Bước đầu phân tích proteomics tế bào bệnh leukemia

Leukemia là nhóm bệnh máu của hệ thống tạo máu, gặp ở mọi lứa tuổi với biểu hiện bệnh rất đa dạng, tỷ lệ mắc bệnh ngày càng cao.

MỞ ĐẦU Leukemia là nhóm bệnh máu của hệ thống tạo máu, gặp ở mọi lứa tuổi với biểu hiện bệnh rất đa dạng, tỷ lệ mắc bệnh ngày càng cao. Ở Mỹ, Hàng năm có 30.800 người được chẩn đốn mắc bệnh leukemia và nó cướp đi sinh mạng của khoảng 21.700 người [27]. Tại Việt Nam, tuy chưa có nghiên cứu nào tiến hành đầy đủ về dịch tễ học của bệnh leukemia cấp trên tồn quốc nhưng theo tổng kết tại Viện Huyết học-Truyền máu thì thấy bệnh gặp tỷ lệ cao nhất (32,1%) [2] trong số các bệnh máu gặp tại đây. Đặc trưng của bệnh là sự tăng sinh khơng kiểm sốt được của một hoặc vài dòng tế bào non (blast), bắt đầu và chủ yếu tại tuỷ xương. Các khối tế bào này gây tổn thương các cơ quan tạo máu, hệ thống miễn dịch và một số cơ quan khác, nhanh chóng đe dọa đến sức khỏe và tính mạng của người bệnh. Việc điều trị bệnh leukemia đạt hiệu quả cao đòi hỏi phải có sự phân loại và chẩn đốn chính xác các thể bệnh. Những nghiên cứu đầu tiên về bệnh leukemia bắt đầu từ đầu thế kỷ XIX, và cho đến nay, trên thế giới đã có rất nhiều nghiên cứu về vấn đề phân loại và chẩn đốn bệnh. Cùng với sự tiến bộ của khoa học, bệnh leukemia đã được nghiên cứu và phân loại từ cấp độ phân tử, nhờ đó việc điều trị leukemia cấp đã có những tiến bộ rõ rệt. Một trong những phương pháp mới nhất bước đầu được áp dụng để nghiên cứu bệnh leukemia chính là proteomic. Đây là một phương pháp hữu dụng trong việc phân tích hệ protein của một cơ thể sinh vật, mang lại nhiều ứng dụng quan trọng trong sinh học, y học, dược học và trong nghiên cứu cơ chế các q trình sinh học của cơ thể. Với kỹ thuật proteomics người ta đã nghiên cứu chỉ thị sinh học của nhiều loại bệnh khác nhau, đặc biệt là các bệnh ung thư như ung thư vú, ung thư tuyến tiền liệt, ung thư thanh quản, ung thư phổi, ung thư gan, ung thư buồng trứng… Trong khn khổ luận văn này, tơi đã tiến hành đề tài nghiên cứu: THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN “Bước đầu phân tích proteomics tế bào bệnh leukemia” nhằm mục tiêu tách các tế bào bạch cầu của bệnh nhân bị bệnh leukemia và phân tách các protein của chúng phục vụ cho nghiên cứu proteome bệnh leukemia. THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN CHƯƠNG 1 – TỔNG QUAN 1.1. Khái qt về bệnh leukemia 1.1.1. Leukemia là gì? Leukemia là một dạng ung thư liên quan đến hệ thống tạo máu của cơ thể, bao gồm hệ bạch huyết và tủy xương, được đặc trưng bởi sự tăng sinh ác tính của các các dòng tế bào máu, đặc biệt là bạch cầu. Leukemia chiếm khoảng 2% tổng số các bệnh ung thư[6]. Nam giới dường như mắc leukemia nhiều hơn phụ nữ và người da trắng mắc bệnh nhiều hơn các nhóm chủng tộc người khác. Người trưởng thành bị leukemia tấn cơng và phát triển nhiều hơn 10 lần so với trẻ em. Leukemia gặp ở hầu hết các lứa tuổi trưởng thành. Khi leukemia diễn biến ở trẻ em, nó thường xảy ra nhất ở độ tuổi dưới 4. Riêng tại Mỹ năm 2008, theo tính tốn có khoảng 44 270 người (25180 nam và 19090 nữ) được chuẩn đốn leukemia và nó sẽ cướp đi sinh mạng của 21700 người. 