Triển khai quy trình bào chế và nghiên cứu độ ổn định viên nén aciclovir kết dính sinh học đường tiêu hóa

ĐẶT VẤN ĐỀ Viên nén là một dạng bào chế được sử dụng rất phổ biến hiện nay do có những ưu điểm vượt trội như tiện lợi, dễ sử dụng, dễ bảo quản và vận chuyển, và đặc biệt thích hợp để sản xuất ở quy mô lớn. Tuy nhiên, hạn chế chính của dạng bào chế này là sinh khả dụng thất thường. Đối với các dược chất ít tan trong nước hoặc hấp thu kém ở đường tiêu hóa, sinh khả dụng thường thấp khi sử dụng ở dạng viên nén nếu không có những biện pháp cải thiện thích hợp. Aciclovir là một thuốc kinh điển điều trị virus, đã được sử dụng trong 3 thập kỉ nay với khả năng chủ yếu là chống lại Virus Herpes nhóm 1, Virus Herpes nhóm 2, và Virus Varicella Zoster. Do tác dụng chọn lọc trên virus mà không ảnh hưởng đến tế bào người nên ACV có rất ít tác dụng không mong muốn. Tuy nhiên, khả năng hấp thu theo đường uống chậm và không hoàn toàn, cộng với thời gian bán thải ngắn đã trở thành những rào cản lớn làm hạn chế sinh khả dụng của các dạng viên nén chứa ACV. Hiện nay trên thị trường hầu như chỉ có các dạng viên nén quy ước của ACV với giá thành khá cao, và phải sử dụng 5 đến 6 lần trong 1 ngày gây khó khăn cho người bệnh trong việc tuân thủ điều trị. Để khắc phục những nhược điểm này, đồng thời xuất phát từ thực tiễn nhằm phát triển hệ thuốc mới có khả năng ứng dụng vào thực tế, tại trường Đại học Dược Hà Nội đã có nghiên cứu bào chế hệ KDSH đường tiêu hóa chứa ACV 9. Các tác giả đã xây dựng được công thức bào chế viên nén có khả năng kết dính và kiểm soát giải phóng thuốc tại dạ dày ở quy mô phòng thí nghiệm. Trên cơ sở nghiên cứu này, chúng tôi thực hiện đề tài: “Triển khai quy trình bào chế và nghiên cứu độ ổn định viên nén aciclovir kết dính sinh học đường tiêu hóa” với các mục tiêu:  Triển khai quy trình bào chế viên nén Aciclovir kết dính sinh học đường tiêu hóa ở quy mô 5000 viên.  Đánh giá khả năng kết dính sinh học invivo của viên trên chó.  Theo dõi độ ổn định của viên nén Aciclovir bào chế.

NGUYỄN ĐỨC LONG

TRIỂN KHAI QUY TRÌNH BÀO CHẾ

VÀ NGHIÊN CỨU ĐỘ ỔN ĐỊNH VIÊN NÉN ACICLOVIR KẾT DÍNH SINH HỌC ĐƯỜNG TIÊU HÓA KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ

HÀ NỘI - 2014

NGUYỄN ĐỨC LONG

TRIỂN KHAI QUY TRÌNH BÀO CHẾ

VÀ NGHIÊN CỨU ĐỘ ỔN ĐỊNH VIÊN NÉN ACICLOVIR KẾT DÍNH SINH HỌC ĐƯỜNG TIÊU HÓA KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ

trường Đại học Dược Hà Nội, em đã nhận được rất nhiều sự giúp đỡ, động viên của các thầy cô, gia đình và bạn bè

Với lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới:

TS Vũ Thị Thu Giang DSCK II Lê Văn Thanh

Những người thầy đã tận tình hướng dẫn, chỉ bảo em, giúp em hoàn thành khóa luận này và tăng thêm niềm đam mê với khoa học

Em xin chân thành cảm ơn ThS Nguyễn Hồng Trang – Giảng viên trường Đại học Y – Dược Huế cùng các thầy cô giáo và các anh chị kỹ thuật viên của

bộ môn Bào chế đã hỗ trợ và tạo điều kiện thuận lợi cho em trong suốt thời gian làm thực nghiệm tại bộ môn

Em cũng xin cảm ơn Ban giám hiệu, các phòng ban, các thầy cô giáo và cán

bộ, nhân viên trường Đại học Dược Hà Nội – những người đã dạy bảo và giúp đỡ

em trong suốt 5 năm học tập dưới mái trường này

Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè, những người luôn ở bên em, chia sẻ, động viên và giúp đỡ em trong suốt thời gian qua

