tình hình nhiễm leptospira trên chó tại tỉnh an giang

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG TRẦN THỊ DIỄM MI TÌNH HÌNH NHIỄM LEPTOSPIRA TRÊN CHÓ TẠI TỈNH AN GIANG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP NGÀNH THÚ Y Cần Thơ - 2014 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP NGÀNH THÚ Y Tên đề tài: TÌNH HÌNH NHIỄM LEPTOSPIRA TRÊN CHÓ TẠI TỈNH AN GIANG Giảng viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: PGS.TS HỒ THỊ VIỆT THU TRẦN THỊ DIỄM MI MSSV: 3103036 Lớp: Dược Thú Y- K36 Cần Thơ - 2014 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y Đề tài: Tình hình nhiễm Leptospira chó tỉnh An Giang; sinh viên: Trần Thị Diễm Mi thực bệnh xá thú y phòng thí nghiệm vi sinh Bộ môn Thú Y, khoa Nông Nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng, trường Đại Học Cần Thơ từ tháng 07/2014 đến tháng 10/2014. Cần Thơ, ngày….tháng… năm 2015 Cần Thơ, ngày….tháng… năm 2015 Duyệt Bộ Môn Duyệt Giáo viên hướng dẫn PGS.TS HỒ THỊ VIỆT THU Cần Thơ, ngày….tháng… năm 2015 Duyệt Khoa Nông Nghiệp Sinh Học Ứng Dụng i LỜI CẢM ƠN Qua bao năm học tập rèn luyện mái trường Đại Học Cần Thơ, hôm hoàn thành luận văn tốt nghiệp. Trong trình học tập thực luận văn nổ lực thân, có nguồn động viên dạy bảo tận tình cha mẹ thầy cô. Con xin kính dâng lên cha mẹ lòng biết ơn sâu sắc, người dành đời cho cất bước đến trường. Xin chân thành ghi nhớ công ơn cô Hồ Thị Việt Thu hết lòng quan tâm, động viên, bảo tận tình để hoàn thành tốt luận văn tốt nghiệp. Xin bày tỏ lòng biết ơn đến cô Nguyễn Thị Bé Mười dìu dắt giúp đỡ mặt để thực tốt đề tài. Cô Châu Thị Huyền Trang nhiệt tình giúp đỡ, dạy bảo truyền đạt kiến thức quý báu suốt thời gian cô làm cố vấn học tập cho tôi. Quý thầy cô Bộ môn Thú Y Bộ môn Chăn Nuôi truyền đạt cho kiến thức, kinh nghiệm quý báu, lẫn nhận thức xã hội trình học tập trường. Các cô chú, ban lãnh đạo, cán thú y Long Xuyên, Chợ Mới, Tịnh Biên tỉnh An Giang hết lòng giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình lấy mẫu. Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến tất anh chị, bạn bè, em giúp đỡ suốt thời gian học tập làm luận văn. Cuối lời xin kính chúc quý thầy cô anh, chị, em bạn dồi sức khỏe thành đạt sống! Trần Thị Diễm Mi ii MỤC LỤC Trang duyệt . i Lời cảm ơn . ii Mục lục . iii Danh mục chữ viết tắt v Danh sách bảng . vi Danh sách hình . vii Tóm lược . viii CHƯƠNG ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG CƠ SỞ LÝ LUẬN 2.1 Giới thiệu bệnh Leptospira 2.1.1 Đặc điểm Leptospira 2.1.2 Dịch tễ học 2.1.3 Cơ chế sinh bệnh . 2.1.4 Triệu chứng . 2.1.5 Bệnh tích . 2.1.6 Chẩn đoán bệnh 10 2.1.7 Phòng bệnh . 14 2.1.8 Điều trị 15 2.2 Tình hình nghiên cứu bệnh Leptospira 16 2.2.1 Tình hình nghiên cứu giới . 16 2.2.2 Tình hình nghiên cứu nước . 17 CHƯƠNG PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU . 18 3.1 Nội dung nghiên cứu 18 3.2 Phương tiện nghiên cứu . 18 3.2.1 Thời gian địa điểm . 18 3.2.2 Đối tượng nghiên cứu . 18 3.2.3 Thiết bị, dụng cụ . 18 iii 3.3 Phương pháp tiến hành 20 3.3.1 Phương pháp lấy mẫu. 21 3.3.2 Phương pháp thực phản ứng vi ngưng kết MAT 21 3.3.3 Phương pháp thống kê số liệu . 