11% số người mắc bệnh ở độ tuổi dưới 20 [18]. 1.1.2. Ngun nhân gây bệnh leukemia Cho tới nay ngun nhân gây leukemia vẫn chưa được làm sáng tỏ. Tuy nhiên, các nhà nghiên cứu đã nhấn mạnh đến 4 nhóm nhân tố chính có thể gây ra bệnh leukemia: - Các bức xạ tự nhiên và nhân tạo. - Một vài dạng chất hóa học như các hóa chất nhómAlkyl - Một số dạng virus: HTLV 1, 2 gây leukemia dòng T lympho - Các yếu tố di truyền: các dạng bất thường ở nhiễm sắc thể như chuyển đoạn, thiếu hoặc thừa nhiễm sắc thể,… Cũng giống như các bệnh ung thư khác, leukemia là kết quả từ các đột biến ADN trong q trình ngun phân. Các đột biến này gây hoạt hóa các gen ung thư hoặc bất hoạt các gen triệt tiêu u bướu, làm hỏng q trình phá hủy tế bào chết cũng như q trình biệt hóa và phân bào. Những đột biến này có thể THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN phát sinh một cách ngẫu nhiên hoặc là kết quả của việc phơi nhiễm bức xạ hoặc hợp chất gây ung thư và những chất ảnh hưởng đến bộ máy di truyền. Virus cũng có liên quan đến một vài dạng leukemia. Bệnh thiếu máu Fanconi cũng là một tác nhân dẫn đến sự hình thành bệnh leukemia dòng tủy [24]. Do chưa tìm được ngun nhân của bệnh, người ta khơng có bất cứ biện pháp nào để có thể phòng bệnh. 1.1.3. Phân loại bệnh leukemia Leukemia được chia làm 2 loại là Leukemia cấp (Acute leukemia - AL) và Leukemia kinh (Chronic leukemia – CL). Leukemia cấp là sự tăng sinh của các tế bào non, đơi khi một số tế bào đã biệt hóa, còn leukemia kinh là sự tăng sinh của các tế bào trưởng thành hơn hoặc đã biệt hóa. Dựa vào nguồn gốc của tế bào ác tính thuộc dòng lympho hay dòng tủy, người ta chia thành leukemia cấp dòng lympho (acute lymphocytic leukemia, ALL), leukemia cấp dòng tủy (acute myelocytic leukemia, AML), leukemia kinh dòng lympho (Chronic lymphocytic leukemia-CLL) và leukemia kinh dòng tủy (Chronic myelocytic leukemia - CML). Nhờ những đặc điểm về hình thái học, hóa học tế bào, phương pháp miễn dịch sử dụng kháng thể đơn dòng để xác định dấu ấn màng tế bào (CD), di truyền tế bào, sinh học phân tử, người ta phân loại leukemia cấp dòng tủy thành 8 thể từ M o đến M 7 và leukemia dòng lympho thành 3 thể L 1 , L 2 , L 3 . Ngồi ra còn một số thể khác như Leukemia tế bào gốc sinh máu chưa biệt hóa, Leukemia tế bào hỗn hợp (Mixed Leukemia): tủy lai với lympho, tủy lai với tế bào diệt tự nhiên (NK), tủy lai T hoặc B lympho. THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Hình 1. Sơ đồ phân loại bệnh leukemia 1.1.3.1. Leukemia cấp Đặc điểm của leukemia cấp là sự tăng sinh tế bào non chưa trưởng thành (immature hemopoietic), tủy xương có ≥ 30% tế bào non (blast) trong tổng số các tế bào có nhân. Các tế bào máu non sinh sản nhanh chóng trong tủy xương, chúng lấn át các tế bào bình thường, gây ức chế tạo hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu, đơi khi có thể lan ra các cơ quan khác (hiện tượng thâm nhiễm hay xâm lấn). Leukemia cấp được chia làm hai nhóm chính * Leukemia cấp dòng lympho xảy ra phổ biến ở trẻ em và người mới trưởng thành. Theo thống kê ở Mỹ năm 2008 có 5430 người mắc ALL trong đó 61% ở dưới độ tuổi 20 [18]. ALL xảy ra khi các tế bào tạo máu sơ cấp gọi là ngun bào lympho tăng sinh mà