Hà Nội, ngày 23 tháng 4 năm 2014

Sinh viên Nguyễn Đức Long

ĐẶT VẤN ĐỀ 1

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN 2

1.1 Aciclovir 2

1.1.1 Cấu trúc hóa học 2

1.1.2 Tính chất lý, hóa 2

1.1.3 Dược động học 2

1.1.4 Chỉ định và liều dùng 4

1.2 Một số nghiên cứu bào chế dạng viên nén KDSH có chứa ACV 5

1.3 Đại cương về thẩm định quy trình sản xuất viên nén 6

1.3.1 Một số khái niệm 6

1.3.2 Kế hoạch thẩm định quy trình sản xuất viên nén 7

1.4 Đại cương về độ ổn định của thuốc 13

1.4.1 Một số khái niệm 13

1.4.2 Mục tiêu đánh giá độ ổn định 13

1.4.3 Tiêu chuẩn đánh giá độ ổn định 14

1.4.4 Các thử nghiệm dùng trong nghiên cứu độ ổn định 14

1.4.5 Phân vùng khí hậu 15

1.4.6 Đánh giá độ ổn định đối với viên nén 16

CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20

2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị 20

2.1.1 Nguyên vật liệu 20

2.1.2 Thiết bị 20

2.1.3 Động vật thí nghiệm 21

2.2 Nội dung nghiên cứu 21

2.3 Phương pháp nghiên cứu 22

2.3.1 Phương pháp bào chế viên nén ACV kết dính sinh học 22

2.3.4 Phương pháp nghiên cứu độ ổn định viên nén ACV 200mg KDSH 28

CHƯƠNG 3 THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 29

3.1 Nghiên cứu quy trình bào chế viên nén ACV KDSH trên quy mô 5000 viên 29

3.1.1 Khảo sát giai đoạn trộn bột kép 29

3.1.2 Khảo sát giai đoạn trộn tá dược trơn 31

3.1.3 Khảo sát giai đoạn dập viên 33

3.1.4 Kết luận 40

3.2 Đánh giá khả năng kết dính sinh học in-vivo 41

3.2.1 Nghiên cứu bào chế viên nén ACV KDSH có chứa chất cản quang 41

3.2.2 Đánh giá khả năng kết dính sinh học in-vivo trên chó 43

3.3 Nghiên cứu độ ổn định của viên nén ACV kết dính sinh học đường tiêu hóa 45

3.3.1 Thuốc được bảo quản trong lọ chất dẻo HDPE 45

3.3.2 Thuốc được bảo quản trong vỉ nhôm 48

CHƯƠNG 4 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 54

4.1 Kết luận 54

4.2 Kiến nghị 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO

PHỤ LỤC

BaSO4 Bari sulfat

HCl Acid hydrocloric

HDPE Polyethylen cao phân tử

HPLC Sắc kí lỏng hiệu năng cao

HPMC Hydroxypropyl-methylcellulose

KDSH Kết dính sinh học

LOD Mất khối lượng do sấy

MLT Giới hạn kiểm tra vi sinh vật

Na CMC Natri carboxy methyl cellulose

NaHCO3 Natri hydrocarbonat

NaOH Natri hydroxid

QTSX Quy trình sản xuất

RSD Độ lệch chuẩn tương đối

TCCS Tiêu chuẩn cơ sở

tlag Thời gian tiềm tàng

TKHH Tinh khiết hóa học

USP Dược điển Mỹ

Bảng 3: Kế hoạch lấy mẫu và chỉ tiêu chấp nhận 9

Bảng 4: Các vùng khí hậu 15

Bảng 5: Tần số kiểm tra ở các điều kiện bảo quản khác nhau 17

Bảng 6: Điều kiện bảo quản dùng trong nghiên cứu độ ổn định 18

Bảng 7: Nguyên vật liệu nghiên cứu 20

Bảng 8: Công thức lô 5000 viên 22

Bảng 9: Điều kiện bảo quản và khoảng thời gian lấy mẫu 28

Bảng 10: Kết quả đánh giá hàm lượng ACV trong mẫu bột kép khảo sát ở lô 1 29

Bảng 11: Hàm lượng ACV trong mẫu bột kép của 3 lô 30

Bảng 12: Chỉ số nén của các mẫu bột kép ở 3 lô 32

Bảng 13: Độ trơn chảy của các mẫu bột kép ở 3 lô 32

Bảng 14: Khối lượng và độ cứng của viên tại các tốc độ dập khác nhau 34

Bảng 15: Khối lượng và độ cứng của viên khảo sát trên lô 1 35

Bảng 16: Hàm lượng của các viên nén ACV khảo sát trên lô 1 36

Bảng 17: Kết quả thử hòa tan các viên nén khảo sát trên lô 1 36

Bảng 18: Lực KDSH, khả năng nổi, khả năng trương nở của viên trên lô 1 36

Bảng 19: Khối lượng viên nén ACV khảo sát trên lô 2 và 3 37

Bảng 20: Độ cứng của các viên nén khảo sát trên lô 2 và 3 38

Bảng 21: Hàm lượng của các viên nén khảo sát trên lô 2 và 3 39

Bảng 22: Kết quả thử hòa tan của các viên nén khảo sát trên lô 2 và 3 39

Bảng 23: Lực KDSH, khả năng nổi, trương nở của viên khảo sát trên lô 2 và 3 40

Bảng 24: Đề xuất 1 số chỉ tiêu chất lượng viên nén AVC KDSH đường tiêu hóa 40

Bảng 25: Khối lượng các tá dược trong các công thức mẫu viên 41

Bảng 26: Hàm lượng, thời gian tiềm tàng, khả năng trương nở của các mẫu viên 42

Bảng 27: Kết quả thử hòa tan của các mẫu viên 42

Bảng 28: % ACV còn lại của các viên nén bảo quản ở điều kiện thực 45

Bảng 32: Thời gian tiềm tàng, lực KDSH, khả năng trương nở của viên nén ACV bảo quản ở điều kiện thực 47Bảng 33: Thời gian tiềm tàng, lực KDSH, khả năng trương nở của viên nén ACV theo dõi ở điều kiện lão hóa cấp tốc 47Bảng 34: % ACV còn lại của các viên nén bảo quản trong vỉ ở điều kiện thực 49Bảng 35: % ACV còn lại của các viên nén bảo quản trong vỉ ở điều kiện lão hóa cấp tốc 49Bảng 36: Độ hòa tan của viên nén ACV theo dõi ở điều kiện thực 50Bảng 37: Độ hòa tan của viên nén ACV theo dõi ở điều kiện lão hóa cấp tốc 51Bảng 38: Thời gian tiềm tàng, lực KDSH, khả năng trương nở của viên nén ACV theo dõi ở điều kiện thực 52Bảng 39: Thời gian tiềm tàng, lực KDSH, khả năng trương nở của viên nén ACV theo dõi ở điều kiện lão hóa cấp tốc 52

Hình 2: Thiết bị đánh giá lực kết dính sinh học chế tạo từ cân Roberval 27Hình 3: Sơ đồ lấy mẫu phân tầng (cỡ mẫu: 10) 29Hình 4: Hình ảnh chụp X-quang trên chó sau khi uống thuốc ở các thời điểm khác nhau 44

ĐẶT VẤN ĐỀ

Viên nén là một dạng bào chế được sử dụng rất phổ biến hiện nay do có những

ưu điểm vượt trội như tiện lợi, dễ sử dụng, dễ bảo quản và vận chuyển, và đặc biệt thích hợp để sản xuất ở quy mô lớn Tuy nhiên, hạn chế chính của dạng bào chế này

là sinh khả dụng thất thường Đối với các dược chất ít tan trong nước hoặc hấp thu kém ở đường tiêu hóa, sinh khả dụng thường thấp khi sử dụng ở dạng viên nén nếu không có những biện pháp cải thiện thích hợp

Aciclovir là một thuốc kinh điển điều trị virus, đã được sử dụng trong 3 thập kỉ

nay với khả năng chủ yếu là chống lại Virus Herpes nhóm 1, Virus Herpes nhóm 2,

và Virus Varicella Zoster Do tác dụng chọn lọc trên virus mà không ảnh hưởng đến

tế bào người nên ACV có rất ít tác dụng không mong muốn Tuy nhiên, khả năng hấp thu theo đường uống chậm và không hoàn toàn, cộng với thời gian bán thải ngắn đã trở thành những rào cản lớn làm hạn chế sinh khả dụng của các dạng viên nén chứa ACV Hiện nay trên thị trường hầu như chỉ có các dạng viên nén quy ước của ACV với giá thành khá cao, và phải sử dụng 5 đến 6 lần trong 1 ngày gây khó khăn cho người bệnh trong việc tuân thủ điều trị

Để khắc phục những nhược điểm này, đồng thời xuất phát từ thực tiễn nhằm phát triển hệ thuốc mới có khả năng ứng dụng vào thực tế, tại trường Đại học Dược

Hà Nội đã có nghiên cứu bào chế hệ KDSH đường tiêu hóa chứa ACV [9] Các tác giả đã xây dựng được công thức bào chế viên nén có khả năng kết dính và kiểm soát giải phóng thuốc tại dạ dày ở quy mô phòng thí nghiệm Trên cơ sở nghiên cứu này,

chúng tôi thực hiện đề tài: “Triển khai quy trình bào chế và nghiên cứu độ ổn định viên nén aciclovir kết dính sinh học đường tiêu hóa” với các mục tiêu:

 Triển khai quy trình bào chế viên nén Aciclovir kết dính sinh học đường tiêu hóa ở quy mô 5000 viên

