Khảo sát hàm lượng vitamin b12 trong một số chế phẩm vitamin sản xuất trong nước đang lưu hành trên thị trường hà nội

p m BỘ Y T Ế TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI • • • • ****** NGUYỄN ĐỨC HỒNG LONG KHẢO SÁT HÀM LƯỢNG VITAMIN Bj2 TRONG MỘT SỐ CHẾ PHẨM VITAMIN SẢN x u ẤT TRONG Nước ĐANG LƯU HÀNH TRÊN THI TRƯỜNG HÀ NƠI ( KHỐ LUẬN TÓT N G p i^ Đ ^ C sĩ KHÓA 2000-2005 ) m m m Người hướng dẫn : TÍCH TH.S NGUYỄN LÂM HỔNG Nơi thực : BỘ MÔN HỐ PHÂN TÍCH - ĐỘC CHẤT ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI Thời gian thực : 2/2005 ĐẾN 5/2005 Hà Nội 5-2005 ỈÊ m LỜI eĂm 0H Với lòng biết ơn sâu sắc xin bày tỏ lời cảm ơn đến thầy TRẦN t íc h TH.S NGUYỄN THỊ KlỀU ANH - TH.S NGUYỄN l ầ m HỒNG - thầy tận tình hướng dẫn tơi thực khố luận Tơi xin chân thành cảm ơn thầy, giáo mơn Hố Phân Tích - Độc Chất tồn thể mơn, Ban Giám Hiệu trường ĐH Dược Hà Nội giúp đỡ tạo điều kiện đ ể tơi hồn thành khố luận Do thời gian hạn c h ế nên khố luận khơng thể tránh khỏi thiếu sót, mong đóng góp ý kiến thầy cơ, bạn bè đ ể khố luận tơi hồn thiện Tơi xỉn chán thành cảm ơn Hà Nội, ngày 26 tháng năm 2005 Sinh viên NGUYỄN ĐỨC HOÀNG LONG MỤC LỤC Lời cảm ơn Đặt vấn đ ề Phần 1: Tổng quan - 1.1 Tmh hình chất lượng số viên chứa Vitamin B|, Bg, Bị2 lưu hành thị trường Việt Nam - - -3 1.1.1 Tinh hình chất lượng số thuốc chứa Vitamin B|, Bj công ty nước -3 1.1.2 Tinh hình chất lượng số thuốc chứa Vitaminh B|, Bg, B |2 sản xuất nước 1.2 Tổng quan Cyanocobalamin (Vitamin B 12) 1.2.1 Công thức phân tử - cấu tạo 1.2.2 Tính chất hóa lý 1.2.3 Tác dụng dược lý - 1.3 Các tiêu đánh giá hàm lượng vitamin B - - 1.4 Các phương pháp tiến hành để định lượng Vitamin B |2 -7 4.1 Phương pháp quang phổ tử ngoại khả kiến 1.4.2 Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) - Phần 2: Đối tượng, phương tiện, nội dung, phương pháp nghiên cứu 16 2.1 Đối tượng nghiên cứu 16 2.2 Phương tiện nghiên cứu - - - 16 2.3 Nội dung phương pháp nghiên cứu - —17 2.3.1 Cách lấy mẫu - - 17 2.3.2 Lựa chọn điều kiện sắc ký lỏng hiệu cao - 17 2.3.3 Áp dụng điều kiện chọn để định lượng Vitamin Bị2 số chế phẩm Vitamin - - 17 2.4 Phương pháp xử lý số liệu - - - - -— 18 Phần 3: Kết nghiên u -20 3.1 Mẫu dùng để định lượng - 20 3.2 Khảo sát chọn điều kiện sắc ký - 20 3.2.1 Khảo sát chọn điều kiện sắc k ý 20 3.2.2 Khảo sát độ phù hợp hệ thống sắc ký - - 22 3.2.3 Khảo sát phụ thuộc tuyến tính diện tích pic với nồng độ 22 3.2.4 Khảo sát độ xác phưcmg pháp 23 3.2.5 Khảo sát độ phương pháp sắc k ý 24 3.3 Kết định lượng — - - 25 3.3.1 Độ đồng hàm lượng B |2 chế phẩm thuốc viên 25 3.3.2 Định lượng Bị2 chế phẩm thuốc viên - 27 3.3.3 Định lượng B |2 chế phẩm thuốc tiêm 33 Bàn luận 34 Phần 4: Kết luận đề x u ấ t 35 4.1 Kết luận 35 4.2 Đề xuất - 36 Tài liệu tham khảo DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT CtyCP : Công Ty CỔ Phần Cty : Công