Bước đầu phân tích dịch tễ học vi khuẩn gây bệnh gram âm bằng kỹ thuật sinh học phân tử

Nghiên cứu được thực hiện với mục tiêu bước đầu phân tích dịch tễ học phân tử vi khuẩn E. coli và Klebsiella pneumoniae ESBL trong số các vi khuẩn gây bệnh gram âm để chứng minh tình trạng nhiễm chéo.

Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 BƯỚC ĐẦU PHÂN TÍCH DỊCH TỄ HỌC VI KHUẨN GÂY BỆNH GRAM ÂM BẰNG KỸ THUẬT SINH HỌC PHÂN TỬ Nguyễn Trọng Hiệp*, Nguyễn Hoàng Thu Trang*, Bùi Tùng Hiệp** TÓM TẮT Mở đầu: Nghiên cứu gần Việt Nam cho thấy tượng sinh enzym β-lactamase phổ rộng (ESBL) ngày phổ biến vi khuẩn đường ruột lan vi khuẩn Gram âm khác Mặt khác, nhiễm trùng bệnh viện tình trạng nhiễm chéo cặp trùng song hành với Tuy nhiên Việt Nam chưa có nhiều nghiên cứu tỉ lệ nhiễm chéo vi khuẩn gây bệnh qua phân tích dịch tễ học phân tử, phương pháp nghiên cứu áp dụng hữu hiệu nước phát triển để kiểm sóat nguy Mục tiêu: Bước đầu phân tích dịch tễ học phân tử vi khuẩn E coli Klebsiella pneumoniae ESBL số vi khuẩn gây bệnh Gram âm để chứng minh tình trạng nhiễm chéo Phương pháp: Vi khuẩn thu thập từ bệnh phẩm nước tiểu, máu, đàm, dịch phế quản, … phân lập môi trường chuyên biệt định danh phản ứng sinh hóa Thử nghiệm phương pháp đĩa giấy kháng sinh kết hợp hiệp lực để sàng lọc vi khuẩn ESBL Các chủng vi khuẩn E coli K pneumoniae sinh ESBL tiến hành kỹ thuật ERIC-PCR với mồi ERIC để xác định tỉ lệ nhiễm chéo, gồm ERIC-2 (5'AAG TAA GTG ACT GGG GTG AGC G-3') ERIC-1026 (5'-TAC ATT CGA GGA CCC CTA AGT G-3') Sản phẩm khuếch đại điện di gel agarose phân tích số lượng kích thước băng DNA thu Kết quả: 494 chủng vi khuẩn thu năm 2009 từ 448 bệnh nhân bệnh viện Chợ Rẫy TP HCM năm 2009, 351 chủng vi khuẩn Gram âm (71%) Tỉ lệ vi khuẩn có kiểu hình ESBL 28,8% (101/351 chủng) Họ vi khuẩn đường ruột chiếm đến 81,1% chủng ESBL (89/101 chủng), với đa số E coli K pneumoniae, tỉ lệ 36 chủng (40,4%) 25 chủng (28,1%) Với kỹ thuật ERIC-PCR, chủng E coli K pneumoniae ESBL xác định tỉ lệ nhiễm chéo cho thấy E coli có tỉ lệ nhiễm chéo 52,7% (19/36 chủng) với type phụ, có type phụ gây nhiễm chéo chủng Ở K pneumoniae, tỉ lệ nhiễm chéo 48% (12/25 chủng), có type phụ gây nhiễm chéo Như bước đầu khảo sát với loài vi khuẩn E coli K pneumoniae, tỉ lệ nhiễm chéo cao, xác định 50,8% Kết luận: Trong nghiên cứu chúng tôi, bước đầu khảo sát lòai vi khuẩn E coli K pneumoniae ESBL, cho thấy tỉ lệ nhiễm chéo từ gấp rưỡi đến gần gấp đôi so với nghiên cứu nước Kết thật nghiêm trọng với việc điều trị bệnh viện vi khuẩn ESBL đa đề kháng với nhiều kháng sinh thơng dụng Từ khóa: Vi khuẩn gây bệnh Gram âm, Họ vi khuẩn đường ruột, enzym β-lactamase phổ rộng, PCR trình tự chung xen kẽ lặp vi khuẩn đường ruột (ERIC-PCR), nhiễm chéo **Bệnh viện cấp cứu Trưng Vương, TP HCM *Khoa Dược- ĐH Y Dược TP HCM, TP HCM Tác giả liên hệ: TS Nguyễn Trọng Hiệp ĐT: 0907429991 Email: ntronghiep@yahoo.com 258 Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học ABTRACT PRELIMINARY EPIDEMIOLOGICAL