24 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 4.1 Tỷ lệ nhiễm Leptospira chó An Giang 25 4.2 Tỷ lệ nhiễm Leptospira chó theo giống 26 4.3 Tỷ lệ nhiễm Leptospira theo lứa tuổi 27 4.4 Tỷ lệ nhiễm Leptospira theo giới tính . 28 4.5 Tỷ lệ nhiễm Leptospira theo phương thức nuôi 28 4.6 Kết định danh chủng Leptospira chó 30 4.7 Tỷ lệ nhiễm Leptospira chó theo hiệu giá ngưng kết . 31 4.8 Cường độ nhiễm chủng Leptospira cá thể 32 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 34 5.1 Kết luận 34 5.2 Đề nghị . 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO . 35 PHỤ CHƯƠNG . 38 Phụ lục A . 38 Phụ lục B 39 Phụ lục C 41 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nguyên chữ Nghĩa tiếng Việt DNA Deoxyribonucleic Acid RNA Ribonucleic Acid PCR Polymerase Chain Reaction MAT Microscopic Agglutination Test Phản ứng vi ngưng kết ELISA Enzyme Linked Immunosorbent Assay Xét nghiệm liên kết miễn dịch với enzyme Immuno fluorescence Phản ứng miễn dịch huỳnh quang CF Complement fixation Phản ứng kết hợp bổ thể EMJH Ellinghausen-McCulloughJohnson-Harris Môi trường Ellinghansen-Mc Cullough cải tiến Johnson Harris MLST Multilocus Sequence Typing Kỹ thuật giải trình tự gen nhiều locus IF v Phản ứng chuỗi trùng hợp hay phản ứng khuếch đại gen DANH SÁCH BẢNG Bảng Nội dung Trang Bảng 2.1: Phân loại serogroup Leptospira . Bảng 2.2: Một số chủng xoắn khuẩn gây bệnh loài động vật . Bảng 3.1: Các chủng Leptospira dùng thực phản ứng MAT 19 Bảng 4.1: Tỷ lệ nhiễm Leptospira chó An Giang 26 Bảng 4.2: Tỷ lệ nhiễm Leptospira chó theo địa bàn . 25 Bảng 4.3 : Tỷ lệ nhiễm Leptospira chó theo lứa tuổi 27 Bảng 4.4: Tỷ lệ nhiễm Leptospira chó theo giới tính 28 Bảng 4.5: Tỷ lệ nhiễm Leptospira chó theo phương thức nuôi . 28 Bảng 4.6: Kết định danh chủng Leptospira . 30 Bảng 4.7: Tỷ lệ nhiễm Leptospira chó theo hiệu giá ngưng kết . 31 Bảng 4.8: Cường độ nhiễm chủng Leptospira cá thể 32 vi DANH SÁCH HÌNH Hình Nội dung Trang Hình 2.1 Leptospira kính hiển vi điện tử Hình 2.2 Đường lây nhiễm mầm Leptospirosis . Hình 2.3 Chó vàng da toàn thân Hình 2.4 Thận chó có nhiều nốt xuất huyết hoại tử trắng . 10 Hình 2.5 Leptospira nhuộm màu đỏ nâu dọc thành ống thận 10 Hình 2.6 Sơ đồ phát Leptospirosis kỹ thuật PCR . 14 Hình 3.1 Sơ đồ chẩn đoán huyết học Leptospirosis 20 Hình 3.2 Sơ đồ pha loãng huyết . 22 Hình 3.3 Các mức độ ngưng kết phản ứng vi ngưng kết 23 Hình 3.4 Sơ đồ nâng cao hiệu giá huyết 24 Hình 4.1 Biểu đồ Tỷ lệ nhiễm Leptospira chó theo địa bàn 25 Hình 4.2 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm Leptospira chó theo lứa tuổi . 27 Hình 4.3 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm Leptospira chó theo phương thức nuôi . 