Góp phần phân biệt về mặt dược liệu 2 loài ban việt nam hypericum patulum thunb ex maray và hypericum uralum buch ham ex d don họ ban hypericaceae

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ VŨ NGỌC HÂN GÓP PHẦN PHÂN BIỆT VỀ MẶT DƯỢC LIỆU LOÀI BAN VIỆT NAM Hypericum patulum Thunb ex Murray Và Hypericum uralum Buch Ham ex D Don HỌ BAN-HYPERICACEAE KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2014 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ VŨ NGỌC HÂN GÓP PHẦN PHÂN BIỆT VỀ MẶT DƯỢC LIỆU LOÀI BAN VIỆT NAM Hypericum patulum Thunb ex Murray Và Hypericum uralum Buch Ham ex D Don HỌ BAN-HYPERICACEAE KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS TS Nguyễn Duy Thuần TS Nguyễn Thu Hằng Nơi thực hiện: Bộ môn Dược Liệu – Trường Đại Học Dược Hà Nội HÀ NỘI - 2014 LỜI CẢM ƠN Những dịng khóa luận này, muốn gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy cơ, bạn bè gia đình, người ln quan tâm, ủng hộ hướng dẫn suốt q trình nghiên cứu hồn thành khóa luận Tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc đến PGS TS Nguyễn Duy Thuần - Học viện Y dược học cổ truyền TS Nguyễn Thu Hằng - giảng viên Bộ mơn Dược liệu hết lịng tận tình hướng dẫn, bảo động viên tơi suốt q trình thực hồn thành khóa luận tốt nghiệp Tôi xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo anh chị kỹ thuật viên môn Dược liệu Trường Đại Học Dược Hà Nội – người chia sẻ giải đáp vướng mắc tơi suốt q trình làm khóa luận, tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ tơi q trình thực khóa luận Để hồn thành khóa luận này, khơng thể khơng kể đến giảng dạy tỉ mỉ nhiệt tình tồn thể thầy giáo Ban giám hiệu trường Đại học Dược Hà Nội, giúp cho em có tảng kiến thức vững chắc, để khơng hồn thành tốt khóa luận, mà cịn phục vụ cho cơng việc sau Cuối cùng, muốn gửi lời cảm ơn tới bố mẹ, gia đình, người thân bạn bè, người sát cánh động viên giúp đỡ tơi vượt qua thời điểm khó khăn học tập q trình hồn thành khóa luận Hà Nội, ngày 14 tháng năm 2014 Sinh viên Lê Vũ Ngọc Hân MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG I: TỔNG QUAN 1.1 Vị trí phân loại 1.2 Đặc điểm chi Hypericum L 1.3 Phân bố 1.4 Các loài thuộc chi Hypericum L 1.5 Giới thiệu loài Hypericum patulum Thunb ex Murray 1.6 Giới thiệu loài Hypericum uralum Buch Ham ex D Don 11 CHƯƠNG II: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị 13 2.2 Nội dung nghiên cứu 13 2.3 Phương pháp nghiên cứu 14 CHƯƠNG III: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 15 3.1 Kết nghiên cứu thực vật 15 3.1.1 Đặc điểm thực vật BLT 15 3.1.2 Đặc điểm thực vật BLN 16 3.2 Kết nghiên cứu hóa học 23 3.2.1 Định tính nhóm hợp chất dược liệu phản ứng hóa học 23 3.2.2 Định tính SKLM 30 3.3 Bàn luận 40 CHƯƠNG IV: