Nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa theo hướng bảo vệ gan của polysaccharid chiết xuất từ nấm linh chi vàng (ganoderma colossum)

Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CHỐNG OXY HÓA THEO HƯỚNG BẢO VỆ GAN CỦA POLYSACCHARID CHIẾT XUẤT TỪ NẤM LINH CHI VÀNG (GANODERMA COLOSSUM) Ngô Quốc Hận*, Nguyễn Thị Thu Hương* TÓM TẮT Mục tiêu nghiên cứu: Những công trình nghiên cứu chứng minh triterpenoid, polysaccharid nhóm hoạt chất định dược tính nấm linh chi Kết nghiên cứu gần cho thấy cao chiết cồn cao chiết nước từ nấm linh chi vàng (Ganoderma colossum) có hoạt tính chống oxy hóa in vitro, làm giảm tăng hàm lượng malonyl dialdehyd (MDA) gan bị gây tổn thương oxy hóa cyclophosphamid Đề tài thực với mục tiêu khảo sát tác dụng chống oxy hóa theo hướng bảo vệ gan polysaccharid thô chiết từ nấm linh chi vàng thực nghiệm gây tổn thương oxy hóa tế bào gan cyclophosphamid Đối tượng Phương pháp nghiên cứu: Polysacharid thô chiết phương pháp đun hồi lưu bột nấm với nước (1:20) tủa cồn 96% (tỷ lệ 1:5) Nghiên cứu in vitro: Khảo sát hoạt tính dập tắt gốc tự thử nghiệm 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) hoạt tính ức chế peroxy hoá lipid thử nghiệm MDA Nghiên cứu in vivo: Polysaccharid thô cho uống liên tục ngày sau tiêm phúc mạc liều cyclophosphamid 150 mg/kg thể trọng Vào ngày thứ 8, mổ tách lấy gan chuột đem định lượng MDA glutathion (GSH) Kết quả: Polysaccharid thô chiết từ nấm linh chi vàng có hoạt tính chống oxy hóa in vitro yếu Ở liều uống 100 mg/kg thể trọng chuột ngày, polysaccharid làm giảm tăng hàm lượng MDA gan phục hồi giảm hàm lượng GSH nội sinh gan chuột bị gây tổn thương oxy hóa cyclophosphamid Polysaccharid thô liều uống 50 mg/kg không làm thay đổi hàm lượng MDA GSH đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng tương ứng, cho thấy liều chưa thể tác dụng thay đổi hàm lượng MDA hàm lượng GSH gan gây cyclophosphamid Kết luận: Polysaccharid thô chiết từ nấm linh chi vàng có tác dụng chống oxy hóa theo hướng bảo vệ gan chuột bị gây tổn thương oxy hóa cyclophosphamid Từ khóa: Nấm linh chi vàng, polysaccharid thô, cyclophosphamid, tác dụng chống oxy hóa, tác dụng bảo vệ gan ABSTRACT STUDY ON ANTIOXIDANT EFFECTS OF GANODERMA COLOSSUM ON CYCLOPHOSPHAMIDE-INDUCED HEPATOTOXICITY Ngo Quoc Han, Nguyen Thi Thu Huong * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 15 - Supplement of No - 2011: 50 - 55 Objectives: It has been reported that triterpenoid and polysaccharide compounds derived from Ganoderma lucidum (Lingzhi or Reishi) play an important role in pharmacological effects of Lingzhi Recently, it has been determined that both ethanol extract and aqueous extract of Ganoderma colossum had antioxidant activity and produced the protective effect against cyclophosphamide-induced liver damage The purpose of this study was to evaluate the antioxidant activity and hepatoprotective effect of crude polysaccharide extracted from Ganoderma colossum on liver damage induced by cyclophosphamide in mice * Trung Tâm Sâm Dược liệu TP Hồ Chí Minh-Viện Dược liệu Tác giả liên lạc: PGS.TS Nguyễn Thị Thu Hương