Góp phần xây dựng tiêu chuẩn định lượng paracetamol

TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI GÓP PHẦN XÂY DỤNG TIÊU CHUẨN ĐỊNH LƯỢNG PARACETAMOL (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP D ược SỸ ĐẠI HỌC KHOÁ 19 - 2000 ) Người thực hiện: sv Hoàng Tùng Người hướng dẫn: TS Thái Duy Thìn GVC Nguyễn Đình Hiển Nơi thực hiện: Bộ môn Hoá Dược Thời gian thực hiện: 01/03/2000-20/05/2000 Hà Nội - 2000 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI GÓP PHẦN XÂY DựNG TIÊU CHưẨN ĐỊNH LƯỢNG PARACETAMOL (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP Dược SỸ ĐẠI HỌC KHOÁ 1995-2000) Hà Nội - 2000 LỜI CẢM ƠN Trong thời gian thực hhoá luận tốt nghiệp Được sỹ Đại học, nhận giúp đỡ tận tình thầy hướng dần, cán môn lỉoá Được Trước tiên, xin chân thành cảm ơn hướng dẫn tận tình thầy giáo-TS Thái Buy Thìn thảy Rguyễn Đình ĩịiển mà có tài liệu kỹ cần thiết thực nghiệm cấc thầy cung cấp, hướng dẫn Đổng thời thầy cô hỹ thuật viên khác môn giúp đỡ nhiều thời gian íôi thực đề tài ĨỈỈ1Ờnhững giúp đỡ mà hoàn thành đề tài thờigian ngắn Xin cảm ơn giúp đỡ cửa thư viện trường Đại học Được Ẹá nội, thư viện Khoa học kỹ thuật Trung ương cung cấp tài liệu có liên quan; phòng thí nghiệm trung tâm trường Đại học Được lịà nội giúp xử lý số mẫu mà điều máy móc ởphòng thí nghiệm môn Tịoù Được chưa cho phép ữỉộí lần nữa, xin chân thành cảm ơn tất giúp đỡ quý giá thầy cô người MỤC LỤC ■ ■ Trang Phần 1: Đặt vấn đề Phần 2: Tổng quan 2.1 Paracetamol 2.2 Điểm qua số phương pháp định lượng Paracetamol 2.3 Các phương pháp khảo sát khoá luận 2.3.1 Phương pháp đo Nitrit 2.3.2 Phương pháp quang phổ hấp thụ tử ngoại Phần 3: Thực nghiệm kết .12 3.1 Nguyên vật liệu phương pháp thực nghiệm 12 3.2 Kết thực nghiệm nhận xét 12 3.2.1 Định lượng Paracetamol phương pháp đo Nitrit 12 3.2.2 Định lượng Paracetamol phương pháp quangphổ hấp thụ tử ngoại 22 3.2.3 So sánh hai phương pháp định lượng Paracetamol 31 3.2.4 ứng dụng định lượng Paracetamol chế phẩm có thị trường .34 Phần 4: Kết luận đề xuất 36 Phần 5: Tài liệu tham khảo 37 PHẦN ĐẶT VÂN ĐỂ Paracetamol thuốc thuộc nhóm hạ nhiệt giảm đau sử dụng rộng rãi Có tới 281 bào chế phẩm với tên biệt dược khác phép lưu hành Việt Nam có hoạt chất Paracetamol [4] - Chỉ có Paracetamol như: Apo-Acetaminophen, Bé Nóng, Daíangal, Panadol, Paracetamol, Efferalgan, Oralgan, Tylenol - Có thành phần khác kết hợp Paracetamol Alaxan, Ankitamol, Zandol, Efferalgan-Codein, Decolgen, Pamin [13] r—-~Việc kiểm nghiệm Paracetamol nguyên liệu khâu quan trọng việc sản xuất thuốc có chất lượng tốt Paracetamol Dược điển khác nêu chuyên luận [14] [18] [20] [22] [23] [24] [26] Dược điển Việt Nam chưa có chuyên luận [1] [2] Định lượng Paracetamol từ trước tới thường theo Tiêu chuẩn ngành [9] Tiêu chuẩn sở [8] Vì cần phải có phương pháp định lượng Paracetamol thức Dược điển Việt Nam lần xuất tới để thống tiêu chuẩn nước Mục tiêu đề tài khảo sát phần định lượng nhằm đưa phương pháp định