http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN CHÚ GI I CH VI T T T : axit Deoxyribonucleic B.cereus : Bacillus cereus ATCC 9946 B.pumilus : Bacillus pumilus ATCC 10441 B.subtilis : Bacillus subtilis ATCC 6633 D : Dmhc : Dung mơi h u c E.Coli : Escheriachia Coli ATCC 25922 OBO OK S CO M ADN ng kính vòng vơ khu n (mm) P.aeruginosa: Pseudomonas Nhi m s c th aeruginosa VM 201 P.mirabilis : Proteus mirabilis BV 108 S(Spiral) : Xo n lò xo s : đ l ch chu n hi u ch nh S.typhi : Salmonella typhi DT220 S.flexneri : Shigella flexneri DT 122 S.lutea : Sarcina lutea ATCC 9314 Sm(smooth) : Nh n S.aureus : Staphylococus aureus ATCC 1228 VSV : Vi sinh v t ISP : Ch MT : Mơi tr dd : Dung d ch VK : Vi khu n ng trình Streptomyces Qu c t KIL ng http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN TV N Hi n v i s phát tri n c a cơng ngh thơng tin cơng ngh c coi m t nh ng ngành cơng ngh hàng đ u c a th KIL OBO OKS CO M sinh h c c ng đ gi i Trong ph i k đ n cơng ngh sinh h c vi sinh v t s n xu t kháng sinh, vitamin ho t ch t ng d ng y h c c ng nh l nh v c khác ph c v đ i s ng ng T nh ng ph i có nh ng phát tri n v t b c ng pháp sinh t ng h p bán t ng h p cơng ngh vi sinh sinh t ng h p kháng sinh ti p t c kh ng đ nh vai trò c a Trong s h n 10.000 ch t kháng sinh đ c tìm có kho ng 2.000 ch t th c v t t o kho ng 8.000 ch t kháng sinh vi sinh v t t ng h p, x khu n t ng h p h n 60% Các cơng trình nghiên c u ch ng minh Streptomyces m t chi x khu n g m nhi u lồi có kh n ng sinh t ng h p kháng sinh đa d ng v c u trúc đ c m kháng khu n chi có kh n ng t ng h p ch t ch ng ung th AIDS c bi t m t s lồi u tr HIV- Tuy nhiên có m t v n đ gây lo âu l n đ i v i nhà nghiên c u, s xu t hi n c a vi sinh v t kháng kháng sinh ch t hóa tr li u khác Do nhà khoa h c chun gia y t khơng ng ng tìm ki m nh ng ph ng sách đ ch ng l i hi n t ng T i b mơn Vi sinh Sinh h c tr ng ih cD c Hà N i, chúng tơi ti n hành phân l p nghiên c u v ch ng Streptomyces 40.16 v i m c đích sau: + T ch ng Streptomyces đ c phân l p, ch n gi ng sinh t ng h p kháng sinh t t nh t b ng ch n l c ng u nhiên đ t bi n, + Nghiên c u mơi tr ng ni c y u ki n lên men t i u, + Nghiên c u đ c m, hình thái sinh lý nh m xác đ nh tên khoa h c c a ch ng Streptomyces 40.16 theo khóa phân lo i ISP, + Nghiên c u xây d ng quy trình chi t, tách s n ph m đ c tính c a kháng sinh x khu n Streptomyces 40.16 t ng h p lên http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN PH N T NG QUAN KIL OBO OKS CO M 1.1 VÀI N T V KHÁNG SINH [5][6][8][11] 1.1.1.L CH S N m 1928, nhà vi khu n h c ng i Anh Alexander Fleming nghiên c u t c u khu n ơng nh n th y xung quanh khu n l c m c xanh nhi m vào h p peptri ni t C U T O THàNH V NG V NàY đĨ đ KHU N HI N T k L đ c m c xanh Penicillium notatum m t ch ng t o penixilin ng c Fleming nghiên c u phân l p thu n t xác đ nh N m 1941 penixilin đ c nghiên c u s n xu t ph c v u tr cho th ng binh đ i chi n th gi i th II k ngun c a ch t kháng sinh đ c th a nh n Cho đ n ng i ta đĨ PH T HI N Và M T KHO NG H n 8000 ch t kháng sinh khác có ngu n g c t n m m c, x khu n vi khu n Thu t ng kháng sinh (antibiotic) đ c Waksman N.A g i t NG PH T MINH RA STREPTOMYCIN T M I tr 1944 KHI ng ni c y STREPTOMYCES GRISEUS 1.1.2 nh ngh a KH NG SINH Là NH NG H P CH T HO TI T RA CÚ T C D NG C CH S H C DO VI SINH V T PH T TRI N HAY TI U DI T M T C CH CH n l c m t nhóm vi sinh v t xác đ nh (vi khu n, n m, x khu n, protozoa, virus) hay c t bào ung th n ng đ th p 1.1.3.C ch tác d ng c a kháng sinh Các kháng sinh tác d ng c b n qua vi c c ch ph n ng t ng h p r t khác c a t bào vi sinh v t gây b nh Chúng liên k t vào v trí xác hay phân t đích c a t bào vi sinh v t mà t o ph n ng trao đ i ch t Các đích tác d ng đ c tr ng cho t ng nhóm kháng sinh, nhiên nhi u tr ng h p ng i ta v n ch a bi t đ c xác h t Có m c tác d ng khác đ i v i t bào vi khu n ho c n m: Tác d ng L N THàNH T BàO, T C D NG L N MàNG NGUY N SINH CH T, T C D NG L N QU http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN TR NH T NG H P ADN, T C D NG L N QU PROTEIN, T C D NG L N S TR NH T NG H P TRAO đ i ch t hơ h p cu i tác d ng lên s trao đ i ch t trung gian KIL OBO OKS CO M 1.1.4.PHÕN LO I KH NG SINH PHân lo i kháng sinh có th theo nhi u cách, nh ng