ĐT: 38298530 E-mail: huongsam@hotmail.com 50 Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học Material and Method: Mushroom powders were immersed with 20-folds volume water and refluxed for h at the temperature of 100oC The aqueous extract was precipitated with 96% ethanol (1:5) and the precipitate thus obtained was dried For in vitro study, the free radical scavenging effect on 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical (DPPH) test and the anti-lipid peroxidation effect on malonyl dialdehyde (MDA) test of crude polysaccharide were examined For in vivo study, the model of cyclophosphamide-induced liver damage (single dose of 150 mg/kg, intraperitoneal injection) was applied to study on the hepatoprotective effect of crude polysaccharide via measuring liver MDA content and liver glutathione content Results: The free radical scavenging effect on DPPH test and the anti-lipid peroxidation effect on MDA test of crude polysaccharide were not high when compared with positive control Crude polysaccharide at the oral dose of 100 mg/kg for days alleviated the increase of hepatic MDA content and restored the decrease of hepatic glutathione content caused by cyclophosphamide Crude polysaccharide at the oral dose of 50 mg/kg had no effect on the MDA content or GSH content as compared with respective control Conclusion: Crude polysaccharide extracted from Ganoderma colossum produced the hepatoprotective effect against cyclophosphamide-induced liver damage Key words: Ganoderma colossum, crude polysaccharide, cyclophosphamide, antioxidant activity, hepatoprotective effect chi vàng chưa nghiên cứu Do đó, đề tài ĐẶT VẤN ĐỀ “Nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa theo Nhiều công trình nghiên cứu chứng hướng bảo vệ gan polysaccharid chiết từ minh nấm linh chi (Ganoderma lucidum (Fr.) nấm linh chi vàng Ganoderma colossum” Karst) có tác dụng chống oxy hóa, kích thích thực với mục tiêu sau: hoạt động hệ miễn dịch có hiệu trị - Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa in vitro liệu tốt cho bệnh nhân bị ung thư polysaccharid thô chiết từ nấm linh chi bị bệnh gan Các triterpenoid, vàng thử nghiệm 1,1-diphenyl-2polysaccharid chứng minh picrylhydrazyl (DPPH) thử nghiệm nhóm hoạt chất định dược tính linh malonyl dialdehyd (MDA) chi(3) Nấm linh chi vàng (Ganoderma colossum) - Khảo sát tác dụng polysaccharid thô lục bảo linh chi, nhiên chiết từ nấm linh chi vàng thực nghiệm có báo cáo tác dụng sinh học loài nấm Kleinwatcher P & cs El Dine gây tổn thương oxy hóa gan chuột nhắt R.S & cs phân lập xác định cấu trúc trắng cyclophosphamid, thông qua lanostan triterpen lacton (colossolacton I, II, tiêu xác định hàm lượng MDA glutathion III, IV) Ganoderma colossum Việt (GSH) gan Nam(5,6) Ngoài tác dụng kháng viêm, kháng ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU khuẩn độc tế bào, colossolacton có tác Đối tượng nghiên cứu dụng kháng HIV kháng virus gây viêm gan (4) siêu vi C Kết nghiên cứu gần Nấm linh chi vàng cung cấp Trung Trung tâm Sâm Dược liệu TP.HCM cho thấy tâm Nghiên cứu Linh chi Nấm Dược liệu cao chiết cồn