Đang tải... (xem toàn văn)
Bài viết thực hiện nhằm đánh giá khả năng chống oxy hóa và ức chế enzym αglucosidase của Hồng đảng sâm (Codonopsis javanica (Blume) Hook. f. Thoms). Để nắm chi tiết nội dung, mời các bạn cùng tham khảo bài viết.
VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 57-65 Original Article Evaluation of Antioxidant and α-glucosidase Inhibitory Activities of Codonopsisjavanica (Blume) Hook f Thoms’ Root Extract Nguyen Thi Thuy, Ngo Ha Linh Trang, Nguyen Thi Thanh Binh, Bui Thanh Tung* VNU School of Medicine and Pharmacy, 144 Xuan Thuy, Cau Giay, Hanoi, Vietnam Received 06 August 2020 Revised 26 August 2020; Accepted 31 August 2020 Abstract: This study aims to evaluate the antioxidant ability and α-glucosidase inhibitory activities of Codonopsisjavanica extract to elucidate its mechanism in the treatment of diabetes type The roots of Codonopsisjavanica were extracted with ethanol solvents and fractionated with n-hexane, ethyl acetate and butanol solvents The total extract and the fractions were evaluated for free radical scavenging by 2.2-diphenyl-1-picrylhydrazyl method and α-glucosidase inhibitory activity in vitro The study results show that ethyl acetate fraction from Codonopsisjavanica roots had the strongest antioxidant activity with a value of IC50 of 80.6 ± 2.8 µg/mL and a strong α-glucosidase enzyme inhibitory activity with a value of IC50 of 80.4 ± µg/mL These data suggest that ethyl acetate fraction from Codonopsisjavanica roots may have potential for the prevention and treatment of diabetes type Keywords: Codonopsisjavanica, diabetes type 2, α-glucosidase, antioxidant ability, fraction.* * Corresponding author E-mail address: tungasia82@gmail.com https://doi.org/10.25073/2588-1132/vnumps.4267 57 58 B.T Tung et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 57-65 Nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa ức chế enzym α-glucosidase cao chiết rễ Hồng Đảng Sâm (Codonopsis javanica (Blume) Hook f Thoms) Nguyễn Thị Thúy, Ngơ Hà Linh Trang, Nguyễn Thị Thanh Bình, Bùi Thanh Tùng* Khoa Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội, 144 Xuân Thủy, Cầu Giấy, Hà Nội, Việt Nam Nhận ngày 06 tháng năm 2020 Chỉnh sửa ngày 26 tháng năm 2020; Chấp nhận đăng ngày 31 tháng năm 2020 Tóm tắt: Stress oxy hóa nguyên nhân gây biến chứng mạch máu bệnh tiểu đường loại Enzym α-Glucosidase enzym thủy phân phân tử đường đôi, làm tăng tốc độ hấp thu glucose làm tăng nồng độ glucose máu Hồng đảng sâm (Codonopsis javanica) sử dụng y học cổ truyền với tác dụng hạ đường huyết Mục đích nghiên cứu đánh giá tác dụng chống oxy hóa ức chế enzym α-glucosidase cao chiết rễ Hồng đảng sâm nhằm làm rõ chế dược liệu hỗ trợ điều trị bệnh đái tháo đường Rễ Hồng đảng sâm chiết dung môi ethanol tiếp tục chiết phân đoạn dung môi n-hexan, ethyl acetat nbutanol Cao chiết toàn phần phân đoạn đánh giá khả quét gốc tự phương pháp DPPH tác dụng ức chế α-glucosidase in vitro Kết cho thấy phân đoạn ethyl acetat cao chiết rễ Hồng đảng sâm có hoạt tính chống oxy hóa mạnh với giá trị IC50 80,6 ± 2,8 µg/mL Ngồi ra, phân đoạn có tác dụng ức chế enzym α-glucosidase mạnh với giá trị IC50 80,4 ± µg/mL Kết nghiên cứu cho thấy phân đoạn ethyl acetat cao chiết rễ Hồng Đảng Sâm có tiềm phịng ngừa điều trị bệnh tiểu đường loại Từ khóa: Đái tháo đường loại 2, Hồng Đảng Sâm, α-glucosidase, tác