Phát hiện thiếu glucose 6 phosphat dehydrogenase và phân tích dạng đột biến gen của nó ở một số dân tộc ng ời việt nam

Bộ Y tế Trờng Đại học Y Hà Nội ************ Báo cáo tổng kết đề tài Nghiên cứu khoa học Cấp quản lý đề tài: Bộ Y tế Tên đề tài: Phát thiếu glucose-6-phosphat dehydrogenase phân tích dạng ®ét biÕn gen cđa nã ë mét sè d©n téc ngời việt nam Chủ nhiệm đề tài: PGS.TS trần thị Cơ quan chủ trì đề tài: Trờng Đại học Y Hà Nội 5673 22/01/2006 Báo cáo tổng kết đề tài Nghiên cứu khoa học Hà Nội - 2005 Cấp quản lý đề tài: Bộ Y tế Cơ quan chủ trì đề tài: Trờng Đại học Y Hà Nội Tên đề tài: Phát thiếu glucose-6-phosphat dehydrogenase phân tích dạng đột biến gen số dân tộc việt nam Chủ nhiệm đề tài: PGS.TS Trần Thị Chính Th ký đề tài: BS Lê Ngọc Anh Những ngời thực hiện: PGS.TS Trần Thị Chính Trờng Đại häc Y Hµ Néi GS Vị TriƯu An Tr−êng Đại học Y Hà Nội PGS.TS Nguyễn Thị Ngọc Dao Viện Công nghệ Sinh học PGS.TS Đoàn Hạnh Nhân Viện Sốt rét-Ký sinh trùng-Côn trùng TW TS Tạ Thị Tĩnh TS Hoàng Hạnh Phúc Viện Sốt rét-Ký sinh trùng-Côn trùng TW Viện Nhi Trung ơng ThS Huỳnh Thị Diễm Thuý Bệnh viện Đa khoa Đà Nẵng ThS Đỗ Thị Tuyên Viện Công nghệ Sinh häc ThS Ngun Minh Hïng ViƯn Sèt rÐt - C«n trïng - Ký sinh trïng 10 ThS Lý BÝch Thuỷ Viện Công nghệ Sinh học 11 BSCKII Nguyễn Văn Hoà Bệnh viện Việt Nam - Cu Ba, Quảng Bình 12 BS Lê Ngọc Anh Trờng Đại học Y Hà Néi 13 ThS Ngun Tr−êng Giang ViƯn C«ng nghƯ Sinh học 14 GS Kaoru Nishiyama Đại học Tổng hợp Kobe - NhËt B¶n Thêi gian thùc hiƯn: 10/2002 - 09/2005 Tỉng sè kinh phÝ thùc hiƯn: 200.000.000 ®ång Mơc lơc Phần A: Tóm tắt kết đề tài 1 Kết chủ yếu đạt đợc đề tài áp dụng thực tiễn Đánh giá thực đề tài 4 Đánh giá viƯc sư dơng kinh phÝ 5 C¸c ý kiÕn đề xuất Phần B: kết nghiên cứu đề tài Đặt vấn đề Chơng 1: Tổng quan tài liệu 1.1 Những hiểu biết G6PD 1.1.1 Cấu trúc G6PD 1.1.2 Chức G6PD 10 1.1.3 Những điều kiện ảnh hởng đến hoạt ®éng cđa G6PD 12 1.2 BƯnh thiÕu G6PD 13 1.2.1 Lịch sử nghiên cứu tình hình thiếu G6PD 13 1.2.2 Biểu lâm sàng, xét nghiệm, chẩn đoán điều trị 15 1.2.3 Cơ sở gen học thiếu G6PD, mối liên quan với đặc tính hoá sinh thể lâm sàng 19 1.3 Các kỹ thuật phát thiếu G6PD 23 1.3.1 Kỹ thuật định tính 23 1.3.2 Kỹ thuật tạo vòng Formazan bán định lợng 24 1.3.3 Kỹ thuật định lợng 25 1.3.4 Kỹ thuật phân tích gen - Kỹ thuật PCR-MPTP 26 Chơng 2: Đối tợng phơng pháp nghiên cứu 28 2.1 Đối tợng nghiên cứu 28 2.2 Phơng pháp nghiên cứu 29 2.2.1 ThiÕt kÕ nghiªn cøu 29 2.2.2 Néi dung nghiên cứu 29 2.2.3 Các bớc nghiên cứu 29 2.2.4 Các qui trình kỹ thuật 29 2.2.5 Xử lý số liệu 39 Chơng 3: Kết nghiên cứu 41 3.1 Một số yếu tố ảnh hởng đến kỹ thuật Formazan 41 3.1.1 Xác định điều kiện phản ứng Formazan 41 3.1.2 Thêi gian cÊt gi÷ bƯnh phÈm 45 3.1.3 Vị trí bấm mẫu 45 3.1.4 Đánh giá độ nhạy, độ đặc hiệu 46 3.2 Tỷ lệ thiếu G6PD dân tộc 48 3.2.1 Tỷ lệ thiếu G6PD dân tộc 48 3.2.2 Tỷ lệ thiếu G6PD theo giới 49 3.3 Kết phân tích gen thiếu G6PD 51 3.3.1 Kết tách chiết ADN từ bạch cầu máu ngoại vi 51 3.3.2 Kết kiểm tra sản phẩm phản ứng PCR-MPTP 52 3.3.3 Đối tợng phân tích gen 55 3.3.4 Các dạng đột biến gen G6PD dân tộc 55 Chơng 4: Bàn luận 59 4.1 Về đối tợng nghiên cứu 59 4.2 Về kỹ thuật tạo vòng Formazan bán định lợng phát 60 thiếu hụt G6PD 4.2.1 Các điều kiện phản ứng Formazan 60 4.2.2 Thêi gian cÊt gi÷ bƯnh phÈm 62 4.2.3 Vị trí bấm mẫu 62 4.2.4 Độ nhạy, độ ®Ỉc hiƯu cđa kü tht Formazan 62 4.3 Tû lƯ thiếu G6PD 64 4.4 Kỹ thuật PCR-MPTP dạng đột biến G6PD 66 