lượng Paracetamol thích hợp với Việt Nam để chuyển tới hội đồng Dược điển tham khảo, xem xét việc đưa tiêu chuẩn vào Dược điển Việt Nam xuất thời gian tới PHẦN TỔNG QUAN 2.1 PARACETAMOL [7] [15] * Công thức phân tử: C8H9N 02 * Công thức cấu tạo HO- HO-C6H4-NH-COCH3 * Tinh chất: - Nhiệt độ nóng chảy từ 168-172° - Bột tinh thể trắng, không mùi, vị đắng, khó tan nước, tan nước sôi (1/20), tan alcol (1/10), tan kiềm tạo muối phenolat - Phổ u v : Trong dung môi nước-acid có cực đại hấp thụ 245 nm {E (1%, lcm) = 668} Trong dung môi nước-kiềm có cực đại hấp thụ 257 nm ỊE (1%, lcm) = 715} - Cho phản ứng -OH phenol tự do: với Fe3+ cho màu lam tím - Dễ bị thuỷ phân chức amid không bền * Tạp chất cần ý p.aminophenol, thường xác định giói hạn tạp chất phép đo Nitrit * Công dụng: Ngoài tác dụng giảm đau, hạ nhiệt, có tác dụng làm(fhử giãn cơ; không gây kích ứng dầy, dung nạp tốt 2.2 ĐIỂM QUA MỘT số PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG PARACETAMOL 2 Đ ịn h lượng b ằ n g N itrit [9] [26] Thuỷ phân Paracetamol để giải phóng nhóm amin thơm bậc I, định lượng nhóm amin thơm dung dịch Natri nitrit môi trường HCL 2.2.2 Phương pháp quang phổ hấp thụ tử ngoại [22] [24] Nguyên tắc: Dựa vào khả hấp thụ tử ngoại phân tử Paracetamol môi trường acid có cực đại hấp thụ 245 nm; môi trường kiềm có cực đại hấp thụ 257 nm 2.2.3 Sắc ký lỏng cao áp (HPLC) với Detector u v [6] [19] [21] Nguyên tắc định lượng; Dựa vào việc đo chiều cao hay diện tích pic 2.2.4 Định lượng Nitơ phương pháp Kendal (Kieldahl) [3] [23] Phương pháp dựa phân huỷ phân tử hữu có chứa Nitơ đun với H2S đặc với có mặt Kali hay Natri sulfat Khi Nitơ chuyển thành NH3, kết hợp với H2S thành (NH4)2S Thêm NaOH vào hỗn hợp phản ứng cất kéo NH3 giải phóng nước vào dung dịch chuẩn H9S 0,1N thừa, chuẩn độ acid dư dung dịch NaOH 0,1N Để phân huỷ dễ dàng chất có chứa Nitơ phương pháp Kendal, ta thường dùng xúc tác như: CuO, CuS04, Selen, Selen oxyd, Pt, Pd, Selen clorid Thêm Na2S hay K2S làm tăng độ sôi H2S làm phản ứng oxy hoánhanh 2.2.5 Định lượng theo phương pháp chuẩn độ gốc amin tự dung dịch Ceri amonỉ sulíat (Phương pháp đo Ceri) [3] [14] [18] [20] Trong dung dịch acid có mặt chất khử, Ceri IV kết hợp điện tử chuyển thành Ceri III Trong phương pháp chuẩn độ đo Ceri, người ta sử dụng íeroin để phát điểm kết thúc Feroin phức chất sắt 1,10 diazaphenantren (o-Phenantrolin) Sắt phức hợp sắt II sắt III Phức chất sắt II có màu đỏ, phức chất sắt III có màu xanh Khi đến điểm tương đương, lượng Ceri IV thừa oxy hoá phức chất sắt II thành sắt III thị chuyển màu [(C12H8N2)3Fe]2+ (M àu đỏ) [(C12H8N2)3Fe]3+ - (Màu xanh) 2.2.6 Định lượng phương pháp đo màu [5] [12] Thuỷ phân Paracetamol môi trường acid, sau cho tác dụng với thuốc thử Natri nitroprusiat kiềm Ở vùng pH acid, dung dịch không tạo màu Trong môi trường dung dịch có pH 11,3- 11,4 cho phản ứng tạo màu bền vững cho mật độ quang cao Màu cho mật độ quang cao từ , :aT phút thứ 10, kể từ cho thuốc