Viêm gan virus là một nhóm bệnh truyền nhiễm rất phổ biến và nguy hiểm
Trang 1MỤC LỤC
Đặt vấn đề: 6
Chương 1: Tổng quan tài liệu 8
1.1 Bệnh viêm gan virus B: 8
1.1.1 Hình thái và xếp loại của virus viêm gan B: 8
1.1.2 Cấu trúc phân tử của virus viêm gan B: 8
1.1.2.1.Cấu trúc và genom của virus viêm gan B: 8
1.1.2.2 Các protein cấu trúc của virus viêm gan B: 9
1.1.3 Các kháng thể trong huyết thành sau khi nhiễm HBV: 11
1.1.4 Chẩn đoán phòng thí nghiệm viêm gan virus B: 12
1.2 Tình hình viêm gan virus B trên thế giới và Việt Nam: 13
1.2.1 Tình hình viêm gan virus B trên thế giới: 13
1.2.2 Tình hình viêm gan virus B tại Việt Nam 14
Chương 2: Đối tượng và phương pháp nghiên cứu 16
2.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu 16
2.2 Đối tượng nghiên cứu 16
2.3 Phương pháp nghiên cứu 16
2.3.1 Thiết kế nghiên cứu: 16
2.3.2 Chọn mẫu và cỡ mẫu nghiên cứu: 16
2.3.3 Quy trình tiến hành nghiên cứu: 16
2.4 Phương pháp sử lý số liệu: 17
2.5 Phương pháp hạn chế sai số: 17
2.6 Các biến số trong nghiên cứu: 18
2.7 Đạo đức trong nghiên cứu: 19
Chương 3: Kết quả nghiên cứu 20
3.1 Tỷ lệ nhiễm virus viêm gan B ở các đối tượng đến xét nghiệm tại Trung tâm y tế dự phòng Hải phòng trong năm 2008 20
Bảng 3.1 Một số thông tin về nhóm đối tượng nghiên cứu: 20
Trang 2Bảng 3.2 Tỷ lệ HBsAg (+) trên tổng số đối tượng: 21
Bảng 3.3 Tỷ lệ nhiễm HBsAg theo nhóm tuổi: 22
Bảng 3.4 Tỷ lệ nhiễm HBsAg theo giới: 23
Bảng 3.5 Tỷ lệ nhiễm HBsAg theo địa dư: 23
Bảng 3.6 Tỷ lệ nhiễm HBsAg theo trình độ văn hoá: 24
Bảng 3.7 Tỷ lệ nhiễm HBsAg theo nghề nghiệp: 24
3.2 Nhận thức về phòng chống lây nhiễm virus viêm gan B và xác định mối liên quan với tình hình nhiễm virus viêm gan B của các đối tượng đến xét nghiệm tại Trung tâm y tế dự phòng Hải phòng trong năm 2008 25
Bảng 3.8 Kiến thức của các đối tượng về các dấu hiệu của bệnh viêm gan virus B: 25
3.8.1 Theo tuổi: 25
3.8.2.Theo giới tính: 26
3.8.3 Theo địa dư: 27
3.8.4 Theo trình độ học vấn:………28
3.8.5 Theo nghề nghiệp: 29
Bảng 3.9 Kiến thức của các đối tượng về đường lây truyền của bệnh viêm gan virus B: 30
3.9.1 Theo tuổi: 30
3.9.2.Theo giới tính: 30
3.9.3 Theo địa dư: 31
3.9.4 Theo trình độ học vấn: 32
3.9 Theo nghề nghiệp: 33
Bảng 3.10 Kiến thức của các đối tượng về biến chứng của bệnh viêm gan virus B: 33
3.10.1 Theo tuổi: 33
3.10.2.Theo giới tính: 34
3.10.3 Theo địa dư: 35
3.10.4 Theo trình độ học vấn: 35
Trang 33.10.5.Theo nghề nghiệp: 36
Bảng 3.11 Thực hành của các đối tượng về xử trí vết thương để phòng bệnh viêm gan B: 37
3.11.1 Theo tuổi: 37
3.11.2.Theo giới tính: 38
3.11.3 Theo địa dư: 38
3.11.4 Theo trình độ học vấn: 39
3.11.5 Theo nghề nghiệp: 40
