TEST KIỂM NHANH DƯ LƯNG KHÁNG SINH DÙNG TRONG THỰC PHẨM NANKAI BIOTECH SẢN XUẤT THEO CÔNG NGHỆ MỸ m Chứng nhận chất lượng sản phẩm: ISO 9001:2000 co vi c o Các lónh vực ứng dụng: 1/ Kiểm nghiệm chế phẩm từ bơ sữa 2/ Dư lượng chất độc hại, thuốc trừ sâu rau 3/ Dư lượng chất độc hại, kháng sinh thòt gia súc, gia cầm 4/ Test kiểm nhanh dùng mật ong 5/ Test kiểm nhanh dùng trứng 6/ Test kiểm nhanh dùng thủy sản 7/ Test kiểm nhanh dùng nước tiểu 8/ Test kiểm nhanh dùng thức ăn gia súc w w w d a Danh mục sản phẩm: 1/ Test kiểm nhanh Chloramphenicol 2/ Test kiểm nhanh Tetracyline 3/ Test kiểm nhanh Streptomicin 4/ Test kiểm nhanh Quinolones 5/ Test kiểm nhanh Sulfamethazine 6/ Test kiểm nhanh Malachite Green – Lecoumalachite 7/ Test kiểm nhanh Organophosphorus 8/ Test kiểm nhanh Sulfamethoxazol 9/ Test kiểm nhanh Melamine Công ty Cổ phần Đại Cổ Việt Chuyên tư vấn, lắp đặt, phân phối sản phẩm phòng kiểm nghiệm GIỚI THIỆU SƠ LƯỢC VỀ TEST KIỂM NHANH CHLORAMPHENICOL: I MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG: m Dụng cụ phát nhanh dư lượng Chloramphenicol dụng cụ kiểm tra nhanh, bước để định lượng Chloramphenicol có thực phẩm nói chung, bao gồm thủy hải sản, mật ong… Tổng thời gian thực xét nghiệm dụng cụ vào khoảng 25 phút .c o II TĨM TẮT: Chloramphenicol loại kháng sinh phổ rộng, sử dụng thường xun cho q trình chế biến thực phẩm có nguồn gốc động vật nhờ có đặc tính kháng khuẩn dược động học tuyệt vời co vi Tuy nhiên, thể người lại gây độc tính huyết học, cụ thể thiếu máu biến dạng với hàm lượng chưa xác định rõ Điều dẫn đến việc Chloramphenicol bị cấm sử dụng việc điều trị cho súc vật dùng làm ngun liệu chế biến thực phẩm .d a Dư lượng Chloramphenicol trước thường phát phương pháp miễn dịch phóng xạ (radioimmunologically) sắc ký khí (gas chromatographically) Tuy nhiên, xét nghiệm miễn dịch men (enzyme immunoassay) lại cho thấy ưu điểm rõ rệt so với phương pháp truyền thống Khơng cần dùng đến ngun liệu phóng xạ, thời gian thực xét nghiệm giảm đáng kể so với thực phương pháp sắc ký khí w Dụng cụ phát nhanh dư lượng Chloramphenicol dụng cụ kiểm tra nhanh để định lượng Chloramphenicol có mẫu thử với độ nhạy tùy theo u cầu kiểm nghiệm khách hàng Ưu điểm dụng cụ kết quan sát mắt thường tất thuốc thử bao gồm dụng cụ w III NGUN LÝ: w Ngun tắc xét nghiệm phản ứng kháng ngun - kháng thể Xét nghiệm nhanh bước xét nghiệm miễn dịch cạnh tranh, chất dò (detector reagent) bao gồm mảnh vàng keo (colloidal gold) tráng phủ kháng thể kháng Chloramphenicol tinh khiết lực Trong chất phát (capture reagent) phức hợp