ĐỀ XUẤT VÀ KẾT LUẬN 44 4.1 Kết luận 44 4.2 Đề xuất 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO 45 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT - BLN: Ban nhỏ - BLT: Ban to - KL: Kết luận - KQ: Kết - NXB: Nhà xuất - Rf: Hệ số lưu - SKLM: Sắc ký lớp mỏng - TLTK: Tài liệu tham khảo - VGB: Viêm gan B DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Trang Bảng 1.1: Các loài thuộc chi Hypericum L có Việt Nam Bảng 1.2: Các hợp chất xanthon phân lập từ BLT Bảng 1.3: Các hợp chất flavonoid phân lập từ BLT Bảng 3.1: Kết định tính nhóm hợp chất BLT BLN 29 Bảng 3.2: Kết SKLM phân đoạn dịch chiết n-hexan BLN 34 với hệ I Bảng 3.3: Kết SKLM phân đoạn dịch chiết n-hexan BLT 34 với hệ I Bảng 3.4: Kết SKLM phân đoạn dịch chiết n-hexan cuả BLN 35 với hệ IV Bảng 3.5: Kết SKLM phân đoạn dịch chiết n-hexan cuả BLT 36 hệ IV Bảng 3.6: Kết SKLM phân đoạn dịch chiết Ethyl acetat cuả BLN 37 với hệ VI 10 Bảng 3.7: Kết SKLM phân đoạn dịch chiết Ethyl acetat cuả BLT 38 với hệ VI 11 Bảng 3.8: Kết SKLM phân đoạn dịch chiết Ethyl acetat cuả BLN 39 với hệ X 12 Bảng 3.9: Kết SKLM phân đoạn dịch chiết Ethyl acetat cuả BLT 39 với hệ X 13 Bảng 3.10: So sánh đặc điểm hình thái lồi BLT BLN 40 14 Bảng 3.11: So sánh đặc điểm hiển vi hai loài BLT BLN 41 15 Bảng 3.12: So sánh sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết n – hexan BLT 42 BLN – hệ I 16 Bảng 3.13: So sánh sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết n – hexan BLT BLN – hệ IV 42 17 Bảng 3.14:So sánh sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết ethyl acetat 42 BLT BLN – hệ VI 18 Bảng 3.15: So sánh sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết ethyl acetat BLT BLN – hệ X 43 10 DANH MỤC CÁC HÌNH STT Tên hình Trang Hình 3.1: Hypericum patulum Thunb ex Muray 18 Hình 3.2: Hypericum uralum Buch Ham ex D Don 18 Hình 3.3: Ảnh chụp vi phẫu Ban to kính hiển vi 19 Hình 3.4: Ảnh chụp vi phẫu Ban nhỏ kính hiển vi 19 Hình 3.5: Ảnh chụp vi phẫu thân Ban to kính hiển vi 20 Hình 3.6: Ảnh chụp vi phẫu thân Ban nhỏ kính hiển vi 20 Hình 3.7: Ảnh chụp bột Ban to kính hiển vi 21 Hình 3.8: Ảnh chụp bột Ban nhỏ kính hiển vi 21 Hình 3.9: Ảnh chụp bột thân Ban to kính hiển vi 22 10 Hình 3.10: Ảnh chụp bột thân Ban nhỏ kính hiển vi 22 11 Hình 3.11: Sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết n-hexan BLN 33 BLT 12 Hình 3.12: Sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết Ethyl acetat BLN BLT 33 ĐẶT VẤN ĐỀ Họ Ban - Hyperiaceae họ thực vật phong phú đa dạng giới Chỉ tính riêng chi Hypericum L., giới ghi nhận 461 loài, phân bố rộng khắp tất châu lục, trừ Nam cực Bắc Cực [25] Đây chi có nhiều lồi thực vật có giá trị sống người Các loại dược thảo sử dụng rộng rãi giới dùng điều