cao chiết nước từ nấm linh chi Polysacharid thô chiết phương pháp vàng có tác dụng dập tắt gốc tự ức chế đun hồi lưu bột nấm với nước (tỷ lệ 1:20) trình peroxy hóa màng tế bào, làm giảm tăng tủa cồn 96% (tỷ lệ 1:5) Hiệu suất hàm lượng MDA gan bị gây tổn thương chiết 4,66% Hàm lượng đường hòa tan oxy hóa cyclophosphamid(8) Tuy nhiên 47,39% hàm lượng đường khử 10,67% nghiên cứu polysaccharid chiết từ nấm linh Chuyên Đề Dược Khoa 51 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Động vật nghiên cứu Chuột nhắt trắng đực, chủng Swiss albino, 5-6 tuần tuổi, trọng lượng trung bình 22 ± g, cung cấp Viện Vắc xin Sinh phẩm Y tế – TP Nha Trang để ổn định tuần trước thử nghiệm Chuột nuôi đầy đủ thực phẩm viên, rau xanh nước uống đầy đủ Thể tích cho uống mẫu thử nghiệm hay tiêm phúc mạc cyclophosphamid 10 ml/kg thể trọng chuột Thuốc thử nghiệm Endoxan® chứa 534,5 mg cyclophosphamid monohydrat tương đương với 500 mg cyclophosphamid khan (Baxter Oncology GmbH, Germany) Lô sản xuất 9F615E, ngày sản xuất: 06/2009; hạn dùng 06/2012 Các thuốc đối chiếu: Acid ascorbic (Merck, Germany); Trolox (Calbiochem Ltd Co.); Silymarin (Sigma Co.Ltd, USA) Phương pháp nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu in vitro Phương pháp xác định khả dập tắt gốc tự (thử nghiệm DPPH)(2,8) Công thức tính % hoạt tính chống oxy hóa (HTCO): HTCO% = [(ODC – ODT) / ODC] x 100 ODC: Mật độ quang chứng dung môi (DMSO hay MeOH) ODT: Mật độ quang mẫu thử Các số liệu kết thử nghiệm biểu thị trị số trung bình lần đo khác Phương pháp nghiên cứu in vivo Gây mô hình cyclophosphamid(7,8) tổn thương gan Chuột thí nghiệm chia thành hai nhóm: - Nhóm bình thường, ký hiệu CY (-): Lô chứng: uống nước cất Lô thử: uống polysaccharid thô hòa tan nước cất liều 100 mg/kg thể trọng Lô thuốc đối chiếu: uống silymarin liều 100 mg/kg thể trọng - Nhóm bệnh lý, ký hiệu CY(+): chuột tiêm phúc mạc liều cyclophosphamid 150 mg/kg thể trọng 0,5 ml mẫu thử nồng độ khảo sát cho phản ứng với đồng lượng dung dịch DPPH 0,8 mM pha MeOH Hỗn hợp sau pha để nhiệt độ phòng 30 phút Đo quang bước sóng λ = 515 nm Acid ascorbic sử dụng làm chất đối chiếu Lô thử: uống polysaccharid thô hòa tan nước cất liều 50 100 mg/kg thể trọng Phương pháp xác định khả ức chế peroxy hóa lipid (thử nghiệm MDA)(8,9) Lô thuốc đối chiếu: uống silymarin liều 100 mg/kg thể trọng 0,1 ml mẫu thử nồng độ thử nghiệm cho phản ứng với 0,5 ml dịch đồng thể não thêm đệm phosphat vừa đủ ml Ủ hỗn hợp phản ứng 37oC 15 phút dừng phản ứng ml acid tricloacetic 10% Sau ly tâm lấy dịch cho phản ứng với 1ml acid thiobarbituric 0,8% 15 phút nhiệt độ 100oC Làm lạnh đo quang bước sóng λ = 532 nm Trolox, đồng phân vitamin E sử dụng làm chất đối chiếu Thời gian cho uống ngày khoảng 8-9 sáng liên tục ngày sau tiêm cyclophosphamid Vào ngày thứ 8, sau lần cho uống cuối mổ tách lấy gan chuột đem định lượng MDA GSH Tính toán kết 52 Lô chứng: uống nước cất Phương pháp xác định hàm lượng malonyl dialdehyd (MDA) gan chuột(8) Tách gan chuột nghiền đồng thể dung dịch đệm KCl 1,15 % theo tỉ lệ 1:10 nhiệt Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 độ 0-5 0C Lấy