Nghiên cứu thành phần hóa học và vỏ thân vọng cách premna corymbosa (burm f) rottl et willd , họ VERBENACEAE

Nghiên cứu thành phần hóa học và vỏ thân vọng cách premna corymbosa (burm f) rottl et willd , họ VERBENACEAE Nghiên cứu thành phần hóa học và vỏ thân vọng cách premna corymbosa (burm f) rottl et willd , họ VERBENACEAE Nghiên cứu thành phần hóa học và vỏ thân vọng cách premna corymbosa (burm f) rottl et willd , họ VERBENACEAE Nghiên cứu thành phần hóa học và vỏ thân vọng cách premna corymbosa (burm f) rottl et willd , họ VERBENACEAE Nghiên cứu thành phần hóa học và vỏ thân vọng cách premna corymbosa (burm f) rottl et willd , họ VERBENACEAE Nghiên cứu thành phần hóa học và vỏ thân vọng cách premna corymbosa (burm f) rottl et willd , họ VERBENACEAE Nghiên cứu thành phần hóa học và vỏ thân vọng cách premna corymbosa (burm f) rottl et willd , họ VERBENACEAE Nghiên cứu thành phần hóa học và vỏ thân vọng cách premna corymbosa (burm f) rottl et willd , họ VERBENACEAE Nghiên cứu thành phần hóa học và vỏ thân vọng cách premna corymbosa (burm f) rottl et willd , họ VERBENACEAE Nghiên cứu thành phần hóa học và vỏ thân vọng cách premna corymbosa (burm f) rottl et willd , họ VERBENACEAE Nghiên cứu thành phần hóa học và vỏ thân vọng cách premna corymbosa (burm f) rottl et willd , họ VERBENACEAE Nghiên cứu thành phần hóa học và vỏ thân vọng cách premna corymbosa (burm f) rottl et willd , họ VERBENACEAE Nghiên cứu thành phần hóa học và vỏ thân vọng cách premna corymbosa (burm f) rottl et willd , họ VERBENACEAE Nghiên cứu thành phần hóa học và vỏ thân vọng cách premna corymbosa (burm f) rottl et willd , họ VERBENACEAE

^ - - - a

B ộ YTẾTRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI

NGUYỄN THỊ MINH TÂM

VỌNG CÁCH

( KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP DUỢC SỸ KHOÁ 200;

Ngưòi hướng dẫn : TH.S Nguyễn Thị Bích Hằng

Trường đại học Dược Hà Nội Thòi gian thực hiện : Từ 2 - 2007 đến 5 - 2007

HÀ NỘI, 5-2007

'" r t ĩ i

M à i e ả n t ể U t !

^rútiạ, iuết ạuắ trình thựe hiện Uitũií luận tốt ttạhiêftf tồi đã nhận ỉtưđíi rút nhiều sự quan lântf í'hi híỉa tận tình eủa eáe thầụ eê , ạia đình

tĩỈL b4ui bề Qtkẵti dịp, nÁụ, tềi 'deừt đuùíe hùụ, lẬ íàng, biỂL đtt lâxL iẨa lởi:

^S-J^S- ^họMn ^hanh 3Cụ-f là nạẮjtòi íttầụ đã tận tình, ehi bảú-^ tạơ- ntời điều, kiện ekờ^ tòi tham, ạia »tqJhiiht eứu, khơa, hjỢe

^h S- Qíựuụễtt Qifitf ^íeh 'X>ằnạ,f tà giáo- oiỀn, đ a trựe tiỂpL ktíố9tạ dattf eki bỏjt% tận tì»thf qiúft, đs^ tơi ír^njg suujût iítởi ạùut tàm thựa nạhMền

ớũ hơàn thiên báo- eá&.

ÇCôi dtUt ehân thành, eảm đtt: @Ó£ ihầụ eô- qiájó-f eáe kụ, thuÂt ữiêti bệ- mỗn '7)a5ơi? £iỀii; eÓA phờttg, ban trứng, ỈM^ưồnạ.; eá*t bệ- (ĩ)íệtt 'Tôỡú họe —

^njutg tânt khoa kạe tự nhiỂti ÚÁ eồng, nạkỀ Qfíếe ^Ì£L đôi qiáp, tçu)- điỀu kiệti eho- lôi ihựe hiện khớÁ íiiẠn nắụ,.

Qfta đâụ tồi eũnụ æin đừờe bàụ tẲ lònạ biâ ổn lâi ạia ditthj bạn bè

¿tã luền bền eanh đồttg úiỀn, khỉeh lè, tựtì mọi ítỉều lùĩn úẠt ehíít oil tinh thần ỉtẩ tồi eó- thẻm n / ntỉêt mòi trong, nụhiỀn eứu Idtởíi họe.

(T)& thòi giatt ơà- ithA Ệtảng, bản thân, eẩ ftjçut, nền khôá luận khỗng,

^ồi XÌM I ehân íhỉuứt eảm <fnl

'T ôìl Qlệiy ihójng, 5 nàm 2007

Sừtit tùềtt.

QlạẲiụễn ^kiM tnh ^âm

MỤC LỤC

ĐẶT VẮN ĐỂ 1

PHẦN I TỔNG QUAN 2

1.1 VỊ TRÍ PHÂN LOẠI, ĐẶC ĐlỂM THựC VẬT VÀ PHÂN Bố CỦA CÂY VỌNG CÁCH 2 1.1.1 VỊ trí phân loại 2

1.1.2 Đặc điểm thực vật 4

1.1.2.1 Số lượng và phân bố của chi Premna 4

1.1.2.2 Đặc điểm thực vật chi Premna 5

1.1.2.3 Một số loài thuộc chi Premna 5

1.2 THẢNH PHẢN HOA HỌC ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 9 1.3 TÁC DỤNG DƯỢC LÝ •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 9 1.4 TÍNH VỊ, CÔNG NĂNG 10

1.5 CÔNG DỤNG 10

1.6 CÁC BÀI THUỐC VÀ CHẾ PHẨM c ó v ọ n g c á c h 11

PHẦN n THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 13

2.1 ĐỐI TƯỢNG, NGUYÊN LIỆU, HOÁ CHẤT, THIẾT BỊ VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cúu ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 13 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 13

