nghiên cứu về chủng Streptomyces 40.16

Hiện nay cùng với sự phát triển của công nghệ thông tin thì công nghệ sinh học cũng được coi là một trong những ngành công nghệ hàng đầu của thế giới

CHÚ GIẢI CHỮ VIẾT TẮT ADN : axit Deoxyribonucleic B.cereus : Bacillus cereus ATCC 9946 B.pumilus : Bacillus pumilus ATCC 10441 B.subtilis : Bacillus subtilis ATCC 6633 D : Đường kính vòng vơ khuẩn (mm) Dmhc : Dung mơi hữu cơ E.Coli : Escheriachia Coli ATCC 25922 P.aeruginosa: Pseudomonas Nhiễm sắc thể aeruginosa VM 201 P.mirabilis : Proteus mirabilis BV 108 S(Spiral) : Xoắn lò xo s : độ lệch chuẩn đã hiệu chỉnh S.typhi : Salmonella typhi DT220 S.flexneri : Shigella flexneri DT 122 S.lutea : Sarcina lutea ATCC 9314 Sm(smooth) : Nhẵn S.aureus : Staphylococus aureus ATCC 1228 VSV : Vi sinh vật ISP : Chương trình Streptomyces Quốc tế MT : Mơi trường dd : Dung dịch VK : Vi khuẩn THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN ĐẶT VẤN ĐỀ Hiện nay cùng với sự phát triển của cơng nghệ thơng tin thì cơng nghệ sinh học cũng được coi là một trong những ngành cơng nghệ hàng đầu của thế giới. Trong đó phải kể đến cơng nghệ sinh học vi sinh vật sản xuất kháng sinh, vitamin và các hoạt chất ứng dụng trong y học cũng như các lĩnh vực khác phục vụ đời sống con người đang có những phát triển vượt bậc. Từ những phương pháp sinh tổng hợp và bán tổng hợp thì cơng nghệ vi sinh sinh tổng hợp kháng sinh tiếp tục khẳng định vai trò của mình. Trong số hơn 10.000 chất kháng sinh được tìm ra thì có khoảng 2.000 chất do thực vật tạo ra còn khoảng 8.000 chất là kháng sinh do vi sinh vật tổng hợp, trong đó xạ khuẩn tổng hợp hơn 60%. Các cơng trình nghiên cứu đã chứng minh Streptomyces là một chi xạ khuẩn gồm nhiều lồi có khả năng sinh tổng hợp kháng sinh đa dạng về cấu trúc và đặc điểm kháng khuẩn. Đặc biệt một số lồi trong chi này có khả năng tổng hợp các chất chống ung thư và điều trị HIV- AIDS. Tuy nhiên có một vấn đề gây lo âu lớn đối với các nhà nghiên cứu, đó là sự xuất hiện của các vi sinh vật kháng kháng sinh và các chất hóa trị liệu khác. Do đó các nhà khoa học và các chun gia y tế đã khơng ngừng tìm kiếm những phương sách để chống lại hiện tượng này. Tại bộ mơn Vi sinh và Sinh học trường Đại học Dược Hà Nội, chúng tơi tiến hành phân lập và nghiên cứu về chủng Streptomyces 40.16 với các mục đích sau: + Từ chủng Streptomyces đã được phân lập, chọn giống sinh tổng hợp kháng sinh tốt nhất bằng chọn lọc ngẫu nhiên và đột biến, + Nghiên cứu mơi trường ni cấy và điều kiện lên men tối ưu, + Nghiên cứu đặc điểm, hình thái và sinh lý nhằm xác định tên khoa học của chủng Streptomyces 40.16 theo khóa phân loại