ty HPLC: High-Performance Liquid Chromatography - HPLC p : page PA : Tinh khiết phân tích SDK : SỐ Đăng Ký TCCL: Tiêu chuẩn chất lượng TNHH : Trách nhiệm hữu hạn TP : Thành phố TW : Trung ương VKN : Viện Kiểm Nghiệm ĐẶT VẤN ĐỂ Trong thời gian gần đây, tình hình chất lưcmg thuốc coi vấn đề xúc không riêng ngành Dược mà nhiều ban ngành, tổ chức toàn dân Thuốc chất lượng gây hậu lớn đến sức khoẻ bệnh nhân, ảnh hưởng xấu đến kết điều trị, gây thiệt hại kinh tế, làm giảm uy tín nhà sản xuất Theo thống kê Viện kiểm nghiệm, Bộ y tế, từ năm 2001 đến năm 2004 thuốc không đạt tiêu chuẩn chất lượng chiếm tỷ lệ cao, khoảng 3%-10% tổng số mẫu kiểm nghiệm Trong tổng số chế phẩm thuốc bị rút giấy phép đăng ký có 30% thuốc khơng đạt tiêu chuẩn chất lượng [6 , 25] Trong mặt hàng thuốc chế phẩm viên có chứa loại Vitamin B|, Bộ, B |2 loại thuốc có nhiều vi phạm tiêu chuẩn chất lượng thuốc Điều không xảy thuốc sản xuất nước mà xảy thuốc ngoại nhập hãng tiếng giới Hàng năm, có tới hàng trăm lơ thuốc Viamin khơng đạt tiêu chuẩn chất lượng bị đình lưu hành thị trường Việt Nam [6 ] Trong đó, việc tiến hành kiểm tra cách có hệ thống, tồn diện chất lượng thuốc thị trường chưa đựợc tiến hành Viện kiểm nghiệm, Bộ y tế, trung tâm kiểm nghiệm kiểm tra chất lượng thuốc mẫu sở sản xuất tự mang đến mẫu đoàn tra gửi Số lượng mẫu thuốc kiểm tra năm chiếm khoảng 50% tổng số mặt hàng thuốc lưu hành thị trường [6 ] Xuất phát từ thực tế đó, với mong muốn có đánh giá tồn diện vấn đề chất lượng số sản phẩm thuốc Vitamin 3B lưu hành Việt Nam để từ có đề xuất cho công tác quản lý, sản xuất Doanh nghiệp nước tiến hành thực khoá luận: "Khảo sát hàm lượng Vitamin Bị2 số chề phấm Vỉtamiĩi sản xuất nước lưu hành thị trường Hà Nội " Khóa luận thực với mục tiêu sau: 1, Lựa chọn phương pháp lấy mẫu, khảo sát điều kiện định lượng Vitamin B j phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao Áp dụng điều kiện khảo sát để xác định hàm lượng Vitamin B |2 số chế phẩm vitamin 3B công ty nước lưu hành thị trường Hà Nội PHẦN 1: TỔNG QUAN 1.1 TÌNH HÌNH CHẤT LƯỢNG MỘT s ố THUỐC VIÊN CHỨA VITAMIN Bi, Bé, B i2 đ a n g LUU h n h t i v iệ t n a m 1.1.1 Tình hình chất lượng số thuốc chứa Vitamin B 5, B 12 cơng ty nước ngồi: Hiện nay, thị trưịỉng thuốc Việt Nam, sản phẩm vitamin 3B nhập cơng ty nước ngồi chiếm tỷ lệ lớn, chủ yếu hãng Dược phẩm có tên tuổi giới Phần lớn, chế phẩm vitamin 3B cơng ty nước ngồi chứa hàm lượng hoạt chất B |2 cao, [7, 14] , với cơng thức bào chế thưịỉng là: Thiamin hydroclorid 250mg Pyridoxin hydroclorid 250mg Cyanocobalamin lOOOmcg Trong vài năm gần đây, tình hình chất lượng thuốc nhập tăng lên đáng kể.Theo báo cáo tổng kết công tác kiểm nghiệm năm 2004 VKN, tổng số 5.865 mẫu thuốc nhập lấy để kiểm tra chất lượng có 78 số mẫu khơng đạt TCCL, chiếm 1,33% (so với năm 1999 7,8%) Tuy nhiên, số chế phẩm không đạt TCCL, chế phẩm