dân tộc Việt Nam nhóm nghiên cứu 4.5 Các đặc điểm thiếu G6PD nghiªn cøu 73 4.5.1 ThiÕu G6PD mĐ 73 4.5.2 Thiếu G6PD gia đình 75 4.5.3 Về dạng đột biến gen G6PD ngời Việt Nam dân tộc nghiên cứu 76 4.6 Nghiên cøu thiÕu G6PD vµ øng dơng thùc tiƠn 79 KÕt luận 81 Kiến nghị 82 Tài liệu tham khảo 83 Phụ lục Các chữ viết tắt 6PG Phosphogluconat aa Acid amin bp Base pair cDNA Complementary DNA Da Dalton DNA Deoxyribonucleic acid G6PD Gluco Phosphat Dehydrogenase GSH Glutathion Synthetase Hb Hemoglobin MPTP Multiplex PCR using Tandem forward Primer MTT 3-([4,5-Dimethylthiazol-2-yl])-2,5 diphenyl tetrazolium Bromid, Thiazolylblue NADP Nicotinamid adenin dinucleotid phosphate nt Nucleotid NST NhiƠm s¾c thĨ PCR Polymerase Chain Reaction PCR-SSP PCR - sequence specific primer PCR-SSO PCR - sequence specific oligonucleotide PMS Phenazine Methosulfat RCLB Red Cell Lysis Buffer RNA Ribonucleic acid UGT1A1 UDP - glucuronyl transferase WCLB White Cell Lysis Buffer WHO World Health Organization Lêi c¶m ơn Chúng xin bày tỏ lòng cám ơn chân thành tới nhà khoa học: - GS.TS Nguyễn Thu Nhạn - Nguyên Viện trởng Viện Nhi trung ơng - GS.TS Nguyễn Công Khanh - Nguyên Viện trởng Viện Nhi trung ơng - BS Nguyễn Thị Ngọc Phợng - Giám đốc Bệnh viện Từ Dũ - TP.HCM - GS.TS Văn Đình Hoa - Trởng Bộ môn MD-SLB -Trờng ĐHYHN - PGS.TS Nguyễn Văn Tờng - Nguyên Phó Vụ trởng Vụ KHĐT - BYT - ThS Nguyễn Thị Quỳnh Mai - Phòng Quản lý NCKH - Trờng ĐHYHN đà giúp đỡ chân tình nhóm nghiên cứu tổ chức tạo điều kiện cho việc lấy máu số dân tộc Sự giúp đỡ quí báu đà hỗ trợ cho hoàn thành tốt nội dung nghiên cứu Đề tài Thay mặt nhóm nghiên cứu Chủ nhiệm Đề tài PGS.TS Trần Thị Chính Nghiệm thu đề tài Phần A: Tóm tắt kết đề tài Kết chủ yếu đạt đợc đề tµi: ThiÕu Glucose Phosphate Dehydrogenase (G6PD) lµ bƯnh lý enzym hồng cầu hay gặp ngời, số ngời thiếu G6PD toàn giới có khoảng 400 triệu [41,78] Bệnh thờng gây tình trạng thiếu máu tan huyết sau sử dụng vài loại thuốc, thức ¨n hay nhiƠm khn [52] ThiÕu G6PD lµ bƯnh di trun qua nhiƠm s¾c thĨ (NST) giíi tÝnh Locus gen quy định cấu trúc G6PD nằm nhánh dài vùng băng NST X (Xq.28) [66b,77] Cùng với phát triển sinh học phân tử sở gen học thiếu G6PD, dạng đột biến gen ngày đợc sáng tỏ Mỗi dạng đột biến gây bệnh cảnh mức độ nặng nhẹ khác trớc công thuốc chất oxy hoá [52,71] Theo y văn giới tỷ lệ thiếu G6PD nh dạng đột biến gen có khác dân tộc vùng địa lý Châu á, có Việt Nam, đợc xếp vào khu vực có tû lÖ thiÕu G6PD cao (0,5 - 30%) [20,65,82] ë nớc ta, từ năm 70 đến đà có nghiên cứu thiếu G6PD số dân tộc địa phơng, đặc biệt vùng có sốt rét lu hành [14,20, 22,23,24,25] Tuy nhiên công bố dừng lại mức độ tỷ lệ thiếu Từ thực tế này, việc tìm phơng pháp đơn giản, rẻ tiền, dễ dàng phát thiếu G6PD hoàn cảnh, điều kiện để từ phân tích dạng đột biến gen, nâng cao hiểu biết bệnh mức độ gen phân tử, khuyến cáo tai biến xảy cho ngời mang gen bệnh cần thiết Do vậy, mục tiêu đề tài là: Xác định điều kiện thích hợp ứng dụng kỹ thuật tạo vòng Formazan bán định lợng phát thiếu G6PD Xác định tỷ lệ thiÕu G6PD ë mét sè d©n téc ng−êi ViƯt Nam: Ngời Kinh - Hà Nội, Mờng - Hoà Bình, Katu - Huế, Raglai - Khánh Hoà, Tày - Cao Bằng Khánh Hoà, Rục - Quảng Bình ứng dụng kỹ thuật PCR-MPTP tìm dạng đột biến gen G6PD số trờng hợp thuộc dân tộc Nghiệm thu đề tài 1.1 Đóng góp đề tài: - Trên sở kỹ thuật Formazan bán định lợng phát thiếu G6PD phòng thí nghiệm tác giả Hisaichi Fujii cộng sự, đà chuẩn lại số điều kiện để triển khai