ISP, + Nghiên cứu xây dựng quy trình chiết, tách sản phẩm và các đặc tính của kháng sinh do xạ khuẩn Streptomyces 40.16 tổng hợp lên. THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN PHẦN 1 TỔNG QUAN 1.1. VÀI NẪT VỀ KHÁNG SINH [5][6][8][11] 1.1.1.LỊCH SỬ Năm 1928, nhà vi khuẩn học người Anh Alexander Fleming trong khi nghiên cứu tụ cầu khuẩn ơng nhận thấy xung quanh khuẩn lạc mốc xanh nhiễm vào hộp peptri ni tụ CẦU TẠO THàNH VŨNG VỤ KHUẨN. HIỆN Tượng kỠ LẠ NàY đĨ được Fleming nghiên cứu và phân lập thuần khiết và xác định được mốc xanh đó là Penicillium notatum một chủng tạo ra penixilin. Năm 1941 penixilin được nghiên cứu sản xuất phục vụ điều trị cho thương binh trong đại chiến thế giới thứ II và kỷ ngun của chất kháng sinh được thừa nhận. Cho đến nay người ta đĨ PHỎT HIỆN Và MỤ TẢ KHOẢNG Hơn 8000 chất kháng sinh khác nhau có nguồn gốc từ nấm mốc, xạ khuẩn và vi khuẩn. Thuật ngữ kháng sinh (antibiotic) được Waksman N.A gọi từ 1944 KHI ỤNG PHỎT MINH RA STREPTOMYCIN TỪ MỤI trường ni cấy STREPTOMYCES GRISEUS 1.1.2 Định nghĩa KHỎNG SINH Là NHỮNG HỢP CHẤT HOỎ HỌC DO VI SINH VẬT TIẾT RA CÚ TỎC DỤNG ỨC CHẾ SỰ PHỎT TRIỂN HAY TIỜU DIỆT MỘT CỎCH CHọn lọc một nhóm vi sinh vật xác định (vi khuẩn, nấm, xạ khuẩn, protozoa, virus) hay cả tế bào ung thư ở nồng độ thấp. 1.1.3.Cơ chế tác dụng của kháng sinh. Các kháng sinh tác dụng cơ bản qua việc ức chế các phản ứng tổng hợp rất khác nhau của tế bào vi sinh vật gây bệnh. Chúng liên kết vào các vị trí chính xác hay các phân tử đích của tế bào vi sinh vật mà tạo ra các phản ứng trao đổi chất. Các đích tác dụng đặc trưng cho từng nhóm kháng sinh, tuy nhiên trong nhiều trường hợp người ta vẫn chưa biết được chính xác hết. Có 6 mức tác dụng khác nhau đối với tế bào vi khuẩn hoặc nấm: Tác dụng LỜN THàNH TẾ BàO, TỎC DỤNG LỜN MàNG NGUYỜN SINH CHẤT, TỎC DỤNG LỜN QUỎ THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN TRỠNH TỔNG HỢP ADN, TỎC DỤNG LỜN QUỎ TRỠNH TỔNG HỢP PROTEIN, TỎC DỤNG LỜN SỰ TRAO đổi chất hơ hấp và cuối cùng là tác dụng lên sự trao đổi chất trung gian. 1.1.4.PHÕN LOẠI KHỎNG SINH PHân loại kháng sinh có thể theo nhiều cách, nhưng theo cấu trúc hóa học là khoa học nhất.Bảng 1 giới thiệu một số nhóm kháng sinh quan trọng. Bảng 1: Các chất kháng sinh được phân loại theo cấu trúc hố học PHÕN LOẠI NHÚM KHỎNG SINH KHỎNG SINH CỤ THỂ 1. Các kháng sinh có chứa đường trong phân tử AMINOGLYCOSID ORRTHSOMYCIN N-GLYCOSID C-GLYCOSID GLYCOLIPID STREPTOMYCIN, NEOMYCIN EVERNINOMYCIN STREPTOTHRICIN VANCOMYCIN MOENOMYCIN 2. KHỎNG SINH CHỨA VŨNG LACTON LỚN (MACROCYCLIC LACTON) KHỎNG SINH MACROLID KHỎNG SINH POLYEN ANSAMYCIN MACROTETROLID