theo c u trúc hóa h c khoa h c nh t.B ng gi i thi u m t s nhóm kháng sinh quan tr ng B ng 1: Các ch t kháng sinh đ PHÕN LO I c phân lo i theo c u trúc hố h c NHÚM KH NG SINH Các kháng sinh có ch a AMINOGLYCOSID đ ng phân t ORRTHSOMYCIN N-GLYCOSID C-GLYCOSID GLYCOLIPID KH NG SINH CH A V NG LACTON L N (MACROCYCLIC LACTON) KH NG SINH MACROLID KH NG SINH POLYEN ANSAMYCIN MACROTETROLID QUINON Và C C KH NG SINH C NG H ANTHRACYCLIN NAPHTHOQUINON BENZOQUINON C C TETRACYCLIN C C KH NG SINH AMINOACID Và PEPTID D N XU T AMINOACID KH NG SINH BETALACTAM KH NG SINH PEPTID CHROMOPEPTID DEPSIPEPTID KH NG SINH D V NG CH A NIT 6.KH NG SINH D V NG CH A OXY Các Kháng sinh nhân th m C C KH NG SINH NUCLEOSID C C KH NG SINH POLYETHER D N XU T benzen, ête th m KH NG SINH C TH STREPTOMYCIN, NEOMYCIN EVERNINOMYCIN STREPTOTHRICIN VANCOMYCIN MOENOMYCIN ERYTHROMYCIN CANDICIDIN, NISTATIN RIFAMICIN TETRANACTIN ADRIAMYCIN ACTINORHODIN MITOMYCIN TETRACYCLIN, TERAMYCIN CYCLOSERIN PENICILIN, CEPHALOSPORIN BACITRAXIN, POLYMYCIN ACTINOMYCIN VALINOMYCIN POLYOXIN MONENSIN CLORAMFENICOL NOVOBIOCIN http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 1.1.5 KH I NI M V KH NG KH NG SINH Kháng kháng sinh hi n t ng VSV m t tính nh y c m ban đ u c a m t th i gian v nh vi n v i tác d ng c a kháng sinh hay hố tr li u KIL OBO OKS CO M Kháng sinh ch y u m t tác d ng theo c ch : Thay đ i v trí đích, gi m tính th m c a thu c ho c tác đ ng c a eNZYM LàM M T HO T T NH C A KH NG sinh Tính kháng kháng sinh đ theo B n ch t di truy n tính kháng thu c đ bi n plasmid C C QU nhi m s c th x y c di truy n cho th h ti p c kh ng đ nh nh tác nhân gây đ t TR NH NàY lan truy n tính kháng thu c ngồi m c đ phân t , t i n P NH bACTERIOPHAGE Và BI N N P VàO VI KHU N ti p h p 1.1.6 S đ mơ t quy tr NH S N XU T KH NG SINH Gièng trun đ phßng thÝ nghiƯm B×nh nh©n gièng C1, C2,C3 B×nh lªn men t¹o kh¸ng sinh DÞch sau lªn men Läc Sinh khèi DÞch läc Sinh khèi kh« DÞch chiÕt KS ®Ëm ®Ỉc Tinh chÕ DÞch chiÕt sinh khèi S¶n phÈm Tinh chÕ Tinh chÕ S¶n phÈm Tinh chÕ S¶n phÈm ®· kiĨm nghiƯm S¶n nghiƯm phÈm ®ãng gãi http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Hình S đ t ng qt s n xu t kháng sinh NG D NG C A KH NG SINH 1.1.7 c s d ng y h c t 1940 (penixilin) sau m t lo t KIL OBO OKS CO M Kháng sinh đ ch t kháng sinh khác t x khu n đ c phát minh nhanh chóng đ c s d ng đ di u tr b nh nhi m trùng hi m nghèo B NG :M T VàI KH NG SINH QUAN TR NG CÚ GI T CAO T N KH NG SINH VI SINH V T S N XU T KH NG SINH TR KINH HO T PH PENICILLIUM CHRYSOGENUM KH NG KHU N STREPTOMYCIN S GRISEUS KH NG lao TETRACYCLIN S AUREOFACIENS KH NG KHU N PENICILIN G CHLORAMFENICOL S VENEZUELA KH NG KHU N OXYTETRACYCLIN STR RIMOSUS KH NG KHU N CEPHALOSPORIN C CEPHALOSPORIUM ACREMONIUM KH NG KHU N ACTINOMYCIN D S ANTIBIOTICUS Kháng ung th BLEOMYCIN S VERTICILLUM Kháng ung th DAUNORUBICIN S PEUCETIUS Kháng ung th MITOMYCIN C STREPTOMYCES SP Kháng ung th KANAMYCIN S KANAMYCETICUS KH NG KHU N S NOURSEI KH NG N M ASPERGILLUS FUMIGATUS KH NG PROTOZOA GRISEOFULVIN PENICILLIUM GRISEOFULVUM KH NG N M NISIN STREPTOCOCCUS SP B O QU N TH C PH M STREPTOCOCCUS SP B O QU N TH C PH M NOCARDIA MEDITERANEI KH NG LAO NISTATIN FUMAGILLIN NATAMYCIN RIFAMYCIN http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN POLYMYXIN B BACILLUS POLYMYXA KH NG KHU N GENTAMYCIN MICROMONOSPORA PURPUREA KH NG KHU N c s d ng thú y đ u tr b nh nhi m KIL OBO OKS CO M KH NG SINH C N đ trùng c a đ ng v t nh viêm ph i trâu b , T V.V…TRONG CH n ni kháng sinh đ HUY T TR NG L N, c s d ng làm ch t b sung vào th c n nh m kích thích t ng tr ng R t nhi u ch t kháng sinh đ c ng d ng v i m c đích (các kháng sinh nhóm tetracyclin, monenzin,…) KH NG SINH C N đ c ng d ng nơng nghi p tr c h t đ tiêu di t n m vi khu n gây b nh cho tr ng nh b nh khơ v n, vàng l i lúa (validamyin, blasticidin S, kasugamyxin, v.v…), b nh th i c r có c ,v.v…Kháng sinh c N K CH TH CH N Y M M C A H T TH ngâm h t dung d ch kháng sinh tr ng c gieo v a đ kích thích n y m m, v a tiêu di t m m b nh đ t KH NG SINH C N đ c s d ng cơng nghi p th c ph m đ b o qu n th c ph m đóng h p.N u dùng kháng sinh th c ph m đóng h p s b o qu n đ đ c lâu h n, kh trùng nhi t đ th p h n nên ch t l ng th c ph m gi c t t h n(ví d NIZIN) 1.2 IC 