dụng chống oxy hóa, chiết xuất phân đoạn Mở đầu* Đái tháo đường (ĐTĐ) loại ngày tăng tỷ lệ mức độ ảnh hưởng đến vấn đề sức khỏe khác, nguyên nhân gây tử vong hàng đầu, gây nhiều biến chứng trầm trọng ảnh hưởng lớn đến chất lượng sống [1] Mặc dù có nhiều tiến điều trị bệnh tiểu đường thuốc tân dược đường uống, việc nghiên cứu phát triển thuốc tiếp tục thuốc có tác dụng phụ gây cho người bệnh * Tác giả liên hệ Địa email: tungasia82@gmail.com https://doi.org/10.25073/2588-1132/vnumps.4267 Xu hướng quay với thiên nhiên, tìm tịi, phát triển thuốc Đơng y thuốc Y học cổ truyền ngày trọng nhiều kết hợp với tiến khoa học kỹ thuật y học Dược liệu có đặc điểm chứa lượng lớn hợp chất tự nhiên có tác dụng chống oxy hóa ức chế enzym α-glucosidase Các gốc tự gây trình trạng oxy hóa mức, gây tổn thương tuyến tụy ảnh hưởng đến q trình sinh tổng hợp, giải phóng insulin [2] Enzym αglucosidase tham gia vào bước cuối trình tiêu hóa Vì vậy, chất ức chế enzym B.T Tung et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 57-65 α-glucosidase làm giảm trình hấp thu glucose sau bữa ăn [3] Đây hai đích thường sử dụng nghiên cứu tác dụng dược liệu hỗ trợ điều trị bệnh ĐTĐ Hồng đảng sâm (Codonopsis javanica (Blume) Hook f Thoms) vị thuốc cổ truyền sử dụng phổ biến nhiều nước châu Á Trung Quốc, Nhật Bản,… [4] Từ nhiều loài thuộc chi Codonopsis C lanceolata, C pilosula, C ussuriesis, C subglobosa người ta chiết triterpen glycosid polysaccharid có tác dụng lên hệ miễn dịch giúp điều trị ung nhọt, cải thiện trí nhớ [5] Ở Việt Nam, chi Codonopsis có 3-4 lồi, loại Hồng đảng sâm Việt Nam Codonopsis javanica sử dụng từ lâu dân gian với nhiều công dụng quý điều hòa huyết áp, tăng cường sinh lực [6,7] Các nghiên cứu phân lập thành phần hóa học rễ Hồng đảng sâm cho kết có nhiều nhóm chất quý từ tự nhiên acid phenolic, flavonoid, alkaloid [6,7] Một số nghiên cứu giới cho thấy Hồng đảng sâm có tác dụng chống viêm, kháng khuẩn hạ đường huyết [5] Tuy vậy, Việt Nam chưa có nhiều nghiên cứu chứng minh nhằm phát triển loại dược liệu thành sản phẩm hỗ trợ điều trị bệnh ĐTĐ Vì vậy, nghiên cứu thực nhằm đánh giá khả chống oxy hóa ức chế enzym αglucosidase Hồng đảng sâm (Codonopsis javanica (Blume) Hook f Thoms) Đối tượng phương pháp nghiên cứu 2.1 Hóa chất, dung mơi Acid ascorbic (99%, Sigma – Aldrich, Singapore); 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH, Sigma – Aldrich, Singapore); pnitrophenyl-α-D-glucopyranosid (pNPG Merck, Singapore); p-nitrophenol chuẩn (Merck, Singapore); α-glucosidase 0,9 U/ml (pha nước khử ion lạnh) (Sigma – Aldrich, Singapore); dung môi ethanol, n-hexan (nHex), ethyl acetat (EtOAc), n-buthanol (nBuOH), methanol (MeOH) (Trung Quốc) đạt TCCS 59 2.2 Thiết bị Cân phân tích AY 129 (Shimadzu – Nhật Bản); Máy siêu âm Ultrasonic Cleaners AC150H (MRC – Israel); Máy cô quay chân không Rotavapor R-210 (Buchi – Đức); Máy khuấy từ gia nhiệt C-MAG HS (IKA – Đức); Máy đo quang UV Agilent technologies Cary 60 (UVVIS – Mỹ); 2.3 Đối tượng nghiên cứu Rễ Hồng đảng sâm thu mua vào tháng năm 2018, Buôn Ma Thuột Mẫu nghiên cứu giám định thực vật học Bộ môn Dược liệu Dược học cổ truyền, Khoa Y Dược với tên khoa học Codonopsis javanica (Blume) Hook f., họ Hoa chuông (Campanulaceae) Mẫu tiêu lưu giữ Bộ môn Dược liệu Dược học cổ truyền, Khoa Y Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội 2.4 Chuẩn bị mẫu Rễ Hồng