Nghiên cứu bào chế viên kali clorid 600 mg phóng thích kéo dài

THUỐC PHÓNG THÍCH HOẠT CHẤT KÉO DÀI Thuốc PTKD là những chế phẩm có khả năng kéo dài quá trình giải phóng và hấp thu dược chất từ dạng thuốc nhằm duy trì nồng độ thuốc trong máu trong m

LÊ THỊ THU VÂN

NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN KALI CLORID 600 mg

PHÓNG THÍCH KÉO DÀI

Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ DƯỢC PHẨM

Mã số: 62.73.01.01

LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC

Người hướng dẫn khoa học

1 GS TS Lê Quan Nghiệm

2 PGS.TS Hoàng Minh Châu

TP HỒ CHÍ MINH – Năm 2011

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi Các kết quả trong luận án này là trung thực và chưa từng được công bố trong bất kỳ công trình nào khác

MỤC LỤC

Trang

Trang phụ bìa i

Lời cam đoan ii

Mục lục iii

Danh mục các ký hiệu, các chữ viết tắt iv

Danh mục các bảng v

Danh mục các hình ix

ĐẶT VẤN ĐỀ 1

Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Kali clorid .3

1.2 Thuốc phóng thích hoạt chất kéo dài 8

1.3 Nghiên cứu tương đương sinh học bằng phương pháp đo lượng thuốc bài tiết trong nước tiểu .22

Chương 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng 31

2.2 Phương pháp nghiên cứu 32

Chương 3 KẾT QUẢ 3.1 Nghiên cứu bào chế 45

3.2 Nghiên cứu nâng cấp cỡ lô .62

3.3 Xây dựng tiêu chuẩn và nghiên cứu độ ổn định .75

3.4 Nghiên cứu tương đương sinh học 82

Chương 4 BÀN LUẬN 4.1 Về nghiên cứu bào chế viên kali clorid 600 mg phóng thích kéo dài 114

4.2 Về xây dựng tiêu chuẩn 120

4.3 Về độ ổn định của viên bao phim kali clorid 600 mg phóng thích kéo dài 122

4.4 Về đánh giá tương đương sinh học viên bao phim kali clorid 600 mg phóng thích kéo dài .123

KẾT LUẬN 129

KIẾN NGHỊ 130 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ

TÀI LIỆU THAM KHẢO

PHỤ LỤC

AAS Quang phổ hấp thụ nguyên tử (Atomic Absorption Spectrometry)

Ae Lượng dược chất bài tiết (Amount excreted)

AES Quang phổ phát xạ nguyên tử (Atomic Emission Spectrometry)

AUC Diện tích dưới đường cong (Area Under the Curve)

BMI Chỉ số khối cơ thể (Body Mass Index)

BP Dược điển Anh (Bristish Pharmacopeia)

CDER Trung tâm nghiên cứu và đánh giá thuốc

(Center For Drug Evaluation and Research)

CI Khoảng tin cậy (Confidence Interval)

CV Hệ số phân tán (Coefficient of variation)

DĐVN Dược điển Việt Nam

EC Ethyl cellulose

FDA Cơ quan quản lý thực và dược phẩm (Food and Drug Administration) GHCB Giới hạn cảnh báo

GHD Giới hạn dưới

GHT Giới hạn trên

HPC Hydroxypropyl cellulose

HPMC Hydroxypropyl methyl cellulose

ISE Điện cực chọn lọc ion (Ion Selective Electrode)

NTN Người tình nguyện

PEG Poly ethylen glycol

PTKD Phóng thích kéo dài

R Tốc độ bài tiết (Rate of Excretion)

RSD Độ lệch chuẩn tương đối (Relative Standard Deviation)

SD Độ lệch chuẩn (Standard Deviation)

SEM Kính hiển vi điện tử quét (Scanner Electron Microscope)

DANH MỤC CÁC BẢNG

Trang

Bảng 2.1 Nhu cầu dinh dưỡng khuyến nghị 38

Bảng 2.2 Bảng thu thập mẫu nước tiểu của người tình nguyện ở từng phân đoạn 39

Bảng 3.1 Tương quan giữa thể tích dung dịch chuẩn độ (V; ml) và điện thế dung dịch (E; mV) 44

Bảng 3.2 Kết quả xác định độ chính xác của phương pháp định lượng 46

Bảng 3.3 Kết quả xác định độ đúng của phương pháp định lượng 46

Bảng 3.4 Kết quả định lượng của thuốc đối chiếu 47

Bảng 3.5 Kết quả thử nghiệm độ hoà tan của viên Kaleorid® LP 600 mg 47

Bảng 3.6 Các công thức sàng lọc tá dược tạo khung 49

Bảng 3.7 Kết quả thử nghiệm độ hoà tan của các viên nén công thức I – VII 50

Bảng 3.8 Thành phần của các công thức CT1 - CT5 51

Bảng 3.9 Các thông số kỹ thuật và chất lượng của viên từ công thức CT1-CT5 51

Bảng 3.10 Kết quả thử nghiệm độ hoà tan của viên điều chế từ CT1– CT5 51

Bảng 3.11 Các thông số kỹ thuật của viên nhân kali clorid 600 mg 52

Bảng 3.12 Độ hoà tan của viên kali clorid được bao với Eudragit RL 100 54

Bảng 3.13 Các biến độc lập 56

Bảng 3.14 Các biến phụ thuộc 56

Bảng 3.15 Độ hoà tan viên bao của các thí nghiệm 1-8 với chất bao ethyl cellulose 59

Bảng 3.16 Các hệ số bi và mức ý nghĩa 57

Bảng 3.17 Độ hoà tan viên bao của các thí nghiệm 9-12 với chất bao ethyl cellulose 59

Bảng 3.18 Kết quả định lượng kali clorid trong hỗn hợp bột

theo thời gian trộn 63

Bảng 3.19 Tốc độ chảy của các mẫu bột lấy từ lô thăm dò 63

Bảng 3.20 Các giới hạn của biểu đồ kiểm soát phạm vi quan sát và kiểm soát khối lượng trung bình được ước tính từ lô thăm dò 64

Bảng 3.21 Kết quả khảo sát tốc độ chảy của khối hạt sau khi trộn hoàn tất 65

Bảng 3.22 Kết quả theo dõi khối lượng viên trong quá trình dập viên 65

Bảng 3.23 Kết quả kiểm tra độ cứng của viên nén 3 lô nâng cấp 69

Bảng 3.24 Kết quả kiểm tra độ mài mòn của viên nén 3 lô nâng cấp 70

Bảng 3.25 Kết quả định lượng các viên nhân lô 1, lô 2 và lô 3 70

Bảng 3.26 Kết quả thử độ hoà tan của viên nhân 3 lô nâng cấp 71

Bảng 3.27 So sánh các số liệu phóng thích hoạt chất từ viên nén của 3 lô 71

Bảng 3.28 Các thông số cơ bản của qui trình bao phim 72

Bảng 3.29 Tỉ lệ phần trăm kali clorid phóng thích từ viên bao phim so với tiêu chuẩn Dược điển Anh 74

Bảng 3.30 Kết quả so sánh các số liệu từ thử nghiệm độ hoà tan của 3 lô 75

Bảng 3.31 Hình thức cảm quan của viên Kali clorid phóng thích kéo dài trong điều kiện bảo quản ở nhiệt độ 40 ± 2oC và độ ẩm tương đối 75 ± 5% 77

Bảng 3.32 Kết quả theo dõi hàm lượng theo thời gian trong điều kiện bảo quản thuốc ở nhiệt độ 40 ± 2oC và độ ẩm tương đối 75 ± 5% 78

Bảng 3.33 Kết quả thử độ hoà tan của thuốc viên Kali clorid phóng thích kéo dài bảo quản ở nhiệt độ 40 ± 20C và độ ẩm tương đối 75 ± 5% 79

Bảng 3.34 Hàm lượng thuốc theo thời gian trong điều kiện bảo quản ở nhiệt độ 30 ± 20C và độ ẩm tương đối 75 ± 5% 80

quản ở nhiệt độ 30 ± 2 C và độ ẩm tương đối 75 ± 5% 81

Bảng 3.36 Kết quả khảo sát độ đúng và độ chính xác giữa các lần đo trong ngày 86

Bảng 3.37 Kết quả khảo sát độ đúng và độ chính xác giữa các lần đo khác ngày 86

Bảng 3.38 Kết quả kiểm tra sức khỏe tổng quát của 24 người tình nguyện 88

Bảng 3.39 Các thông số sinh học của 24 người tình nguyện 89

Bảng 3.40 Đánh giá mức đáp ứng nhu cầu dinh dưỡng và đặc điểm cân đối trong khẩu phần ăn của người tình nguyện 90

Bảng 3.41 Thiết kế thử nghiệm theo mô hình chéo đôi, 2 thuốc, 2 trình tự, 2 thời kỳ 91

Bảng 3.42 Lượng ion kali bài tiết trước khi uống thuốc thử nghiệm 93

Bảng 3.43 Lượng ion kali bài tiết truớc khi uống thuốc đối chiếu 94

Bảng 3.44 So sánh tốc độ bài tiết ion kali trước khi uống thuốc 95

Bảng 3.45 Lượng ion kali bài tiết trong các phân đoạn nước tiểu 0-24 giờ sau khi uống thuốc thử nghiệm 97

Bảng 3.46 Lượng ion kali bài tiết trong các phân đoạn nước tiểu 0-24 giờ sau khi uống thuốc đối chiếu 98

Bảng 3.47 Lượng thuốc bài tiết trong khoảng 0-24 giờ (Ae0-24) ở người tình nguyện uống thuốc thử nghiệm 99

