Nghiên cứu thành phần hóa học thân cây mâm xôi (Rubus Alceaefolius poir.), họ Rosaceae ở Yên Sơn, Tuyên Quang

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ĐỖ THỊ NGỌC THỦY NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC THÂN CÂY MÂM XÔI (RUBUS ALCEAEFOLIUS POIR.), HỌ ROSACEAE Ở YÊN SƠN – TUYÊN QUANG LUẬN VĂN THẠC SỸ HOÁ HỌC Thái Nguyên - 2012 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn1 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ĐỖ THỊ NGỌC THỦY NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC THÂN CÂY MÂM XÔI (RUBUS ALCEAEFOLIUS POIR.), HỌ ROSACEAE Ở YÊN SƠN – TUYÊN QUANG Chuyên ngành: Hoá học Hữu cơ Mã số : 60.44.27 LUẬN VĂN THẠC SỸ HOÁ HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS PHẠM VĂN THỈNH Thái Nguyên - 2012 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn2 LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Phạm Văn Thỉnh - Người thầy khoa học, mẫu mực đã hết lòng tận tình hướng dẫn, động viên và giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu và thực hiện luận văn. Tôi xin chân thành cảm ơn TS. Nguyễn Quyết Tiến, TS. Phạm Thị Hồng Minh những người thầy đã tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tôi nhiều kiến thức bổ ích và những kinh nghiệm quý báu trong nghiên cứu khoa học. Xin chân thành cảm ơn các thầy cô trong khoa Hoá - Trường Đại học Sư phạm Thái Nguyên, các thầy của Trường Đại học Sư phạm Hà Nội đã tận tình giảng dạy, giúp đỡ và đưa ra nhiều ý kiến quý báu về mặt chuyên môn trong quá trình tôi nghiên cứu và hoàn thành luận văn. Xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu cùng toàn thể các thầy cô trường trung học phổ thông Dương Tự Minh và gia đình tôi đã tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt quá trình học tập và làm luận văn. Thái Nguyên, tháng 08 năm 2012 Tác giả luận văn Đỗ Thị Ngọc Thủy Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn3 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi, các số liệu, kết quả nêu trong luận văn này là trung thực và chưa từng được ai công bố trong bất kỳ công trình nào khác. Tác giả luận văn Đỗ Thị Ngọc Thủy Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn4 i MỤC LỤC Trang Trang bìa phụ Lời cảm ơn Lời cam đoan Mục lục i Danh mục các kí hiệu, các chữ viết tắt iii Danh mục các bảng iv Danh mục các hình v Danh mục sơ đồ vii Danh mục các phụ lục viii MỞ ĐẦU 1 Chương 1. TỔNG QUAN 3 1.1. Khái quát về các thực vật chi Rubus 3 1.2. Thành phần hóa học các loài thuộc chi Rubus 4 1.2.1. Các hợp chất secquitecpenoit 4 1.2.1.1. Các hợp chất Secquitecpenoit khung eudeusman 4 1.2.1.2. Các hợp chất Secquitecpenoit khung guaiane 5 1.2.2. Các hợp chất ditecpenoit 5 1.2.2.1. Các hợp chất ditecpen khung labdan 5 1.2.2.2. Các hợp chất ditecpen khung ent-kauran 6 1.2.3. Các hợp chất tritecpenoit 10 1.2.3.1. Các hợp chất tritecpen khung oleanan 10 1.2.3.2. Các hợp chất tritecpen khung ursan 11 1.2.4. Các hợp chất flavonoit 15 1.2.4.1. Các hợp chất flavonol 15 1.2.4.2. Các hợp chất flavanol 16 1.2.4.3. Các hợp chất hydroxyflavanol 17 1.2.5. Các hợp chất anthraquinon 18 1.2.6. Các hợp chất khác 18 1.3. Tình hình nghiên cứu hóa thực vật cây Rubus alceafolius 20 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn5 ii Chương 2. THỰC NGHIỆM 11 2.1. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu 22 2.1.1. Thu mẫu cây, xác định tên khoa học và phương pháp xử lý mẫu 22 2.1.2. Phương pháp ngâm chiết và phân lập các hợp chất từ dịch chiết 22 2.1.3. Phương pháp xác định cấu trúc hoá học các chất phân lập được 23 2.2. Dụng cụ, hóa chất và thiết bị nghiên cứu 23 2.2.1. Dụng cụ, hoá chất 23 2.2.2. Thiết bị nghiên cứu 24 2.3. Thu nhận các dịch chiết từ cây Mâm xôi 25 2.3.1. Thu nhận các dịch chiết 25 2.3.2. Khảo sát định tính các dịch chiết 26 2.3.2.1. Phát hiện các hợp chất sterol 26 2.3.2.2. Phát hiện các ancaloit 26 2.3.2.3. Phát hiện các flavonoit 27 2.3.2.4. Phát hiện các cumarin 27 2.3.2.5. Định tính các glucosit tim 27 2.3.2.6. Định tính các saponin 28 2.3.2.7. Định tính các tanin 28 2.4.1. Cặn dịch chiết n-hexan của câyMâm xôi (MXH) 29 2.4.1.1. Hợp chất β-sitosterol (MXH1) 29 2.4.1.2. Hợp chất axit ursolic (MXH6) 30 2.4.1.3. Hợp chất Axit euscaphic (MXH14) 31 2.4.2. Cặn dịch chiết etyl axetat của cây Mâm xôi (MXE) 32 2.4.2.1. Hợp chất β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranosit (MXE1) 32 2.4.2.2. Hợp chất 8-methoxy-4H-chromen-4-one (MXE2) 33 2.4.2.3. Hợp chất suavissimoside R1 (MXE18) 33 2.4.2.4. Hợp chất trachelosperoside A1 (MXE21) 33 Chương 3. THẢO LUẬN KẾT QUẢ 36 3.1. Nguyên tắc chung 36 3.2. Phân lập và nhận dạng các hợp chất có trong các dịch chiết khác nhau của cây Mâm xôi 36 3.2.1. Hợp chất steroit 37 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn6 iii 3.2.1.1. Hợp chất β-sitosterol (MXH1) 37 3.2.1.2. Hợp chất β-sitosterol-3- O -β- D -glucopyranosit (MXE1) 37 3.2.2. Hợp chất tritecpenoit 40 3.2.2.1. Hợp chất axit ursolic (MXH6) 40 3.2.2.2. Hợp chất axit euscaphic (MXH14) 50 3.2.2.3. Hợp chất suavissimoside R1 (MXE18) 60 3.2.2.4. Hợp chất trachelosperoside A1 (MXE21) 71 3.2.3. Hợp chất poliphenol: 8-methoxy-4H-chromen-4-one (MXE2) 82 KẾT LUẬN 92 TÀI LIỆU THAM KHẢO 93 PHỤ LỤC 98 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn7 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT DÙNG TRONG LUẬN VĂN  Các phương pháp sắc ký CC : Column Chromatography SKLM : Sắc ký lớp mỏng  Các phương pháp phổ MS : Mass Spectroscopy ESI-MS : Electron Spray Ionization Mass Spectroscopy FT-IR : Fourier Transform Infrared Spectroscopy NMR : Nuclear Magnetic Resonance 1 H-NMR : 1 H-Nuclear Magnetic Resonance 13 C-NMR : 13 C- Nuclear Magnetic Resonance DEPT : Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer HMQC : Heteronuclear Multiple - Quantum Coherence HMBC : Heteronuclear multiple - Bond Correlation Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn8 v DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1. Một vài đại diện thuộc khung labdan 6 Bảng 1.2. Một vài đại diện ditecpen khung ent-kauran 7 Bảng 1.3. Một số hợp chất tritecpen khung oleanan 10 Bảng 1.4. Một số hợp chất đại diện khung ursan 12 Bảng 1.5. Một vài đại diện Các hợp chất flavonol 15 Bảng 1.6. Một vài đại diện các hợp chất pentahydroxyflavan 17 Bảng 1.7. Một số đại