 Đánh giá khả năng kết dính sinh học in-vivo của viên trên chó

 Theo dõi độ ổn định của viên nén Aciclovir bào chế

 Tính chất vật lý: Bột kết tinh màu trắng hoặc gần như trắng, nóng chảy ở khoảng

2300C, sau đó phân hủy Khó tan trong nước, dễ tan trong dimethyl sulfoxyd, rất khó tan trong ethanol 96 % Tan trong các dung dịch acid vô cơ và hydroxyd kiềm loãng [3], [5]

 Độ tan của ACV:

Bảng 1: Độ tan của ACV trong các môi trường pH khác nhau [10]

1.1.3 Dược động học

Hấp thu:

 Khả năng hấp thu ACV theo đường uống thấp (sinh khả dụng khoảng 10% - 20%) [20] Theo một số tài liệu, nguyên nhân là do:

 Độ tan trong nước của ACV thấp (khoảng 0,2% ở 250C) [10]

 Thời gian lưu thuốc ngắn ở vị trí hấp thu (ở phía trên đường tiêu hóa đến tá tràng và hỗng tràng) [10]

 ACV có tính thấm kém, hấp thu theo cơ chế khuếch tán thụ động qua kẽ tế bào (có diện tích rất nhỏ so với diện tích bề mặt màng tế bào và có các protein liên kết nối 2 vách tế bào) nên hạn chế sự vận chuyển thuốc [19]

 Thức ăn không làm ảnh hưởng tới hấp thu của thuốc khi dùng đường uống [2]

Phân bố

 Thuốc phân bố rộng vào các dịch trong cơ thể Nồng độ thuốc trong dịch não tủy xấp xỉ 50% so với nồng độ thuốc trong huyết thanh, đây được xem là 1 yếu tố quan trọng trong điều trị viêm não do virus [2]

Như vậy, theo tính chất lý hóa và dược động học của ACV, ta có thể nhận thấy

2 rào cản lớn đối với việc hấp thu của ACV ở các dạng viên nén quy ước là:

 Độ tan của ACV thấp tại các môi trường dọc theo ruột non (do pH ở đây thường là khoảng trung tính hoặc kiềm)

 ACV hấp thu chủ yếu ở phần đầu ruột non Cơ chế hấp thu ACV là cơ chế vận chuyển thụ động

Trái lại, các đặc điểm hòa tan và hấp thu của ACV kể trên lại thuận lợi cho dạng viên nén kết dính sinh học và giải phóng thuốc kéo dài tại dạ dày Cụ thể, lượng ACV được kiểm soát giải phóng dần ra khỏi viên hòa tan thuận lợi trong dịch vị, được đưa

từ từ qua phần đầu ruột non, do đó sẽ hạn chế cạnh tranh hấp thu, giúp thuốc hấp thu

hiệu quả và duy trì nồng độ trong tuần hoàn dài hơn Như vậy, cùng một lượng dược chất, nhưng lượng ACV được hấp thu và duy trì trong máu theo lý thuyết là cao hơn

so với các dạng bào chế quy ước

1.1.4 Chỉ định và liều dùng

Chỉ định:

ACV được chỉ định trong các trường hợp sau [6]:

 Điều trị khởi đầu và dự phòng nhiễm virus Herpes Simplex - 1 và Herpes

Simplex - 2 ở da và niêm mạc, thần kinh và sinh dục, viêm não Herpes Simplex

 Điều trị nhiễm Herpes zoster cấp tính ở mắt, phổi, thần kinh

 Điều trị khởi đầu và tái phát Herpes sinh dục

 Dự phòng và điều trị nhiễm virus ở người suy giảm miễn dịch, cấy ghép cơ quan, bệnh thủy đậu

Liều dùng:

Liều ACV phụ thuộc vào mục đích điều trị [15]:

 Virus Varicella zoster ít nhạy cảm với thuốc hơn virus Herpes simplex và

liều cao hơn đôi khi được sử dụng

 Đối với bệnh Herpes Simplex ở trẻ sơ sinh, liều dùng là 60 mg/kg/ngày chia

làm 3 liều tiêm tĩnh mạch

 Trẻ sơ sinh, trẻ em, thanh thiếu niên và những người có bệnh viêm não

Herpes Simplex được điều trị bằng 30 mg/kg/ngày chia làm 3 lần

 Trẻ em dưới một tuổi dùng 30 mg/ kg/ngày, chia làm ba lần

 Đối với trẻ em suy giảm miễn dịch bị thủy đậu, liều 1500 mg/m2 bề mặt cơ thể mỗi ngày, chia làm 3 lần, trong 7 - 10 ngày

 Trẻ sơ sinh mắc thủy đậu được điều trị bằng ACV tiêm tĩnh mạch 30 - 60 mg/kg/ngày chia làm 3 lần trong 10 ngày

 Đối với bệnh ở da, miệng, hoặc mắt, điều trị trong 14 ngày là phù hợp

 Đối với viêm não và bệnh phổ biến, điều trị trong 21 ngày được khuyến khích

Từ những trình bày ở trên, có thể kết luận việc bào chế chế phẩm viên nén ACV kiểm soát giải phóng thuốc ở dạ dày có ý nghĩa nhằm điều chỉnh và duy trì nồng độ

thuốc giải phóng xuống phần đầu của ruột non, đảm bảo tỉ lệ dược chất được hấp thu cao, do đó tăng hiệu quả điều trị của ACV Việc giảm liều dùng thuốc giúp giảm được độc tính của thuốc và tránh gây lãng phí Hiện nay trên thị trường chỉ có các dạng viên nén quy ước chứa ACV mà chưa có chế phẩm viên nén kiểm soát giải phóng thuốc tại dạ dày Do đó, việc nghiên cứu bào chế viên ACV kết dính sinh học (KDSH) giải phóng kéo dài (GPKD) có khả năng ứng dụng được vào thực tiễn

1.2 Một số nghiên cứu bào chế dạng viên nén KDSH có chứa ACV

- Roberto R.C và các cộng sự [17] đã tiến hành nghiên cứu bào chế viên nén kết dính niêm mạc đường tiêu hóa sử dụng chitosan (CS) và hydroxypropyl-methylcellulose (HPMC) để kiểm soát giải phóng của ACV Nghiên cứu khả năng trương nở, kết dính và hòa tan được thực hiện ở 2 pH là 1,5 và 4 Tất cả các mẫu viên nén được thiết kế cho khả năng kết dính tốt trên niêm mạc dạ dày do sự có mặt của 1 hoặc cả 2 thành phần là CS và HPMC Viên nén chứa HPMC và CS/HPMC cho thấy khả năng duy trì giải phóng trong 24 giờ, tuy nhiên khả năng hòa tan hoàn toàn của viên nén không phải ở thời điểm đó Trái lại, viên nén chỉ chứa CS có thể giải phóng tất cả lượng ACV trong 4 giờ, không có dư lượng dược chất nào trong viên nén, do khả năng lưu giữ kém của CS và quá trình ăn mòn ở pH 1,5 Những kết quả này cho phép tác giả kết luận rằng CS là tá dược được lựa chọn để xây dựng công thức lưu giữ thuốc ở dạ dày do đã được chứng minh tính tương thích với dạ dày