Chương 4: Bàn luận kết quả 41
1 Tình hình nhiễm virus viêm gan B ở các đối tượng đến xét nghiệm tại Trung tâm y tế dự phòng Hải phòng trong năm 2008 41
2 Nhận thức, thực hành về phòng chống lây nhiễm virus viêm gan B của những đối tượng trên 41
KIẾN NGHỊ 41
Trang 4Đặt vấn đề
Viêm gan virus là một nhóm bệnh truyền nhiễm rất phổ biến và nguy
hiểm Bệnh thường gặp ở các nước đang phát triển, trong đó có Việt Nam Theo
thống kê của Tổ chức Y tế thế giới, có khoảng 2 tỷ người nhiễm virus viêm gan
B (Hepatitis B virus – HBV) Trong đó 350 triệu người mang virus mạn tính
Những người mang virus viêm gan B mạn tính là nguồn lây nhiễm quan trọng
trong cộng đồng và có nguy cơ cao mắc các bệnh gan nguy hiểm liên quan đến
nhiễm virus viêm gan B Hàng năm ước tính có khoảng 2 triệu người mang virus
viêm gan B mạn tính chết vì xơ gan và ung thư gan trên thế giới Có đến 90% trẻ
sơ sinh, 25 – 50% trẻ từ 1 – 5 tuổi và chỉ 5 – 10% người lớn bị nhiễm virus viêm
gan B trở thành người mang virus mạn tính
Việt Nam nằm trong khu vực có nguy cơ cao về nhiễm HBV với là một
trong những nước có tỷ lệ bệnh lưu hành cao nhất thế giới, tỷ lệ người mang
HBV trung bình là 15 – 25% Tỷ lệ người mang HBsAg thay đổi tuỳ theo từng
đối tượng và khu vực Đối tượng khám tuyển đi lao động nước ngoài là 24,74%,
nhân viên y tế 17,3 – 26,3%%, sinh viên Đại học Y Hà Nội 25% thống kê số
liệu về tỷ lệ nhiễm HBV theo khu vực cho thấy tại Thành phố Hồ Chí Minh là
11,3%; Khánh Hoà: 15,48%, Vĩnh Phú: 23,2%, Hà Bắc: 25,5%, Lâm đồng:
16,74% ải phòng là một thành phố cảng liên thông với thủ đô Hà Nội, có nền
kinh tế phát triển Nơi đây tập trung nhiều nhóm đối tượng khác nhau từ dân bản
địa đến dân nhập cư Các nghiên cứu tại Hải Phòng cho thấy: tỷ lệ nhiễm
HBsAg ở phụ nữ có thai là 12,59% ,ngư dân đánh bắt cá xa bờ của Hải Phòng là
19,16%
Tuy vậy, chưa có nhiều những nghiên cứu đầy đủ về tình hình nhiễm
HBV của các đối tượng khác tại Hải Phòng Để giúp cho Thành phố nói chung
và sở Y tế thành phố nói riêng có những biện pháp tích cực và hiệu quả hơn
trong công tác phòng chống lây nhiễm virus viêm gan B, đề tài “Nghiên cứu
thực trạng nhiễm virus viêm gan B và nhận thức của các đối tượng đến xét
Trang 5nghiệm tại Trung tâm y tế dự phòng Hải phòng năm 2008”được tiến hành với
2 mục tiêu:
1 Xác định tỷ lệ nhiễm virus viêm gan B ở các đối tượng trong
nhân dân thành phố Hải Phòng đến xét nghiệm tại Trung tâm y tế dự phòng
Hải Phòng trong năm 2008
2 Đánh giá nhận thức, thực hành về phòng chống lây nhiễm virus
viêm gan B của những đối tượng trên
Từ đó đề xuất một số biện pháp can thiệp nhằm góp phần làm giảm tỷ lệ
nhiễm virus viêm gan B của nhân dân thành phố trong những năm tới
