Recent article] [PubMed] NGHIÊN CứU MộT Số TRựC KHUẩN GRAM ÂM SINH MEN BETA - LACTAMASE PHổ Mở RộNG PHÂN LậP TạI BệNH VIệN ĐA KHOA THàNH PHố CầN THƠ Trần Đỗ Hùng, Phạm Đức Thọ TóM TắT N
Trang 1density in the patients with Graves` disease J Clin
Endocrinol Metab 2007;92:2182–9 [PubMed]
12 Cawood T, Moriarty P, O`Shea D Recent
article] [PubMed]
NGHIÊN CứU MộT Số TRựC KHUẩN GRAM ÂM SINH MEN BETA - LACTAMASE PHổ Mở RộNG PHÂN LậP TạI BệNH VIệN ĐA KHOA THàNH PHố CầN THƠ
Trần Đỗ Hùng, Phạm Đức Thọ TóM TắT
Nghiên cứu mô tả cắt ngang được thực hiện từ
tháng 2 đến tháng 6 năm 2012 nhằm xác định tỷ lệ
một số trực khuẩn Gram âm sinh ESBL và đánh giá
mức độ đề kháng kháng sinh của các vi khuẩn sinh
ESBL phân lập được tại Bệnh viện đa khoa thành phố
Cần Thơ Tiến hành nuôi cấy, phân lập, định danh và
thực hiện kháng sinh đồ Đồng thời, khảo sát sự sinh
ESBL của vi khuẩn Sau thời gian nghiên cứu, chúng
tôi ghi nhận được: tỷ lệ trực khuẩn Gram âm sinh
ESBL chung là 39,2% Có 5 loại trực khuẩn Gram âm
sinh ESBL là Escherichia coli 34,5%, Pseudomonas
aeruginosa 25,0%, Klebsiella pneumoniae 17,8%,
Proteus mirabilis 12,0%, Enterobacter spp 10,7%
Các chủng vi khuẩn sinh ESBL có tỷ lệ đề kháng
kháng sinh cao hơn nhiều so với các VK không sinh
ESBL, nhất là với các kháng sinh như Ampicilline,
Cephalosporin, và Cefotaxime gần như là 100%, kế
đến là Tetracycline và Bactrim Các chủng sinh ESBL
đề kháng mức độ cao với Gentamycine (>70%), đề
kháng trung bình với Ciprofloxacine (từ 39,2% đến
59,2%) và mức độ đề kháng thấp nhất là
Amoxicilline/acid clavulanic
Từ khóa: Sự bùng phát, trực khuẩn Gram âm, đề
kháng kháng sinh, sinh men beta-lactamase phổ rộng
summary
Cross-sectional descriptive study was carried out
from February to June 2012 to determine the rates of
a number of ESBL-producing Gram-negative bacilli
and assess the level of antibiotic resistance of
ESBL-producing bacteria isolated at general hospital of Can
Tho city Proceed culturing, isolating, identifying and
implementating antibiogramme At the same time,
survey producing ESBL of bacteria After the study
period, we recorded: the rate of Gram-negative bacilli
producing ESBL was 39.2% There were five types of
ESBL producing gram-negative bacilli were
Escherichia coli 34.5%, Pseudomonas aeruginosa
25.0%, Klebsiella pneumoniae 17.8%, Proteus
mirabilis 12.0%, Enterobacter spp 10.7%
ESBL-producing bacteria have antibiotic resistance rates
higher than non-ESBL-producing strains, especially
as Ampicilline antibiotics, cephalosporin, and
cefotaxime is almost 100%, the next are Tetracycline
and Bactrim The ESBL-producing strains have high
level of resistance with gentamycine (> 70%), the
average resistance level with Ciprofloxacine (from
39.2% to 59.2%) and the lowest level of resistance is Amoxicilline / clavulanic acid
Keywords: emergence, Gram negative bacilli, antibiotic resistance, extended-spectrum β -lactamase
ĐặT VấN Đề