ANALYSIS OF PATHOGENIC GRAM-NEGATIVE ISOLATES BY MOLECULAR BIOLOGY TECHNIQUE Nguyen Trong Hiep, Nguyen Hoang Thu Trang, Bui Tung Hiep * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 15 - Supplement of No - 2011: 258 - 264 Background: In Vietnam, recent studies show the emergence of extended-spectrum ß-lactamases (ESBLs) producing organisms along with multiple resistant isolates pose a serious problem in the hospital setting, ESBLproducing bacteria are frequently in the Enterobacteriaceae family and spread other Gram-negative bacteria Moreover, nosocomial infections and the cross-transmission are always being together However, there was not studied about the cross-transmission rates among bacterial pathogens by using molecular epidemiological analysis in Vietnam This method is very common in the developed countries in order to control the crosstransmission Objectives: To analyse the molecular epidemiology of E coli and Klebsiella pneumoniae ESBL among pathogenic Gram-negative isolates for the cross-transmission Method: The bacterial strains were isolated from urine, blood, sputum, bronchial aspiration, abdominal liquid and cerebrospinal fluid The double disk synergy test was performed to screen ESBL strains E coli and K pneumoniae ESBL isolates were realized the ERIC-PCR with ERIC primers: ERIC-2 (5'-AAG TAA GTG ACT GGG GTG AGC G-3') and ERIC-1026 (5'-TAC ATT CGA GGA CCC CTA AGT G-3') The amplified products were electrophoresed on agarose gel, the profiles were analyzed on the number and the size of DNA bands Results: 494 clinical isolates obtained in 2009 from 448 patients in Cho Ray hospital of HCM city, 351 strains were Gram-negative bacteria (71%) ESBL phenotypes occupied 28.8% (101/351 Gram-negative strains) ESBL isolates from the Enterobacteriaceae family were very high (89/101 strains), more predominant with 36 E coli strains (40.4%) and 25 K pneumoniae strains (28.1%) E coli and K pneumoniae ESBL isolates were performed the ERIC-PCR to determine the cross-transmission rate The results demonstrated that the crosstransmission among E coli was 52.7% (19 of 36 strains) with sub-types in which sub-type caused the crosstransmission to the other strains In K pneumoniae, the cross-transmission was 48% (12 of 25 strains) with sub-types Therefore, our preliminiary study on two species bacteria of E coli and K pneumoniae ESBL showed that the cross-transmissions were very high to at least 50.8% Conclusion: In our study, the preliminary analysis identified that the cross-transmission rate between E coli and K pneumoniae ESBL were higher than from half to twofold of the foreign studies It is really a serious problem in the hospital setting because all these strains producing ESBL were multi-resistant to many common antibiotics Keywords: Gram-negative clinical isolates, Enterobacteriaceae family, extended-spectrum ß-lactamases (ESBLs), enterobacterial repetitive intergenic consensus-PCR (ERIC-PCR), cross-transmission Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas ĐẶT VẤN ĐỀ aeruginosa v…v…, gây bệnh nhiễm Hiện nay, Việt Nam trùng nguy hiểm(5) nước có tỉ lệ nhiễm trùng cao giới Đặc Mặt khác, mơi trường bệnh viện, điểm khí hậu nhiệt đới điều kiện thuận lợi cho nhiễm trùng bệnh viện nhiễm trùng chéo vi khuẩn gây bệnh, vi khuẩn Gram (cross-transmission) cặp trùng ln song âm chiếm tỉ lệ cao, đến 84,5% Những hành với nhau(12) Theo số liệu Tổ chức y tế vi khuẩn tác nhân quan trọng kể đến: Chuyên Đề Dược Khoa 259 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 giới, loại nhiễm trùng bệnh viện viêm phổi chiếm tỉ lệ cao (62,3%), vị trí đặt catheter mạch máu (18%), nhiễm khuẩn huyết (16%), thủ thuật can thiệp chẩn đoán điều trị bộc lộ tĩnh mạch, đặt thơng dày, đặt nội khí quản thở máy, vi khuẩn tác nhân thường đồng thời vi khuẩn tiết enzym β-lactamase phổ rộng (ESBL)(5) Đây quan tâm lớn bác sĩ thực hành lâm sàng, nhà quản lí điều dưỡng chăm sóc bệnh nhân Nhiều nghiên cứu cho thấy nhiễm trùng chéo thường gặp Khoa hồi sức cấp cứu, tần suất đến 10,7% /1000 bệnh nhân-ngày nhiều ngun nhân…(212) Để phân tích tình trạng nhiễm chéo, phải áp dụng kỹ thuật sinh học phân tử (SHPT) Đây phương pháp phân biệt hai cá thể lòai dựa khác biệt dấu ấn di truyền DNA, áp dụng hữu hiệu nước phát triển để giới hạn nguy Trong kỹ thuật dùng phân tích dịch tễ học phân tử vi khuẩn gây bệnh kỹ thuật RAPD-PCR (PCR khuếch đại đa hình đoạn DNA khuếch đại ngẫu nhiênRandom Amplified Polymorphic DNA); dùng mồi trình tự chung xen kẽ lặp vi khuẩn đường ruột (ERIC) thường gọi ERIC-PCR (enterobacterial repetitive intergenic consensusPCR), thường sử dụng khơng cần nhiều trang thiết bị đắt tiền, lực phân tích cá thể loài tốt Điện di phân tích gel agarose cho phổ (profile) sản phẩm khuếch đại, thường đặc trưng riêng biệt cho chủng cụ thể(6,9,10) Ở Việt Nam chưa có nhiều nghiên cứu phân tích dịch tễ học tình trạng nhiễm chéo vi khuẩn gây bệnh kỹ thuật SHPT Nghiên cứu nhằm phân tích dịch tễ học, bước đầu xác định tỉ lệ nhiễm chéo vi khuẩn ESBL gây bệnh phổ biến E coli Klebsiella pneumoniae bệnh viện kỹ thuật ERIC-PCR 260 VẬTLIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Chủng vi khuẩn Nghiên cứu thực 351 chủng vi khuẩn Gram âm phân lập từ mẫu nước tiểu, máu, đàm, dịch phế quản, dịch não tuỷ, dịch báng bệnh viện Chợ Rẫy Tp.HCM từ tháng đến tháng năm 2009 Tiêu chuẩn chọn bệnh nhân: bệnh nhân yêu cầu tiến hành xét nghiệm vi sinh, chưa sử dụng kháng sinh vòng tuần trước lấy mẫu bệnh phẩm Phân lập, định danh vi khuẩn Theo quy trình “Sổ tay quy trình Vi sinh lâm sàng” bệnh viện Chợ Rẫy nhằm thu chủng khiết Các mẫu bệnh phẩm hoạt hóa, phân lập mơi trường thích hợp định danh phản ứng sinh hóa Thơng tin dịch tễ học bệnh nhân tuổi tác, giới tính, chẩn đóan nhiễm trùng ghi nhận Kiểm tra tính đề kháng kháng sinh Thực kháng sinh đồ với chủng vi khuẩn khiết theo hướng dẫn NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards), E coli ATCC 25922 dùng làm mẫu chứng