khảo sát khả năng đáp ứng miễn dịch của gà tàu vàng đối với vaccine lasota phòng bệnh newcastle

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG NGUYỄN QUỐC CƯỜNG KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ TÀU VÀNG ĐỐI VỚI VACCINE LASOTA PHÒNG BỆNH NEWCASTLE LUẬN VĂN T

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG

NGUYỄN QUỐC CƯỜNG

KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ TÀU VÀNG ĐỐI VỚI VACCINE LASOTA PHÒNG BỆNH NEWCASTLE

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP

NGÀNH THÚ Y

CẦN THƠ - 2013

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP NGHÀNH THÚ Y

KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ TÀU VÀNG ĐỐI VỚI VACCINE

LASOTA PHÒNG BỆNH NEWCASTLE

MSSV : LT11645

Lớp : CN1167L1

Cần Thơ - 2013

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP VÀ SINH HỌC ỨNG DỤNG

Cần Thơ, ngày tháng năm 2013 Cần Thơ, ngày tháng năm 2013

ThS Bùi Thị Lê Minh

Cần Thơ, ngày … tháng … năm …

Duyệt Khoa Nông Nghiệp và Sinh Học Ứng Dụng

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của bản thân Các số liệu, kết quả trình bày trong luận văn là trung thực và chưa từng được ai công bố trong bất kỳ công trình luận văn nào trước đây

Tác giả luận văn

Nguyễn Quốc Cường

LỜI CẢM TẠ

Trải qua quá trình dài học tập và nghiên cứu của bản thân, tôi đã hoàn thành

luận văn tốt nghiệp Ngoài ra tôi còn nhận được sự ủng hộ, chia sẻ, giúp đỡ của

gia đình, bạn bè và của quý Thầy Cô!

Trước hết con xin ghi nhớ mãi công ơn sinh thành và nuôi dưỡng của cha

mẹ, sự giúp đỡ, ủng hộ động viên của ông bà cùng tất cả những người thân trong

suốt thời gian sống và học tập

Tôi xin chân thành biết ơn sự hướng dẫn tận tình của cô Bùi Thị Lê Minh là

giáo viên hướng dẫn tôi thực hiện đề tài này Ngoài ra còn cùng với sự hỗ trợ,

giúp đỡ nhiệt tình của thầy Trần Ngọc Bích và cô Huỳnh Ngọc Trang đã tạo điều

kiện tốt nhất cho tôi trong suốt thời gian thực hiện luận văn này

Chân thành cảm ơn gia đình chú ba Hoàng quản lý trại đã nhiệt tình giúp đỡ

tôi trong thời gian thực hiện đề tài này dưới trại

Đồng thời, xin cám ơn đến các bạn lớp Thú Y LTK37 đã giúp đỡ và đồng

hành cùng tôi trong suốt những năm học vừa qua

Xin kính gởi đến quí Thầy, Cô, các anh chị, người thân và bạn bè tôi lời chúc

sức khỏe, thành công và nhận nơi tôi lòng biết ơn sâu sắc

Tôi xin chân thành cám ơn!