Trang 6
Chương 1
TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1 Virus viêm gan B:
1.1.1 Vài nét về lịch sử bệnh virus viêm gan B
Viờm gan virus là một bệnh cũ đó được mô tả lần đầu tiên từ thế kỷ thứ
5.BC
Năm 1947, MacCallum và Bauer phân biệt viêm gan A là “Viêm gan
truyền nhiễm” và viêm gan B là “Viêm gan huyết thanh” do hai bệnh khác nhau
về phương diện dịch tễ học Năm 1973: WHO phân biệt các tác nhân gây viêm
gan khác nhau và sau phát minh của Blumberg và công sự về kháng nguyên
Australia, năm 1965 virus HBV được xác định và định rừ đặc điểm Kháng
nguyên Australia ngày nay được gọi tên là kháng nguyên bề mặt viêm gan B
(HBsAg) và liên quan với nhiễm HBV cấp và món
Những thử nghiệm huyết thanh học có độ nhạy và đặc hiệu cao đó sẵn
sàng cho HBV và đưa đến những hiểu biết sâu sắc hơn về lịch sử tự nhiên của
bệnh Các nghiên cứu về sinh bệnh học và dịch tễ học đó đưa đến sự phát triển
một cách an toàn và hiệu quả của Vaccin phũng chống nhiễm HBV cũng như
các thuốc chống virus trong điều trị viêm gan B món và cỏc nghiờn cứu này
cũng đó chứng minh rằng khụng phải tất cả cỏc viờm gan do truyền mỏu đều
liên quan đến viêm gan B mà cũn do tỏc nhõn khỏc (HCV) chịu trỏch nhiệm
Việt Nam nằm trong vùng có nguy cơ rất cao về nhiễm HBV với tỷ lệ
người mang HBsAg trong cộng đồng từ 15-26%
Virus viêm gan B là DNA virus, sợi đôi, có vỏ thuộc họ Hepadnaviridae
Hạt virus hoàn chỉnh (Dane particle) cú lớp vỏ ngoài bao gồm HBsAg bao
quanh lỏi Nucleocapsid Bờn trong lừi của HBV chứa sợi đôi DNA, protein lừi
(HBcAg), khỏng nguyờn HBe (HBeAg) và Polymerase phụ thuộc DNA
(DNA-dependent polymerase) HBcAg (AntiHBc) và HBeAg (Anti-HBe) được tạo
Trang 7thành trong đáp ứng đối với nhiễm trùng HBV và được sử dụng trong chẩn đoán
nhiễm HBV
1.1.2 Cấu trúc phân tử:
1.1.2.1 Cấu trúc và genom của virus viêm gan B:
* Cấu trúc: có 3 thành phần:
- Lõi: là ADN hình tròn và có một phần sợi kép Một sợi dài (L) gần
như khép kín có 3.200 nucleotit và một phần sợi ngắn (S) thay đổi từ 50 – 100%
độ dài so với sợi dài Trọng lượng phân tử gần 2.106.000 dalton ADN của HBV
chịu trách nhiệm đối với một số phân týp kháng nguyên đã được phân lập và xác
định trình tự axit amin
- Capsit: Có cấu trúc đối xứng hình hộp, bao quanh lõi, thành phần chính
là protein chứa 2 kháng nguyên quan trọng là HBcAg và HBeAg, có các enzym
ADN-polymerase, proteinkinase
- Vỏ ngoài: chứa kháng nguyên bề mặt HBsAg, dày 7nm
* Genom: có 4 gen được biết rõ:
- Gen S (kể cả tiền S1 và tiền S2): mã hoá protein chính là HBsAg
- Gen C: mã hoá protein chính của lõi
- Gen P: mã hoá cho protein lớn giàu histidin (Đây là một polymerase có
hoạt tính enzim phiên mã ngược)