ERYTHROMYCIN CANDICIDIN, NISTATIN RIFAMICIN TETRANACTIN 3. QUINON Và CỎC KHỎNG SINH CỰNG HỌ ANTHRACYCLIN NAPHTHOQUINON BENZOQUINON CỎC TETRACYCLIN ADRIAMYCIN ACTINORHODIN MITOMYCIN TETRACYCLIN, TERAMYCIN 4. CỎC KHỎNG SINH AMINOACID Và PEPTID DẪN XUẤT AMINOACID KHỎNG SINH BETALACTAM KHỎNG SINH PEPTID CHROMOPEPTID DEPSIPEPTID CYCLOSERIN PENICILIN, CEPHALOSPORIN BACITRAXIN, POLYMYCIN ACTINOMYCIN VALINOMYCIN 5. KHỎNG SINH DỊ VŨNG CHỨA NITơ CỎC KHỎNG SINH NUCLEOSID POLYOXIN 6.KHỎNG SINH DỊ VŨNG CHỨA OXY CỎC KHỎNG SINH POLYETHER MONENSIN 7. Các Kháng sinh nhân thơm DẪN XUẤT benzen, các ête thơm CLORAMFENICOL NOVOBIOCIN THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 1.1.5 KHỎI NIỆM VỀ KHỎNG KHỎNG SINH Kháng kháng sinh là hiện tượng VSV mất đi tính nhậy cảm ban đầu của nó trong một thời gian vĩnh viễn với tác dụng của kháng sinh hay hố trị liệu. Kháng sinh chủ yếu mất tác dụng theo 3 cơ chế: Thay đổi vị trí đích, giảm tính thấm của thuốc hoặc do tác động của eNZYM LàM MẤT HOẠT TỚNH CỦA KHỎNG sinh. Tính kháng kháng sinh được di truyền cho các thế hệ tiếp theo. Bản chất di truyền tính kháng thuốc được khẳng định nhờ tác nhân gây đột biến và plasmid. CỎC QUỎ TRỠNH NàY lan truyền tính kháng thuốc ngồi nhiễm sắc thể xảy ra ở mức độ phân tử, tải nạP NHỜ bACTERIOPHAGE Và BIẾN NẠP VàO VI KHUẨN và tiếp hợp. 1.1.6 Sơ đồ mơ tả quy trỠNH SẢN XUẤT KHỎNG SINH Tinh chÕ Gièng trun đ trong phßng thÝ nghiƯm Sinh khèi Sinh khèi kh« DÞch chiÕt sinh khèi S¶n phÈm Tinh chÕ B×nh nh©n gièng C1, C2,C3 B×nh lªn men t¹o kh¸ng sinh Tinh chÕ DÞch läc DÞch chiÕt KS ®Ëm ®Ỉc S¶n phÈm ®· kiĨm nghiƯm nghiƯm S ¶n phÈm ®ãng gãi S¶n phÈm Tinh chÕ Läc DÞch sau lªn men THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Hình 1. Sơ đồ tổng qt sản xuất kháng sinh 1.1.7 ỨNG DỤNG CỦA KHỎNG SINH Kháng sinh được sử dụng trong y học từ 1940 (penixilin) sau đó một loạt các chất kháng sinh khác từ xạ khuẩn được phát minh ra và nhanh chóng được sử dụng để diều trị bệnh nhiễm trùng hiểm nghèo. BẢNG 2 :MỘT VàI KHỎNG SINH QUAN TRỌNG CÚ GIỎ TRỊ KINH TẾ CAO TỜN KHỎNG SINH VI SINH VẬT SẢN XUẤT KHỎNG SINH HOẠT PHỔ PENICILIN G PENICILLIUM CHRYSOGENUM KHỎNG KHUẨN STREPTOMYCIN S. GRISEUS KHỎNG lao TETRACYCLIN S. AUREOFACIENS KHỎNG KHUẨN CHLORAMFENICOL S. VENEZUELA KHỎNG KHUẨN OXYTETRACYCLIN STR. RIMOSUS KHỎNG KHUẨN CEPHALOSPORIN C CEPHALOSPORIUM ACREMONIUM KHỎNG KHUẨN ACTINOMYCIN D S. ANTIBIOTICUS Kháng ung thư BLEOMYCIN S. VERTICILLUM Kháng ung thư DAUNORUBICIN S. PEUCETIUS Kháng ung thư MITOMYCIN C STREPTOMYCES SP Kháng ung thư KANAMYCIN S. KANAMYCETICUS KHỎNG KHUẨN NISTATIN S. NOURSEI KHỎNG NẤM FUMAGILLIN ASPERGILLUS FUMIGATUS