Chloramphenicol-protein đính màng dụng cụ xét nghiệm Trong q trình xét nghiệm, mẫu thử qua màng Càng có nhiều chất phân tích mẫu thử, chúng cạnh tranh mạnh với Chloramphenicol đính màng để gắn kết với kháng thể chất dò (có số lượng giới hạn) Chloramphenicol, tồn mẫu thử với hàm lượng 0,1 ppb ngăn chặn gắn kết chất dò với Chloramphenicol đính màng, cho kết dương tính Công ty Cổ phần Đại Cổ Việt Chuyên tư vấn, lắp đặt, phân phối sản phẩm phòng kiểm nghiệm IV LƯU Ý : Khơng sử dụng q hạn ghi bao bì - Dụng cụ xét nghiệm nên giữ kín bao bì bảo vệ trước dùng - Sử dụng dụng cụ sớm tốt khơng q sau bỏ bao bì bảo vệ, nhiệt độ phòng cao 30 oC độ ẩm cao - Khơng đụng vào màng trắng dụng cụ xét nghiệm - Khơng dùng ethyl acetate phòng khơng có thơng .c o V BẢO QUẢN VÀ ĐỘ ỔN ĐỊNH: m - Bảo quản nhiệt độ phòng (4-30oC) bao bì bảo vệ Dụng cụ ổn định thời hạn có ghi bao bì KHƠNG ĐƯỢC ĐỂ ĐƠNG LẠNH dùng q thời hạn sử dụng vi VI BỘ THIẾT BỊ XÉT NGHIỆM BAO GỒM: Dụng cụ phát nhanh dư lượng Chloramphenicol (40 chiếc) - Chất hút ẩm (một miếng cho gói) - Chất đệm PBST (một lọ cho bộ) - Ống nhỏ giọt sử dụng lần (một ống cho gói) - Tờ hướng dẫn sử dụng .d a co - VII CÁCH XỬ LÝ MẪU THỬ: Mẫu thử nên để nơi mát, tránh ánh sáng trực tiếp Làm đồng lấy lượng hợp lý mẫu thử (vd: 50 g) - Cân g mẫu thử bỏ vào ống ly tâm 50 ml w w - Thêm 10 ml ethyl acetate lắc vòng 5-10 phút - Ly tâm: phút / 4000 rpm / nhiệt độ phòng (20-25°C / 68-77°F) phòng kiểm nghiệm, giấy lọc kiểm cảng thu mua w - - Lấy ml lớp ethyl acetate phía cho vào bình quay làm bay ethyl acetate 65oC máy quay chân khơng, cho vào ống nghiệm làm bay ethyl acetate 65oC khí Nitơ - Hồ tan chất cặn 0,3 ml dung dịch PBST, thêm 0,3 ml dung dịch nhexane trộn phút - Chuyển dung dịch vào ống nghiệm dùng 100 μl lớp dung Công ty Cổ phần Đại Cổ Việt Chuyên tư vấn, lắp đặt, phân phối sản phẩm phòng kiểm nghiệm dịch để đưa vào xét nghiệm VIII QUY TRÌNH THỰC HIỆN: Đọc kỹ tồn quy trình trước thực Để dụng cụ xét nghiệm mẫu thử ổn định nhiệt độ phòng trước xét nghiệm m Chuẩn bị mẫu thử theo mục (Cách xử lý mẫu thử) vi c o Lấy dụng cụ phát nhanh dư lượng Chloramphenicol khỏi bao bì bảo vệ co Giữ ống nhỏ giọt thẳng đứng nhỏ giọt đầy dung dịch thử vào giếng thử (S) dụng cụ, bắt đầu tính thời gian Lưu ý: tránh đưa bọt khí vào giếng thử (S) Xem minh hoạ hình .d a Chờ vạch màu đỏ lên Nên đọc kết vòng 3~5 phút Cần ý màng thử dụng cụ phải hồn tồn trước đọc kết Khơng nên đánh giá kết sau phút C IX CÁCH ĐỌC KẾT QUẢ: T ÂM TÍNH: w w Hai vạch: vạch thử (T) đậm vạch chuẩn (C), vạch tham chiếu (R) Kết cho biết