XÉT NGHHIEM hóa SINH c b n

Tóm tắt - • Acid min: – – Cấu tạo, phân loại Chuyển hóa acid amin • • Tổng hợp acid amin: nhóm a.a, sơ đồ tổng hợp nhóm, điều hòa tổng hợp a.a Thoái hóa acid amin: - trình khử amin oxi hóa, - trao đổi amin - Số phận NH3 • Protein: – – Cấu tạo (cấu tạo bậc 1, bâc 2, bậc 3, bậc 4) Vai trò chức protein a.a bán cần thiết với trẻ em Phân loại protein Cthh Protein Protein Protein tạp albumins nucleoproteins globulins glycoprteins glutelins mucoproteins prolanin phosphoproteins albuminoids chromoproteins histones lipoproteins metalloproteins 1.1 Thoái hóa chung acid amin 1.1.1 Khử amin  Là trình tách -NH2 khỏi a.a Sản phẩm chung NH3 (1) Khử amin thủy phân R - CH - COOH +H 2O NH3 (2) Khử amin hydro (hydro): R - CH - COOH OH +2H NH2 (3) KHử amin nội phân tử R - CH=CH - COOH + NH3 (acid bÐo kh«ng b·o hoµ) NH2 (4) Khử amin oxi hóa R CH COOH - NH2 R - CH - COOH + NH3 (acid bÐo) R - CH - COOH - R - CH - COOH + NH3 [O] R - CO - COOH + NH3 (α-ceto acid) Quá trình khử amin oxi hóa: trình acid amin tách nhóm amin chuyển thành α cetonic tương ứng PƯ diễn bào tương - Khử amin oxi hóa acid amin thông thường: L acid amin acid imin + acid α cetonic L acid amin oxidase - Đa số enzym xúc tác phản ứng amin oxi hóa có coenzyme flavin  hoạt động yếu PƯ diễn ty thể - Khử amin oxi hóa glutamat: ATP Glutamat imin glutamat + α ceto glutamat Glutamat dehydrogenase (GLDH) - Enzyme L-glutamat dehydrogenase (GLDH) có coenzym NAD/NADP hoạt động mạnh GLDH: - Có ty thể tế bào gan Là enzyme dị lập thể: Coenzyme NAD NADP Xét nghiệm GLDH  xác định mức độ hủy hoạt gan  - Quá trình trao đổi amin: Là trình biến đổi cặp a.a 1cặp α-cetonic acid nhờ enzym transaminase (CoE- Vita B6) xúc tác chuyển amin (NH2) acid amin + acid α cetonic acid α cetonic Transaminase -Trong thể trình trao đổi nhóm amin xảy mạnh -Chất nhận chủ yếu (acid α cetonic) chủ yếu acid α glutaric - enzyme transaminase chủ yếu là: - GOT: gultamat oxaloacetate transaminase - GPT: Glutamat pyruvat transaminase + acid amin Liên quan trình khử trao đổi acid amin: - Do hoạt tính cao transaminase  chất nhận chủ yếu acid α glutaric nên nhóm amin a.a khác chuyển phần lớn cho glutamat - Glutamat dehydrogenase (GLDH) enzyme có tốc độ cao có lợi lượng (giải phóng ATP) - L acid amin oxydase hoạt động yếu  L a.a khử amin gián tiếp qua glutamat Tổng hợp acid amin: nhóm a.a, sơ đồ tổng hợp nhóm, điều hòa tổng hợp a.a • acid amin tổng hợp từ khung carbon sản phẩm đường đường phân • enzyme xúc tác trình tổng hợp acid amin threonin enzyme dị lập thể • threonin dehydratase Quá trình tổng hợp acid amin thường điều hòa theo feedback: Khi sản phẩm cuối ketobutyrat trình nồng độ lớn, chất ức chế phản ứng isoleucin Điều hòa enzyme threonin dehydratase tổng hợp isoleucin, leucin 10 Cấu trúc hemoglobin 66 Cấu trúc hemoglobin  Hemoglobin có máu người : 15g/100ml  Là phân tử tồn dạng tetramer  Có nhóm ngoại hem  Khối lượng phân tử đơn vị (1 pr + hem) = 17000  Khối lượng phân tử Hem =??? 