thử^bền vững vùng pH khác, màu dung dịch có mật độ quang thấp Trong phương pháp trên, chọn hai phương pháp d ễ p h ổ cập Việt Nam đ ể kh ảo sát: phương pháp quang p h ổ hấp thụ tử ngoại; phương pháp đo Nỉtrỉt 2.3 CÁC PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT TRONG KHOÁ LUẬN 2.3.1 Phương pháp đo Nitrit [6] [9] [17] [26] 2.3.1.1 Nguyên tắc Thủy phân Paracetamol dung dịch HC1 10% Định lượng amin thơm bậc I vừa giải phóng dung dịch Natri nitrit 0,1M môi trường HC1 HO-C6H4-NH-COCH3 + H20 -> HO-C6H4-NH2 + CH3COOH (1) HO-C6H4-NH2 + NaN02 + 2HC1 -> [H0-C6H4-N+=N]C1- + NaCl + 2H20 (2) * Điều kiện đ ể thực phản ứng (2): (+) Nhiệt độ: - Ở nhiệt độ cao >18°c xảy phản ứng sau: HN 02 —> H20 + NO (3) làm lượng chất chuẩn NaNOo / ' - Còn nhiệt độ thấp phản ứng xảy chậm, khó xác định điểm kết thúc phản ứng - Nhiệt độ thích hợp 10-15°c (+) Xúc tác: Thường dùng Halogenid Br' c r (Trong Br' xúc tác tốt hơn, dạng dùng KBr dễ tan nước) ị+ ) Lượng acid HCl đưa vào: Cần lượng > lần yêu cầu phản ứng (Theo phương trình (2) phân tử HC1 phản ứng với phân tử OH-C6H4NH2) 2.3.I.2 Chọn cách xác định điểm kết thúc: + Dùn2 thi ngoai: dung dịch Kl/hồ tinh bột, tẩm lên giấy lọc, phơi khô Thỉnh thoảng lấy giọt hỗn họp định lượng chấm lên giấy 2KI + 2NaN02 + 4HC1 -> I2 + 2NaCl + 2NO + 2H20 + 2KC1 (4) Iod giải phóng phản ứng với hồ tinh bột tạo màu xanh Nhược điểm: Nếu phản ứng chậm thời điểm phản ứng kết thúc lần chấm giọt nên gây sai số + Dùng thi nôi: - Đỏ trung tính: chuyển từ màu đỏ hồng sang xanh lơ - TropeolinOO: chuyển từ màu từ đỏ sang vàng, hai màu thuộc gam màu sáng, khó phát chuyển màu nên ta trộn thêm Xanh methylen vào để màu chuyển từ hồng tím sang xanh lơ xanh mạ, dễ phát Muốn thị chuyển màu điểm tương đương nồng độ acid ban đầu phải khoảng giới hạn Đối với trường hợp Paracetamol, ta phải qua giai đoạn thuỷ phân HC1 10% nên khống chế nồng độ acid sau thuỷ phân Vì sau thuỷ phân xong, định lượng không xác Hơn sản phẩm tạo có màu gây khó khăn việc phát thay đổi màu thị phản ứng kết thúc + Chuẩn đô đo thế: Khi OH-C6H4-NH2 phản ứng hết vói HN02 thêm NaN02 làm chuyển trạng thái tạo bước nhảy Nhờ ta phát điểm kết thúc phản ứng Cặp điện cực thường dùng là: (1) Calomen bão hoà-Pt (2) Điện cực Ag-Pt ưu điểm: Không phụ thuộc vào nồng độ acid, miễn đủ lượng cho phản ứng xảy hoàn toàn; không phụ thuộc vào việc muối diazoni tạo có màu hay không màu; có độ nhạy cao; tránh sai số chủ quan nhìn mắt; chuẩn độ chọn lọc amin thơm bậc I hỗn hợp có nhiều thành phần + Chuẩn đô Amve (đo d ò m ): Cặp điện cực dùng là: - Một điện cực thị điện cực so sánh: Chọn làm phân cực điện cực thị Vẽ đường cong chuẩn độ: phụ thuộc dòng khuếch tán vào thể tích dung dịch chuẩn độ Đường cong chuẩn độ gồm hai đoạn thẳng cắt nhau, điểm cắt ứng với điểm kết thúc phản ứng - Hai điện cực thị: Cả hai điện cực nhúng vào dung dịch phân tích Giữa hai điện cực có chênh lệch thế, điện cực xảy phản ứng điện hoá, từ có dòng điện qua mạch Thế phân