trị bệnh thấp khớp, bệnh vàng da, phù nề, viêm chảy dịch vị dùng điều trị vết thương bầm giập [6] Hypericum patulum Thunb ex Murray Hypericum uralum Buch.Ham ex D Don hai dược liệu quý chi Hypericum L sử dụng rộng rãi dân gian để chữa bệnh [6] Ở Việt Nam có số đề tài nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng sinh học loài Hypericum patulum Thunb ex Murray [1],[13],[14] Tuy nhiên, nghiên cứu loài Hypericum uralum Buch.Ham ex D Don cịn hạn chế Trên thực tế, hai lồi thuộc chi có đặc điểm hình thái tương đối giống Để góp phần phân biệt tránh nhầm lẫn sử dụng hai loài này, đề tài “Góp phần phân biệt mặt dược liệu hai loài Ban Việt Nam Hypericum patulum Thunb ex Murray Hypericum uralum Buch.Ham ex D Don, họ Ban - Hypericaceae” tiến hành với mục tiêu so sánh phân biệt hai loài Hypericum patulum Thunb ex Murray Hypericum uralum Buch.Ham ex D Don đặc điểm thực vật thành phần hóa học Để thực mục tiêu trên, đề tài bao gồm nội dung sau: - Nghiên cứu thực vật: Mô tả đặc điểm hình thái, đặc điểm vi phẫu đặc điểm bột loài Hypericum patulum Thunb ex Murray loài Hypericum uralum Buch.Ham ex D Don - Nghiên cứu hóa học: Định tính lồi Hypericum patulum Thunb ex Murray loài Hypericum uralum Buch.Ham ex D Don phản ứng hóa học sắc ký lớp mỏng CHƯƠNG I: TỔNG QUAN 1.1 Vị trí phân loại Theo hệ thống phân loại Takhtajan (2009)[16], chi Hypericum L có vị trí phân loại sau: Giới: Plantae Ngành: Magnoliaphyta Lớp: Magnoliopsida Phân lớp: Dilleniidae Bộ: Hypericales Họ: Hypericaceae Chi: Hypericum L 1.2 Đặc điểm chi Hypericum L Cây bụi nửa bụi, sống lâu năm, khơng có lơng có lơng đơn giản, có tuyến mờ mờ đục, màu đen đỏ tối, nhiều tầng (trộn vào có mặt dưới), thường rìa ven rìa Lá mọc đối (hoặc vịng), không cuống cuống ngắn, gân lông chim chân vịt (hiếm rẽ đơi), mép ngun có tuyến mép Cụm hoa xim Hoa lưỡng tính, hoa hình hình cốc Đài 5, tiền khai hoa năm điểm, 4, xếp chữ thập, không đều, tràng liền phần rời Tràng 5, xếp xoắn ốc, màu vàng vàng chanh (hiếm trắng), mặt thường màu nhạt, có gân đỏ, không rụng sớm rụng sau nở hoa, thường không đối xứng Nhị hoa chùm 5, rời dính vào họng tràng, dính với thành bó nhị dính vào đài, khơng theo quy tắc khơng dính thành cụm nhị, khơng rụng rụng sớm, bó nhị lên đến 70 (120) nhị, nhị mảnh, rời dính 2/3, bao phấn nhỏ, dính lưng dính gốc, mở dọc, có tuyến liên kết, nhị vơ tính bị khuyết (rất hiếm) Bầu nhụy 3-5 khoang, đính nỗn trung trụ khoang với 2-3-5 hợp điểm đính nỗn bên, hợp điểm có từ đến nhiều nỗn, thân nỗn 3-5, rời đính phần đến hồn tồn, núm nhụy nhỏ, bè không Quả nang chẻ ô tự mở, vỏ thường chứa dầu Hạt nhỏ, hình 33 Hình 11a: Hệ dung mơi I Hình 11b: Hệ dung mơi IV 11a) B: UV254, C: UV365, D:TT vanillin/H2SO4 11b) A: UV254, B: UV365, C:TT