Nghiên cứu thành phần hóa học thân cây Mơ tam thể (Paederia scandens) ở Tây Nguyên

MỤC LỤCMỞ ĐẦU1CHƯƠNG I: TỔNG QUAN3I.1. Giới thiệu về họ cà phê13I.2. Chi Paederia.3I.2.1. Mơ leo (Paederia foetida).4I.2.2. Mơ tam thể (Paederia scandens)4I.3. Giới thiệu về loài mơ tam thể (Paederia scandens)4I.3.1. Khái quát về cây mơ tam thể 24I.3.2. Các bài thuốc kinh nghiệm sử dụng mơ tam thể8I.3.2. 1. Chữa kiết lỵ mới phát:8I.3.2. 2. Chữa tiêu chảy do nóng:8I.3.2. 3. Chữa sôi bụng, ăn khó tiêu:8I.3.2. 4. Chữa tiêu chảy ra máu:8I.3.2.5. Chữa ho gà9I.3.2. 6. Trừ giun kim và giun đũa:9I.3.2. 7. Trị viêm tai:9I.3.2. 8. Chữa đau dạ dày:9I.3.2. 9. Chữa bí tiểu tiện:9I.3.3. Thành phần hóa học trong cây mơ tam thể10I.3.3.1. Các iridoid glucosid:10I.3.3.2. Các iridoid glucosid dạng đi me…………………………………….11I.3.3.3. Các anthraquinon………………………………….………………...13CHƯƠNG II: THỰC NGHIỆM VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU15II.1. Đối tượng, nội dung và các phương pháp nghiên cứu15II.1.1 Đối tượng15II.1.2. Nội dung nghiên cứu15II.1.3. Phương pháp nghiên cứu15II.2. Thiết bị, dụng cụ, hóa chất sử dụng trong quá trình thí nghiệm15II.2.1. Thiết bị15II.2.2. Dụng cụ16II.2.3. Hóa chất16II.3. Thực nghiệm16II.3.1. Thu hái, xử lý mẫu thô, điều chế cặn chiết16III II.3.2. Sơ đồ thực nghiệm17 II.3.3. Phân lập các chất từ cặn chiết20 II.3.3.1. Chạy sắc kí bản mỏng tìm hệ dung môi thích hợp cho quá trình chạy cột:20 II.3.3.2. Chạy cột sắc kí20 II.3.3.3. Chạy cột đảo pha21II.4. Phương pháp xác định cấu trúc các hợp chất tách được22II.5. Đặc trưng phổ các hợp chất tách được.22CHƯƠNG III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN23III.1. Phân lập các chất sạch:23III.2. Xác định cấu trúc các chất sạch:23KẾT LUẬN35TÀI LIỆU THAM KHẢO36PHỤ LỤC

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI

- NGUYỄN THỊ NGỌC ÁNH

NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC

THÂN CÂY MƠ TAM THỂ (PAEDERIA SCANDENS)

Ở TÂY NGUYÊN

Chuyên ngành: Hóa học hữu cơ

Mã số: 60.44.01.14

LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC HÓA HỌC

Giáo viên hướng dẫn: PGS.TS Đặng Ngọc Quang

Hà Nội – 10/2015

LỜI CẢM ƠN

Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến giảng viên PGS.TS Đặng NgọcQuang cùng các thầy cô trong tổ bộ môn Hóa Hữu cơ đã tận tình giúp đỡ,khích lệ kịp thời trong thời gian làm việc tại trường Đại Học sư phạm Hà Nội

Ngoài ra, em cũng xin cho em gửi lời cảm ơn đến Ban Giám Hiệutrường đại học Tây Nguyên, Ban Giám Hiệu trường đại học Sư Phạm Hà Nội,khoa hóa học của trường đại học Sư Phạm Hà Nội, phòng hợp chất thiênnhiên đã tạo điều kiện cho em được học hỏi, trau dồi kiến thức nhằm nâng cao

sự hiểu biết về chuyên môn

Cảm ơn em Hà Thị Nhung đã giúp đỡ chị rất nhiều trong quá trình làmviệc tại phòng thí nghiệm, cảm ơn các bạn đồng khóa, gia đình, bạn bè đãluôn động viên, giúp đỡ em trong suốt quá trình làm luận văn này

Trong quá trình làm luận văn này, em luôn nhận được sự giảng dạy chỉ bảotận tình và được tạo mọi điều kiện tốt nhất, với sự kính trọng và lòng biết ơn sâusắc, em xin gửi lời cảm ơn chân thành nhất tới PGS.TS Đặng Ngọc Quang!