KHỎNG PROTOZOA GRISEOFULVIN PENICILLIUM GRISEOFULVUM KHỎNG NẤM NISIN STREPTOCOCCUS SP. BẢO QUẢN THỰC PHẨM NATAMYCIN STREPTOCOCCUS SP. BẢO QUẢN THỰC PHẨM RIFAMYCIN NOCARDIA MEDITERANEI. KHỎNG LAO THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN POLYMYXIN B BACILLUS POLYMYXA KHỎNG KHUẨN GENTAMYCIN MICROMONOSPORA PURPUREA. KHỎNG KHUẨN KHỎNG SINH CŨN được sử dụng trong thú y để điều trị các bệnh nhiễm trùng của động vật như viêm phổi ở trâu bŨ, TỤ HUYẾT TRỰNG Ở LỢN, V.V…TRONG CHăn ni kháng sinh được sử dụng làm chất bổ sung vào thức ăn nhằm kích thích tăng trọng. Rất nhiều chẩt kháng sinh được ứng dụng với mục đích này (các kháng sinh nhóm tetracyclin, monenzin,…). KHỎNG SINH CŨN được ứng dụng trong nơng nghiệp trước hết để tiêu diệt các nấm và vi khuẩn gây bệnh cho cây trồng như các bệnh khơ vằn, vàng lụi ở lúa (validamyin, blasticidin S, kasugamyxin, v.v…), bệnh thối cổ rễ ở các cây có củ,v.v…Kháng sinh cŨN KỚCH THỚCH NẨY MẦM CỦA HẠT. THường ngâm hạt trong dung dịch kháng sinh trước khi gieo vừa để kích thích nẩy mầm, vừa tiêu diệt mầm bệnh trong đất. KHỎNG SINH CŨN được sử dụng trong cơng nghiệp thực phẩm để bảo quản thực phẩm đóng hộp.Nếu dùng kháng sinh thực phẩm đóng hộp sẽ bảo quản được lâu hơn, khử trùng ở nhiệt độ thấp hơn nên chất lượng thực phẩm giữ được tốt hơn(ví dụ NIZIN). 1.2.ĐẠI CƯƠNG VỀ XẠ KHUẨN [1][9][11][14][15] 1.2.1 Đặc điểm của xạ khuẩn * Đặc điểm chung của xạ khuẩn: (Actinomycetes) là một nhóm vi khuẩn thật (Eubacteria) có cấu tạo sợi như nấm (nấm tia) nhưng lại có khích thước và cấu tạo tế bào gần giống vi khuẩn, chúng phân bố rộng rĨI TRONG TỰ NHIỜN: TRONG đất, nước và trong các chất hữu cơ. - Những đặc điểm đặc trưng của xạ khuẩn : + Kích thước của xạ khuẩn nhỏ bé tương tự như vi kích thước vi khuẩn + NHÕN CỦA XẠ KHUẨN là nhân khơng điển hình + MàNG TẾ BàO XẠ KHUẨN KHỤNG CHỨA XENLULO Và KITIN + SỰ PHÕN CHIA TẾ BàO CỦA XẠ KHUẨN THEO KIỂU CỦA VI KHUẨN THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN + XẠ KHUẨN KHỤNG CÚ GIỚI TỚNH - TUY VẬY XẠ KHUẨN LẠI CÚ HỠNH thái, cẤu TẠO SỢI, PHỎT TRIỂN BẰNG PHÕN NHỎNH THàNH NHỮNG SỢI NHỎ, DàI GỌI Là KHUẨN TI (HIPHA), MỖI KHUẨN TI DO MỘT TẾ BàO HỠNH THàNH, TẬP HỢP CỦA CỎC KHUẨN TI NàY GỌI Là HỆ KHUẨN TI. * Đặc điểm cấu tạo tế bào xạ khuẩn : - Đường kính khuẩn ti xạ khuẩn khoảng 0,2 - 3,0 µM - MàU SẮC CỦA KHUẨN TI khí sinh rất phong phú: màu trắng, vàng, đỏ, lục, tía, nâu, đen… - THàNH TẾ BàO DàY TỪ 7,5-10,0 NM, KHỤNG CÚ XENLULO Và KITIN - PHÕN CHIA TẾ BàO THEO KIỂU PHÕN BàO VỤ TỚNH. * PHÕN LOẠI: Actinomycetales Actinoplanaceae Actinomycetaceae Streptomycetaceae NOCARDIA STREPTOMYCES MICROMONOSPORA Hình 2: Sơ bộ phân loại xạ khuẩn 1.2.2.