1.2.1 NG V X KHU N [1][9][11][14][15] c m c a x khu n * c m chung c a x khu n: (Actinomycetes) m t nhóm vi khu n th t (Eubacteria) có c u t o s i nh n m (n m tia) nh ng l i có khích th c u t o t bào g n gi ng vi khu n, chúng phân b NHI N: TRONG đ t, n c r ng rĨI TRONG T c ch t h u c - Nh ng đ c m đ c tr ng c a x khu n : + Kích th c c a x khu n nh bé t ng t nh vi kích th c vi khu n + NHÕN C A X KHU N nhân khơng n hình + MàNG T BàO X KHU N KH NG CH A XENLULO Và KITIN +S KHU N PHÕN CHIA T BàO C A X KHU N THEO KI U C A VI http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN + X KHU N KH NG CÚ GI I T NH - TUY V Y X KHU N L I CÚ H NH thái, c u T O S I, PH T TRI N B NG PHÕN NH NH THàNH NH NG S I NH , DàI G I Là BàO H NH THàNH, KIL OBO OKS CO M KHU N TI (HIPHA), M I KHU N TI DO M T T T P H P C A C C KHU N TI NàY G I Là H KHU N TI * - c m c u t o t bào x khu n : ng kính khu n ti x khu n kho ng 0,2 - 3,0 µ M - MàU S C C A KHU N TI khí sinh r t phong phú: màu tr ng, vàng, đ , l c, tía, nâu, đen… - THàNH T BàO DàY T KITIN 7,5-10,0 NM, KH NG CÚ XENLULO Và - PHÕN CHIA T BàO THEO KI U PHÕN BàO V T NH * PHÕN LO I: Actinomycetales Actinoplanaceae Actinomycetaceae NOCARDIA Streptomycetaceae STREPTOMYCES MICROMONOSPORA Hình 2: S b phân lo i x khu n 1.2.2 c m h NH TH I Và SINH L * C A X KHU N chi Streptomyces c m h NH TH I: - KHU N L C T O THàNH T NG C M, B M T KH X , D NG PH N , KH NG TRONG SU T, CÚ C C N P TO H NH PHÚNG X R P, X RA THEO http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN - Khu n l c có chân v ng ch c, khó tách kh i mơi tr ng ni C Y - Kh n ty c ch t ti t mơi tr c, có s c t ch hồ tan dung mơi h u c KIL OBO OKS CO M n ng m t s lo i s c t , có s c t hồ tan + Khu n ty c ch t m c mơi tr ng ni c y, khơng phân cách su t q tr NH PH T TRI N - KHU N TY khí SInh: khu n ty c ch t phát tri n m t th i gian dài khơng khí thành nh ng khu n ty khí sinh có đ + Chu i bào t : đ c h NH THàNH T ng kính t 1,0-1,4 µ M KHU N TY KÝ SINH, CÚ NHI U H NH D NG KH C NHAU: th ng, MÚC CÕU, XO N, U N CONG + Bào t tr n: đ c h NH THàNH DO S PHÕN C T C A S I BàO T , Là C quan sinh s n ch y u c a x khu n Bào t tr n có th h NH C U, H NH ELIPSOID, H NH QUE, H NH TR C C BàO T NHAU THàNH CHU I 3- 50 BàO T có th có d ng tr n nh n (SM), X (HA) * X T PH PV I HO C NHI U H n B m t c a bào t (WA), CÚ GAI (SP), HO C CÚ TÚC c m sinh lý: - STREPTOMYCES vi sinh v t d d ng, có tính oxy hố cao phát tri n chúng phân gi i hydrat cacbon làm ngu n th c n cung c p v t ch t ngu n n ng l ng đ ng th i thu phân h p ch t nh gelatin, casein, tinh b t Chúng c ng có th kh nitrat thành nitrit - STREPTOMYCES Là VI SINH V T CÚ THàNH T BàO KI U CW1 CÚ CH A L-DAP (DIAMINOPIMELAT) Và GLYCIN - STREPTOMYCES Là LI X u c a chúng th t i u th KHU N H h p hi u khí Nhi t đ t i ng 25-30 0C, m t vài lồi có th m c nhi t đ cao h n, pH ng t 6,8-7,5 - Kh n ng t o s c t c a STREPTOMYCES: S C T STREPTOMYCES đ T O THàNH T c chia thành b n lo i: s c t hồ tan, s c t khu n ty c ch t, s c t melanoid, s c t khu n l c http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 1.2.3.PHÕN LO I STREPTOMYCES CHI STREPTOMYCES bao g m m t s l n ng sinh t ng h p kháng sinh đ ng l n x khu n có kh c ng d ng nhi u l nh v c khác KHU N Là R T QUAN TR NG KIL OBO OKS CO M Vi c phân lo i xác đ nh T N X CÚ R T NHI U KHO PHÕN LO I STREPTOMYCES KH C NHAU: PHÕN LO I THEO KRASILLKOW, WAKSMAN, GAUZE, SHIRLING & GOTTLIEB, NGI RA C N CÚ TH PHÕN LO I THEO KI U GEN H I NGH "VI SINH V T TH GI I L N X" (đ c t ch c t i Mexico vào n m 1970) ch n khố phân lo i c a E.B.Shirling & Gottlieb làm khố phân lo i đ phân lo i chi STREPTOMYCES đ t tên qu c t International STREPTOMYCES PROJECT (ISP) Khố phân lo i d a vào đ c m: - c m h NH TH I H C C A X KHU N : + Màu s c c a khu n ty c ch t, khu n ty khí SINH, + H NH D NG CHU I BàO T , + B M T BàO T - c m sinh lí h c: + Kh n ng t o s c t hồ tan, + Kh n ng t o s c t melanoid, + Kh n ng s d ng ngu n đ ng c a x khu n 1.2.4 Kh n ng sINH T NG H P KH NG SINH C A STREPTOMYCES M T S KH L N KH NG SINH DO LI STREPTOMYCES SINH T NG H p, r t đa d ng, có h u h t nhóm phân lo i kháng sinh 1.3 C I T O GI NG VI SINH V T [1][5][8][10][11][15] 1.3.1.M c đích Trong th c t khơng th phân l p đ c t t nhiên m t ch ng VSV có kh n