khơng phát triển thành các tế bào máu bình thường. Những tế bào bất thường này lấn át các tế bào máu khỏe mạnh. Chúng có thể tập trung lại trong các hạch bạch huyết và gây ra sưng tấy. Tỷ lệ sống sót đối với bệnh biến thiên theo lứa tuổi, 85% ở trẻ em và 50% ở người lớn[14] Leukemia Leukemia kinh (CL) Leukemia cấp (AL) Leukemia cấp dòng tủy (AML) Leukemia cấp dòng lympho (ALL) Leukemia kinh dòng tủy (CML) Leukemia kinh dòng lympho (CLL) M 0 M 1 M 2 M 3 M 4 M 5 M 6 M 7 L 1 L 2 L 3 THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Dựa vào hình thái và hóa học tế bào (hệ thống phân loại FAB), ALL được chia thành 3 thể khác nhau[5]: + L1: Tế bào tương đối đồng nhất về mặt hình thái, đó là các tế bào nhỏ, kích cỡ tương đối đồng đều, tỷ lệ nhân và ngun sinh chất rất hẹp. + L2: Hình thái tế bào to nhỏ khác nhau, tỷ lệ nhân, ngun sinh chất khơng đồng đều, nhân có biểu hiện khơng thuần nhất. + L3: Tế bào ác tính cao: to, nhân có nhiều hốc (vacuole). Dựa vào dấu ấn miễn dịch của màng tế bào, ALL được phân loại theo bảng 1 Bảng 1. Phân loại theo miễn dịch ALL Thể % Hình thái Miễn dịch Dòng lympho B Tiền tiền B Tiền B Chung B biệt hóa 11 10 51 3 L1, L2 L1, L2 L1, L2 L3 HLA-DR, TdT, CD19 HLA-DR, TdT, CD19, Ig trong bào tương HLA-DR, TdT, CD19, CD10 (CALLA) HLA-DR, TdT, CD19, Ig trên bề mặt tế bào Dòng lympho T Tiền T T biệt hóa 7 17 L1, L2 L1, L2 TdT, CD3, CD7 TdT, CD3, CD&, CD1a/2 * Leukemia cấp dòng tủy là dạng leukemia cấp phổ biến nhất ở người trưởng thành, tỷ lệ mắc bệnh tăng dần theo tuổi. Ở Mỹ, tử vong do AML chiếm tỷ lệ 1,2% trong tổng số các ca tử vong vì ung thư [16]. AML xảy ra khi các tế bào THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN non tăng sinh q mức nhưng khơng hoặc kém biệt hóa để phát triển thành tế bào máu bình thường. Các ngun tủy bào non chất đầy trong tủy xương và cản trở sự sản sinh của các tế bào máu khỏe mạnh bình thường. Điều này dẫn tới thiếu máu (khơng có đủ tế bào hồng cầu), chảy máu và thâm tím (do thiếu các tế bào tiểu cầu, yếu tố giúp tạo thành cục máu đơng) và thường xun bị nhiễm trùng vì khơng có đủ các tế bào bạch cầu làm nhiệm vụ bảo vệ. Tỷ lệ sống sót trong 5 năm của bệnh nhân mắc AML là 40% [9]. Dựa vào hình thái và hóa học tế bào (FAB), AML được chia thành 8 thể khác nhau [5] + M 0 : Tế bào tủy khơng biệt hóa hoặc biệt hóa rất ít, phản ứng PO + <3% + M 1 : Tế bào tủy biệt hóa rất ít, phản ứng PO + >3% + M 2 : Tế bào tủy đã biệt hóa một phần, phản ứng PO + >20% + M 3 : Tế bào biệt hóa ở giai đoạn tiền tủy bào – gọi là leukemia cấp tiền tủy bào + M 4 : Bệnh lý xảy ra ở tế bào nguồn giai đoạn hạt/mono – gọi là leukemia cấp dòng hạt/mono + M 5 : Bệnh lý xuất hiện ở tế bào đầu dòng mono - gọi là leukemia cấp dòng mono + M 6 : Bệnh lý xảy ra ở tế nào đầu dòng hồng cầu gọi là leukemia cấp dòng hồng cầu + M 7 : Bệnh lý xảy ra ở đầu dòng mẫu tiểu cầu gọi là leukemia dòng mẫu tiểu cầu. Dựa vào dấu ấn miễn dịch của màng tế bào, AML được phân loại như bảng 2 Bảng 2. Phân loại theo miễn dịch AML Thể Hình thái Miễn dịch THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN + Dòng tủy chung: M 0 , M 1 -M 3 CD 33+ , CD 34 + Dòng hạt/mono: M 4 CD 33+ , CD 14+ , CD 13 , CD 