cưc hai điện cực khoảng 0,01-0,1 V Ghi lại đường cong chuẩn độ để xác định điểm kết thúc Nhận xét: Chuẩn độ Ampe có ưu điểm cần ghi kết số điểm trước sau tương đương để vẽ đường cong chuẩn độ chuẩn độ đo Bảng 6: Sự phụ thuộc độ hấp thụ (E) nồng độ dung dịch Paracetamol (C) môi trường NaOH 0,01 N c j.ug/m l E c /u g lm l E c /u g lm l E 0.152 0.429 10 0.717 0.213 0.502 11 0.788 0.283 0.571 12 0.859 0.358 0.646 13 0.931 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 c 0.0 10 11 12 13 14 Hình 9: Đổ thị phụ thuộc E-C môi trường NaOH 0,01 N Nhận xét: Dựa đồ thị ta thấy: Trong khoảng nồng độ từ 4-13 jLig/ml độ hấp thụ tuyến tính vói nồng độ dung dịch Nhưng nên đo dung dịch có nồng độ khoảng từ -10 |Ug/ml Xử lý EXCEL 97, ta thu phương trình hồi quy sau: y = 0.0 14x + 0.0016; với hệ số tương quan r = 0.9999 24 K hảo sát thời gian đo: Tiến hành đo độ hấp thụ sau pha thòi * gian khác ta có kết bảng Bảng 7: Ảnh hưỏng thời gian đo tới độ hâ'p thụ STT m (mg) E 5' E 10' E 15' E 20' E 25' E 30' 39.9 0.553 0.553 0.553 0.553 0.554 0.555 44.8 0.620 0.620 0.620 0.621 0.621 0.622 35.4 0.489 0.489 0.489 0.489 0.489 0.490 Nhận xét: Thời gian đo nên từ 5-15' sau pha khoảng thời gian này, độ hấp thụ ổn định Sau 15', E có xu hướng tăng lên * Kết qu ả định lượng: Được trình bày bảng Bảng 8: Kết định lượng Paracetamol môi trường NaOH 0,01 N TT m cân (mg) E Hàm lượng Thống kê 5 (%) 6.72 38.1 6.18 ơ2=0.2855 43.1 9 6.38 Sd=0.53 46.1 6.78 Se=0.19 36 9 6.08 oc=0.05 9 A=96.76±0.45 8 9 0 5 7.03 x=96.76 Nhận xét: Phương pháp tiến hành nhanh, cho kết có độ lặp ổn định Tuy nhiên khoảng thời gian đo đạt xác vòng 15' 25 i 3.2.2A Định lượng Paracetamo! môi trường Methanol-nước: * Quy trình tiến hành: Cân xác khoảng 120 mg Paracetamol, hoà tan 10 ml methanol cho vào bình định mức dung tích 500 ml, thêm nước đủ thể tích, lắc kỹ Lấy xác ml cho vào bình định mức dung tích 100 ml thêm nước đủ thể tích, lắc kỹ Đo độ hấp thụ dung dịch cuối bước sóng 243.3 nm, với mẫu trắng nước cất Song song đo độ hấp thụ dung dịch chuẩn có nồng độ biết vào khoảng 12|ig/ml Khối lượng (mg) Paracetamol mẫu thử tính theo công thức: m = 10.Cc(Et/Ec) (mg) Ợ rong đó: Cc nồng độ dung dịch chuẩn Ec độ hấp thụ dung dịch chuẩn Et độ hấp thụ dung dịch thử) * Phổ hấp thụ Paracetamol môi trường Methanol-nước ABS 0.77992 ŨŨQ4 b b o NM 243 3 Parac./MeOH Gai rì 122 SBU 19 Apr 2800 z.ữ O IT Q Q ũ J J O DO N M ABS : 0000 -> 1.5000 : 00.00 -> 350.00 Basel ine Erase u ieu R e-scale Zoom Label More Use the crraphi cs cn rso r, tra ck , slope _ _ Hình 10: Phổ hâ'p thụ Paracetamol môi trường Methanol-nước 26 Nhận xét: Paracetamol môi trường Methanol-nước có cực đại hấp thụ bước sóng 243.3 nm Vì phép định lượng tiến hành bước sóng * Khảo sát khoảng tuyến tính E-C Pha dung dịch Paracetamol mỏi trường Methanol-nước nồng độ từ - 15 |Lig/ml đo độ hấp thụ, ta thu kết bảng hình 11 ,D Bảng 9: Sự phụ thuộc E-C môi trường Methanol ' c piglml E 0.133 c ụglml 0.457 12 0.789 