- Panigrahy R.N và cộng sự [16] tiến hành nghiên cứu bào chế viên nén ACV KDSH dạng cốt theo phương pháp dập thẳng, sử dụng các polyme KDSH CP 971P, natri alginat, HPMC K15M Nghiên cứu về tương tác giữa các thành phần được phân tích bằng quang phổ hồng ngoại cho thấy không có sự tương tác giữa dược chất và polyme Kết quả thực nghiệm chứng minh tất cả các mẫu viên bào chế đều đạt chất lượng tốt về độ cứng (5 - 6 kg/cm2), mật độ (~ 1 g/cm3), hàm lượng dược chất (> 90

%) và thời gian kết dính ex - vivo (> 12 giờ); trong đó CP 971P có khả năng KDSH tốt

hơn HPMC K15M và natri alginat Viên nén bào chế đều có khả năng trương nở tốt, GPDC kéo dài 12 giờ theo động học bậc không Nghiên cứu độ ổn định của lô tối ưu cho thấy các đặc tính lý hóa của thuốc không thay đổi đáng kể sau 90 ngày bảo quản ở

điều kiện lão hóa cấp tốc (nhiệt độ 40°C, độ ẩm tương đối 75%)

- Tavakoli N và cộng sự [22] đã tiến hành nghiên cứu bào chế hệ nổi, KDSH chứa ACV theo phương pháp dập thẳng Các thành phần cơ bản của viên gồm tá dược tạo khí (natri hydrocarbonat kết hợp với acid citric), polyme KDSH HPMC K4M kết hợp với CP hoặc Na CMC, polyvinyl pyrrolidon, natri alginat Nghiên cứu khả năng nổi cho thấy viên chứa 15% tá dược tạo khí có tlag là 10 - 30 giây, thời gian nổi kéo dài 24 giờ Sau 12 giờ, khoảng 60 - 90% ACV được giải phóng Tốc độ giải phóng dược chất giảm khi tăng tỷ lệ polyme Thông qua các kết quả nghiên cứu cho thấy viên bào chế với 15 % tá dược tạo khí, 20 – 30% HPMC K4M, 30 % Na CMC (hoặc

20 % PVP, 20 % natri alginat) có khả năng nổi tốt và giải phóng dược chất in - vitro

kéo dài Tóm lại, sự kết hợp của một polyme dẫn chất cellulose (HPMC) với một hoặc nhiều polyme có nguồn gốc tự nhiên hoặc polyme được sản xuất bằng phương pháp tống hợp hóa học có thể bào chế một hệ nổi, KDSH đạt các yêu cầu về thời gian tiềm tàng, thời gian nổi, khả năng kết dính và tốc độ giải phóng dược chất

Hiện tại trong nước đã có các nghiên cứu về viên nang và vi cầu chứa ACV nhằm mục đích cải thiện sinh khả dụng của thuốc Tuy nhiên, vẫn chưa có công trình nào về dạng bào chế viên nén giải phóng kéo dài chứa dược chất ACV – dạng dùng phổ biến và thuận tiện cho người bệnh

1.3 Đại cương về thẩm định quy trình sản xuất viên nén

Thuật ngữ “Thẩm định” được áp dụng để xác minh quy trình sản xuất lần cuối cùng ở quy mô sản xuất Thông thường tối thiểu là ba lô sản xuất liên tục cần được thẩm định đạt yêu cầu trước khi đưa sản phẩm ra thị trường [12]

Thẩm định quy trình của dạng thuốc rắn dùng đường uống cần phải có công

thức lô và nguyên tắc hoạt động các thiết bị sử dụng để sản xuất cụ thể Các thông số quy trình cần được kiểm soát, giám sát và kiểm tra yêu cầu được thực hiện trong suốt quá trình sản xuất số lượng lớn công thức thuốc dạng rắn đường uống phụ thuộc vào phương pháp sản xuất và dạng bào chế của nó (viên nén được nén trực tiếp, viên nén được bao, viên nang, bột/hạt) Giới hạn chấp nhận nên đi vào xem xét bản chất của các dạng thuốc uống rắn, ví dụ đối với các dạng bào chế liên quan đến khả năng giải phóng thuốc (giải phóng trực tiếp hoặc được điều chỉnh giải phóng) [12]

Thẩm định đầy đủ sẽ đem lại lợi ích cho nhà sản xuất theo nhiều cách [8]:

 Nâng cao hiểu biết về quy trình, giảm nguy cơ xảy ra sự cố trong sản xuất,

và vì thế đảm bảo quy trình hoạt động hiệu quả

 Đảm bảo chắc chắn một quy trình sản xuất sẽ tạo ra các sản phầm luôn đảm bảo chất lượng theo yêu cầu

 Giảm thiểu sự cố trong quá trình hoạt động sản xuất, giảm nguy cơ cho những chi phí do sai hỏng

 Giảm nguy cơ của việc vi phạm các quy định của cơ quan quản lý

 Tạo điều kiện cho việc kiểm tra và bảo trì hệ thống tốt hơn

 Cho phép tất cả nhân viên có thể kiểm soát và cải tiến quy trình

 Một quy trình được thẩm định đầy đủ sẽ không cần phải có nhiều các kiểm tra trong quá trình sản xuất và kiểm nghiệm sản phẩm cuối cùng

1.3.2 Kế hoạch thẩm định quy trình sản xuất viên nén

1.3.2.1 Công thức lô

Để thực hiện thẩm định QTSX, công thức lô của dạng thuốc rắn dùng làm thuốc phải được xác định đúng Tất cả các thành phần của công thức dùng trong quy trình sản xuất phải được liệt kê, với khối lượng của chúng cho 1 lô đầu tiên (bao gồm cả phần thừa, nếu cần) [12]

1.3.2.2 Thiết bị chính và các nhóm thiết bị

Các thiết bị chính được sử dụng cho quy trình sản xuất cần được xác định cụ thể và các nhóm của các thiết bị cần được chỉ ra Các thiết bị được phân loại nói chung bởi các đơn vị hoạt động (ví dụ, nhào và trộn, sấy khô, giảm kích thước hạt,

đơn vị phân liều, bao, đóng gói sơ cấp, in ấn, đóng gói) Đối với mỗi thao tác, các thiết bị được tiếp tục phân loại theo các lớp (nguyên tắc hoạt động) [12]

1.3.2.3 Mô tả quy trình và các thông số quy trình

Các thông số của quy trình sau đây được khuyến cáo phải được kiểm soát và giám sát như một phần của thẩm định quy trình, tùy thuộc vào hình thức và phân loại quá trình sản xuất Các thông số quá trình liệt kê dưới đây không đầy đủ Dưới đây là

1 vài ví dụ và có thể khác nhau tùy thuộc vào loại thiết bị sử dụng [12]

Bảng 2: Quy trình sản xuất viên nén [12]

Giai đoạn Các thông số trọng yếu (CPP) Rây nguyên liệu thô (nếu cần) • Cỡ rây

Trộn sơ bộ (nếu cần) • Thời gian trộn, tốc độ trộn, khối lượng mẻ Xát hạt khô (nếu áp dụng)