- Gen X: có lẽ mã hoá protein xuất hiện trong tế bào gan bị nhiễm HBV
và liên quan tới cơ chế gây ung thư
1.1.2.2 Các protein cấu trúc của virus viêm gan B:
* Kháng nguyên bề mặt virus viêm gan B (HBsAg):
HBsAg là kháng nguyên bề mặt của virus viêm gan B Nó là dấu ấn miễn dịch
quan trọng trong các nghiên cứu dịch tễ học để xác định đường lây truyền, yếu
Trang 8tố nguy cơ và phân vùng HBV Các thử nghiệm phát hiện HBsAg có vai trò
quan trọng trong chẩn đoán viêm gan B cấp và mạn tính
Kháng nguyên HbsAg là thành phần của vỏ bọc lipoprotein của HBV, ở
dạng hạt có đường kính 22nm và dạng ống rộng 22nm, dài 200nm Trình tự các
axit amin của ADN được xác định ngay sau khi genom của HBV được tạo dòng
Bốn khung đọc mở (ORF – Open reading frame) mã hoá các phần protein lớn
hơn 50 axit amin đã được xác định
Để giải thích đầy đủ các chức năng của protein S, M, L người ta sử dụng
các danh từ là protein bề mặt của virus viêm gan B loại nhỏ (SHBs), trung bình
(MHBs) và lớn (LHBs) Đoạn tiền S1 có mặt một phần trong protein LHBs,
đoạn tiền S2 có mặt một phần tiếp theo trong protein LHBs và hình thành đầu
kết thúc amino của protein MHBs Đoạn S có mặt trong cả 3 loại protein
Ngoài 3 loại protein HBs trên, các hạt virion còn chứa protein lõi P22,
genom ADN của nó, một ADN polymerase mà đó cũng là một ARN – ase phiên
mã ngược, và một protein kết thúc nối với đầu 5’ của sợi ADN được mã hoá cho
protein Ngoài ra còn có một protein – kinase có mặt cùng với capsit sẽ
phosphoryl hoá protein lõi
HBsAg mang quyết định kháng nguyên a là quyết định kháng nguyên
quan trọng nhất về phương diện sinh miễn dịch Quyết định kháng nguyên a
được tạo thành bởi các aa 124 đến 127, nó giữ vai trò sinh kháng thể anti – HBs
và có tính đặc hiệu nhóm cho HBsAg Quyết định nguyên a cùng với một số
quyết định nguyên phân týp khác nhau như d, y và w, r tạo nên các phân týp chủ
yếu của HBsAg như adw, ayw, adr, ayr Các phân týp này phân bố khác nhau
theo vùng địa lý Ơ Việt Nam theo các nghiên cứu mới đây thì phân týp ayw
chiếm tỷ lệ 60%, ayr chiếm 17% và adw chiếm 8% Điều tra này đã giúp các
nhà nghiên cứu sản xuất vacxin theo phân týp lưu hành ở Việt Nam
* Kháng nguyên lõi của virus viêm gan B (HBcAg: Hepatitis B core
antigen):
Trang 9Đây là kháng nguyên chủ yếu của nucleocapsit trong virus viêm gan B
HBcAg hiếm khi xuất hiện trong huyết thanh mà chủ yếu xuất hiện trong nhân
tế bào gan Sự có mặt của HBcAg với hàm lượng cao chứng tỏ có hoạt động sao
chép của HBV trong viêm gan cấp Việc sinh tổng hợp protein lõi dài 185 axit
amin được bắt đầu với một codon AUG có hiệu suất cao ở đầu 5’ của ARN
thông tin