vitamin 3B vãn chiếm tỷ lệ cao (khoảng 10% so với tổng số mẫu 3B lấy để kiểm nghiệm), tất hàm lượng vitamin Bị2 thấp so với tiêu chuẩn [6 , 25] 1.1.2 Tình hình chất lượng sơ thuốc chứa Vitamin Bi, Bg, B 12 sản xuất nước Hiện nay, chế phẩm vitamin 3B sản xuất nước ngày chiếm tỷ lệ lớn thị trường Từ năm 2001 đến năm 2005, có khoảng 27 chế phẩm vitamin 3B cơng ty, xí nghiệp cấp số đăng ký lưu hành Tuy nhiên, chất lượng thuốc công ty nước so với thuốc nhập có chênh lệch lớn Tỷ lệ thuốc nước không đạt TCCL cao gấp 2,5 so với thuốc nhập Chất lượng thuốc cơng ty nước có khác thuốc xí nghiệp trung ương với công ty cổ phần, công ty TNHH sỏ đạt GMP với sở chưa đạt GMP Vài năm gần nhiều văn thông báo thu hồi thuốc Bộ y tế lơ thuốc xí nghiệp nước cơng bố tạp chí chun ngành : - Văn số 4478/QLD ngày 5-9-2000 việc thu hồi lô thuốc bao phim Vitamin B„ Bộ, B ,2 có SKS: 24070500-05.02, SDK: QY-K7-47-97 xí nghiệp 30-Cty đầu tư Miền Đơng-Bộ Quốc Phịng (SAP) thuốc không đạt chất lượng hàm lượng B |2 [9] - Thông báo số 7086/QLD ngày 18/12/00 việc thu hồi thuốc Vitamin Bị, Bg, Bj lô số 030400, Xí nghiệp Dược phẩm TW 25 khơng đạt TCCL hàm lượng B |2 [2 ] - Thông báo thu hồi thuốc số 4477/QLD 5/9/2000 sản phẩm Edphavit có SKS 160600-1201 Cty Dược phẩm Quận TP Hồ Chí Minh [21] - Thơng báo số 7111/QLD-CL ngày 5/11/03 việc thu hồi thuốc Tribf (viên bao phim Vitamin Bị, Bg, B 12) lô số 010203 CTCP Hố Dược Phẩm Mekophar [22] Điều chứng tỏ chất lượng thuốc sản xuất nước có nhiều vấn đề cần quan tâm Hầu hết, chế phẩm vitamin 3B sản xuất nước thường có hàm lượng dược chất sau [14]: Thiamin mononitrat 125 mg ( thiamin hydroclorid ) Pyridoxin hydroclorid 125 mg Cyanocobalamin 125mcg Một số chế phẩm sở, xí nghiệp khác lại chứa hàm lượng Cyanocobalamin thấp hơn, như: CTCP Dược phẩm Hà Tây viên nén Vitamin B|, B|2, Bg bao phim chứa 50 mcg B,2, Cty Dược vật tư y tế Phú Thọ viên nén Vitamin có hàm lượng Cyanocobalamin 10 mcg [7, 14] Một số chế phẩm 3B thường gặp khác: Medtri - B Qy Dược phẩm TW Huế; TRIBF Xí nghiệp Dược phẩm TW - 24; Triovit B xí nghiệp Dược phẩm TW 25; TrivitaBF Qy CPDP - Dược liệu (Pharmedic); Vitamin B1-B6-B12 QyCP Dược phẩm Dược Liệu Mekong (Mekopharma); Newcobex Qy dược vật tư y tế Phú Thọ [7, 8,14] 1.2 TỔNG QUAN VỀ CYANOCOBALAMIN (VITAMIN B 12) [1,8, 14, 28, 29, 30,31], 1.2.1 Công thức phân tử - cấu tạo Công thức vitamin B |2 phức tạp, chủ yếu gồm hai thành phần nucleotit phần cobamin, nối với qua mạch isopropanol M ,CO Crl- H C*rU C 'rU MHjCOQI -CHjCHjCOMHj bl^CHjCOM H^ i ' O IjCH jCO M H CH j— ộ CH, ‘3 0— ì ‘— o ~ H o •'CrljOH Hình 1.1 Công thức cấu tạo Vitamin Bị2 Công thức phân tử: Cộ2H88CoNị3 ị4P; p.t.l: 1329,36 +x Tên khoa học: a-(5,6-dimethylbenzimidazol-l-yl) cobamid (cyanid;hydroxyd ) Tỷ lệ nguyên tố phân tử: c 55.83%, H 6.54%, Co 4.35%, N 14.47%, o 16.53%, p 2.29% đến vạch Dung dịch thử đem đo HPLC điều kiện