ml dịch đồng thể, thêm vào ml dung dịch đệm Tris (pH = 7,4) Ủ hỗn hợp phản ứng 37oC 60 phút dừng phản ứng ml acid tricloacetic 10% Sau ly tâm lấy ml dịch cho phản ứng với ml acid thiobarbituric 0,8 % 100 0C 15 phút đo quang λ = 532 nm Hàm lượng MDA (nM/ml) tính theo phương trình hồi quy tuyến tính chất chuẩn MDA Phương pháp xác định hàm lượng glutathion (GSH) gan chuột(7) Tách gan chuột nghiền đồng thể dung dịch đệm KCl 1,15 % theo tỉ lệ 1:10 nhiệt độ 0-5 0C Lấy ml dịch đồng thể gan thêm đệm Tris (pH = 7,4) vừa đủ ml Ủ hỗn hợp phản ứng 37oC 60 phút dừng phản ứng ml acid tricloacetic 10% Sau ly tâm lấy ml dịch cho phản ứng với 0,2 ml thuốc thử Ellman 5,5’–dithiobis– (2–nitrobenzoic acid) thêm đệm EDTA phosphat vđ ml Để phút nhiệt độ phòng sau tiến hành đo quang bước sóng λ = 412 nm Hàm lượng GSH (nM/g protid) tính theo phương trình hồi quy tuyến tính chất chuẩn GSH Đánh giá kết Các số liệu biểu thị trị số trung bình: M ± SEM (Standard error of the mean – sai số chuẩn giá trị trung bình) xử lý thống kê dựa vào phép kiểm One–Way ANOVA Student-Newman-Keuls test (phần mềm Jandel Scientific SigmaStat) Kết thử nghiệm đạt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% P < 0,05 so với lô chứng KẾT QUẢ-BÀN LUẬN Kết nghiên cứu in vitro Bảng Hoạt tính chống oxy hóa in vitro polysaccharid thô chiết từ nấm linh chi vàng thử nghiệm DPPH NỒNG ĐỘ µg/ml Chứng ΔODTrung bình 0,775 Chuyên Đề Dược Khoa HTCO% - Nghiên cứu Y học NỒNG ĐỘ µg/ml 2000 1500 1000 500 250 100 50 ΔODTrung bình 0,277 0,370 0,477 0,605 0,686 0,721 0,767 HTCO% 64,23 52,23 38,41 21,89 11,43 6,97 0,97 10 0,773 0,26 Bảng Hoạt tính chống oxy hóa in vitro polysaccharid thô chiết từ nấm linh chi vàng thử nghiệm MDA NỒNG ĐỘ µg/ml Chứng 2000 1500 1000 500 250 100 50 10 ΔOD Trung bình 0,431 0,161 0,247 0,286 0,318 0,338 0,359 0,390 0,404 HTCO% 62,72 42,74 33,57 26,13 21,60 16,61 9,41 6,27 Nhận xét bàn luận Trong thử nghiệm DPPH, DPPH gốc tự có màu tím nhờ vào điện tử N chưa ghép đôi, sau phản ứng với oxy nguyên tử chất dập tắt gốc tự bị giảm màu tím Hoạt tính chống oxy hóa polysaccharid thể qua việc làm giảm màu DPPH, dẫn đến giảm độ hấp thu bước sóng 515 nm Trong thử nghiệm MDA, MDA chất sinh trình peroxy hóa lipid màng tế bào, phản ứng với thuốc thử acid thiobarbituric tạo phức hợp trimethin có màu hồng Hoạt tính chống oxy hóa polysaccharid thể qua việc làm giảm màu phức hợp làm giảm lượng MDA có mẫu dẫn đến giảm độ hấp thu bước sóng 532 nm Bảng kết cho thấy, hoạt tính chống oxy hóa polysaccharid hai thử nghiệm DPPH MDA nồng độ 2000 μg/ml cao nhất, nhiên hoạt tính yếu so sánh với giá trị IC50 chất đối chiếu dương (bảng 3) 53 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học Bảng Giá trị IC50 polysaccharid chiết từ nấm linh chi vàng IC50 (µg/ml) DPPH Polysaccharid 1462,6 MDA Acid ascorbic 46,2 Polysaccharid 1603,2 Trolox 860 Kết nghiên cứu in vivo Bảng Kết khảo sát hàm lượng MDA gan Nhóm CY(-) CY(+) Lô (n = 10) Liều uống (mg/kg) Chứng Polysaccharid Silymarin Chứng 100 100 50 100 100 Polysaccharid Silymarin Hàm lượng MDA (nM/ml dịch đồng thể) 2,82 ± 0,18 3,23 ± 0,13 3,07 ± 0,21 6,42 ± 