0.202 0.524 13 0.857 0.270 0.589 14 0.919 0.325 10 0.656 15 0.989 0.393 11 0.722 E 27 c ịuglmỉ E Hình 11: Sự tuyến tính độ hấp thụ nồng độ dung dịch Paracetamol pha môi trường Methanol-nước Nhận xét: Dựa vào đồ thị ta thấy khoảng nồng độ từ 5-14 |ig/ml độ hấp thụ tuyến tính với nồng độ dung dịch Nhưng ta nên đo dung dịch có nồng độ khoảng từ -13 |Ug/ml - Xử lý EXCEL 97 ta phương trình hồi quy: y = 0.065ÓX + 0.001; Hệ số tương quan r = 0.9999 * Khảo sát thời gian đo: Tiến hành đo độ hấp thụ sau pha mẫu định lượng thòi điểm khác nhau, ta thu kết bảng 10: 28 Bảng 10: Diễn biến độ hấp thụ theo thời gian STT m cân (mg) E 5' E 10' E 15' E 20' E 25' E 30' 118.9 0.758 0.758 0.758 0.758 0.758 0.758 120.2 0.764 0.764 0,764 0.764 0.764 0.764 119.1 0.759 0.759 0.759 0.759 0.759 0.759 Nhận xét: Trong dung môi Methanol-nước, độ hấp thụ không bị ảnh hưởng yếu tố thời gian Vì sau pha cần dung dịch ổn định đến hết bọt khí (sau khoảng 5') tiến hành đo * Kết định lượng: Được trình bày bảng 11 - Tiến hành pha đo độ hấp thụ dung dịch chuẩn: Cân xác khoảng 120 mg chất đối chiếu, pha 10 ml Methanol chuyển vào bình định mức 500 ml, bổ sung nước tới vạch, lắc kỹ; Lấy ml dung dịch này, cho vào bình định mức 100 ml pha loãng với nước đến đủ thể tích, lắc kỹ Tiến hành đo độ hấp thụ dung dịch cuối bước sóng 243.3 nm Đo độ hấp thụ dung dịch chuẩn có nồng độ c c = 12 |j.g/ml / bước sóng, thu kết E c = 0,789 - Tiến hành đo độ hấp thụ dung dịch thử: Tiến hành mẫu chuẩn nêu 29 Bảng 11: Kết định lượng Paracetamol dung môi Methanol-nước m thử E dung Hàm (mg) dịch thử lượng (%) 114.4 6.12 x=96.78 122.1 7 9 7.03 2=0.1842 121.9 7 96.82 Sd=0,43 118.1 7.10 Se=0.16 124.1 0.793 9 oc=0.05 120.0 96.96 A=96.78±0.39 119.8 0.758 6.23 STT c c = 12 ỊLig/ml Xử lý thống kê E c = 0.789 Nhận xét: Kết định lượng có độ lặp ổn định, phương pháp tiến hành nhanh Nhưng cần phải tiến hành mẫu Paracetamol chuẩn nên thường phụ thuộc vào điều kiện có chất chuẩn hay chất đối chiếu không 32.2.5 So sánh kết định lượng theo phương pháp quang p h ổ hấp thụ ƯV môi trường NaOH môi trường Methanol-nước * So sánh hai giá trị trung bình: (S2 bình phương độ lệch) - Trong môi trường Methanol-nước: X = 96.78; n = 7; S2A= 1.1051; - Trong môi trường NaOH 0,01 N: X = 96.76; n = 8; S2B = 1.9986; Ta tính được: S2AB = (S2A+ S2B)/(nA+ nB -2) = 0.2387; => t = 0.0791 < t005.13 = 2,160; 30 Vậy hai giá trị trung bình phương pháp đo quang môi trường Methanol-nước đo quang môi trường NaOH ,0 IN khác ý nghĩa thống kê vói mức ý nghĩa a = 0,05 * So sánh độ xác hai phương pháp : - Trong môi trường Methanol-nước: Ơ2A=0.1842; nA= 7; - Trong môi trường NaOH 0.01 N: Ơ2B= 0.2855; nB= 8; => F = 2b/ 2a = 1.55 < F0,01;(7;6) = 8-26; Vậy hai phương sai khác ý nghĩa thống kê Kết luận đáng tin cậy với mức ý nghĩa a = 0,01; Nhận xét: Hai phương pháp định lượng Paracetamol có độ xác (Kết luận có độ tin cậy 99%) 3.2.2.