đảng sâm rửa sạch, sấy khô lại lò sấy nhiệt độ 65oC Sau đem rễ xay nhỏ tiến hành chiết xuất theo phương pháp sau: Rễ dược liệu cắt nhỏ khoảng cm (200 g) ngâm ngập ethanol 96%, chiết xuất phương pháp siêu âm 50ºC 30 phút, lặp lại lần Dịch chiết lọc qua y tế gộp lại, cô lại máy cô quay chân không thu cao chiết tổng ethanol Phân tán phần lượng cao vào nước cất theo tỷ lệ 1:1 Tiếp tục tiến hành chiết phân đoạn mẫu với dung mơi có độ phân cực tăng dần n-Hex, EtOAc n-BuOH (mỗi dung môi chiết lần, lần 100 mL) Cô quay thu cắn dịch chiết phân đoạn đến khối lượng không đổi 2.5 Phương pháp đánh giá tác dụng quét gốc tự DPPH Nguyên tắc: hợp chất DPPH có khả tạo gốc tự bền dung dịch MeOH bão hòa Khi phản ứng với chất chống oxy hóa, dung dịch màu tím đỏ chuyển sang màu vàng cam, có độ hấp thụ cực đại bước sóng λ = 517 nm 60 B.T Tung et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 57-65 Cho chất thử vào dung dịch này, chất có khả quét gốc tự làm giảm cường độ hấp thụ ánh sáng gốc tự DPPH Đo hấp thụ bước sóng biết lượng DPPH lại sau phản ứng [8] Đánh giá khả chống oxy hóa giá trị hấp thụ ánh sáng dung dịch thử nghiệm so với chất đối chứng Pha dung dịch DPPH có nồng độ 0,24 mg/mL dung môi MeOH - Mẫu thử: cao dược liệu pha lỗng dung mơi MeOH bão hòa thành dãy nồng độ 31,25; 62,5; 125; 250; 500 1000 μg/mL dùng cho thí nghiệm - Chất chuẩn dương acid ascorbic hòa tan MeOH bão hòa thành dãy nồng độ 1; 5; 10; 20; 50 μg/mL Cách tiến hành - Lấy 340 µL dung dịch DPPH MeOH, 100 µL dung dịch mẫu thử pha lỗng 560 µL MeOH trộn micro pipet, bọc giấy bạc, ủ 25˚C 15 phút - Song song với mẫu thử, tiến hành mẫu chứng với điều kiện thành phần - Tiến hành đo hấp thụ bước sóng λ = 517 nm Tất thí nghiệm lặp lại lần, lấy kết trung bình lần đo Thí nghiệm lặp lại lần Hoạt tính qt gốc tự DPPH đánh giá thơng qua giá trị phần trăm ức chế (I%): AC −At I% = ⋅ 100 AC − A0 Trong đó: I%: Hoạt tính chống oxy hóa; Ac: Độ hấp thụ mẫu chứng; At: Độ hấp thụ mẫu thử; A0: Độ hấp thụ mẫu trắng (sử dụng methanol) Xác định IC50 phần mềm SigmaPlot 12 dựa đồ thị phần trăm ức chế (I%) theo nồng độ mẫu thử (C) Tác dụng chống oxy hóa in vitro dịch chiết so sánh với chất chuẩn dương acid ascorbic 2.6 Phương pháp đánh giá tác dụng ức chế enzym α-glucosidase in vitro Phương pháp dựa nguyên tắc: Enzym α-glucosidase xúc tác trình chuyển chất pNPG thành α-glucose p-nitrophenol có màu vàng nhạt - hấp thụ cực đại λ = 405 nm Chất kìm hãm enzym làm cường độ hấp thụ ánh sáng dung dịch giảm [9] Dựa vào độ hấp thụ dung dịch có khơng có mặt chất thử để suy phần trăm ức chế enzym Sử dụng phần mềm SigmaPlot 12 để xác định IC50 Cách tiến hành Hoạt tính ức chế enzym α-glucosidase đánh giá theo phương pháp Moradi-Afrapoli F cộng [10] Cụ thể sau: - Chất thử hòa tan dimethyl sulfoxid (DMSO), pha loãng đệm phosphate 10 mM (pH 6,8) đưa 50 μL vào giếng khay 96 giếng để nồng độ 256 μg/mL, 64 μg/mL, 16 μg/mL; μg/mL - Thêm vào giếng 20 μL α-glucosidase (0,5 U/mL) 130 μL đệm phosphate 100 mM (pH 6,8), trộn ủ 37°C 15 phút - Thêm vào giếng chất pNPG, ủ tiếp 37°C 60 phút - Đĩa thí nghiệm có chất thử, đệm phosphate pNPG sứ dụng làm chất chứng trắng (blank) Giếng thí nghiệm có DMSO 10%, đệm phosphate, enzym pNPG sử dụng làm đối chứng Thí nghiệm lặp lại lần để đảm bảo xác - Dừng thí nghiệm cách thêm 80 μL Na2CO3 0,2M vào đo độ hấp thụ quang (A) máy đo ELISA Plate Reader (Bio-Rad) bước sóng λ = 405 nm Công thức đánh giá khả ức chế enzym α-glucosidase mẫu thử: AC −At I% = ⋅ 100 AC − A0 Trong đó: Ac = A đối chứng = A đối chứng – A mẫu trắng đối chứng At = A mẫu thử = A mẫu thử - A mẫu trắng thử B.T Tung et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 57-65 Giá trị IC50 tính dựa vào đồ thị phương trình biểu diễn % ức chế enzym αglucosidase theo nồng độ cao toàn phần phân đoạn dịch chiết từ rễ Hồng đảng sâm 2.7 Xử lí số liệu Các số liệu lưu trữ phân tích xử lý liệu theo phương pháp thống kê sinh học máy vi tính phần mềm Microsoft Office Excel 2016 phần mềm SigmaPlot 12 (Systat Software, Inc, Mỹ) Kết 3.1 Quy trình chiết xuất phân đoạn dịch chiết cao rễ Hồng đảng sâm Rễ Hồng đảng sâm (200g) sau sấy khô, cắt nhỏ chiết xuất lần với ethanol 96% thu 12,32g cao Hiệu suất chiết đạt 61 6,16% Giữ lại 2,32g cao ethanol để đánh giá khả chống oxy hóa ức chế enzym αglucosidase in vitro, lấy 10 g lại hòa tan vào nước cất chiết với n-Hex, EtOAc, nBuOH, cô quay đến khối lượng không đổi thu phân đoạn sau: 1,12 g cao n-Hex; 4,56 g cao EtOAc 4,15 g cao n-BuOH 3.2 Đánh giá tác dụng chống oxy hóa phân đoạn dịch chiết rễ Hồng đảng sâm theo phương pháp DPPH Tác dụng chống oxy hóa in vitro theo phương pháp DPPH cao toàn phần phân đoạn dịch chiết từ rễ Hồng đảng sâm thí nghiệm nồng độ 31,25; 62,5; 125; 250; 500 1000 μg/mL Acid ascorbic chất chứng dương sử dụng thí nghiệm Giá trị phần trăm ức chế I (%) cao chiết toàn phần phân đoạn cao chiết nồng độ khác từ rễ Hồng đảng sâm Acid ascorbic trình bày Bảng Bảng Khả chống oxy hóa in vitro dịch chiết tồn phần phân đoạn dịch chiết cao rễ Hồng đảng sâm chất đối chứng nồng độ khác Phân đoạn Ethanol n-Hex EtOAc n-BuOH Chất đối chứng Acid ascorbic 1000 92,78 ± 3,2 79,46 ± 2,1 97,58 ± 3,3 85,7 ± 1,9 500 75,36 ± 1,9 57,36 ± 2,2 86,45 ± 2,2 74,6 ± 2,0 % ức chế nồng độ (µg/mL) 250 125 62,5 59,63 43,25 23,54 ± 2,3 ± 1,6 ± 0,9 48,25 31,25 14,6 ± 1,7 ± 1,1 ± 0,5 76,24 65,87 46,35 ± 1,9 ± 1,6 ± 1,5 60,5 45,8 30,7 ± 2,1 ± 1,5 ± 0,9 31,25 10,24 ± 0,4 7,84 ± 0,2 35,25 ± 1,2 12,9 ± 0,3 % ức chế nồng độ (µg/mL) 50 85,68 ± 2,4 20 52,42 ± 1,4 10 36,58 ± 0,8 Kết từ Bảng cho thấy tác dụng chống oxy hóa in vitro tăng dần theo nồng độ Dịch chiết ethanol toàn phần từ rễ Hồng đảng sâm thể tác dụng chống oxy hóa in vitro với giá trị IC50 tính 186,5 ± 7,4 µg/mL Trong phân đoạn dịch chiết, phân đoạn EtOAc thể 21,2 ± 0,5 5,33 ± 0,2 Giá trị IC50 (µg/mL) 186,5 ± 7,4 294,7±10,2 80,6 ± 2,8 159,2 ± 9,1 Giá trị IC50 (µg/mL) 17,2 ± 1,4 tác dụng chống oxy hóa in vitro mạnh với I% nồng độ cao 1000 µg/mL 97,58 %, giá trị IC50 tính 80,6 ± 2,8 µg/mL Tiếp theo phân đoạn n-BuOH với giá trị I% đạt 85,7 % nồng độ cao 1000 µg/mL, giá trị IC50 tính 159,2 ± 9,1 µg/mL Phân đoạn n- 62 B.T Tung et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 57-65 Hex thể tác dụng chống oxy hóa yếu với giá trị IC50 tính 294,7 ± 10,2 µg/mL Song song với mẫu thử, tiến hành tương tự với mẫu chứng dương acid ascorbic cho thấy tác dụng chống oxy hóa in vitro acid ascorbic hoạt động ổn định thí nghiệm, có giá trị IC50 17,2 ± 1,4 µg/mL Kết tác dụng ức chế enzym αglucosidase in vitro phân đoạn dịch chiết rễ Hồng đảng sâm Tác dụng dụng ức chế enzym α-glucosidase in vitro cao toàn phần phân đoạn dịch chiết từ rễ Hồng đảng sâm thí nghiệm nồng độ 31,25; 62,5; 125; 250; 500 1000 μg/mL Acarbose chất chứng dương