Genom HBV – ADN của virion khi xâm nhập vào nhân tế bào bị nhiễm
sẽ biến đổi thành một vòng khép kín đồng hoá trị có thể do một enzym sửa chữa
ADN của tế bào; ADN này là khuôn cho mARN tiền genom và sẽ được phiên
dịch cho protein lõi và protein polymerase Với hạt lõi, quá trình phiên mã
ngược của ARN tiền genom sản sinh ra ADN sợi (-), nối với protein primase
* Kháng nguyên e của virus viêm gan B (HBeAg):
Đây là kháng nguyên không thuộc hệ HBsAg có mối liên quan với nhiễm
HBV mạn tính HBeAg là kháng nguyên hoà tan, có mặt trong huyết tương ở
các hình thái vật lý khác nhau và xuất hiện trong quá trình phân tách
nucleocapsit của HBV invitro HBeAg được xem như là dấu ấn biểu thị sự nhân
lên của HBV và liên quan đến tình trạng nhiễm và mức độ nặng của bệnh
1.1.3 Các kháng thể trong huyết thành sau khi nhiễm HBV:
* Kháng thể kháng kháng nguyên bề mặt (anti – HBs): xuất hiện sau 1 –
3 tháng kể từ khi HBV xâm nhập cơ thể, lúc đó HBsAg thường đã hết trong
huyết thanh, anti- HBs giảm dần theo thời gian Điều quan trọng có ứng dụng
bậc nhất là anti- HBs có vai trò bảo vệ cơ thể chống tái nhiễm HBV Vì vậy
nguyên lý làm vacxin viêm gan B là lấy HBsAg làm kháng nguyên Một miễn
dịch có hiệu lực được biểu thị bằng sự có mặt của anti-HBs
* Kháng thể kháng kháng nguyên lõi (anti – HBc): anti-HBc được sản
sinh trong thời gian đầu của nhiễm trùng cấp tính và tiếp tục tồn tại trong nhiều
năm, có thể là suốt đời Khi HBsAg đã hết, nếu anti-HBc có hàm lượng cao thì
Trang 10chứng tỏ HBV đang phát triển, đang hoạt động và đang ở dạng viêm gan B cấp
Anti-HBc không có giá trị bảo vệ cơ thể chống tái nhiễm HBV, không có vai trò
điều hoà miễn dịch cũng như miễn dịch bệnh sinh Nó có tác dụng như một chỉ
điểm chứng tỏ sự có mặt của HBcAg Thử nghiệm tìm anti-HBc có thể có giá trị
trong các chương trình nghiên cứu ở trẻ lớn và người lớn, vì nó là thử nghiệm
đơn giản nhất để phát hiện người nhiễm HBV mà không được tiêm chủng
Tiêm chủng bằng vacxin viêm gan không tạo ra đáp ứng anti-HBc Vì vậy
sự có mặt của anti-HBc ở người đã được tiêm chủng có thể là do họ đã bị nhiễm
HBV hoạt động trước đó
* Kháng thể kháng kháng nguyên HBeAg (anti – HBe): Sự xuât hiện
của anti-HBe cho thấy đây là dấu hiệu của sự lui bệnh và hàm lượng HBsAg (+)
sẽ giảm dần xuống Những người HBsAg (+) mà có anti-HBe (+) thì ít có khả
năng lây truyền hơn những người có đồng thời HBsAg (+) và HBeAg (+)
1.1.4 Phương pháp chẩn đoán HBV:
Để chẩn đoán viêm gan B cấp và mạn tính, người ta đã áp dụng các thử
nghiệm phát hiện HBsAg và các kỹ thuật miễn dịch học để phát hiện kháng
nguyên và kháng thể của virus Bên cạnh đó kỹ thuật kính hiển vi điện tử có thể
được sử dụng để xác định HBV trong máu hoặc trong sinh thiết các tổ chức gan