Vốn kiến thức của bản thân có hạn, chắc chắn không tránh khỏi thiếusót, kính mong các thầy cô giáo và các đồng nghiệp giúp đỡ tôi, những mongbản thân ngày càng hoàn thiện hơn

Hà Nội, ngày tháng năm 2015

Học viên K23

Nguyễn Thị Ngọc Ánh

DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT TRONG LUẬN VĂN

 Kí hiệu các phương pháp sắc kí

TLC : Thin Layer Chromatography (sắc kí lớp mỏng)

CC : Column Chromatography (sắc kí cột)

Prep HPLC : Preparative High Performance Liquid Chromatography

(sắc kí lỏng điều chế hiệu năng cao)

 Kí hiệu các phương pháp phổ

IR : Infrared Spectroscopy

(Phổ hồng ngoại)

ESI-MS : Electronspray ionization mass spectroscopy

(Phổ khối lượng ion hóa bằng phun mù điện tử)

NMR : Nuclear Magnetic Resonance Spectrum

HSQC : Heteronuclear multiple quantum correlation

(Phổ hai chiều tương quan đa lượng tử dị hạt nhân)

HMBC : Heteronuclear multiple bond correlation

(Phổ hai chiều tương quan đa liên kết dị hạt nhân)

MỤC LỤC

MỞ ĐẦU 1

CHƯƠNG I: TỔNG QUAN 3

I.1 Giới thiệu về họ cà phê[1] 3

I.2 Chi Paederia 3

I.2.1 Mơ leo (Paederia foetida) 4

I.2.2 Mơ tam thể (Paederia scandens) 4

I.3 Giới thiệu về loài mơ tam thể (Paederia scandens) 4

I.3.1 Khái quát về cây mơ tam thể [2] 4

I.3.2 Các bài thuốc kinh nghiệm sử dụng mơ tam thể 8

I.3.2 1 Chữa kiết lỵ mới phát: 8

I.3.2 2 Chữa tiêu chảy do nóng: 8

I.3.2 3 Chữa sôi bụng, ăn khó tiêu: 8

I.3.2 4 Chữa tiêu chảy ra máu: 8

I.3.2.5 Chữa ho gà 9

I.3.2 6 Trừ giun kim và giun đũa: 9

I.3.2 7 Trị viêm tai: 9

I.3.2 8 Chữa đau dạ dày: 9

I.3.2 9 Chữa bí tiểu tiện: 9

I.3.3 Thành phần hóa học trong cây mơ tam thể 10

I.3.3.1 Các iridoid glucosid: 10

I.3.3.2 Các iridoid glucosid dạng đi me……….11

I.3.3.3 Các anthraquinon……….……… 13

CHƯƠNG II: THỰC NGHIỆM VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15

II.1 Đối tượng, nội dung và các phương pháp nghiên cứu 15

II.1.1 Đối tượng 15

II.1.2 Nội dung nghiên cứu 15

II.1.3 Phương pháp nghiên cứu 15

II.2 Thiết bị, dụng cụ, hóa chất sử dụng trong quá trình thí nghiệm 15

II.2.1 Thiết bị 15

II.2.2 Dụng cụ 16

II.2.3 Hóa chất 16

II.3 Thực nghiệm 16

II.3.1 Thu hái, xử lý mẫu thô, điều chế cặn chiết 16

III II.3.2 Sơ đồ thực nghiệm 17

II.3.3 Phân lập các chất từ cặn chiết 20

II.3.3.1 Chạy sắc kí bản mỏng tìm hệ dung môi thích hợp cho quá trình chạy cột: 20