vanillin/H2SO4 Hình 3.11: Sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết n-hexan BLN BLT Hình 12a: Hệ dung mơi VI Hình 12b: Hệ dung mơi X 12a) A: UV254, B: UV365, D: TT boric/oxalic 12b) A: UV254, B: UV365, C: TT Vanillin/H2SO4 Hình 3.12: Sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết Ethyl acetat BLN BLT Ghi chú: 1: Ban nhỏ; 2: Ban to 34 Bảng 3.2: Kết SKLM phân đoạn dịch chiết n-hexan BLN với hệ I STT UV254 Rf UV365 TT Vanilin/H2SO4 Độ đậm Màu Độ đậm Màu Độ đậm 0,08 + Hồng + Tím + 0,15 + Đỏ + Tím + 0,18 + Đỏ + Tím + 0,23 - Đỏ + Tím + 0,25 + Đỏ + - - 0,31 - Đỏ + Tím ++ 0,37 + Đỏ ++ Tím + 0,42 + Đỏ + Tím + 0,47 - Đỏ ++ Tím + 10 0,55 + Xanh ++ Tím + 11 0,58 + - - Tím + 12 0,87 - - - Tím + Nhận xét: Dịch chiết phân đoạn n-hexan BLN khai triển SKLM với hệ dung môi I cho 12 vết Bảng 3.3: Kết SKLM phân đoạn dịch chiết n-hexan BLT với hệ I STT Rf UV254 UV365 TT Vanilin/H2SO4 Độ đậm Màu Độ đậm Màu Độ đậm 0,05 + Xanh + - - 0,08 + Hồng + Tím + 35 0,15 + Đỏ + Tím + 0,18 + Đỏ + Tím + 0,23 - Đỏ + Tím + 0,25 + Đỏ + - - 0,31 - Đỏ + Tím ++ 0,37 + Đỏ ++ Tím + 0,42 + Đỏ ++ Tím + 10 0,47 - Đỏ ++ Tím + 11 0,55 + Xanh ++ Tím + 12 0,58 + Vàng + Tím + 13 0,75 - Xanh + Tím ++ 14 0,87 - - - Tím + Nhận xét: Dịch chiết phân đoạn n-hexan BLT khai triển SKLM với hệ dung môi I cho 14 vết Bảng 3.4: Kết SKLM phân đoạn n-hexan cuả BLN với hệ IV STT Rf UV254 UV365 TT Vanilin/H2SO4 Độ đậm Màu Độ đậm Màu Độ đậm 0,04 + Hồng + Tím ++ 0,08 + Đỏ + Tím + 0,16 - Xanh + Tím + 0,21 - Xanh + Tím + 36 0,22 + Đỏ + - - 0,25 - - - Tím ++ 0,26 + Đỏ + - - 0,31 + Đỏ + - - 0,36 + Đỏ + - - 10 0,44 ++ Đỏ ++ Tím + 11 0,61 ++ - - Tím + 12 0,63 + Vàng - Tím + 13 0,70 + Đỏ + - - 14 0,75 ++ Xanh ++ Tím + 15 0,81 ++ Đỏ + Tím + Nhận xét: Dịch chiết phân đoạn n-hexan BLT khai triển SKLM với hệ dung môi IV cho 15 vết Bảng 3.5: Kết SKLM phân đoạn n-hexan cuả BLT hệ IV STT Rf UV254 UV365 TT Vanilin/H2SO4 Độ đậm Màu Độ đậm Màu Độ đậm 0,43 + Xanh + Tím ++ 0,81 + Đỏ + Tím + 0,16 - Xanh + Tím + 0,21 - - - Tím + 0,22 + Đỏ + - - 37 0,25 - - - Tím ++ 0,26 + Đỏ + - - 0,31 + Đỏ + - - 0,36 + Đỏ + - - 10 0,44 + Đỏ + Tím + 11 0,61 - - - Tím + 12 0,63 + Vàng - Tím + 13 0,70 + Đỏ + - - 14 0,75 ++ Xanh ++ Tím + 15 0,81 ++ Đỏ + Tím + Nhận xét: Dịch chiết phân đoạn n-hexan BLT khai triển SKLM với hệ dung môi IV cho 15 vết 3.2.2.4 Kết phân đoạn Ethyl acetat - Kết SKLM dịch chiết phân đoạn Ethyl acetat hai loài ban với hệ dung mơi VI X trình bày sắc ký đồ hình 12 bảng 9,10,11,12 Bảng 3.6: Kết SKLM phân đoạn Ethyl acetat cuả BLN với hệ VI STT Rf UV254 UV365 TT Boric/Oxalic Độ đậm Màu Độ đậm Màu Độ đậm 0,25 + - - - - 0,68 + Xanh + - - 0,81 + - - - - 0,20 ++ Tím + Vàng + 38 0,41 - Hồng + - - 0,44 + Xanh + - - 0,46 ++ Nâu + Vàng + 0,47 + Đỏ + - - 0,51 + Đỏ + - - 10 0,55 + Đỏ + - - 11 0,64 - Đỏ + - - 12 0,66 - Xanh + - - 13 0,71 + Đỏ + - - Nhận xét: Dịch chiết phân đoạn Ethyl acetat BLN khai triển SKLM với hệ dung môi VI cho 13 vết Bảng 3.7: Kết SKLM phân đoạn Ethyl acetat cuả BLT với hệ VI Rf UV254 X100 Độ đậm Màu Độ đậm Màu Độ đậm 0,02 + - - - - 0,68 + Xanh + - - 0,81 + - - - - 0,20 ++ Tím + - - 0,31 - Tím + - - 0,44 + Xanh + - - 0,46 ++ Nâu + Vàng + STT UV365 TT Boric/Oxalic 39 0,47 + Đỏ + - - 0,55 + Đỏ + - - 10 0,71 + Đỏ + - - Nhận xét: Dịch chiết phân đoạn Ethyl acetat BLT khai triển SKLM với hệ dung môi VI cho 10 vết Bảng 3.8: Kết SKLM phân đoạn Ethyl acetat cuả BLN với hệ X Rf UV254 X100 Độ đậm Màu Độ đậm Màu Độ đậm 0,37 + Nâu + Vàng + 0,58 - Xanh + - - 0,62 + - - - - 0,63 + Đỏ + - - 0,68 + Đỏ + - - 0,71 + Đỏ + - - 0,74 + Đỏ + - - 0,82 ++ Xanh + - - 0,85 - Đỏ + - - STT UV365 TT Vanilin/H2SO4 Nhận xét: Dịch chiết phân đoạn Ethyl acetat BLN khai triển SKLM với hệ dung môi X cho vết Bảng 3.9: Kết SKLM phân đoạn dịch chiết Ethyl acetat cuả BLT với hệ X STT Rf UV254 Độ đậm UV365 Màu Độ đậm TT Vanilin/H2SO4 Màu Độ đậm 40 0,25 + - - - - 0,37 ++ Nâu ++ Vàng + 0,48 + - - - - 0,58 + Xanh + - - 0,62 ++ - - - - 0,71 ++ Nâu + Vàng + 0,74 + Đỏ + Nâu + 0,82 ++ Xanh + - - 0,85 - Đỏ + - - Nhận xét: Dịch chiết phân đoạn Ethyl acetat BLT khai triển SKLM với hệ dung môi X cho vết Kết quả: Sau thăm dò hệ dung môi, phân đoạn Hexan, hệ I hệ IV cho kết tốt Đối với phân đoạn Ethyl acetat, hệ VI hệ X cho kết tốt 3.3 Bàn luận Từ kết nghiên cứu trình bày mục 3.1 3.2 tiến hành so sánh khác loài Ban to (Hypericum patulum Thunb ex Murray) Ban nhỏ (Hypericum uralum Buch.Ham ex D Don) đặc điểm hình thái, đặc điểm hiển vi SKLM 3.3.1 Về đặc điểm hình thái Sự khác đặc điểm hình thái hai lồi BLT BLN trình bày bảng 13: Bảng 3.10: Sự khác đặc điểm hình thái lồi BLT BLN Bộ phận Đặc điểm Ban to Ban nhỏ Toàn Dạng Cây bụi Cây gỗ Thân Hình dạng Hình trụ trịn Thân lúc non có gân dọc dẹp bên rõ ràng, cuối có 41 hai sườn hình trụ trịn Lơng Lá Có lơng che chở Hình dạng Khơng có lơng che chở Phiến hình oval Phiến có hình mác già oval thn Mặt Nhợt nhạt, có hình trứng có tuyến Mặt xanh, mặt phủ suốt mờ Hoa Kích thước Đường kính khoảng 4cm Tràng Đường kính 1,5-3cm Hầu trịn Hình dạng Dài 3-5mm Quả nang hình trứng Quả Hình trứng đến gần tròn Dài 6-7mm Bầu Hạt bột phấn trắng Quả nang hình cầu đến gần trịn Hạt dạng sợi, nhỏ Hạt màu nâu đậm, dạng elip hình cong Vân trụ trịn Có vân ngang Có vân sóng thưa dạng gỗ Nhận xét: Dựa vào kết so sánh bảng 13 cho thấy phân biệt hai loài Ban to Ban nhỏ đặc điểm hình thái: dạng cây; hình dạng lơng che chở thân; hình dạng mặt lá; kích thước hoa bầu; hình dạng cánh hoa, quả, hạt; vân hạt 3.3.2 Về đặc