kỹ thuật phòng thí nghiệm phòng thí nghiệm - cộng đồng - Sử dụng kỹ thuật tạo vòng Formazan bán định lợng đà xác định đợc tỷ lệ thiếu G6PD 6079 ngời thuộc dân tộc Kinh, Mờng, Katu, Raglai, Tày, Rục Việt Nam - Đà phát đợc dạng đột biÕn g©y thiÕu G6PD ë d©n téc ng−êi ViƯt Nam nhãm nghiªn cøu b»ng kü thuËt PCR-MPTP - Đà góp phần nâng cao hiểu biết mức độ gen, ph©n tư cđa bƯnh di trun g©y thiÕu G6PD, bệnh lý enzym hồng cầu hay gặp - Bổ sung vào đồ giới dạng ®ét biÕn g©y thiÕu G6PD cđa ng−êi ViƯt Nam 1.2 Kết cụ thể: - Kỹ thuật tạo vòng Formazan bán định lợng phát thiếu G6PD có độ nhạy, độ đặc hiệu tơng ứng 100% 81,08% so với kỹ thuật định lợng điều kiện xét nghiệm bảo quản mẫu dới ngày (nhiệt ®é 40C), nhiƯt ®é ph¶n øng 250C ®Õn 370C, thêi gian đọc kết sau 24 - Sử dụng kỹ thuật tạo vòng Formazan bán định lợng đà phát đợc tỷ lệ thiếu G6PD chung nhóm nghiên cứu 4,80% (292/6079 ngời), ngời Kinh - Hà Nội 1,59%; Mờng - Hoà Bình 16%; Katu Huế 10,96%; Raglai - Khánh Hoà 2,42%; Tày - Cao Bằng, Khánh Hoà 14,15% ngời Rục - Quảng Bình 18,92% - Tû lƯ thiÕu G6PD cđa nam ë hÇu hết dân tộc cao nữ (p 0,05) - Sử dụng kỹ thuật PCR-MPTP đà phát đợc dạng đột biến gen từ 107 tỉng sè 292 tr−êng hỵp thiÕu G6PD cđa dân tộc nghiên cứu Đó là, G6PD Gaoha exon 2, nucleotid 95A G lµm acid amin 32 His Arg; G6PD Viangchan, Chatham vµ Chinese-5 ë exon nucleotid 871 G A, acid amin 291 Val Met, nucleotid 1003 G A, acid amin 335 Ala Thr vµ nucleotid 1024 C T, acid amin 342 Leu Phe; G6PD Union ë exon 11 nucleotid 1360 C T, acid amin 454Arg Cys; G6PD Canton Kaiping Nghiệm thu đề tài exon 12 nucleotid 1376 G C, 459 Arg Leu, nucleotid 1388 G A, acid amin 463 Arg His; cuèi cïng lµ G6PD Silent ë exon 11 nucleotid 1311 C T nh−ng không làm thay đổi acid amin Tyrosin - Các dạng đột biến gây thiếu G6PD ngời Kinh số dạng đà tìm thấy trừ G6PD Chinese-5; Ngời Mờng gặp chủ yếu G6PD Union (8/18 trờng hợp) không gặp G6PD Gaoha, Chatham Kaiping; Ngời Katu hầu hết G6PD Viangchan/Silent (20/21 trờng hợp) trờng hợp G6PD Union; ngời Raglai gặp dạng G6PD Viangchan (14/18) G6PD Canton (4/18); ngời Tày gặp G6PD Viangchan, Canton Kaiping; ngời Rục có trờng hợp G6PD Viangchan 1.3 Hiệu đào tạo: - Đà đào tạo thành công Thạc sỹ Y học (đạt Xuất sắc) - Đà hoàn thành luận văn tốt nghiệp Bác sỹ Y khoa (đạt Xuất sắc) 1.4 Hiệu kinh tế: - Kỹ thuật tạo vòng Formazan bán định lợng phát thiếu G6PD triển khai phòng thí nghiệm ngày đợc 160 đến 200 mẫu, ngày hôm sau vào đọc kết quả, giá thành 8000 đ/mẫu thay kỹ thuật định lợng 50.000 đ/mẫu - Phát thiếu G6PD thông báo cho ngời bệnh ngời nhà (nếu trẻ nhỏ) qua đến thầy thuốc để phòng tránh nguy tan máu sau sử dụng thuốc, thức ăn hay nhiễm khuẩn; thông báo danh mục loại thuốc cần tránh Hỗ trợ công tác chăm sóc sức khoẻ ban đầu, giảm bớt thiệt hại sức khoẻ, kinh tế cho ngời bệnh cho xà hội - Phân tích dạng đột biến gen thông báo cho ngời mang gen bệnh mức độ nặng nhẹ bệnh qua ®ã l−u ý møc ®é nguy c¬ tai biÕn tiếp xúc với tác nhân oxy hoá 1.5 Hiệu x hội: Từ thực tế điều tra kết nghiên cứu thu đợc đà cho thấy dân tộc ngời, sống biệt lập, có tập quán riêng, giao lu thờng có tỷ lệ thiếu G6PD cao nh dân tộc Rục - Quảng Bình hay Katu - Nam Đông, Huế Rất tiếc điều kiện khai thác quan hệ gia đình ngời thiếu G6PD dân tộc này, nhng với dân tộc Nghiệm thu đề tài G6PD, Creighton, T.E., ed The Encyclopedia of Molecular Medicine New York John Wiley And Sons, Inc, p 1449-1451 57 Ernest Beutler, Tom J Vulliamy (2002) “Hematologically