với dung dịch chuẩn Bảng 5: Kết khảo sát độ phương pháp Chuẩn thêm Lượng chuẩn vào (i^g) tìm lại (^Ig) 0 19.77 98.87 2 0 20.15 100.75 0 19.89 99.45 0 19.95 99.72 0 19.83 99.73 0 20.19 100.93 STT % Tìm lại Giá trị trung bình Giá trị thống kế Độ lệch chuẩn tương đối Khoảng tin cậy X = 99.75 % RSD% = 0.79% X ± taSx = 99.75 ± 0.83 (n = 6, a = 0.95, ta = 2.57) Nhận xét: Kết cho thấy tỷ lệ thu hồi trung bình khoảng 99.75%, độ lệch chuẩn tương đối RSD% = 0.79% < < 2% Như vậy, chứng tỏ phương pháp khảo sát áp dung để định lượng Bi2 chế phẩm Vitamin 3B 3.3 KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG Áp dụng điều kiện khảo sát để xác định độ đồng hàm lượng định lượng Vitamin Bi2 chế phẩm 3B số cơng ty, xí nghiệp nước 3.3.1 Độ đồng hàm lượng Bi2 chế phẩm thuốc viên + Để xác định độ đồng hàm lượng vitamin Bi2 lô chế phẩm, chúng tơi tiến hành làm thí nghiêm; đo riêng lẻ khối lượng 10 viên nén bao phim llơ chế phẩm 3B, bóc vỏ bao phim nghiền thành bột viên, bột mịn cho vào bình định mức 25ml Sau cho nước cất vừa đủ, lắc kỹ đem ly tâm 5phút Hút xác 5ml phần dịch sau ly tâm, cho vào bình định mức lOml, thêm nước vừa đến vạch Lắc kỹ, lọc qua màng lọc 0,45 I^m tiến hành tiêm vào máy sắc ký HPLC Ghi giá trị diện tích pic thu sắc ký đồ mẫu chuẩn mẫu thử tương ứng Tính phần trăm hàm lượng B |2 có mẫu thử dựa chuẩn Bj2 biết hàm lượng theo công thức mục 2.2.3 > Kết khảo sát đô đồns hàm lươns trons ch ế phẩm vitamin Bảng 6: Kết khảo sát độ đồng hàm lượng Vitamin Bj2 STT Tên Công ty CT dược phẩm TW Huế: SDK VNA-4110-01 XN dược phẩm TW25 SDK; VNA-0548-03 CTCP dược phẩm Bến Tre SDK VNA-4747-02 CTCP dược phẩm Hà Tây SDK VNB-1110-02 CT dược-Vật tư y tế Cửu Long SDK V711-H12-05 CT dược-Vật tư y tê Phú Thọ SDK VNA-0639-03 Lô thứ Lô thứ Lô thứ Lô thứ Hàm lượng (%) Hàm lượng (%) Hàm lượng (%) Hàm lượng (%) SL; 090404 SL: 320904 SL: 441104 SL:461104 98.44% -102.95% 95.15% -100.20% 94.75% - 97.32% 92.12% - 95.45% SL: 010204 SL: 020704 SL: 031004 SL:051204 95.52% -100.13% 97.43% -102.22% 98.72% -102.12% 96.34% - 99.52% SL: 2400 SL: 2410 SL: 2550 SL: 2510 99.83% -104.72% 99.92% -106.34% 100.18%-104.26% 97.82% -101.15% SL: 301104 SL:741104 SL: 480105 SL: 560105 93.32% - 99.65% 94.23% - 99.81% 94.17% - 100.05% 94.25% - 98.33% SL: 1071203 SL: 1081203 SL: 1301203 SL: 0140804 22.32% - 25.01% 18.27% - 20.43% 31.01% - 32.83% 98.18% -102.76% SL: 01 SL: 04 SL: 05 SL: 07 92.65% - 96.09% 94.71% -101.12% 97.51% -101.01% 97.31% -102.89% Khoảng giới hạn TCCL : 85% -115% Nhận xét: Bảng kết cho thấy, 24 lơ thuốc cơng ty xí nghiệp khảo sát, có lơ thuốc Cty Dược- vật tư y tế Cửu Long không đạt TCCL độ đồng hàm lượng Vitamin Bj Các lơ thuốc khơng đạt có hạn dùng đến 12-2005 Chỉ có lơ thuốc 0140804 có hạn dùng đến 08-06 đạt TCCL độ đồng hàm lượng Bj 3.3.2 Định lượng Bi2 chế phẩm thuốc viên Tiến hành: pha dung dịch chuẩn dung dịch thử phần