* Phương pháp trực tiếp: là phát hiện hạt virus (hạt Dane) hoặc các thành
phần cấu trúc của virus Cụ thể là phát hiện: hạt virus, ADN của virus kháng
nguyên HBsAg, kháng nguyên HBeAg, kháng nguyên HBHBcAg trong tế bào
gan (kết hợp với làm sinh thiết gan)
* Phương pháp gián tiếp (phương pháp huyết thanh học): là phát hiện
kháng thể, cụ thể là anti – HBs, anti – HBc, anti – HBe
Các kỹ thuật được dùng để phát hiện gồm:
- Ngưng kết hồng cầu thụ động
Trang 11- Miễn dịch gắn enzym (ELISA – Enzyme linked immunosorbentassay)
- Miễn dịch huỳnh quang
- Miễn dịch phóng xạ
- Miễn dịch phóng xạ
- Miễn dịch điện di đối lưu, khuyếch tán
- Sinh học phân tử (kỹ thuật PCR phát hiện ADN)
- Miễn dịch hiển vi điện tử
- Kính hiển vi điện tử (chụp virus)
Ngoài các thử nghiệm trên, trong chẩn đoán lâm sàng còn sử dụng các
biện pháp kỹ thuật bổ sung thăm dò hình thái trong viêm gan cấp và mạn như
soi ổ bụng, sinh thiết gan Các xét nghiệm sinh hoá thăm dò chức năng gan
cũng rất giá trị trong chẩn đoán viêm gan
1.2 Tình hình bệnh viêm gan virus B trên thế giới và Việt Nam:
1.2.1 Trên thế giới
Nhiễm virus viêm gan B là một vấn đề có tính chất toàn cầu bởi HBV
xuất hiện ngay cả ở các quần thể dân chúng sống cách biệt và sống trên các hòn
đảo Tỷ lệ nhiễm virus viêm gan B và cách thức lây truyền có sự khác biệt rõ rệt
giữa các vùng khác nhau trên thế giới Trên cơ sở điều tra huyết thanh học các
dấu ấn miễn dịch của virus viêm gan B đặc biệt là HBsAg, mức độ nhiễm virus
viêm gan B được chia thành 3 mức độ khác nhau: cao, trung bình, thấp
* Vùng dịch lưu hành cao (chính là tỷ lệ % số người nhiễm virut viêm
gan B nằm trong vùng có tỷ lệ lưu hành viêm gan B cao)
Gần 45% dân số thế giới nằm trong vùng này bao gồm hầu hết các nước
thuộc khu vực Châu Á (trừ Nhật Bản, Ấn độ), Châu Phi, hầu hết các nước Trung
Trang 12Đông, vùng lưu vực sông Amazon (Nam Mỹ), hầu hết các đảo thuộc khu vực
Thái Bình Dương, và một số dân tộc sống ở Bắc cực như Eskimo, Maoris
Ở những khu vực này nhiễm HBV xảy ra từ rất sớm, ngay từ khi mới sinh
và trẻ nhỏ Phương thức lây truyền chính là từ mẹ sang con (nhiễm trong thời kỳ
chu sinh hay còn gọi là lây truyền dọc) hoặc lây truyền ngang trong lứa tuổi nhỏ
Vì nhiễm trùng ở trẻ nhỏ thường là không triệu chứng, do đó tỷ lệ người
lành mang trùng và mắc các bệnh liên quan đến nhiễm virus viêm gan B như
viêm gan mạn tính, ung thư gan, xơ gan trong cộng đồng này rất cao
Ngoài ra,tiêm chích ma tuý, quan hệ tình dục bừa bãi cũng đóng vai trò
quan trọng làm tăng tỷ lệ nhiễm HBV trong cộng đồng
* Vùng lưu hành dịch trung bình (chính là tỷ lệ % số người nhiễm virut