• Cỡ rây

• Tốc độ xát

• Tốc độ cấp nguyên liệu

Trộn lần cuối • Thời gian trộn, cỡ mẻ, tốc độ

• Cỡ rây (cho trộn khô, nếu cần)

Sấy • Thời gian sấy

• Phân bố nhiệt độ sấy Làm nguội • Nhiệt độ, thời gian Dập viên (bao gồm phát hiện kim

loại và loại bụi)

• Thông số máy dập viên

• Tốc độ dập

Bào chế dịch/hỗn dịch bao (nếu có) • Nhiệt độ

• Thông số máy

• Tốc độ

• Hệ thống cấp nguyên liệu Đóng gói chính

• Thông số máy

• Tốc độ máy

• Tốc độ cấp nguyên liệu Kiểm soát môi trường (chỉ áp

dụng cho các sản phẩm nhạy cảm

với nhiệt và/hoặc ẩm)

• Nhiệt độ

• Độ ẩm tương đối

1.3.2.4 Kế hoạch lấy mẫu và chỉ tiêu chấp nhận

Kế hoạch lấy mẫu và chỉ tiêu chấp nhận áp dụng trong thẩm định quy trình sản xuất được thể hiện ở bảng 3

Bảng 3: Kế hoạch lấy mẫu và chỉ tiêu chấp nhận [12]

Giai đoạn Kế hoạch lấy mẫu Kiểm tra Chỉ tiêu chấp nhận

Sấy (nếu

yêu cầu)

Ít nhất 3 mẫu từ ít nhất

3 vị trí khác nhau hoặc tại 3 điểm thời gian trong buồng sấy hoặc trong quá trình sấy khô

Mất khối lượng do sấy (LOD) - phân tích một mẫu cho mỗi vị trí

Dựa trên đặc điểm

kỹ thuật sản phẩm cho LOD

Nhào/trộn

Ít nhất 3 mẫu từ ít nhất

10 vị trí khác nhau phân bố đều khắp máy trộn (Hai mươi điểm cho máy trộn đối lưu)

Đồng đều sau nhào/

trộn (định lượng) – Phân tích 1 mẫu ở mỗi vị trí

- Kết quả mỗi mẫu: Trung bình ± 10%

- Tất cả các mẫu: RSD ≤ 5,0%

Lấy mẫu hỗn hợp (có thể được thực hiện như 1 phần của đánh giá trước khi đưa ra thị trường)

Nếu yêu cầu,

 khả năng trơn chảy

 Thông số kỹ thuật khác

(*): Có thể được bỏ qua nếu bước tiếp theo là dập viên và/hoặc đóng gói

- Theo tiêu chuẩn

- Độ đồng đều: Theo chuyên luận

- Giới hạn kiểm tra

vi sinh vật (MLT): Theo phương pháp chuyên luận MLT

- Các chỉ tiêu khác: theo chuyên luận/ Theo tiêu chuẩn

Dập viên Lấy mẫu phân tầng

Độ đồng đều

 Bất kỳ thông số kỹ thuật nội bộ khác, nếu cần thiết

- Độ đồng đều: theo chuyên luận

- Các chỉ tiêu khác: theo chuyên luận / Theo tiêu chuẩn

Lấy mẫu hỗn hợp (có thể được thực hiện như 1 phần của đánh giá trước khi đưa ra thị trường)

 Hình thức

 Độ đồng đều

 Hàm lượng (hiệu lực)

 thông số kỹ thuật khác

(**): Có thể được thực hiện sau khi bao và/hoặc đóng gói, nếu có

- Độ đồng đều: Theo chuyên luận

- MLT: Theo phương pháp chuyên luận MLT

- Những chỉ tiêu khác: chuyên luận /Theo tiêu chuẩn

Bao viên Lấy 1 mẫu từ mỗi nồi

bao

Định lượng (áp dụng cho trường hợp chỉ bao dược chất)

Hàm ẩm/dư lượng dung môi

- Định lượng: Theo tiêu chuẩn

- Hàm ẩm/dư lượng dung môi: theo hướng dẫn của ICH

Ít nhất là mười điểm phân bố ở tất cả các phân lô (Kế hoạch lấy mẫu khác có thể được chấp nhận nếu là thăm

 Hình thức

 Độ đồng đều (áp dụng cho trường hợp chỉ bao dược chất)

 Hàm lượng (hiệu lực thuốc)

 Các thông số kĩ thuật khác (***): Có thể bỏ qua nếu được đóng gói

- Độ đồng đều: theo chuyên luận riêng

- Các chỉ tiêu khác: theo chuyên luận / Theo tiêu chuẩn

In Lấy mẫu phân tầng  Hình thức Theo tiêu chuẩn Đóng bột/

hạt vào lọ Lấy mẫu phân tầng

 Đồng đều khối lượng

Yêu cầu ± 5% so với ghi trên nhãn Đóng gói sơ

cấp Lấy mẫu phân tầng

 Hình thức

 Tính toàn vẹn của bao bì (nếu yêu cầu)

Theo tiêu chuẩn

Bản thân thẩm định không giúp cải thiện quy trình Thẩm định chỉ có thể khẳng định hoặc phủ định quy trình đã được xây dựng phù hợp và được kiểm soát hay không Tốt nhất là bất kì hoạt động xây dựng quy trình nào ở giai đoạn sau đều phải được kết thúc bằng thẩm định

1.4 Đại cương về độ ổn định của thuốc

1.4.1 Một số khái niệm

Độ ổn định là khả năng một hoạt chất hay một sản phẩm thuốc duy trì được các đặc tính của nó trong giới hạn quy định trong suốt tuổi thọ (các khía cạnh tính chất hóa học, tính chất vật lý, vi sinh và sinh dược học của ổn định phải được xem xét) [1], [11]

Tuổi thọ của thuốc là khoảng thời gian tính từ khi thuốc sản xuất ra đến khi thuốc không còn đáp ứng được các yêu cầu chất lượng theo tiêu chuẩn quy định trong điều kiện bảo quản xác định [11]

Mục tiêu của nghiên cứu độ ổn định là xác định được tuổi thọ, cụ thể là thời gian bảo quản trong điều kiện xác định mà trong khoảng thời gian đó các sản phẩm thuốc vẫn đáp ứng được các thông số kĩ thuật đã thiết lập [11] Nghiên cứu độ ổn định sẽ giúp cung cấp bằng chứng về chất lượng của thuốc hoặc sản phẩm thuốc thay đổi theo thời gian dưới tác động của các yếu tố môi trường như nhiệt độ, độ ẩm, và ánh sáng, và để thiết lập thời gian kiểm tra lại hay thời hạn sử dụng cho các sản phẩm thuốc và điều kiện bảo quản [14]

1.4.2 Mục tiêu đánh giá độ ổn định

Nghiên cứu độ ổn định của thuốc nhằm 4 mục tiêu chính [7]:

 Giai đoạn phát triển sản phẩm

Ở giai đoạn này, các phép thử cấp tốc được thực hiện nhằm lựa chọn công thức bào chế, quy trình sản xuất thuốc và đồ bao gói thích hợp Sau khi có sản phẩm, tiếp tục dùng các thử nghiệm cấp tốc để dự báo độ ổn định, sơ bộ đánh giá tuổi thọ trong điều kiện bảo quản đã định Các thử nghiệm dài hạn bắt đầu được triển khai phục vụ các giai đoạn tiếp theo