sử dụng thí nghiệm Giá trị phần trăm ức chế I (%) cao chiết toàn phần phân đoạn cao chiết nồng độ khác từ rễ Hồng đảng sâm chất đối chứng dương trình bày Bảng Bảng Khả ức chế enzym α-glucosidase in vitro cao toàn phần, phân đoạn dịch chiết rễ Hồng đảng sâm chất đối chứng nồng độ khác Phân đoạn Ethanol n-Hex EtOAc n-BuOH Chất chứng Acarbose đối % ức chế nồng độ (µg/mL) 1000 500 250 95,23 80,23 69,25 ± 3,6 ± 2,9 ± 2,5 68,25 58,25 49,2 ± 2,6 ± 1,9 ± 1,4 98,25 84,23 73,51 ± 3,5 ± 2,3 ± 2,0 86,3 75,6 63,5 ± 3,0 ± 2,5 ± 2,4 125 51,24 ± 1,8 32,12 ± 1,1 62,32 ± 1,8 46,3 ± 1,3 62,5 39,25 ± 1,3 15,23 ± 0,4 42,17 ± 1,3 32,6 ± 0,9 31,25 25,14 ± 0,8 8,25 ± 0,3 32,36 ± 1,0 15,6 ± 0,5 % ức chế nồng độ (µg/mL) 50 85,68 ± 3,2 20 52,42 ± 1,3 10 36,58 ± 1,2 Kết từ Bảng cho thấy khả ức chế enzym α-glucosidase in vitro tăng dần theo nồng độ Dịch chiết ethanol toàn phần, phân đoạn EtOAc n-BuOH từ rễ Hồng đảng sâm có giá trị IC50 99,5 ± 4,8 µg/mL, 80,4 ± 5,9 µg/mL, 129,6 ± 6,2 µg/mL, thể tác dụng ức chế enzym α-glucosidase tốt mẫu chứng Acarbose (giá trị IC50 156,8 ± 2,8 µg/mL) Trong phân đoạn dịch chiết, phân đoạn EtOAc thể tác dụng chống oxy hóa in vitro mạnh với I% nồng độ cao 1000 µg/mL 98,25% Phân đoạn n-Hex thể tác dụng chống oxy hóa in vitro yếu với giá trị IC50 tính 291,4 ± 8,7 µg/mL Song song với mẫu thử, tiến hành tương tự với mẫu chứng dương Acarbose cho thấy tác dụng ức chế enzym α-glucosidase in vitro Acarbose hoạt động ổn định thí nghiệm 21,2 ± 0,8 5,33 ± 0,1 Giá trị IC50 (µg/mL) 99,5 ± 4,8 291,4 ± 8,7 80,4 ± 5,9 129,6 ± 6,2 Giá trị IC50 (µg/mL) 156,8 ± 2,8 Bàn luận Hiện nay, ĐTĐ bệnh lý gây ảnh hưởng lên nhiều vấn đề sức khỏe khác, phát sinh nhiều biến chứng trầm trọng, ảnh hưởng lớn đến chất lượng sống nguyên nhân gây tử vong hàng đầu Số lượng người mắc ĐTĐ tăng gấp đơi vịng thập kỷ gần ngày trẻ hóa qua năm Bệnh ĐTĐ gây nên nhiều biến chứng nguy hiểm, nguyên nhân hàng đầu gây bệnh tim mạch, mù lòa, suy thận, cắt cụt chi [1] Các nhà khoa học giới nỗ lực tìm kiếm phương pháp phịng điều trị hiệu bệnh ĐTĐ, ngăn ngừa biến chứng nâng cao chất lượng sống Nhiều nghiên cứu chứng minh loại thảo dược có tác dụng hạ glucose máu, dược liệu có khả B.T Tung et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 57-65 chống oxy hóa ức chế enzym α-glucosidase Rễ Hồng đảng sâm có tác dụng dược lý tốt, sử dụng nhiều y học cổ truyền Hồng đảng sâm thường dùng để bồi bổ sức khỏe, dùng loại thuốc bổ, giúp bổ tỳ, ích khí, tân khát [5] Oxy hóa q trình xảy phản ứng hóa học, mà electron chuyển thành chất oxy hóa, hình thành nên gốc tự Sự gia tăng gốc tự sinh phản ứng dây chuyền, dẫn đến phá hủy tế bào thể Các gốc tự trạng thái cấu trúc phân thử có điện tích lẻ quỹ đạo điện tử cùng, bao gồm nguyên tử, phân tử, ion, electron chưa ghép gặp Chúng khơng ổn định tạo phản ứng hóa học với phân tử khác Các dạng hoạt động gốc tự ROS (Oxy hoạt tính), RNS (Nitrogen hoạt tính), RSS (Sulfur hoạt tính) [11,12] Các gốc tự ổn định, có khả phản ứng cao với chất, thời gian tồn ngắn phụ thuộc vào chất điều kiện hệ mà tồn [12,13] Trong bệnh ĐTĐ, trình tăng glucose huyết thể sản sinh nhiều gốc tự làm suy yếu hệ thống phòng thủ chống oxy hóa nội sinh [14] Do đó, việc sử dụng chất chống oxy hóa để phịng ngừa làm suy giảm triệu chứng bệnh ĐTĐ biện pháp thường cân nhắc sử dụng Phương pháp quét gốc tự DPPH sử dụng rộng rãi để đánh giá khả chống