67 Phần protein hemoglobin - Được cấu tạo từ chuỗi polypeptid loại cấu trúc bậc khác Ở người trưởng thành; HbA1: α2β2 - Trong α có 141 a.a chuỗi β có 146 a.a HbA2: α2δ2 Ở trẻ sơ sinh HbF: α2γ2 Ở bào thai HbG: ζ γ2 HbP: ζ 2ξ 68  Hemoglobin sản xuất từ tuần thứ thai kì dạng HbG HbF Sau chuyển thành dạng HbF giai đoạn gần sinh   Khi sinh HbF dần bị chỗ HbA SỰ KHÁC NHAU CỦA Hb máu trẻ sơ sinh người bình thường khác chuỗi δ, γ, β 69 Gene tổng hợp Polypeptid cho Hemoglobin Gene mã hóa cho loại chuỗi α nằm NST só 16 Gene mã hóa cho loạichuỗi β nằm NST só 11 70 Sự liên kết chuỗi polypeptid phân tử HbA1 (α2β2) - Nhóm COO- tận chuỗi α1 + NH3 tận α2 - Arg (141) α1 liên kết với Asp(126) α2 - COO- tận β1 liên kết với Lys(40) α2 - Imidazol His(146) liên kết với Asp (94) chuỗi β1và β2 - Bằng liên kết tận COO- bị khóa chặt 71 Cấu tạo nhân hem Hem = Porphyrin + Fe Fe liên kết với Porphyrin nhờ liên kết qua nguyên tử N Fe liên kết với Histon đoạn xoắn F8 Pr (liên kết số 5) Có vị trí liên kết với O (liên kết số 6) Histon đoạn xoăn F8 chuỗi Pr 72 DPG (2-3 diphosphoglycerate) - Có mặt hồng cầu làm ảnh hưởng đến lực HB - DPG giảm lực Hb theo phản ứng: - Hb-DPG+4O2 Hb(O2)2 + DPG 73 Tóm tắt: cấu trúc Hemoglobin Protein Hem Vị trí liên kết O 74 Tính chất Myoglobin Hemoglobin Kết hợp với khí: Oxy CO2 CO Oxy hóa Hemoglobin Tính chất enzyme Peroxydase Catalase 75 Tính chất kết hợp với Oxy Myoglobin: có vị trí gắn Oxy có lực cao với Oxy Mb+ O2 ↔ MbO2 Hemoglobin: - có vị trí gắn oxy tiểu phần Ái lực tiểu phần tương đối thấp tăng đột biến sau phân tử O2 liên kết (500 lần) - Có hợp tác tiểu phần Hb có thay đổi cấu hình: Hb có gắn Oxy có dạng dãn(R) Hb không gắn Oxy có dạng căng (T) - Do áp lực O2 lớn nên cấu hình dạng R nhiều dạng T 76 Hb+ O2 ↔ Hb(O2)4+ XH+ Quá trình kết hợp O Hemoglobin tạo nên lượng proton H+  kích thích chuyển Hemoglobin dạng R thành dạng T giúp trình điều hòa vận chuyển O từ phổi đến tổ chức Sự kết hợp HbO phụ thuộc nhiều vào áp suất riêng phần O2 (PO2) 77 Tính chất kết hợp với CO2 Phụ thuộc vào PCO2 CO2 kết hợp với –NH2 tự đo chuỗi polypeptid tạo thành dẫn xuất carbamin R- NH2 + CO2 ↔ R- NH-COOH + HbO2 + H +CO2↔ HHbCO2 + CO2 78 Tính chất kết hợp với CO Hb + CO HbCO(bền vững cao) Hb gắn với CO nhân hem làm giảm lực O (vì CO có lực cao O 210 lần) Sự oxy hóa hemoglobin Môt số chất oxy hóa tác dụng với Fe Hem tạo thành meth Hb (Không có khả gắn O) Met Hb vó thể bị phân hủy enzyme số chất chống oxy hóa nhử vitamin C 79 80