Nguyễn Quốc Cường

MỤC LỤC

Trang

Trang duyệt i

Lời cam đoan ii

Lời cảm tạ iii

Mục lục .iv

Danh mục bảng v

Danh mục hình vi

Danh sách biểu đồ vii

Danh mục chữ viết tắt viii

Tóm lược .ix

CHƯƠNG 1 ĐẶT VẤN ĐỀ 1

CHƯƠNG 2 CƠ SỞ LÝ LUẬN 2

2.1 Sơ lược tình hình nghiên cứu bệnh Newcastle 2

2.1.1 Tình hình nghiên cứu trên thế giới 2

2.1.2 Tình hình nghiên cứu trong nước 2

2.2 Căn bệnh học 3

2.2.1 Đặc điểm hình thái và cấu trúc của virus Newcsate 4

2.2.2 Tính chất sinh học 4

2.3 Miễn dịch chống bệnh Newcastle 6

2.3.1 Miễn dịch tế bào 7

2.3.2 Miễn dịch dịch thể 7

2.3.3 Miễn dịch tại chổ 7

2.3.4 Miễn dịch thụ động 7

2.3.5 Ức chế đáp ứng miễn dịch 8

2.4 Vaccine phòng bệnh Newcastle 8

2.5 Sơ lược về giống gà thí nghiệm 10

CHƯƠNG 3 PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM 12

3.1 Nội dung nghiên cứu 12

3.2 Phương tiện thí nghiệm 12

3.2.1 Thời gian, địa điểm và đối tượng nghiên cứu 12

3.2.2 Vật liệu thí nghệm 12

3.3 Phương pháp nghiên cứu 13

3.3.1 Chuẩn bị nuôi gà để thí nghiệm 13

3.3.2 Bố trí thí nghiệm 14

3.3.3 Qui trình thực hiện phản ứng HA 17

3.3.4 Qui trình thực hiện phản ứng HI 18

3.4 Phương pháp phân tích số liệu 19

CHƯƠNG 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 20

4.1 Kết quả kháng thể thụ động của gà Tàu Vàng 20

4.2 Đánh giá khả năng bảo hộ của 2 loại vaccine Newcastle 21

4.3 Trọng lượng và tăng trọng của gà Tàu Vàng thí nghiệm 22

4.4 Đánh giá chỉ tiêu bạch cầu của gà Tàu Vàng đối với vaccine Lasota 24

Chương 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 25

TÀI LIỆU THAM KHẢO 26

PHỤ LỤC 29

DANH MỤC BẢNG

3.1 Quy trình phòng bệnh bằng vaccine 14

3.2 Bố trí thí nghiệm với vaccine Newcastle Trên gà Tàu Vàng 14

3.3 Trình tự tiến hành thực hiện phản ứng HA 17

3.4 Trình tự tiến hành thực hiện phản ứng HI 18

4.1 Kết quả kháng thể thụ động của gà Tàu Vàng 20

4.2 Kết quả kháng thể xuất hiện 14 ngày sau khi tiêm vaccine lần hai 21

4.3 Kết quả kháng thể xuất hiện 28 ngày sau khi tiêm vaccine lần hai 21

4.4 Kết quả kháng thể xuất hiện 75 ngày tuổi 22

4.5 Trọng lượng của gà tàu vàng trong thí nghiệm 22

4.7 Tăng trọng của gà tàu vàng trong thí nghiệm 23

4.8 Hệ số chuyển hóa thức ăn 23

4.9 Kết quả bạch cầu của gà Tàu Vàng ở hai nghiệm thức 24

DANH SÁCH HÌNH

2.1 Mô hình cấu trúc Paramyxovirus 4

2.2 Gà Tàu Vàng 11

3.1 Vacine Newcastle chủng lasota 12

3.2 Úm gà con thí nghiệm 13

3.3 Chủng ngừa vaccine cho gà 15

3.4 Lấy máu tim trên gà 15

3.5 Cân gà khi kết thúc thí nghiệm 16

3.6 Kết quả phản ứng HI 19

ICPI : Intra Cerebral Pathogenicity Index

IVPI : Intra Venous Pathogenicity Index

PBS : Phosphate Buffer Saline

PPMV-1 : Pigeon Paramyxovirus Type 1

VVND : Viscerotropic Velogenic Newcastle Disease

FAO : Food agriculture orgainzation

GMT : Geometric Mean titer

ELD50 : Embryo lethal 50 pecent dose

OIE : Office international of epizotics

TÓM LƯỢC

Đề tài “Khảo sát khả năng đáp ứng miễn dịch của gà Tàu Vàng đối với vaccine

Lasota phòng bệnh Newcastle” được tiến hành từ tháng 08/2013 đến tháng

12/2013, tại trại chăn nuôi Ba Hoàng quận Bình Thủy Thành Phố Cần Thơ Thí nghiệm được bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẩu nhiên với hai nghiệm thức trên giống Tàu Vàng, đáp ứng miễn dịch của gà sau khi chủng vaccine Lasota được đánh giá bằng phương pháp huyết thanh học để xác định hàm lượng kháng thể Qua thời gian nghiên cứu chúng tôi ghi nhận được kết quả như sau:

Tỷ lệ kháng thể bảo hộ của vaccine Lasota lúc gà 35 ngày tuổi và 49 ngày tuổi là 80% Tỷ lệ bảo hộ của vaccine Lasota đến 75 ngày tuổi giảm còn 60% không còn khả năng bảo hộ với bệnh Newcastle Hiệu giá kháng thể lúc gà 35 ngày tuổi là 21.1, 49 ngày tuổi là 10.58 và 75 ngày tuổi là 6.10 Khả năng đáp ứng miễn dịch vaccine Lasota đủ bảo hộ gà đến 49 ngày tuổi

Tăng trọng của gà Tàu Vàng từ 0-3 tuần tuổi giữa hai nghiệm thức dao động từ 4.05g/con đến 5.43g/con Giai đoạn 3-6 tuần tuổi tăng trọng của gà ở hai nghiệm thức đạt cao nhất với NT1 là 15.86g/con, NT2 là 20.58g/con đến giai đoạn 6-12 tuần tuổi tăng trọng của gà đều giảm ở hai nghiệm thức NT1 là 13.60g/con, NT2

là 15.77g/con

Hàm lượng bạch cầu trước khi tiêm vaccine là 29,132 x 10 3 /mm3 và sau khi tiêm vaccine gà được10 ngày tuổi và 24 ngày tuổi lần lược là 26,656 x 10 3 /mm 3 , 27,254 x 10 3 /mm 3

CHƯƠNG 1 ĐẶT VẤN ĐỀ

Ở nước ta hiện nay, ngành chăn nuôi gà ngày càng phát triển với các hình thức chăn nuôi công nghiệp qui mô lớn đã góp phần cung cấp một lượng lớn thực phẩm cho con người đồng thời cũng mang lại nhiều thu nhập Tuy nhiên, dịch bệnh là điều đáng lo ngại, gây tổn thất cho nhà chăn nuôi đặc biệt là những bệnh do virus gây ra vì chưa có thuốc đặc trị