viêm gan B nằm trong vùng có tỷ lệ lưu hành viêm gan B thấp hơn các nước
trong khu vực)
43% dân số thế giới nằm trong vùng này bao gồm Ấn Độ, một phần
Trung Đông, Tây á, Nhật Bản, Nga, Đông Âu, hầu hết các nước Nam và Trung
Mỹ Phương thức lây truyền tại đây rất đa dạng, xảy ra ở tất cả các lứa tuổi từ trẻ
sơ sinh đến người lớn Trường hợp nhiễm cấp virus viêm gan B phần lớn xảy ra
ở lứa tuổi thanh niên và người lớn Đối tượng nhiễm virus viêm gan B trong thời
kỳ chu sinh sẽ trở thành người mang virus mạn tính có nguy cơ lây lan cao trong
cộng đồng
* Vùng lưu hành thấp:
Vùng nay bao gồm các nước như Mỹ, Canada, Tây Âu, úc, NewZealnd,
Bắc Mỹ, Nam Mỹ Phương thức lây truyền chính là lây truyền ngang ở lứa tuổi
trưởng thành.đối tượng có nguy cơ cao thường gặp là những người tiêm chích
ma tuý, đồng tính luyến ái, nhân viên y tế, người được truyền máu hoặc lây
nhiễm trong gia đình người nhiễm virus viêm gan B
1.2.2 Tại Việt Nam:
Trang 13Việt Nam nằm trong vùng có nguy cơ rất cao về nhiễm virus viêm gan B
Tỷ lệ người nhiễm trong cộng đồng dân cư dao động trong khoảng 10-26% tuỳ
theo từng đối tượng (một trong những tỷ lệ nhiễm cao nhất trên thế giới) Kết
quả nghiên cứu cho thấy tỷ lệ người mang HbsAg ở thành phố HCM là 10%, Hà
Nội là 17%, người khám tuyển lao động nước ngoài là 24,74% Điều tra năm
1994 trên bộ đội tuổi từ 20- 22 thì có đến 21,9% mang HbsAg (+) Theo kết quả
điều tra nhóm thuyền viên lao động trên biển ở Hải Phòng mang HbsAg chiếm
tỷ lệ là 15,67% Hàng năm có khoảng 20.000 người mắc viêm gan B và tỷ lệ tử
vong từ 0,7- 0,8%
* Bảng 1: Tỷ lệ HBsAg (+) trong nhóm người khoẻ mạnh ở một số địa
phương
Khám tuyển đi lao động nước ngoài(Hà Nội) 18- 40 24,74%
Người khoẻ mạnh( Các tỉnh ĐB ven biển) 6- 55 12,8- 19,7%
Trang 14Chương 2
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1 Địa điểm và thời gian
- Địa điểm nghiên cứu: Phòng xét nghiệm Trung tâm y tế dự phòng Hải
Phòng
- Thời gian nghiên cứu: Từ tháng 6 đến tháng 12 năm 2008
2.2 Đối tượng: Tất cả những đối tượng tuổi từ 15 trở lên cư trú trên địa
bàn thành phố Hải phòng đến xét nghiệm virus viêm gan B tại Trung tâm Y tế
dự phòng Hải Phòng
2.3 Phương pháp nghiên cứu:
2.3.1 Thiết kế thí nghiệm: Áp dụng phương pháp nghiên cứu mô tả cắt
ngang
2.3.2 Quy trình tiến hành:
* Tổ chức tập huấn cho các điều tra viên và xét nghiệm viên về phương
pháp điều tra phỏng vấn đối tượng đến xét nghiệm, về kỹ thuật xét nghiệm
HBsAg
* Phát hiện HBsAg trong huyết thanh bệnh nhân bằng phương pháp sắc
ký miễn dịch
* Những trường hợp có kết quả nghi ngờ sẽ chuyển sang làm tiếp bằng
phương pháp Elisa, phát hiện HBsAg trong huyết thanh bệnh nhân bằng kháng
thể đơn dòng kháng HBsAg