oxy hóa in vitro có nhiều ưu điểm phương pháp khác Kết nghiên cứu cho thấy tác dụng chống oxy hóa phương pháp thu dọn gốc tự DPPH cao chiết toàn phần phân đoạn rễ Hồng đảng sâm phụ thuộc vào nồng độ: nồng độ cao chiết tăng tác dụng quét gốc tự tăng theo Cao chiết phân đoạn EtOAc rễ Hồng đảng sâm có quét gốc tự DPPH cao với IC50 80,6±2,8 μg/mL Kết đánh giá tác dụng chống oxy hóa Hồng đảng sâm nghiên cứu nảy tương đồng với nghiên cứu giới loài chi Codonopsis Sang-Min Jeon cộng có nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa in vitro loài khác chi Codonopsis Codonopsis lanceolata Kết cho thấy chiết cao áp hấp q trình lên 63 men có hiệu so với cách chiết xuất thông thường [15] Chang-Seon Yoo Sung-Jin Kim chứng minh dịch chiết MeOH Codonopsis pilosula có tác dụng chống oxy hóa in vivo rõ rệt thơng qua ức chế q trình oxy hóa iNOS protein [16] Judy Yuet-Wa Chan cộng nghiên cứu tác dụng chống ĐTĐ chống oxy hóa mơ hình chuột mắc bệnh tiểu đường hỗn hợp SR10 gồm rễ Astragali, rễ Codonopsis Cortex Lycii Kết cho thấy hỗn hợp SR10 có hiệu việc giảm mức đường huyết điều trị mãn tính cách cải thiện chức tế bào beta Các hoạt động biểu enzym chống oxy hóa, catalase superoxide dismutase tăng lên điều trị hỗn hợp SR10 Hơn nữa, hỗn hợp SR10 không cho thấy độc tính thể [17] Enzym α-glucosidase enzym nằm màng đường ruột, tham gia vào bước cuối q trình tiêu hóa Enzym xúc tác cho trình phân hủy đường disaccaride sucrose hay maltose thành monosaccharide glucose, chất ức chế enzym làm giảm trình hấp thu đường từ quan tiêu hóa vào máu [9,18] Cơ chế hoạt động enzym αglucosidase sau: glucose cung cấp carbohydrat chứa thức ăn Sau vào thể, carbohydrat enzym tụy (αamylase) ruột non (α-glucosidase) tiết ra, thủy phân thành phân tử đường đơn thẩm thấu vào máu, tỏa để nuôi tế bào thể Enzym α-glucosidase có chức xúc tác việc cắt đứt liên kết 1,4-α-D-glucosid chất đề giải phóng α-D-glucose [19] Có thể làm giảm thủy phân carbohydrat chậm thẩm thấu glucose vào máu việc kiểm soát hoạt động enzym α-glucosidase [20] Các chất ức chế enzym α-glucosidase sử dụng làm thuốc tân dược acarbose, voglibose, thường gây nên số tác dụng không mong muốn đau bụng, tiêu chảy, Trong nghiên cứu này, acarbose sử dụng làm chất đối chứng dương để đánh giá khả ức chế enzym αglucosidase Kết nghiên cứu đề tài cho thấy cao chiết ethanol toàn phần, phân đoạn EtOAc n-BuOH rễ Hồng đảng sâm có tác 64 B.T Tung et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 57-65 dụng ức chế enzym α-glucosidase mạnh so với chứng dương acarbose Ngoài ra, tác dụng ức chế enzym α-glucosidase in vitro cao chiết toàn phần cao chiết phân đoạn rễ Hồng đảng sâm phụ thuộc vào nồng độ Kết nghiên cứu cao chiết rễ C Javanica tương đồng với nghiên cứu trước loài chi Codonopsis Kai He cộng chứng minh Codonopsis pilosula có khả hạ đường huyết chuột bị tiểu đường streptozotocin việc ức chế tốt enzym α-glucosidase [21] Suk Whan Jung cộng nghiên cứu rễ Codonopsis lanceolata có chứa hợp chất tangshenoside β-adenosine có tác dụng ức chế α-glucosidase in vitro yếu với IC50 lần 1,4 9,3 mM [22] Một số hợp chất phân lập từ rễ Hồng đảng sâm có tiềm điều trị ĐTĐ bệnh mắc kèm stress oxy hóa gây Taraxerol, β-sitosterol, α-spinasterol chứng minh có tác dụng chống ĐTĐ chống oxy hóa xem xét nghiên cứu lâm sàng để phát triển thuốc điều trị bệnh tiểu đường biến chứng tiểu đường gây bệnh