II.3.3.2 Chạy cột sắc kí 20

II.3.3.3 Chạy cột đảo pha 21

II.4 Phương pháp xác định cấu trúc các hợp chất tách được 22

II.5 Đặc trưng phổ các hợp chất tách được 22

CHƯƠNG III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 23

III.1 Phân lập các chất sạch: 23

III.2 Xác định cấu trúc các chất sạch: 23

KẾT LUẬN 35

TÀI LIỆU THAM KHẢO 36 PHỤ LỤC

DANH MỤC BẢNG

Bảng 1: Khối lượng các cặn chiết 17

Bảng 2: Dữ liệu phổ NMR của chất A-1 27

Bảng 3: Số liệu phổ NMR của hợp chât A2 30

Bảng 4: Dữ liệu phổ của A-3 34

DANH MỤC HÌNH

Hình 1: Cây mơ tam thể có hoa 2

Hình 2: Cây mơ tam thể 7

Hình 3 : Phổ khối của hợp chất A1 23

Hình 4 Phổ 1H NMR của hợp chất A1 24

Hình 5: Phổ 13C NMR của hợp chất A1 25

Hình 6: Phổ 1H NMR của hợp chất A2 28

Hình 7: Phổ 13C NMR của hợp chất A2 25

Hình 8 : Phổ khối của hợp chất A3 31

Hình 9: Phổ 1H NMR của A3 32

Hình 10: Phổ 13C NMR của A3 33

DANH MỤC SƠ ĐỒ

SƠ ĐỒ 1: Sơ đồ phân lập các hợp chất từ thân mơ tam thể 18

Sơ đồ 2 Phân lập các chất từ cao BuOH 19

MỞ ĐẦU

Hiện nay, các căn bệnh nan y như bệnh ung thư, HIV-ADIS, các bệnhviêm nhiễm đặc biệt là sự kháng thuốc của các loại vi sinh vật là những vấn

đề ngày càng được quan tâm ở hầu hết các quốc gia trên thế giới Theo ước tính

và thống kê của Tổ chức y tế thế giới (WHO) thì hàng năm trên toàn cầu cókhoảng 9-10 triệu người mới mắc bệnh ung thư và một nửa trong số đó chết vì

căn bệnh này Việc nghiên cứu và phát triển các dược phẩm mới từ các nguồn

nguyên liệu tự nhiên vẫn đang đóng góp mạnh mẽ vào các lĩnh vực điều trị baogồm chống ung thư, chống nhiễm khuẩn, chống viêm, điều chỉnh miễn dịch vàcác bệnh về thần kinh Giữa những năm 2000 – 2005, hơn 20 thuốc mới là sảnphẩm thiên nhiên hoặc dẫn xuất từ thiên nhiên đã được đưa vào sản xuất Vớiviệc đưa vào các phương pháp sàng lọc hoạt tính sinh học nhanh thách thức đặt

ra cho các nhà hóa học là việc nghiên cứu các quy trình phân tách hiệu quả cáchợp chất thiên nhiên từ các nguồn thực vật, vi nấm, sinh vật biển… và thực hiệncác chuyển hóa hóa học để tạo ra các dẫn xuất mới

Nước ta nằm trong vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa, có một thảm thựcvật vô cùng phong phú và đa dạng với hơn 12.000 loài thực vật bậc cao, trong

đó có khoảng 3380 loài cây thuốc Các loại thuốc bảo vệ thực vật thân thiệnvới môi trường vẫn đang được các nhà khoa học tiếp tục nghiên cứu Cácdược phẩm có hiệu quả cho chữa trị các bệnh trên hiện nay rất ít, giá thànhcao và một số dược phẩm có nguồn gốc hóa học còn gây độc hại nặng chocác tế bào lành cũng như môi trường Điều đó đã thúc đẩy các nhà khoa họckhông ngừng nghiên cứu tìm ra các dược phẩm mới, trong đó các chất từ thựcvật là nguồn dược liệu chữa trị ung thu, bệnh viêm nhiễm hấp dẫn, thu hút sựđầu tư của nhiều nhà khoa học trên thế giới

Cây mơ tam thể, Paederia scandens (Lour) Merrill thuộc họ Cà phê

(Rubiaceae) là loại cây thân leo, mọc hoang ở Việt Nam, Trung Quốc, NhậtBản và Philippin Các bộ phận của cây được sử dụng làm thuốc như lợi tiểu,

gây nôn, kháng viêm, diệt khuẩn, kháng virus Epstein-Barr Các nghiên

cứu trước về cây mơ tam thể đã cho thấy nó có chứa hai thành phần chính làcác iridoid glucosid và các anthraquinon

Như vậy, nghiên cứu về các hợp chất hóa học có hoạt tính từ cây mơtam thể là một trong những hướng nghiên cứu có nhiều triển vọng và đượcnhiều nhà khoa học trên Thế giới quan tâm Tuy nhiên, ở Việt Nam, thân cây

mơ tam thể vẫn chưa được nghiên cứu về thành phần hóa học, dược lý và khảnăng ứng dụng của nó Do vậy, chúng tôi đề xuất chọn đề tài thực hiện:

“Nghiên cứu thành phần hóa học thân cây Mơ tam thể (Paederia

scandens) ở Tây Nguyên”.

Với các mục tiêu sau: Xác định thành phần hóa học trong cặn chiết

metanol của thân cây mơ tam thể (Paederia scandens).

Hình 1: Cây mơ tam thể có hoa.