điểm hiển vi Sự khác đặc điểm hiển vi loài BLT BLN trình bày bảng 14: Bảng 3.11: So sánh đặc điểm hiển vi hai loài Ban Đặc điểm thân Vi phẫu BLN Tỷ lệ diện tích mơ mềm Khoảng 2/3 Khoảng 1/1 Khía thân Vi phẫu BLT Khơng có Có Tế bào tiết nằm xen kẽ Có Khơng có Có Khơng có vỏ/mơ mềm ruột với tế bào mô giậu Bột thân Đám tinh bột hình trịn hình trứng 42 Nhận xét: Dựa vào kết so sánh bảng 13 cho thấy phân biệt hai lồi Ban to Ban nhỏ đặc điểm hiển vi: tỷ lệ diện tích mơ mềm vỏ/mơ mềm thân, khía thân, tế bào tiết vi phẫu đám tinh bột bột thân 3.3.3 Định tính SKLM Sự khác sắc ký đồ hai loài BLT BLN trình bày bảng 15,16, 17, 18: Bảng 3.12: So sánh sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết n – hexan BLT BLN – hệ I Hệ dung môi Hệ I Phân Đặc điểm Số vết sắc ký đồ đoạn Số vết Rf dịch chiết n- Số vết có BLT hexan Ban to Ban nhỏ 14 12 12 12 (Rf=0,05 0,75) Số vết có BLN Vết đặc biệt - Rf= 0,58 Huỳnh quang vàng Khơng có huỳnh quang Nhận xét: Từ điểm khác trên, dựa vào sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết nhexan với hệ dung mơi I phân biệt hai loài Ban to Ban nhỏ Bảng 3.13: So sánh sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết n-hexan BLT BLN – hệ IV Hệ dung môi Hệ IV Phân Đặc điểm Số vết sắc ký đồ đoạn Số vết Rf dịch chiết n- Số vết có BLT hexan Ban to Ban nhỏ 15 15 15 15 Số vết có BLN Nhận xét: Từ so sánh trên, dựa vào sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết n-hexan với hệ dung môi IV chưa đủ sở để phân biệt hai loài Ban to Ban nhỏ Bảng 3.14:So sánh sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết ethyl acetat BLT BLN-hệ VI Hệ dung môi Hệ IV Phân Đặc điểm Số vết sắc ký đồ đoạn Số vết Rf Ban to Ban nhỏ 10 13 10 10 43 dịch chiết Số vết có BLT Ethyl acetat Số vết có BLN (Rf=0,51; 0,64 0,66) Nhận xét: Từ điểm khác trên, dựa vào sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết ethyl acetat với hệ dung mơi VI phân biệt hai loài Ban to Ban nhỏ Bảng 3.15: So sánh sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết ethyl acetat BLT BLN–hệ X Hệ dung môi Hệ X Đặc điểm Số vết sắc ký đồ Ban to Ban nhỏ 9 Phân đoạn Số vết Rf dịch chiết Số vết có BLT (Rf= 0,63 0,68) Ethyl acetat Số vết có BLN (Rf= 0,25 0,48) Nhận xét: Từ điểm khác trên, dựa vào sắc ký đồ phân đoạn dịch chiết ethyl acetat với hệ dung mơi X phân biệt hai loài Ban to Ban nhỏ 44 CHƯƠNG IV: ĐỀ XUẤT VÀ KẾT LUẬN 4.1 Kết luận Đề tài đạt mục tiêu đề thu kết sau: 4.1.1 Về thực vật - Đã mơ tả hình thái hai - Đã mô tả đặc điểm vi phẫu thân lá, soi bột thân hai loài Ban to Ban nhỏ thu hái Sapa 4.1.2 Về mặt hóa học - Bằng phản ứng hóa học sơ xác định Ban to Ban nhỏ nghiên cứu chứa nhóm hợp chất sau: Flavonoid, Steroid, Caroten, Saponin, Acid amin, Đường