0,42 6,13 ± 0,32 4,22 ± 0,43 3,54 ± 0,34 Hàm lượng MDA (nM/g Protid) 76,90 ± 4,82 88,22 ± 3,51 83,90 ± 5,78 175,58 ± 11,39# 167,35 ± 8,70 * 115,11 ± 11,82 * 96,70 ± 9,37 CY(-) : Nhóm chuột bình thường, không tiêm cyclophosphamid; CY(+): Nhóm chuột bị gây stress oxy hóa, có tiêm cyclophosphamid; # P< 0,05 đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng CY (-); * P< 0,05 đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng CY(+) tương ứng Bảng Kết khảo sát hàm lượng GSH gan Nhóm CY(-) CY(+) Lô (n = 10) Chứng Polysaccharid Silymarin Chứng Polysaccharid Silymarin Liều uống (mg/kg) 100 100 50 100 100 Hàm lượng GSH (nM/ml dịch đồng thể) 425,88 ± 10,85 414,98 ± 23,77 430,01 ± 20,15 245,24 ± 13,0 250,22 ± 16,74 332,17 ± 19,99 361,28 ± 24,35 Hàm lượng GSH (nM/g Protid) 11626,73 ± 296,28 11329,20 ± 648,83 11739,64 ± 550,13 6695,20 ± 354,81# 6831,13 ± 457,10 9068,51 ± 545,81* 9863,33 ± 664,68* CY(-) : Nhóm chuột bình thường, không tiêm cyclophosphamid; CY(+): Nhóm chuột bị gây stress oxy hóa, có tiêm cyclophosphamid; # P< 0,05 đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng CY(-) ; *P< 0,05 đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng CY(+) tương ứng Nhận xét bàn luận bảng kết Lô chứng tiêm cyclophosphamid uống nước cất ngày có hàm lượng MDA tăng đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng bình thường, chứng tỏ cyclophosphamid gây tổn thương peroxy hóa màng tế bào dẫn đến việc làm tăng hàm lượng MDA gan Cyclophosphamid biến đổi sinh học gan trở thành 4-hydroxycyclophosphamid aldophosphamid có tính alkyl hóa, dẫn đến hình thành tác nhân gây độc tế bào acrolein, chloroacetaldehyd(1) Ngoài ra, nghiên cứu trước nhóm chứng minh cyclophosphamid làm giảm hàm lượng 54 glutathion, chất chống oxy hóa nội sinh thể, đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng sinh lý ngày thứ sau tiêm cyclophosphamid(7) Kết thực nghiệm đề tài ghi nhận kết tương tự, cho thấy có giảm hàm lượng glutathion lô chứng tiêm cyclophosphamid đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng sinh lý Điều cho thấy glutathion nhóm chất có chứa sulfhydryl (như cystein N-acetylcystein) với chức giải độc thông qua hệ thống cytocrom P-450 tương tác với acrolein, chất chuyển hóa cyclophosphamid thể(1) Độc tính cyclophosphamid tăng kéo theo suy giảm Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 glutathion nội sinh gan, gián tiếp làm tăng trình peroxy hóa lipid màng tế bào dẫn đến hàm lượng MDA tăng Lô bình thường không tiêm cyclophosphamid uống polysaccharid thô chiết từ nấm linh chi vàng ngày có hàm lượng MDA GSH không thay đổi đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng, chứng tỏ polysaccharid tác dụng thể chuột bình thường Lô tiêm cyclophosphamid uống polysaccharid thô chiết từ nấm linh chi vàng liều 50 mg/kg thể trọng chuột ngày không làm thay đổi hàm lượng MDA GSH đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng tương ứng, cho thấy liều chưa thể tác dụng thay đổi hàm lượng MDA hàm lượng GSH gan gây cyclophosphamid Lô tiêm cyclophosphamid uống polysaccharid thô chiết từ nấm linh chi vàng liều 100 mg/kg