ng t o ch t kháng sinh mong mu n v i hàm l ng đ đ th a mãn u c u c a s n xu t cơng nghi p Các VSV phân l p t c ch t t nhiên th ng có ho t tính th p đ ng th i q trình ni c y, ho t tính c a chúng th ng gi m d n Vì v y vi c c i t o gi ng VSV b ng nhi u bi n pháp khác nh m http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Các MT s d ng làm thí nghi m MT trình bày khu n Streptomyces 40.16 đ c X c c y vào MT trên, sau ngày ti n hành th ho t tính kháng sinh b ng ph ng pháp kh i th ch Kích th c MT t t nh t K t qu đ c trình bày KIL OBO OKS CO M s cho th y đ ph n tr c vòng vơ khu n b ng hình B ng 5: Ho t tính kháng sinh c a ch ng Streptomyces 40.16 mơi tr ng khác VK S.aureus Tham s MT1 MT2 D (mm) 27,99 26,07 22,42 23,05 24,13 27,03 19,13 s B.pumilus D (mm) s B.subtilis D (mm) s B.creus D (mm) s S.lutea D (mm) s E.coli D (mm) s P.mirabilis D (mm) s S.flexneri D (mm) s S.typhi P.aeruginosa D (mm) 0,29 0,08 MT3 0,38 MT4 0,19 MT5 0,10 MT6 0,25 MT7 0,32 20,71 19,23 18,24 15,61 16,41 18,35 14,77 0,19 0,17 0,26 0,46 0,35 0,35 0,22 18,12 18,02 14,45 14,21 15,32 16,57 10,42 0,13 0,14 0,22 0,15 0,22 0,29 0,33 18,14 18,01 16,34 15,96 15,43 17,17 10,30 0,11 0,28 0,43 1,30 0,25 0,19 0,20 19,23 18,39 14,29 13,47 13,22 17,53 11,44 0,24 0,28 0,30 0,42 0,35 0,16 0,38 25,11 23,57 50,33 19,04 17,48 23,34 10,29 0,46 0,30 0,23 0,11 0,41 0,34 0,18 18,38 17,27 16,46 13,36 16,31 17,15 11,28 0,10 0,33 0,31 0,37 0,21 0,09 0,28 17,87 17,55 16,18 14,24 15,22 17,26 10,15 0,29 0,52 0,18 0,39 0,21 0,08 0,27 18,43 18,07 15,85 13,76 16,20 18,37 12,39 s 0,19 0,03 0,45 0,21 0,13 0,09 0,32 D (mm) 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 s 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Nh n xét: Ch ng Streptomyces 40.16 đ u sinh t ng h p kháng sinh mơi tr ng nh ng MT1 cho k t qu t t nh t chúng tơi quy t đ nh ch n MT1 MT1 c ng mơi tr ti p theo s ng ni c y x khu n Streptomyces 40.16 KIL OBO OKS CO M s d ng MT1 làm mơi tr ng phân l p V y nh ng nghiên c 3.4 K T QU CH N L C NG U NHIÊN Ti n hành sàng l c ng u nhiên đ ch n d ng ch ng có h at tính kháng sinh m nh nh t thu n t hóa ch ng gi ng đ ph c v cho nghiên c u ti p theo K t qu đ c trình bày b ng http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN B ng6: K t qu ch n l c ng u nhiên ch ng Streptomyces 40.16 K t qu ho t tính kháng sinh Ký ch ng Bacillus pumilus Proteus mirabiliss KIL OBO OKS CO M hi u D (mm) s D (mm) S 24,07 0,80 23,69 0,85 24,38 0,03 24,32 1,04 22,48 0,52 23,18 1,56 24,91 0,75 25,84 0,77 24,04 1,84 24,39 0,79 21,23 1,47 18,72 1,26 24,64 0,48 25,69 0,66 21,45 0,49 25,50 0,64 20,93 0,79 25,29 0,26 18,12 0,21 25,03 1,13 20,74 0,43 25,24 1,22 19,10 0,51 18,84 0,94 20,74 1,28 23,15 0,48 20,05 1,10 24,62 0,43 18,24 0,22 22,43 0,49 19,02 1,79 23,83 0,87 19,67 0,49 22,58 0,26 19,96 1,24 18,32 0,39 20,68 0,15 20,55 1,40 21,01 0,84 21,84 1,40 18,73 0,64 21,93 1,62 21,59 0,96 22,73 1,47 23 20,84 0,54 21,59 0,14 25 22,20 0,89 24,53 0,46 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 20,33 0,58 25,29 0,81 27 21,32 0,60 24,79 0,29 28 19,91 1,09 22,14 0,20 29 20,63 0,97 24,34 0,85 20,92 0,93 18,91 0,44 21,04 0,42 18,55 1,37 19,17 0,88 18,27 0,38 30 31 32 KIL OBO OKS CO M 26 Nh n xét: Sau x lý k t qu gi l i bi n ch ng t t nh t 1, 2, 4, đ làm c s cho b c c i t o gi ng ti p theo K t qu ch n l c ng u nhiên ch có ý ngh a ban đ u ch ng có ho t tính cao sau ch n l c ng u nhiên v n ch a ph i ch ng t t nh t cho q trình lên men Theo k t qu ch ng s có ho t tính t t nh t nên nghiên c u ti p theo s s d ng ch ng s 3.5.K T QU T BI N C I T O GI NG làm t ng ho t tính kháng sinh c a Streptomyces 40.16 chúng tơi ti n hành đ t bi n b ng tia UV đ i v i d ng ch ng s có b tham s : + Kho ng cách chi u: 60cm +Th i gian chi u: 5phút s ng sót sau đ t bi n: 0,26% K t qu đ c trình bày b ng c sóng 254nm v i http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN B ng 7: Ho t tính kháng sinh c a Streptomyces 40.16 sau đ t bi n b ng ánh sáng UV Ho t tính KS Bacillus pumilus Proteus mirabiliss KIL OBO OKS CO M Bi n ch ng Ho t tính KS D (mm) s % bi n đ i D (mm) s ho t tính % bi n đ i ho t tính 27,10 0,91 107,58 23,55 1,41 113,22 27,15 0,58 107,78 23,07 0,85 110,91 27,63 1,24 109,69 21,83 0,48 104,95 27,14 1,66 107,74 21,58 0,42 