29 vii TÓM LƯỢC Đề tài nghiên cứu "Tình hình nhiễm Leptospira chó tỉnh An Giang" thực thời gian từ 07/2014 đến 10/2014. Mẫu huyết chó thu thập từ hộ dân huyện Chợ Mới, Tịnh Biên thành phố Long Xuyên tỉnh An Giang bao gồm 152 mẫu. Tình hình nhiễm Leptospira chó xác định phản ứng vi ngưng kết (Microscopic Agglutination Test) với 24 chủng kháng nguyên sống Leptospira. Kết ghi nhận sau: Tỷ lệ huyết dương tính với Leptospira chó 20,39% (31/152). Tỷ lệ nhiễm Leptospira huyện Tịnh Biên, Long Xuyên, Chợ Mới 21,15% (11/52); 19,61% (10/51); 20,41% (10/49). Tỷ lệ nhiễm Leptospira chó khác biệt có ý nghĩa thống kê giống, giới tính độ tuổi. Chó nuôi theo phương thức nuôi thả có tỷ lệ nhiễm Leptospira (23,08%) cao nuôi nhốt (4,55%) có ý nghĩa thống kê. Có 13 chủng dương tính tổng số 24 chủng kiểm tra. Các chủng phổ biến bao gồm: L. icterohaemorrhagiae Verdun (27,94%), L. icterohaemorrhagiae copenhagini Wijnberg (19,12%), L. panama panama CZ 214K (13,24%), L. canicola canicola Chiffon (5,88%), L. sejroe hardjo Hardjo Bovis (5,88%). Hiệu giá ngưng kết từ 1/200-1/800, tập trung chủ yếu hiệu giá 1/200 (53,66 %). Chó nhiễm từ 1-4 chủng cá thể, chủng chiếm tỷ lệ cao (51,22%). viii 4.6 Kết định danh chủng Leptospira chó Bảng 4.6 Kết định danh chủng Leptospira Bảng Stt Chủng Leptospira Số mẫu nhiễm Tỷ lệ (%) L. australis australis Ballico - L. autumnalis autumnalis Akiyami A 2,94 L. bataviae bataviae Van Tienen 2,94 L. canicola canicola Hond Utrecht IV - L. ballum castellonis Castellon - L.icterohaemorrhagiae copenhagini Wijnberg 13 19,12 L. pyrogenes pyrogenes Salinem 4,41 L. icterohaemorrhagiae tonkini LT9668 2,94 L.icterohaemorrhagiae icterohaemorrhagiae 19 27,94 10 L. cynopterie cynopterie 3522C - 11 L. gryppotyphosa gryppotyphosa Moskva V 4,41 12 L. sejroe hardjo Hardjo Bovis 5,88 13 L. hebdomadis hebdomadis Hebdomadis 14 L. javanica javanica Veldrat Bataviae 46 2,94 15 L. panama panama CZ 214K 13,24 16 L. semaranga Patoc I 17 L. pomona pomona Pomona 2,94 18 L. tarassovi tarassovi Mitis Johnson - 19 L. tarassovi vughia LT0968 - 20 L. sejroe hardjo Hardjoprajitno - 21 L. sejroe saxkoeboing Mus 24 - 22 L. canicola canicola Chiffon 5,88 23 L. louisian louisian LSU1945 - 24 L. hustbridge hustbridge Hustbridge 4,41 Verdun Tổng số chủng 13 30 Qua bảng 4.6 cho thấy 24 chủng chuẩn viện Pasteur thành phố Hồ Chí Minh cung cấp dùng để chẩn đoán huyết học phát chó nhiễm 13 chủng Leptospira. Trong đó, phổ biến với L. icterohaemorrhagiae Verdun (27,94%), L. icterohaemorrhagiae copenhagini Wijnberg (19,12%), L. panama CZ 214K (13,24%), L. canicola Chiffon (5,88%), L. sejroe Hardjo Bovis (5,88%). Kết nghiên cứu Nguyễn Thị Bé Mười (2008), phát 10 serovar tổng số 12 serovar, serovar chiếm tỷ lệ cao L. hustbridge (36,69%), L .icterohaemorrhagiae (17,16%), L. bataviae (13,61%). Theo nghiên cứu Nguyễn Văn Nhã (2010), kiểm tra huyết chó quanh khu vực trại chăn nuôi. Chó dương tính với 13 chủng tổng số 23 chủng Leptospira. Các chủng chiếm phổ biến: L.icterohaemorrhagiae Tonkini LT9668 (22,7%), L. australis australis Ballico (18,2%). L. canicola canicola chiffon (18,18%). L. icterohaemorrhagiae tìm thấy nhiều quốc gia, chúng xuất hai serovar copenhageni icterohagemorrhagiae. Ký chủ serovar chuột nâu (Rattus norvegicus). Khi chuột nhiễm hai serovar này, chúng phóng thích nước tiểu vào môi trường lây nhiễm cho chó. Theo nghiên cứu Võ Thành Thìn ctv, (2012) phát serovar phổ biến heo panama (19,5%), icterohaemorrhagiae (14,6%). Chó ký chủ thích hợp L. canicola sau lan truyền loài động vật khác. L. sejroe gây bệnh chủ yếu cho trâu bò lây lan vật nuôi khác heo, chó… Từ nhận định kết cho thấy có liên quan loài động vật việc lây nhiễm Leptospira. Tuỳ vào vùng, khu vực thời điểm khảo sát mà số chủng gây nhiễm khác chủng gây nhiễm chính. 