Hiện nay, ngoài bệnh cúm thì bệnh Newcastle cũng xảy ra rất thường xuyên

và gây thiệt hại lớn cho nghành chăn nuôi gà Bệnh Newcastle do một loại paramyxovirus gây ra, bệnh xảy ra ở mọi lứa tuổi của gà và tỷ lệ chết có thể lên đến 100% (OIE, 2008), gà bệnh có những triệu chứng về hô hấp, tiêu hóa

và thần kinh Do đó, việc sử dụng vaccine để phòng bệnh Newcastle là điều cần thiết

Trên thị trường hiện nay, có nhiều loại vaccine phòng bệnh Newcastle cho gà được sản xuất Hiệu quả phòng bệnh của các loại vaccine này là một yếu tố chọn lựa của nhà chăn nuôi Tuy nhiên, thông tin về mức bảo hộ của các loại

vaccine chưa nhiều, do đó chúng tôi thực hiện nghiên cứu “Khảo sát khả

năng đáp ứng miễn dịch của gà Tàu Vàng đối với vaccine Lasota phòng bệnh Newcastle” nhằm khảo sát khả năng đáp ứng miễn dịch và khả năng

tăng trọng của gà Tàu Vàng sau khi tiêm phòng vaccine Lasota (Navetco) đồng thời khảo sát sự thay đổi hàm lượng bạch cầu trước và sau khi tiêm vaccine

đó, có nhiều báo cáo về sự bùng phát bệnh ở Châu Âu giống như những gì người ta biết về bệnh Newcastle đã từng xảy ra trước đó vào năm 1926 (Halasz, 1912) Ochi và Hashimoto cho rằng bệnh có thể xảy ra sớm hơn ở Hàn Quốc vào năm 1924 (Levine, 1964)

Năm 1935, Doly mô tả căn bệnh Newcastle là bệnh truyền nhiễm cấp tính với các bệnh tích chủ yếu là xuất huyết ở đường tiêu hóa Đặc trưng của bệnh là

do virus gây bệnh có tính hướng nội tạng Bệnh do các chủng độc lực cao Velogenic gây ra, bệnh còn được gọi tên là Viscerotropic Velogenc Newcastle Disease Bệnh Newcastle còn được mô tả ở thể cấp tính với bệnh tích đặc trưng ở đường hô hấp và thần kinh nên được gọi là neurotropic Newcastle, thể bệnh này cũng do các chủng cường độc gây ra (Beach,1944)

Năm 1946, Beaudetta và Black mô tả bệnh ở thể cấp tính với bệnh tích xuất huyết ở đường hô hấp và thần kinh Bệnh xảy ra chủ yếu ở gà con, gà lớn có tỷ

lệ chết thấp, bệnh do các chủng virus thuộc nhóm mesogenic gây ra

Năm 1948, Hitchner và Johnson mô tả bệnh xảy ra ở thể nhẹ với triệu chứng

hô hấp, có tỷ lệ chết thấp, bệnh do chủng độc lực yếu gây ra

Đầu năm 1960, có nhiều báo cáo về việc sử dụng vaccine để chống lại chủng virus có độc lực cao ở vùng Trung Đông (Chu và Rizk,1971)

Theo ghi nhận của Walker et al.,(1973), ở Mỹ đã áp dụng thành công chương

trình phòng bệnh ở miền Nam California Bệnh đã khống chế thông qua việc tiêu hủy những chim bệnh và quản lý chặt chẽ việc tiêm phòng những loại gia cầm mẫn cảm với bệnh

Tại đảo Western của Scotland năm 1986, một trận dịch xảy ra làm chết toàn bộ

gà ở đây, người ta tìm thấy chủng virus gây bệnh Newcastle trên đàn gà địa phương (Saif, 2008)

2.1.2 Tình hình nghiên cứu trong nước

Ở Việt Nam, bệnh Newcastle đã có từ rất lâu ở khắp hai miền Nam Bắc Trong thời kỳ Pháp thuộc, bệnh được gọi là dịch tả gà Năm 1933, Phạm Văn Huyến

có mô tả một bệnh dịch tả gà mà tác giả gọi là dịch tả gà giả Năm 1938, Vittoz

báo cáo về một bệnh mà tác giả gọi là “dịch tả gà giả Nam bộ” (Dương Nghĩa Quốc, 1997) Tuy nhiên, bệnh được chính thức ghi nhận qua chẩn đoánở phòng thí nghiệm vào năm 1949 Từ đó, bệnh Newcastle được xem là bệnh gây tác hại

lớn nhất đối với nền chăn nuôi gà ở Việt Nam (Trần Đình Từ và ctv, 1998)

Năm 1956, Nguyễn Văn Lương và Neter đã chẩn đoán được những gà bệnh ở miền Nam là do Newcastle Cũng trong thời gian này ở miền Bắc, Trần Quang Nhiên và Nguyễn Văn Lương (1956), đã xác định bệnh Newcastle xảy ra rất phổ biến ở nhiều tỉnh thuộc miền Bắc và đã nghiên cứu vaccine phòng bệnh này (Dương Nghĩa Quốc, 1997)