 Giai đoạn lập hồ sơ đăng ký

Trên cơ sở kết quả thực nghiệm cấp tốc và dài hạn, nhà sản xuất xác định tuổi thọ và hạn dùng của thuốc ở điều kiện bảo quản và bao gói thích hợp Các thông tin này được ghi rõ trên nhãn thuốc và đồ bao gói

 Giai đoạn thuốc lưu hành trên thị trường

Nhà sản xuất tiếp tục theo dõi độ ổn định để khẳng định tuổi thọ của thuốc trong điều kiện bảo quản đã đề xuất Để đảm bảo an toàn về chất lượng thuốc lưu hành trên thị trường, các cơ quan quản lý cũng theo dõi độ ổn định của thuốc thông qua việc thanh tra, kiểm tra QTSX, lấy mẫu thuốc kiểm nghiệm

1.4.3 Tiêu chuẩn đánh giá độ ổn định

Các tiêu chuẩn đánh giá độ ổn định của thuốc là [7]:

Độ ổn định hóa học: Các tính chất hóa học (thành phần định tính và định lượng) của hoạt chất có mặt trong chế phẩm nằm trong một giới hạn cho phép theo tiêu chuẩn chất lượng

 Độ ổn định vật lý: Các đặc điểm vật lý của nguyên liệu làm thuốc như màu sắc, trạng thái tinh thể, độ tan, điểm chảy, không thay đổi Các đặc điểm của chế phẩm như màu sắc, độ cứng, độ rã, độ hòa tan dao động trong khoảng giới hạn cho phép của tiêu chuẩn chất lượng

 Độ ổn định vi sinh: Độ vô trùng hoặc giới hạn nhiểm khuẩn của chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu của tiêu chuẩn Nếu chế phẩm có chứa chất kháng khuẩn thì hàm lượng của nó không được vượt quá giới hạn cho phép

 Độ ổn định điều trị: Tác dụng điều trị của chế phẩm không thay đổi

Về nguyên tắc, các thử nghiệm về độ ổn định nên được tiến hành ở các điều kiện rất khắc nghiệt hơn là ở các điều kiện kém khắc nghiệt vì lợi ích của bệnh nhân

và đồng thời để phát hiện dễ dàng các chất hoặc công thức dễ gặp các vấn đề đặc biệt

về độ ổn định [11]

1.4.4 Các thử nghiệm dùng trong nghiên cứu độ ổn định

Các thử nghiệm dùng trong nghiên cứu độ ổn định gồm có [1]:

 Thử nghiệm nhanh: thử ở nhiệt độ cao trong 1 đến 12 tuần nhằm xác định nhanh các yếu tố ảnh hưởng đến độ ổn định, từ đó lựa chọn công thức thuốc, thông số kĩ

 Thử nghiệm khắc nghiệt: Được coi là đồng nghĩa với lão hóa cấp tốc Tuy nhiên,

nó thường dùng các yếu tố phân hủy thuốc ở mức độ cao hơn Thử nghiệm khắc nghiệt thường nâng nhiệt độ cao lên hơn 100C so với lão hóa cấp tốc, độ ẩm trên 75% hoặc cao hơn nữa

 Thử nghiệm dài hạn (ở điều kiện thực): Là thử nghiệm bảo quản thuốc ở điều kiện thực, toàn bộ các chỉ tiêu chất lượng theo tiêu chuẩn được đánh giá kéo dài theo thời gian đến khi thuốc không còn đáp ứng được chất lượng đã đề ra Thử nghiệm này có ý nghĩa xác định chính xác tuổi thọ, thời hạn sử dụng của thuốc

1.4.5 Phân vùng khí hậu

Tuổi thọ của thuốc phụ thuộc vào vùng khí hậu mà thuốc lưu hành Để nghiên cứu độ ổn định của thuốc người ta chia thế giới thành 4 vùng khí hậu như sau:

Bảng 4: Các vùng khí hậu [11]

Vùng khí hậu Định nghĩa Điều kiện thử nghiệm dài hạn

II Khí hậu cận nhiệt đới và Địa

Trung Hải 250C / Độ ẩm 60%

III Khí hậu nóng và khô 300C / Độ ẩm 35%

IVa Khí hậu nóng và ẩm 300C / Độ ẩm 65%

IVb Khí hậu nóng và rất ẩm 300C / Độ ẩm 75%

Điều kiện thực để đánh giá độ ổn định trong 1 thời gian dài ở vùng ASEAN là điều kiện của khu vực IVb (300C/ Độ ẩm 75%) [11]

1.4.6 Đánh giá độ ổn định đối với viên nén

1.4.6.1 Lựa chọn lô

Các dữ liệu độ ổn định cần được nghiên cứu trên các lô của cùng một công thức

và dạng bào chế như trong hệ thống bao bì đóng gói dự kiến để lưu hành trên thị trường [11]

Việc lựa chọn lô được thực hiện theo chỉ dẫn sau [11]:

 Đối với nghiên cứu độ ổn định của chất hóa học mới, cần được nghiên cứu trên ít nhất ba lô đầu tiên của các sản phẩm thuốc

 Đối với thuốc Generic và các thay đổi, áp dụng nguyên tắc dưới đây:

 Đối với dạng bào chế quy ước (ví dụ như dạng thuốc rắn, dung dịch giải phóng trực tiếp) và khi các dược chất được cho là bền vững, có thể chấp nhận

dữ liệu ổn định nghiên cứu trên ít nhất hai lô ở quy mô pilot

 Đối với các dạng bào chế đặc biệt (ví dụ dạng thuốc giải phóng kéo dài) hoặc đối với các dược chất được coi là không bền vững, yêu cầu dữ liệu về độ

ổn định trên 3 lô đầu tiên Hai trong ba lô nên ít nhất là ở quy mô pilot, lô thứ

ba có thể nhỏ hơn, nếu hợp lý

 QTSX áp dụng cho những lô đầu tiên nên mô phỏng lại quy trình áp dụng cho lô sản xuất ở quy mô công nghiệp và nên tạo ra các sản phẩm có cùng chất lượng và đạt cùng tiêu chuẩn chất lượng như sản phẩm dự định lưu hành

 Nếu có thể, các lô của sản phẩm thuốc nên được sản xuất bởi việc sử dụng các lô nguyên liệu dược chất khác nhau

1.4.6.2 Tiêu chuẩn chất lượng

Tiêu chuẩn chất lượng là danh sách các thử nghiệm, phương pháp kiểm nghiệm kèm theo và các giới hạn chấp nhận bao gồm khái niệm các giới hạn chấp nhận khác nhau đối với tiêu chuẩn chất lượng khi xuất xưởng và tiêu chuẩn chất lượng tuổi thọ Nghiên cứu sự ổn định nên bao gồm kiểm tra những đặc tính của sản phẩm thuốc dễ bị thay đổi trong quá trình bảo quản và có khả năng ảnh hưởng đến chất

lượng, an toàn và/hoặc hiệu lực Thử nghiệm bao gồm (nếu thích hợp) tính chất vật

lý, hóa học, sinh học và các thuộc tính vi sinh, hàm lượng chất bảo quản (ví dụ như chất chống oxy hóa, chất kháng khuẩn), và các thử nghiệm chức năng (ví dụ, đối với một hệ phân liều) [11]