11+ , + Dòng tủy mono: M 5 CD 14+ , CD 33+ + Dòng hồng cầu M 6 Glycophorin –A, CD 71 + Dòng mẫu tiểu cầu: M 7 CD 41 , CD 61 Hiện nay, hệ thống phân loại của tổ chức y tế thế giới (WHO) cũng được khuyến cáo sử dụng và thêm vào đó các dữ liệu về mặt lâm sàng cũng như các đặc tính sinh học đáng quan tâm như hình thái học, hố học tế bào, kiểu hình miễn dịch, di truyền tế bào và sinh học phân tử. Việc phân chia các phân nhóm cũng dựa vào sự khác biệt các thơng số chẩn đốn và xác định các bệnh nhân phù hợp hơn với các phương pháp điều trị đặc biệt. 1.1.3.2. Leukemia kinh Leukemia kinh phân biệt với Leukemia cấp là cơ thể sản sinh q nhiều tế bào máu gần trưởng thành, chúng phát triển theo các con đường khác nhau nhưng thường khơng thực hiện chức năng giống như các tế bào máu trưởng thành. Leukemia kinh thường phát triển chậm hơn và ít biểu hiện rầm rộ hơn leukemia cấp. Có hai dạng leukemia kinh chủ yếu: - Leukemia kinh dòng lympho thường gặp ở những người trên 55 tuổi. Tỷ lệ người mắc bệnh này cao nhất là ở độ tuổi từ 60 đến 70 tuổi. Ở CLL, các tế bào ác tính trong tủy xương là tế bào thuộc lympho. Những tế bào bất thường này khơng có khả năng chống lại sự nhiễm trùng như các tế bào bình thường. Ở CLL, các tế bào ung thư có trong tủy xương, máu, lách và hạch bạch huyết, chúng gây ra lách to, hạch to. Tỷ lệ sống sót trong 5 năm của bệnh nhân mắc CLL là 75% [18]. - Leukemia kinh dòng tủy hay gặp nhất ở độ tuổi từ 25 đến 60 tuổi. Ở CML, các tế bào ác tính là tế bào thuộc dòng tủy. Các tế bào CML thường chứa một dạng bất thường trong mã di truyền gọi là nhiễm sắc thể Philadelphia. Tuy THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN nhiên, bệnh này khơng di truyền. Leukemia kinh dòng tủy có thể được chữa khỏi bằng việc cấy ghép tủy xương. Tỷ lệ sống sót trong 5 năm của bệnh nhân mắc CML là 90% [20]. Ngồi ra còn có Leukemia tế bào tóc (Hairy cell leukemia - HCL). HCL đơi khi được coi là một dạng của CLL, tuy nhiên nó khơng hồn tồn giống những đặc điểm của CLL. Khoảng 80% những người bị bệnh này là nam giới và chưa có một trường hợp nào xảy ra ở trẻ em. Tỷ lệ sống của bệnh này trong 10 năm là từ 96-100% [12]. 1.1.4. Triệu chứng của bệnh leukemia Các biểu hiện ban đầu của leukemia cũng giống như triệu chứng của cảm cúm hay các bệnh thơng thường khác, bao gồm 4 hội chứng chủ yếu: - Hội chứng nhiễm trùng: sốt, mệt mỏi, đau khớp, thường xun nhiễm trùng. - Hội chứng thiếu máu: da xanh, đau đầu, chóng mặt, chảy máu hay sưng tấy ở răng, lợi. - Hội chứng xuất huyết ở da, niêm mạc, cơ khớp, chậm lành các vết thương, chảy máu mũi hay thường xun bị bầm tím. - Hội chứng hạch: hạch to, lách to, gan to, cảm thấy đầy bụng, chướng bụng. 1.4.5. Chẩn đốn bệnh leukemia Bác sỹ có thể khơng phát hiện ra leukemia nếu chỉ dựa trên những triệu chứng của bệnh nhân. Tuy nhiên, qua q trình khám sức khỏe, bác sỹ có thể phát hiện ra rằng bệnh nhân có hạch bạch huyết nổi lên hay hiện tượng tăng kích thước của gan hoặc lách. Việc chẩn đốn có thể trở nên rõ ràng hơn khi các xét nghiệm máu định kỳ (đặc biệt là đếm tế bào máu) cho kết quả khác thường. Bệnh nhân được chỉ định tiến hành lần lượt các xét nghiệm cho đến khi xác định chính xác thể