2.1.2 Nguyên liệu 13

2.1.5 Phưong pháp nghiên cứu 14

2.1.5.1 Nghiên cứu về mặt thực vật 14

2.1.5.2 Nghiên cứu về mặt hoá học 14

2.1.5.3 Xử lý kết quả thực nghiệm 15

2.2 THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 15

2.2.1 Kết quả nghiên cứu về thực vật 15

2.2.1.1 Đặc điểm hình thái cây Vọng Cách 15

2.2.1.2 Đặc điểm dược liệu 16

2.2.1.3 Đặc điểm bột dược liệu vỏ thân Vọng Cách 16

2.2.2 Kết quả nghiên cihi về mặt hoá học 18

2.2.2.1 Định tính các nhóm chất bằng phản ứng hoá học 18

2.222 ơiiết xuất các chất trong vỏ thân Vọng Cách 25

2.223 Đùứi túứi flavonoid trong các phân đoạn chiết xuất 26

2 2 2 Â Định túứi Flavonoid trong dược liệu bằng sắc ký lớp mỏng 26

2.22.5 Xác định độ ẩm của dược liệu 28

2.2.2.6 Kết quả đùứi lượng các phân đoạn chiết xuất 28

222.1 Phân lập các chất trong cắn c 31

2.2.2.5 Nhận dạng các chất phân lập được ( THj, TH2) 34

2.3 BÀN LUẬN _ 36 2.3.1 Về thực vật: 36

2.3.2 Về mặt hoá học 36

PHẦN in KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUẤT 38

ĐH&THCN Đại học và trung học chuyên nghiệp

ĐẶT VẤN ĐỂ

Từ xa xưa, ông cha ta đã biết sử dụng những cây cỏ xung quanh, để tạo nên những bài thuốc độc đáo, chữa được nhŨQg bệnh thông thưcmg và nhiều bệnh hiểm nghèo Ngay cả khi nền KHKT đã có những bước tiến vượt bậc như hiện nay, các hợp chất tổng hợp và bán tổng hợp ngày càng nhiều thì dược liệu

vẫn giữ một vị trí quan trọng Điều này được khẳng định bỏi thực tế là xu

hướng chăm sóc và bảo vệ sức khoẻ của con người bằng những sản phẩm từ thiên nhiên ngày càng tăng, ngày càng nhiều công trình nghiên cứu khoa học

và ứng dụng từ dược liệu Việt Nam có hệ thực vật đa dạng, phong phú Đó là điều kiện vô cùng thuận lọi để phát triển nguồn dược liệu, cung cấp cho nhu cầu sử dụng trong nước và xuất khẩu

Vọng Cách là một loài cây đã rất quen thuộc với người dân Trong dân gian vỏ, rễ, lá Vọng Cách được sử dụng để chữa viêm gan, lỵ, chữa mụn nhọt, làm gia vị ăn gỏi cá ở các nước châu Á, Vọng Cách đã được sử dụng để bào chế một số biệt dược chữa bệnh viêm gan, tiểu đường Tuy vậy, những nghiên cứu về loài cây này chưa được đầy đủ về mặt thực vật, hoá học và sinhhọc ở Việt Nam cho tói nay mới có hai đề tài nghiên cứu về cây Vọng Cách Nguyễn Thị Nga làm đề tài tốt nghiệp ứiạc sĩ dược học năm 2005 về thân và lá cây Vọng Cách thu hái tại Hà nội, và Thân Thi Kiều My đã nghiên cứu hoa Vọng Cách trong đề tài tốt nghiệp dược sĩ đại học năm 2005

Vói mục tiêu nghiên cứu một cách đầy đủ hơn về thành phần hoá học, góp phần phát hiện và nâng cao giá trị sử dụng của cây Vọng Cách, chúng tôi

đã tiến hành đề tài: “ Nghiên cứu thành phần hoá học vỏ thân Vọng Cách”,

vói các nội dung sau:

1 Về mặt thực vật: Nghiên cứu đặc điểm vi học vỏ thân cây Vọng Cách góp phần nhận biết và tiêu chuẩn hoá dược liệu

2 vềhoáhọc:

cể

+ Định tính các nhóm chất hữu trong vỏ thân cây Vọng Cách.

+ Chiết xuất và phân lập một số chất trong vỏ thân cây Vọng Cách

+ Nhận dạng các chất phân lập được

PHẦN I TỔNG QUAN

1.1 VỊ TRÍ PHÂN LOẠI, ĐẶC ĐlỂM THựC VẬT VÀ PHÂN BÔ CỦA CÂY VỌNG CÁCH

1.1.1 Vị trí phân loại

Theo các tài liệu [3], [6], [7], [12], [15]:

Cây Vọng Cách thuộc chi I^remna, một chi nằm trong họ cỏ Roi Ngựa (Verbenaceae) Vị trí của chi Premna trong hệ thống phân loại thực vật được tóm tắt như sau:

Ngành Magnoliophyta (Ngành Ngọc Lan)

Lớp Magnoliosida (Lớp Ngọc Lan)

Phân lớp Lamiidae (Phân lớp Hoa Môi)

Bộ Lamiales (Bộ Hoa Môi)

Họ Verbenaceae (Họ cỏ Roi Ngựa)Qii Premna

Tên khoa học của cây Vọng cách ghi trong các tài liệu ở Việt Nam còn khác nhau:

Premna corymbosa (Burm.í.) Rottl Et Willd.

Premna integrifolia L.

Premna littorea Rumph.

Premna corymbi/era (Bum.f) Rottle Et Willd.

Premna obtusiỷolia R Br.

Premna serratiỷolia L.

Chúng tôi thống kê và tổng kết trong bảng 1.1

Bảng 1.1 Tên khoa học của cây Vọng cách theo một số tài liệu

1 Premna integriỷolia L. - Những cây thuốc và vị thuốc

Việt Nam [16]

- Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam [5]

- Cây cỏ Viêt Nam [14]

M.H.Lecomte

RottLEtWilld

- Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam [5]

- Thực vật dược - Phân loại thực vật [4]

4 Premna obtusiýolia R Br. - Cây thuốc và đông vât làm

thuốc ở Việt Nam [5]

Viện Dược liệu

5 Premna serratifolia L. - Cây cỏ Viêt Nam [14]

- Thực vật chí E)ông Dương [24]

Phạm Hoàng Hộ M.H.Lecomte

6 Premna littorea Rumph. - Cầy thuốc và đông vât làm

thuốc ở Việt Nam [5]

- 'Iliực vật chí Đông Dương [24]

Viện Dược liệu

M.H.Lecomte

Cây Vọng Cách ở một số địa phưottg còn gọi là cây Vọng Khách, cây Cách, Cách Núi, Bông Cách, Bọng Cách , là một cây tương đối quen thuộc được trồng ở ven đường, làm cảnh, lấy bóng mát