Bảng 3.48 Lượng thuốc bài tiết trong khoảng 0-24 giờ (Ae0-24) ở người tình nguyện uống thuốc đối chiếu 100

Bảng 3.49 Lượng ion kali bài tiết trong các phân đoạn nước tiểu 24-48 giờ sau khi uống thuốc thử nghiệm 103

Bảng 3.50 Lượng ion kali bài tiết trong các phân đoạn nước tiểu 24-48 giờ sau khi uống thuốc đối chiếu 104

của thuốc thử nghiệm 105 Bảng 3.52 Lượng thuốc bài tiết trong khoảng 24-48 giờ (Ae24-48)

của thuốc đối chiếu 106 Bảng 3.53 Tốc độ bài tiết của thuốc thử nghiệm 107 Bảng 3.54 Tốc độ bài tiết của thuốc đối chiếu 108 Bảng 3.55 Bảng số liệu tính hằng số tốc độ bài tiết (Kel)

của thuốc thử nghiệm 110 Bảng 3.56 Bảng số liệu tính hằng số tốc độ bài tiết (Kel)

của thuốc đối chiếu 111

DANH MỤC CÁC HÌNH

Trang Hình 1.1 Cấu trúc phân tử của ethyl cellulose 14 Hình 1.2 Khung căn bản của của các Eudragit 16 Hình 1.3 Đồ thị lượng thuốc bài tiết tích luỹ trong nước tiểu 25 Hình 1.4 Dạng đồ thị của tốc độ bài tiết thuốc trong nước tiểu theo thời gian 26 Hình 2.1 Sơ đồ tóm tắt các giai đoạn sản xuất viên kali clorid 600 mg

phóng thích kéo dài 36 Hình 3.1 Đồ thị biễu diễn sự thay đổi điện thế (E; mV)

theo thể tích dung dịch chuẩn độ (V; ml) 46 Hình 3.2 Đồ thị đạo hàm bậc nhất của hàm số E = f(V) 46 Hình 3.3 Đường biểu diễn phóng thích hoạt chất từ 3 lô thuốc đối chiếu 49 Hình 3.4 Đồ thị phóng thích hoạt chất từ thuốc đối chiếu

theo mô hình Higuchi 49 Hình 3.5 Aûnh hưởng của tỉ lệ triethyl citrat và tỉ lệ lớp bao Eudragit RL 100

đến tốc độ phóng thích dược chất 55 Hình 3.6 Hình cắt ngang viên được bao bằng Eudragit RL 100

dưới kính hiển vi điện tử quét (x100) 55 Hình 3.7 Hình cắt ngang viên được bao bằng ethyl cellulose

dưới kính hiển vi điện tử quét (x100) 60 Hình 3.8 Hình cắt ngang màng bao ethyl cellulose

dưới kính hiển vi điện tử quét (x1000) 60 Hình 3.9 Đường biểu diễn phóng thích hoạt chất từ viên kali clorid

được bao với ethyl cellulose theo mô hình Higuchi 61

dưới kính hiển vi điện tử quét (x1000) 61

Hình 3.11 Bề mặt viên bao kali clorid phóng thích kéo dài sau khi thử nghiệm hoà tan (x10.000) 62

Hình 3.12 Biểu đồ kiểm soát phạm vi quan sát thực hiện trên lô 1 66

Hình 3.13 Biểu đồ kiểm soát khối lượng trung bình thực hiện trên lô 1 66

Hình 3.14 Biểu đồ kiểm soát phạm vi quan sát thực hiện trên lô 2 67

Hình 3.15 Biểu đồ kiểm soát khối lượng trung bình thực hiện trên lô 2 67

Hình 3.16 Biểu đồ kiểm soát phạm vi quan sát thực hiện trên lô 3 68

Hình 3.17 Biểu đồ kiểm soát khối lượng trung bình thực hiện trên lô 3 68

Hình 3.18 Đường biểu diễn phóng thích hoạt chất từ viên nhân của các lô 1, 2 và 3 71

Hình 3.19 Diễn biến các thông số trong giai đoạn bao phóng thích kéo dài lô 1 73

Hình 3.20 Diễn biến các thông số trong giai đoạn bao phóng thích kéo dài lô 2 73

Hình 3.21 Diễn biến các thông số trong giai đoạn bao phóng thích kéo dài lô 3 74

Hình 3.22 Đồ thị phóng thích hoạt chất từ viên bao của các lô 15 kg 75

Hình 3.23 Hàm lượng kali clorid trong thuốc so với ban đầu trong điều kiện bảo quản ở nhiệt độ 40 ± 2oC và độ ẩm tương đối 75 ± 5% 77

Hình 3.24 Hàm lượng kali clorid trong thuốc so với ban đầu trong điều kiện

bảo quản dài hạn 81

Hình 3.25 Đồ thị so sánh lượng kali clorid phóng thích in vitro của thuốc thử nghiệm và thuốc đối chiếu trong môi trường HCl 0,1 N (f2= 85,30) 82

Hình 3.26 Đồ thị so sánh lượng kali clorid phóng thích in vitro của thuốc thử

nghiệm và thuốc đối chiếu trong môi trường đệm phosphat 4,5 (f2= 80,11) 83

Hình 3.27 Đồ thị so sánh lượng kali clorid phóng thích in vitro của thuốc thử

nghiệm và thuốc đối chiếu trong môi trường

đệm phosphat pH 6,8 (f2=90,98) 83

Hình 3.28 Đồ thị so sánh lượng kali clorid phóng thích in vitro của thuốc thử nghiệm và thuốc đối chiếu trong môi trường nước cất (f2=76,92) 84

Hình 3.29 Lượng ion kali bài tiết tích luỹ trước khi uống thuốc 93

Hình 3.30 Tốc độ bài tiết ion kali của người tình nguyện trước khi uống thuốc 94

Hình 3.31 Lượng ion kali bài tiết tích luỹ 0-24 giờ sau khi uống thuốc 100

Hình 3.32 Lượng thuốc bài tiết tích luỹ 0-24 giờ sau khi uống thuốc 100

Hình 3.33 Tốc độ bài tiết thuốc từ 0-24 giờ sau khi uống thuốc 101

Hình 3.34 Đường biểu diễn lượng thuốc còn lại sau khi được bài tiết qua đường tiểu theo thời gian ở người tình nguyện uống thuốc thử nghiệm 110

Hình 3.35 Đường biểu diễn lượng thuốc còn lại sau khi được bài tiết qua đường tiểu theo thời gian ở người tình nguyện uống thuốc đối chiếu 111

Hình 4.1 So sánh tỉ lệ kali clorid phóng thích từ viên nhân và viên bao 117

Hình 4.2 So sánh tốc độ bài tiết ion kali ở người tình nguyện trước và sau khi uống thuốc thử nghiệm 126

Hình 4.3 So sánh lượng ion kali bài tiết tích luỹ ở người tình nguyện trước và sau khi uống thuốc thử nghiệm 127

ĐẶT VẤN ĐỀ

Ion kali là một cation chủ yếu của tế bào, có chức năng chính là duy trì áp suất thẩm thấu của tế bào Ion kali cần thiết cho dẫn truyền xung động thần kinh, duy trì hoạt động bình thường của cơ tim, não, cơ xương, chức năng thận và cân bằng kiềm toan của cơ thể Sự thiếu hụt kali của cơ thể thường xảy ra chậm trong các trường hợp dùng lâu dài thuốc lợi tiểu thải kali, cường aldosteron, đái tháo đường nhiễm acid, tiêu chảy nặng, loạn nhịp tim điều trị bằng digitalis

Biểu hiện của tình trạng giảm kali là nhịp tim nhanh bất thường, yếu cơ và đôi khi làm liệt chi Về mặt biến dưỡng, sự thiếu kali có thể làm cơ thể chậm phát triển, làm giảm lượng somatidin C trong tuần hoàn và ức chế tổng hợp protein Sự thiếu ion kali cũng là một nguyên nhân dẫn đến bệnh cao huyết áp

Để cung cấp kali trong trị liệu thường dùng kali aspartat, kali acetat, kali gluconat, kali bicarbonat, kali clorid,… Thông thường, khi nồng độ kali huyết giảm thường kèm theo tình trạng giảm clor huyết, nên kali clorid thường được sử dụng nhiều hơn các dạng muối khác Kali clorid là một dược chất thuộc danh mục thuốc thiết yếu do Bộ Y tế Việt Nam ban hành lần thứ 4 năm 1999

Ngoại trừ những trường hợp khẩn cấp cần cung cấp kali qua đường tiêm thì sử dụng thuốc bằng đường uống là cách dùng thuận lợi nhất cho bệnh nhân Mặc dù kali clorid hấp thu nhanh và tốt hơn các muối kali khác qua đường tiêu hoá nhưng bệnh nhân cần phải uống thuốc lặp lại nhiều lần trong ngày vì khả năng giữ kali của thận kém ngay cả khi cơ thể thiếu kali trầm trọng Khi sử dụng đường uống, thuốc viên dạng qui ước có kali clorid gây kích ứng hoặc tổn thương đường tiêu hoá do sự

phóng thích tập trung tại một nơi với nồng độ cao Để khắc phục các nhược điểm trên, dạng thuốc viên uống phóng thích kéo dài là dạng bào chế phù hợp nhất cho dược chất kali clorid Dược điển Anh và Dược điển Mỹ cũng đã có các chuyên luận về dạng thuốc này

Cho đến nay, trên thị trường thuốc Việt Nam các chế phẩm thuốc viên kali clorid phóng thích kéo dài là các thuốc ngoại nhập như Kaleorid® LP 600 mg và Kaldyum

