Kết quả: Môi trường chuyển từ màu đỏ của môi trường sang màu vàng đậm (+) (Hình)

+ Giải thích kết quả:

 Vi khuẩn trong mẫu 4BP có khả năng lên men đường Saccrose, do

đó đường Saccrose bị lên men tạo thành acid => Làm giảm pH môi trường, làm thay đổi màu của chất chỉ thị màu Phenol red (từ màu

6 Thử nghiệm khả năng di động

- Môi trường: Môi trường bán lỏng NA bổ sung TTC, để đứng

- Thao tác: Dùng que cấy thẳng lấy vi khuẩn từ mẫu 4BP cấy sang môi trường bán lỏng NA đã chuẩn bị, trích thẳng từ trên xuống dưới ngay từ giữa ống MT Ủ 370C/24-48h

- Kết quả: Phản ứng di động âm (-): vi khuẩn chỉ mọc trên đường cấy

- Giải thích kết quả:

 Sử dụng môi trường NA có bổ sung TTC, nếu vi khuẩn có khả năng khử TTC thì nó sẽ tạo ra formazan (màu đỏ), trước đó thì không có màu đỏ Dựa vào đó ta dễ dàng phát hiện ra vi khuẩn có di động hay không

 Kết quả cho thấy vi khuẩn chỉ mọc trên đường cấy, không nhận thấy

có hình giống rễ cây màu đỏ lan rộng ra khỏi đường cấy