kiểm tra chất lượng(8) Ghi nhận lại tỉ lệ đề kháng với kháng sinh quan trọng vi khuẩn Gram âm: augmentin (amoxicillin+ clavulanic acid), ceftazidime, cetriaxone, imipenem, amikacin, ciprofloxacin Vi khuẩn xác định đa đề kháng đề kháng từ kháng sinh trở lên(16) Xác định kiểu hình ESBL Bằng phương pháp đĩa đơi: tìm tác dụng hiệp lực thạch Mueller-Hinton đĩa chứa 20 μg amoxicillin/10 μg clavulanic acid đặt đĩa cephalosporin hệ đặt xung quanh (đặt cách 2-3 cm tính từ trung tâm đĩa), gồm ceftazidime (30 μg), cefotaxim (30 μg) Nếu có tăng rộng vùng ức chế nơi giao thoa kháng sinh, số tài liệu gọi hình ảnh “nút chai champagne”, kết luận chủng có tiết enzym ESBL(8) Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Kỹ thuật sinh học phân tử Chiết DNA vi khuẩn Hoạt hóa chủng có kiểu hình ESBL mơi trường Trypticase soy broth, sau thực chiết DNA gen vi khuẩn kit (Wisard SV genomic DNA purification systemCat A 2361-Promega) Thực phản ứng ERIC-PCR Sử dụng cặp mồi ERIC-2 (5'-AAG TAA GTG ACT GGG GTG AGC G-3') ERIC-1026 (5'-TAC ATT CGA GGA CCC CTA AGT G-3') Phản ứng thực máy luân nhiệt (ATC401 model; Apollo-CLP) với chu kỳ biến tính phút 940C; 40 chu kỳ (1 phút 960C, phút 520C, phút 720C); 10 phút 720C Sản phẩm khuếch đại điện di điện trường 100V 45 phút gel agarose 1,5% có chứa ethidium bromide Sản phẩm phát bước sóng 254 nm hệ thống chụp gel (Dolphin-Doc) Kỹ thuật ERIC-PCR phân tích tình trạng nhiễm chéo thực 36 chủng E coli 25 chủng K pneumoniae ESBL tổng số 101 chủng ESBL phát phương pháp đĩa đơi Phân tích kết Tổng số vạch DNA số lượng kích thước tạo nên phổ riêng biệt cho chủng Giữa chủng vi khuẩn lồi xem có liên quan mật thiết mặt di truyền với có khơng q vạch khác biệt, nói cách khác từ chủng vi khuẩn nhiễm chéo tạo ra(10) Các vi khuẩn E coli K pneumoniae ESBL phân tích type phụ (sub-type) để từ cho biết chủng vi khuẩn lây nhiễm chéo bao nhiêu, số trường hợp nhiễm chéo n-1 (n số chủng vi khuẩn lồi có type phụ) KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Từ tháng đến tháng năm 2009, phân lập định danh 494 chủng vi khuẩn từ 448 mẫu bệnh phẩm bệnh viện Chợ Rẫy TP Chuyên Đề Dược Khoa Nghiên cứu Y học HCM 403 bệnh phẩm có chủng, 44 bệnh phẩm có chủng bệnh phẩm có chủng Nghiên cứu cho thấy tỉ lệ vi khuẩn Gram âm bệnh viện Chợ Rẫy chiếm đến 71% (351/494 chủng) trường hợp nhiễm trùng Một nghiên cứu gần bệnh viện Nhi Đồng II cho thấy tỷ suất mắc vi khuẩn Gram âm lên đến 81,8% Nghiên cứu khác bệnh viện Chợ Rẫy (2003), kết luận vi khuẩn Gram âm nguyên nhân gây nhiễm trùng thường gặp Tỉ lệ vi khuẩn ESBL số vi khuẩn Gram âm xác định thông qua thử nghiệm đĩa đôi 28,8% (101/351 chủng), vi khuẩn họ Enterobacteriaceae chiếm đến 81,1% (89/101 chủng) mà E coli K pneumoniae đa số, tỉ lệ 40,4% (36/89 chủng) 28,1% (25/89 chủng) Ngoài ra, Acinetobacter baumanii (vi khuẩn không thuộc họ Enterobacteriaceae) chiếm 10,9% Nghiên cứu bệnh viện Nhiệt đới (2002-2004) tỉ lệ vi khuẩn ESBL 33,14%, nhiều nghiên cứu khác cho thấy tỉ lệ vi khuẩn ESBL