khảo sát độ xác phương pháp Mỗi mẫu thử làm lần Kếtquả tính tốn làm tương tự trên, ta thu đựơc kết sau > Kết đinh lươns ch ế phẩm côns ty - xí nshiêp: • Vcd chế phẩm 3B CtyCP Dược phẩm Bến Tre, có a )K : VNA-0548-03, hàm lượng ưên viên Bgi Bj: B ,2 = 125mg: 125mg: 125mcg Bảng : Kết định lượng Vitamin Bj2 Hàm Lượng % (kl/kl) Lô Giá trị thống kê x = 102.32% 2400 (HD: 11-06) 102.12 102.63 102.10 102.79 101.95 s = 0.37 RSD%= 0.36% x = 105.73% 2410 (HD: 11-06) 106.92 104.49 105.90 105.94 105.39 s = 0.88 RSD%= 0.84% x = 100.1% 2510 (HD: 12-06) 100.20 98.99 99.62 100.93 100.78 s = 0.81 RSD%= 0.81% x = 103.27% 2550 (HD: 01-07) 103.25 103.74 103.41 104.10 101.88 s = 0.85 RSD%= 0.82% Nhận xét: Kết định lượng Vitamin Bị2 bảng cho thấy, hàm lượng Vitamin B |2 viên đạt khoảng từ 100% - 105%, với độ lệch chuẩn tương đối RSD « 2% Kết cho thấy chế phẩm viên nén 3B Bến Tre đạt TCCL hàm lượng Bị2 • Với chế phẩm Medtri-B Xí nghiệp Dược phẩm TW Huế, có SDK: VNA-4110-01, hàm lượng viên Bgi B,: B |2 = 125mg: 125mg: 125mcg Bảng : Bảng kết định lượng Vỉtamin Bị2 Hàm Lượng % (kl/kl) Giá trị thống kê x = 101.21 090404 (HD: 04-06) 101.05 100.35 101.56 100.37 102.73 s = 0.99 RSD%= 0.97% X = 91.13 320904 (HD: 09-06) 96.61 98.46 97.68 97.69 95.21 s = 1.26 RSD%= 1.29% ^ = 441104 (HD: 11-06) 95.23 97.67 95.32 96.10 95.20 s = 0.99 RSD%= 1.03% 93.41 461104 (HD: 11-06) 94.17 94.26 93.72 92.36 92.51 s = 0.91 RSD%= 0.98% Nhận xét: Kết định lượng cho thấy lơ thuốc có hàm lượng Vitamin Bj so với hàm lượng ghi nhãn nằm khoảng từ % đến 97%, sai số tương đối nhỏ Chế phẩm viên nén Medtri- B TW Huế đạt TCCL hàm lượng Bijtheo qui định • Với chế phẩm 3B CtyCP Dược phẩm Hà Tây có SDK: VNB-1110-02, hàm lượng viên Bg: Bj: B |2 = 115mg: 115mg: 50mcg Bảng : Bảng kết vê định lượng Vitamin B Hàm Lượng % (kl/kl) STT Giá trị thống kê J = 95.67 301104 (HD: 11-06) 94.75 96.90 96.03 95.23 95.42 s = 0.83 RSD%= 0.86% x = 92.73 741104 (HD: 11-06) 97.22 97.28 97.00 95.34 97.04 s = 0.93 RSD%= 1.0% 1=96.03 480105 (HD: 01-07) 95.30 97.50 96.45 95.83 95.09 s = 0.97 RSD%= 1.01% x = 96.28 560105 (HD: 01-07) 96.41 95.82 97.34 96.60 95.35 s = 0.77 RSD%= 0.79% Nhận xét: Chế phẩm viên nén Vitamin 3B CtyCP Dược phẩm Hà Tây đạt TCCL hàm lượng Vitamin B |2 theo tiêu chuẩn qui định, nhiên hàm lượng đạt thấp khoảng từ 92% đến 96% lô thuốc khảo sát • Với chế phẩm 3B Xí nghiệp Dược phẩm TW 25 có SDK: VNA-0548-03, hàm lượng viên Bị' Bj = 250mg: 250mg: Img Bảng 10: Bảng kết vê định lượng Vitamin Bj2 Hàm Lượng % (kl/kl) ^ ^ S T T Lô Gía trị thống kê J = 97.61 010204 (HD: 02-06) 95.69 97.82 97.37 98.57 98.61 s = 1.19 RSD%= 1.22% 020704 (HD: 07-06) x = 100.21 100.86 102.11 97.91 100.26 99.89 s = 1.53 RSD%= 1.54% 031004 (HD: 70-06) Z =100.03 101.00 100.67 99.47 99.58 99.43 s = 0.75 RSD%= 0.75% X = 91.56 051204 (HD: 12-06) 97.56 98.23 97.45 96.87 97.66 s = 0.49 RSD%= 0.49% Nhận xét: Hàm lượng Vitamin Bi2 viên 3B Xí nghiệp Dược phẩm TW 25 đạt trung bình từ 97% đến 100% so với hàm lượng ghi nhãn • Với chế phẩm Newcobex Cty Dược - vật tư y tế Phú Thọ có SDK: VNA-0639-03, hàm lượng viên Bg: Bịi Bj = 250mg: 250 mg; lOmg Bảng 11 : Bảng kết định lượng Vitamin B j Nhận xét: Hàm lượng Vitamin B |2 chế phẩm viên nén Newcobex Cty Dược - vật tư y tế Phú Thọ đạt từ 94% đến 98% so với hàm lượng ghi nhãn • Với chế phẩm 3B Cty Dược - vật tư y tế Cửu Long có SDK: V711-H12-05, hàm lượng viên Bg! B|: Bi2 = 250mg: 250mg: 125mg Nhận xét: Qua bảng kết 12 cho thấy, mức độ suy giảm hàm lượng Bi2 sản phẩm viên nén 3B Cty Dược - vật tư y tế Cửu Long cao Trong lô 1071203, 1081203, 1301203 có hạn dùng đến tháng 122005 khảo sát lơ khơng đạt TCCL, hàm lượng Bi2 23% đến 32% so với hàm lượng ghi nhãn Cịn lơ 0140804 có hạn dùng đến tháng 8-2006 đạt TCCL - Đối với lô thuốc không đạt TCCL hàm lượng Bị2 nói trên, chúng tơi tiến hành kiểm tra lại cách tiến hành khảo sát lại lơ lần, đồng thời tiến hành tìm mua thêm mẫu lơ nhiều nơi khác Kết lần kiểm tra lại cho thấy hàm lượng B |2 lô thuốc thấp so với hàm lượng ghi nhãn từ % đến 23% Như vậy, kết chúng tơi thu qua q trình khảo sát đáng tin cậy 3.3.3 Định lượng chê phẩm thuốc tiêm - Tiến hành: Để định lượng Vitamin Bi2 số lô chế phẩm thuốc tiêm, ta lấy dung dịch thuốc tiêm có nồng độ biết ghi nhãn (lOOOmcg/lml), pha thành dung dịch có nồng độ xác 25 mcg/ml đem đo quang - Xử lý mẫu: Hút xác Im dung dịch ống thuốc tiêm Bị2 cho vào bình định mức lOml, thêm nước vừa đủ Từ dung dịch này, hút xác 2.5ml cho vào bình định mức lOml, thêm nước cất để có dung dịch đem đo quang có nồng độ 25 mcg/ml > Kết đinh lương lĩiỏt sỏ chế phẩm thuốc tiém khảo sát; Bảng 15: Bảng kết định lượng Vỉtamỉn B dung dịch thuốc tiêm srr Danh mục công ty Lô thứ Lô thứ Lơ thứ Xí Nghiệp Dược Phẩm SL; 50904 X = 107.80% s = 1.06 RSD% = 0.98% SL: 10104 X = 102.4% s = 0.53 RSD% = 0.52% SL: 61104 X = 105.70% s = 0.66 RSD% = 0.63% SL: 20604 X = 108.63% s=1.14 RSD% = 1.05% SL: 61004 V37 - H04 - 05 SL: 40804 X = 103.90% s = 0.32 RSD% = 0.30% X = 109.76% s = 1.36 RSD% = 1.24% Cty Dược - vật tư y tế Vĩnh Pliúc SDK: V - H - SL: 041004 X = 102.90% s = 0.49 RSD% = 0.48% SL: 191004 X = 100.97% s = 0.36 RSD% = 0.36% SL: 221104 X = 103.70% s = 0.67 RSD% = 0.64% Trung ương SDK : H02 - 096 - 01 Xí Nghiệp Dược Phẩm Trung ương SDK: Nhận xét: Qua bảng kết khảo sát cho thấy, hàm lượng Bj2 dung dịch thuốc tiêm B |2 thường cao hàm lượng ghi nhãn 0 %, kết có độ lệch chuẩn tương đối thấp RSD < 2% Kết chứng tỏ hàm lượng B |2 dung dịch tiêm đạt TCCL hàm lượng B |2 theo qui định Dược Điển III BÀN LUẬN: Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao, phương pháp có nhiều ứng dụng việc chiết tách định lượng chất hỗn hợp nhiều thành phần phức tạp với độ xác độ cao Phương pháp sắc ký mà khảo sát tiến hành có ưu điểm: - Độ cao: 