diện hợp chất hydroxyflavanol 17 Bảng 1.8. Một số hợp chất anthraquinon 18 Bảng 1.9. Một vài đại diện 19 Bảng 2.1. Khối lượng các cặn chiết thu được từ cây Mâm xôi 26 Bảng 2.2. Kết quả định tính các nhóm chất trong cây Rubus alceaefolius 29 Bảng 3.1. Độ dịch chuyển hóa học 13 C NMR của MXH1 và MXE1 38 Bảng 3.2. Số liệu phổ của MXH.6 và axit ursolic 41 Bảng 3.3. Các số liệu NMR và các tương tác xa trong MXH14 50 Bảng 3.4. Số liệu phổ NMR và các tương tác xa của MXE18 62 Bảng 3.5. Số liệu phổ NMR và các tương tác xa của MXE21 73 Bảng 3.6. Số liệu phổ NMR và các tương tác xa của MXE2 83 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn9 vi DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 2.1. Cây Mâm xôi 22 Hình 2.2. Hoa và quả Mâm xôi 22 Hình 3.1. Cấu trúc hóa học của MXH1 và MXE1 38 Hình 3.2. Cấu trúc hóa học của MXH6 41 Hình 3.2.1. Phổ FT-IR của MXH6 43 Hình 3.2.2. Phổ LC-ESI-MS của MXH6 44 Hình 3.2.3. Phổ 1 H – NMR của MXH6 45 Hình 3.2.4. Phổ 13 C – NMR của MXH6 46 Hình 3.2.5. Phổ 13 C-DEPT của MXH6 47 Hình 3.2.6. Phổ HSQC của MXH6 48 Hình 3.2.7. Phổ HMBC của MXH6 49 Hình 3.3. Cấu trúc hóa học của MXH14 51 Hình 3.3.1. Phổ FT-IR của MXH14 53 Hình 3.3.2. Phổ LC-ESI-MS của MXH14 54 Hình 3.3.3. Phổ 1 H–NMR của MXH14 55 Hình 3.3.4. Phổ 13 C – NMR của MXH14 56 Hình 3.3.5. Phổ 13 C-DEPT của MXH14 57 Hình 3.3.6. Phổ HSQC của MXH14 58 Hình 3.3.7. Phổ HMBC của MXH14 59 Hình 3.4. Cấu trúc hóa học của MXE18 61 Hình 3.4.1. Phổ FT-IR của MXE18 64 Hình 3.4.2. Phổ LC-ESI-MS của MXE18 65 Hình 3.4.3. Phổ 1 H-NMR của MXE18 66 Hình 3.4.4. Phổ 13 C-NMR của MXE18 67 Hình 3.4.5. Phổ 13 C-DEPT của MXE18 68 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn10 [...]... mẫu cây, xác định tên khoa học và phương pháp xử lý mẫu Nguyên liệu để nghiên cứu là thân cây Mâm xôi Mẫu tươi được thu hái vào tháng 08/2011 tại Yên Sơn, Tuyên Quang Mẫu cây đem nghiên cứu hoá thực vật được PGS.TS Lê Ngọc Công (Khoa Sinh- KTNN trường Đại học Sư phạm Thái Nguyên) xác định tên khoa học là Rubus alceaefolius Poir., thuộc họ Rosaceae Hình 2.1 Cây Mâm xôi Hình 2.2 Hoa, quả Mâm xôi Mẫu thân. .. gian lá cây có tác dụng chữa bệnh viêm gan vàng da, phù thũng, dùng nước sắc uống tốt cho tiêu hoá [1] Do vậy, chúng tôi đã chọn đề tài với tên: Nghiên cứu thành phần hoá học của thân cây Mâm xôi (Rubus alceaefolius Poir.) họ Rosaceae ở Yên Sơn - Tuyên Quang làm đối tượng nghiên cứu để tìm hiểu thành phần hóa học với mục đích tìm ra những hợp chất có hoạt tính sinh học làm sáng tỏ việc sử dụng cây này... Nam… Những kết quả nói trên có phần đóng góp xứng đáng của các nhà khoa học thuộc nhiều chuyên ngành như sinh học, hoá học, công nghệ học, Tiếp tục theo hướng nghiên cứu nói trên, cây Mâm xôi có tên khoa học Rubus alceafolius họ Rosaceae ở Việt nam, lại là cây thuốc dân gian nên được chọn làm đề tài nghiên cứu cho luận văn này Một vài công trình nghiên cứu về lá cây Mâm xôi cho biết có triecpenoit và... MXE2 90 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn11 viii DANH MỤC SƠ ĐỒ Trang Sơ đồ 2.1 Ngâm chiết mẫu cây Mâm xôi (Rubus alceaefolius) 25 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn12 1 