bệnh mắc phải. Các xét nghiệm bao gồm: huyết đồ, tủy đồ, sinh THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN thiết tủy, hóa học tế bào, miễn dịch tế bào và di truyền tế bào. Dựa vào đó, bác sĩ đưa ra phác đồ điều trị thích hợp cho từng bệnh nhân. Huyết đồ là xét nghiệm cho phép xác định số lượng các tế bào máu và các thành phần liên quan của máu ngoại vi: hồng cầu, bạch cầu và tiểu cầu, hàm lượng huyết sắc tố, tỷ lệ hồng cầu trên thể tích máu tồn phần, phản ánh tình trạng thiếu máu hoặc cơ đặc máu (hematocrit). Huyết đồ được tiến hành nhằm: - Sàng lọc những bệnh lý đặc trưng bởi những thay đổi nghiêm trọng về số lượng tế bào máu (ví dụ trong các bệnh nhiễm trùng, một số bệnh ung thư, ở các bệnh nhân tiếp xúc với hóa chất độc hại…) - Theo dõi diễn biến của một số bệnh như: bệnh leukemia, u bạch huyết, các bệnh liên quan tới máu, bệnh mạn tính… - Theo dõi tác dụng phụ của một số thuốc có khả năng ức chế hoạt động của tủy xương. Điều này đặc biệt quan trọng đối với những bệnh nhân bị một số bệnh ung thư (nhất là ung thư máu, u bạch huyết), và những người phải dùng hóa trị liệu hoặc xạ trị. Nếu số lượng tế bào máu giảm xuống mức q thấp, bác sĩ sẽ cho bệnh nhân nhập viện ngay vì lúc này họ rất dễ bị nhiễm trùng, chảy máu hoặc bị các biến chứng nghiêm trọng khác, gây nguy hiểm cho tính mạng. Ở bệnh nhân leukemia cấp, huyết đồ thể hiện tình trạng giảm 1-3 dòng tế bào của máu ngoại vi và xuất hiện bạch cầu non trong cơng thức bạch cầu. Các chỉ số hồng cầu máu ngoại vi thường cho thấy một tình trạng thiếu máu bình sắc hồng cầu bình thường khơng hồi phục. Số lượng bạch cầu có thể từ dưới 1G/l cho đến trên 200G/l. Đa số các bệnh nhân có số lượng bạch cầu khoảng từ 5- 30G/l [4][1]. Tủy đồ của bệnh nhân leukemia cấp thường cho thấy một tình trạng tủy giàu tế bào. Tuy nhiên trong những trường hợp leukemia thứ phát tủy thường nghèo tế bào hoặc có mật độ bình thường. Các dòng tế bào tạo máu bình thường trong tủy bị thay thế bởi những tế bào non ác tính. Các tế bào này phải chiếm một tỷ lệ ≥30% các tế bào có nhân trong tủy thì mới có thể xác định chẩn đốn là leukemia. Bên cạnh đó có thể quan sát thấy sự trưởng thành khơng bình THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN [...]... chiều 3.4 Điện di hai chiều protein bệnh leukemia Điện di 2 chiều là kỹ thuật nền tảng trong phân tích proteomics Kỹ thuật này đã được sử dụng để phân tách protein thu được trong dịch chiết tế bào bạch cầu và cả trong huyết tương của bệnh nhân leukemia Mẫu đem phân tích là mẫu hỗn hợp, bao gồm tế bào bạch cầu của các bệnh nhân leukemia và hỗn hợp huyết tương của chính các bệnh nhân trên Kết quả điện di... protein tế bào bệnh leukemia Để có thể nghiên cứu protein trong tế bào bạch cầu bệnh leukemia thì cần phải tách các tế bào bạch cầu Do đó chhúng tơi đã sử dụng Ficoll™ 400 để tách các tế bào bạch cầu Ficoll™ 400 F4375 là một hợp chất cao phân tử dưới dạng bột, trơ, có cấu tạo là polysucrose Ficoll được pha với đệm PBS hoặc SBSS cho đến khi có tỉ trọng thích hợp cho việc phân tách các loại tế bào theo... trưng giữa hai nhóm CML và CLL 3.1.2 Đặc điểm tế bào học của bệnh nhân leukemia cấp Khác với bệnh leukemia kinh, đặc điểm tế