103,75 27,85 1,36 110,56 22,13 0,82 106,39 28,69 1,86 113,89 21,89 1,17 105,24 24,62 0,88 97,74 20,51 0,15 94,61 27,52 1,11 109,25 22,01 0,43 105,82 26,71 1,15 106,03 22,03 0,56 105,91 27,97 1,35 111,04 21,85 1,44 105,05 28,19 1,33 119,91 22,06 0,39 106,36 27,78 1,49 110,28 22,11 0,77 106,29 25,52 0,92 101,31 22,80 1,32 109,62 25,79 1,27 102,38 22,64 1,29 108,85 25,47 0,51 101,11 22,07 1,53 106,11 24,88 0,52 98,77 21,82 1,69 104,90 25,05 1,05 94,44 22,87 1,53 109,95 24,78 0,39 98,37 21,74 1,32 104,52 24,27 1,99 96,35 20,88 0,57 100,38 25,71 0,65 102,06 21,45 1,11 103,13 23,63 1,50 93,81 21,35 1,17 102,64 22 24,11 0,66 95,71 21,45 0,84 103,13 23 23,89 0,70 94,84 20,18 0,14 97,02 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 25,34 0,94 100,59 21,21 0,77 101,97 25 23,77 0,60 94,36 20,43 0,15 98,22 26 24,02 0,66 95,36 19,13 0,78 95,82 27 25,99 0,89 103,18 19,62 0,84 94,32 25,38 1,38 100,75 19,22 0,22 94,40 24,59 1,50 97,62 19,94 0,70 95,87 24,68 1,28 97,98 19,47 0,71 93,61 27,32 1,26 108,46 21,81 0,76 104,86 23,43 0,98 93,01 100,44 0,10 93,47 25,19 1,33 20,80 0,39 28 29 30 31 32 MC KIL OBO OKS CO M 24 Nh n xét: D a vào k t qu đ t bi n nh n th y ch ng sau đ t bi n có kh n ng t ng h p kháng sinh t ng đ i khác bi t so v i m u ch ng Sau đ t bi n k t h p v i sàng l c thu đ c bi n ch ng d 3.6 K T QU D CH L C THU Các bi n ch ng thu đ ng cao nh t 1*, 5*, 6*, 11*, 12* C T CH NG STREPTOMYCES 40.16 c sau đ t bi n đem l c thu đ c d ch l c đem th ho t tính vi khu n B.pumilus P.mirabilis K t qu đ c trình bày b ng hình B ng 8: K t qu th ho t tính dich l c ch ng Streptomyces 40.16 D ch l c Vi khu n L n1 L n2 L n3 Bacillus pumilus Proteus mirabilis D (mm) 29,54 24,54 s 0,40 0,50 D (mm) 28,37 22,35 s 1,38 0,56 D (mm) 24,09 20,21 s 1,27 0,21 Tham s http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 3.7.K T QU LÊN MEN SINH T NG H P KHÁNG SINH T bi n ch ng đ c ch n sau sàng l c ng u nhiên đ t bi n c i t o gi ng ti n hành lên men quy mơ phòng thí nghi m v i tham s sau: KIL OBO OKS CO M Th i gian nhân gi ng c p 1: 48h Th i gian lên men: 120h T c đ l c: 145- 150 vòng/ phút Nhi t đ lên men 300C, pH7,3 Sau q trình lên men, d ch l c lên men đ l c đem th ho t tinh b ng ph c l c lo i b sinh kh i thu d ch ng pháp gi ng th ch K t qu gi i thi u b ng B ng 9: K t qu lên men chìm bi n ch ng Ký hi u Ho t l c kháng sinh bi n ch ng 40.16 40.16.4 40.16.7 40.16.4.5 40.16.4.12 Bacillus pumilus Proteus mirabiliss D (mm) s D (mm) s 16,34 0,81 15,36 0,50 20,32 0,18 19,37 0,89 20,23 0,30 19,43 0,10 20,91 0,72 20,37 0,21 22,69 0,06 21,49 0,79 Nh n xét: K t qu lên men chìm cho th y bi n ch ng sau đ t bi n sinh t ng h p kháng sinh m nh h n ch ng sàng l c ng u nhiên g c Ch ng t hi u qu đ t bi n làm t ng kh n ng sinh t ng h p kháng sinh 3.8 NH H NG C A PH N B N V NG C A KHÁNG SINH Th đ b n v ng c a kháng sinh pH khác nhau, k t qu B ng 10: nh h b ng 10 ng c a pH đ n đ b n v ng c a kháng sinh VSV ki m đ nh Proteus mirabiliss Ho t l c kháng sinh PH Sau ngày Sau 10 ngày D (mm) s D (mm) S 21,73 0,26 19,97 0,99 http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 21,90 0,39 20,87 0,51 21,55 0,86 20,72 0,76 21,78 0,64 20,92 1,33 11 22,31 0,49 21,24 0,54 KIL OBO OKS CO M Nh n xét: Kháng sinh d ch l c t b n v ng ng đ i b n v ng pH trung tính, pH acid ki m Q trình chi t tách tinh ch n u ti n hành nhanh có th ti n hành m i pH Nh ng pH - đ c ch n làm pH b o qu n dung d ch kháng sinh, gi d ch lên men đ nghiên c u ti p 3.9 K T QU CHI T XU T KHÁNG SINH 3.9.1 Chi t b ng trao đ i ion D ch l c cho ch y qua c t trao đ i ion v i nh a cationid Amberlite IRC50 (d ng Na+), ph n h p ph b ng dung d ch HCl0,75M, t c đ ch y chung c a d ch qua c t 4,5ml/phút.Thu l y d ch phân đo n khác u ch nh v pH7, đem th ho t tính kháng sinh b ng ph ng pháp gi ng th ch v i VSV ki m đ nh P.mirabilis K t qu khơng tách đ c kháng sinh b ng s d ng c t trao đ i ion 3.9.2.Chi t b ng dung mơi h u c Ti n hành chi t kháng sinh l n b ng dung mơi khác pH khác nhau: 3, 7, 10 v i t l Vdm Vd ch l c = 1 ánh giá ho t tính kháng sinh c a pha dung mơi h u c (dmhc) b ng ph ng pháp khoanh gi y l c, pha d ch l c (N) b ng ph ng pháp gi ng th ch K t qu đ c trình bày b ng 11 hình B ng 11: K t qu chi t xu t kháng sinh b ng dung mơi