1.1.2 Đặc điểm thực vật

I.I.2.I Số lượng và phân bố của chi Premna

Theo các tài liệu [9], [10], [14], [24]

Trên thế giói, chi Premna có khoảng 200 loài và dưói loài, phân bố ở các vùng nhiệt đói của lục địa Là một trong số những chi có nhiều loài nhất trong họ cỏ Roi Ngựa

ở Việt Nam có khoảng 15 loài, trong đó có 4 -5 loài được dùng làm thuốc Chúng tôi đã thống kê được trong bảng 1.2

Bảng 1.2 Các loài trong chi Premna có ở Việt Nam

Phòng, Nam Bộ

Trị

4 p, chevalieri p, Dop Cách hoa vàng Phú Thọ, Ninh Bình đến

Nghệ An

7 p.flavescens Ham In Wall. Cách trở vàng, Cách

hoa xanh

Từ Vmh Phúc tới Đồng Nai và Bà Rịa-vũng tàu

Ninh Bình, Lâm Đồng

10 p lactifolia Roxb. Cách lá rộng Tây Nguyên

Lâm Đồng

15 p stenobotrys Meư. Cách phát hoa ngắn Trên vùng vôi chợ gành

1.1.2.2 Đặc điểm thực vật chi Premna

Các tài liệu [9], [11], [24] đã mô tả đặc điểm thực vật của chi này như sau:

Cây gỗ nhỏ hoặc cây nhỡ, cành non vuông, thường có gai hoặc lông mịn bao phủ Lá thường mọc đối, không có lá kèm, đofn, nguyên, gân lá hình lông chim Hoa họp thành những dạng cụm hoa khác nhau, thường không đều, rất thay đổi Đài hình chuông hay hình ống, tồn tại trên quả Qii Premna có tràng vói ống ngắn, chia 2 môi, có 4 thuỳ rõ Đây là đặc điểm để phân biệt vói một số chi khác trong họ có đặc điểm thực vật khá giống các cây thuộc chi Premna như chi Vitex ống tràng có 5 thuỳ, chi Gmelia có ống ữàng to, hoa to Các cây trong chi Premna có nhị 4, đính vào họng tràng, chỉ nhị dài, thò ra ngoài, bao phẩh hướng trong Màng hạt phấn có 3 rãnh- lỗ Bộ nhuỵ có 2 lá noãn, đính noãn bên Bầu trên, có vách giả chia thành 4 ô, mỗi ô đựng 1 noãn Quả nang hay quả hạch, hạt thường không có nội nhũ

1.1.2.3 Một số loài thuộc chi Premna

♦ Cây cách lông ( Premna tomentosa Willd.) [9], [10], [14], [24]

Cây gỗ cao 15- 16 m Nhánh hcd hình bốn cạnh, có lông hình sao rồi

nhẵn Lá hình trái xoan hay xoan - tròn, thót lại dần dần và dài ở đầu, tròn, hình tim hay cụt ở gốc, mặt trên nhẵn, mặt dưới có lông mềm hình sao,

nguyên, hoi dạng màng, dài 28 cm, rộng 14 cm; gân giữa lồi; gân bên 12- 20,

rẽ đôi; gân nhỏ nằm ngang, đều, mạng gân rõ; cuống lá có lông mềm hình sao, dài 8 cm

Cụm hoa ngù dạng tán, kép, có lông mềm hình sao, dài 16 cm, rộng 12-

2 0 cm, cuống chung dài 2 0 cm; lá bắc hình dải hẹp, hình ngọn giáo, dài 8 cm,

lá bắc con hầu như không có; hoa không cuống Đài hình chuông, nhẵn ở trong, có lông hình sao ở ngoài, dài 2,5 mm; thuỳ 5, nhỏ, nhọn Tràng hình phễu, không lông ở mặt tì-ong trừ ở họng có lông nhung, có lông mịn hình sao

ở nửa trên mặt ngoài, dài 5 mm; thuỳ 4, gẩn bằng nhau, môi trên nguyên, môi dưới có 3 thuỳ Nhị 4, thụt trong ống Bẩu hình nón ngược, có lông nhiều hình sao ở đỉnh; vòi dài 4 mm; đầu nhụy chẻ hai, ngắn Quả hạch màu tím đen

Phân bố ở Ấi Độ, Xrilanka, Việt Nam, Malaysia, Indonesia, ở nước ta,

có gặp tại các tỉnh Nam Bộ

ở Malaysia, nước sắc lá dùng cho phụ nữ sinh đẻ uống và nước pha rễ hay nước sắc lá được dùng làm nước tắm trị bệnh

ở Indonesia, lá nghiền ra dùng điều trị vết thương cho động vật nuôi,

ở Ẫi Độ, dầu rễ thơm, dùng làm thuốc trị các rối loạn của dạ dày

♦ Cách hoa vàng ( Premna chevalierì Dop.) [9], [10], [14], [24]

Cây nhỡ hay cây gỗ Cành non tròn, phủ lông mịn, sau nhẵn, vỏ màu nâu, nứt dọc Lá hình trái xoan hay hình bầu - trái xoan có mũi ở đầu, gốc tròn và không đều, dài 4 - 9 cm, rộng 1 ,7 -5 cm, mặt trên nhẵn, mặt dưód có lông thưa, nguyên hoặc có khi có khía răng ở phẩn trên

Hoa họp thành chuỳ ở ngọn cành, có lông, các nhánh phân đôi hoặc phân ba; lá bắc ở gốc có dạng lá, các lá bắc ở phía trên bé, hình dải Hoa màu vàng nhạt có những đường vạch đỏ, họng màu tím Đài có tuyến ở mặt ngoài,

có 5 răng rất ngắn, hình tam giác Tràng có tuyến ở mặt ngoài, nhắn ờ mặt

trong, môi ữên tròn, nguyên, môi dưói có 3 thuỳ ngắn; các thuỳ tròn Nhị 4, 2

trội; chỉ nhị đính ở giữa ống tràng, dài bằng tràng; bao phấn hình cầu Bầu nhẵn, có tuyến tói gần đỉnh; vòi nhụy dài bằng nhị; đầu nhụy chẻ đôi ngắn Quả hạch màu đen Hạt không có phôi nhũ.