Đề tài “NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN KALI CLORID 600 mg PHÓNG THÍCH KÉO DÀI” được thực hiện nhằm nghiên cứu bào chế viên kali clorid

600 mg phóng thích kéo dài đạt độ hoà tan theo tiêu chuẩn Dược điển Anh và tương đương sinh học với sản phẩm Kaleorid® LP 600 mg (Leo Pharmaceutical Products, Đan Mạch) đang lưu hành tại thị trường Việt Nam

Để đạt được mục tiêu trên, các nội dung nghiên cứu được thực hiện gồm:

1 Nghiên cứu bào chế viên Kali clorid 600 mg phóng thích kéo dài ở qui mô phòng thí nghiệm

2 Nghiên cứu nâng cấp cỡ lô

3 Xây dựng tiêu chuẩn cơ sở và nghiên cứu độ ổn định của sản phẩm

4 Nghiên cứu tương đương sinh học viên bao phim Kali clorid 600 mg phóng thích kéo dài với viên Kaleorid® LP 600 mg

Kali clorid rất bền với nhiệt độ (nhiệt độ chảy là 790ºC, thăng hoa ở 1500oC)

Ở 20oC, kali clorid không tan trong aceton và ete, khó tan trong ethanol (1:250), tan được trong glycerol (1:14), rất dễ tan trong nước (1:2,8); dung dịch bão hoà trong nước có pH khoảng 7

Một gam kali clorid tương ứng với 13,4 mmol kali (13,4 mEq K+) hay 0,52 g kali [91], [92]

1.1.2 CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG KALI

1.1.2.1 Phương pháp trực tiếp

Các phương pháp quang kế ngọn lửa, quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS), quang phổ phát xạ nguyên tử (AES), điện cực chọn lọc ion (ISE) đã được ứng dụng để định lượng trực tiếp ion kali [29], [31], [56], [88], [111], [121]

- Phương pháp AAS và AES được sử dụng để xác định nồng độ các ion kim loại bằng phép đo cường độ hấp thụ hoặc phát xạ ánh sáng ở bước sóng đặc trưng bởi

hơi nguyên tử của nguyên tố được hoá hơi từ chất cần phân tích Phương pháp AAS được Dược điển Mỹ (USP) sử dụng để định lượng ion kali trong chế phẩm có chứa kali clorid [111] Phương pháp AES được Dược điển Anh (BP) sử dụng để định lượng ion kali trong chế phẩm có chứa kali clorid [29]

- Phương pháp ISE dựa trên sự trao đổi ion qua màng của một điện cực chọn lọc ion Sự trao đổi này làm phát sinh điện thế Sự thay đổi điện thế sẽ cho một giá trị chính xác từ mẫu đo Màng của điện cực chọn lọc ion kali là màng polyme có chứa valinomycin hoặc màng của hợp chất “bis-crown-ether” Các hợp chất này có cấu trúc vòng với các khoang rỗng bên trong Các khoang rỗng có kích thước chính xác bằng đường kính của ion kali Như vậy, có thể tạo phức và dẫn ion kali qua màng [48], [107] Phương pháp ISE đã được ứng dụng để đo nồng độ kali trong thử nghiệm hoà tan và trong dịch sinh học [33], [42], [56], [88]

1.1.2.2 Phương pháp gián tiếp

Sự định lượng kali trong kali clorid có thể được thực hiện bằng phương pháp hoá học thông qua ion clorid, điểm kết thúc có thể được xác định bằng chỉ thị màu hoặc sự biến đổi điện thế đột ngột (phương pháp chuẩn độ điện thế) Phương pháp hoá học định lượng kali clorid bằng chỉ thị màu được sử dụng để định lượng kali clorid nguyên liệu trong Dược điển Việt Nam (DĐVN), BP và USP [3], [29], [111] Phương pháp chuẩn độ điện thế được sử dụng định lượng kali clorid trong thử nghiệm hoà tan cho viên kali clorid phóng thích kéo dài (PTKD) của BP [29]

Phương pháp chuẩn độ điện thế là một phương pháp phân tích hoá học trên

sự khảo sát điện thế hình thành trong quá trình chuẩn độ Điện thế của điện cực và nồng độ của các thành phần có trong dung dịch có mối liên hệ tương quan với nhau Nồng độ của chất cần chuẩn độ giảm đi khi thêm dung dịch chuẩn độ Tại điểm tương đưng, chất chuẩn độ thừa sẽ gây ra sự thay đổi đột ngột về điện thế Đường cong chuẩn độ là một hàm số biểu diễn sự thay đổi của điện thế (E) theo thể tích

(V) của chất chuẩn độ (E= f (V)) Điểm uốn của đường cong cho phép xác định điểm tương đương của phép chuẩn độ Điểm tương đương còn được xác định bằng cách lấy đạo hàm bậc nhất của hàm số, cực đại của đường đạo hàm chính là điểm uốn của đường cong chuẩn độ và cũng chính là điểm tương đương [114]

1.1.3 VAI TRÒ SINH LÝ CỦA ION KALI

Ion kali là một trong các ion quan trọng của cơ thể, có chức năng duy trì hoạt động của các mô cơ Ở trạng thái sinh lý bình thường của cơ thể, ion kali phân bố khoảng 90% ở dịch nội bào (khoảng 3150 mEq), chủ yếu ở dịch nội bào của cơ 76% (2650 mEq), hồng cầu 7% Dịch ngoại bào có khoảng 10% tổng lượng ion kali của

cơ thể (350 mEq), tuy nhiên ion kali chỉ định vị trong huyết tương khoảng 0,4% (15 mEq) và 1% trong dịch gian bào Nồng độ của ion kali trong huyết tương từ 3,5 đến 5,5 mEq/L

Tỉ số nồng độ ion kali trong dich nội bào và ngoại bào (Ki/Ke) quyết định phần lớn chức năng hoạt động của mô cơ thần kinh Do lượng ion kali trong dịch ngoại bào chiếm một tỉ lệ rất nhỏ, nên chỉ cần một thay đổi nhỏ về nồng độ ion kali trong dịch ngoại bào sẽ ảnh hưởng đến hoạt động của mô cơ thần kinh Chênh lệch nồng độ K+ trong và ngoài tế bào cần thiết cho dẫn truyền xung động thần kinh ở các mô đặc biệt như tim, não và cơ xương cũng như duy trì chức năng thận bình thường và cân bằng kiềm toan Sự vận chuyển ion kali qua màng tế bào được thực hiện bởi men Na+-K+-ATP-ase, có tác dụng vận chuyển tích cực, bơm Na+ ra ngoài và K+ vào trong tế bào Những bất thường về nồng độ ion kali có thể ảnh hưởng đến chức năng tim [82] Nồng độ kali trong máu là một trong những thông số quan trọng để chẩn đoán sàng lọc cao huyết áp nguyên phát vì sự thiếu ion kali trong cơ thể là một trong 8 nguyên nhân gây nên bệnh này [36]

Ion kali được cung cấp hàng ngày cho cơ thể từ thức ăn Thông thường, cân bằng ion kali trong cơ thể được duy trì bằng các cơ chế chính xác; lượng ion kali thải

trừ ra khỏi cơ thể tương đương lượng hấp thu Lượng lớn ion kali đưa vào nhanh chóng được bài tiết và chỉ làm tăng rất ít nồng độ của ion kali trong huyết tương Thải trừ kali ở thận xảy ra thụ động (qua cầu thận) và tái hấp thu tích cực qua ống gần và nhánh lên của quai Henle Ở ống lượn xa và ống góp (thận) kali được thải trừ tích cực dưới sự điều khiển của aldosteron Trong điều kiện sinh lý bình thường, 90% tổng lượng ion kali thải trừ bài tiết qua nước tiểu, lượng còn lại bài tiết qua phân và qua mồ hôi

Các bệnh lý liên quan đến ion kali bao gồm tăng kali huyết và hạ kali huyết, có thể đuợc chia làm 3 nhóm căn cứ vào nguyên nhân:

- Rối loạn do thay đổi cung cấp kali cho cơ thể

- Rối loạn do bài tiết

- Rối loạn trong phân phối kali qua màng tế bào

Tăng kali huyết xảy ra khi ion kali được tạo ra quá nhiều (ly giải mô) hoặc không được thải trừ hữu hiệu do nguyên nhân hormon (thiếu aldosteron) hoặc do các nguyên nhân từ nhu mô thận gây tổn thương bài tiết Triệu chứng lâm sàng là cảm giác khó chịu, đánh trống ngực và yếu cơ Điện tâm đồ thường được thực hiện sớm để xác định ảnh hưởng lên tim

Hạ kali huyết có nhiều nguyên nhân, có thể do chế độ ăn không đủ kali, do mất nước nặng làm mất kali ra khỏi cơ thể trong trường hợp tiêu chảy, nôn, cũng có thể xảy ra do vận động đổ mồ hôi quá mức Dấu hiệu lâm sàng sơ phát là yếu cơ và đau cơ, vọp bẻ, liệt, táo bón, buồn nôn, nôn, rối loạn nhịp tim [2], [50]

1.1.4 CÁC THUỐC CHỨA KALI CLORID

Hiện nay có nhiều dạng thuốc chứa kali clorid như dung dịch uống, thuốc bột để pha thành dung dịch uống chứa 10, 15, 20 mmol; dạng kali đậm đặc dùng pha tiêm 1,5 mmol/ml; viên nén bao tan trong ruột 600 mg và viên nén hoặc viên nang PTKD 600 mg (8 mmol) hoặc 750 mg (10 mmol)

