tong quan ve nam ki sinh trung

Bài 1: VI NẤM Y HỌC MỤC TIÊU Sau học xong, học viên có khả năng: Nhận dạng hình thể số nấm men, nấm sợi Thực kỹ thuật lấy bệnh phẩm xét nghiệm vi nấm Trình bày kỹ thuật nhuộm soi vi nấm Tiến hành kỹ thuật soi tươi trực tiếp, nhuộm soi (Gram) tìm vi nấm Nhận định kết xác NỘI DUNG Quan sát hình thể số loại vi nấm y học Thực kỹ thuật lấy bệnh phẩm xét nghiệm vi nấm y học Quy trình xét nghiệm vi nấm y học Thực kỹ thuật soi tươi tìm vi nấm y học A Hình thể vi nấm • Cấu tạo: phận dinh dưỡng phận sinh sản • Căn vào phận dinh dưỡng, nấm chia thành loại: nấm men nấm sợi A Hình thể vi nấm Nấm men 1.1 Tế bào nấm men - Cấu tạo đơn bào - Hình cầu hay trái xoan - Kích thước: đường kính trung bình - 6µm 1.2 Bào tử Nấm men sinh bào tử chồi (búp) Candida A Hình thể vi nấm Nấm men Cryptococcus – neoformans A Hình thể vi nấm Nấm sợi 2.1 Sợi nấm  Cấu tạo đơn bào đa bào  Những sợi nấm hình ống, dài, mảnh, phân nhánh, có vách ngăn vách ngăn  Kích thước: đường kính từ - 10µm A Hình thể vi nấm Nấm sợi A Hình thể vi nấm Nấm sợi 2.2 Bào tử  Bào tử đốt  Bào tử chồi (bào tử mầm)  Bào tử áo (bào tử màng dày)  Bào tử thoi  Bào tử đính: hình chai, hình chổi, hình hoa cúc  Bào tử phấn A Hình thể vi nấm Bào tử đốt Coccidioides immitis II Soi tươi – nấm lang ben - Nấm thành đám nhỏ gồm có sợi tơ nấm tế bào nấm men - Tơ sợi nấm ngắn cong, phân nhánh chữ S, V hay Y - Tế bào nấm men hạt tròn thành đám 10 -30 tế bào II Soi tươi - Candida Thấy nhiều tế bào nấm men sợi tơ giả II Soi tươi - Candida II Soi tươi - ASPERGILLUS - Phân nhánh, phân vách, nhánh phụ tạo với nhánh góc 450 - Sau nuôi cấy thấy bào tử đính hình hóa cúc II Nhuộm soi PP nhuộm Áp dụng Kết Gram Dịch âm đạo, mủ, đờm, phết họng, cặn nước tiểu… Nấm thường bắt màu gram (+) Giêmsa Máu, tủy xương Nhuộm mực tàu Tìm vi nấm có năng, đặc biệt Cryptococcus neoformans Mực tàu không thấm vào nang tạo khoảng trống quanh tê bào vi nâm Nhuộm kháng acid Ziehl Neelse Tìm Norcardia Nocardia sp bắt màu đỏ Nhuộm PAS Mô bệnh phẩm sinh thiết Vi nấm bắt màu đỏ tím Nhuộm xanh methylen Dịch âm đạo, mủ, đờm, phết họng, cặn nước tiểu… Nấm bắt màu xanh II Nhuộm soi - Gram II Nhuộm soi - Giemsa - Dung dịch giemsa 10%: nhuộm - 15 phút - Dung dịch giemsa 3%: Nhuộm 45 phút II Nhuộm soi – Mực tàu - Đánh dấu tiêu - Nhỏ giọt mực tàu lên lam kính - Hòa bệnh phẩm vào mực tàu - Đậy lamen - Soi KHV x40 II Nhuộm soi – Ziehl Neelse Dàn bệnh phẩm Cố định nhiệt Phủ fuchsin 0,3%, hơ nóng lần cho bốc (không sôi) Rửa nước Tẩy màu cồn acid HCl 3% Rửa nước Phủ xanh methylen/ 1ph Rửa nước để khô Soi KHV Đánh giá kết - Soi có sợi nấm, đoạn sợi nấm có bào tử nấm - Hoặc: không thấy sợi nấm, đoạn sợi nấm không thấy có bào tử nấm - Trường hợp cần