hàm lượng Chloramphenicol mẫu thử C 0,1 ppb T w DƯƠNG TÍNH: Hai vạch: vạch thử (T) nhạt vạch chuẩn (C), khơng thấy vạch thử Kết cho biết hàm lượng Chloramphenicol mẫu thử 0,1 ppb C T KẾT QUẢ SAI: vạch chuẩn khơng xuất Kết lượng mẫu thử khơng đủ quy trình kỹ thuật thực sai Xem lại quy trình làm lại xét nghiệm với dụng cụ Nếu gặp trục trặc, ngừng việc sử dụng dụng cụ thử liên hệ với cơng ty phân phối Công ty Cổ phần Đại Cổ Việt Chuyên tư vấn, lắp đặt, phân phối sản phẩm phòng kiểm nghiệm X KIỂM SỐT CHẤT LƯỢNG: Một phép kiểm tra chất lượng đưa vào q trình thử Một vạch đỏ xuất vùng chuẩn (C), vùng tham chiếu (R), xem kết kiểm tra chất lượng tích hợp sẵn Điều cho biết lượng mẫu thử đủ kỹ thuật thao tác .c o m Các tiêu chuẩn kiểm sốt chất lượng khơng kèm theo dụng cụ Tuy nhiên, chúng tơi khuyến cáo việc kiểm sốt chất lượng dương tính âm tính nên thực với tiêu chuẩn thực hành thí nghiệm tốt để chắn quy trình thử thực XI HIỆU SUẤT : Độ nhạy: vi Độ nhạy phân tích dụng cụ phát nhanh dư lượng Chloramphenicol 0,1 ppb Độ nhạy xác định cách thử lặp lặp lại mẫu thử chứa 0,1 ppb Chloramphenicol co Đặc trưng: d a Dụng cụ phát nhanh dư lượng Chloramphenicol đặc trưng việc phân tích Chloramphenicol với nồng độ 0,1 ppb lớn Việc thêm Thiamphenicol (100 ppb) Florfenicol (3000 ppb) vào dịch chuẩn âm tính (dung dịch đệm PBST) mẫu thử dương tính (0,1 ppb Chloramphenicol) cho thấy khơng có phản ứng chéo Khơng phản ứng chéo với với tetracycline, gentamicin ampicillin Độ xác: w w w Một thử nghiệm đa trung tâm thực Bình Thuận để so sánh kết xét nghiệm thực Dụng cụ phát nhanh dư lượng Chloramphenicol với kết xét nghiệm thực phương pháp tương đối thơng dụng thị trường ELISA Nghiên cứu thực 234 mẫu xét nghiệm: hai phương pháp xét nghiệm nhận dạng 145 mẫu âm tính 98 mẫu dương tính Kết cho thấy 94.7% trùng hợp hai phương pháp xét nghiệm Công ty Cổ phần Đại Cổ Việt Chuyên tư vấn, lắp đặt, phân phối sản phẩm phòng kiểm nghiệm ... phát nhanh dư lượng Chloramphenicol (40 chiếc) - Chất hút ẩm (một miếng cho gói) - Chất đệm PBST (một lọ cho bộ) - Ống nhỏ giọt sử dụng lần (một ống cho gói) - Tờ hướng dẫn sử dụng .d a co - VII... lý mẫu thử (vd: 50 g) - Cân g mẫu thử bỏ vào ống ly tâm 50 ml w w - Thêm 10 ml ethyl acetate lắc vòng 5-1 0 phút - Ly tâm: phút / 4000 rpm / nhiệt độ phòng (2 0-2 5°C / 6 8-7 7°F) phòng kiểm nghiệm,...GIỚI THIỆU SƠ LƯỢC VỀ TEST KIỂM NHANH CHLORAMPHENICOL: I MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG: m Dụng cụ phát nhanh dư lượng Chloramphenicol dụng cụ kiểm tra nhanh, bước để định lượng Chloramphenicol