Các kết quả nghiên cứu về bệnh Newcastle và áp dụng vaccine phòng bệnh do hai nhà khoa học Nguyễn Bá Huệ và Nguyễn Thu Hồng thực hiện vào thập niên 80 ở viện Thú Y đã phân lập nhiều chủng virus Newcastle từ các ổ dịch ở các trại gà nuôi công nghiệp và gà nuôi thả trong đàn Hai tác giả này cũng nghiên cứu áp dụng vaccine Lasota bằng các phương pháp cho uống và cho ăn (Nguyễn Trường Giỏi, 1999)

Năm 1981, Trần Đình Từ và cộng tác đã nghiên cứu độc lực của các chủng virus Newcastle và có kết luận rằng chủng hệ I2 có nhiều đặc tính tương đồng với chủng Mukterwar (trích dẫn Dương Nghĩa Quốc, 1997)

Việc sử dụng vaccine để khống chế bệnh Newcastle được thực hiện vào nhũng năm 1960 Ở thời điểm này, gia cầm được chủng ngừa bằng vaccine virus sống nhược độc, đông khô Gần đây, phát triển vaccine Newcastle chịu nhiệt được sản xuất từ chủng V4 và I2 Năm 1999, gần 8000 liều vaccine chịu nhiệt

đã được Công Ty Navetco sản xuất và cung cấp trên thị trường (Trần Đình Từ, 2005)

Nguyen Đinh Quat et al (2004) thử hiệu lực của vaccine chụi nhiệt chủng I2

trên cút nuôi thịt Kết quả này cho thấy, chim cút có đáp ứng kháng thể thấp hơn so với gà được chủng vaccine này ( trích dẫn Nguyễn Hải Ngân, 2010)

Nghiên cứu của Phạm Văn Tự et al (2006) về ảnh hưởng của aflatoxin B1 có

trong thức ăn đến đáp ứng miễn dịch của gà công nghiệp đối với bệnh Newcastle, kết quả cho thấy aflatoxin B1 làm giảm đáp ứng miễn dịch của gà đối với bệnh Newcatle

Nghiên cứu của Hồ Thị Việt Thu (2012) so sánh hiệu quả các loại vaccine và đường cấp vaccine trong việc phòng bệnh Newcaste Kết quả vaccine chủng Lasota cho đáp ứng kháng thể nhanh hơn so với vaccine chủng F, gà con được cấp vaccine qua đường nhỏ mắt cao hơn ở gà được cấp vaccine qua đường uống Vaccine chủng M cho gà lớn (>60 ngày tuổi) được cấp qua đường tiêm bắp có đáp ứng kháng thể cao hơn so với cấp vaccine qua đường tiêm dưới da

từ PMV1 đến PMV9 Virus gây bệnh Newcastle (Newcastle disease

virus-NDV) thuộc PMV1

2.2.1 Đặc điểm hình thái và cấu trúc của virus Newcastle

Paramyxovirus là một loại virus đa hình thái, ở dạng hình cầu và có kích thước khoảng 100-500nm, ở dạng hình sợi có kích thước chiều ngang khoảng 100nm với chiều dài thay đổi Hình thái của virus biến đổi theo nồng độ muối của môi trường sống (Nguyễn Đức Hiền, 2011) Bộ gen là một phân tử ARN, một chuỗi âm có trọng lượng phân tử khoảng 5.106 Dalton, chiếm 5% trọng lượng của tiểu thể virus

Virus Newcastle chứa ít nhất 6 protein đặc hiệu; trong đó, có hai kháng nguyên bề mặt là haemagglutinin-neuaminidase (HN) protein và fusion (F) protein, bốn kháng nguyên nằm bên trong là polymerase (L) protein, nucleocapsid (N) protein, phosphoprotein (P) protein và matrit (M) protein

Hình 2.1 Mô hình cấu trúc Paramyxovirus

Kháng nguyên HN có chứa hemagglutinin và neuraminidase Enzyme neuraminidase có mặt ở tất cả các thành viên của nhóm paramyxovirus, enzyme này có tác dụng làm tách dần các hồng cầu đã ngưng kết Còn kháng nguyên F gắn liền với sự phản ứng của virus đối với các tế bào đích và kháng thể trung hòa Các kháng nguyên HN và F, khi mới tạo thành chưa có hoạt tính và nó chỉ thể hiện hoạt tính sau khi bị phân cắt bởi các protease của tế bào chủ

Đặc tính gây bệnh và độc lực của virus

Các chủng virus Newcastle khá đồng nhất về tính kháng nguyên nhưng lại rất khác nhau về khả năng gây bệnh Khả năng này thay đổi từ những chủng gây

ra thể quá cấp với tỷ lệ chết 100% đàn gà đến những chủng hoàn toàn không gây bệnh khi chúng lan truyền trong điều kiện tự nhiên