CHƯƠNG I: TỔNG QUAN

I.1 GIỚI THIỆU VỀ HỌ CÀ PHÊ [1]

Các cây thuộc họ Cà phê (Rubiceae) thường là loại cây gỗ, cây bụihoặc nửa bụi, đôi khi là cây thân thảo hay dây leo Lá mọc đối, luôn có lá kèmvới nhiều hình dạng khác nhau Hoa thường tập hợp thành cụm hình xim, đôikhi hình đầu, mẫu 5 hoặc 4 Đài và tràng đều hợp, tràng có tiền khai hoathường vặn Trong một vài trường hợp số thùy của tràng có thể lên tới 8-10

Số nhị thường bằng với số thùy tràng và nằm xen kẽ giữa các thùy, dính vàoống tràng hoặc họng tràng Bộ nhụy gồm hai lá noãn dính nhau thành bầudưới, hai buồng Một vòi nhụy mảnh, đầu nhụy hình đầu hay chia hai Mỗibuồng của bầu chứa một đến nhiều noãn đảo hay thẳng Quả mọng, hạch hayquả khô(quả mở hoặc quả phân thành những hạch nhỏ) Hạt thường có phôithẳng có nội nhũ hoặc đôi khi không có

Trên thế giới, họ Cà phê (Rubiaceae) là một trong năm họ có nhiều loàinhất trong nhóm thực vật có hoa, với khoảng 13.000 nghìn loài [2], đượcphân bố trong 620 chi, hơn 40 tông và được chia làm 3 phân họ:Cinchonoideae, Ixoroideae, Rubioideae [3]

Chúng được tìm thấy ở tất cả các lục địa, kể cả nam cực, với một vài

loài của chi Coprosma, Galium, và Sherardia [2] Phần lớn được phân bố ở

vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới Ở Việt Nam, theo các tài liệu đã công bố mớinhất về họ Cà phê cho thấy, họ này có khoảng 93 chi và 450 loài, phân bốrộng khắp cả nước

I.2 CHI PAEDIRIA.

Ở Việt Nam, có hai loài là Paederia scandens (Mơ tam thể) và

Paederia foetida (Mơ leo).

I.2.1 Mơ leo (Paederia foetida).

Phân bố: Cây của phân vùng Ấn Độ - Malaysia, mọc ở lùm bụi và cũngđược trồng làm cây dược liệu

Công dụng: Thường dùng chữa: Co thắt túi mật và dạ dày ruột (co cơ

trơn), tê đau do ngoại thương; trẻ em cam tích, tiêu hoá kém và suy dinh

dưỡng; viêm gan vàng da, viêm ruột, lỵ; viêm khí quản, ho gà, lao phổi;phong thấp đau nhức gân cốt, đòn ngã tổn thương; giảm bạch cầu gây ra bởi

bức xạ; nhiễm độc bởi phốt pho hữu cơ trong các sản phẩm nông nghiệp;

dùng ngoài trị viêm da, eczema, lở loét, áp xe; toàn cây còn dùng chữa vếtthương do các trùng độc cắn; …

I.2.2 Mơ tam thể (Paederia scandens)

Dây leo bằng thân quấn Lá mọc đối hình trứng, nếu mặt dưới lá màutím đỏ thì gọi là mơ tam thể Hoa màu tím nhạt, mọc thành xim ở kẽ lá Quảdẹt Toàn cây có lông mềm và có mùi khó ngửi

Phân bố: Cây mọc hoang và được trồng ở các bờ rào để làm thuốc hoặcrau ăn

Công dụng: Chữa lỵ trực trùng; kiết lỵ mới phát; tiêu chảy do nóng; sôiđầy bụng, ăn khó tiêu; tiêu chảy ra máu; ho gà…

I.3 GIỚI THIỆU VỀ LOÀI MƠ TAM THỂ (PAEDERIA

SCANDENS).

I.2.1 Khái quát về cây mơ tam thể [2]

Mơ tam thể còn có tên khác là dây mơ lông, dây mơ tròn, thối địt, ngưu

bì đống , mơ lông, rau mơ, dắm chó, mẫu cẩu đằng, ngũ hương đằng

Tên khoa học Paederia scandens.