4.7 Tỷ lệ nhiễm Leptospira chó theo hiệu giá ngưng kết Bảng 4.7: Tỷ lệ nhiễm Leptospira chó theo hiệu giá ngưng kết Bảng 10 Bảng 11 Hiệu giá Số mẫu dương tính Tỷ lệ (%) 1/200 22 53,66 1/400 15 36,58 1/800 9,76 31 Qua bảng 4.7 cho thấy mức hiệu giá 1:200 chiếm tỷ lệ cao 53,66%, mức hiệu giá 1:800 có mẫu dương tính chiếm tỷ lệ thấp 9,76%. Hiệu giá kháng thể ngưng kết chủ yếu tập trung mức từ 1:200 đến 1:400. Hiệu giá kháng thể phản ánh hàm lượng kháng thể có máu chó. Hiệu giá cao chứng tỏ mức độ nhiễm xoắn khuẩn cao. Kết nghiên cứu phù hợp với kết nghiên cứu Nguyễn Thị Bé Mười (2008), mức hiệu giá 1/200 chiếm tỷ lệ 47,93%, hiệu giá tập trung chủ yếu mức 1/200 1/400. Tuy nhiên kết nghiên cứu lại thấp kết nghiên cứu Hoàng Mạnh Lâm ctv (2002), tỷ lệ dương tính chó hiệu giá ngưng kết kháng thể 1/800 46,3%. 4.8 Cường độ nhiễm chủng Leptospira cá thể Bảng 4.8: Cường độ nhiễm chủng Leptospira cá thể Bảng 12 Số chủng cá thể Tên serovar nhiễm ghép Số mẫu dương tính Tỷ lệ (%) 21 51,22 L. canicola, L. pyrogenes, L. panama, L. hustbridge, L. icterohaemorrhagiae, L. sejroe, L. canicola, L. hustbridge 14 34,15 L. icterohaemorrhagiae, L. panama, L. canicola, L. 12,19 2,44 autumnalis, , L. sejroe L. icterohaemorrhagiae, L. panama, L. canicola, L. gryppotyphosa Từ kết bảng 4.8 cho thấy tổng số 41 mẫu dương tính Leptospira có 21 mẫu huyết ngưng kết với chủng chiếm tỷ lệ cao (51,22%) nhiễm ghép với chủng chiếm tỷ lệ thấp (2,44%). Nhìn chung chó nhiễm phổ biến 1-3 chủng. Tỷ lệ nhiễm giảm dần theo tăng chủng cá thể. Các serovar nhiễm ghép phức tạp chủ yếu serovar gây bệnh phổ biến. Kết phù hợp với nghiên cứu Nguyễn Thị Bé Mười (2008), chó nhiễm phổ biến từ 1-3 serovar. Sự khác biệt số chủng huyết cá thể có ý nghĩa mặt dịch tễ, mặt điều trị không quan tâm áp dụng biện pháp điều trị người ta thường ý đến hiệu giá 32 ngưng kết kháng thể cao hay thấp mà không phân biệt chủng độ nhạy Leptospira kháng sinh gần nhau. Kết phù hợp với nghiên cứu Nguyễn Văn Nhã (2010) chó có 11,9% mẫu có tỷ lệ nhiễm ghép chủng, gồm chủng cá thể. Tỷ lệ thấp kết nghiên cứu, nhìn chung chó nhiễm phổ biến 1-3 chủng. 33 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Tỷ lệ nhiễm bệnh Leptospira chó An Giang 20,39%. Tỷ lệ nhiễm Leptospira chó khác biệt có ý nghĩa thống kê giống, địa bàn, giới tính độ tuổi. Tỷ lệ nhiễm Leptospira chó theo phương thức nuôi thả (23,08%) cao nuôi nhốt (4,55%) có ý nghĩa thống kê. Chó dương tính với 13 chủng tổng số 24 chủng kiểm tra. Trong chủng phổ biến là: L. icterohaemorrhagiae Verdun (27,94%), L.icterohaemorrhagiae copenhagini Wijnberg (19,12%), L. panama panama CZ 214K (13,24%), L. canicola canicola Chiffon (5,88%), L. sejroe hardjo Hardjo Bovis (5,88%). Chó dương tính với Leptospira mức hiệu giá ngưng kết từ 1/200-1/800, hiệu giá 1/200 (53,66 %) chiếm tỷ lệ cao nhất. Chó nhiễm từ 1-4 chủng cá thể, chủng chiếm tỷ lệ cao (51,22%). 