Bên cạnh đó, các yếu tố khác như tuổi, tình hình sức khỏe, trạng thái miễn dịch cũng ảnh hưởng đến tỷ lệ mắc bệnh, tỷ lệ chết hoặc triệu chứng lâm sàn của gà (OIE, 2009)

Trong tự nhiên, virus Newcastle có biểu hiện độc lực ở những mức độ khác nhau Có những ổ dịch xảy ra rất nặng, tỷ lệ chết cao và bệnh tích rất điển hình nhưng cũng có những ổ dịch xảy ra rất nhẹ, tỷ lệ chết không đáng kể, độc lực của Newcastle ở Châu Á và Châu Âu thường cao hơn Bắc Mỹ (Nguyễn Trường Giỏi, 1999)

Hiện nay, người ta đã phân loại được nhiều chủng Newcastle, các chủng khác nhau về độc lực nhưng giống nhau về tính kháng nguyên Có 3 nhóm độc lực:

- Nhóm cường độc (velogenic): được chia thành 2 nhóm phụ

+ Viscertropic velogenic: thường gây ra bệnh quá cấp tính, gây chết 100% gà với bệnh tích xuất huyết đường tiêu hóa Chủng này gây nhiều thiệt hại cho ngành chăn nuôi gà ở châu Á

+ Neurotropic velogenic: dạng bệnh quá cấp tính, cũng gây chết 100% gà với triệu chứng thần kinh và hô hấp

- Nhóm độc lực vừa (mesogenic): gây nhiễm trùng hô hấp cấp tính và đôi khi

có triệu chứng thần kinh, có thể gây chết 50% đàn gà, làm giảm tỷ lệ đẻ trứng Những virus gây bệnh nhẹ cho gà trên 6 tuần tuổi như chủng H (Herforshire), chủng M (Mukteswar), hai chủng này khi tiêm cho phôi gà 10-11 ngày, làm chết phôi và xuất huyết toàn phôi thai

- Nhóm độc lực yếu (lentogenic): là các chủng có độc lực thấp như B1, Lasota

và F, có thể làm giảm đẻ trứng nhưng ít gây chết trừ gà con mới nở không có kháng thể hoặc gà đang mắc bệnh khác, gây nhiễm trùng nhẹ ở gà con với triệu chứng chủ yếu ở đường hô hấp Ngoài ra, còn có chủng V4 và Ulster khi gây nhiễm cho gà thì không có triệu chứng bệnh

Trong cùng một chủng virus Newcastle, độc lực của chúng có thể tăng lên do liều virus đưa vào cơ thể, đường đưa virus, tuổi gà và điều kiện ngoại cảnh Gà càng nhỏ, tính thụ cảm với virus càng mạnh Sự mẫn cảm của virus ít liên quan đến giống gà (Nguyễn Văn Khanh, 2011)

Theo OIE (2000), để đánh giá độc lực của virus Newcastle ta có thể căn cứ vào các chỉ số sau đây:

MDT (Mean dead Time): chỉ số thời gian gây chết phôi trung bình

ELD50 (Embryo lethal dose): liều gây chết 50% phôi gà

ICPI (Intracerebral pathogenicity index): chỉ số gây chết khi tiêm vào não gà con một ngày tuổi

IVPI (Intravenous pathogenicity index): chỉ số gây chết khi tiêm vào tĩnh mạch gà 6 tuần tuổi

Virus xâm nhiễm qua niêm mạc hầu họng rồi vào máu Khi vào cơ thể virus nhân lên tại chổ nhiễm và trong bạch cầu Virus gây nhiễm trùng huyết, bại huyết và đi đến hầu hết các cơ quan của cơ thể đặc biệt là lách, gan, có ở buồng trứng, các noãn ở thời kỳ phát triển gây viêm hoại tử (Beaudette, 1946) Sau đó virus xâm nhập vào hệ thần kinh trung ương Nội mô thành huyết quản

bị phá hủy gây xuất huyết và thâm nhiễm dịch thẩm xuất vào các xoang trong

cơ thể (Nguyễn Bá Hiên và Nguyễn Minh Tâm, 2007)

Phần lớn bệnh ở thể cấp tính, gà thường chết trong thời kỳ nhiễm trùng huyết Trong trường hợp bệnh kéo dài (thể mãn tính), virus xâm nhiễm vào hệ thần kinh trung ương

Sức đề kháng của virus

Virus Newcastle có sức đề kháng tương đối yếu Virus không thể tồn tại quá

24 giờ trong thịt thối rửa, trong phân, xác chết Trong ổ rơm, nền chuồng, virus bị tiêu diệt mạnh Trong điều kiện khô ráo virus có thể sống trong vài

tháng Nhiệt độ thấp có thể bảo quản virus trong thời gian dài Gough et al

(1988) Ở 1-2oC virus có thể tồn tại trong 3 tháng, ở -20oC virus có thể tồn tại trong 1 năm Virus trong phôi gà bệnh được bảo quản ở trạng thái khô, lạnh có thể giữ được tính gây bệnh trong 2 năm Trong tủy xương, thịt giữ lạnh, virus còn độc lực trong 6 tháng Ở 100oC virus bị diệt trong 1 phút, ở 60oC virus trong 30 phút, ở 56oC độc lực của virus bị phá hủy trong 5 phút đến 6 giờ, ở