thay đổi tuỳ theo khu vực, bệnh viện quốc gia Việt nam thường chiếm tỉ lệ cao(1,3,6) Kháng sinh đồ 89 chủng ESBL thuộc họ Enterobacteriaceae, kết cho thấy mức độ đề kháng loại kháng sinh cephalosporin hệ thứ cao (ceftazidime 67,4%, ceftriaxon 89,9%) Sự đề kháng với fluoroquinolone (ciprofloxacine) đáng báo động so với kháng sinh khác (83,1%) Các chủng nhạy cảm tương amikacin, tỉ lệ 54,8% Imipenem amoxicillin/clavulanat tác dụng tốt vài chủng xuất kiểu hình trung gian (Bảng 1) Đa số chủng ESBL đa đề kháng kháng sinh, kháng sinh kháng sinh lúc với tỷ lệ cao 32,6%, 29,2% 21,3%, số chủng đề kháng loại kháng sinh nhiều Mặt khác, khơng có chủng ESBL đề kháng hay kháng sinh Có thể nói tình hình đề kháng 261 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 kháng sinh vi khuẩn họ Enterobacteriaceae tiết enzym ESBL nghiêm trọng Bảng Tính đề kháng kháng sinh họ vi khuẩn đường ruột Enterobacteriaceae sinh ESBL Kháng sinh Augmentin Ceftazidime Ceftriaxone Imipenem Amikacin Ciprofloxacine Đề kháng (%) 67,4 89,9 36 83,1 Chúng thực phản ứng ERIC-PCR cho 36 chủng E coli, 25 chủng K pneumonia phân tích kết điện di Đối với vi khuẩn E coli, chúng tơi nhận thấy có type phụ gây nhiễm chéo Trong có type phụ A gây nhiễm chéo chủng vi khuẩn, type phụ B nhiễm chéo chủng vi khuẩn, type phụ C gây nhiễm chéo chủng Type phụ D, E, F, G gây nhiễm chéo chủng vi khuẩn (Hình 1) Do tỉ lệ nhiễm chéo vi khuẩn E coli 52,7% (19/36 chủng) Ở K pneumoniae, chủng cho băng khuếch đại kích thước từ 300 bp đến khoảng 2kb Chúng nhận thấy có type phụ gây nhiễm chéo Type phụ I gây nhiễm chéo cho chủng vi khuẩn, type phụ II gây nhiễm chéo cho chủng vi khuẩn, type phụ III gây nhiễm chéo cho chủng vi khuẩn, type phụ IV gây nhiễm chéo cho chủng vi khuẩn Như tỉ lệ nhiễm chéo K pneumoniae 48% (12/25 chủng) Như nghiên cứu bước đầu với loài vi khuẩn E coli K pneumoniae, tỉ lệ nhiễm chéo cao, xác định 50,8% (31/61 chủng) M 10 11 12 13 14 15 16 17 18 N M 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 N DAABACBBCAAEDFBAEACBGGAFAB kb 1kb 700 bp 500 bp Hình Sản phẩm phản ứng ERIC-PCR E coli M: Marker 1Kb (Bio-Labs); N: Marker 100 bp (Novagen) Có type phụ gây nhiễm chéo từ 36 chủng E coli khảo sát: A (giếng 2,3,6,11,12,19,22,31,35), B (giếng 5,8,9,18,25,36),C (giếng 7,10,24), D (giếng 1,15), E (giếng 13,21), F (giếng16,33), G (giếng 29,30) Các chủng lại khơng có nhiễm chéo (giếng 4,14,17,20,23,26,27,28,32,34) M 10 11 12 13 14 15 16 N M 17 18 19 20 21 22 23 24 25 N I I I I II I I IV IV II III II II III III II 1kb 500 bp kb 700 bp Hình Sản phẩm phản ứng ERIC-PCR Klebsiella Pneumoniae M: thang 1Kb(Bio Lads); M1: thang 100 bp (Novagen); có type phụ gây nhiễm chéo từ 25 chủng K pneumoniae: I (lane 1,2,3,6,9,10), II (7,15,20,21,25), III (18,23,24), IV (12,14) Các chủng lại khơng có nhiễm chéo (lane 4,5,8,11,13,16,17,19,22) 262 Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Weist K cho thấy nhiễm chéo thường gặp Khoa hồi sức cấp cứu, tần suất đến 39,3 /1000 bệnh nhânngày