Đặc điểm hỠNH THỎI Và SINH LỚ CỦA XẠ KHUẨN chi Streptomyces * Đặc điểm hỠNH THỎI: - KHUẨN LẠC TẠO THàNH TỪNG CỤM, BỀ MẶT KHỤ RỎP, XỰ XỠ, DẠNG PHẤN , KHỤNG TRONG SUỐT, CÚ CỎC NẾP TOẢ RA THEO HỠNH PHÚNG XẠ. THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN - Khuẩn lạc có chân khá vững chắc, khó tách ra khỏi mơi trường ni CẤY. - Khẩn ty cơ chất tiết ra mơi trường một số loại sắc tố, có sắc tố hồ tan trong nước, có sắc tố chỉ hồ tan trong dung mơi hữu cơ. + Khuẩn ty cơ chất mọc trong mơi trường ni cấy, khơng phân cách trong suốt q trỠNH PHỎT TRIỂN - KHUẨN TY khí SInh: khuẩn ty cơ chất phát triển một thời gian dài trong khơng khí thành những khuẩn ty khí sinh và có đường kính từ 1,0-1,4 µM. + Chuỗi bào tử: được hỠNH THàNH TỪ KHUẨN TY KÝ SINH, CÚ NHIỀU HỠNH DẠNG KHỎC NHAU: thẳng, MÚC CÕU, XOẮN, UỐN CONG. + Bào tử trần: được hỠNH THàNH DO SỰ PHÕN CẮT CỦA SỢI BàO TỬ, Là Cơ quan sinh sản chủ yếu của xạ khuẩn. Bào tử trần có thể hỠNH CẦU, HỠNH ELIPSOID, HỠNH QUE, HỠNH TRỤ. CỎC BàO TỬ TẬP HỢP VỚI NHAU THàNH CHUỖI 3- 50 BàO TỬ HOẶC NHIỀU Hơn. Bề mặt của bào tử có thể có dạng trơn nhẵn (SM), XỰ XỠ (WA), CÚ GAI (SP), HOẶC CÚ TÚC (HA). * Đặc điểm sinh lý: - STREPTOMYCES là vi sinh vật dị dưỡng, có tính oxy hố cao. Để phát triển chúng phân giải các hydrat cacbon làm nguồn thức ăn cung cấp vật chất và nguồn năng lượng đồng thời thuỷ phân các hợp chất như gelatin, casein, tinh bột. Chúng cũng có thể khử nitrat thành nitrit. - STREPTOMYCES Là VI SINH VẬT CÚ THàNH TẾ BàO KIỂU CW1 CÚ CHỨA L-DAP (DIAMINOPIMELAT) Và GLYCIN. - STREPTOMYCES Là LI XẠ KHUẨN HỤ hấp hiếu khí. Nhiệt độ tối ưu của chúng thường là 25-30 0 C, một vài lồi có thể mọc ở nhiệt độ cao hơn, pH tối ưu thường từ 6,8-7,5. - Khả năng tạo sắc tố của STREPTOMYCES: SẮC TỐ TẠO THàNH TỪ STREPTOMYCES được chia thành bốn loại: sắc tố hồ tan, sắc tố khuẩn ty cơ chất, sắc tố melanoid, sắc tố khuẩn lạc. THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 1.2.3.PHÕN LOẠI STREPTOMYCES CHI STREPTOMYCES bao gồm một số lượng lớn các xạ khuẩn có khả năng sinh tổng hợp ra các kháng sinh được ứng dụng trong nhiều lĩnh vực khác nhau .Việc phân loại và xác định TỜN XẠ KHUẨN Là RẤT QUAN TRỌNG. CÚ RẤT NHIỀU KHOỎ PHÕN LOẠI STREPTOMYCES KHỎC NHAU: PHÕN LOẠI THEO KRASILLKOW, WAKSMAN, GAUZE, SHIRLING & GOTTLIEB, NGI RA CŨN CÚ THỂ PHÕN LOẠI THEO KIỂU GEN. HỘI NGHỊ "VI SINH VẬT THẾ GIỚI LẦN X" (được tổ chức tại Mexico vào năm 1970) chọn khố phân loại của E.B.Shirling & Gottlieb làm khố phân loại chính để phân loại chi STREPTOMYCES và đặt tên quốc tế là International STREPTOMYCES PROJECT (ISP) Khố phân loại dựa vào các đặc điểm: - Đặc điểm hỠNH THỎI HỌC CỦA XẠ KHUẨN : + Màu sắc của khuẩn ty cơ chất, khuẩn ty khí SINH, + HỠNH DẠNG CHUỖI BàO TỬ, + BỀ MẶT BàO TỬ. - Đặc điểm sinh lí học: + Khả năng tạo sắc tố hồ tan, + Khả năng tạo sắc tố melanoid, + Khả năng sử dụng các nguồn đường của xạ khuẩn. 