8oC đến 20oC phải nhiều tháng mới phá hủy được virus

Ở nhiệt độ bình thường, trong nước sinh lý, virus còn sống sau 3 tháng Virus

dễ bị tiêu diệt bởi các chất sát trùng như crezyl 5%, NaOH 2% Một số hóa chất như formol, priolactone làm vô hoạt virus nhưng không làm thay đổi tính kháng nguyên của virus Spalatin và Hanson (1976), đã chứng minh có sự thay đổi về tính bền với nhiệt của các chủng virus Newcastle và tính chất này đã được áp dụng trong nghiên cứu dịch tể học (Trần Đình Từ, 1998)

Năm 1995, Glolam và Hanson đã chọn lọc được một chủng virus Newcastle chịu nhiệt dùng trong nghiên cứu tái tổ hợp virus Phát hiện này đã gợi ý cho các nhà khoa học Úc phát triển virus Newcastle chịu nhiệt từ chủng V4 Vaccine này đã áp dụng thành công trong phòng bệnh Newcastle trên gà nuôi

ở nông thôn của nhiều nước Đông Nam Á (Trần Đình Từ, 1998)

2.3 Miễn dịch chống bệnh Newcastle

Ngày nay người ta biết rõ đáp ứng miễn dịch chống bệnh Newcastle gồm miễn

dịch dịch thể và miễn dịch qua trung gian tế bào

2.3.1 Miễn dịch tế bào

Đáp ứng miễn dịch đầu tiên của cơ thể đối với sự nhiễm virus Newcastle là miễn dịch qua trung gian tế bào và có thể phát hiện vào ngày thứ 2-3 sau khi chủng vaccine Điều này giải thích khả năng bảo hộ của gà hình thành rất sớm trước khi xuất hiện kháng thể

Miễn dịch qua trung gian tế bào là một bộ phận của cơ chế bảo vệ của gia cầm Hàng rào bảo vệ niêm mạc bao gồm cả yếu tố tế bào của hệ thống miễn dịch và các kháng thể của dịch tiết Một nghiên cứu gần đây (Reynolds và Maraqa, 2000) đã kết luận rằng đáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào đối với bệnh Newcastle bởi đáp ứng này không đủ bảo hộ chống nguy cơ nhiễm virus Newcastle độc Tuy nhiên, tầm quan trọng của miễn dịch trung gian tế bào trong sự bảo hộ vaccine thì không rõ lắm và một đáp ứng thứ cấp mạnh đối với mầm bệnh tương tự đáp ứng kháng thể dường như không xảy ra (Nguyễn Đức Hiền, 2011)

2.3.2 Miễn dịch dịch thể

Trong thực tế người ta thường dùng xét nghiệm HI để đánh giá hiệu lực

vaccine sau khi chủng (Allison et al., 2005) Lee và Hanson (1979) kháng thể

xuất hiện trong huyết thanh của gà 6-10 ngày sau khi tiếp xúc với kháng nguyên Kháng thể thường xuất hiện trong tuần đầu sau khi tiêm chủng vaccine nhưng đạt mức cao nhất vào tuần thứ hai và duy trì tới tuần thứ tư rồi giảm dần Kháng thể có thể kéo dài một năm sau khi chủng vaccine mesogen (độc lực vừa), hoặc được tái chủng bằng vaccine lentogen (độc lực yếu)

Nếu đàn gà mẹ được miễn dịch chắc chắn thì hàm lượng gà con nở ra có hàm

lượng kháng thể ngang bằng lượng kháng thể trong máu gà mẹ (Heller et al.,

1977) Theo Lâm Minh Thuận (2004), hàm lượng kháng thể thụ động ở gà con phụ thuộc vào hàm lượng kháng thể mẹ truyền

2.3.3 Miễn dịch tại chỗ

Các kháng thể trong dịch tiết ở đường hô hấp và đường tiêu hóa của gà xuất hiện đồng thời với kháng thể trong máu Ở đường hô hấp trên, các immunoglobulin (Ig) chủ yếu là IgA Tương tự, sự tiết kháng thể ở tuyến Harder xảy ra sau khi nhỏ vaccine Miễn dịch tại chỗ đống vai trò quan trọng bảo vệ các của xâm nhập tự nhiên của virus (Malkinon và Small, 1977) IgA được tạo ra khi chủng các loại vaccine sống, nhưng hình như không có đáp ứng thứ phát khi tái chủng vaccine

2.3.4 Miễn dịch thụ động

Kháng thể của gà mẹ có thể truyền cho gà con qua lòng đỏ trứng Mức kháng thể ở gà con một ngày tuổi gần tương đương với hiệu giá kháng thể gà mẹ

Allan et al., (1974) đã ước lượng thời gian bán hủy của kháng thể thụ động

khoảng 4-5 ngày Kháng thể thụ động có tác dụng bảo vệ gà con trong những ngày đầu Mặt khác, nó có thể làm giảm hiệu lực phòng bệnh của vaccine, do

vậy cần được xem xét khi xác định thời điểm chủng vaccine lần đầu cho gà con nhất là khi sử dụng vaccine virus sống