Trong trường hợp giảm kali huyết nặng, dạng dịch truyền với nồng độ từ 40 mmol đến 80 mmol/ lít được sử dụng với tốc độ truyền dịch không quá 1 mmol/ phút cho người lớn và 0,02 mmol/ kg/phút đối với trẻ em Trường hợp giảm kali huyết nhẹ có thể được điều trị bằng cách bổ sung kali clorid theo đường uống hoặc được khuyến cáo dùng các thực phẩm có chứa nhiều kali như cà chua, cam, chuối Bổ sung kali bằng chế độ ăn và thuốc được chỉ định ở bệnh nhân điều trị với thuốc lợi tiểu

Sinh khả dụng bằng đường uống của kali clorid rất cao, lượng hấp thu bằng đường uống có thể lên đến 90-95% [49] Sự hấp thu ion kali không bị ảnh hưởng bởi thức ăn

Người lớn uống phòng trong liệu pháp lợi niệu 40 mmol/ngày kali clorid có thể phòng được giảm kali huyết ở phần lớn số người bệnh dùng thuốc lợi tiểu dài ngày Đối với người tăng huyết áp không biến chứng, không phù, điều trị ngoại trú, nếu kali huyết thanh dưới 3 mmol/L, nên dùng 50-60 mmol/ngày Đối với người bệnh phù như suy tim, xơ gan cổ trướng dùng liều 40-80 mmol/ngày (thiếu nhẹ) hoặc 100-120 mmol/ngày (thiếu nặng) kèm theo dõi cẩn thận kali huyết thanh

Tác dụng phụ và độc tính của các thuốc có kali clorid phụ thuộc vào đường sử dụng và dạng bào chế Cần đặc biệt quan tâm đến độc tính trên tim khi dùng kali qua đường tiêm tĩnh mạch Nếu tốc độ truyền vượt quá 0,5 mmol/kg/giờ, thầy thuốc phải ngồi bên cạnh để theo dõi các dấu hiệu lâm sàng và điện tâm đồ liên tục Nếu có rối loạn chức năng thận, đặc biệt là suy thận cấp như có dấu hiệu thiểu niệu và (hoặc) tăng creatinin huyết thanh, xảy ra trong khi truyền kali clorid, cần ngừng truyền ngay [2]

Các dạng thuốc viên qui ước (kể cả viên nén bao tan trong ruột) có kali clorid thường gây nhiều tác dụng phụ cho đường tiêu hoá như buồn nôn, nôn mữa, tiêu chảy, đau thắt vùng bụng, loét dạ dày, thực quản Dạng dung dịch uống ít gây biến

chứng cho đường tiêu hoá hơn, do niêm mạc dạ dày không tiếp xúc trực tiếp với các tinh thể kali clorid, nhưng thuốc lại có vị mặn khó uống và thường gây buồn nôn [2], [92]

Các dạng thuốc kali clorid PTKD có ưu điểm tránh được nguy cơ tác dụng phụ tại đường tiêu hoá, đồng thời hiệu quả điều trị tốt hơn các dạng thuốc qui ước vì tạo được một nồng độ ion kali ổn định

Các biệt dược thường gặp là Kaldyum 600 mg (Egis Pharma, Hungary), Kaleorid® LP 600 mg (Leo Pharmaceuticals, Đan Mạch), Slow-K®

1.2 THUỐC PHÓNG THÍCH HOẠT CHẤT KÉO DÀI

Thuốc PTKD là những chế phẩm có khả năng kéo dài quá trình giải phóng và hấp thu dược chất từ dạng thuốc nhằm duy trì nồng độ thuốc trong máu trong một thời gian dài hơn so với dạng thuốc qui ước với mục đích giảm số lần dùng thuốc cho người bệnh, giảm tác dụng phụ không mong muốn, nâng cao hiệu quả điều trị của thuốc Theo Dược điển Mỹ, thuốc PTKD ít nhất phải giảm nửa số lần dùng thuốc cho người bệnh

Thuốc PTKD đã được nghiên cứu và được đưa ra thị trường từ đầu thập niên

1950 [34], khởi đầu là viên spansule chứa amphetamin sulfat Trong khoảng

1950-1970, đã có nhiều thuốc PTKD được sản xuất với tá dược phổ biến là các tá dược tạo khung thân nước Sự phát triển dạng thuốc PTKD trong giai đoạn này có những giới hạn nhất định do thiếu những nghiên cứu sâu về được động học và sinh dược học Đến những năm 1970-1990, những kiến thức về dược động học và sự hấp thu của thuốc được phát triển, các nhà khoa học đã xác định được những nhược điểm của dạng thuốc qui ước và nghiên cứu các dạng thuốc mới có hiệu quả trị liệu tốt hơn [123] Trong khoảng thập niên 1980, chỉ có hai chuyên luận thuốc PTKD trong Dược điển Mỹ (USP 24 năm 1985) Cho đến nay thuốc PTKD đã phát triển nhanh chóng Dược điển Mỹ năm 2007 (USP 30) đã có 39 chuyên luận thuốc PTKD

Về mặt bào chế, thuốc tác dụng kéo dài dùng để uống thuờng được trình bày dưới dạng viên nén hay viên nang Hai cấu trúc thường gặp của thuốc PTKD là cấu trúc khung và cấu trúc màng bao

1.2.1 VIÊN NÉN PHÓNG THÍCH KÉO DÀI CÓ CẤU TRÚC KHUNG

Thuốc viên PTKD là dạng thuốc được nghiên cứu và phát triển nhiều nhất so với các dạng bào chế PTKD khác Phương pháp đơn giản để điều chế viên nén PTKD là vận dụng các kỹ thuật kinh điển như tạo hạt, dập viên để nén hỗn hợp gồm hoạt chất, chất mang tạo tác dụng kéo dài và các tá dược khác thành viên Cấu trúc của viên nén loại này được gọi là viên nén khung (matrix tablet) để phân biệt với các cấu trúc khác là bể chứa (reservoir), thẩm thấu (osmotic), …

Viên nén khung được phân loại theo tính chất vật lý của khung, tính chất hoá học của khung, động học phóng thích hoạt chất, cơ chế phóng thích hoạt chất

Theo cách phân loại cơ chế phóng thích hoạt chất, viên khung có 2 loại là hệ thống khung khuếch tán và hệ thống khung hoà tan- bào mòn [59] Tuy nhiên cách phân loại này chỉ có tính chất tương đối, một số viên nén điều chế từ các polyme thân nước tạo thành hệ thống khung trương nở phóng thích hoạt chất theo 2 cơ chế khuếch tán và bào mòn-hoà tan [16], [17], [70], [123]

Viên nén có cấu trúc khung phóng thích hoạt chất theo cơ chế khuếch tán đã được nghiên cứu khá kỹ lưỡng về cơ chế phóng thích dược chất Theo Higuchi, lượng dược chất giải phóng trên 1 đơn vị diện tích của khung có hình trụ dẹt được mô tả theo phương trình:

2

α 0 α

s (2C pC )t]

T

pC[D

M= − (1)

M : lượng dược chất phóng thích trên 1 đơn vị diện tích ở thời điểm t

Ds : hệ số khuếch tán của dược chất

Cα : độ tan của dược chất đối với môi trường

Co : lượng dược chất ban đầu trong khung

p : độ xốp của khung

T: độ gấp khúc của các kênh khuếch tán

t: thời gian

Tốc độ phóng thích dược chất có thể được điều chỉnh khi thay đổi độ xốp và độ gấp khúc của các kênh khuếch tán nghĩa là thay đổi cấu trúc xốp Các phương pháp thay đổi cấu trúc xốp là thay đổi tỉ lệ tá dược tạo khung, thay đổi hình dáng của viên, thêm các muối hoặc các chất tan để tạo ra các lỗ xốp thân nước, thay đổi lực nén, thay đổi kích thước tiểu phần chất tạo khung, … [16], [41]

Viên nén có cùng một công thức và kỹ thuật bào chế, các yếu tố Ds , Cα, Co,

p, T không thay đổi, do đó phương trình trên được viết dưới dạng

2kt

Nhóm tá dược tạo khung trơ không tan

Nhóm tá dược tạo khung trơ không tan đã được sử dụng từ cuối những năm

1950 và đã cho ra đời một số chế phẩm thuốc viên tác dụng kéo dài cho các hoạt chất như methamphetamin (Dexosyn–Abbott), sắt sulfat (Ferro-Gradumet- Abbott),

Nhóm sáp và tá dược thân dầu

Các tá dược thân dầu dùng bào chế thuốc PTKD gồm các sáp, các chất béo và dẫn xuất Dược chất trong các khung sáp và chất béo phóng thích theo cơ chế khuếch tán và bào mòn Hai tiêu chuẩn đầu tiên để chọn các tá dược thuộc nhóm này là điểm chảy và thể chất, tá dược có điểm chảy thấp và thể chất mềm thì không sử dụng làm khung cho thuốc viên nén PTKD vì không đảm bảo tính chất vật lý của viên nén Các chất trong nhóm thường được sử dụng cho viên nén PTKD là sáp carnauba, stearyl alcol, acid stearic, sáp thầu dầu, sáp ong, dầu thực vật hydrogen hoá, poly ethylen glycol monostearat, triglycerid,…[26] Mặc dù có điểm chảy thấp nhưng các tá dược thân dầu cũng khá bền với nhiệt: sáp thầu dầu không bị biến tính khi nhiệt độ lên đến 150 oC, stearyl alcol là 100 oC và sáp carnauba là 160 oC Điều

này thuận lợi trong phương pháp bào chế có gia nhiệt [26], [53]