xác định loài nấm phải nuôi cấy phân lập định danh loài nấm III Cấy nấm định danh Mục đích : Cho biết xác bệnh loại vi nấm Môi trường cấy nấm - Thường dùng thạch Sabouraud BHI - Để chống tạp nhiễm bổ sung kháng sinh Chloramphenicol, Gentamicin, Penicillin; Streptomycin; Ciprofloxacin III Cấy nấm định danh Kỹ thuật cấy - Bệnh phẩm ướt, cặn lắng dịch… cấy phân vùng vi khuẩn - Bệnh phầm khô (mảnh da, tóc, móng…): dìm bệnh phẩm vào môi trường nuôi cấy Mỗi bệnh phẩm dùng 3-5 ống môi trường - Các bệnh phẩm vô trùng: Máu, dịch não tủy… tăng sinh BHI/ thạch máu trước cấy vào Sabouraud III Cấy nấm định danh Nhiệt dộ thời gian ủ - Ủ 25 -30 độ C/ TB tuần Với nấm men ngày Nấm da 1,5 – tháng - Kết luân (-) sau tháng Định danh Mội số điểm lưu ý Ý nghĩa việc tìm thấy Candida bệnh phẩm - Nếu bệnh phẩm có tính tạp nhiễm niêm mạc miệng, đờm, phân, dịch âm đạo….chỉ có ý nghĩa bệnh tháy nhiều sợi tơ nâm giả tế bào nấm men  soi tươi nhuộm soi có ý nghĩa cấy - Nếu bệnh phẩm máu, dịch não tủy, mủ từ ổ áp xe… khảo sát trực tiếp hay cấy có ý nghĩa chẩn đoán Xin trân trọng cảm ơn! [...]... nghiệm vi nấm y học 1 Các loại bệnh phẩm thông thường: da, tóc, móng, đờm, máu… 2 Các loại bệnh phẩm can thiệp: dịch não tủy, mô sinh thiết, dịch âm đạo, giác mạc… I Kỹ thuật lấy bệnh phẩm xét nghiệm vi nấm y học – Chuẩn bị 1 Dụng cụ: Dao cạo, kéo, kẹp, tăm bông, ống nghiệm, bơm kim tiêm, lam kính, đèn cồn… 2 Hóa chất: Cồn 70, cồn iod 3 Bệnh nhân Ngừng dùng thuốc điều trị nấm ít nhất 1-2 tuần I Kỹ thuật... những sợi tóc mất bóng, xốp, mất màu, dễ gẫy, sợi tóc có những hạt đen hay trắng bám chặt vào sợi tóc, hoặc những sợi tóc phát huỳnh quang dưới ánh sáng đèn Wood Cắt thành đoạn 1 cm ` I Kỹ thuật lấy bệnh phẩm xét nghiệm vi nấm y học 3 Bệnh phẩm dịch âm đạo - Rửa sạch bộ phân sinh dục bằng nước, thấm khô - Đưa mỏ vịt vào âm đạo, dùng que tăm bông lấy dịch ở thành sau, cùng đồ âm đạo I Kỹ thuật lấy bệnh... màu gram (+) Giêmsa Máu, tủy xương Nhuộm mực tàu Tìm vi nấm có năng, đặc biệt Cryptococcus neoformans Mực tàu không thấm vào nang tạo khoảng trống quanh tê bào vi nâm Nhuộm kháng acid Ziehl Neelse Tìm Norcardia Nocardia sp bắt màu đỏ Nhuộm PAS Mô bệnh phẩm sinh thiết Vi nấm bắt màu đỏ tím Nhuộm xanh methylen Dịch âm đạo, mủ, đờm, phết họng, cặn nước tiểu… Nấm bắt màu xanh II Nhuộm soi - Gram ... Đánh dấu tiêu bản + Nhỏ 1 giọt NaCl 0,9% Hoà đều bệnh phẩm + Đậy lamen Soi KHV x10 và x40 II Soi tươi– KOH 2 Soi tươi với KOH 10% - 30% - Áp dụng: Bệnh phẩm rắn – đặc như: da, móng, đờm, mủ, tóc, mẩu mô sinh thiết… - Tiến hành + Đánh dấu tiêu bản + Nhỏ 1 giọt KOH 10 – 30% Để bệnh phẩm lên + Đậy lamen Để yên 15 – 30ph/ hơ nóng nhẹ vài phút + Soi KHV x10 và x40 II Soi tươi – nấm da, móng - Sợi tơ nấm phân