Thuộc họ Cà phê Rubiaceae

Mô tả: Dây leo bằng thân quấn, sống nhiều năm Thân màu xanh lụchoặc màu tím, có nhiều lông cứng màu trắng; tiết diện tròn ở thân già, hơi dẹt

ở thân non Lá đơn, nguyên, mọc đối, có mùi đặc trưng; phiến lá hình timđỉnh nhọn, dài 9-11 cm, rộng 4-6 cm, mặt trên màu xanh lục mặt dưới màutím, có nhiều lông cứng màu trắng; gân lá hình lông chim nổi rõ ở mặt dưới, 6cặp gân phụ đối hoặc gần đối Cuống lá hình lòng máng nông, dài 2-3 cm,màu xanh, có nhiều lông trắng; 2 lá kèm ở giữa 2 cuống lá, dạng vẩy tam giáchoặc hình tim dài 0,3-0,5 cm, màu xanh, tồn tại Cụm hoa xim hai ngả rấtphân nhánh ở nách lá hoặc ngọn cành, dài 10-50 cm Hoa nhỏ, đều, lưỡngtính, mẫu 5 rất ít mẫu 6, không cuống, lá bắc hình tam giác nhỏ Đài hoa: 5-6,rời, đều, hình tam giác nhỏ cao 1 mm, màu xanh hơi tím, có lông trắng, tiềnkhai van Tràng hoa: 5-6 cánh đều, màu tím mặt ngoài màu trắng xanh ở mặttrong, dính nhau ở 2/3 dưới tạo thành ống tràng dài 0,4-0,5 cm, phía trên xòe

ra 5 phiến dài 0,2 cm có nhiều gai nạc, mỗi phiến có 3-4 thùy cạn không đều

và uốn lượn; mặt trong họng tràng có nhiều lông tiết màu tím nhạt, dài 0,2-0,3

cm, chân dài đa bào (tế bào to dần về phía đỉnh của lông tiết) đầu đơn bào totròn dài; mặt ngoài ống tràng có rất nhiều lông màu trắng, 4-6 tế bào mọngnước xếp chồng lỏng lẻo Bộ nhị: 5-6 nhị đều, rời, đính ở đáy ống tràng xenkẽ cánh hoa Chỉ nhị dạng sợi mảnh, màu hồng hoặc tím nhạt dài 0,2-0,25 cm,nhẵn bóng Bao phấn 2 ô, màu trắng, thuôn dài 0,3-0,35 cm, nứt dọc, hướngtrong, đính lưng Hạt phấn m, rộng 20-25 µm, màu trắng, hình bầu dục 2 đầuthuôn tròn, có 3 rãnh dọc, có vân, dài 42,5-50 Bộ nhụy: bầu dưới hìnhchuông 2 ô, mỗi ô có 1 noãn, đính noãn trung trụ; 1 vòi nhụy ngắn, màu hồngnhạt; 2đầu nhụy dạng sợi uốn lượn, dài 0,4-0,7 cm, màu hồng nhạt, có nhiềulông mịn màu trắng; đĩa mậthình khoen bao quanh gốc vòi nhụy

Thân cây: Vi phẫu tiết diện hình bầu dục hai đầu tròn Các

mô gồm: Biểu bì tế bào hình chữ nhật không đều, lớp cutin mỏng răng cưa, cónhiều lông che chở đa bào dài Mô dày góc 2-3 lớp tế bào hình chữ nhật hoặc

đa giác kích thước không đều Mô mềm vỏ đạo 3-4 lớp tế bào hình bầu dục

hai đầu rộng, kích thước không đều, xếp nằm ngang Nội bì có đai Caspary.Tầng sinh bần bên trong nội bì tạo 1 lớp bần và nhiều lớp lục bì xếp thành dãyxuyên tâm Trụ bì 3-4 lớp tế bào đa giác, kích thước không đều, váchcellulose dày hay mỏng xen lẫn nhau Libe 1 tế bào đa giác, kích thước khôngđều, vách uốn lượn, xếp thành cụm Tượng tầng tạo libe 2 và gỗ 2 ở giữa bócấp 1 còn khoảng gian bó tạo mô mềm hóa gỗ ở trong và mô mềm váchcellulose bên ngoài Libe 2 tế bào hình chữ nhật kích thước không đều, váchmỏng, xếp xuyên tâm Gỗ 2 không liên tục, mạch gỗ 2 hình đa giác tròn, kíchthước lớn, phân bố thành từng cụm; mô mềm gỗ hình đa giác hoặc hình chữnhật kích thước đều, vách dày, bao quanh mạch Gỗ 1 tập trung thành cụm,mỗi bó có 2-3 mạch hình tròn trong vùng mô mềm vách xenlulozơ Mô mềmtủy đạo tế bào hình đa giác tròn hoặc tròn, kích thước không đều, váchxenlulozơ mỏng.