2.3.2.1 Kỹ thuật ELISA
Trang 15- Mẫu xét nghiệm được ủ với kháng thể đã gắn sẵn ở giếng Sau khi rửa
các giếng để loại bỏ các chất không gắn, cho thêm cộng hợp kháng thể – enzym
và lúc đó sẽ xảy ra phản ứng cộng hợp kháng thể – enzym này với phức hợp
kháng thể – kháng nguyên đã hình thành trong lần ủ thứ nhất
- Sau khi phản ứng kết thúc và rửa lần 2, tiến hành ủ tiếp với dung dịch cơ
bản của enzym và chất hiện màu Nếu màu xuất hiện thì mẫu xét nghiệm là
dương tính với HBsAg Nếu không thấy xuất hiện màu là âm tính với HBsAg
2.3.2.2 Phương pháp thu thập số liệu: Số liệu được thu thập từ hai
nguồn:
- Phỏng vấn trực tiếp người đến xét nghiệm theo mẫu phiếu phỏng vấn
được xây dựng từ trước ( kèm theo trong phần phụ lục) Bộ câu hỏi này được
chuẩn bị và xây dựng dựa vào mục tiêu nghiên cứu và có sự tham gia đóng góp
của các chuyên gia về miễn dịch, truyền nhiễm và dịch tễ học
- Sau khi phỏng vấn lấy máu làm XN HBsAg
2.4 Phương pháp xử lý số liệu:
* Số liệu sau khi thu thập sẽ được xử lý bằng phương pháp thống kê
* Các số liệu được trình bày dưới dạng tỷ lệ %, được biểu diễn bằng bảng
số liệu
2.5 Phương pháp hạn chế sai số:
* Chọn cán bộ tham gia nghiên cứu là những cán bộ thành thạo về chuyên
môn và được tập huấn kỹ về cách thu thập các thông tin chính xác và chuẩn
mực
* Tuyệt đối tuân thủ các nguyên tắc, trình tự và kỹ thuật xét nghiệm
máu
Trang 16* Trước khi điều tra phỏng vấn, các điều tra viên phải giải thích rõ mục
đích và ý nghĩa của cuộc điều tra cho các đối tượng hiểu và cùng cộng tác trong
nghiên cứu
2.6 Các biến số trong nghiên cứu:
- So sánh tỷ lệ HBsAg (+) giữa 2 giới
- So sánh tỷ lệ HBsAg (+) theo địa
dư, so sánh giữa nội và ngoại thành
- So sánh tỷ lệ HBsAg (+) giữa các nhóm trình độ văn hoá
- So sánh tỷ lệ HBsAg (+) giữa các nhóm nghề nghiệp
Kết quả xét nghiệm
Phiếu phỏng vấn
Trang 17Mục tiêu Các biến số Phương pháp
dư, trình độ học vấn, nghề nghiệp
- Tỷ lệ đối tượng biết về đường lây truyền bệnh viêm gan virus B, liên quan với các nhóm tuổi, giới, địa
dư, trình độ học vấn, nghề nghiệp
- Tỷ lệ đối tượng biết về những biến chứng của bệnh viêm gan virus B, liên quan với các nhóm tuổi, giới, địa dư, trình độ học vấn, nghề nghiệp
- Tỷ lệ đối tượng biết về cách phòng chống bệnh viêm gan virus B, liên quan với các nhóm tuổi, giới, địa
dư, trình độ học vấn, nghề nghiệp
Phiếu phỏng vấn
2.7 Đạo đức trong nghiên cứu
- Các đối tượng tự nguyện tham gia nghiên cứu trên cơ sở hiểu rõ mục
tiêu nghiên cứu
- Các thông tin về XN và phỏng vấn của các đối tượng đều được giữ kín
- Kết quả nghiên cứu đảm bảo tính khách quan và trung thực
-Tư vấn cho các đối tượng về các biện pháp phòng bệnh viêm gan virus