Các tá dược thân dầu có thể dùng riêng lẻ hay phối hợp với các tá dược tạo

khung khác cùng nhóm hay khác nhóm Hỗn hợp dầu thầu dầu hydrogen hoá: propylene glycol monostearat (1:1), sáp carnauba: stearyl alcol (1:1), sáp carnauba: acid stearic (1:1) là tá dược tạo khung cho cả dược chất tan trong nước và không tan trong nước

Sáp còn được phối hợp với các tá dược khác như hypromellose, hydroxypropyl cellulose, alginat/pectin-gelatin, gôm xanthan, Eudragit để điều chế viên nén PTKD [9], [70], [86], [93]

Sự phóng thích dược chất có thể điều chỉnh hiệu quả hơn bằng cách thêm chất diện hoạt hoặc chất tạo kênh như natri clorid, đường, polyol, polyme thân nước để làm gia tăng tốc độ thấm của nước vào khung và sau đó bị bào mòn Sự lựa chọn các chất phối hợp phải căn cứ vào tính chất hoạt chất và tốc độ phóng thích hoạt chất dự kiến [6], [81]

Do có nhiệt độ nóng chảy thấp nên nhiệt sinh ra trong quá trình dập viên có thể làm chảy các sáp tạo khung và gây nên hiện tượng dính chày Vì vậy khi sử dụng các tá dược sáp, cần thêm vào công thức chất chống dính, thích hợp nhất là talc (4-6%), aerosil (0,5-1%) và nên dập viên ở môi trường có nhiệt độ thấp Các chất chống dính còn đóng vai trò tá dược trơn chảy trong công thức Không cần thêm tá dược trơn bóng vì các tá dược thân dầu sẽ tạo ra một màng phim bóng khi dập viên Vì vậy, magnesi stearat, nếu có trong công thức chỉ đóng vai trò tá dược chống dính [26], [39] Trong quá trình dập viên, các sáp tan chảy bao quanh các tiểu phần của viên có tác dụng như một màng bao cho hoạt chất PTKD [15]

Khung sáp không thể phóng thích 100 % lượng dược chất vì một phần dược chất bị bao bọc bởi một màng sáp không tan nên bị giữ lại trong khung [70]

Nhược điểm chủ yếu của khung thân dầu là sự phóng thích dược chất không lặp lại giống nhau trong cơ thể vì các chất dầu có thể bị tác động của các men tiêu hoá như lipase, nhiệt độ, tác động cơ học khác trong đường tiêu hoá

Nhóm tá dược thân nước (polyme thân nước)

Nhóm này chiếm một tỉ lệ khá lớn trong tổng số các tá dược tạo khung Các tá dược thân nước bao gồm:

- Các polyme thiên nhiên và bán tổng hợp không thuộc dẫn chất cellulose như natri alginat, gôm xanthan, gôm guar, chitosan, tinh bột biến tính,… [25], [94]

- Polyme của acid acrylic là carbome và tên thương mại là carbopol Carbopol 934 là chất được nghiên cứu nhiều nhất để tạo khung Polyme này có tính ion hoá nên

pH là một yếu tố cần quan tâm khi chọn tá dược này [70]

- Các cellulose ether như methyl cellulose, hydroxyethyl cellulose, hydroxypropyl cellulose, hydroxypropyl methyl cellulose (HPMC) là các chất tạo khung không ion hoá và natri carboxymethyl cellulose là chất tạo khung ion hoá Nhóm này được sử dụng nhiều nhất là HPMC

Chất tạo khung HPMC không tương tác với các dược chất có tính acid hoặc kiềm và dễ dàng phối hợp với các tá dược tạo khung khác HPMC có nhiều loại với độ nhớt khác nhau, loại dùng để tạo khung cho thuốc PTKD thường là loại K100, K15M, Metolose 60SH và 90SH với tỉ lệ linh hoạt 10-80% [91]

Động học phóng thích dược chất từ khung polyme thân nước phụ thuộc vào tính chất hoá lý của lớp gel, độ tan trong nước của dược chất, sự mài mòn của khung trong môi trường thử

Tốc độ phóng thích chỉ đạt được tuyến tính khi tốc độ trương nở và tốc độ mài mòn của khung bằng nhau Do đó, nhiều tá dược khác thường được phối hợp cùng các polyme thân nước để điều chỉnh tốc độ phóng thích dược chất Các tá dược như tá dược trơn bóng, tá dược độn, chất diện hoạt, chất làm thay đổi pH, đặc biệt là tính chất tan hay không tan của tá dược độn làm thay đổi đáng kể tốc độ phóng thích dược chất vì tá dược độn chiếm tỉ lệ khá cao trong công thức [9], [13], [14], [106], [118]

1.2.2 VIÊN NÉN PHÓNG THÍCH KÉO DÀI CÓ CẤU TRÚC MÀNG BAO

Bao phim là kỹ thuật ứng dụng trong bào chế thuốc với mục đích cải thiện cảm quan, che dấu mùi vị khó chịu của thuốc, bảo vệ dược chất tránh các tác động của môi trường Với sự phát triển của các nguyên liệu và thiết bị bao, kỹ thuật bao phim ngày nay được ứng dụng để nghiên cứu và sản xuất thuốc có sinh khả dụng cao như thuốc bao tan trong ruột, thuốc tác động tại kết tràng, thuốc phóng thích hoạt chất kéo dài [35] Các dạng thuốc được bao phim nhằm kiểm soát sự phóng thích dược chất được gọi với thuật ngữ “hệ thống PTKD được kiểm soát bởi màng bao” [39] hoặc “hệ thống bể chứa” Trong các hệ này, hoạt chất được phóng thích từ nhân qua màng bao theo cơ chế khuếch tán hoặc theo cơ chế áp suất thẩm thấu [37] Động học phóng thích dược chất bậc 0 có thể đạt được đối với hệ này

Các chất bao phim phóng thích kéo dài

Các chất bao phim đa dạng về loại và số lượng nhưng chỉ có 3 chất được sử dụng nhiều nhất để bao phim phóng thích hoạt chất kéo dài là cellulose acetat [45],

ethyl cellulose và các dẫn chất trùng hợp của acid methacrylic (các Eudragit) [113]

EC là dẫn chất ethyl ether của cellulose; trong phân tử EC có thể chứa đến 44,0 – 51,0 % nhóm ethoxy (-OC2H5) (hình 1.1.) Ở mỗi đơn vị anhydroglucose của

phân tử cellulose có chứa 3 nhóm OH, do đó sự thế có thể được thực hiện để tạo nhóm ethoxy ở cả 3 phóm OH Khi cả 3 nhóm đều được thế bởi 3 nhóm ethoxy, phân tử được coi là đạt mức độ thế (degree of subtitute) đến 3,0 Trên thực tế mức độ thế có thể thay đổi, tuỳ thuộc vào mục đích sử dụng của polyme [55]

Các polyme dùng bao phim thường có hàm lượng của nhóm ethoxy trong phân tử trong khoảng 48,0- 49,5%, tương ứng với mức độ thế khoảng 2,41-2,51

Ngoài mức độ thế, có nhiều loại EC do phân tử lượng khác nhau, thể hiện bằng độ nhớt của dung dịch 5% polyme pha trong hỗn hợp toluen: ethanol (8:2) [91] Mức độ thế và độ nhớt của EC là hai yếu tố quan trọng để lựa chọn EC trong kỹ thuật bao phim Có nhiều loại EC với độ nhớt khác nhau để lựa chọn Phối hợp các loại EC khác nhau sẽ thu được hỗn hợp EC có độ nhớt mong muốn [96]

EC là một polyme bền nhất trong số các dẫn xuất của cellulose Ưu điểm của màng phim EC là dẻo dai, ổn định về tính chất vật lý và hoá học, ít độc tính Màng bao EC được đánh giá có độ đàn hồi tốt hơn so với màng bao HPMC 100.000 và màng bao Eudragit RS 100 [87]

EC tan tốt trong hầu hết dung môi hữu cơ hoặc hỗn hợp dung môi hữu cơ dễ dàng tạo dung dịch chất bao, hoặc dễ dàng phân tán trong nước để tạo thành các hệ chất bao hỗn dịch mịn phân tán trong nước Các dịch bao EC trong nước được pha sẵn dưới tên thương mại là Surelease®, Aquacoat® Thành phần của các dịch bao này rất khác nhau nên khi sử dụng cần tuân thủ theo hướng dẫn của nhà sản xuất [57], [58]

EC phối hợp được với nhiều chất liệu tan được trong nước, do đó dễ dàng điều chỉnh tính thấm của màng bằng cách lựa chọn và phối hợp với các loại polyme thân nước ở các tỉ lệ thích hợp [90], [124]

EC thích hợp với nhiều phương pháp tạo màng phim như bao bằng nồi bao, bao bằng hệ thống tầng sôi, bao nén, bao bột khô [55], [85], [113]

Các poly methacrylat (Eudragit) dùng bao phim phóng thích kéo dài

Các sản phẩm trùng hợp của acid methacrylic được điều chế bằng phương

pháp polyme hoá nên sản phẩm có các tính chất hoá lý ổn định Quá trình polyme

hoá có thể làm tăng chuỗi polyme từ các dẫn chất methacrylat hoặc acrylat Tùy

thuộc vào các nhóm thế trên chuỗi polyme chính, hiện nay trên thị trường có nhiều

dẫn chất methacrylic khác nhau dùng cho nhiều mục đích khác nhau trong ngành

dược như làm tá dược dính cho viên nén, tá dược tạo khung cho viên PTKD và chủ

yếu là tá dược bao phim với nhiều mục đích khác nhau [103]

Có 3 Eudragit® được sử dụng để bao phim PTKD gồm Eudragit® RL,

Eudragit® RS và Eudragit® NE (hình 1.2)