Phân bố ở Trung Quốc, Việt Nam và Lào ở nước ta, có gặp từ Phú

Thọ, Ninh Bình vào đến Nghệ An

Cầy mọc ở các rừng thưa và trong rừng phục hồi

Ra hoa vào mùa hạ

Dân gian dùng lá làm thuốc chữa bại liệt, vàng da, phù và đau khớp

* Cây cách lá rộng ( Premna latifolia Roxb.) [9], [10], [14], [24]

Cây gỗ cao 6 - 8 m Nhánh non có lông đofn mịn, cứng Lá hình trái xoan hay trái xoan - ũ:òn, nhọn ngắn ở đầu, hình tim hay tròn thành góc hoặc

tù ở gốc, mặt trên có lông mịn, mặt dưối có lông mịn màu tro khi lá còn non, mép nguyên, dạng giấy, dài 5 - 15 cm, rộng 3 - 7 cm; gân giữa mịn, gân bên 10

- 14, hoi lồi, không đều, rẽ đôi; gân con và mạng ít rõ; cuống lá dài 5 - 20 mm

Cụm hoa ngù thưa, nhiều hoa, dài 6-8 cm, rộng 5-8 cm; lá bắc nhỏ, dễ rụng; hoa không cuống, dài 4-5 mm Đài hình chuông, có lông mịn hay có lông cứng, dài 2 mm; răng 5, bằng nhau, ngắn Tràng nhẵn ở mặt ngoài, dài 4 mm; ống ngắn có lông nhung ở họng; thuỳ 4, chia 2 môi; môi ttên nguyên, môi dưói có 3 thuỳ mà thuỳ giữa có lông nhung và lớn hơn Nhị 4, thò ra ngoài ống, chỉ nhị đúứi ở họng tràng Bầu hình nón, không lông trừ ở đỉnh có lông mịn và có tuyến; vòi dài 4-5 mm, đầu nhụy chẻ đôi ngắn Quả hạch không lông, có mụt, có đài hoa bao ở gốc, rộng 6 mm

Phân bố ở Ẩi Độ, Mianma, Trung Quốc, Việt Nam, Lào, Campuchia ở nước ta có gặp ở một số nơi thuộc tỉnh các Tây Nguyên

Cây mọc trong rừng ẩm vùng núi

ở Ấi Độ, người ta dùng lá làm thuốc uống trong và đắp ngoài tri phù thũng Nhựa của vỏ cây dùng đắp nhọt đầu đinh Dịch của vỏ dùng cho động vật nuôi khi chúng bị đau bụng

♦ Cây vọng cách (Premna corymbosa (Burm.f.) Rottl.et Willd.) [5],

[9], [10], [14], [16], [24]

Cây nhỡ cao 5 - 7 m Cành non hình vuông, đôi khi có gai và lông mịn,

cành già nhẵn màu nâu đỏ, có rãnh và lỗ bì Lá mọc đối, hình trái xoan, dài 14-

16 cm, rộng 10 - 12 cm, gốc tròn hay hơi hình tim, đầu tù hay có mũi nhọn

ngắn, mặt ữên nhẵn bóng, gân hằn rõ, mặt dưói nhạt có lông mịn ừên các gân,

mép nguyên hoặc khía răng ở phía đầu lá Lá vò ra có mùi thơm như chanh

Cụm hoa mọc ở đầu cành thành ngù dài 10 - 18 cm, có lông mịn; lá bắc

nhỏ dạng lá; hoa màu trắng hay hcứ xanh lục; đài có lông và tuyến, chia hai

môi, môi ữên nguyên hoặc xẻ hai thuỳ, môi dưói nguyên hoặc có 2 -3 răng rất

nhỏ; tràng có lông ở mặt ngoài, ống hình trụ, chia hai môi, môi trên có hai

thuỳ gần bằng nhau, môi dưới có 3 thuỳ tròn; nhị 4, hcd thòi ra ngoài; chỉ nhị

đính ở họng tràng; bầu nhẳi

Quả hạch, hình bầu hoặc hình trứng, màu đen

Mùa hoa quả: Tháng 5 - 8

Phân bố, sinh thái

Cây Vọng Cách phân bố từ Ẩi Độ đến Thái Lan, Campuchia, Lào và

Việt Nam ở Việt Nam, Vọng Cách là loài cây tương đối quen thuộc đối vói

người dân ở vùng đồng bằng và trung du Cây phân bố rải rác từ Quảng Ninh,

Hải Phòng, Thái Bình, Hải Dương đến Nam Bộ và đảo Phú Quốc

Vọng Cách là cây bụi ưa sáng, ưa ẩm nhưng cũng có thể hơi chịu hạn,

thường mọc lẫn với nhiều loại cây bụi khác ngay ở quanh làng, dọc theo các

bờ kênh mương, đồi cây bụi và bờ nương rẫy Cây thường xanh do mọc chồi

và ra lá non gần như quanh năm Tuy nhiên, mùa sinh tnrỏĩig mạnh lại vào vụ

xuân - hè Vọng Cách ra hoa kết quả nhiều, tái sinh tự nhiên chủ yếu từ hạt Cầy

còn có khả năng tái sinh chồi khoẻ sau khi bị chặt đốn ở một số địa phương,

nhân dân còn ứồng Vọng Cách ở vườn nhà, để lấy lá non làm rau gia vị

Bộ phận dừng

Lá, thu hái quanh năm Có noi dùng cả vỏ, thân, rễ Hái về rửa sạch, phcd hay sấy khô hoặc sao vàng

1.2 THÀNH PHẦN HOÁ HỌC [5], [16], [21]

Lá cây Vọng Cách có tinh dầu

Vỏ cây Vọng Cách chứa 2 alcaloid là premnin và garianin được Basu

N.K và Dandiya p.c chiết ra năm 1947.

Trong rễ cây Vọng Cách có tinh dầu thơm và một chất màu vàng

Theo Phạm Hoàng Hộ [14]: vỏ thân Vọng Cách còn có sympathicomimetic

Theo Nguyễn Thị Nga [19]: Trong lá Vọng Cách có Stigmat - 5 - en - 3ß - ol và acid oleanolic

Theo Ostsuka Hideaki và cộng sự, lá cây có verbascosid iridoid glucosid và 3-monoacyl 6-O-a-L phamnopyranoacyl catapol [5]

Theo [22]: Trong lá có Premnazol QH7NO3

Theo Thân Thị Kiều My [18]: Trong hoa Vọng Cách có acid para - methoxy - cinnamic, Quercetin và Ethanone r-(-2 ’-hydroxyphenyl) - (2,4- dihydrophenyl)

Theo [23]: Trong p corymbosa còn có 6-deoxy (C20H24O4).