Important Mutations: G6PD”, Blood Cells, Molecules, and Diseases, Vol 28, p 93-103 58 George B Segel (2000) “Enzymatic defects”, Nelson Text Book of Peadiatric, p 1406-1408 59 Hiroyuki Matsuoka et al (2003) “Five different G6PD variants found among 11 G6PD deficient persons in Flores Island, Indonesia”, J Hum Genet 48: p 541-544 60 Hiroyuki Matsuoka et al (2003) “Two cases of G6PD deficient Nepalese belonging to the G6PD Mediterranean-type, not Indian-Pakistan sub-type but MediterraneanMiddle East sub-type”, J Hum Genet 48:275-277 61 Hisaichi Fujii et al (1984) “A New Simple Screening Method for G6PD Deficiency”, ACTA Haematology, JNP, Vol 47, p 185-188 62 I S Tantula et al (1999) “Field Trials of Rapid Test fot G6PD Deficiency in Combination with a Rapid Diagnosis of Malaria”, Tropical Medicine and International Health, Vol 4, No 4, p 245-250 63 I Nuchprayoon, S Sanpavat, S Nuchprayoon (2002) “G6PD mutation in Thailand: G6PD Viangchan (871 G A) is most common deficiency variant in the Thai population”, Human Mutation, Mutation in Brief # 481, dot 10.1002/humu.9010 64 J.S Kaeda et al (1995) “A New glucose-6-phosphat dehydrogenase variant G6PD Orissa (44Gly), is the major polymorphic variant in tribal populations in Ala India”, Am J Hum Genet., 57(6), p.1335-1341 65 Kuni Iwai et al (2001) “Distribution of G6PD Mutations in Southeast Asia”, Hum Genet, Vol108, p 445-449 66 Lucio Luzzatto (1989) “G6PD Deficiency”, The Metabolic Basis of Inherited Disease, p.2237-2254 89 NghiÖm thu ®Ị tµi 66b MG Percio et al (1986) “Isolation of human G6PD cDNA clones Primary structure of the protein and unusual 5’ non-coding region”, Nucleic acids Res 14, p.2511 67 Marguerite Hershcel, Ernest Beutler (2001) “Low G6PD Enzyme Activity Level at The Time of Hemolysis in a Male Neonate with The African Type of Deficiency”, Blood Cells, Molecules, and Diseases, Vol 27, p 918-923 68 Matilde Valeria Ursini, Lorenzo Scalera, Giuseppe Martini (1990) “High Levels of Transcription Driven by A 400 bp Segment of The Human G6PD Promoter”, Biochemical and Biophysical Research Communications, Vol 170, No 3, p 1203-1209 69 Michael Kaplan et al (1999) “Neonatal Hyperbilirubinemia in G6PD deficient Heterozygotes”, American Academy of Pediatrics, Vol 104, No.1, p 68-74 70 Michael Kaplan, Nurit Algur, Cathy Hammermany (2001) “Onset of Jaundice in G6PD Deficient Neonates”, American Academy of Pediatrics, Vol 108, p 956-959 70b Mombo Erik Landry et al (2003) “Human genetic polymorphisms and asymptomatic P.falciparum malaria in Garbonese schoolchidren” Am.J Med Hyg., Vol.2, No 68, p 186-190 71 Nguyen Huu Chan, Nguyen Thi Ha, Phan Thi Ly (1998) “Effects of oxidizing agent on the enzyme activity of G6PD and membrane lipid peoxidation of human and experimental animals erythrocytes”, Revue Pharmacentique - numerol, p 37-44 72 Ramesh Agarwal and A.K Deorari (2002) “Unconjugated Hyperbilirubinemia in Newborns: Current Perspective”, Indian Pediatrics, No 39, p 30-42 73 Rosario Notaro, Adeyinka Afolayan, Lucio Luzzatto (2000) “Human mutation in G6PD reflect evolutionary history”, The FASEB Journal, Vol 14, p 485-494 73b S.A Miller, D.D Dykes et al (1988) “A simple salting out produce for extracting DNA from human nucleated cells”, Nucleic Acids Res., 16, p.1215 74 Seth J Corey, Ernest Beutler (1996) 90 NghiÖm thu đề tài Clinical, Genetic, and Biochemical Features of G6PD West Virgini”, Americnan Journal of Hematology, No 