Các Eudragit® RL và RS là các polyme tạo được màng phim có tính thấm

nước do trong phân tử có nhóm amoni bậc 4 Nhóm thân nước này kiểm soát tốc độ

thấm nước, mức độ trương nở và như vậy kiểm soát mức độ khuếch tán qua màng

phim Eudragit® RL có chứa khoảng 10% nhóm thân nước nên được xem là có tính

thấm nước cao, Eudragit® RS có chứa khoảng 5% nhóm thân nước nên có tính thấm nước thấp Trên thực tế, 2 loại Eudragit® này có thể được phối hợp với nhiều tỉ lệ khác nhau để thu được màng phim có tính thấm mong muốn [96]

Eudragit NE không chứa nhóm chức có tính ion hoá trong phân tử Eudragit

NE được cung cấp dưới dạng phân tán trong nước có hàm lượng chất rắn là 30% (Eudragit NE 30 D) hoặc 40% (Eudragit NE 40 D) Các hệ phân tán chứa Eudragit

NE có độ nhớt thấp, màu trắng đục và có mùi thơm nhẹ Màng phim từ Eudragit

NE trương nở trong môi trường nước, khả năng trương nở không bị ảnh hưởng bởi pH của môi trường [91], [103]

Các yếu tố ảnh hưởng đến sự phóng thích dược chất từ viên bao phim PTKD

Sự thành công của một sản phẩm bao phim phụ thuộc vào 3 yếu tố chính là công thức dịch bao, chất lượng của chất nền (viên nhân) và các thông số kỹ thuật của qui trình bao phim

Ảnh hưởng của công thức dịch bao

Công thức dịch bao cho thuốc PTKD ảnh hưởng trực tiếp quan trọng đến cấu trúc của màng phim và ảnh hưởng chủ yếu đến tốc độ phóng thích dược chất của sản phẩm

Công thức dịch bao phải được lựa chọn sao cho tính chất của màng phim chỉ thay đổi rất nhỏ trong suốt hạn dùng của thuốc Ngoài polyme chính trong công thức còn có các tá dược khác như chất hoá dẻo, polyme phụ, chất tạo kênh khuếch tán, chất chống dính, chất màu,… Hầu hết các tá dược đều có thể ảnh hưởng đến tính nguyên vẹn và khả năng điều chỉnh tốc độ phóng thích dược chất nên cần thiết phải lựa chọn chất phụ gia thích hợp

Chất hoá dẻo

Chất hoá dẻo là thành phần không thể thiếu trong công thức dịch bao để làm tăng tính dẻo dai, đàn hồi của màng phim, giúp màng phim bám chắc vào mặt viên

Khi thêm chất hoá dẻo cần lưu ý đến tính tương thích giữa polyme và chất hoá dẻo Các chất hoá dẻo thường sử dụng cho hệ dung dịch chất bao trong dung môi hữu cơ là dầu thầu dầu, triacetin, propylen glycol, glycerol, các poly ethylen glycol (PEG) như PEG 200-400, PEG 6000, các ester acid hữu cơ như diethyl phtalat, triethyl citrat (TEC) , …[11]

Tỉ lệ tối ưu của chất hoá dẻo tùy thuộc vào loại polyme sử dụng và sự có mặt của các chất phụ gia khác [97], [124] Tỉ lệ thông thường của chất hoá dẻo 1-50% (kl/kl) chất tạo phim

Ngoài ảnh hưởng đến nhiệt độ chuyển dịch kính của polyme, chất hoá dẻo còn ảnh hưởng đến tốc độ phóng thích dược chất Chất hoá dẻo thân nước, tan trong nước sẽ tăng tốc độ phóng thích hoạt chất từ màng phim và ngược lại [12], [57], [64], [89], [103]

Các polyme và tá dược thân nước

Màng phim phóng thích dược chất kéo dài là một màng trơ, không tan, có tính thấm hạn chế Vì vậy trong công thức dịch bao thường phối hợp các tá dược thân nước với mục đích tạo màng phim điều chỉnh tốc độ phóng thích thuốc tối ưu nhất, hoặc giúp cho các dược chất có phân tử lớn đi qua màng dễ dàng

Các tá dược thân nước thường sử dụng là các polyme thân nước và các chất tan trong nước như đường, natri clorid, lactose hoặc các chất diện hoạt Trong trường hợp sử dụng các polyme phụ, phải lựa chọn để có sự tương thích với polyme chính

Để điều chỉnh tốc độ phóng thích dược chất, có thể phối hợp các polyme thuộc nhóm acrylic với nhau Các Eudragit® RS và RL có thể được phối hợp với nhau dễ dàng vì các nhóm chức giống nhau nên hoàn toàn tương thích Ngoài ra còn có thể phối hợp các polyme không tan (Eudragit® RS và RL) với các polyme thuộc nhóm bao tan trong ruột (Eudragit® S và L) [91], [103]

EC thường phối hợp với HPMC, hydroxypropyl cellulose (HPC), methyl cellulose, natri carboxymethyl cellulose (natri CMC), polyvinyl pyrrolidon, copolyme poly (vinyl alcol)- poly (ethylen glycol) [51], [79], [89] Sự phối hợp giữa

EC và HPMC được đánh giá là tương thích Loại HPMC được chọn để phối hợp nên là loại có độ nhớt thấp Tuy nhiên sự phối hợp này chỉ thích hợp khi dùng các dung môi thân nước vì dung môi hữu cơ hoà tan EC rất tốt nhưng gây hiện tượng tách pha khi phối hợp với HPMC hoặc HPC Tốc độ phóng thích dược chất phụ thuộc vào tỉ lệ phối hợp của polyme thân nước trong công thức [69], [73], [104], [124] Sự phối hợp của EC và HPMC đã được nghiên cứu để tạo hệ thống phóng thích dược chất theo kiểu bơm thẩm thấu bằng cách bao viên nhân kali clorid Tốc độ phóng thích dược chất khác nhau với các tỉ lệ phối hợp giữa EC và HPMC trong hệ này [51]

Các tá dược thân nước làm thay đổi tốc độ phóng thích dược chất qua màng phim nhờ vào sự thay đổi tính thấm của màng phim và sự hình thành các lỗ hoặc các kênh khuếch tán trên màng phim khi tiếp xúc với môi trường thử nghiệm hoà tan hay môi trường dịch tiêu hoá Bằng phương pháp dùng kính hiển vi quét (scanning electron microscopy) có thể quan sát được sự hình thành các lỗ hoặc kênh khuếch tán trên màng bao sau khi dược chất phóng thích [11], [27], [72]

Các tá dược không tan

Sự phối hợp các chất rắn không tan (chất màu, chất chống dính) vào dịch bao polyme trong dung môi hữu cơ sẽ làm thay đổi tính thấm của màng Các chất màu không tan thường được sử dụng nhiều do tạo màu bền, tuy nhiên màu không tan sẽ tạo cấu trúc hạt trong màng phim và dược chất sẽ khuếch tán qua màng phim dọc theo bề mặt các chất màu và khuếch tán qua các khoảng trống giữa polyme và chất màu Cần thận trọng khi thêm các chất rắn vào hệ phân tán trong nước, vì các chất rắn có thể ảnh hưởng lớn đến quá trình hình thành màng phim [27], [52]

Ảnh hưởng của chất lượng viên nhân

Hình dạng và kích thước viên nhân

Hình dạng và kích thước nhân quyết định diện tích bề mặt, do đó ảnh hưởng đến sự đồng nhất của bề dày lớp bao như vậy tốc độ phóng thích dược chất sẽ thay đổi Viên nhân nên có bề mặt lồi đúng tiêu chuẩn sẽ có độ cứng đồng đều trên bề mặt viên, tránh các trường hợp mẻ cạnh hay mẻ ở đỉnh lồi trong quá trình bao Độ nhẵn của viên nhân cũng ảnh hưởng đến tốc độ phóng thích thuốc Những thay đổi về diện tích bề mặt có thể do độ gồ ghề của bề mặt nhân, do đó ảnh hưởng đến tốc độ phóng thích thuốc Không nên khắc các ký hiệu lên bề mặt của viên nhân sẽ bao PTKD [67], [119]

Độ cứng và độ mài mòn của viên nhân

Khi viên không đủ độ bền cơ học, thường xảy ra tình trạng vỡ viên và mòn viên trong quá trình bao do viên nhân phải chịu nhiều tác động cơ học của quá trình bao Tình trạng này thường gặp khi nâng cấp cỡ lô, vì trong trường hợp này khối lượng của toàn khối viên tăng lên nên mỗi viên phải chịu nhiều tác động cơ học hơn Vì vậy, các sản phẩm và qui trình bao chưa được nghiên cứu kỹ về phương diện

cơ học thì không nên áp dụng cho quy mô lớn

Viên nhân có độ cứng thấp cần phải thận trọng khi bao, nhất là trong quá trình nâng cấp cỡ lô Các viên có kích thước lớn nên có có độ cứng cao hơn là viên nhỏ

Độ mài mòn là một thông số quan trọng Thử nghiệm độ mài mòn phản ảnh gần chính xác sự chuyển động của viên trong nồi bao Viên nén dùng để bao phim nên có độ mài mòn tối đa đến 0,3% và tốt nhất là nhỏ hơn 0,1% [67]

Độ dính của màng phim lên bề mặt viên

Sự bám dính của màng phim vào dạng thuốc là yêu cầu quan trọng, nếu màng phim không bám dính vào dạng thuốc sẽ ảnh hưởng đến hình dạng cảm quan