1.3 TÁC DỤNG DƯỢC LÝ [5], [10], [16]

Thực nghiệm trên ếch của Basu N.K và Dandiya p.c cho thấy các alcaloid Premnin và gariarin trong vỏ cây Vọng Cách có tác dụng giống giao cảm, gây co mạch, tăng huyết áp, giảm sức co bóp của cơ tim, giãn đồng tử của động vật thí nghiệm,

Một hợp chất Phenol được phân lập từ vỏ rễ tươi có tác dụng ức chế các

chủng vi khuẩn gram dương như Staphylococcus aureus, Streptococus và

Bacillus subtilis.

Cao nước của cây Vọng Cách có tác dụng mạnh trên tử cung và ruột trên động vật thí nghiệm, gây tăng rõ rệt nhu động của các cơ quan này.

Rễ Vọng Cách có tác dụng chống tiểu đường trên động vật đã được gây tiểu đường thực nghiệm

Premnazol phân lập từ lá Vọng Cách có tác dụng chống viêm trên chuột cống trắng, làm giảm sự tạo u hạt vói hoạt tính tương đương với Phenylbutazol, và làm giảm trọng lượng tuyến thượng ứiận và lượng chứa acid ascorbic Trong cùng tìú nghiệm, hoạt túứi enzym của acid phosphatase, glutamat pyruvat ttansaminase (GPT) và glutamat oxaloacetat transaminase (GOT) giảm tt-ong huyết tìianh và gan, trong khi lượng protein tì*ong huyết thanh giảm

Cao nước vỏ tìiân Vọng Cách có tác dụng ức chế cơ tim, gây hạ đường máu trên động vật thí nghiệm

1.4 TÍNH VỊ, CÔNG NÃNG[16]

Vọng Cách có vị hăng, đắng, có mùi thơm, tính mát Có tác dụng trợ tỳ can, tiêu độc, lợi tiểu, tán ứ kết tiêu bại Rễ có tác dụng thông kinh mạch, lợi tiêu hoá, trị sốt

1.5 CÔNG DỤNG [5],[9], [10], [16]

Vọng Cách được dùng làm thuốc trong phạm vi kinh nghiệm dân gian

Lá chữa lỵ, tiểu tiện khó, tiêu hoá kém Ngoài ra còn được dùng chữa phạm phòng, phát sốt,viêm gan, co tìiắt sau khi giao hợp Liều 30 - 40 g sắc uống

Rễ chữa đau bụng, ăn không tiêu, sốt vói liều 20 g sắc uống

Trong y học dân gian Đông Nam Á, Vọng Cách được dùng làm thuốc lọi tiểu trị phù, thuốc gây trung tiện, bổ dạ dày, trị tiêu chảy, viêm phế quản, thấp khớp nhức đầu và thuốc bổ cho phụ nữ sau khi đẻ

Lá và rễ được dùng ở các nước Đông Dương làm thuốc lợi tiểu, bổ dạ dày và hạ sốt

ở Indonesia, nước sắc lá là thuốc lọd sữa và chữa thấp khớp

ở Malaysia, nước sắc lá và rễ có tác dụng hạ sốt

ở Ấi Độ, rễ Vọng Cách được dùng để nhuận tràng, lợi dạ dày, trợ tim,

bổ Lá có tác dụng gây trung tiện, lợi sữa, và nấu cháo ăn để bổ dạ dày Nước

sắc lá dùng ttị cơn đau bụng, đầy hơi, nước sắc cây non dùng trị thấp khớp,

đau dây thần kùứi

ở Srilanka, tinh dầu từ rễ Vọng Cách trị đau bụng,

ở Papua Niu Ghine, cao lá trị ho, nhức đầu và sốt

ở Guam, nước hãm vỏ cây trị đau dây thẫn kinh

Ngày nay đã có nhiều công trình nghiên cứu cho thấy, các thành phần

hoá học chiết xuất từ Vọng Cách có tác dụng tốt đối với bệnh nhân tiểu đường

typ I và typ n [25]

1.6 CÁC BÀI THUỐC VÀ CHẾ PHẨM c ó VỌNG CÁCH [5], [12],

[16], [24]

Chữa kiết lỵ: Lá Vọng Cách tươi (30 - 40 g), rửa sạch, vò nát thêm ít

nước đun sôi để nguội Khuấy đều vắt lấy nước, thêm đường cho ngọt để

uống Ngày uống một chén 30 - 40 ml, trẻ em dùng nửa liều.Cũng có tìiể

dùng lá khô vói liều 10 - 15 g sắc uống

Hậu sản vàng da ;Dùng lá cách phối hợp vói nhân trần và cối xay, liều

lượng bằng nhau 12 g, sắc nước uống

Abana: Một chế phẩm thuốc trợ tim của Ấi Độ bào chế từ nhiều dược

liệu trong đó có Vọng Cách, có tác dụng bảo vệ rõ rệt chống tăng huyết áp và

thiếu máu cục bộ, đã được thử nghiệm trên chuột cống trắng và thể hiện có

hoạt túih hạ lipid máu có ý nghĩa Abana làm giảm |3 - lipoprotein và

apoprotein trong huyết thanh; các lipoprotein tỷ trọng thấp giảm nhiều hơn

lipoprotein tỷ trọng rất thấp Tuy nhiên, lipoprotein tỷ trọng cao trong huyết

thanh tăng nhẹ Sự giảm các thành phần lipid trong huyết thanh và gan kèm

theo bcd sự giảm các acid béo tự do trong huyết thanh và giảm hoạt tính của

enzym tiêu mỡ trong gan Abana gây ức chế rõ rệt sự sinh tổng hợp cholesterol trong gan và tăng thải từ acid mật trong phân Kết quả nghiên cứu giải thích rõ cơ chế tác dụng bảo vệ tim và hạ lipid máu của thuốc Abana.

Dasamula: Là một chế phẩm thuốc cổ truyền của Ấi Độ, thành phần có

chứa rễ Vọng Cách, có tác dụng trị sốt dai dẳng

Buas - Buas: Toa thuốc Đông y của Malaysia phối hợp rễ cây Vọng

Cách vói lá của một số loài cam chanh để trị trướng bụng, đầy hoi [26]

PHẦN II THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ

2.1 ĐỐI TƯỢNG, NGUYÊN LIỆU, HOÁ CHẤT, THIẾT BỊ VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ú u

2.1.1 Đối tượng nghiên cứu

Đối tượng nghiên cứu là vỏ thân Vọng Cách

2.1.2 Nguyên liệu

Vỏ thân Vọng Cách được thu hái tại Hà Nam, vào tháng 8 năm 2006

Mẫu thu hái được lấy từ cây đã được định tên là Premna corymbosa (Burm.f.) Rottl et Willd., họ Verbenaceae.