5.2 Đề nghị Cần phổ biến kiến thức mạng lưới thú y mức độ nguy hiểm bệnh cho cộng đồng để đưa biện pháp khắc phục thích hợp. Diệt chuột, bảo vệ tốt nguồn nước, thực phẩm, vùng đầm lầy phải khai thông cống rãnh. Phát sớm điều trị động vật nuôi mắc bệnh mang mầm bệnh. Cần tiếp tục thực nghiên cứu với số lượng mẫu lớn nhiều địa bàn, đối tượng chuột, heo, bò, người .để xác định mức độ lây lan loài. Nên áp dụng nhiều biện pháp đại PCR, .trong nghiên cứu để đạt kết xác việc định danh chủng, làm sở cho việc điều chế vaccine phòng bệnh đạt hiệu cao. 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Đỗ Tuấn Anh, 2008. “Leptospirosis”, giảng môn học truyền nhiễm. Học viện Quân y. Hoàng Mạnh Lâm, Đậu Ngọc Hào Đào Xuân Vinh, 2002. Xác định số serovar Leptospira chó, chuột người Đaklak. Tạp chí khoa học kĩ thuật thú y, tập IX, số 1, pp 13-18. Hồ Thị Việt Thu, Nguyễn Đức Hiền, 2012. Giáo trình bệnh truyền nhiễm gia súc gia cầm. NXB Đại học Cần Thơ, pp 61-66. Lê Đăng Hà, 2011. Bệnh truyền nhiễm nhiệt đới. Nhà xuất Khoa học Kĩ thuật Hà Nội, pp 550-575. Lê Huỳnh Thanh Phương, 2001. Tình hình nhiễm Leptospira chó số địa phương phía Bắc Việt Nam biện pháp phòng trị. Luận án tiến sĩ nông nghiệp. Đại học Nông Nghiệp I. Lê Văn Hùng, 2002. Miễn dịch học. Tủ sách trường Đại học Nông Lâm TP.Hồ Chí Minh. Phạm Sỹ Lăng, Hoàng Văn Năm, 2012. Bệnh truyền lây từ động vật sang người, Nhà xuất Nông nghiệp Hà Nội. Nguyễn Lương, 1997. Dịch tể học thú y tập II phần chuyên bệnh. Tủ sách Đại học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh. Nguyễn Bá Hiên, Huỳnh Thị Mỹ Lệ, 2013. Bệnh truyền nhiễm động vật nuôi biện pháp khống chế. NXB Nông Nghiệp. Nguyễn Như Thanh, 1997. Vi sinh vật thú y. NXB Nông Nghiệp Hà Nội, pp 148-156. Nguyễn Như Thanh, 2001. Vi sinh vật thú y. NXB Nông Nghiệp Hà Nội. Nguyễn Thị Bé Mười, 2008. Tình hình nhiễm Leptospira chó Thành phố Cần Thơ. Luận văn thạc sĩ Thú y. Khoa NN&SHƯD. Trường Đại học Cần Thơ. Nguyễn Văn Nhã, 2010. Điều tra tình hình nhiễm Leptospira chuột chó xung quanh trại chăn nuôi Công ty cổ phần thuỷ sản Sông Hậu. Luận văn tốt nghiệp đại học khoa Nông Nghiệp. Đại học Cần Thơ. 35 Nguyễn Vĩnh Phước, 1977. Vi sinh vật thú y tập II. Tủ sách trường Đại học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh, pp 310-328. Tiêu chuẩn Việt Nam, 2011. Bệnh động vật – Quy trình chẩn đoán – Phần 15: Bệnh xoắn khuẩn Leptospira. TCVN 8400-15:2011. Trần Thanh Phong, 1996. Một số bệnh truyền nhiễm chó. Tủ sách trường Đại học Nông Lâm. TP. Hồ Chí Minh. Võ Lê Chi, 2012. Ứng dụng kỹ thuật PCR để chẩn đoán Leptospirosis lợn Đắk Lắk Bình Định. Luận văn đại học Công nghệ Sinh học. Đại học Nha Trang. Võ Thành Thìn, Đào Duy Hưng, Đặng Văn Tuấn, Phạm Trung Hiếu Lê Thắng, 2012. Tình hình nhiễm Leptospira lợn nái Khánh Hoà. Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, XIX (5): 55-59. Tiếng Anh Carter, G.R., 1984. Diagnosic Procedures interrogans Veterinary Bacteriology and Mycology, Charles Thomas Publisher Springfrdd illinois. USA. Faine, S., Adler B., C. Bolin, and P. Perolat, 1999. Morphology and chemical compostion. In: Leptospira and Leptospirosis, 2nd edition. MediSci, Melbourne, Australia, pp 17 – 28. Johnson, R.C., and S. Faine. 