khác pH khác K tqu Ho t l c kháng sinh Bacillus pumilus Tham s PH Cloroform N D (mm) s dmhc Butyl acetat N dmhc Diclomethan N dmhc n-Butanol N dmhc 25,71 20,57 22,19 20,06 26,36 23,54 8,26 22,89 1,02 1,24 0,72 7,25 1,47 0,20 1,97 0,73 http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN D (mm) s 10 D (mm) 3,55 24,11 26,73 24,15 16,59 27,34 1,56 0,81 6,14 0,58 0,19 1,39 1,29 24,36 22,72 0,00 25,12 26,72 24,94 0,00 24,66 0,68 0,00 1,45 0,00 1,32 0,56 0,54 0,50 KIL OBO OKS CO M s 25,52 21,34 0,49 Nh n xét: C hai dung mơi Butyl acetat n-Butanol chi t đ kháng sinh t d ch l c c h t pH10 Ch n n-Butanol đ nghiên c u ti p 3.10.K T QU S C KÝ L P M NG Sau chi t kháng sinh t d ch lên men sang n-Butanol ta ti n hành s c ký l p m ng đ xác đ nh thành ph n kháng sinh làm c s cho vi c tinh ch sau K t qu s c ký đ c gi i thi u b ng 12 hình Vi khu n ki m đ nh Proteus mirabilis B ng 12: K t qu s c ký l p m ng K t qu H dung mơi Rf UV VSV Thu c th H 0,87 0,87 - H 0,89 0,89 - H 0-0,81 0-0,81 - H dung mơi ch y s c ký: -H 1: Clorofoc: Metanol: amonihytroxyd(25%) (2:2:1) -H 2: n-Butanol: Etanol: dimetylformamid (3:1:1) -H 3: Butylaxetat: axeton: trietylamin (1:2:1) Khơng phát hi n đ c b ng thu c th hóa h c (-) Nh n xét: Kháng sinh phát hi n đ khơng phát hi n đ c n 96o) c b ng ánh sáng t ngo i nh ng c b ng m t s lo i thu c th hóa h c (nh Ninhydrin 1% -S b k t lu n d ch l c c a Streptomyces 40.16 có nh t thành ph n kháng sinh (m t thành ph n có ho t tính m nh m t thành ph n có ho t tính y u h n) http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 3.11 K T QU TH B N C A KHÁNG SINH D ch l c kháng sinh đem đun sơi 1000C, đun sơi 1000C 30 phút đun cách th y 30 phút L y d ch l c đem th ho t tính b ng ph b ng 13 KIL OBO OKS CO M th ch, k t qu ng pháp gi ng B ng 13: K t qu b n nhi t c a kháng sinh b n nhi t c a kháng sinh VSV ki m đ nh 100 0C Sơi 30 phút Cách th y D (mm) s D (mm) s D (mm) s 24,44 0,61 27,04 0,24 24,41 0,20 D (mm) s D (mm) s D (mm) s 20,78 0,35 22,98 0,31 20,49 0,42 B.pumilus P.mirabilis Nh n xét: Kháng sinh ch ng Streptomyces 40.16 t ng h p r t b n v i nhi t, có th thu n l i nghiên c u tinh ch kháng sinh v i quy mơ l n h n 3.12 K T Q A TH KH N NG CH NG N M: Tác d ng ch ng n m c a kháng sinh Streptomyces 40.16 t o đ kh o sát b ng ph ng pháp khuy ch tán s d ng kh i th ch đ i v i Candida albicans, m c đen 1, m c xanh Aspergillus niger Các k t qu đ thi u c c gi i b ng 14 B ng 14 K t qu th tác d ng ch ng n m c a h n h p kháng sinh Ch ng Tham s 40.16.4.1 40.16.4.5 40.16.4.6 40.16.4.11 40.16.4.12 N mm c Asp.niger M c đen M c xanh D (mm) 17,22 18,97 18,73 17,97 19,03 s 1,39 0,59 1,42 0,39 1,29 D (mm) 14,36 13,79 13,53 14,29 13,92 s 0,48 0,00 0,00 0,00 0,00 1,52 0,00 0,00 0,00 0,00 0,72 0,00 0,00 0,00 0,00 0,92 0,00 0,00 0,00 0,00 1,59 0,00 0,00 0,00 0,00 D (mm) s D (mm) Cadida s http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN PH N K T LU N VÀ XU T 4.1 K T LU N KIL OBO OKS CO M Qua q trình nghiên c u c b n chúng tơi hồn thành đ c m c tiêu c a khóa lu n t t nghi p rút m t s k t lu n sau: - Xác đ nh ch ng Streptomyces 40.16 có nhi u đ c m trùng v i ch ng Streptomyces nigellus Vì v y v c b n có th kh ng đ nh Streptomyces 40.16 có tên khoa h c Streptomyces nigellus - Streptomyces 40.16 x khu n đ c phân l p t c ch t Vi t Nam q trình ni c y t o kháng sinh ph r ng có tác d ng t t vi khu n Gram (+) Gram (-) - Ch ng đ c c i t o cho ho t tính kháng sinh cao, mơi tr c y b m t t t nh t MT1 mơi tr ng ni ng lên men t t nh t MT1dd - Qua q trình c i t o ch n gi ng thu đ c bi n ch ng có kh n ng sinh t ng h p kháng sinh t t h n ch ng g c Kháng sinh ch ng Streptomyces 40.16 sinh t ng h p có m t s đ c m: + Tan dung mơi h u c thơng th + Chi t đ c b ng ph ng ng pháp chi t s d ng dung mơi h u c + Khá b n v i nhi t, ch u đ c m i pH pH t i u pH – + Kháng sinh có thành ph n ho t đ ng 4.2 XU T - Ti p t c c i t o gi ng b ng ph thu t di truy n hi n đ i đ thu đ ng pháp truy n th ng k c ch ng có kh n ng sinh t ng h p kháng sinh ngày t t h n - Ti p t c nghiên c u ph ng pháp chi t tách nh m thu đ c s n ph m tinh t v i hi u su t cao - Nghiên c u kh n ng 0treptomyces 40.16 t o ng d ng th c t c a kháng sinh ch ng http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN - Lên men quy mơ l n sau chi t xu t tinh ch nh m thu đ m tl c ng kháng sinh đ đ ti n hành xác đ nh c u trúc, tính ch t lý hóa ti n KIL OBO OKS CO M hành th ti n lâm sàng đ i v i ch t kháng sinh n u u ki n cho phép TÀI LI U THAM KH O *Tài Li u Ti ng Vi t [1] B mơn Vi sinh (1999), Vi sinh h c, Tr ng ih cD c Hà N i [2] Ki u H u nh (1999), Giáo trình Vi sinh v t h c cơng nghi p, NXB khoa h c k thu t [3] B mơn Hố D c (1998), Hố D c II, Tr ng [4] B mơn Hố phân tích (1998), Hố phân tích II, Tr N i ih cD ng c Hà N i ih cD [5] T Minh Kng (2004), C s Cơng Ngh Sinh H c s n xu t D c Hà c ph m, NXB Y H c Hà N i [6] Nguy n Khang (2005), Kháng sinh h c ng d ng, NXB Y H c Hà N i [7] H Vi t Q (2002), Chi t tách, phân chia, xác đ nh ch t b ng dung mơi h u c , lý thuy t- th c hành- ng d ng, t p 1, NXB Khoa h c k thu t [8] Cao V n Thu (9/2000), Bài gi ng kháng sinh vitamin http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN [9] Lã Th Th o (2005), “Nghiên c u s lên men sinh t ng h p kháng sinh nh Streptomyces 23.245” Khóa lu n v n t t nghi p n m 2001-2005 N i 2003 KIL OBO OKS CO M [10] Khu t H u Thanh, C s di truy n phân t , NXB Khoa h c k thu t Hà [11] Nguy n Lân D ng, Nguy n ình Quy n, Ph m V n Ty (1997), Vi sinh v t h c, NXB Giáo d c *Tài Li u Ti ng Anh [12] Greg O.Buchanan, Rika Regentin, Misty Piagentini, Andreas Rascher, Robert McDaniel, Jorge L.Galazzo, and Peter J.Licori (2005), “ Production of 8Demethylgeldanamycin and 4,5-Epoxy-8- demethylgeldanamycin from a Recombinat Strain of Streptomyces hygroscopicus”,J Nat Prod, No 68, P 607610 [13] Toshikazu Komoda, Madoka Kishi, Naoki Abe, Yasumase Sugiyama, and Akira Hirota (2004), “Novel Lipoxygenase Inhibitors, Tetrapetalone B, C, and D from Streptomyces sp.”, Biosi Biotechnol Biochem, No 68 [14] E B Shirling, D Gottlieb (1996), Method for characterozation of Streptomyces species, Int, J, Syst, Bacteriol, Vol 16 [15] Selman A Waksman (1959), The Actinomyces, Vol I, London 2002 [16].PHILIPPE BRESSOLLIER, FRANCOIS LETOURMAN, MARIA URDACI AND BERNARD VERNEUIL (1999), “PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF KERATINOLYTIC SERINE PROTEINASE FROM STREPTOMYCES ALBIDOFLAVUS” APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY, VOL 65, NO 6, P 2570- 2576 [17] JUN KONO, TAKUYA KAWAHATA, TORU OTAKE, MOTOKO MORIMOTO, HARUYO MORI, NOBORU UEBA, MAKI NISHIO, AKIO KINUMAKI, SABURO KOMAISUBARA AND KEISUKE KAWASHIMA (1996), "BOROMYCIN, AN ANTI-HIV ANTIBIOTIC", BIOSCI BIOTECH BIOCHEM., VOL 60, NO3, P 1036-1037 http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN KIL OBO OKS CO M M CL C L I C M N Error! Bookmark not defined PH N T NG QUAN 1.1 VàI N T V KH NG SINH [5][6][8][11] 1.2 ic ng v x khu n [1][9][11][14][15] 1.3 C I T O GI NG VI SINH V T [1][5][8][10][11][15] 10 1.4 Dinh d ng mơi tr ng ni c y [5] 13 1.5 Lên men sinh t ng h p kháng sinh [2][5][8] 13 1.6 Tách chi t tinh ch [4][7] 17 1.7 M t s nghiên c u m i s n xu t kháng sinh [12][13][16][17] 19 PH N 22 NGUN LI U VÀ PH NG PHÁP 22 2.1 Ngun li u 22 2.2 Các ph ng pháp th c nghi m 26 PH N 33 K T QU VÀ TH O LU N 33 3.1 Xác đ nh tên khoa h c c a Streptomyces 33 3.2 Kh n ng t ng h p kháng sinh c a ch ng Streptomyces 40.16 mơi tr ng phân l p (MT1) 34 3.3 K t qu l a ch n mơi tr ng ni c y ch ng Streptomyces 40.16 34 3.4 K t qu ch n l c ng u nhiên 36 3.6 K t qu d ch l c thu đ c t ch ng Streptomyces 40.16 40 3.7 K t qu lên men sinh t ng h p kháng sinh 41 3.8 nh h ng c a pH đ n đ b n v ng c a kháng sinh 41 3.9 K t qu chi t xu t kháng sinh 42 3.10 K t qu s c ký l p m ng 43 3.11 K t qu th đ b n c a kháng sinh 44 3.12 K t q a th kh n ng ch ng n m: 44 http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN PH N 45 K T LU N VÀ XU T 45 4.1 K t lu n 45 xu t 45 KIL OBO OKS CO M 4.2 [...]