Vỏ thân Vọng Cách thu hái vể đem phcd khô, sấy ở nhiệt độ 50°c trong

tủ sấy có quạt thông gió, sau đó nghiền thành bột nửa thô, cho vào túi ni lông buộc km Bảo quản nơi khô mát để làm thí nghiệm

2.1.3 Hoá chất

- Hoá chất sử dụng trong nghiên cứu đạt tiêu chuẩn tinh khiết phân tích

- Hoá chất: Ethanol, Methanol, Chloroforai, Ethylacetat, n-hexan, n- Butanol, Amoniac, Acid chlohydric Acid sulfuric

- Máy uv - VIS Spectrophometer cary lE - varian ( Australia) đặt tại Phòng thí nghiệm trung tâm - Trường đại học Dược Hà Nội.

- Máy FT - IR Spectrophometer 1650 Perkin Elmer ( USA) đặt tại Phòng thí nghiệm trung tâm - Trường đại học Dược Hà Nội

- Máy 5989 - B - MS tại Phòng cấu trúc - Viện hoá học - Viện Khoa học và Công nghệ Việt nam

- Máy Bniker - Advance - 500 MHz tại Phòng cấu trúc - Viện hoá học - Viện Khoa học và Công nghệ Việt nam

2.1.5 Phương pháp nghiên cứu

+ Kiểm nghiệm dược liệu bằng phương pháp hiển vi [20]

+ Thực tập hình thái giải phẫu thực vật [17]

2.1.5.2 Nghiên cứu về mặt hoá học

- Định tính các nhóm chất bằng phản ứng hoá học theo phưoiig pháp ghi trong tài liệu;

+ Thực tập dược liệu - Phần hoá học [2]

+ Bài giảng dược liệu - Tập I, n [1]

+ Phương pháp nghiên cứu hoá học cây thuốc [13]

- Định tính flavonoid trong dược liệu bằng sắc ký lớp mỏng sử dụng bản mỏng Silicagel GF254 tráng sẵn của Merck

- Định lượng các phân đoạn chiết xuất trong dược liệu bằng phương pháp cân

- Phân lập các chất bằng sắc ký cột vói chất nhồi cột là Silicagel cỡ hạt 0,020 - 0,063 mm của Merck.

- Nhận dạng các chất phân lập được dựa vào số liệu các phổ ư v, IR,

MS, NMR

2.I.5.3 Xử lý kết quả thực nghiệm

Xử lý kết quả thực nghiệm bằng phương pháp thống kê sử dụng Student

test ở mức ý nghĩa a = 0,05.

2.2 THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ

2.2.1 Kết quả nghiên cứu về thực vật

2.2.1.1 Đặc điểm hình thái cây Vọng Cách

Mẫu dược liệu nghiên cứu được thu hái từ cây Vọng Cách Premna

corymbosa (Burm.f.) Rottl et Willd, họ Verbenaceae có đặc điểm về hình thái

như sau:

Cây gỗ nhỏ, cao khoảng 4 m Cành non có thiết diện vuông, màu xanh,

có lông mịn bao phủ vỏ cành già màu nâu đỏ, có nhiều rãnh theo chiều dọc

Lá bắc hình lá rất bé Hoa có cuống rất ngắn, khoảng Imm Đài hoa thay đổi,

có lông mịn và tuyến tiết ở mặt ngoài, đài chia làm 2 môi, hầu hết chia răng không rõ, hoặc có môi trên với hai răng không rõ và môi dưới có 3 răng nhọn nhỏ Tràng có lông mịn ở mặt ngoài, nhiều lông trắng và dài ở mặt ữong, thò

ra ngoài như bông, ống tràng hình trụ, chia làm 2 môi, môi trên có 2 thuỳ,

môi dưới có 3 thuỳ tròn Nhị 4, thò ra ngoài, chỉ nhị đính ở họng tràng Bầu

trên, hình trứng, nhẵii

Quả hạch, hình cầu, đường kính khoảng 3 mm, vỏ xù xì, màu nâu đen, phần trên có đầu nhọn Cắt ngang quả thấy chia làm 4 ô, mỗi ô có 1 hạt Đài còn lại trên quả

Hoa nở vào tháng 6 đến tháng 8

2.2.1.2 Đặc điểm dược liệu

Dược liệu vỏ thân Vọng Cách được mô tả như sau: Độ dài khoảng 10 -

30 cm, cong queo, độ dày từ 5 - 10 mm vỏ màu vàng nâu, bề mặt sần sùi Mùi hăng, vị đắng

2.2.1.3 Đặc điểm bột dược liệu vỏ thân Vọng Cách

Bột màu vàng nâu, mùi hăng, vị đắng

Soi và quan sát dưói kính hiển vi thấy:

Mảnh mạch (1)

Lông che chở đơn bào (2)

Lông che chở đa bào (3)

Tế bào cứng (4)

Bó sọi chứa tinh thể calci oxalat hình khối (5)

Mảnh bần (6)

Hình 1 Ảnh cây và cành Vọng cách

Hình 2 Ảnh chụp bột vỏ thân Vọng Cách dưới kính hiển vi

K >

2.2.2 Kết quả nghiên cứu về mặt hoá học

2.2.2.I Định tính các nhóm chất bằng phản ứng hoá học

+ Định tính alcaloid:

Cho khoảng 2 g dược liệu vào bình nón dung tích 50 ml, thêm 15 ml dd

H2SO4 IN Đun đến sôi, để nguội Lọc lấy dịch cho vào bình gạn dung tích

100 ml Kiềm hoá dịch lọc bằng dd N H 3 6N (khoảng 8 ml) đến phản ứng kiềm (thử bằng giấy quỳ) Chiết tiếp bằng chloroform 3 lần, mỗi lần 5 ml Gộp dịch chiết chloroform vào bình gạn, lắc vói dd H2SO4 IN hai lần, mỗi lần 5 ml Lấy dịch chiết acid để làm các phản ứng:

- Cho 1 ml dịch chiết vào ống nghiệm nhỏ, thêm 2-3 giọt thuốc thử Dragendorff, không thấy xuất hiện kết tủa da cam (Phản ứng âm túứi)

- Cho 1 ml dịch chiết vào ống nghiệm nhỏ, thêm 2-3 giọt thuốc thử Mayer, không thấy xuất hiện kết tủa ữắng (Phản ứng âm tính)

- Cho 1 ml dịch chiết vào ống nghiệm nhỏ, thêm 2-3 giọt thuốc Bouchardat, không thấy xuất hiện kết tủa nâu đỏ (Phản ứng âm tính)

Nhận xét: Dược liệu không có alcaloid.