1984. Leptospira, p. 62-67. In N. R. Krieg and J. G. Holt (ed.), Bergey’s manual of systematic bacteriology, vol. 1. Williams & Wilkins, Baltimore, Md. Kmety, E., and H. Dikken. 1993. Classification of the species Leptospira interrogans and history of its serovars. University Press Groningen, Groningen, The Netherlands. Krawezyk, M., 2005. Serological evidence of Leptospirosis in animals in northern Poland. Veterinary Record, 156, pp 88-89. Prescott, J.F., 2008. Canine Leptospirosis in Canada: A veterinarian’s perspective. Canadian Medical Association Journal, 178(4), pp 397-398. Richard, E.G., C.L. Rebecca, E.L. Catherine, V.S. Peter, N.E. Hollis and C.B. Stephen, 2006. Influence of infecting Serogroup on Clinical Features of Leptospirosis in Dogs. Journal of Veterinary Internal Medicine. 20(3), pp 489494. 36 Scanziani, E., F Origgi, A.M. Giusti, G. Iacchia, A. Vasino, G. Pirovano, P. Scarpa and S. Tagliabue, 2002. Serological survey of leptospiral infection in kennelled dogs in Italy. Journal Small Anim Practice, 43(4), pp 154-157. Stoyanova, N., N. Tokarevich, L. Gracheva, G. Volkova, N. Gracheva, S. Kravchenko, N. Kuvina, T. Liseeva, E. Matsievskaya, V. Pyanukh, V. Snegiriov and V. Sosnitsky, 2004. Leptospirosis in North-West Russia, 3, pp 12-15. Ward, M.P., 2002. Clustering of reported cases of leptospirosis among dogs in United States and Canada, 56, pp 215-256. 37 PHỤ CHƯƠNG Phụ lục A BỆNH ÁN THEO DÕI TRÊN CHÓ Ngày ……… tháng ……. Năm 2014 Số phiếu: ………………………. I. THÔNG TIN Tên chủ vật nuôi: . Địa chỉ: …………………………………… Điện thoại: .…………… Tên chó: …………… ……… Giống: …… …… Giới tính……… Tuổi…………… ; Trọng lượng…………………… Thời gian biểu bệnh……………. ; Bệnh tiến triển nhanh hay chậm:… Tiêm ngừa bệnh: …………………… ; Chủng:……… .…… Ngày tiêm ngừa: ; Lịch tẩy ký sinh trùng:…… … II. KHÁM LÂM SÀNG Phương thức nuôi: Thức ăn: thả nhốt TĂ gia đình hỗn hợp thức ăn bổ sung Ăn: ăn nhiều ăn bỏ ăn Uống: uống nhiều uống bình thường có không Diệt chuột: Nuôi động vật khác: Trạng thái dinh dưỡng: heo bò mập mèo ốm sụt cân VI. THÔNG TIN KHÁC 38 Phụ lục B MỘT SỐ HÌNH ẢNH Hình 1. Lấy máu từ tĩnh mạch chân chó Hình 2. Thực phản ứng vi ngưng kết 39 Đọc kết kính hiển vi tụ quang đen vật kính 10X Hình 3. Phản ứng âm tính Hình 4. Ngưng kết 1+ Hình 5. Ngưng kết 2+ 40 Phụ lục C Kết xử lý thống kê chương trình MINITAB 13.0 1. Tỷ lệ nhiễm Leptospira theo địa bàn Âm tính Dương tính Chợ Mới 41 11 Long Xuyên 41 10 Tịnh Biên 39 10 Huyện Chi-Square Test: Âm tính. Dương tính Expected counts are printed below observed counts Âm tính Dương tính 41 11 41,39 10,61 41 10 40,60 10,40 39 10 39,01 9,99 Total 121 31 Total 52 51 49 152 Chi-Sq = 0,004 + 0,015 + 0,004 + 0,015 + 0,000 + 0,000 = 0,038 DF = 2, P-Value = 0,981 Kết quả: Tỷ lệ nhiễm Leptospira theo địa bàn khác ý nghĩa thống kê (P=0,981>0,05) 41 2. Tỷ lệ nhiễm Leptospira theo giống Giống chó Số mẫu xét nghiệm Số mẫu dương tính Chó ta 91 19 Chó lai 61 12 Chi-Square Test: Âm tính. Dương tính Expected counts are printed below observed counts Âm tính Dương tính 72 72,44 49 48,56 Total 121 19 Total 91 18,56 12 61 12,44 31 