Ó Kết luận hàm lượng Paracetamol mẫu nguyên liệu định lượng phương pháp quang phổ hấp thụ u v : * V ề dung môi định lượng: Từ kết xử lý trên, chọn môi trường NaOH ,0 IN không phụ thuộc vào chất chuẩn hay chất đối chiếu Trị số E (1%, lem) Paracetamol lấy 715 [22] Tuy nhiên nên có thực nghiệm xác định lại trị số điều kiện Việt Nam * Hàm lượng Paracetam ol: A =96.76±0.45 % (Kết định lượng môi trường NaOH 0,01N) Kết luân: Chọn môi trường kiềm đ ể tiến hành định lượng Paracetamol 3.2.3 So sánh hai phương pháp định lượng Paracetamol: - Phương pháp đo Nitrit - Phương pháp quang p h ổ hấp thụ uv 31 3.2.3.1 So sánh kết định lượng hai phương pháp: * So sánh giá trị trung bình: - Phương pháp đo nitrit thời gian thuỷ phân 45': X = 96.77; n = 6; S2A= 0.6370 - Phương pháp đo quang p h ổ môi trường NaOH 0,01 N: X = 96.76; n = 8; S2B = 1.9986; (S2 bình phương độ lệch) Ta tính được: S2AB = (S2A+ S2B)/(nA+ nB -2) = 0.2196; t = 0.0395 < t 0i05;12 = 2,179; Vậy hai giá trị trung bình phương pháp đo Nitrit (thuỷ phân 45') đo quang môi trường NaOH 0,01N khác ý nghĩa thống kê với mức ý nghĩa a = 0,05 * So sánh độ xác hai phương p h áp : - Phương pháp đo Nitrit: Ơ2A= 0.1274; nA= 6; - Phương pháp đo quang: Ơ2B= 0.2855; nB= 8; => F = [...]... 0.1796 0.1739 96.85 a = 0.05 STT Hàm lượng Paracetamol (%) Xử lý thống kê Nhận xét: Thời gian thuỷ phân 45' cho kết quả định lượng tương tự mẫu định lượng với thời gian thuỷ phân 30' 19 Thòi gian thuỷ phân 60*: Kết quả định lượng được trình bày ở bảng 5 Bảng 5: Kết quả định lượng Paracetamol với thời gian thuỷ phân 60' Khối Khối lượng Hàm lượng lượng Paracetamol Paracetamol cân (g) tính được (g) (%)... tin cậy: A = 96.80 ± 0,39 STT 18 Nhận xét: Thời gian thuỷ phân 30' đã có thể định lượng được amin thơm bậc I tương ứng với lượng Paracetamol trong mẫu thử được giải phóng -Thòi gian thuỷ phản 45*: Kết quả định lượng được trình bày ở bảng 4 Bảng 4: Kết quả định lượng Paracetamol vối thời gian thuỷ phân 45' Khối Khối lượng lượng Paracetamol cân (g) tính được (g) 1 0.2617 0.2528 96.61 X = 96.77 2 0.2567... nhiên nên có thực nghiệm xác định lại trị số này ở điều kiện Việt Nam * Hàm lượng Paracetam ol: A =96.76±0.45 % (Kết quả định lượng trong môi trường NaOH 0,01N) Kết luân: Chọn môi trường kiềm đ ể tiến hành định lượng Paracetamol 3.2.3 So sánh hai phương pháp định lượng Paracetamol: - Phương pháp đo Nitrit - Phương pháp quang p h ổ hấp thụ uv 31 3.2.3.1 So sánh về kết quả định lượng của hai phương pháp:... phương pháp định lượng Paracetamol ở trên là có độ chính xác như nhau (Kết luận này có độ tin cậy 99%) 3.2.2.Ó Kết luận về hàm lượng Paracetamol trong mẫu nguyên liệu định lượng bằng phương pháp quang phổ hấp thụ u v : * V ề dung môi trong định lượng: Từ các kết quả đã xử lý ở trên, chọn môi trường NaOH 0 ,0 IN vì không phụ thuộc vào chất chuẩn hay chất đối chiếu Trị số E (1%, lem) của Paracetamol. .. luân: Chỉ nên thực hiện quá trình thuỷ phân trong vòng 30'-45' để rút ngắn thời gian tiến hành và giảm chi phí năng lượng 3.2.I.6 Kết luận về hàm lượng