98.87% - 100.93% -Sai số thấp: RSD% = 0.79% - Tiến hành đơn giản, khơng phải qua q trình chiết tách riêng Vitamin B]2 - Hệ thống sắc ký mà áp dụng đơn giản, tiện lợi - tiết kiệm Trước có số cơng trình đánh giá chất lượng Vitamin 3B Viện Kiểm Nghiệm, Phân viện kiểm nghiệm Hồ Chí Minh, số cá nhân khác Trong cơng trình thường dùng phương pháp sắc ký tạo cặp ion để định lượng Bị, Bg Bj 2, với pha động có thành phần Natri Heptansulphonat Natri Octansulphonat chất đắt tiền (khoảng trăm nghìn/ Ig hố chất) Và để pha 11 dung mơi pha động cho lần tiến hành định lượng cần dùng khoảng 1.1 g hoá chất trên, tốn Theo thống kê cơng trình nghiên cứu giảm chất lượng chế phẩm Vitamin 3B chủ yếu so suy giảm hàm lượng B |2 nên khoá luận em tập trung vào khảo sát hàm lượng Bị2 Hệ thống sắc ký với thành phần pha động gồm Methanol, Na2HPƠ4, nước cất, nên tiết kiệm chi phí PHẦN 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUÂT 4.1 KẾT LUẬN: Sau tháng thực khóa luận, tơi thu số kết sau: * Về kiến thức: Đã bước đầu làm quen với công tác nghiên cứu, đọc tra cứu tài liệu, biết cách triển khai công việc cách có hiệu quả, biết cách vận hành máy sắc ký lỏng hiệu cao * Về thực nghiệm: • Đã lựa chọn điều kiện sắc ký lỏng hiệu cao để định lượng Vitamin B |2 số chế phẩm Vitamin có chứa Bj 2: + Máy sắc ký lỏng HPLC Merck- Hitachi + Cột Apolo C8 ( 150 X 4,6mm ), 5|xm + Detector u v bước sóng 361 nm + Pha động ; Methanol: dung dịch Na2 04( 10%) tỷ lệ 36.5: 63.5 Điều HP chỉnh pH = 3.5 H3PO4 98% (PA) + Tốc độ dịng: l.Oml/phút + Thể tích tiêm: 50|il • Đánh giá chất lượng số chế phẩm Vitamin có chứa Bj lun hành thị trường Hà Nội: + Đã sơ khảo sát đánh giá TCCL hàm lượng B |2 33 lơ chế phẩm thuốc có chứa Vitamin B |2 cơng ty xí nghiệp nước.Trong có cơng ty xí nghiệp có chế phẩm Vitamin khảo sát đạt TCCL theo qui định + Đã xác định tổng số lô thuốc Vitamin 3B khảo sát Cty Dược - vật tư y tế Cửu Long có SDK V711-H12-05, có hàm lượng B |2 viên đo thấp nhiều so với hàm lượng ghi nhãn, đạt trung bình từ 22% đến 32% so với lượng ghi nhãn, gồm lô sau: 1071203,1081203 1301203 4.2 ĐỀ XUẤT - Do thời gian có hạn nên qui mô khảo sát giới hạn địa bàn Hà Nội Nếu có thời gian mở rộng qui mô đánh giá - Mở rộng đối tượng khảo sát (có thể gồm : viên nén Vitamin 3B bao nang, viên nén bao đưòỉng, số chế phẩm Vitamin 3B nhập nước - Đề nghị Cty Dược cửu Long quan quản lý có biện pháp khắc phục chất lượng lơ thuốc có hàm lượng B j thấp so với hàm lượng ghi nhãn TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài Liêu Tiếng Viẽt Bộ mơn Hố Dược (20QA), Giáo trình Hố Dược tập l,Tr\iịĩigáĩậ]\ọc Dược Hà Nội, trang 295-297 Bộ Mơn Hố Phân Tích (2004), Kiểm Nghiệm Thuốc, Trường đại học Dược Hà Nội, trang 68-98 Viện Kiểm nghiệm, Bộ y tế (2000), Báo cáo kết nghiên cứu đề tài: Nghiên cứu định lượng vitamin tan nước dầu thuốc hỗn hợp vitamin phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao Viện Kiểm nghiệm, Bộ y tế (2001), ứng dụng phương pháp chia tách kiểm nghiệm thuốc Viện Kiểm nghiệm, Bộ y tế, Thông báo kiểm nghiệm 1-2001, trang 29- 30 Viện Kiểm nghiệm, Bộ y tế, Báo cáo tổng kết công tác kiểm nghiệm, giám sát chất lượng thuốc năm 2004 phương hướng nhiệm vụ năm 2005, trang 9-15 Danh mục thuốc vitamin 3B cấp số đăng ký từ năm 2001- 2004 Dược điển Việt Nam III, trang 85-86, phụ lục 8.2 Tạp chí Dược học, số 10/2000 tr 11 10 Phân viện kiểm nghiệm TP.HCM-2001, Báo cáo kết định lượng Vitamin B ¡ c h ế phẩm 3B, Tài liệu Viện Kiểm nghiệm 11 Lê Kim Dung (1999), ứng dụng phương pháp b ố trí thí nghiệm tối ưu đ ể đánh giá ảnh hưởng s ố yếu tố đến suy giảm hàm lượng c h ế phẩm Vitamin Bị, B(ị Bị2 Luận án Thạc sĩ Dược học, Trường Đại học Dược Hà Nội 12 Nguyễn Mộng Hiền, Nguyễn Hữu Đức, “Góp phần nghiên cứu độ ổn định thuốc viên nén vitamin Bj,B i2” - Khoa Dược, ĐH Y-Dược TPHCM, Tạp chí Dược học s ố 1/2001, trang 12 13 Đặng Văn Hoà, Phân viện kiểm nghiệm HCM, “Định lượng vitamin B12 viên Trivit B” , Thông báo kiểm nghiệm s ố 2-1992 14 DS Nguyễn Hiểu Lâm - DS Trần Tuyết Quỳ (2003), Thuốc biệt dược cách sử dụng, Nhà xuất Y học, trang 1088- 1127 15 Phạm Luận (1989), Giáo trình sở lý thuyết HPLC, Đại học tổng hợp Hà Nội, trang 36-64 16 Thái Phan Quỳnh Như (1993), Định tính-định lượng Vitamin B/, Bị, Bi2 , C, PP thuốc hỗn hợp Vitamin phương pháp sắc ký lỏng HPLC 17 Thái Phan Quỳnh Như-Đào Hùng Phi, Viện Kiểm nghiệm, “Nghiên cứu định lượng đồng thời Vitamin tan nước thuốc đa vitamin phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao”, Tạp chí Dược họcsố 5-1993, trang 23-26 18 Thái Phan Quỳnh Như (2001), Phương pháp phân tích sắc ký lỏng hiệu cao, trang 4-18 19 Từ Vọng Nghi - Hoàng Minh Châu- Từ Văn Mặc (1998), Cơ Sà Hoá Học Phân Tích, Nhà xuất Khoa Học Kỹ Thuật, trang 193-200 20 Tạp chí Thuốc sức khoẻ, số 181 (01/02/01), trang 17 21 Tạp chí Thuốc sức khoẻ, số 173 (1/10/2000), trang 14 22 Tạp chí Thuốc sức khoẻ, ngày 1/12/2003 23 Tiêu chuẩn sở viên nén bao phim Vitamin Bị, Bị2 CtyCP Dược phẩm Hà Tây 24 Tiêu chuẩn sở viên nén bao phim Newcobex Cty Dược - vật tưy tế Phú Thọ 25 Dương Thị Mai Trang, Huỳnh Thị Ngọc Phượng, 'Tình hình chất ‘ lượng thuốc không đạt tiêu chuẩn chất lượng bị xử lý từ 1/2000 đến 61200r\ Tạp chí Dược học số 12/2001, trang Tài Liêu Tiếng Anh 26 The Bristish Pharmacopoeia (1998), p 2592-2593 27 Martindale-the Complete Drug Reference, Thirty-second edition, p 1363-1365 28 The Merck Index 12''' edition (1996), p 10153, 10154 29 The Japanese Pharmacopoeia 14 th, 1-2001, p 793-724 30 Pharmacopoeia o f the people's Ripublic o f China (2000), Volum II, p 737-739 31 The USP 24 (2000), p 17-40,1030, 1920-1925 32 Quanyun A.Xu and Lawrence A.Trissel (1999), Stability- Indicating HPLC Methods fo r Drug Analysis, American Pharmaceutical Association