Vi khuẩn đề kháng kháng sinh luôn là vấn đề cần phải quan tâm của các nước trên thế giới, đặc biệt là các nước đang phát triển Sự đề kháng kháng sinh đã trở thành nguy cơ đối với sức khỏe mọi người Vi khuẩn và gen kháng thuốc của vi khuẩn nhanh chóng lan truyền khắp mọi nơi, kể cả bệnh viện, cộng đồng
và trong chăn nuôi Trong khi tốc độ đề kháng kháng sinh ngày càng gia tăng thì việc nghiên cứu tìm ra các loại kháng sinh mới để điều trị ngày càng giảm Như vậy trong cuộc chạy đua dành ưu thế, vi khuẩn luôn vượt lên trước, khoảng cách giữa khả năng vi khuẩn biến đổi để trở thành kháng kháng sinh và khả năng con người kiểm soát được vi khuẩn đã cách xa Vì vậy, nếu chúng ta không có các biện pháp làm giảm tốc độ kháng thuốc kịp thời sẽ dẫn đến hậu quả không còn kháng sinh để điều trị
Hiện nay, sự đề kháng kháng sinh của các trực khuẩn Gram âm đối với các kháng sinh nhóm β-lactamase bằng cách sinh men β-β-lactamase phổ mở rộng (ESBL) đang được xem như một vấn đề cấp thiết của ngành y tế toàn cầu, đặc biệt là các vi khuẩn Gram âm sinh ESBL gây đề kháng với rất nhiều loại kháng sinh Rất nhiều nghiên cứu trên thế giới cũng như ở Việt Nam đã ghi nhận sự gia tăng của các vi khuẩn sinh ESBL Tỷ lệ vi khuẩn sinh ESBL cũng như mức độ đề kháng kháng sinh của chúng thường khác nhau tùy theo quốc gia, khu vực và từng nơi nghiên cứu Tại Cần Thơ, chưa có có nhiều nghiên cứu về vi khuẩn Gram âm sinh ESBL Vì vậy, chúng tôi tiến hành đề tài này nhằm:
- Xác định tỷ lệ một số trực khuẩn Gram âm sinh ESBL tại Bệnh viện đa khoa thành phố Cần Thơ
- Đánh giá mức độ đề kháng kháng sinh của các
vi khuẩn sinh ESBL phân lập được
ĐốI TƯợNG - PHƯƠNG PHáP NGHIÊN CứU
1 Đối tượng nghiên cứu
Những bệnh nhân nằm điều trị tại Bệnh viện đa khoa thành phố Cần Thơ có chỉ định nuôi cấy định
Trang 2danh vi khuẩn và làm kháng sinh đồ
2 Phương pháp nghiên cứu
2.1 Thiết kế nghiên cứu: Phương pháp mô tả cắt
ngang
2.2 Chọn mẫu: Chọn mẫu thuận tiện
2.3 Tiêu chuẩn chọn mẫu: Các trực khuẩn Gram
âm được phân lập tại khoa xét nghiệm, Bệnh viện đa
khoa thành phố Cần Thơ từ tháng 2 đến tháng 6 năm
2012
2.4 Vi khuẩn kiểm chứng: Enterobacter cloacae
ATCC 23355, Escherichia coli ATCC10536,
Klebsiella pneumoniae ATCC 13882, Proteus
mirabilis ATCC 43071, Pseudomonas aeruginosa
ATCC 27853
3 Phương pháp thu thập số liệu
- Kỹ thuật nuôi cấy, phân lập và định danh vi
khuẩn theo thường quy của Tổ chức Y tế Thế giới
Thực hiện kháng sinh đồ theo phương pháp
Kirby-Bauer hướng dẫn của NCCLS
- Phát hiện ESBL theo phương pháp đĩa đôi
khuếch tán với khoảng cách giữa đĩa Amoxicillin/acid
Clavulanic (AMC) và đĩa Cephalosporin thế hệ 3 là
30mm (từ trung tâm đến trung tâm) Nếu nghi ngờ, sẽ
thu hẹp khoảng cách xuống còn 20mm Thử nghiệm
dương tính (vi khuẩn sinh ESBL) khi có sự tăng kích
thước vùng vô khuẩn của đĩa Cephalosporin thế hệ 3
về phía đĩa AMC hoặc có vùng vô khuẩn giữa các đĩa
nói trên
4 Phương pháp xử lí và phân tích số liệu
- Dữ liệu được nhập và xử lý bằng phần mềm
SPSS phiên bản 18.0
- Thống kê mô tả
- Tần số và tỉ lệ % về các loại vi khuẩn gây bệnh,