khử, Tanin, Polysaccharid - Triển khai sắc kýp mỏng hai phân đoạn dịch chiết Hexan Ethyl acetat hai loài Ban nhiều hệ dung môi cho kết tách tốt + Đối với phân đoạn dịch chiết hexan: Hệ dung môi I: Hexan – Ethyl acetat (4:1) Hệ dung môi IV: Diclomethan – MeOH (9:1) + Đối với phân đoạn ethyl acetat: Hệ dung môi VI: Toluen – Ethyl acetat – Aceton – Acid Formic (5:2:2:1) Hệ dung môi X: Ethyl acetat-Acid formic-MeOH-Nước (25:1:1:1) 4.1.3 Phân biệt hai loài Ban to Ban nhỏ Kết so sánh đặc điểm thực vật hóa học hai lồi Hypericum uralum Buch.Ham Ex D Don Hypericum patulum Thunb ex Murray cho thấy phân biệt hai lồi dựa trên: đặc điểm hình thái; đặc điểm hiển vi; SKLM phân đoạn dịch chiết n-hexan với hệ dung môi I ethyl acetat với hệ dung môi VI hệ dung môi X 4.2 Đề xuất Từ kết thu được, đề tài có số đề xuất sau: - Xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm hai loài Hypericum uralum Buch.Ham Ex D Don Hypericum patulum Thunb ex Murray 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng việt Bùi Thị Bằng, Sàng lọc số vị thuốc, thuốc nhằm điều trị viêm gan man siêu vi B, Báo cáo kết nghiên cứu đề tài cấp bộ, Hà Nội, năm 2008 Bộ môn Dược liệu – Đại học Dược Hà Nội (2006), Bài giảng dược liệu, NXB Y học, Hà Nội, Tập I,II Bộ môn Dược liệu – Đại học Dược Hà Nội (2006), Thực tập dược liệu, Trung tâm thông tin – Thư viện – Trường Đại học Dược Hà Nội Bộ môn thực vật – Đại học Dược Hà Nội, Thực vật học, NXB Y học Bộ Y tế, Dược điển Việt Nam IV, NXB Y học Võ Văn Chi, Từ điển thuốc Việt Nam, NXB Y học Nguyễn Chiều, Ngô Đức Phương, Nguyễn Tập, Báo cáo tổng kết đề tài Hypericum,Viện dược liệu, 2002 Nguyễn Thượng Dong, Bùi Thị Bằng, Nghiên cứu thuốc hỗ trợ điều trị viêm gan mạn hoạt động từ dược liệu Phạm Hoàng Hộ, Cây cỏ Việt Nam, NXB Trẻ 10 Ngơ Phương, Bổ sung lồi thuốc cho hệ thực vật Việt Nam – Ban Wight (Hypericum wightianum Wall ex Wight et Arn.) – Clusiaceae, Tạp chí Dược liệu, tập 11, số 2/2006: 47-49 11 Ngô Đức Phương Phân biệt loài thuộc chi Hypericum L (Clusiaceae Lindl.) sử dụng làm thuốc có Việt Nam Luận văn thạc sĩ Sinh học, Hà Nội, tháng 12/2006 12 Ngô Phương, Trần Văn Thụy, Bổ sung loài thuộc chi Hypericum L (Họ Hypericaceae Juss.) cho hệ thực vật Việt Nam, Tuyển tập báo cáo Hội nghị Sinh thái Tài nguyên sinh vật lần thứ 3, 22/10/2009 – Viện sinh thái Tài nguyên sinh vật – Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam 13 Nguyễn Quốc Thức Nghiên cứu thực vật, thành phần hóa học tác dụng sinh học số loài thuộc hi Hypericum L Việt Nam Luận án tiến sỹ Dược học, Hà Nội 2006: 65-79 46 14 Nguyễn Quốc Thức cộng (2007), “Tác dụng chống viêm gan ức chế bệnh xơ gan Hypericum patulum Thunb ex Murray”, Tạp chí Dược liệu, 6: 174178 Tiếng nước ngồi 15 Ana Patrícia