Đối với viên nén, các chỉ tiêu cần đánh giá là: Hình thức, mùi, màu, định lượng, sản phẩm phân huỷ, độ hòa tan (hoặc độ rã, nếu hợp lý), hàm ẩm, độ cứng/độ bở [11] Một số thuốc dạng bào chế hiện đại có sinh khả dụng cải biến như thuốc tác dụng kéo dài, thuốc giải phóng theo chương trình có các chỉ tiêu được quy định riêng như tốc độ hòa tan, giải phóng dược chất [11]

1.4.6.3 Tần số thử nghiệm

Đối với các nghiên cứu dài hạn, tần số kiểm tra cần đủ để thiết lập hồ sơ về tính

ổn định của thành phẩm thuốc Tần số thử nghiệm ở điều kiện bảo quản dài hạn thông thường là mỗi 3 tháng trong năm đầu tiên, mỗi 6 tháng trong năm thứ hai và mỗi 1 năm sau đó trong hạn sử dụng đề xuất [11]

Ở điều kiện bảo quản lão hóa cấp tốc, cần tối thiểu là ba thời điểm, kể cả thời điểm đầu và thời điểm kết thúc (0, 3, và 6 tháng), đối với thời gian thử nghiệm là 6 tháng Trong trường hợp (dựa trên kinh nghiệm phát triển) các kết quả nghiên cứu lão hóa cấp tốc cho thấy sự biến đổi đáng kể của các chỉ tiêu theo dõi, cần thực hiện thêm thử nghiệm bằng cách thêm một số mẫu ở thời điểm kết thúc hoặc bằng cách thêm thời điểm thứ 4 vào thiết kế nghiên cứu [11]

Bảng 5: Tần số kiểm tra ở các điều kiện bảo quản khác nhau [11]

1.4.6.4 Điều kiện bảo quản

Nói chung, một sản phẩm thuốc phải được đánh giá trong điều kiện bảo quản thích hợp (với sự dao động thích hợp) cho phép đánh giá về tính ổn định với nhiệt và (nếu có thể) độ nhạy cảm với độ ẩm hoặc khả năng mất dung môi của chế phẩm Các điều kiện bảo quản và thời gian của nghiên cứu được lựa chọn nên là đủ để bao quát các giai đoạn bảo quản, vận chuyển, và sử dụng sau này (ví dụ, sau khi pha hoặc pha loãng như đã ghi trên trên nhãn) [11]

Nghiên cứu độ ổn định nói chung nên tiến hành theo điều kiện bảo quản như

sau:

Bảng 6: Điều kiện bảo quản dùng trong nghiên cứu độ ổn định [11]

Nghiên cứu/loại bao bì Điều kiện bảo quản

Dài hạn (cho các sản phẩm trong bao bì

sơ cấp thấm hơi nước) 300C ± 20C / Độ ẩm 75% ± 5%

Dài hạn (cho các sản phẩm trong bao bì

sơ cấp chống ẩm) 300C ± 20C / Độ ẩm không cần chỉ rõ Cấp tốc 400C ± 20C / Độ ẩm 75% ± 5%

Đánh giá ở điều kiện khắc nghiệt

400C ± 20C / 75% RH ± 5% RH hoặc ở điều kiện khắc nhiệt hơn

Thử nghiệm dài hạn sẽ được tiếp tục trong một khoảng thời gian đủ để bao quát thời gian sử dụng ở giai đoạn thử nghiệm thích hợp [11]

Dữ liệu từ các điều kiện bảo quản cấp tốc có thể được sử dụng để đánh giá ảnh hưởng của việc di chuyển trong 1 thời gian ngắn nằm ngoài điều kiện bảo quản nhãn (chẳng hạn như có thể xảy ra trong quá trình vận chuyển) [11]

Điều kiện bảo quản khác được chấp nhận nếu có lý do chính đáng, ví dụ trong các trường hợp sau đây [11]:

 Sản phẩm thuốc nhạy cảm với nhiệt nên được lưu trữ dưới một điều kiện nhiệt độ thay thế thấp hơn mà cuối cùng sẽ được chỉ định làm nhiệt độ bảo quản dài hạn (Sản phẩm có chứa thành phần hoạt động kém ổn định hơn và các công

thức không phù hợp với nghiên cứu thực nghiệm trên bảo quản ở nhiệt độ cao như thuốc đạn thì cần phải nghiên cứu sự ổn định dài trong thời gian dài hơn)

 Cần xem xét đặc biệt đối với các sản phẩm có biến đổi về tính chất vật lý hoặc thậm chí hóa học ở điều kiện nhiệt độ bảo quản thấp hơn, ví dụ như, hỗn dịch hoặc nhũ tương có thể sa lắng hoặc tách kem, dầu và các chế phẩm bán rắn

có thể biểu hiện tăng độ nhớt

Trong trường hợp điều kiện nhiệt độ thấp hơn được sử dụng, 6 tháng thử nghiệm cấp tốc nên được thực hiện ở nhiệt độ ít nhất là trên nhiệt độ bảo quản thực tế dự kiến

150C (cùng với điều kiện độ ẩm tương đối phù hợp với nhiệt độ) Ví dụ, đối với một sản phẩm được lưu trữ lâu dài ở điều kiện lạnh, thử nghiệm lão hóa cấp tốc cần được tiến hành ở nhiệt độ 250C ± 20C / Độ ẩm 60% ± 5% Các điều kiện thực của thử nghiệm đã lựa chọn phải được phản ánh trên nhãn và hạn sử dụng (ngày hết hạn) Đánh giá độ ổn định nên được tiến hành trên dạng phân liều đóng gói trong hệ thống đóng gói kín được dùng cho lưu hành trên thị trường (bao gồm cả bao gói thứ

2 và nhãn bao bì nếu có thể) Bất cứ nghiên cứu có sẵn nào thực hiện trên các sản phẩm bên ngoài bao bì trực tiếp hoặc trong nguyên liệu bao gói khác có thể là 1 phần hữu ích của đánh giá khắc nghiệt của dạng bào chế hoặc có thể được xem xét như 1 thông tin hỗ trợ [11]

Các dạng bao bì khác nhau của các sản phầm thuốc khác nhau yêu cầu các điều kiện đánh giá độ ổn định không giống nhau

 Sản phẩm thuốc được đóng gói trong bao bì chống ẩm

Những bao bì được xem là chống ẩm gồm có ống tiêm làm bằng thủy tinh, nhôm / vỉ nhôm, Polyethylen cao phân tử (HDPE) hoặc chai thủy tinh được đóng bằng kim loại hoặc nhựa HDPE