2.3.5 Ức chế đáp ứng miễn dịch

Sự ức chế đáp ứng miễn dịch có tác động quan trọng đến khả năng gây bệnh của các chủng virus gây bệnh Newcastle và mức bảo hộ được tạo thành bởi tiêm chủng dự phòng Trong điều kiện tự nhiên, sự ức chế đáp ứng miễn dịch Newcastle có thể xảy ra do gà bị nhiễm các virus khác như Gumboro Hậu quả thiếu hụt miễn dịch sẽ dẫn đến bệnh do virus gây bệnh Newcastle gây ra sẽ nghiêm trọng hơn và không đáp ứng đầy đủ với tiêm chủng vaccine (Faragher

et al., 1974)

2.4 Vaccine phòng bệnh Newcastle

Vaccine nhược độc

Các chủng vaccine nhược độc phòng bệnh Newcastle được chia làm 3 nhóm

- Nhóm mesogenic gồm các chủng: Roakin, Mukteswar, Standard, Komarov

- Nhóm lentogenic gồm các chủng Lasota, Hichner B1

- Nhóm: Avirulent không độc lực gồm các chủng Ulster 2C, vaccine4, V4HR Trong 3 nhóm trên thì 2 nhóm Mesogenic và Lentogenic là 2 nhóm truyền thống đã được sử dụng từ lâu ở nước ta và đã có kết quả đáng khích lệ trong việc hạn chế tác hại của bệnh Newcastle Ngày nay các chủng thuộc nhóm

Avirulent đang được thừa nhận và đang dần thay thế các nhóm truyền thống

Một số loại vaccine nhược độc đã được sử dụng ở nước ta

- Vaccine F được điều chế tại Weybridge (Anh) năm 1975 được đưa sang Việt

Nam (1956) Đây là một loại vaccine có độc lực thấp tạo miễn dịch yếu và không bền Có thể dùng cho gà con một ngày tuổi

- Vaccine Newcastle chịu nhiệt chủng H4N4 đã được kiểm nghiệm và đưa vào sản xuất bước đầu cho những kết quả đáng khích lệ Vaccine H4N4 có thể vận chuyển trong điều kiện bình thường đã tạo ra thuận lợi cho việc đưa về nông thôn

- Vaccine Mukteswar còn gọi là vaccine hệ I, vaccine dịch tả dùng cho gà lớn Loại vaccine này có nguồn gốc từ Ấn Độ, nó có độc lực cao nhất trong các tất

cả các loại vaccine sống tạo miễn dịch cao và bền

- Vaccine Herfordshire có độc lực thấp hơn chủng M và cũng tạo miễn dịch cao và bền Vaccine này cũng có thể gây phản ứng cho gà trên 8 tuần tuổi và

gà đang đẻ

- Vaccine K (Komarov) loại vaccine này có độc lực yếu hơn vaccine M nhưng

có ưu điểm tạo miễn dịch nhanh sau 3 ngày tiêm chủng

- Vaccine R (Roakin) được phân lập từ giống cường độc tự nhiên và làm giảm độc có nguồn gốc ở Mỹ

- Vaccine dạng đông khô (của công ty Navetco) được sản xuất từ virus nhược độc chủng Lasota, tạo miễn dịch mạnh và bền hơn chủng F Mỗi liều vắcxin chứa ít nhất 106EID50 virus Newcastle chủng Lasota nhược độc

- Vaccine BAL-ND-IB (Bestar) vaccine sống dạng đông khô phòng bệnh Newcastle (ND) và bệnh Viêm phế quản truyền nhiễm (IB) mỗi liều vaccine chứa 106.0

EID50virus ND và 102.5EID50virus IB

- Ngoài ra còn các loại vaccine nhược độc có tên thương mại: Vaccine Pestos, Sotasee, Bipetos Được nhập từ nước ngoài

Vaccine vô hoạt

Là chế phẩm sinh học được chế từ chủng virus cường độc hoặc nhược độc, được khử độc tính bằng formol hoặc P-Propiolacton có bổ sung thêm chất bổ trợ nhằm tăng cường hiệu quả của vaccine Tá chất có tác dụng gây phản ứng viêm nhẹ làm tăng khả năng thực bào, tá chất còn có tác dụng hấp phụ kháng thể, sau đó giải phóng từ từ có tác dụng giống như chủng vaccine nhắc lại nhiều lần Những thí nghiệm gần đây còn chứng minh rằng tá chất làm tăng hiệu quả của lympho THB.