thể trọng chuột ngày có tác dụng ức chế gia tăng hàm lượng MDA làm tăng hàm lượng GSH gan đạt ý nghĩa thống kê so với lô chứng tương ứng, cho thấy polysaccharid thô chiết từ nấm linh chi vàng liều thể tác dụng bảo vệ gan thực nghiệm gây tổn thương oxy hóa cyclophosphamid Thuốc đối chiếu dương silymarin, hoạt chất chiết xuất từ Silybum marianum (Cúc gai) thể tác dụng bảo vệ gan thực nghiệm gây tổn thương oxy hóa cyclophosphamid KẾT LUẬN Polysaccharid thô chiết từ nấm linh chi vàng có tác dụng chống oxy hóa theo hướng bảo vệ gan thực nghiệm gây tổn thương oxy hóa cyclophosphamid Cám ơn: Nhóm tác giả xin chân thành cảm ơn hỗ trợ kinh phí Sở Khoa học Công nghệ Tp.HCM TÀI LIỆU THAM KHẢO Chuyên Đề Dược Khoa Nghiên cứu Y học Abraham P., Sugumar E (2008) Increased glutathione levels and activity of PON1 (phenyl acetate esterase) in the liver of rats after a single dose of cyclophosphamide: a defense mechanism? Exp Toxicol Pathol., 59(5):301-306 Amarowiez R., Pegg R.P., Rahimi-Moghaddam P., Barl B., Weil J.A (2004) Free radical scavenging capacity and antioxidant activity of selected plant species from the Canadian prairies, Food Chemistry, 84: 551-562 Boh B., Berovic M., Zhang J., Zhi-Bin L (2007) Ganoderma lucidum and its pharmaceutically active compounds, Biotechnol Annu Rev., 265-301 El Dine R.S., El Halawayny A.M., Hattori M (2008) Anti-HIV1 protease activity of lanostane triterpenes from the Vietnamese mushroom Ganoderma colossum J Nat Prod., 71(6): 1022-1026 El Dine R.S., El Halawayny A.M., Norio Nakamura, ChaoMei MA, Hattori M (2008) New lanostane triterpene lactones from the Vietnamese mushroom Ganoderma colossum (FR.)C.F.BAKER., Chem Pharm Bull., 56(5): 642-646 Kleinwatcher P., Ngo Anh, T.T Kiet, Schlegel B., Dahse H M., Hartl A., Grafe U (2001) Colossolactones, new triterpenoid metabolistes from a Vietnamese mushroom Ganoderma colossum J Nat Prod., 64(2): 236-239 Lê Minh Triết, Dương Thị Công Minh, Nguyễn Thị Thu Hương, Trần Công Luận (2008) Tác dụng Xuyên tâm liên (Andrographis paniculata Burm F Nees, Acanthaceae) thực nghiệm gây suy giảm miễn dịch cyclophospamid”, Y học TP Hồ Chí Minh, tập 12, phụ số 4: 142-147 Nguyễn Thị Thu Hương, Ngô Minh Nghĩa (2009) Nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa nấm Linh chi vàng (Ganoderma colossum, Ganodermataceae) Tạp chí Dược liệu, tập 14(6): 302306 Stroev E A., Makarova V G (1989) Determination of lipid peroxidation rate in tissue homogenate laboratory In: Manual in Biochemistry, Moscow, 243 -256 55 ... hóa theo Nhiều công trình nghiên cứu chứng hướng bảo vệ gan polysaccharid chi t từ minh nấm linh chi (Ganoderma lucidum (Fr.) nấm linh chi vàng Ganoderma colossum” Karst) có tác dụng chống oxy hóa, ... tính linh malonyl dialdehyd (MDA) chi( 3) Nấm linh chi vàng (Ganoderma colossum) - Khảo sát tác dụng polysaccharid thô lục bảo linh chi, nhiên chi t từ nấm linh chi vàng thực nghiệm có báo cáo tác. .. gan (4) siêu vi C Kết nghiên cứu gần Nấm linh chi vàng cung cấp Trung Trung tâm Sâm Dược liệu TP.HCM cho thấy tâm Nghiên cứu Linh chi Nấm Dược liệu cao chi t cồn cao chi t nước từ nấm linh chi