độ nhạy của các loại kháng sinh thường dùng trên
kháng sinh đồ và vi khuẩn sinh ESBL
-Sử dụng phép kiểm Chi bình phương để xét mối
liên quan cho từng biến với mức ý nghĩa thống kê α là
0,05
KếT QUả
1 Tỷ lệ các trực khuẩn Gram âm sinh ESBL
- Số chủng trực khuẩn Gram âm đã ghi nhận được
trong suốt thời gian nghiên cứu là 214 chủng Tỷ lệ
các vi khuẩn Gram âm trong tổng số các vi khuẩn
phân lập được trong giai đoạn nghiên cứu: 214/445
chiếm tỷ lệ là 48,1%
- Số chủng sinh ESBL là 84 chủng đạt tỷ lệ ESBL
(+) là 39,2%
2 Tỷ lệ các loại vi khuẩn sinh Gram âm ESBL
Bảng 1 Tỷ lệ các loại vi khuẩn Gram âm sinh
ESBL
3 Tỷ lệ các trực khuẩn Gram âm sinh ESBL theo loại mẫu nghiệm
Bảng 2 Phân bố vi khuẩn Gram âm sinh ESBL theo mẫu nghiệm
4 Tỷ lệ đề kháng kháng sinh của các trực khuẩn Gram âm sinh ESBL
4.1.Tỷ lệ đề kháng kháng sinh của Escherichia coli
Bảng 3 Tỷ lệ đề kháng kháng sinh của Escherichia coli ESBL(+) và ESBL(-)
Kháng sinh
Tần số khảo sát Tỷ lệ đề kháng
(%)
p ESBL
(+) ESBL (-)
ESBL (+)
ESBL (-) Amoxicillin/
4.2 Tỷ lệ đề kháng kháng sinh của Pseudomonas aeruginosa
Bảng 4 Tỷ lệ đề kháng kháng sinh của Pseudomonas aeruginosa ESBL(+) và ESBL(-)
Kháng sinh
Tần số khảo sát Tỷ lệ đề kháng (%)
p ESBL
(+) ESBL (-) ESBL (+) ESBL (-) Amoxicillin/
Trang 3Ampicillin 21 37 100,0 54,5
4.3 Tỷ lệ đề kháng kháng sinh của Klebsiella
pneumoniae
Bảng 5 Tỷ lệ đề kháng kháng sinh của Klebsiella
pneumoniae ESBL(+) và ESBL (-)
Kháng sinh
Tần số khảo sát (n)
Tỷ lệ đề kháng (%)
p ESBL
(+)
ESBL (-)
ESBL (+)
ESBL (-) Amoxicillin/A
4.4 Tỷ lệ đề kháng kháng sinh của Proteus
mirabilis ESBL(+) và ESBL(-)
Bảng 6 Tỷ lệ đề kháng kháng sinh của Proteus
mirabilis ESBL(+) và ESBL (-)
Kháng sinh
Tần số khảo sát (n) Tỷ lệ đề kháng (%)
p ESBL
(+)
ESBL (-)
ESBL (+)
ESBL (-) Amoxicillin/
4.5 Tỷ lệ đề kháng kháng sinh của Enterobacter spp ESBL(+) và ESBL(-)
Bảng 7 Tỷ lệ đề kháng kháng sinh của Enterobacter spp ESBL(+) và ESBL (-)
Kháng sinh
Tần số khảo sát (n)
Tỷ lệ đề kháng (%)
p ESBL
(+)
ESBL (-)
ESBL (+)
ESBL (-) Amoxicillin/A
BàN LUậN
1 Tỷ lệ các trực khuẩn Gram âm sinh ESBL Trong 84 chủng tiết ESBL gây bệnh phân lập
được, chiếm đa số là vi khuẩn E.coli và Pseudomonas aeruginosa với tỷ lệ lần lượt là 34,5%
và 25,0% Kết quả thu được cũng phù hợp với các nghiên cứu khác trong nước Các tác giả đều nhận xét E coli và Pseudomonas aeruginosa là hai loại vi khuẩn thường phân lập được nhất trong nhóm các vi khuẩn sinh ESBL
Trong nghiên cứu của chúng tôi tỷ lệ trực khuẩn Gram âm sinh ESBL là 39,2% Với Nguyễn Thị Yến Xuân năm 2004, tỷ lệ vi khuẩn sinh ESBL ở các bệnh nhân được chẩn đoán nhiễm khuẩn bệnh viện là 41%,
tỷ lệ này cao do nghiên cứu chỉ tập trung ở các bệnh nhân bị nhiễm khuẩn bệnh viện ở miền Bắc, Chu Thị Nga năm 2006 nghiên cứu tỷ lệ sinh ESBL ở bệnh viện Việt Tiệp – thành phố Hải Phòng là 30%) ở miền Trung, theo Nguyễn Thị Ngọc Huệ tại Bệnh viện đa khoa Bình Định năm 2004, tỷ lệ sinh ESBL chung là 22% Như vậy kết quả của chúng tôi cao hơn so với một số tác giả khác, nhưng lại thấp hơn với kết quả tại thành phố Hải Phòng