Tuy nhiên vaccine vô hoạt có những nhược điểm là: thời gian bảo quản không được lâu, để đông lạnh dể làm hư vaccine, phải chủng cho từng con và giá thành cao

Một số loại vaccine vô hoạt đang được lưu hành ở nước ta

- Vaccine Imopest do Rhone Merieus (Pháp) sản xuất Vaccine thuộc chủng Texas có hiệu giá trước khi vô hoạt là 108ETD50 chất bảo quản là Methiolate 0.005mg, chất bổ trợ dạng dầu vừa đủ 0,3 cc/liều

- Vaccine Gumboro+ND là vaccine vô hoạt phòng 2 bệnh Newcastle và Gumboro do Công Ty Interviet (Hà Lan) sản xuất thành phần một liều gồm Newcastle Clone 30>/ 50 PD50(PD: Protective dose)+Gumboro D78>/ 12,5 log2 VN (VN: virus Neuteralization)

- Vaccine Gumboro+Newcastle do Pháp sản xuất mỗi liều chứa 108EID50 virus Newcastle chủng texas và 1057CCID50 virus Gumboro chủng VNIO Đây là vaccine chết nhị giá dùng tiêm cho gà mẹ để gây miễn dịch chủ động cho gà

mẹ và gà mẹ truyền kháng thể thụ động cho gà con

Tiêu chuẩn cho một vaccine Newcastle

Vaccine lý tưởng để sử dụng phải thỏa những tiêu chuẩn quan trọng sau đây

- An toàn: vaccine không gây ra các dấu hiệu lâm sàng khi dùng với bất kì đường tiêm chủng nào ở gà con và gà trước hoặc trong kỳ đẻ trứng

- Thuần khiết (Purty): vaccine phải không nhiễm vi sinh vật ngoại lai

- Ổn định: Chủng vaccine phải ổn định về mặt di truyền không chuyển đổi thành dạng có độc lực cao hơn khi lây truyền qua gà Vaccine phải có thời gian sống có thể chấp nhận được

- Hiệu lực: Liều tiêm chủng của virus có khả năng kích thích miễn dịch thích hợp, thường nằm giữa 106-107 EID 50/liều

Quy trình chủng ngừa

Hiện nay, trong các xí nghiệp chăn nuôi gà công nghiệp đang tồn tại khá nhiều quy trình chủng ngừa vaccine phòng bệnh Newcastle Chúng tôi xin giới thiệu quy trình được các xí nghiệp nuôi gà áp dụng

Quy trình do Viện Chăn Nuôi ban hành năm 2010

- Đối với gà thương phẩm hướng thịt: ngày 7-21 chủng vaccine ND-IB

- Đối với gà đẻ: ngày 7-21 chủng vaccine IB và ngày 70-120-7 tháng

ND-IB

Quy trình Công Ty NAVETCO

- Đối với gà hướng thịt: 3-5 ngày vaccine chủng F, ngày 21 vaccine lasota

- Đối với gà đẻ: 3-5 ngày vaccine chủng F, ngày 21 vaccine lasota trên 60 ngày chủng M

Quy trình Công Ty BESTAR

- Đối với gà hướng thịt: 1-3 ngày (BAL ND-B1 hoặc ND-IB), 21 ngày (BAL

ND “lasota” hoặc BAL ND-IB)

- Đối với gà đẻ: 1-3 ngày (BAL ND-IB), 21 ngày (BAL ND-IB), 70 ngày, 7 tháng (BAL ND-IB)

2.5 Sơ lược về giống gà thí nghiệm

Theo Lê Minh Hoàng (2002) giống gà Tàu Vàng có xuất xứ từ Trung Quốc, nhưng giống gà này được đưa vào miền Nam từ rất lâu và trở thành giống gà địa phương, được nuôi rộng rãi các tỉnh Nam Bộ

Giống gà Tàu Vàng có ngoại hình khá đẹp, lông màu vàng đến màu vàng rơm,

cổ có cườm đen từ nhiều đến ít, da và chân vàng, mào đơn Đặc điểm nổi bật của gà là dọc bàn chân có hàng lông nhỏ mọc phía ngoài chân và hướng xuống dưới Gà rất nhanh nhẹn và ưa thích kiếm mồi trong vườn Gà có trọng lượng vừa phải, khi trưởng thành (6 tháng tuổi) con mái nặng khoảng 1,5-1,7kg, con trống khoảng 2-2,2kg Khả năng sinh sản của gà kém, khi nuôi tập trung và áp dụng kỹ thuật cai ấp thì tỷ lệ đẻ bình quân toàn đàn chỉ từ 25-30% Nếu không

có chế độ cai ấp thì tỷ lệ này nhiều khi đạt tới 20% Thời gian đẻ sớm, ham ấp

nặng khoảng 42-45g Trong môi trường nuôi chăn thả và ấp tự nhiên thì tỷ lệ

nở cao từ 90-95% Nếu nuôi nhốt và ấp theo lối ấp công nghiệp thì tỷ lệ nở chỉ đạt 73-77% Đặc tính quan trọng nhất của giống gà Tàu Vàng là chất lượng thịt thơm ngon và được nhiều người ưa chuộng (Bùi Xuân Mến, 2007)

Hình 2.2 Gà Tàu Vàng

Nguồn:

http://www.khoahoc.com.vn/doisong/ung-dung/48973_An-Giang-phuc-trang-thanh-cong-ga-giong-tau-vang.aspx