Cuống lá: Vi phẫu tiết diện hình lòng máng nông Biểu bì tế bào hìnhchữ nhật, kích thước gần đều, cutin mỏng răng cưa, nhiều lông che chở đa bàodài Mô dày góc 3-4 lớp tế bào đa giác tròn hoặc tròn, kích thước không đều

Mô mềm đạo nhiều lớp tế bào đa giác tròn hoặc tròn, kích thước không đều,vách mỏng Bó dẫn chính có cấu tạo cấp 1, gỗ ở trên libe ở dưới xếp hìnhcung và 2 bó phụ ở hai bên Libe tế bào đa giác nhỏ, kích thước đều nhau,vách uốn lượn, xếp thành từng cụm sát nhau gần như liên tục Mạch gỗ hình

đa giác tròn hoặc tròn xếp thành dãy 2-4 mạch, các dãy thường cách xa nhaubởi 3-6 dãy mô mềm vách xenlulozơ Tinh thể canxioxalat hình kim kíchthước lớn nằm rải rác trong mô mềm

Lá: Gân giữa: Vi phẫu 2 mặt lồi, mặt dưới lồi nhiều hơn mặt trên Biểu

bì tế bào hình chữ nhật, kích thước gần đều, cutin mỏng răng cưa, nhiều lôngche chở đa bào dài ở cả 2 biểu bì Mô dày góc 3- 4 lớp tế bào hình đa giác gầntròn, kích thước không đều Mô mềm đạo tế bào đa giác tròn hoặc gần tròn,

kích thước không đều Bó dẫn hình cung, libe ở dưới, gỗ ở trên Libe tế bàohình đa giác xếp thành vòng cung liên tục Mạch gỗ tròn hoặc đa giác tròn,xếp thành dãy xen kẽ mô mềm 3-7 dãy tế bào vách xenlulozơ Tinh thểcanxioxalat hình kim kích thước lớn nằm rải rác trong vùng mô mềm.

Phiến lá: Biểu bì tế bào hình chữ nhật kích thước không đều, tế bào biểu bìtrên lớn gấp 2-3 lần tế bào biểu bì dưới, cutin mỏng, lông che chở đa bào ở cả 2mặt, lỗ khí có ở biểu bì dưới Mô mềm giậu 1 lớp tế bào hình dấu phẩy (đầu trên

to đầu dưới nhỏ), xếp không khít nhau Mô mềm khuyết 3-4 lớp tế bào đa giáctròn hoặc tròn, kích thước không đều, xếp lộn xộn Bó gân phụ nằm rải rác trongvùng mô mềm Tinh thể calci oxalat hình kim rải rác trong mô mềm

Phân bố, sinh học và sinh thái: Cây mơ tam thể, là loại cây thân leo,mọc hoang ở Việt Nam, Trung Quốc, Nhật Bản và Philippin Ở Việt Nam,cây được trồng làm rau gia vị từ đồng bằng đến miền núi Trồng vào mùaxuân thu, ở bờ rào, bờ ao có lùm bụi cho leo

Bộ phận dùng: Lá, thân, rễ

Hình 2: Cây mơ tam thể đến độ thu hoạch

I.3.2 Các bài thuốc kinh nghiệm sử dụng mơ tam thể

I.3.2.1 Chữa kiết lỵ mới phát:

Lấy một nắm lá mơ tươi, thái nhỏ trộn với trứng gà cả lòng đỏ và lòngtrắng, lấy lá chuối bọc lại rồi nướng chín đều để ăn, hoặc cho lên chảo ránvàng không cho dầu, mỡ Ngày ăn 2-3 lần và ăn liên tục vài ngày là khỏi Nếu

bị chứng lỵ mới phát do đại tràng tích nhiệt thì lấy một nắm lá mơ và mộtnắm lá phèn đen, cả hai rửa sạch, nhúng qua nước sôi, vẩy khô, giã nát, vắtlấy nước cốt uống, uống 2-3 lần

- Lá mơ lông 100g, rau sam 400g, hạt cau 100g, củ phượng vĩ 100g, cỏsữa nhỏ lá 400g Tất cả sao tán bột dùng 20g/ngày dùng 5-7 ngày

- Lá mơ lông 100g, phèn đen 20g, củ phượng vĩ 20g, sao tán bột, uốngngày 20g

- Lá mơ lông 100g, cỏ nhọ nồi tươi 100g, lá phượng vĩ 100g, sắc uốngtrong 5-7 ngày