MỞ ĐẦU Việt Nam có một nền y dược học cổ truyền từ lâu đời Trước khi nền y dược học hiện đại thâm nhập vào Việt Nam, y dược học cổ truyền... và đưa ra hướng bảo tồn và sử dụng hiệu quả cây dược liệu quí này Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn14 3 Chương 1 TỔNG QUAN CÁC THỰC VẬT CHI RUBUS VÀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CHÚNG 1.1 Khái quát về các thực vật chi Rubus Cây Mâm xôi với danh pháp khoa học là Rubus alceaefolius Poir., chi Mâm xôi (Rubus) , họ Hoa Hồng (Rosaceae) , bộ Rosales, lớp Hai lá mầm (Magnoliopsida),... trong cây R idaeus [17] (11.3) Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn31 20 1.3 Tình hình nghiên cứu hóa thực vật cây Rubus alceafolius Poir Ở mục 2 đề cập đến những nghiên cứu hoá thực vật của chi Rubus đã chỉ ra tính đa dạng về thành phần hoá học, những hoạt tính chủ yếu là do các diterpenoit và tritecpenoit, anthraquinon với cấu trúc rất phong phú và đa dạng ở các... của cây Rubus alceafolius trong y học cổ truyền: Cây Mâm xôi có nhiều tác dụng trong điều trị bệnh, người ta thường hái lá và thân cây quanh năm Vị thuốc mới thấy dùng trong phạm vi nhân Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn32 21 dân thường dùng sắc uống để giúp cho sự tiêu hoá, đau gan, kém ăn, ăn uống không tiêu [5] Ngoài ra kinh nghiệm dân gian còn dùng lá, thân. .. tính kháng khuẩn [32b] Ở nước ta cũng có một vài loài thuộc chi Rubus được dùng trong y học dân gian Cây Ngấy lá nhỏ (R parvifolius) ở miền trung được dùng để trị bệnh tê thấp, đau gan, viêm đường tiết niệu, ho ra máu [2], cây Mâm xôi (R Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn15 4 alceaefolius) giúp cho dễ tiêu hoá, bổ thận lợi tiểu, ngoài ra còn dùng để chữa bệnh... Gần đây, việc nghiên cứu và chiết xuất thành công axit shikimic từ cây Hồi Lạng sơn (Illicium verum), đó là nguyên liệu chính để sản xuất tamiflu Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn13 2 (oseltamivir photphat) làm thuốc trị dịch cúm gia cầm H5N1, hay như chế phẩm Crilla từ cây Náng hoa trắng (Crinum latifolium) trong việc điều trị u tiền liệt tuyến ở Việt Nam…... vịt, mép có răng không đều nhau, mặt trên phủ nhiều lông lởm chởm, mặt dưới có lông mềm màu xám Cụm hoa thành đầu hay chùm ở nách lá, màu hồng Quả hình cầu, gồm nhiều quả hạch tụ họp lại như dáng mâm xôi, khi chín màu đỏ tươi[1], [3] 1.2 Thành phần hóa học các loài thuộc chi Rubus Cho đến nay đã có khoảng 30 loài thực vật chi Rubus được nghiên cứu hoá thực vật [10], đã phân lập và nhận dạng được 112 . đã chọn đề tài với tên: Nghiên cứu thành phần hoá học của thân cây Mâm xôi (Rubus alceaefolius Poir. ) họ Rosaceae ở Yên Sơn - Tuyên Quang làm đối tượng nghiên cứu để tìm hiểu thành phần hóa. THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ĐỖ THỊ NGỌC THỦY NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC THÂN CÂY MÂM XÔI (RUBUS ALCEAEFOLIUS POIR. ), HỌ ROSACEAE Ở YÊN SƠN – TUYÊN QUANG . HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM ĐỖ THỊ NGỌC THỦY NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC THÂN CÂY MÂM XÔI (RUBUS ALCEAEFOLIUS POIR. ), HỌ ROSACEAE Ở YÊN SƠN – TUYÊN