_ BÀI NGHIÊN CỨU Phân lập a - tocopherolquinone lupeol từ thân Bọ mẩy (Clerodendrum cyrtõphyllum Turcz.) Nguyễn Thị Dừa**, Nguyễn Việt cường**, Nguyễn Thành Đạt*** Thái Nguyễn Hùng Thu*, Nguyễn Thái An* *Trường Đại học DượcHà Nội, **Trường Đại học Bách Khoa Hà Nội, ***Trung tâmKiểm nghiệm Hà Nội SUMMARY From chloroform extracts of the stem of Clerodendrum cyrtophyllum Turcz., two compounds a-tocopherolquinone (1) and lupeol (2) - were isolated by various chromatography methods Their chemical structures were elucidated by means of ESI-mass, ’H-NMR, ’^C-NIVIR, HSQC, HMBC spectra This is the first report of(1) and (2) compounds from the stem of Clerodendrum cyrtophyllum Turcz Đặt vấn đề Clerodendrum cyrtophylum Turcz., tên thường gọi Bọ mẩy, loài có diện tích phân bố rộng so với loài chi Clerodendrum L Theo kinh nghiệm dân gian, tất phận Bọ mẩy đểu nhân dân ta sử dụng với mục đích khác Toàn thường dùng để trị viêm ruột, lỵ trực trùng máu, viêm hầu họng, viêm amidan, viêm tuyến nước bọt, cảm mạo phát sốt, lợi xuất huyết Rễ Bọ mẩy chữa viêm ruột, lỵ, viêm họng, viêm amidan, viêm tuyến nước bọt, cảm mạo phát sốt Lá non Bọ mẩy có tác dụng lợi tiêu hóa, dùng nấu nước tắm trị ghẻ lở [3] Đã có sổ hợp chất phân lập từ Bọ mẩy [4], [5], [6], [7], nhiên chưa có nghiên cứu đẩy đủ toàn diện dược liệu Trong khuôn khổ nghiên cứu loài thuộc chi Clerodendrum L, phân lập hợp chất từ loài Clerodendrum cyrtophylum Turcz [2] Bài báo tiếp tục mô tả trình phân lập nhận dạng hợp chất TA06 {1) TA08 (2) từ thân Bọ mẩy thu hái Thái Nguyên Các hợp chất khác phân lập trình biện giải phổ công bố sổ Nguyên liệu, phương pháp nghiên cứu Nguyên liệu Mẫu nghiên cứu thân Bọ mẩy thu hái Thái Nguyên, giám định tên khoa học là: ũerodendrum cyrtophyllum Turcz họ cỏ roi ngựa (Verbenaceae) Phương pháp phương tiện nghiên cứu Sử dụng phương pháp sắc ký thông dụng để phân lập chất Cấu trúc hợp chất phân lập nhận dạng dựa liệu phổ MS NMR IM Sắc ký lớp mỏng (SKLM) thực mỏng tráng sẵn Silicagel GF254 (Merck) Phát chất đèn tử ngoại bước sóng 254nm 356nm màu dung dịch acid sulfuric 10%, sấy 110°c phút - Sắc ký cột với chất hấp phụ Silicagel có cỡ hạt là40-63|jm (230-400 mesh) - Điểm chảy đo máy Kofler microhotstage Viện Hóa học hợp chất thiên nhiên - Phổ khối lượng (ESI-MS) đo máy AGILENT 1100 LC-MSD Trap Viện Hóa học hợp chất thiên nhiên - Các phổ 'H-NMR, '^C-NMR, DEPT, đo máy Bruker AM500 FT-NMR Spectrometer, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam Kết bàn luận M 446 Phổ 'H-NMR (1) tín hiệu đặc trưng tetra-alkyl benzoquinon.Tren phổ có xuất tín hiệu đơn nhóm methyl vòng quinone ỗ 2,03 (s, 6H, Me-2 Me-5) 2,06 (s, 3H, Me-3) chứng tỏ vòng quinone bị thay hết proton Tín hiệu nhóm methyl đính với carbon gắn nhóm hydroxyl xuất õ 1,23 (s, H - Me-3') nhóm methyl ô 0,88 (m, 6H, Me-15'), 0,89 (m, 3H, Me m o , 86 (m, Me-7') Trên phổ '^C-NMR DEPT thấy xuất 29 tín hiệu carbon với tín hiệu nhóm methyl, tín hiệu carbon methin, 11 tín hiệu carbon methylen tín hiệu carbon bậc bốn Trong đó, tín hiệu đặc trưng vòng quinon xuất vị trí cộng hưởng 187,69 (C-1); 140,46 (C-2); 140,20 (C-3); 187,24 (C-4); 140,56 (C-5); 144,45 (C-6) nhóm methyl vòng quinon vị trí cộng hưởng 12,28 (Me-2); Í (Me-3); 11,96 (Me-5) Ngoài có tín hiệu nhóm methyl đính với carbon bậc bốn có gắn nhóm hydroxyl xuất 26,60 (Me-3') nhóm methyl ỗ 22,63 22,72 (2xMe-15'); 19,76 (Me-ir); 19,71 (Me-7T Các tín hiệu nhóm carbon methylen xuất khoảng tín hiệu cộng hưởng 21,34 - 42,32 Hợp chất (1) xác định a tocopherolquinon (2,3,5-trimethyl-6-(3'-0-methyl)phytyl-1, 4-benzoquinon) nhờ việc so sánh với số liệu phổ hợp chất a - tocopherolquinon [8], Chiết xuất phân lập hợp chất Bột thô mẫu nghiên cứu cho vào bình chiết inox, sử dụng dung môi methanol, chiết nhiểu lẩn phương pháp ngâm nhiệt độ phòng (25“C) Dịch chiết cất thu hổi dung môi áp suất giảm đến cắn Hòa cắn với lượng vừa đủ nước nóng, rổi lắc với dung môi có độ phân cực tăng dần: n-hexan, cloroform, ethỵl acetat thu phân đoạn dịch chiết, cất thu hổi dung môi áp suất giảm để thu cắn phân đoạn Cắn cloroform (55g) phân lập cột Silicagel, rửa giải gradient dung môi với hệ n-hexan:ethyl acetat (100:0 100:20) thu phân đoạn ký hiẹu TC1(25g), TC2(14g) TC3(15g) Báng IDữliệuphổNM RcủoO) Phân đoạn TC2 tiếp tục phân lập sắc ký cột c '6 J ] với hệ rửa giải hỏn hợp n-hexan:aceton (6:1), thu 187,7 phân đoạn TC2A đến TC2E Phân đoạn TC2E 140,5 (350mg) tiếp tục phân lập với dung môi rửa 140,5 giải cloroform, thu phân đoạn TC2E1 (220mg) 187,0 vàTC2E2 (120mg).TừTC2E1 qua lán sắc ký cột với 140,6 hệ dung môi n-hexan:aceton có tỷ lệ khác 144,5 phân lập chất tinh khiết TA06(1 Omg) (1) Me-2 12,3 vàTA08(10mg)(2) Me-3 12,4 12,0 Me-5 Các chất phân lập kiểm tra độ tinh khiết 21,4 r SKLM 2' 40,3 Xác định cấu trúc chất phân lập 70,7 3' Hợp chất TA06{1) 4' 42,3 (1) dạng dầu màu vàng Tan ethanol, 21,2 5' methanol nóng, cloroform Công thức phân tử 187,69 140,46 140,20 187,24 140,56 - 144,45 - 12,28 2,03 (3H,s) 12,36 11,96 2,06 (3H,s) 21,43 2,56 (2H,m ) 40,29 1,05-1,61 72,69 - 42,33 21,34 2,03 (3H,s) 1,05-1,61 1,05-1,61 BAI NGH ÊNCỮU # 6' 37,6 37,64 7' 8' 9' 10' 11' 12' 32,7 29,7 32,83 29,71 24,5 37,5 24,51 37,46 32,79 32,7 37,3 24,8 13' 14' 15' Me-15' Me-15' Me-11' Me-7' 1,05-1,61 1,05-1,61 1,05-1,61 1,05-1,61 1,05-1,61 39,4 37,32 24,80 39,40 1,05-1,61 1,05-1,61 28,0 27,99 1,05-1,61 22,6 22,7 22,63 22,72 19,8 19,76 19,71 19,7 27,8 Me-3' 1,05-1,61 1,05-1,61 26,60 0,88 (3H,m ) 0,88 (3H, m) 0,89 (3H,m ) 0,86 (3H,m ) 1,23 (3H,s) Nhánh isopropenỵl xác nhận tín hiệu carbon methylen ỗ 109,33 (C-29) với tín hiệu carbon bậc bốn ÔI 50,96 (C-20) carbon methyl ô 19,33 (C-30) Ngoài tín hiệu carbon oximethin õ 79,03 (C-3) cho phép xác nhận có nhóm hydroxyl phân tử chất ( ) Bỏng Dữ liệu phổHUR (2) c *6J8] 38,7 27,5 79,0 38,9 cỗũ a - tocopherolquinone đo CDCIj [81 ... vị trí axial (a) hay alpha (a) dẫn tới OH C-3 equatorial (e) [9] Từ phân tích nêu hợp chất ( 2) xác định 3p-hydroxylup20(2 9) en hay lupeol 29 Kết luận Từ phân đoạn cloroform thân Bọ mẩy, hai hợp... from Verbena officinalis", Phytochemistry, 49( 1), 269-271 Nazli Rasool, Abdul Qasim Khan, Viqar Uddin Ahmad and Abdul Malik, (199 1), "A benzoquinone and a coumestan from Psoralea Plicata",! Phytochemistry,... No.8,2800-2803, Mochammad Sholichin et al (198 0), "'^c Nuclear magnetic resonance of Lupane-type triterpens, lupeol, betulin and betulinic acid", Chemical and Pharmaceutical Bulletin, Vol 28 ( 3), 1006-1008