thận ĐTĐ [23; 24] Ngoài ra, Abdullateef Isiaka Alagbonsi cộng cho thấy adenosine mục tiêu điều trị điều trị bệnh tiểu đường tuýp khả hạ đường huyết chuột mắc không mắc bệnh tiểu đường [25] Ayman Mahmoud cộng chứng minh hesperidin đóng vai trị đầy hứa hẹn điều trị bệnh tiểu đường biến chứng nhờ tác dụng điều hịa chất vận chuyển glucose, tiết độ nhạy insulin, stress oxy hóa, q trình viêm, hấp thu glucose ngoại biên, hấp thu glucose ruột sản xuất glucose gan [26] Kết luận Nghiên cứu đánh giá tác dụng chống oxy hóa tác dụng ức chế enzym α-glucosidase in vitro cao toàn phần phân đoạn dịch chiết từ rễ Hồng đảng sâm Kết thu cho thấy phân đoạn EtOAc có tác dụng chống oxy hóa cao với giá trị IC50 80,6 ± 2,8 µg/mL Ngồi ra, phân đoạn EtOAc có tác dụng ức chế enzym α – glucosidase in vitro tốt với giá trị IC50 80,4 ± µg/mL so với phân đoạn dịch chiết khác Kết thu giúp định hướng nghiên cứu sâu thành phần hóa học rễ Hồng đảng sâm, phân đoạn dịch chiết EtOAc, nhằm phân tách, tinh chế hoạt chất có tiềm điều trị ĐTĐ type Tài liệu tham khảo [1] B.Y Te Guidelines for the diagnosis and treatment of type diabetes, 2017 [2] U Asmat, K Abad, K Ismail Diabetes mellitus and oxidative stress-A concise review Saudi pharmaceutical journal 24(5) (2016) 547 [3] D.K Thu, V.M Hung, N.T Trang, B.T Tung Study on α-glucosidase enzyme inhibitory activity and DPPH free radical scavenging of green coffee bean extract (Coffea canephora) VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences 35(2) (2019) [4] C.Y Li, H.X Xu, Q.B Han, T.S Wu Quality assessment of Radix Codonopsis by quantitative nuclear magnetic resonance Journal of Chromatography A 1216(11) (2009) 2124 [5] S.M Gao, J.S Liu, M Wang, T.T Cao, Y.D Qi, B.G Zhang, et al Traditional uses, phytochemistry, pharmacology and toxicology of Codonopsis: A review Journal of ethnopharmacology 219((2018) 50 [6] T.T Ha, H.V Oanh, D.T Ha Chemical constituents of the n-butanol fractions from the roots of Vietnamese Codonopsis javanica (Blume) Hook.f Journal of Pharmacy 56(4) (2016) [7] T.T Ha, N.M Khoi, N.T Ha, N.V Nghi, D.T Ha Chemical Constituents from Roots of Codonopsis javanica (Blume) Hook.f Journal of Medicinal Materials 19((2014) 211 [8] B.T Tung, D.K Thu, N.T.K Thu, N.T Hai Antioxidant and acetylcholinesterase inhibitory activities of ginger root (Zingiber officinale Roscoe) extract Journal of Complementary and Integrative Medicine 14(4) (2017) [9] B.T Tung, D.K Thu, P.T Hai, N.T Hai Evaluation of α-glucosidase inhibitory effects of Pomegranate fruit extracts (Punica granatum Linn) Journal of Traditional Vietnamese Medicine and Pharmacy 5(18) (2018) 59 [10] F Moradi-Afrapoli, B Asghari, S Saeidnia, Y Ajani, M Mirjani, M Malmir, et al In vitro αglucosidase inhibitory activity of phenolic constituents from aerial parts of Polygonum B.T Tung et al / VNU Journal of Science: Medical and Pharmaceutical Sciences, Vol 36, No (2020) 57-65 [11] [12] [13] [14] [15] [16] [17] [18] hyrcanicum DARU Journal of Pharmaceutical Sciences 20(1) (2012) 37 D.T Bao Free radicals Journal of Pharmacy 6((2001) 29 M Carocho, I.C Ferreira A review on antioxidants, prooxidants and related controversy: natural and synthetic compounds, screening and analysis methodologies and future perspectives Food and chemical toxicology 51((2013) 15 National Institute of Medicinal Materials Method for studying