bào học nổi bật của bệnh nhân leukemia cấp là sự xuất hiện tỷ lệ lớn tế bào non ác tính Bên cạnh đó, nghiên cứu cũng cho thấy sự trưởng thành khơng bình thường của các dòng tế bào còn lại Từ kết quả thống kê 39 trường hợp bệnh nhân leukemia cấp được điều trị tại Viện Huyết học... này Kết quả này cho thấy phân tích proteomics huyết tương có thể bổ sung các phương pháp trong việc nhận dạng protein, các protein này có thể có vai trò quan trọng trong việc xác định sự khác biệt về sinh học và trong chẩn đốn giữa các phân nhóm CLL 1.3.2 Phân tích proteomics tế bào bệnh nhân leukemia Wang và các cộng sự (2004) đã tiến hành nghiên cứu proteomics dòng tế bào leukemia (K562/CR3) bằng... tới mục đích cuối cùng là làm tăng hiệu quả điều trị bệnh leukemia Các nghiên cứu proteomics bệnh leukemia thường dựa trên một trong hai nguồn ngun liệu chính là huyết tương và tế bào bệnh nhân 1.3.1 Phân tích proteomics trong huyết tương bệnh nhân leukemia Huyết tương (plasma) là phần dịch lỏng màu vàng nhạt còn lại sau khi máu đã loại bỏ các tế bào máu Một người trưởng thành chứa khoảng 2,5 lít huyết... proteomics tế bào, chúng tơi tiến hành thống kê kết quả xét nghiệm huyết tủy đồ của bệnh nhân nhằm đánh giá các đặc điểm tế bào học của bệnh leukemia 3.1.1 Đặc điểm tế bào học của bệnh nhân leukemia kinh Nghiên cứu trên 7 trường hợp bệnh nhân leukemia kinh, chúng tơi thu được kết quả sau: Bảng 4 Chỉ số tế bào máu trong leukemia kinh Các chỉ số Trị số TB Độ lệch chuẩn (SD) Số lượng hồng cầu (T/l) 2,84... thường với các tế bào máu và tủy bình thường Đối với bệnh leukemia cấp, sự lui bệnh hồn tồn (khơng có các biểu hiện về bệnh trong máu và tế bào) trong 5 năm liên tục là dấu hiệu chứng tỏ bệnh đã được chữa trị Các báo cáo gần đây cho thấy càng ngày càng có nhiều bệnh nhân leukemia đã lui bệnh hồn tồn ít nhất sau 5 năm khi họ chẩn đốn phát hiện bệnh Để nâng cao khả năng chẩn đốn và đẩy lui bệnh, ngày càng... bằng các tế bào T CD4+ và CD8+ cũng tốt như tế bào B Gần đây, kỹ thuật vi chuỗi phản ứng (microarray), phân tích đa hình nucleotide đơn (SNPs) và điện di hai chiều cho phép chúng ta phân tích sâu rộng về sự khác biệt về gen, ARN và protein giữa bệnh nhân và các mẫu đối chứng bình thường Hiện nay, với việc áp dụng các kỹ thuật proteomics trong phân tích leukemia người ta đã đi sâu vào nghiên cứu leukemia. .. LC/MS [28] Các tế bào được dung giải đã được phân tách thành 96 phân đoạn bằng điện di khơng dòng, sau đó được chạy qua SDSPAGE và những phân đoạn hiện băng được chạy tiếp qua LC/MS Trong 96 phân đoạn đó có 35 phân đoạn pH từ 4,75 đến 9,6 được lựa chọn để xác định và đã nhận dạng được 736 protein khác nhau Cũng vào năm 2004, Cui và cộng sự đã tiến hành phân tích proteomics tế bào bệnh nhân leukemia cấp... Lớp tế bào bạch cầu được hút ra và rửa sạch nhiều lần bằng đệm PBS Để kiểm tra khả năng tách tế bào, chúng tơi đã tiến hành nhuộm tế bào bạch cầu bằng Giêmsa và soi tế bào trên kính hiển vi quang học Kết quả được trình bày như ở hình 3 A B THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Hình 3 Ảnh chụp tế bào bạch cầu sau khi phân tách dưới kính hiển vi A: Độ phóng đại 40x; B: Độ phóng đại 100x Trên ảnh chụp mẫu tế bào