- Lá mơ lông 100g, cỏ sữa lá to 100g, rau sam 100g, ngân hoa 20g, búp ổi20g, búp sim 100g, sắc nước sánh hơi đậm, uống trong ngày dùng 5-7 ngày

I.3.2.2 Chữa tiêu chảy do nóng:

Chứng tiêu chảy do nhiệt với triệu chứng khát nhiều, phân khẳm, nướctiểu vàng, bụng đau quặn kèm theo đầy hơi, hậu môn nóng rát, có thể dùng lá

mơ 16g, nụ sim 8g sắc cùng với 500ml nước còn 200ml, chia làm hai lầnuống trong ngày

I.3.2.3 Chữa sôi bụng, ăn khó tiêu:

Lấy một nắm lá mơ tươi ăn kèm trong bữa cơm, hoặc giã nát vắt lấynước uống, ăn như vậy trong khoảng 2-3 ngày là thấy kết quả

I.3.2.4 Chữa tiêu chảy ra máu:

Mơ tam thể 6g ; cây cứt lợn 6g; xuyên tâm liên 4g; đọt cà ăn quả 16g;rau sam 6g Cách dùng: Sắc 3 bát lấy 1, uống lúc còn nóng, ngày 2 lần uống,mỗi ngày một thang

I.3.2.5 Chữa ho gà:

Lá Mơ tam thể 150g; Bách bộ 250g; Cỏ Mần trầu 250g; Rễ Chanh250g; Cỏ Nhọ nồi 250g; Rau Má 250g; Cam thảo dây 150g; Trần bì 100g;Gừng 50g; Đường kính 1500g Cách dùng: Cho vào 6 lít nước sắc còn 1 lít,cho đường kính vào trộn lẫn rồi đun sôi cho còn một lít Liều dùng: Ngàyuống 2-3 lần Trẻ 6 tháng đến 1 năm tuổi, mỗi lần uống 2 thìa cà phê; trẻ 3-4tuổi: 6 lần x 2 thìa cà phê; trẻ 5-7 tuổi: 7 lần x 2 thìa cà phê

I.3.2.6 Trừ giun kim và giun đũa:

- Dùng lá mơ tam thể giã nhỏ, cho tí muối ăn sống hoặc vắt lấy nướcuống, uống liền 3 buổi sáng vào lúc đói thì giun ra Ðể trừ giun kim, ngoàicũng dùng lá mơ lông một nắm 30g, chế vào 50ml nước chín, vắt lấy nước cốtbơm thụt vào hậu môn, giữ lại khoảng 20 phút vào lúc 19-20 giờ trước khi đingủ, giun sẽ bò ra

- Nếu bị nhiễm giun đũa thì lấy khoảng 50 g lá mơ rửa sạch, giã nát, vắtlấy nước cốt cho thêm một ít muối hòa tan rồi uống Uống vào buổi sáng lúcđói, sau 2-3 ngày giun sẽ ra hết

- Nếu bị nhiễm giun kim thì cũng uống nước cốt lá mơ như trên, ngoài

ra lấy khoảng 30 g rau mơ (cả lá, ngọn), rửa sạch, giã nát rồi cho thêm vào500ml nước sôi để nguội, dùng bơm thụt vào hậu môn trước khi đi ngủkhoảng 2-3 phút, giun sẽ bò ra

I.3.2.7 Trị viêm tai:

Lá mơ tươi đem nướng rồi nhét lỗ tai trị viêm tai chảy máu mủ, nước vàng

I.3.2.8 Chữa đau dạ dày:

Bị chứng đau dạ dày thì lấy khoảng 20-30 g lá mơ rửa sạch giã nát, vắtlấy nước uống 1 lần trong ngày Sau nhiều ngày dùng như thế thì có hiệu quả

I.3.2.9 Chữa bí tiểu tiện:

Nếu bị sỏi thận gây bí tiểu tiện, lấy rau mơ sắc uống ngày vài lần rấthiệu nghiệm

I.3 Thành phần hóa học trong cây mơ tam thể

Các nghiên cứu trước về cây mơ tam thể đã cho thấy nó có chứa haithành phần chính là các iridoid và anthraquinon

I.3.1 Các iridoid glucosid:

Đây là một trong những thành phần chính trong cây mơ tam thể, đặc biệt một vài hợp chất iridoid của cây mơ tam thể còn có chứa lưu huỳnh Ví dụ như: paederoside (1), asperuloside (2) và paederosidic axit (3) được tìm thấy trong lá và thân của cây Mơ tam thể Nhật bản

O-GlcH4O

1

O O- GlcH4

CH3-CO-H2C

H

H

C = O O

O

2

O O-GlcH4

CH3-S-CO-H2C

H

H

COOH HO

O

4

O

CH3-S-CO-H2C H

H OH

O

O

5

(GlcH 4 là glucose) Năm 1969, Inoue [7] thông báo rằng axit paederosidic (3) và axit asperulosidic (4) thu được bằng cách đun sôi dung dịch hai lacton glucosid 1

và 2 Vì thế, các tác giả này cho rằng cả hai axit trên không phải là các hợp chất thiên nhiên [7,8] Ngoài ra, axit paederosidic metyl ester (5) cũng thu được bằng cách đun hợp chất 3 trong dung môi methanol [7].