the pharmacological effects of herbal drugs Science and Technology Publishing House, 2006 J.W Baynes Role of oxidative stress in development of complications in diabetes Diabetes 40(4) (1991) 405 S.M Jeon, S.Y Kim, I.H Kim, J.S Go, H.R Kim, J.Y Jeong, et al Antioxidant activities of processed Deoduck (Codonopsis lanceolata) extracts Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition 42(6) (2013) 924 C.S Yoo, S.J Kim Methanol extract of Codonopsis pilosula inhibits inducible nitric oxide synthase and protein oxidation in lipopolysaccharidestimulated raw cells Tropical Journal of Pharmaceutical Research 12(5) (2013) 705 J.Y.W Chan, F.C Lam, P.C Leung, C.T Che, K.P Fung Antihyperglycemic and antioxidative effects of a herbal formulation of Radix Astragali, Radix Codonopsis and Cortex Lycii in a mouse model of type diabetes mellitus Phytotherapy Research: An International Journal Devoted to Pharmacological and Toxicological Evaluation of Natural Product Derivatives 23(5) (2009) 658 S Kumar, S Narwal, V Kumar, O Prakash αglucosidase inhibitors from plants: A natural approach to treat diabetes Pharmacognosy reviews 5(9) (2011) 19 65 [19] K Tadera, Y Minami, K Takamatsu, T Matsuoka Inhibition of α-glucosidase and αamylase by flavonoids Journal of nutritional science and vitaminology 52(2) (2006) 149 [20] C.W Choi, Y.H Choi, M.-R Cha, D.S Yoo, Y.S Kim, G.H Yon, et al Yeast α-glucosidase inhibition by isoflavones from plants of Leguminosae as an in vitro alternative to acarbose Journal of agricultural and food chemistry 58(18) (2010) 9988 [21] K He, X Li, X Chen, X Ye, J Huang, Y Jin, et al Evaluation of antidiabetic potential of selected traditional Chinese medicines in STZ-induced diabetic mice Journal of ethnopharmacology 137(3) (2011) 1135 [22] S.W Jung, A.J Han, H.J Hong, M.G Choung, K.S Kim, S.H Park alpha-glucosidase inhibitors from the roots of Codonopsis lanceolata Trautv Agricultural Chemistry and Biotechnology 49(4) (2006) 162 [23] R Gupta, A.K Sharma, M Dobhal, M Sharma, R Gupta Antidiabetic and antioxidant potential of β‐ sitosterol in streptozotocin‐induced experimental hyperglycemia Journal of diabetes 3(1) (2011) 29 [24] R Khanra, N Bhattacharjee, T.K Dua, A Nandy, A Saha, J Kalita, et al Taraxerol, a pentacyclic triterpenoid, from Abroma augusta leaf attenuates diabetic nephropathy in type diabetic rats Biomedicine & Pharmacotherapy 94((2017) 726 [25] A.I Alagbonsi, T.M Salman, H.M Salahdeen, A.A Alada Effects of adenosine and caffeine on blood glucose levels in rats Nigerian Journal of Experimental and Clinical Biosciences 4(2) (2016) 35 [26] A.M Mahmoud, O.E Hussein Hesperidin as a promising anti-diabetic flavonoid: the underlying molecular mechanism Int J Food Nutr Sci| Volume 3(3) (2014) ... đảng sâm (Codonopsis javanica) sử dụng y học cổ truyền với tác dụng hạ đường huyết Mục đích nghiên cứu đánh giá tác dụng chống oxy hóa ức chế enzym α-glucosidase cao chiết rễ Hồng đảng sâm nhằm... Kết tác dụng ức chế enzym αglucosidase in vitro phân đoạn dịch chiết rễ Hồng đảng sâm Tác dụng dụng ức chế enzym α-glucosidase in vitro cao toàn phần phân đoạn dịch chiết từ rễ Hồng đảng sâm. .. ra, tác dụng ức chế enzym α-glucosidase in vitro cao chiết toàn phần cao chiết phân đoạn rễ Hồng đảng sâm phụ thuộc vào nồng độ Kết nghiên cứu cao chiết rễ C Javanica tương đồng với nghiên cứu