1.2.4 Khả năng sINH TỔNG HỢP KHỎNG SINH CỦA STREPTOMYCES MỘT SỐ KHỎ LỚN KHỎNG SINH DO các LI STREPTOMYCES SINH TỔNG HỢp, rất đa dạng, có trong hầu hết các nhóm phân loại kháng sinh. 1.3 CẢI TẠO GIỐNG VI SINH VẬT [1][5][8][10][11][15] 1.3.1.Mục đích Trong thực tế khơng thể phân lập được từ tự nhiên một chủng VSV có khả năng tạo chất kháng sinh mong muốn với hàm lượng đủ để thỏa mãn u cầu của sản xuất cơng nghiệp. Các VSV phân lập từ cơ chất tự nhiên thường có hoạt tính thấp đồng thời trong q trình ni cấy, hoạt tính của chúng thường giảm dần. Vì vậy việc cải tạo giống VSV bằng nhiều biện pháp khác nhau nhằm THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN [...]... của Streptomyces 40.16 Nhận xét: Bào tử có dạng xoắn lò xo theo khóa phân loại ISP ký hiệu là (S) 3.2 KHẢ NĂNG TỔNG HỢP KHÁNG SINH CỦA CHỦNG STREPTOMYCES 40.16 TRÊN MƠI TRƯỜNG PHÂN LẬP (MT1) Ni cấy chủng Streptomyces 40.16 trên MT1 ở thạch đĩa, thử hoạt tính kháng sinh bằng phương pháp khối thạch Mỗi chủng vi khuẩn làm lọc 3 số liệu Kết quả trình bày ở bảng 4 Bảng 4: Hoạt lực kháng sinh của chủng Streptomyces. .. Inositol Manitol Fructoza Rhamnoza Saccaroza Raffinoza Streptomyces 40.16 Xám (Gy) 0 0 0 S (spiral) Nhẵn (Sm) + + + + + + + + Streptomyces nigellus Xám (Gy) 0 0 0 S (spiral) Nhẵn (Sm) + + + + + + + + Nhận xét: Như vậy có thể kết luận Streptomyces 40.16 có tên khoa học là Streptomyces nigellus THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Bề mặt bào tử của Streptomyces 40.16 Nhận xét: Bề mặt bào tử chụp dưới kính hiển vi... P.aeruginosa 3.3 KẾT QUẢ LỰA CHỌN MƠI TRƯỜNG NI CẤY CHỦNG STREPTOMYCES 40.16 Mục đích của việc chọn mơi trường ni cấy để đánh giá khả năng sinh tổng hợp kháng sinh mạnh nhất của chủng Streptomyces 40.16 và mơi trường thích hợp cho q trình lên men THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Các MT sử dụng làm thí nghiệm là 7 MT đã trình bày ở phần trước Xạ khuẩn Streptomyces 40.16 được cấy vào 7 MT trên, sau 6 ngày thì tiến... dạng chuỗi bào tử: dạng xoắn lò xo Đem đối chiếu với các đặc điểm của chủng xạ khuẩn Streptomyces 40.16 với các lồi xạ khuẩn trong khóa phân loại ISP, chúng tơi thấy đại đa số các đặc điểm này trùng với đặc điểm của Streptomyces nigellus Kết quả được trình bày ở bảng 3, hình 4 và 5 Bảng 3:So sánh đặc điểm của Streptomyces4 0.16 và Streptomyces nigellus Các đặc điểm