đồng thời chức năng của màng bao sẽ không hoàn chỉnh

Độ dính của màng polyme lên bề mặt viên là yêu cầu căn bản để đảm bảo có liên kết tốt giữa màng bao và bề mặt viên

Các thành phần trong viên có thể làm cho màng phim khó dính vào nhân Mangesi stearat là một tá dược trơn bóng rất tốt nhưng lại giảm độ bền cơ học của viên và làm giảm độ dính của phim vào nhân Do đó lượng mangesi stearat sử dụng trong viên nhân bao phim phải được hạn chế [65] Cellulose vi tinh thể và acid stearic có trong thành phần viên nhân sẽ giúp màng phim phối hợp giữa HPMC và

EC dính tốt vào viên nhân nhờ có nhóm hydroxyl và carboxylic Các calci và mangesi stearat làm giảm tính dính của màng phim HPMC và EC vào nhân

Trong các trường hợp bề mặt viên nhân có tính thấm kém, có thể làm gia tăng sự dính của màng phim vào nhân bằng cách thêm vào công thức dịch bao PEG

400 hoặc PEG 6000 [51]

Tác dụng của màng bao lót

Việc sử dụng màng bao lót trong các thuốc PTKD mang lại nhiều lợi ích Lớp bao lót cải thiện độ mài mòn của nhân, làm cho bề mặt nhân nhẵn hơn ở giai đoạn bao phóng thích kéo dài Mặt khác, lớp bao lót bằng HPMC hay HPC là một biện pháp để tăng sự bám dính của dịch bao lên bề mặt viên nhân [51]

Áp suất thẩm thấu

Sự ứng dụng của áp suất thẩm thấu trong kỹ thuật điều chế viên PTKD đã được nghiên cứu kỹ Trên thực tế đã có nhiều sản phẩm ứng dụng nguyên tắc này để điều chế viên có tốc độ phóng thích dược chất rất ổn định

Các thành phần của công thức (là tá dược như đường hoặc dược chất kali clorid) đều có ảnh hưởng đến tốc độ phóng thích dược chất từ viên được bao do áp suất thẩm thấu được tạo ra từ những nguyên liệu này [63], [69]

Ảnh hưởng của qui trình bao phim

Mục tiêu chính của qui trình bao là thiết lập những thông số của qui trình để tạo ra được những lớp bao đồng nhất trên bề mặt viên nhân Những lớp bao đồng nhất này phải có tính lặp lại trên những viên khác nhau của cùng 1 lô và giữa các lô khác nhau, đồng thời tránh được những khiếm khuyết trên màng bao như sự tạo ra những vết nứt (vết nứt do lực co kéo nội hoặc những lổ nhỏ) trên màng phim Những khiếm khuyết này sẽ ảnh hưởng đến tính nguyên vẹn của màng bao trên sản phẩm Các thông số kỹ thuật trong quá trình bao phim như áp suất khí nén, tốc độ phun dịch bao, hiệu quả khuấy trộn dịch bao, nhiệt độ bao viên,… có ảnh hưởng đến sự phân bố đồng nhất của dịch bao lên nhân

Cần phải tránh hiện tượng phun sấy khi dùng dung môi hữu cơ vì sẽ tạo nên màng phim có độ xốp cao hoặc khối viên bị ướt Sự sấy với nhiệt độ quá cao trong trường hợp bao với hệ phân tán trong nước có thể dẫn đến trường hợp khối viên bị dính vào nhau Hiện tượng có thể được khắc phục bằng cách thêm các tá dược trơn như talc, aerosil Ngược lại, nếu khối viên quá ướt có thể dẫn đến hiện tượng thuốc

bị thôi ra (khuếch tán ra) từ nhân và định vị trên màng bao sẽ ảnh hưởng đến tốc độ phóng thích của thuốc từ viên thành phẩm [98], [113]

1.3 NGHIÊN CỨU TƯƠNG ĐƯƠNG SINH HỌC BẰNG PHƯƠNG

PHÁP ĐO LƯỢNG THUỐC BÀI TIẾT TRONG NƯỚC TIỂU

Để có thể cung cấp được hiệu quả trị liệu tối ưu, dược chất từ các dạng thuốc phải đến được vị trí tác động với một nồng độ trị liệu và duy trì được nồng độ này trong một khoảng thời gian đủ dài Thực tế rất khó đo lường được nồng độ thuốc tại

vị trí tác động, nên nồng độ thuốc thường được đo lường trong tuần hoàn chung căn cứ vào giả định là các chất có trong tuần hoàn chung luôn luôn có sự trao đổi tại vị trí tác động, như vậy nồng độ thuốc trong tuần hoàn chung có thể đại diện cho nồng độ thuốc tại vị trí tác động Sinh khả dụng của thuốc được định nghĩa là tốc độ và

mức độ của dược chất hoặc chất có hoạt tính được phân phối từ dạng thuốc và đến được tuần hoàn chung Do đó, sinh khả dụng thường được đánh giá thông qua nồng độ thuốc trong huyết tương Tuy nhiên, trong một số trường hợp nhất định, sinh khả dụng có thể được đánh giá thông qua lượng thuốc bài tiết trong nước tiểu [117]

Nghiên cứu đánh giá sinh khả dụng hoặc tương đương sinh học của thuốc bằng phương pháp sử dụng lượng thuốc bài tiết trong nước tiểu là một phương pháp gián tiếp, điều kiện cần thiết là lượng thuốc nguyên vẹn hoặc chất chuyển hoá của thuốc được bài tiết với một lượng lớn trong nước tiểu Phương pháp này đặc biệt hữu ích khi thuốc có vị trí tác động liên quan đến đường tiết niệu như các thuốc sát trùng đường tiểu (nitrofurantoin, methenamin), các thuốc bài tiết với lượng lớn dưới dạng chưa chuyển hoá trong nước tiểu như các thuốc lợi tiểu nhóm thiazid hoặc sulfonamid [17] Đánh giá lượng thuốc bài tiết qua nước tiểu là phương pháp duy nhất để xác định các thông số dược động học của các thuốc có chứa kali dùng đường uống [110]

Phương pháp đo lượng thuốc bài tiết trong nước tiểu thuận lợi là không gây tổn thương cho đối tượng thử nghiệm nên dễ được chấp nhận Nồng độ thuốc hoặc chất chuyển hoá trong nước tiểu thường cao hơn, ít bị cản trở bởi các protein và các chất khác trong máu do đó dễ định lượng hơn [17] Mặt khác, phân tích nồng độ thuốc trong nước tiểu không đòi hỏi phương pháp có độ nhạy cao như định lượng nồng độ thuốc trong máu vì nếu nồng độ thuốc trong nước tiểu quá thấp, có thể khắc phục dễ dàng bằng cách sử dụng một lượng lớn nước tiểu để định lượng [75]

Để nghiên cứu sinh khả dụng và tương đương sinh học bằng số liệu tích luỹ lượng thuốc bài tiết trong nước tiểu thì dược chất trong nghiên cứu phải không liên kết với protein của huyết tương và được thải qua đường tiểu bằng cách lọc qua cầu thận Nếu thuốc liên kết một phần với protein của huyết tương thì tốc độ bài tiết có

tỉ lệ trực tiếp với nồng độ dược chất dạng tự do trong huyết tương Nếu thuốc liên

kết với protein của huyết tương, sự vận chuyển thuốc từ dịch kẽ thận đến dịch ống thận có khuynh hướng khuếch tán thụ động ngược, khi đó mối quan hệ giữa nồng độ thuốc trong nước tiểu và nồng độ thuốc trong huyết tương rất phức tạp, phụ thuộc cơ bản vào các nồng độ tương đối của thuốc trong các dịch sinh học của cơ thể, pH của nước tiểu, tốc độ bài xuất nước tiểu và nhiều thông số khác

Như vậy, trong phương pháp này để thành công thì tỉ lệ thuốc đi vào tuần hoàn chung và được bài tiết qua thận được giả định là hằng định

Phương pháp này áp dụng tốt trong trường hợp thuốc được bài xuất ở dạng chưa chuyển hoá trong nước tiểu, vì sự đo lường nồng độ chất chuyển hoá trong nước tiểu hoặc các chất đánh dấu phóng xạ trong nước tiểu không thể hiện mức độ chuyển hoá của thuốc trước khi thuốc đến tuần hoàn chung Thuốc có thể bị chuyển hoá tại đường tiêu hoá, trên thành ruột và chịu sự chuyển hoá bước đầu qua gan, cũng như chuyển hoá tại thận, phổi và các cơ quan khác [17], [75]

Một điều kiện có liên quan đến thiết kế nghiên cứu và cách thực hiện nghiên cứu là các mẫu nước tiểu phải thu thập cho đến khi không còn dược chất bài tiết Tổng lượng thuốc bài tiết trong nước tiểu khó có thể xác định chính xác nếu việc thu thập mẫu nước tiểu chấm dứt quá sớm Để có thể thu được hơn 95% tổng lượng thuốc bài tiết qua nước tiểu, thời gian thu thập mẫu phải đạt khoảng 5 đến 7 lần so với thời gian bán thải của thuốc Nếu không có sẵn thông số về thời gian bán thải của thuốc, sự lấy mẫu cần thực hiện cho đến khi lượng thuốc bài tiết không có ý nghĩa (đối với nghiên cứu thực hiện đo nồng độ thuốc trong huyết tương, lượng thuốc nhỏ hơn 10% so với Cmax được xem là không ý nghĩa) Ngoài ra, trong mỗi phân đoạn thu thập nước tiểu, người tình nguyện phải làm rỗng bàng quang hoàn toàn, nếu không lượng nước tiểu ở phân đoạn trước sẽ làm thay đổi thể tích nước tiểu và lượng thuốc bài tiết ở phân đoạn sau [28], [75]