Guedes, Ph.D, Franklin Gregory, Ph.D, Manuel Fernandes-Ferreira, Ph.D Hypericum sp.: Essential oil composition and biological activities 16 Armen Takhtajan, Flowering Plants, Springer Publisher, 2009 17 Kroata Hazler Pilepic, Zeljan Males, Quantitative analysis of polyphenols in eighteen Hypericum taxa, Periodicum Biologorum, Vol 115, No 3, 495-462, 2013 18 Kyoko Ishiguro, Hisae Fukumoto, Akiko Suitani, Mariko Nakajima, Koichiro Isoi, Prenylated xanthones from cell suspension cultures of Hypericum Patulum, Phytochemistry Vol 42, No 2, pp 435-437 19 K Ishiguro, H Oku, K Isoi, XI Hypericum patulum: In vitro culture and protection of Xanthones and other Secondary Metabolites, Biotechnology in Agriculture and Foresty, Vol 43 Medicinal and Aromatic Plants XI 20 Kyoko Ishiguro, Rie Yamamoto, and Hisae Oku, Patulosides A and B, Novel Xanthone Glycosides from Cell Suspension Cultures of Hypericum patulum, Journal of natural products 21 M H Lecomte, Flore Générale de l'Indo-chine, Thực vật chí Đông Dương 22 Ozlem Demirkiran, Xanthones in Hypericum: Synthesis and Biological Activities, Top Heterocycl Chem 23 Pulok K Mukherjee, Rob Verpoorte, B Suresh, Evaluation of in-vivo wound healing activity of Hypericum patulum (Family: Hypericaceae) leaf extract on different wound model in rats, Journal of Ethnopharmacology 24 P Vijayan, S Vinod Kumar, S A Dhanaraj, P K Mukherjee and B Suresh, In vitro Cytotoxicity and Antitumour Properties of Hypericum mysorense and Hypericum patulum, PHYTOTHERAPY RESEARCH 25 Sara L Crockett, Norman K B Robson, Taxonomy and Chemotaxonomy of the Genus Hypericum, Med Aromat Plant Sci Biotechnol, Jan 2011 47 26 Wu Zhengyi, Peter H Raven and Hong Deyuan, Flora of China, Science Press and Missouri Botanical Garden, 13: 2-35, 2007 27 Yamakuni T, Aoki K, Nakatani K, Kondo N, Oku H, Ishiguro K, Ohizumi Y (2006) Neurosci Lett 394:206 28 Zeb Saddiqe, Ismat Naeem, Alya Maimoona1, Asmita V Patel and Claire Helli, Assay of flavonoid aglycones with HPLC in four species of genus Hypericum, Journal of Medicinal Plants Research ... TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC D? ?ỢC HÀ NỘI LÊ VŨ NGỌC HÂN GÓP PHẦN PHÂN BIỆT VỀ MẶT D? ?ỢC LIỆU LOÀI BAN VIỆT NAM Hypericum patulum Thunb ex Murray Và Hypericum uralum Buch Ham ex D Don HỌ BAN- HYPERICACEAE KHÓA... tránh nhầm lẫn sử d? ??ng hai loài này, đề tài ? ?Góp phần phân biệt mặt d? ?ợc liệu hai loài Ban Việt Nam Hypericum patulum Thunb ex Murray Hypericum uralum Buch. Ham ex D Don, họ Ban - Hypericaceae? ?? tiến... bột loài Hypericum patulum Thunb ex Murray loài Hypericum uralum Buch. Ham ex D Don - Nghiên cứu hóa học: Định tính lồi Hypericum patulum Thunb ex Murray lồi Hypericum uralum Buch. Ham ex D Don