nhiều nguyên nhân khác như: không thực nguyên tắc vệ sinh cá nhân, qui định trang phục phòng mổ vệ sinh dụng cụ thăm khám bệnh nhân Trong nghiên cứu này, vi khuẩn thường gây nhiễm chéo Khoa săn sóc đặc biệt S aureus, Enterococcus faecalis, E coli P aeruginosa, vi khuẩn nhiễm chéo đến bệnh nhân, tỉ lệ nhiễm khuẩn chéo từ chủng vi khuẩn nhiễm trùng bệnh viện 34,6% (12) Nghiên cứu cho thấy kỹ thuật sinh học phân tử, nhiều tác giả khác chứng minh tỉ lệ nhiễm khuẩn chéo từ 13-50% chủng vi khuẩn nhiễm trùng bệnh viện Trong nghiên cứu chúng tôi, tỉ lệ nhiễm chéo tính riêng vi khuẩn E coli K pneumoniae ESBL bệnh viện lớn nước ta cao từ gấp rưỡi đến gần gấp đôi so với nghiên cứu nước (412) Kết thật nghiêm trọng, ảnh hưởng lớn đến chất lượng điều trị chủng vi khuẩn ESBL đa đề kháng với nhiều loại kháng sinh thông dụng Về nguồn lây nhiễm chéo, nghiên cứu năm 1997 Marinella cộng sự(7), tìm thấy 100% ống nghe có nhiễm Staphylococcus coagulase âm 38% nhiễm S aureus, việc vệ sinh dụng cụ y tế thơng thường đóng vai trò quan trọng Nghiên cứu đưa quy trình để ngăn chặn việc làm nhiễm dụng cụ chăm sóc bệnh nhân, quy trình tẩy trùng tẩy uế máy móc, quy trình sử dụng găng tay, áo choàng nhân viên y tế Nghiên cứu khác cho thấy thủ thuật chăm sóc có nguy dẫn đến nhiễm khuẩn từ bệnh viện là: mở khí quản, thở máy, đặt nội khí quản, thở oxy, đặt ống thơng tiểu, chạy thận nhân tạo, ung thư, đặt ống thông tĩnh mạch trung tâm; ca phẫu thuật kéo dài phẫu thuật cấp cứu có nhiều nguy dẫn đến bị nhiễm khuẩn vết mổ Ngoài ra, dụng cụ y tế đơn giản ống nghe, máy đo Chuyên Đề Dược Khoa Nghiên cứu Y học huyết áp, nhân viên y tế, bệnh nhân thân nhân trung gian gây nhiễm khuẩn(4) Gần đây, năm 2009, Chang HL cộng sự(2) ứng dụng nhiều phương pháp sinh học phân tử để nghiên cứu tình hình nhiễm chéo vi khuẩn kháng thuốc nguồn gây nhiễm chéo Kết cho thấy dụng cụ y khoa nhân viên y tế nguồn lây nhiễm, nghiên cứu tìm nguyên nhân đề biện pháp ngăn chặn nguồn lây lan Tại Việt Nam, nghiên cứu bệnh viện Cấp cứu Trưng Vương TP HCM năm 2007 tình trạng nhiễm khuẩn số dụng cụ dùng cho bệnh nhân khoa lâm sàng buồng nội soi cho thấy tỉ lệ nhiễm khuẩn cao cho dù dùng dung dịch sát khuẩn dụng cụ y tế như: bình kềm kềm (6,56%), đầu ống nội soi dày, tá tràng, tai mũi họng (11,11%) Một yếu tố khác, có 13% nhân viên y tế rửa tay cách thường xuyên theo nghiên cứu bệnh viện Bạch Mai (Hà Nội) Ngoài ra, qua kiểm tra ngẫu nhiên 77 nhân viên y tế số bệnh viện lớn TP HCM, trung bình có 481.000 vi khuẩn/ bàn tay hộ lý, 275.000 vi khuẩn bàn tay bác sĩ gần 127.000 vi khuẩn/ bàn tay nhóm nhân viên điều dưỡng(11) Điều giúp giải thích rõ ràng tỉ lệ nhiễm chéo tính loài vi khuẩn họ Enterobacteriaceae nghiên cứu cao nhiều so với tỉ lệ quốc gia ý thức kiểm soát vấn đề Do cần phải kiểm sốt nguồn gây nhiễm chéo vấn đề cốt yếu để ngăn chặn bùng nổ nhiễm chéo, điều chưa khảo sát xem nhẹ nước ta Chỉ có kỹ thuật sinh học phân tử rõ nguồn lây nhiễm chéo bệnh viện hữu hiệu để cách ly, lập, dập tắt