152 Chi-Sq = 0,003 + 0,010 + 0,004 + 0,016 = 0,033 DF = 1, P-Value = 0,856 Kết quả: Tỷ lệ nhiễm Leptospira theo giống khác ý nghĩa thống kê (P=0,856>0,05) 42 3. Tỷ lệ nhiễm Leptospira theo lứa tuổi Âm tính Dương tính 3-6 năm tuổi 17 >6 năm tuổi Lứa tuổi Chi-Square Test: Âm tính. Dương tính Expected counts are printed below observed counts Âm tính Dương tính 31 31,05 67 67,66 17 16,72 5,57 Total 121 Total 39 7,95 18 85 17,34 21 4,28 1,43 31 152 Chi-Sq = 0,000 + 0,000 + 0,007 + 0,025 + 0,005 + 0,019 + 0,033 + 0,128 = 0,217 DF = 3, P-Value = 0,975 cells with expected counts less than 5,0 Kết quả: Tỷ lệ nhiễm Leptospira theo lứa tuổi khác ý nghĩa thống kê (P=0,975>0,05). 43 4. Tỷ lệ nhiễm Leptospira theo giới tính Giới tính Số mẫu xét nghiệm Số mẫu nhiễm Tỷ lệ(%) Đực 77 15 19,5 Cái 75 17 22,7 Chi-Square Test: Âm tính. Dương tính Expected counts are printed below observed counts Âm tính Dương tính 62 15 60,79 16,21 58 59,21 Total 120 17 Total 77 75 15,79 32 152 Chi-Sq = 0,024 + 0,09 + 0,025 + 0,093 = 0,232 DF = 1, P-Value = 0,630 Kết quả: Tỷ lệ nhiễm Leptospira theo giới tính khác ý nghĩa thống kê (P=0,630>0,05). 44 5. Tỷ lệ nhiễm Leptospira theo phương thức nuôi Phương thức nuôi Số mẫu âm tính Số mẫu nhiễm Nuôi thả 100 30 Nuôi nhốt 21 Chi-Square Test: Âm tính. Dương tính Expected counts are printed below observed counts Âm tính Dương tính 100 103,49 21 17,51 Total 121 30 Total 130 26,51 22 4,49 31 152 Chi-Sq = 0,117 + 0,459 + 0,694 + 2,710 = 3,980 DF = 1, P-Value = 0,046 cells with expected counts less than 5,0 Kết quả: Tỷ lệ nhiễm Leptospira theo phương thức nuôi khác có ý nghĩa thống kê (P=0,046[...]... dẫn, chúng tôi thực hiện đề tài: Tình hình nhiễm Leptospira trên chó tại tỉnh An Giang Mục tiêu đề tài - Xác định tình hình nhiễm Leptospira trên chó tại An Giang - Xác định ảnh hưởng của các yếu tố địa bàn, giống, giới tính, lứa tuổi, phương thức nuôi đối với tỷ lệ nhiễm Leptospira 1 CHƯƠNG 2 CƠ SỞ LÝ LUẬN 2.1 Giới thiệu về bệnh do Leptospira 2.1.1 Đặc điểm của Leptospira Phân loại học - Lớp Schizomycetes... CỨU 3.1 Nội dung nghiên cứu - Xác định tình hình nhiễm Leptospira trên chó tại An Giang Xác định tỷ lệ nhiễm Leptospira trên chó theo địa bàn, giống, nhóm tuổi, giới tính, phương thức nuôi 3.2 Phương tiện nghiên cứu 3.2.1 Thời gian và địa điểm Thời gian: từ tháng 7 đến tháng 10 năm 2014 Địa điểm: - Thu thập mẫu huyết thanh ở các hộ dân trên địa bàn của tỉnh An Giang bao gồm các huyện Tịnh Biên, Chợ Mới... Leptospira trên chó tại An Giang Bảng 4.1: Tỷ lệ nhiễm Leptospira trên chó tại An Giang 4 Số mẫu xét nghiệm Số mẫu dương tính Tỷ lệ (%) Tịnh Biên 52 11 21,15 Long Xuyên 51 10 19,61 Chợ Mới 49 10 20,41 Tổng cộng 152 31 20,39 Địa bàn Hình 7 Hình P 0,981 4.1 Biểu đồ Tỷ lệ nhiễm Leptospira trên chó theo địa bàn Qua bảng 4.1 cho ta thấy trong 152 mẫu khảo sát thì có 31 mẫu huyết thanh chó dương tính với Leptospira, ... quả trên thấp hơn nghiên cứu của Nguyễn Thị Bé Mười (2008), tỷ lệ nhiễm Leptospira trên chó tại thành phố Cần Thơ là 21,33% Tuy nhiên không có sự khác biệt về tỷ lệ nhiễm Leptospira giữa 2 địa phương trên có thể là do An Giang và Cần Thơ là 2 tỉnh