53, p 35-36 75 Sridevi Sukumar, Malay B et al (2004) “Molecular basis of G6PD deficiency in India”, Blood Cells, Molecules and Diseases 33, p.141-145 76 Stanley T.V (1997) “A case of kerniterus in New Zealand”, A Predictable Tragegy Peadiatric Child health 33: p 451-453 77 Takenori Takizawa et al (1987) “A Single Nucleotide Base Transition Is the Basis of the Common Human G6PD Variant A+”, Genomics, Vol 1, p 228-231 78 Taku Shirakawa et al (1997) “A Comprehensive Method to Scan for Point Mutations of The G6PD Deficiency Gene”, Japanese Journal Human Genetics, Vol 42, p 417-423 79 Thomas Efferth, Rainhardt Osieka, Ernest Beutler (2000) “Short Communication Molecular Characterization of a German Variant of G6PD Deficiency (G6PD Aachen)”, Blood Cells, Molecules, and Diseases, Vol 26, p 101-104 80 Tom Vulliamy, Ernest Beutler, Lucio Luzzatto (1993) “Variants of G6PD Are Due To Missense Mutations Spread Throughout The Coding Region of The Gene”, Human Mutation Vol 2, p 159-167 81 William N Valentine et al (1995) “ Pyruvate Kinase and Other Enzyme Deficiency Disorders of The Erythrocyte”, The Metabolic Basis of Inherited Disease, p 2341-2356 82 WHO Scientific group (1967) “Standardization of procedures for the study of G6PD”, WHO technical report series No.366, p.1-53 83 WHO Working group (1989) “Glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency”, Bulletin of the World Health Organization, 67 (6): p.601-611 91 Phô lôc 1: Phiếu điều tra dân tộc khám sức khoẻ I Thông tin chung: Mà số: Họ tên : Dân tộc Giới: : Ngày sinh : Nơi sinh : Quê quán : II Quan hệ: Quan hệ - Ông nội - Bà nội - Ông ngoại - Bà ngoại - Bố - Mẹ Họ tên Năm sinh Dân tộc Quê quán Phụ lục 2: Danh sách trờng hợp thiếu G6PD dạng đột biến TT Họ tên Kết Quan Giới hệ Địa Formazan Định lợng Dạng đột biến Ngời Kinh Nguyễn Văn K M Xóm 3, Mễ Trì Hạ, Từ Liêm, Hà Nội +++ Gaoha Nguyễn Trờng S M TT 7B tổ 25B Thanh Lơng-Hà Nội +++ Gaoha Ngun Th F MĐ Tỉ 42A Th−ỵng Đình-HN ++ 61 Viangchan/Silent Nhữ Nhật A M Ct -nt- +++ Viangchan/Silent L−¬ng Thanh Q M Ct Tổ 29 Khơng Thợng-HN -Mẹ (Nguyễn Thị B) +++ Viangchan/Silent Ngun BÝch H F TËp thĨ ViƯn 108, Hai Bà Trng, Hà Nội +++ Viangchan/Silent Đoàn Thị Bích L F Mẹ Thuỵ Khuê, Tây Hồ, Hà Nội +++ Viangchan/Silent NguyÔn Ngäc H M Ct -nt- +++ Viangchan Đoàn Xuân B M Tập thể Nam Đồng, Đống Đa, Hà Nội +++ Chatham/Silent 10 Nguyễn Thu A F Mẹ 101C6 Nghĩa Tân-Cầu Giấy-HN ++ 48 Union 11 TrÇn Anh M M Ct -nt- +++ Union 12 TrÇn Ngäc T F MĐ 367 Kim Ng−u, Hai Bµ Tr−ng, Hµ Néi ++ 50 Canton/Silent 13 Ngun Hoàng Đ M Ct -nt- +++ Canton 14 Phạm Thu H F MĐ Héi Vị, Hoµn KiÕm, Hµ Néi ++ 45 Canton 15 Ph¹m Anh T M Ct -nt- +++ Canton TT Họ tên Kết Quan Giới hệ Địa Formazan Định lợng Dạng đột biến 16 Nguyễn Thu H F Mẹ TT xe đạp Thèng NhÊt-C¸t Linh-HN ++ 61 Canton 17 Ngun Quang H M Ct -nt- +++ Cacnton 18 NguyÔn Thu H F Mẹ 48/103 Láng Thợng, Nguyễn Chí Thanh, HN ++ 61 Canton 19 Lª Trung H M Ct -nt- +++ 40 Canton 20 Ngun Phóc Tr M P204, ngâ 14 Nguyễn Khuyến - HN +++ 21 Đinh Thị H F Mẹ 355 Nguyễn Văn Cừ, Gia Lâm, Hà Nội ++ 60 Kaiping 22 Ngun §øc A M Ct -nt- +++ Kaiping 23 NguyÔn ChÝ L M Ct -nt- +++ Kaiping 24 Đỗ Nhật A M 20 Trng Trắc-TX Lạng Sơn +++ Kaiping 25 Nguyễn Văn Ch M Đại häc Y Hµ Néi +++ Kaiping 26 Hoµng Thu Ph F MĐ Hµ Néi ++ 61 Sinlent 27 Ngun Duy Th L M Ct -nt- +++ 40 Sinlent 28 NguyÔn Thị Hải Ph F Mẹ 113, ngõ 291 Lạc Long Quân, Tây Hồ, Hà Nội ++ 60 Silent 29 Ngô Đắc Thái D M Ct -nt- +++ 40 Silent 30 