Loại vi khuẩn sinh ESBL Các nghiên cứu trong nước cho thấy Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae chiếm tỷ lệ cao trong các
Trang 4vi khuẩn sinh ESBL của bệnh viện Thống Nhất:
Klebsiella pneumoniae 18%, E coli 17,7%; bệnh viện
Nhiệt Đới, tỷ lệ Escherichia coli sinh ESBL là 37,9%,
Klebsiella pneumoniae là 17,2%, Pseudomonas
aeruginosa là 8,6% Các nghiên cứu của các tác giả
khác cũng ghi nhận tỷ lệ sinh ESBL cao ở hai loại vi
khuẩn này
Các nghiên cứu ở các nước trên thế giới đều ghi
nhận tỷ lệ cao Escherichia coli, Klebsiella
pneumoniae sinh ESBL ở Thailand năm 2006: E coli
là 26,3% Klebsiella pneumoniae là 21%; Pháp-2004:
Enterobacter aerogenes đứng đầu 36,3%, tiếp đến là
Klebsiella pneumoniae 18,8%, Escherichia coli
16,2% Bên cạnh Escherichia coli và Klebsiella
pneumoniae, nhiều tác giả cũng ghi nhận Proteus
mirabilis, Enterobacter cloacae sinh ESBL
Trong nghiên cứu của chúng tôi, có 5 loại trực
khuẩn Gram âm sinh ESBL là Escherichia coli 34,5%,
Pseudomonas aeruginosa 25,0%, Klebsiella
pneumoniae 17,8%, Proteus mirabilis 12,0%,
Enterobacter spp 10,7%
Tỷ lệ các trực khuẩn Gram âm sinh ESBL theo
loại mẫu nghiệm
Kết quả của chúng tôi cho thấy vi khuẩn sinh
ESBL ở bệnh viện Cần Thơ có trong mủ 27,4%, đàm
32,1%, máu 9,5% nước tiểu 10,7%, phân 20,2%
Theo Chu Thị Nga, vi khuẩn sinh ESBL gặp nhiều
nhất ở mủ 34,9%, đàm, dịch hút phế quản 31,3%,
nước tiểu 15,7%, máu 13,3% Theo Bộ Y Tế
năm2003, vi khuẩn sinh ESBL là những vi khuẩn
chính gây nhiễm trùng đường tiểu (>50%), nhiễm
khuẩn máu 5-20%, nhiễm khuẩn vết mổ 10-20% ở
các nghiên cứu khác, như ở bệnh viện Thống Nhất
thành phố Hồ Chí Minh, tỷ lệ Escherichia coli và
Klebsiella pneumoniae sinh ESBL gặp nhiều nhất là ở
đàm 50%, nước tiểu 34,6% ở bệnh viện Bệnh nhiệt
đới năm 2004 thì vi khuẩn Gram âm sinh ESBL
thường gặp ở nhiễm trùng đường tiểu 42,1%, nhiễm
khuẩn hô hấp dịch rửa phế quản là 47,4% và các
nhiễm trùng khác là 10,5%
2 Tỷ lệ đề kháng kháng sinh của các trực
khuẩn Gram âm sinh ESBL
Các chủng vi khuẩn sinh ESBL ở bệnh viện Cần
Thơ có tỷ lệ đề kháng kháng sinh cao hơn nhiều so
với các VK không sinh ESBL, nhất là với các kháng
sinh như Ampicilline, Cephalosporin, và Cefotaxime
gần như là 100%, kế đến là Tetracycline và Bactrim
(p<0,05) Tác giả Chu Thị Nga ghi nhận mức độ đề
kháng cao của vi khuẩn sinh ESBL với Cefotaxime
90,7%, Ciprofloxacin 68,3% và Gentamicin 82,5%
Theo Nguyễn Thị Yến Xuân, vi khuẩn sinh ESBL (+)
đề kháng với Amoxicillien/acid clavulanic là 59,1%,
Ceftazidine là 42,9%, Ceftriaxone là 95,2% và
Ofloxacin là 73,7% Các kháng sinh còn nhạy cảm tốt
là Amikacin, Tazocin, Imipenem
Đối với các chủng sinh ESBL đề kháng mức độ cao với kháng sinh (>70%), chỉ có Gentamycine Mức
độ đề kháng trung bình là Ciprofloxacine từ 39,2%
đến 59,2% và mức độ đề kháng thấp nhất là Amoxicilline/acid clavulanic Trong khi đó, các chủng