I.3.2 Các iridoid glucosid dạng đime:

Gần đây, nghiên cứu về rễ cây mơ tam thể ở Việt Nam, Đặng Ngọc

Quang và cộng sự đã tinh sạch được ba hợp chất iridoid glucosid dạng dime

(6-8) [10] Đây là những đime đầu tiên được tìm thấy trong chi Paederia sp Đime

6 tạo thành do sự kết hợp của hai monome paederosidic axit methyl ester và

paederosidic axit qua liên kết giữa nhóm cacboxylic của axit paederosidic vànhóm 6-OH trong phần đường của axit paederosidic metyl ester

HO

O

O

CH3-S-CO-CH2H

HO

Trong khi đó đime 7 được tạo thành từ hai phân tử axit paederosidic, có

thể dự đoán hợp chất này tạo thành do sự este hóa của nhóm axit cacboxylictrong axit paederosidic với nhóm 3-OH của glucozơ trong phân tử axitpaederosidic kia Sự gắn kết này được khẳng định qua phổ FAB-MS,2DNMR đặc biệt là tương quan giữa H-3 của phần đường và nhóm cacbonyltrong nhóm este của monome kia

O

CH2H

Đime thứ 3 là hợp chất 8 cũng được tạo thành từ hai monome

Đây cũng là một trong các thành phần chính của các cây thuộc họ Càphê Tuy nhiên, việc phát hiện ra các hợp chất anthraquinon từ Cây mơ tamthể còn rất hạn chế Gần đây, Đặng Ngọc Quang và cộng sự đã tinh sạch được

7 hợp chất anthraquinon (9-15) và một coumarin (16) từ rễ cây mơ tam thể

của Việt Nam chúng là những hợp chất có hoạt tính kháng sinh mạnh [11,12]

OCH3OCH3

13

O

O

OCH3OCH3

Các ấn phẩm trước đây chỉ ra rằng anthraquinon là các hợp chất có

nhiều hoạt tính sinh học quý giá, chẳng hạn như ức chế Epstein-Barr virus

[13], kháng virus [14] và hoạt tính gây độc tế bào [15]

CHƯƠNG II: THỰC NGHIỆM

VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

II.1 ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ CÁC PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

II.1.1 Đối tượng

Đối tượng nghiên cứu là thân cây mơ tam thể, được thu hái tại Tây

Nguyên vào 5/10/2014 Tên khoa học là Paederia scandens Lour được ThS.

Nguyễn Thế Anh, Viện Hàn lâm khoa học và Công nghệ Việt Nam xác định

Sau khi thu hái, thân cây mơ tam thể được được thái nhỏ và phơi khô tựnhiên ở 20-250C

II.1.2 Nội dung nghiên cứu

- Nghiên cứu tổng quan về cây mơ, họ cà phê, về hợp chất hóa học và

sự đa dạng của chúng

- Nghiên cứu thành phần hóa học của thân cây mơ tam thể (Paederia

scandens) thu hái ở Tây Nguyên.

II.1.3 Phương pháp nghiên cứu

II.1.3.1 Phương pháp ngâm chiết, cất quay để thu cặn chiết.

II.1.3.2 Phương pháp sắc kí bản mỏng, sắc kí cột, sắc kí lỏng để kiểm

tra thành phần hóa học và tách chất từ mẫu nghiên cứu

II.1.3.3 Phương pháp phổ 1H-NMR, 13C-NMR, HSQC, HMBC,

ESI-MS để nghiên cứu, xác định cấu trúc phân tử của các chất tách được

II.2 THIẾT BỊ, DỤNG CỤ, HÓA CHẤT SỬ DỤNG TRONG QUÁ TRÌNH THÍ NGHIỆM

II.2.1 Thiết bị

Thiết bị dùng trong quá trình nghiên cứu bao gồm:

1 Thiết bị chiết mẫu (bình chiết, máy siêu âm )