phân loại Màu khuẩn ty khí sinh Sắc... trung bình vòng vơ khuẩn mẫu chứng Sau khi tiến hành đột biến, dựa vào kết quả thu được lựa chọn ra các biến chủng có % biến đổi hoạt tính (+) cao nhất để tiến hành nghiên cứu tiếp theo 2.2.5 Phương pháp lên men gián đoạn + Tạo giống cấp 1: Chủng giống Streptomyces 40.16 khi ni cấy trên thạch nghiêng (MT1) đủ 6 ngày tuổi được cấy vơ trùng sang bình nón 500ml chứa 100ml MT1dd bằng 10ml nước cất vơ trùng,... ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Nhận xét: Chủng Streptomyces 40.16 đều sinh tổng hợp kháng sinh trên 7 mơi trường nhưng MT1 cho kết quả tốt nhất do đó chúng tơi quyết định chọn MT1 vì MT1 cũng là mơi trường phân lập Vậy những nghiên cứư tiếp theo sẽ sử dụng MT1 làm mơi trường ni cấy xạ khuẩn Streptomyces 40.16 3.4 KẾT QUẢ CHỌN LỌC NGẪU NHIÊN Tiến hành sàng lọc ngẫu nhiên để chọn các dạng chủng có họat tính kháng sinh... của serine proteinaza thuỷ phân Keratin từ STREPTOMYCES ALBIDOFLAVUS THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Streptomyces albidoflavus là một chủng xạ khuẩn có khả năng sinh tổng hợp enzym serine proteinaza có tác dụng thuỷ phân keratin Streptomyces albidoflavus khi ni cấy ở mơi trường chứa thịt- da có thể sinh ít nhất 6 loại proteinaza ngoại bào Dịch lên men chủng Streptomyces albidoflavus được ly tâm, lọc sơ... ứng dụng cao đối với mơ hình bệnh tật hiện nay được sinh tổng hợp từ Streptomyces sp 1.7.4 Nghiên cứu hoạt chất có tác dụng ức chế enzym Lipoxygenase từ Streptomyces sp Nhóm các hoạt chất có tác dụng ức chế enzym Lipoxygenase gồm tetrapetalone B (2, C28H35NO9), C (3, C26H 34NO 8), D(4, C28H36NO10) từ Streptomyces sp USF – 4227, một chủng đồng thời cũng sinh tổng hợp tetrapetalone A HLO (Human Lipoxygenase)... QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 XÁC ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA STREPTOMYCES Xạ khuẩn Streptomyces 40.16 được ni cấy trên mơi trường ISP sau 21 ngày thì đem đi quan sát hình thái chuỗi bào tử và hình dạng bề mặt b tử dưới kính hiển vi điện tử có độ phóng đại từ 10.000-40.000 lần Dựa vào kết quả ni cấy trên mơi trường ISP chúng tơi đã xác định được đặc trưng của Streptomyces 40.16 - Màu của khuẩn ty kí sinh: xám (Gy) -... Máy ly tâm ROTOFIX 32, + Nồi hấp vơ trùng Hirayama Model HL 3030 2.2 CÁC PHƯƠNG PHÁP THỰC NGHIỆM 2.2.1 Phương pháp ni cấy và giữ giống Giống Streptomyces 40.16 cấy trên mơi trường thạch nghiêng MT1, ủ cho phát triển ở 300C, trong 7-10 ngày Giống Streptomyces 40.16 sau khi phát triển được cất giữ trong tủ lạnh 2-40C, định kỳ 3-6 tháng cấy truyền 2.2.2 Đánh giá hoạt tính kháng sinh bằng phương pháp khuếch