Giống như nghiên cứu sinh khả dụng hoặc tương đương sinh học của thuốc

dựa vào nồng độ thuốc trong huyết tương, nghiên cứu lượng thuốc bài tiết trong nước tiểu phải có đủ lượng người tình nguyện và đủ số mẫu cần thiết mới thiết lập được các thông số dược động học chính xác

1.3.1 CÁC THÔNG SỐ DƯỢC ĐỘNG HỌC TRONG NGHIÊN CỨU TĐSH

Ba thông số dược động học quan trọng cần xác định trong nghiên cứu SKD và tương đương sinh học bằng phương pháp đo lượng thuốc trong nước tiểu là Ae, Rmaxvà Tmax [102]

Ae (còn được ký hiệu là dU hoặc ∑Xu): lượng thuốc dạng không chuyển hoá bài tiết qua nước tiểu Thông số Ae tương tự như diện tích dưới đường cong (AUC) nồng độ thuốc theo thời gian trong nghiên cứu SKD dựa trên nồng độ thuốc trong máu Về mặt thực nghiệm, lượng nước tiểu được thu thập theo từng phân đoạn sau khi uống thuốc Thể tích nước tiểu từng phân đoạn phải được ghi nhận và mẫu phân tích được lấy từ các phân đoạn Biểu đồ lượng thuốc bài tiết tích luỹ theo thời gian có dạng như hình 1.3

t∞) Mức độ hấp thu tương đối (SKD tương đối) của 2 thuốc có thể được biểu thị là tỉ lệ của các giá trị Ae∞ Tuy nhiên, giá trị Ae∞ là một hàm của tỉ lệ (F) liều sử dụng

được hấp thu (D), hằng số tốc độ thải trừ của thận (ke), và hằng số tốc độ thải trừ tổng thể (K) từ hệ tuần hoàn, được biểu thị:

Ae∞ = F D ke /K (3) Như vậy, một đánh giá tỉ lệ của liều được hấp thu từ tỉ số Ae∞ của 2 thuốc phải được thực hiện từ 2 thuốc có cùng hàm lượng hoạt chất và giữ hoặc hiệu chỉnh cho tỉ số ke/K không đổi trong suốt quá trình nghiên cứu

Rmax (hoặc ERmax): tốc độ bài tiết tối đa, được tính từ tốc độ bài tiết thuốc (R) trong các phân đoạn nước tiểu Thông số Rmax tương tự như nồng độ thuốc tối đa (Cmax) trong nghiên cứu SKD dựa trên nồng độ thuốc trong máu Đồ thị tốc độ bài tiết thuốc trong nước tiểu theo thời gian có dạng tương tự đồ thị nồng độ thuốc trong huyết tương (hình 1.4)

Khi xây dựng biểu đồ của tốc độ bài tiết R theo thời gian, hoặc khi xác định

Rmax , giá trị thời gian phải được lấy tại điểm giữa của phân đoạn nước tiểu thu thập tương ứng, nghĩa là điểm giữa t1 và t2

Tmax: thời gian đạt tốc độ bài tiết thuốc tối đa Thông số Tmax tương tự như giá

- Giá trị Tmax giảm khi tốc độ hấp thu của thuốc tăng

- Giá trị Rmax tăng khi tốc độ và (hoặc) mức độ hấp thu của thuốc tăng

- Giá trị Ae tăng khi mức độ hấp thu của thuốc tăng

Phân tích số liệu để đánh giá tương đương sinh học

Tương đương sinh học trong nghiên cứu tương đương sinh học dựa trên lượng thuốc bài tiết qua nước tiểu cũng được kết luận dựa trên phân tích khoảng tin cậy 90% (CI 90%) của 2 thông số căn bản là Ae0-t và Rmax và sử dụng thuật toán two one- sided t test [71], [111]

Đánh giá lượng thuốc bài tiết qua nước tiểu đã được áp dụng để đánh giá tương đương sinh học hoặc SKD (có phối hợp với nghiên cứu nồng độ thuốc trong huyết tương) của các chế phẩm chứa ampicillin [20], nitrofurantoin [116], lomefloxacin [100], ranitidin [99], riboflavin [66], norfloxacin [80]

Riêng đối với thuốc viên có kali clorid, chỉ có các nghiên cứu về sinh khả

dụng trên NTN đã được công bố [21], [24], [77], hoặc các nghiên cứu đánh giá in vivo có so sánh với thuốc đối chiếu thực hiện trên thỏ [120], [121], [122] Các

nghiên cứu này thực hiện đánh giá các thông số dược động học căn cứ vào lượng ion kali bài tiết tích luỹ trong nước tiểu trong 24 giờ

1.3.2 ĐÁNH GIÁ TƯƠNG ĐƯƠNG SINH HỌC THUỐC VIÊN KALI CLORID

PHÓNG THÍCH KÉO DÀI

Đối với các thuốc chứa ion kali, đánh giá tương đương sinh học bằng cách so sánh nồng độ ion kali trong máu không áp dụng được vì cơ chế tự cân bằng của cơ thể giúp điều chỉnh lượng ion kali trong máu ở một giới hạn hẹp chỉ từ 3,5 đến 5

Đối với viên nén và viên nang kali clorid PTKD, trong vòng 10 năm gần đây, Trung tâm Nghiên cứu và Đánh giá chất lượng thuốc (CDER) của Cơ quan quản lý Thực phẩm và Dược phẩm (FDA) đã có 3 văn bản hướng dẫn về thử nghiệm độ hoà

tan in vitro và đánh giá tương đương sinh học in vivo được ban hành vào các năm

1997 [109], 2002 [110], 2005 [111]

Ngoài các hướng dẫn giống với các nghiên cứu tương đương sinh học khác như tiêu chuẩn thuốc thử nghiệm, thuốc đối chiếu, tiêu chuẩn người tình nguyện, các văn bản này còn đưa ra những hướng dẫn riêng khi thử nghiệm đánh giá tương đương sinh học của thuốc viên kali clorid phóng thích kéo dài

Các văn bản này nêu rõ thuốc viên kali clorid PTKD là thuốc duy nhất không cần thử nghiệm đa liều và không cần thử nghiệm ảnh hưởng của thực phẩm [109] Nghiên cứu tương đương sinh học được thực hiện đơn liều 80 mEq (tương ứng với 10 viên kali clorid 600 mg PTKD), mô hình là thiết kế chéo chuẩn, 2 trình tự, 2 thời kỳ

Hàng ngày, kali được cung cấp cho cơ thể từ thực phẩm, vì vậy khẩu phần ăn có ảnh hưởng đến lượng kali đào thải Sự thay đổi về khẩu phần ăn có thể làm tăng hay giảm đáng kể lượng kali bài tiết trong nước tiểu Do đó, khẩu phần ăn cho đối tượng tham gia thử nghiệm phải được xây dựng và kiểm soát về năng lượng, hàm lượng kali, natri và lượng chất lỏng Người tham gia thử nghiệm phải uống từ 3000

ml đến 5000 ml nước trong ngày (so với bình thường là 1300 ml đến 2500 ml) Ngoài

ra, phải tiêu chuẩn hoá thời gian uống nước, thời gian cung cấp các bữa ăn chính và

phụ, đồng thời khuyến nghị người tình nguyện (NTN) ăn hết khẩu phần được cung cấp Thông tin chi tiết về thành phần của khẩu phần ăn phải được đính kèm trong báo cáo tương đương sinh học

Để tránh sự mất kali qua mồ hôi, NTN cần được ở trong nhà có điều hoà nhiệt độ và tránh các hoạt động thể lực trong suốt thời gian thử nghiệm Cần theo dõi sức khoẻ NTN để biết về tình trạng tiêu chảy kéo dài hay đổ mồ hôi quá mức nếu có xảy ra vì các tình trạng này sẽ ảnh hưởng đến kết quả nghiên cứu [111]

Điểm khác biệt quan trọng so với các nghiên cứu tương đương sinh học khác là ion kali có sẵn trong cơ thể Bình thường, lượng ion kali bài xuất vào nước tiểu trong 24 giờ là từ 20 đến 64 mEq [88] Do đó, cần phải xác định lượng ion kali căn bản trong nước tiểu NTN trước khi cho dùng thuốc Thử nghiệm này phải được xác định ngay trước khi cho NTN dùng thuốc thử nghiệm và thuốc đối chiếu trong điều kiện chuẩn hoá về điều kiện sinh hoạt, khẩu phần ăn và lượng nước uống Như vậy mỗi thời kỳ nghiên cứu gồm 3 giai đoạn liên tiếp là giai đoạn xác định lượng ion kali căn bản, giai đoạn uống thuốc và giai đoạn sau khi uống thuốc [111]

NTN tham gia vào nghiên cứu là người khoẻ mạnh, thể trạng và sức khoẻ bình thường căn cứ vào chỉ số khối cơ thể (Body Mass Index – BMI) trong khoảng 18-25 kg/m2 NTN được khám sức khoẻ tổng quát và xét nghiệm các thông số sinh học căn bản gồm nhịp tim, huyết áp, SGOT, SGPT, điện tâm đồ, kali huyết, creatinin huyết, creatinin niệu

Các tiêu chuẩn loại trừ khi tuyển chọn NTN:

- Có các dấu hiệu bệnh lý về thận, tiêu hoá, tim mạch, gan, thần kinh hoặc rối loạn thận-tụy

- Có dấu hiệu bất thường về thể chất và các thông số sinh học

- Hiện đang hút thuốc hoặc đã từng hút thuốc trong thời gian 6 tháng trước thử nghiệm