giáp nhau có mối tương đồng về khí hậu, chăm sóc nuôi dưỡng vật nuôi Theo nghiên cứu của Lê Huỳnh Thanh Phương (2001), tỷ lệ nhiễm Leptospira trên chó tại. .. số dân nhiều nhất tỉnh An Giang Chó chủ yếu được nuôi thả, vì vậy tỷ lệ nhiễm Leptospira ở đây tương đối cao Kết quả trên phù hợp nghiên cứu Lê Huỳnh Thanh Phương (2001) Tỷ lệ nhiễm Leptospira ở vùng đồng trũng chiếm tỷ lệ cao nhất (28,94%), thành phố và vùng phụ cận chiếm tỷ lệ thấp nhất (18,89%) 4.2 Tỷ lệ nhiễm Leptospira trên chó theo giống Bảng 4.2: Tỷ lệ nhiễm Leptospira trên chó theo giống5 Số... nghiên cứu trên 1.035.366 con chó ở Mỹ và Canada Kết quả phát hiện 33% chó dương tính với Leptospira Chó dưới 1 năm tuổi nhiễm 21%, từ 1-2 năm tuổi nhiễm 11% từ 2-4 năm tuổi nhiễm 17%, 4-7 năm tuổi tỷ lệ nhiễm là 19%, 7-10 năm tỷ lệ nhiễm 16%, còn trên tỷ lệ nhiễm là 17% Theo giới tính thì chó đực dương tính với Leptospira tỷ lệ 31%, chó cái 22% Richard et al (2006) đã kiểm tra 55 mẫu huyết thanh chó ở... (Levett, 2001) Trong đó chó là động vật rất mẫn cảm, gần gũi với con người Ở Việt Nam thịt chó còn là món ăn yêu thích của nhiều người Vì thế các bệnh lây truyền từ chó sang người cần được quan tâm, trong đó có bệnh do Leptospira gây ra An Giang là một tỉnh thuộc đồng bằng sông Cửu Long thường xảy ra lũ lụt, là điều kiện thích hợp để xoắn khuẩn Leptospira lây lan Xuất phát từ tình hình trên và được sự đồng... Cai, Nghệ An, Yên Bái Tỷ lệ dương tính với Leptospira lần lượt là: bò 38%, trâu 35,1%, heo 22,9%, chó 26,47%, công nhân chăn nuôi 56% (Nguyễn Như Thanh, 1997) Lê Huỳnh Thanh Phương (2001) đã nghiên cứu tình hình nhiễm Leptospira trên chó tại một số địa phương miền Bắc Việt Nam Kết quả có 437 mẫu dương tính trong tổng số 1729 chiếm tỷ lệ 25,3% Các serovar có tỷ lệ nhiễm cao là L bataviae, L canicola,... sống, thời gian nghiên cứu 25 Khi so sánh theo địa bàn cho thấy tỷ lệ nhiễm Leptospira trên chó ở Tịnh Biên cao nhất là 21,15%, chó ở Long Xuyên có tỷ lệ nhiễm thấp nhất là 19,61% Tuy nhiên sự khác biệt giữa các địa bàn không có ý nghĩa thống kê (P=0,981) Tỷ lệ nhiễm trên chó ở Tịnh Biên cao hơn so với các địa phương khác có thể được giải thích do Tịnh Biên là một huyện vùng biên giới, có địa hình vừa... xúc với chuột và các chất chứa mầm bệnh là như nhau nên sự cảm nhiễm không có sự khác biệt giữa hai nhóm chó ta và chó lai Theo nghiên cứu của Nguyễn Văn Nhã (2010) ở xung quanh trại chăn nuôi, tỷ lệ nhiễm Leptospira ở giống chó ta là 38,89%, giống chó lai là 50% Tỷ lệ nhiễm trên hai nhóm chó ta và chó lai đều cao hơn kết quả chúng tôi nghiên 26 . Leptospira trên chó là 20, 39% (31/152). Tỷ lệ nhiễm Leptospira giữa các huyện Tịnh Biên, Long Xuyên, Chợ Mới lần lượt là 21,15% (11/52); 19, 61% (10/ 51); 20,41% (10/ 49) . Tỷ lệ nhiễm Leptospira. lỏng có từ 5 -10% huyết thanh thỏ tươi có độ pH 7,2-7,6, nhiệt độ 28-30 0 C và giàu oxy. Xoắn khuẩn mọc chậm sau 6 -10 ngày mới phát triển có khi đến 3 tháng (Nguyễn Như Thanh, 199 7). Việc nuôi. Panama 5 Canicola 18 Pomona 6 Celledoni 19 Pyrogenes 7 Cynopteri 20 Ranarum 8 Djasiman 21 Sarmin 9 Grippotyphosa 22 Sejroe 10 Hebdomadis 23 Shermani 11 Icterohaemorrhagiae