Hoàng Thanh Th F Mẹ 108/63 Nghi Tàm, Tây Hồ, Hµ Néi ++ 24 Silent 31 Ngun Vinh Q M Ct -nt- +++ Silent 32 Ct (Lý H−¬ng Th.) M BƯnh viƯn Tõ Dị - TP.HCM ++ Gaoha 7/2A KP2 Tân Thuận Đông, Q.7, TPHCM +++ Viangchan/Silent 33 Ct (Nguyễn Phơng T.) M Canton TT Họ tên Quan Giới hệ Kết Địa Formazan Định lợng Dạng ®ét biÕn 34 Ct (Lª Hång V.) M Ngun An Ninh, Bình Thạnh, Q.1, TPHCM +++ Viangchan/Silent 35 Ct (Đặng Thị H.) M ấp Bình Phú, Long Nhơn Trạch, Đồng Nai +++ Viangchan/Silent 36 Cg (Phạm ánh T.) F 35 Ngô Quang Huy, Thảo Diễn, Q.2, TPHCM ++ Viangchan/Silent 37 Ct (Lê Thị Kim Th.) M Bệnh viện Từ Dị - TP.HCM +++ Viangchan/Silent 38 Cg (Hå ThÞ D.) F Long Rừng, Long Hựu, Tây Cần Đớc, Long An ++ Union 39 Cg (Nguỵ Thụ Thu H.) F 145 A2, LLQ, F.10, Q Tân Bình, TPHCM ++ Canton 40 Ct (Ng Thị H Y.) M 264/4 Lơng Định Của, Q.2, TPHCM +++ Canton 41 Ct (TrÇn Minh H.) M TËp thĨ C«ng ty Xt nhËp khÈu - TP.HCM +++ Kaiping 42 Ct (Nguyễn Thuỳ T.) M Q Tân Bình, TPHCM +++ Kaiping 43 Cg (Trần Thị Kim L.) F BƯnh viƯn Tõ Dị - TP.HCM ++ Silent 44 Cg (Lª Ngäc N.) F BƯnh viƯn Tõ Dị - TP.HCM ++ Silent Ngời Mờng Quách Thị Đ F Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình +++ 17,8 Viangchan Bùi Thị Ch F Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình ++ 48,7 Viangchan Bùi Văn B M Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình +++ 16,4 Viangchan/Silent Quách Thị B F Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình +++ 39,3 Chinese-5 Bùi Văn D M Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình +++ 27,5 Union Hà Thị B F Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình ++ 58,4 Union TT Họ tên Kết Quan Giới hệ Địa Formazan Định lợng Dạng đột biến Bùi Thị N F Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình +++ Union Hà Văn Ph M Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình +++ 7,4 Union Bùi Xuân Th M Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình +++ 4,3 Union 10 Bùi Thị H F Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình +++ Union 11 Bùi Văn Th M Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình +++ Union 12 Bùi Văn S M Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình +++ 8,0 Union 13 Bùi Thị Th F Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình +++ 39,4 Canton 14 Bùi Thị X F Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình +++ 24,5 Canton 15 Bùi Văn Đ M Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình +++ Canton 16 Hà Thị V F Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình ++ 62,2 Silent 17 Bùi Thị D F Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình ++ 100,5 Silent 18 Bùi Thị Th F Xà Xào Báy, Kim Bôi, Hoà Bình ++ 94,2 Silent Ngời Katu Đoàn Văn V M Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent Phan Thị P F Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent Hồ Văn Th M Nam Đông - HuÕ +++ Viangchan/Silent Hå Th−¬ng L M Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent Hồ Văn C M Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent TT Họ tên Kết Quan Giới hệ Địa Formazan Định lợng Dạng đột biến Phạm Thị P F Nam Đông - HuÕ +++ Viangchan/Silent Ph¹m Quèc D M Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent Ngọc Văn Mu M Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent Ngọc Văn Mi M Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent 10 Trần Văn Cr M Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent 11 Lê Thành C M Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent 12 Lê Thành H M Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent 13 Lê Minh Kh M Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent 14 Hồ Văn R M Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent 15 Kan Arai F Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent 16 Nguyễn Ngọc A L M Nam Đông - HuÕ +++ Viangchan/Silent 17 Hå ThÞ D F Nam §«ng - HuÕ +++ Viangchan/Silent 18 Hå Sü § M Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent 19 Nguyễn Thị S F Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent 20 Hồ Thị L F Nam Đông - Huế +++ Viangchan/Silent 21 Lê Thị ánh T F Nam Đông - Huế +++ Union Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà +++ Viangchan Ngời Racley Cao Văn S B M Bố TT Họ tên Cao Thị N Cao Văn Nh Cao Văn L Cao Thị T Cao Văn X A Cao Thị N Cao Thị G Cao Văn T Cao Thị Th Cao Văn C Cao Thị V L Cao Văn Ch Cao Thị Ch Cao D Cao Thị Minh Ph Cao ThÞ Ng Th Cao Minh V 10 11 12 13 14 15 16 17 18 Quan Giới hệ Kết Địa Formazan Định lợng Dạng đột biến F Mẹ Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà ++ Viangchan M Ct Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà +++ Viangchan M Ct Kh¸nh VÜnh - Kh¸nh Trung - Kh¸nh Hoà +++ Viangchan F Cg Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà ++ Viangchan M Bố Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà +++ Viangchan F Mẹ Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà +++ Viangchan F Cg Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà ++ Viangchan M Ct Kh¸nh VÜnh - Kh¸nh Trung - Kh¸nh Hoà +++ Viangchan F Cg Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà +++ Viangchan M Ct Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà +++ Viangchan F Mẹ Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà +++ Viangchan M Ct Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà ++ Viangchan F Cg Kh¸nh VÜnh - Kh¸nh Trung - Kh¸nh Hoà +++ Viangchan M Bố Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà +++ Canton F Mẹ Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà ++ Canton F Cg Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà +++ Canton M Ct Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà +++ Canton TT Họ tên Kết Quan Giới hệ Địa Formazan Định lợng Dạng đột biến Ngời Tày Bế Thị H F Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà ++ Viangchan/Silent Lờng Ngọc Ch M Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà +++ Canton Hoàng Văn S M Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà +++ Canton Hoàng Thị L F Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà ++ Canton Hoàng Văn Ch M Khánh Vĩnh - Khánh Trung - Khánh Hoà +++ Kaiping F Xà Thợng Hoá, Minh Hoá, Quảng Bình +++ Kaiping Ngời Rục Cao thị Th Tỉng céng: 107 tr−êng hỵp Ghi chó: M: Male - Nam F: Female - N÷ Ct: Con trai Cg: Con g¸i Phơ lơc 3: Mét sè thc, thùc phÈm cần tránh với bệnh nhân thiếu G6PD thuốc giảm đau, hạ sốt, an thần - Acetanilid - Acetophenetidin (Phenacetin) - Aminopyrine, Aniline - Antipyrine - Aspirin - Probenecid - Phenothiazine derivatives - Prosenecoio (senemid) - Fenamic acid - Antazoline - Isoniazide - Benzoic acid derivatives Thuèc vÒ tim m¹ch - Procanamide - Quinidine 3.Thc diƯt khn - N2 - Adetylbulfanilamide - - Amino - - Sulfanilylthiazole - Sulfiboxazole (Gantrisin) - Sulfacetamide - Sulfamethoxypyrimidine - Sulfaninamide - Sulfapyridine - Sulfasalazine - Sulfamethoxazol (Gantanol) - Sulfadiazine - Sulfaguanidine - Sulfamerazine - Sulfacytine - Solfoxone - Salioylazulfapyridine - Sulfaoethamide - Thiazolsulfone (Promizole) - Diaminodiphenylsulfone (DDS) thuèc chèng sèt rÐt - Chloroquine - Hydroxychloroquine - Mepacrine (quinacrine) - Pamaquine - Pentaquine - Primaquine - quinine - Quinocide - Quamquine - Quinolylnise Thuèc kh¸ng khuÈn - Chloramphenicol - Cco-trimoxazole - Furazolidone - Furmethonol - Nalidixic acid - Neoarsphenamine - Nitrofurantoin - Nitrofurazone - Para-aminosalicylic acid Mét sè lo¹i thuèc kh¸c - Aalpha-methyldopa - Ascorbic acid - Phenylhydrazine - Dimercaprol (BAL) - Hydralazine - Toluidine blue - Trinitrotoluene - Urate oxidase - Vitamin K (water soluble) Thùc phÈm - Rợu vang đỏ - Legumes ( họ đậu), sản phẩm làm từ đậu tơng,đậu nành - Blueberries ( hä qt) - Tonic water (n−íc kho¸ng cã pha hơng vị Qinine) - Long nÃo - Các loại đậu fava Phụ lục 4: Danh sách công trình nghiên cứu I Các báo khoa học: Phân tích dạng đột biến gen gây thiếu hụt G6PD số bệnh nhân thuộc tỉnh Hoà Bình Hà Nội - Nguyễn Thị Ngọc Dao, Trần Thị Chính, Kaoru Nishiyama, Taku Shirakawa CS - Hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc 12/1999, tr.1157-1164 Nghiên cứu phơng pháp phát nhanh thiếu hụt G6PD hồng cầu ngời - Lý Thị Bích Thuỷ, Nguyễn Trờng Giang, Trần Thị Chính CS - Hội nghị Khoa học Hoá sinh Y Dợc 08/2001, tr.94-99 Thiếu hụt G6PD kháng nguyên HLA lớp II dân tộc Mờng, Kinh- Hoà Bình, Hà Nội -Việt Nam - Trần Thị Chính, Nguyễn Thị Ngọc Dao CS - Tạp chí Nghiªn cøu Y häc (2002), TËp 20, sè 4, tr 1015 Triển khai phơng pháp để sàng lọc tìm điểm đột biến bệnh nhân thiếu hụt G6PD ë ViƯn Qu©n Y 108” - Ngun Tr−êng Giang, Quách Xuân Hinh, Trần Thị Chính -Hội nghị Khoa học Hoá sinh Y Dợc 08/2002, tr.17-21 Thiếu hụt G6PD, dạng đột biến gen HLA lớp II dân tộc Mờng, Kinh Hoà Bình Hà Nội, Việt Nam. - Trần Thị Chính, Nguyễn Thị Ngọc Dao CS., Hội nghị Sinh học phân tử Hoá sinh toàn quốc (2003), tr 262-267 6.Phát thiếu hụt G6PD phân tích dạng đột biến gen số trờng hợp thuộc dân tộc Kinh, Mờng, Raclei Tày Hà Nội, Hoà Bình Khánh Hoà - Trần Thị Chính, Nguyễn Thị Ngọc Dao, Huỳnh Thị Diễm Thuý CS., Tạp chÝ Nghiªn cøu y häc (2003) TËp 23, 3, tr 99-104 Các dạng đột biến gen G6PD số trờng hợp thuộc dân tộc Mờng, Raclei, Tày, Katu Kinh Hoà Bình, Khánh Hoà, Huế Hà Nội - Nguyễn Thị Ngọc Dao, Trần Thị Chính CS., Báo cáo Khoa học Hội nghị toàn quốc lần thứ 2, NCCB sinh học, nông nghiệp, y học (2003), tr 858-860 Tính đa dạng HLA-DRB1 DQB1 bệnh thiếu G6PD sắc tộc Mờng Hoà Bình - Việt Nam - Vũ Triệu An, Trần Thị Chính CS., Báo cáo Khoa học Hội nghị toàn quốc lần thứ 2, NCCB sinh học, nông nghiệp, y học (2003), tr 805-808 Dạng đột biến gen gây thiếu hụt G6PD hai cặp mẹ ngời Kinh Hà Nội - Huỳnh Thị Diễm Thuý, Trần Thị Chính, Nguyễn Thị Ngọc Dao, Tạp chí Nghiên cứu y häc, (2004) TËp 32, 6, tr 1-5 II C¸c luËn văn: Luận văn tốt nghiệp Thạc sỹ: - Nguyễn Minh Hùng (2004): Xác định tỷ lệ thiếu G6PD tìm hiểu mối liên quan với bệnh sốt rét dân tộc Raglai xà Khánh Trung - Khánh Hoà Vân Kiều, xà Thanh - Quảng Trị, Luận văn Thạc sỹ y học, trờng Đại học Y Hà Nội - Huỳnh Thị Diễm Thuý (2004): Phát thiếu hụt enzym G6PD dạng đột biến gen số trờng hợp trẻ sơ sinh ngời Kinh sinh Hà Nội, Luận văn Thạc sỹ Y học, trờng Đại học Y Hà Nội Luận văn tốt nghiệp Đại học: - Nguyễn Thu Hơng (2005): Phát tần suất thiếu hụt G6PD dân tộc Tày dân tộc Nùng kỹ thuật Formazan bán định lợng, Khoá luận tốt nghiệp Bác sỹ đa khoa, trờng Đại häc Y Hµ Néi