... ng xo n lò xo em đ i chi u v i các đ c đi m c a ch ng x khu n Streptomyces 40.16 v i các lồi x khu n trong khóa phân lo i ISP, chúng tơi th y đ i đa s các đ c đi m này trùng v i đ c đi m c a Streptomyces nigellus K t qu đ c trình bày b ng 3, hình 4 và 5 B ng 3:So sánh đ c đi m c a Streptomyces4 0.16 và Streptomyces nigellus Các đ c đi m phân lo i Màu khu n ty khí sinh S c t melanoid Màu khu n ty c ch... (sm) KIL OBO OKS CO M 15.000 l n th y rõ b m t bào t có d ng tr n nh n theo khóa phân lo i ký hi u Chu i bào t c a Streptomyces 40.16 Nh n xét: Bào t có d ng xo n lò xo theo khóa phân lo i ISP ký hi u là (S) 3.2 KH N NG T NG H P KHÁNG SINH C A CH NG STREPTOMYCES 40.16 TRÊN MƠI TR NG PHÂN L P (MT1) Ni c y ch ng Streptomyces 40.16 trên MT1 kháng sinh b ng ph K t qu trình bày th ch đ a, th ho t tính ng pháp... k t lu n kháng ng pháp phân lo i Streptomyces 40.16 theo ISP * Chu n b gi ng: Gi ng Streptomyces 40.16 đ c ni c y trong ng th ch nghiêng đ 6-10 ngày tu i * Xác đ nh đ c đi m hình thái, màu s c khu n ty khí sinh, khu n ty c ch t và đánh giá kh n ng t o thành s c t hòa tan: Các mơi tr ng ISP1, ISP2, ISP3, ISP4, ISP5 đ c h p ti t trùng 118 0C/30 phút, dùng pipet vơ trùng hút 20ml vào đ a vơ trùng, m i... Manitol Fructoza Rhamnoza Saccaroza Raffinoza Streptomyces 40.16 Xám (Gy) 0 0 0 S (spiral) Nh n (Sm) + + + + + + + + Streptomyces nigellus Xám (Gy) 0 0 0 S (spiral) Nh n (Sm) + + + + + + + + Nh n xét: Nh v y có th k t lu n Streptomyces 40.16 có tên khoa h c là Streptomyces nigellus http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN B m t bào t c a Streptomyces 40.16 Nh n xét: B m t bào t ch p d i kính hi... TRỰC TUYẾN PH N 3 K T QU VÀ TH O LU N 3.1 XÁC NH TÊN KHOA H C C A STREPTOMYCES c ni c y trên mơi tr KIL OBO OKS CO M X khu n Streptomyces 40.16 đ ng ISP sau 21 ngày thì đem đi quan sát hình thái chu i bào t và hình d ng b m t b t d i kính hi n vi đi n t có đ phóng đ i t 10.000-40.000 l n D a vào k t qu ni c y trên mơi tr ng ISP chúng tơi đã xác đ nh đ c đ c tr ng c a Streptomyces 40.16 - Màu c a khu n... 3.3 K T QU L A CH N MƠI TR NG NI C Y CH NG STREPTOMYCES 40.16 M c đích c a vi c ch n mơi tr ng ni c y đ đánh giá kh n ng sinh t ng h p kháng sinh m nh nh t c a ch ng Streptomyces 40.16 và mơi tr thích h p cho q trình lên men ng http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Các MT s d ng làm thí nghi m là 7 MT đã trình bày khu n Streptomyces 40.16 đ c X c c y vào 7 MT trên, sau 6 ngày thì ti n hành... ni c y và gi gi ng Gi ng Streptomyces 40.16 c y trên mơi tr phát tri n đ ng th ch nghiêng MT1, cho 300C, trong 7-10 ngày Gi ng Streptomyces 40.16 sau khi phát tri n c c t gi trong t l nh 2-40C, đ nh k 3-6 tháng c y truy n 2.2.2 ánh giá ho t tính kháng sinh b ng ph Ngun t c: M u th đ ng pháp khu ch tán c đ t trên l p th ch dinh d ng đã c y vi sinh v t ki m đ nh Kháng sinh t m u th khu ch tán vào mơi... cho l n l t vào bình g n theo t l Vdung mơi: Vd ch l c = 1:5, l c 1 phút, đ phân l p trong 1h Sau đó tách riêng dung mơi và d ch l c + Ph ng pháp chi t nhi u l n: D ch l c, dung mơi đ c cho l n l t vào bình g n theo t l Vdung mơi: Vd ch l c = 1:15, l c 1 phút, đ phân l p trong 1h Sau đó tách riêng dung mơi và d ch l c Làm ti p 2 l n v i t l dung mơi trên Ho t tính kháng sinh c a dung mơi và d ch l c... trên s phân chia khác nhau c a các ch t khác nhau vào hai pha ln ti p xúc và khơng hòa l n vào nhau: m t pha t nh và m t pha đ ng Các ph ng pháp s c ký: - S c ký l p m ng (SKLM): Ngun t c: Là ph ng pháp tách các ch t d a trên kh n ng b h p ph (là ch y u) khác nhau c a chúng trên b m t m t ch t r n (ch t h p ph ), đây pha t nh là ch t r n, pha đ ng là dung mơi Ch n dung mơi và ch t h p ph tùy thu c vào... lên men đã lo i b sinh kh i sau q trình chi t xu t và tinh ch s thu đ c 24,5mg TMC-25 1.7.2 Tinh ch và đ c tr ng c a serine proteinaza thu phân Keratin t STREPTOMYCES ALBIDOFLAVUS http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Streptomyces albidoflavus là m t ch ng x khu n có kh n ng sinh t ng h p enzym serine proteinaza có tác d ng thu phân keratin Streptomyces albidoflavus khi ni c y mơi tr ng ch ...http:/ /kilobooks. com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN TV N Hi n v i s phát tri n c a cơng ngh thơng tin cơng... trình chi t, tách s n ph m đ c tính c a kháng sinh x khu n Streptomyces 40.16 t ng h p lên http:/ /kilobooks. com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN PH N T NG QUAN KIL OBO OKS CO M 1.1 VÀI N T V KHÁNG SINH... ho c n m: Tác d ng L N THàNH T BàO, T C D NG L N MàNG NGUY N SINH CH T, T C D NG L N QU http:/ /kilobooks. com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN TR NH T NG H P ADN, T C D NG L N QU PROTEIN, T C D NG