+ Định tính Glycosid tìm:

Cho vào bình nón dung tích 50 ml khoảng 5 g bột dược liệu, thêm 25

ml nước Ngâm trong 24 h, gạn lấy dịch chiết vào một cốc có mỏ Thêm khoảng 30 ml ƠIÌ acetat 30%, khuấy đều, Lọc qua giấy lọc gấp nếp, thử dịch lọc với chì acetat, cho thêm 1 ml chì acetat nữa vào dịch chiết, khuấy và lọc lại Tiếp tục thử đến khi không còn tủa với chì acetat Cho toàn bộ dịch lọc vào bình gạn, lắc kỹ hai lần với chloroform, mỗi lần 5 ml Gạn lấy dịch chloroform chia vào các ống nghiệm nhỏ khô và bốc hoi trên nồi cách thuỷ đến khô Cắn còn lại được đem tiến hành các phản ứng:

- Phản ứng Liebermaim: Cho vào một ống nghiệm có chứa cắn 0,5 ml anhydrid acetic, lắc cho tan hết cắn Để nghiêng ống nghiệm 45® Thêm từ từ đồng lượng H2SO4 đặc (0,5 ml) theo thành ống nghiệm để dịch lọc chia thành

hai lớp ở mặt tiếp xúc hai lớp chất lỏng không thấy xuất hiện vòng tím đỏ (Phản ứng âm tính).

- Phản ứng Legal: Cho vào một ống nghiệm có chứa cắn 0,5 ml cồn 90®, lắc đều cho cắn hoà tan hết, thêm 1 giọt Natri Nitroprussiat 1% và hai giọt dd NaOH 10%, không thấy xuất hiện màu hồng (Phản ứng âm tính)

- Phản ứng Keller - Kiliani: ƠIO vào một ống nghiệm có chứa cắn

0,5ml cồn 90®, lắc đều cho cắn hoà tan hết, thêm vài giọt FeQj 5% trong acid acetic Lắc đều để nghiêng ống nghiệm 45° Thêm từ từ đồng lượng H2SO4 đặc(Iml) theo thành ống nghiệm để dịch lọc chia thành hai lớp ở mặt tiếp xúc hai lớp chất lỏng không thấy xuất hiện vòng tím đỏ ( Phản ứng âm túih)

Nhận xét: Dược liệu không có Glycosid tim

- Phản ứng phân biệt hai loại Saponin: Cho vào ống nghiệm lớn 0,5 g bột dược liệu, thêm 5 ml cồn 90° Đun cách thủy đến sôi, lọc nóng, lấy dịch lọc làm các thí nghiệm:

• Ống 1: Cho 5 ml dd NaOH 0,1N + 5 giọt dịch lọc ữên

• Ống 2: Cho 5 ml dd HQ 0,1N + 5 giọt dịch lọc ttên

Lắc đều hai ống nghiệm trong một phút Để yên, thấy cột bọt ở ống 1

- Phản ứng vói Cyanidin: Cho Iml dịch chiết vào ống nghiệm, thêm một

ít bột Magie kim loại và 5 giọt HCl đặc, lắc đều thấy xuất hiện màu đỏ hồng

( Phản ứng dương tứứi)

- Phản ứng vói NH3: Nhỏ 1 ml dịch chiết lên tờ giấy lọc, hơ khô rồi để lên miệng lọ NH3 đặc mở nút thấy màu vàng của vết chất đậm lên ( Phản ứng dương tứứi)

- Phản ứng với NaOH: Cho 1 ml dịch chiết vào ống nghiệm, thêm 3 giọt NaOH 10% thấy có kết tủa màu vàng và dịch vàng đậm lên ( Phản ứng dương túứi)

- Phản ứng vói FeQj: Cho 1 ml dịch chiết vào ống nghiệm, thêm 3 giọt

F e a35% thấy dịch chuyển từ vàng sang xanh đen ( Phản ứng dương tính)

Nhận xét: Dược liệu có Flavonoid

+ Định tính Coumarìn:

Lấy khoảng 3 g dược liệu cho vào bình nón 50 ml, thêm 20 ml cồn 90®, đun cách thuỷ 5 phút, lọc nóng qua giấy lọc Dịch lọc thu được dùng làm các phản ứng:

ống 2: Để nguyên.

Ống 2: Trong suốt

Thêm vào cả hai ống nghiệm mỗi ống 2 ml nước cất, lắc đều thấy:

Óng 1: Tủa không tan

Ống 2: Có một ít tủa đục Thêm vào ống 1 vài giọt dd HQ đđ không thấy có hiện tượng gì xảy ra ( Phản ứng âm tính)

- Phản ứng chuyển dạng đồng phân cis - trans: Nhỏ một giọt dịch chiết lên giấy thấm, nhỏ tiếp lên đó 1 giọt NaOH 10% Để khô tự nhiên, che một nửa diện tích vết chất trên giấy thấm bằng một đồng xu rồi soi dưới đèn tử

ngoại ở bước sóng X = 366 nm trong vài phút, thấy phát huỳnh quang xanh

Sau đó bỏ đồng xu ra, tiếp tục quan sát dưới đèn tử ngoại thấy nửa vết không che cũng sáng như nửa vết bị che ( Phản ứng âm tính)

Nhận xét: Dược liệu không có Coumaiin

+ Định tính Anthranoid:

Phản ứng Bomtraeger: Lấy khoảng 3 g dược liệu cho vào bình nón 50

ml, thêm 30 ml H2SO4 IN, đun cách thuỷ trong 15 phút Để nguội rồi lọc Cho dịch lọc vào bình gạn, lắc với 5 ml chloroform, gạn lấy phần chloroform để tiến hành phản ứng:

Lấy 1 ml dịch chiết cho vào ống nghiệm, thêm 1 ml NH4OH 10%, lắc đều không thấy xuất hiện màu hồng Tiếp tục cho từng giọt NaOH 10% vào, lắc nhẹ, không thấy lớp nước có màu hồng ( Phản ứng âm túứi)

Nhận xét: Dược liệu không có Anthranoid

+ Định tính Tanin:

Cho vào ống nghiệm 1 g dược liệu, thêm 5 ml nước cất, đun sôi trực tiếp trong 5 phút, lọc lấy dịch lọc để làm các phản ứng:

- Vói dd Fea35%: ƠIO 1 ml dịch lọc vào ống nghiệm, tìiêm 5 giọt dd FeQj

5%, lắc đều, ứiấy dịch chuyển từ vàng sang xanh đen ( Phản ứng dương tính)

- Với dd Gelatin 5%: Cho 1 ml dịch lọc vào ống nghiệm, ứiêm 5 giọt dd gelatin 5%, lắc đều không tìiấy xuất hiện tủa bông trắng ( Hiản ứng âm tứứi).