vi khuẩn sinh ESBL có tỷ lệ kháng thấp hơn được ghi nhận ở bệnh viện Việt - Tiệp thành phố Hải Phòng Amikacin 29,2%, Ceftazidine 57,1%, Ciprofloxacine 58,6% và ở bệnh viện Bệnh nhiệt đới thành phố Hồ Chí Minh với Amikacin 30%, Ceftazidine 57,1%, Ofloxacin 33,3%
Như vậy, đây là nghiên cứu khu vực Cần Thơ chỉ
ra vi khuẩn tiết ESBL không còn gói gọn trong môi trường bệnh viện Các vi khuẩn tiết ESBL hiện diện trong nhiều loại bệnh phẩm khác nhau chứng tỏ sự hiện diện và lan rộng khắp nơi, ở điều kiện nhiệt đới của nước ta, rất dễ tồn tại và sinh sôi phát triển ngoài môi trường, càng làm tăng nguy cơ nhiễm ESBL cho cộng đồng, làm tăng tỷ lệ các gen kháng thuốc trong quần thể vi khuẩn và tạo thuận lợi cho các vi khuẩn nhạy cảm dễ dàng tiếp nhận gen kháng thuốc hơn
Đây là vấn đề đáng báo động không chỉ cho ngành y
tế mà còn cho các cơ quan chức năng, nhằm đề ra các biện pháp cụ thể ngăn chặn sự lan truyền này KếT LUậN
1 Tỷ lệ các trực khuẩn Gram âm sinh ESBL Trong nghiên cứu của chúng tôi tỷ lệ trực khuẩn Gram âm sinh ESBL chung là 39,2% Có 5 loại trực khuẩn Gram âm sinh ESBL là Escherichia coli 34,5%, Pseudomonas aeruginosa 25,0%, Klebsiella pneumoniae 17,8%, Proteus mirabilis 12,0%, Enterobacter spp 10,7%
2 Tỷ lệ đề kháng kháng sinh của trực khuẩn Gram âm sinh ESBL
Các chủng vi khuẩn sinh ESBL ở bệnh viện Cần Thơ có tỷ lệ đề kháng kháng sinh cao hơn nhiều so với các VK không sinh ESBL, nhất là với các kháng sinh như Ampicilline, Cephalosporin, và Cefotaxime gần như là 100%, kế đến là Tetracycline và Bactrim (p<0,05) Đối với các chủng sinh ESBL đề kháng mức
độ cao với kháng sinh (>70%), chỉ có Gentamycine Mức độ đề kháng trung bình là Ciprofloxacine từ 39,2% đến 59,2% và mức độ đề kháng thấp nhất là Amoxicilline/acid clavulanic
TàI LIệU THAM KHảO
1 Chu Thị Nga, Nguyễn Thị Thông và cộng sự (2006), "Tỷ lệ sinh ESBL ở các chủng Klebsiella, E coli và Enterobacter phân lập tại bệnh viện Việt Tiệp -
Trang 5Hải Phòng từ 1/7/2005 đến 31/6/2006" Báo cáo Hội
nghị tổng kết Chống nhiễm khuẩn bệnh viện năm
2006 - Vụ điều trị, Bộ Y tế, trang 66-72
2 Võ Thị Chi Mai, Nguyễn Tấn Cường, Nguyễn
Minh Hải và Lê Kim Ngọc Giao (2009) Nồng độ ức
chế tối thiểu của 9 loại kháng sinh trên trực khuẩn
Gram âm gây nhiễm trùng ổ bụng (SMART
2006-2007) Tạp chí Y học Tp HCM, Tập 13, Phụ bản của
Số 1, trang 320 - 323
3 Laboratory Detection Extended-Spectrum
Beta-Lactamases (2011) Page last update; Available from:
http://www.cdc.gov/HAI/settings/lab/lab esbl.html#a9
4 NCCLS (2011) "Performance standards for
antimicrobial susceptibility testing." Approved standard M 100-S15 Wayne, Pennsylvania
5 Khanfar HS, Bindayna KM, Senok AC and Botta GA (2009) Extended-spectrum beta-lactamases (ESBL) in Escherichia coil and Klebsiella pneumoniae: trends in the hospital and community settings, J Infect Dev Ctries, 3(4): page 295 – 299
6 Perilli M.,B Segatore, M.R.De Massis, M.L.Riccio, C.Bianchi, A.Zollo, G.M.Rossolini, G Amicosante (2009)."TEM-72,a New Extended-Spectrum Beta-Lactamases Detected in P mirabilis and M morganii in Italy." Antimicrobial Agents and Chemotherapy 44(9): 2537-2539