Paracetamol trong mẫu nguyên liệu đem định lượng / Kết quả của mẫu định lượng với thời gian thuỷ 45': A = 96,77 ± 0,39 % 21 3.2.2 Định lượng Paracetamol bằng phương pháp quang phổ hấp thụ ƯV: 3.2.2.1 Dụng cụ: - Cân phân tích, có sai số 0,1 mg - Máy quang... nước đá Định lượng bằng dung dịch Natri nitrrit 0,1N Xác định điểm kết thúc (Vkt) bằng phương pháp đo thế Cứ 1 ml dung dịch Natri nitrit 0,1M tương ứng 0.01512 g C8H9N 0 2 Hàm lượng phần trăm CgH9N 0 2 được tính theo công thức sau: ỵoỵ0 _ ^-0,01512.100 p 3.2.1.4 Xác định thể tích N aN 02 0,1N tỉêu thụ (Vkt) trên một mẫu định lượng Khối lượng cân p = 0,2275 g; Thời gian thuỷ phân 60'; Dung dịch chuẩn. .. phân 30*: Kết quả định lượng được trình bày ở bảng 3 Bảng 3: Kết quả định lượng Paracetamol với thời gian thuỷ phân 30' Lượng Paracetamol Hàm lượng Xử lý thống kê cân (g) tính được (g) (%) (Với mức ý nghĩa a =0,05) 1 0.2493 0.2419 97.01 Giá trị trung bình: X = 96.80 2 0.2906 0.2821 97.06 Phương sai: ơ2 = 0.1048 3 0.2082 0.2017 96.87 Độ lệch chuẩn: s d = 0.32 4 0.1647 0.1585 96.25 Sai số chuẩn: s e = 0.14... quả thu được để xử lý thống kê và rút ra những kết luận * Hai phương pháp được sử dụng trong thực nghiệm là: - Phương pháp định lượng Paracetamol bằng đo Nitrit - Phương pháp định lượng Paracetamol bằng quang phổ hấp thụ uv 3.2 K ẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ NHẬN X ÉT 3.2.1 Định lượng Paracetamol bằng phương pháp đo Nitrit 3.2.1.1 Dụng cụ: - Cân phân tích, có sai số 0,1 mg 12 - Máy đo thế mV-pH meter 3305... khảo sát các cách xác định Vkt ở trên, chọn cách 4 (dựa vào đạo hàm bậc hai) đ ể xác định Vkt 3.2.I.5 Xác định thời gian thuỷ phân thích hợp Với nhận xét rằng chức amid không bền, dễ bị thuỷ phân Tuy nhiên thời gian thuỷ phân tối thiểu để Paracetamol bị thuỷ phân hoàn toàn là bao nhiêu thì phải xác định, nhằm mục đích giảm thời gian tiến hành một mẫu định lượng * Quy trình định lượng ( Xem mục 3.2.1.3)... thụ Định luật Lambert-Beer cho phép xác định nồng độ của các dung dịch hấp thụ bức xạ điện tử bằng cách đo độ hấp thụ: Q - J _ £ k í 9 Trong thực tế thường gặp các trưòng hợp không tuân theo đúng định luật Lambert-Beer Khi đó, ta dùng đường cong chuẩn "Mật độ quang/Nồng độ" để suy ra kết quả định lượng Phương pháp quang phổ hấp thụ tử ngoại và khả kiến được áp dụng để định tính, thử tinh khiết và định ... [2] Định lượng Paracetamol từ trước tới thường theo Tiêu chuẩn ngành [9] Tiêu chuẩn sở [8] Vì cần phải có phương pháp định lượng Paracetamol thức Dược điển Việt Nam lần xuất tới để thống tiêu chuẩn. .. việc định lượng Paracetamol nên tiến hành theo phương pháp định lượng môi trường kiềm 33 3.2.4 ứng dụng định lượng Paracetamol chê phẩm có thị trường Sau lựa chọn phương pháp để định lượng Paracetamol. .. hành giảm chi phí lượng 3.2.I.6 Kết luận hàm lượng Paracetamol mẫu nguyên liệu đem định lượng / Kết mẫu định lượng với thời gian thuỷ 45': A = 96,77 ± 0,39 % 21 3.2.2 Định lượng Paracetamol phương