Nhận xét: Dược liệu không có Tanin

+ Định tính acid hữu cơ: Cho 1 g dược liệu vào ống nghiệm, thêm 5 ml

nước c ấ t, đun sôi trực tiếp trong 10 phút, để nguội rồi lọc Thêm vào dịch lọc

một ít tinh thể NajCOj, thấy có bọt khí bay lẽn ( Phản ứng dương tính )

Nhận xét: Dược liệu có Acid hữu cơ.• • •

+ Định tính acid amỉn: Cho 1 g dược liệu vào ống nghiệm, thêm 10 ml

nước cất, đun sôi 5 phút Lọc nóng Lấy 2 ml dịch chiết cho vào một ống

nghiệm khác, thêm 2 - 3 giọt TT Ninhydrin 3%, đun cách thuỷ sôi 10 phút,

không thấy xuất hiện màu tím ( Phản ứng âm túứi)

Nhận xét: Dược liệu không có acid amin

+ Định tính đường khửi Lấy khoảng 2 g dược liệu cho vào ống nghiệm

to, thêm5 ml cồn 90°, đun cách thuỷ 5 phút, lọc lấy dịch Cho 1 ml dịch lọc vào

Ống nghiệm, ứiêm 3 giọt TT Fehling A và 3 giọt TT Fehling B £Xin cách thuỷ

10 phút thấy có tủa đỏ gạch dưói đáy ống nghiệm (Phản ứng dương tính),

Nhận xét: Dược liệu có đường khử

+ Định tính Polysaccharid: Cho 2 g bột dược liệu vào một cốc có mỏ,

thêm 10 ml nước cất, đun sôi cách thuỷ 5 phút, lọc nóng Cho vào 2 ống

nghiệm:

• Ống 1: 4 ml dịch chiết + 5 giọt TT Lugol

• Ống 2: 4 ml nước cất + 5 giọt TT Lugol

Quan sát thấy ống 1 có màu đỏ đậm hơn ống 2

Nhận xét: Dược liệu có Polysaccharid.

+ Định tính chất béo: Cho 5 g dược liệu vào bình nón có nút mài dung

tích 50 ml, đổ ngập ether dầu hoả, ngâm qua đêm, lọc Nhỏ một giọt dịch chiết lên giấy lọc, hơ nóng cho bay hết dung môi, không thấy để lại vết mờ trên giấy lọc ( Phản ứng âm túih )

Nhận xét: Dược liệu không có chất béo.

+ Định tính Caroten: Cho vào ống nghiệm 2 ml dịch chiết dầu hoả trên,

bốc hơi đến cắn Thêm 2 giọt H2SO4 đặc vào cắn, không thấy dịch lọc chuyển màu xanh ( Phản ứng âm túứi)

Nhận xét: Dược liệu không có Carolen.

+ Định tính Sterol: Cho vào ống nghiệm 1 ml dịch chiết dầu hoả trên, Bốc hoi trến nồi cách thuỷ đến cắn, Thêm vào ống nghiệm 1 ml anhydrid acetic, lắc kỹ cho tan hết cắn Để ống nghiệm nghiêng 45°, Thêm từ từ 1 ml

H2SO4 đặc theo thành ống nghiệm, thấy mặt phân cách giữa hai lớp chất lỏng

có màu xanh ( Phản ứng dương túứi)

Nhận xét: Dược liệu có Steroid

Kết quả định tính các nhóm chất hữu cơ trong vỏ thân cây Vọng Cách được tóm tắt ở bảng 2.1

Bảng 2.1 Kết quả định tính các nhóm chất hữu cơ trong vỏ thân Vọng cách.

3 Saponin Quan sát hiện tượng tạo bọt.

Quan sát hiện tượng phá huyết.

Phản ứng phân biệt hai loại Saponin.

10 Đường khử Phản ứng vối 'IT FehlingA và rr

PehlingB.

Ghi chú: (-): Phản ứng âm tính (++): Phản ứag dưcmg tính rõ

(+): Phản ứng dưoíig tính (+++): Phản ứng dương tính rất rõ

Kết luận: Trong vỏ thân Vọng Cách có: Aavonoid, saponin, acid hữu

cơ, đường khử, polysaccharid, sterol

2.2.2.2 Chiết xuất các chất trong vỏ thân Vọng Cách

Chiết xuất các chất trong vỏ thân Vọng Cách được thực hiện theo sơ đồ

ở hình 3

Hình 3 Sơ đồ chiết xuất các chất trong vỏ thân Vọng Cách

2.2.2.3 Định tính flavonoid trong các phân đoạn chiết xuất

Lấy khoảng 20 mg mỗi loại cắn A, B, c, D cho vào các ống

nghiệmtương ứng A, B, c, D Hoà tan cắn bằng 5 ml cồn, thêmvào mỗi ống

một ít bột Magiê kim loại rồi nhỏ vào 4 -5 giọt HQ đặc Đun cách thuỷ vài

phút, quan sát sự chuyển màu trong mỗi ống:

Ống A: Không chuyển màu

Bảng 2.2 Kết quả định tính Flavonoid trong các phân đoạn.

STT Phân đoạn chiết Phản ứng Kết quả Kết luận

Nhận xét: Trong phân đoạn chiết bằng ethylacetat cho kết quả dương

tính rõ nhất vói phản ứng cyanidin, chứng tỏ hàm lượng flavonoid trong phân

đoạn này là lớn nhất Do đó chúng tôi tập trung vào nghiên cứu flavonoid

trong phân đoạn chiết ethylacetat

2.2.2.4 Định tính Flavonoid trong dược liệu bằng sắc ký lớp mỏng

- Chuẩn bị dịch chấm sắc ký: Lấy khoảng 20 g dược liệu chiết bằng Methanol trong Soxhlet Cất thu hồi dung môi, cô cách thuỷ tới cạn Thêm 40

ml nước cất nóng và đun cách thuỷ 30 phút Lọc lấy dịch chiết nước cho vào