nguy lan truyền TÀI LIỆU THAM KHẢO Cao V, Lambert T, Duong QN, et al (2002) Distribution of extended-spectrum beta-lactamase in clinical isolates of Enterobacteriaceae in Vietnam Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 46 (12): 3739-43 Chang HL, et al (2009) Nosocomial outbreak of infection with multidrug-resistant Acinetobacter baumannii in a medical center in Taiwan Infect Control Hosp Epidemiol, 30 (1): 34-8 263 Nghiên cứu Y học 264 Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Gur D, Livermore DM, Pitt TL, Hall LM, Akalin HE (1992) Diversity of Klebsiella with extended-spectrum beta-lactames at a Turkish university hospital J Hosp Infect, 22, 163-178 Halwani M, Solaymani-Dodaran M, Grundmann H, Coupland C, Slack R (2006) Cross-transmission of nosocomial pathogens in an adult intensive care unit: incidence and risk factors J Hosp Infect, 63 (1): 39-46 Hoàng Trọng Kim, Nguyễn Hoài Phong (2005) Đặc điểm nhiễm khuẩn bệnh viện khoa hồi sức tăng cường bệnh viện Nhi đồng Tạp chí Y học TP Hồ Chí Minh, (1): 147-153 Lautenbach E, Strom Bl, Bilker WB, et al (2001) Epidemiological investigation of fluoroquinolone resistance in infections due to extended-spectrum beta-lactamaseproducing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae Clinical Microbiology and Infectious Diseases, 33: 1288-94 Marinella MA, Pierson C, Chenoweth C (1997) The stethoscope, a potential source of nosocomial infection? Arch Intern Med, 157: 786-790 10 11 12 National Committee for Clinical Laboratory Standards (2006) Performance standards for antimicrobial disk susceptibility tests; approved standard, 9th ed Wayne, PA: NCCLS; document M100- S16 Nikbakht M, et al (2008) Molecular fingerprinting of meticillin-resistant Staphylococcus aureus strains isolated from patients and staff of two Iranian hospitals J Hosp Infect 69(1):46-55 Tenover FC et al (1995) Interpreting chromosomal DNA restriction patterns produced by pulsed-field gel electrophoresis: criteria for bacterial strain typing J Clin Microbiol, 33: 2233-2239 Website Sở y Tế Thành phố Hồ Chí Minh: http//www.medinet.hochiminhcity.gov.vn Weist K, Pollege K, Schulz I, Rüden H, Gastmeier P (2002) How many nosocomial infections are associated with crosstransmission? A prospective cohort study in a surgical intensive care unit Infect Control Hosp Epidemiol, 23 (3):127-32 Chuyên Đề Dược Khoa ... chéo vi khuẩn gây bệnh kỹ thuật SHPT Nghiên cứu nhằm phân tích dịch tễ học, bước đầu xác định tỉ lệ nhiễm chéo vi khuẩn ESBL gây bệnh phổ biến E coli Klebsiella pneumoniae bệnh vi n kỹ thuật. .. truyền DNA, áp dụng hữu hiệu nước phát triển để giới hạn nguy Trong kỹ thuật dùng phân tích dịch tễ học phân tử vi khuẩn gây bệnh kỹ thuật RAPD-PCR (PCR khuếch đại đa hình đoạn DNA khuếch đại ngẫu... bệnh vi n Nhi Đồng II cho thấy tỷ suất mắc vi khuẩn Gram âm lên đến 81,8% Nghiên cứu khác bệnh vi n Chợ Rẫy (2003), kết luận vi khuẩn Gram âm nguyên nhân gây nhiễm trùng thường gặp Tỉ lệ vi khuẩn