Nhạy cảm với độ ẩm hoặc khả năng mất dung môi không quan trọng đối với các sản phẩm thuốc được đóng gói trong các bao bì không thấm nước do đã cung cấp một rào cản vĩnh viễn với độ ẩm hoặc dung môi Vì vậy nghiên cứu độ ổn định cho các sản phẩm được lưu trữ trong các bao bì không thấm nước có thể được thực hiện theo bất kỳ điều kiện độ ẩm tương đối được kiểm soát hoặc môi trường xung quanh [11], [14]

CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị

2.1.1 Nguyên vật liệu

Bảng 7: Nguyên vật liệu nghiên cứu

2 ACV chuẩn VKN – Bộ Y Tế Chuẩn quốc gia

6 Natri hydrocarbonat Merck, Đức BP

12 Acid acetic băng Merck, Đức Dùng cho HPLC

2.1.2 Thiết bị

- Các dụng cụ thuỷ tinh

- Cân kỹ thuật SARTORIUS

- Cân phân tích SARTORIUS có độ chính xác 0,1 mg

- Hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao HP 1260 ALIGENT

- Màng lọc cellulose acetat, kích thước lỗ lọc 0,45 μm

- Máy chụp X-quang tại bệnh viện Chợ Rẫy

- Máy dập viên tâm sai KORSCH EKO

- Máy đo độ ẩm SARTORIUS

- Máy đo độ trơn chảy ERWEKA GWF

- Máy đo khối lượng riêng biểu kiến ERWEKA SVM

- Máy đo lực gây vỡ viên ERWEKA TBH 200

- Máy đo pH EUTECH INSTRUMENTS pH 510

- Máy đo quang phổ UV – VIS HITACHI U1800

- Máy hút ẩm EDISON ED – 12B

- Máy lọc nước PURELAB Classic UV, ELGA

- Máy siêu âm ULTRASONIC LC 60H

- Máy thử hòa tan ERWEKA DT 600

- Rây với các cỡ rây 180, 250, 350 m

- Thiết bị đánh giá khả năng KDSH tự chế tạo từ cân kỹ thuật

- Thiết bị lọc nén Sartorius SM 16249

- Thiết bị trộn lập phương ERWEKA

- Tủ sấy BINDER, HERAEUS

- Tủ vi khí hậu CLIMACELL

2.1.3 Động vật thí nghiệm

Động vật thí nghiệm được lựa chọn gồm có:

 Thỏ trắng trưởng thành, khoẻ mạnh, giống đực, có trọng lượng từ 2,0 - 2,5 kg, được nuôi dưỡng trong điều kiện dinh dưỡng đầy đủ, có kiểm soát, bỏ đói qua ngày

và được uống nước tự do trước khi tiến hành thí nghiệm

 Chó ta trưởng thành, khoẻ mạnh, giống đực, cân nặng 12 - 14 kg, được nuôi dưỡng trong điều kiện dinh dưỡng đầy đủ và được kiểm soát Chó để nhịn đói 10 giờ qua đêm trước khi tiến hành thí nghiệm

2.2 Nội dung nghiên cứu

 Đánh giá một số thông số ảnh hưởng đến giai đoạn trộn bột và dập viên trong quá trình bào chế viên nén ACV KDSH ở quy mô 5000 viên

 Nghiên cứu bào chế công thức chứa Bari sulfat với vai trò là chất cản quang

 Đánh giá khả năng KDSH tại dạ dày của viên bào chế bằng phương pháp chụp X-quang

 Đánh giá độ ổn định của viên nghiên cứu bảo quản ở 2 dạng bao bì lọ nhựa và

vỉ nhôm

2.3 Phương pháp nghiên cứu

2.3.1 Phương pháp bào chế viên nén ACV kết dính sinh học

Từ công thức bào chế viên nén ACV KDSH đường tiêu hóa đã được tối ưu hóa bởi ThS Nguyễn Hồng Trang [9], chúng tôi tiến hành nâng cấp quy mô bào chế trên

3 lô lên quy mô 5000 viên mỗi lô với công thức như sau:

Bảng 8: Công thức lô 5000 viên

Thành phần Khối lượng trong 1 viên

Các bước tiến hành bào chế viên nén ACV như sau:

Hình 1: Phương pháp bào chế viên nén ACV kết dính sinh học

Điều kiện bào chế: nhiệt độ T = 22 ± 30C, độ ẩm RH ≤ 40% (kiểm soát trong phòng kín bằng điều hòa TOSHIBA và máy hút ẩm EDISON ED – 12B)

Quy trình cụ thể:

 Chuẩn bị nguyên liệu

 ACV và các tá dược lactose, Avicel PH101, HPMC K100M được rây qua cỡ rây 250µm; NaHCO3 được nghiền và rây qua cỡ rây 250µm; Carbopol được rây qua cỡ rây 350µm

 Cân các thành phần theo đúng công thức

 Chia đều nguyên liệu thành 4 mẻ, tiến hành trộn bột kép bằng thiết bị trộn lập phương với tốc độ 35 vòng/phút trong thời gian 15 phút

 Magnesi stearat, talc, Aerosil được nghiền, rây qua cỡ rây 180µm và cân theo đúng công thức

 Chia tá dược trơn thành 4 phần và thêm vào khối lập phương, vận hành máy trộn với tốc độ 35 vòng/phút trong 5 phút

 Trộn đều 4 mẻ với nhau

 Đưa bột vào máy dập viên, tiến hành dập với tốc độ 12 vòng/phút

2.3.2 Phương pháp đánh giá một số chỉ tiêu chất lượng của khối bột kép trước khi dập viên

2.3.2.1 Định lượng ACV trong mẫu bột kép

Cân 1 lượng bột kép tương ứng khoảng 0,1 g ACV cho vào cốc có mỏ, thêm khoảng 60 ml dung dịch NaOH 0,1M đem siêu âm hòa tan trong 1 tiếng Kéo dịch đã siêu âm sang bình định mức 100 ml Thêm dung dịch NaOH 0,1M vừa đủ đến vạch, lắc đều và lọc (bỏ 20ml dịch lọc đầu) Hút chính xác 1 ml dịch lọc cho vào bình định mức 100 ml, thêm dung dịch NaOH 0,1M vừa đủ đến vạch, lắc đều Hàm lượng ACV được xác định bằng phương pháp đo quang phổ hấp thụ tử ngoại ở bước sóng 252 nm,

so sánh với mẫu ACV chuẩn có nồng độ 10 µg/ml

2.3.2.2 Xác định khối lượng riêng biểu kiến và chỉ số nén của khối bột

Thể tích biểu kiến của khối bột được đo trên máy ERWEKA SVM Một lượng bột có khối lượng xác định (m) được cho vào ống đong thể tích hình trụ Tiến hành

gõ 10 nhịp, đọc thể tích khối bột ban đầu là V0 Ống đong được tiếp tục gõ cho đến

khi thể tích không thay đổi, đọc thể tích cuối cùng là V

Khối lượng riêng của khối bột ban đầu:

Cl (%) = V0−V

V0 × 100 2.3.2.3 Xác định độ trơn chảy

Tốc độ chảy của khối bột được đo trên máy ERWEKA GWF, với đường kính

lỗ phễu 12 mm, đặt chế độ có rung Tốc độ chảy được tính theo công thức:

V = tgφ Trong đó: V: tốc độ chảy (g/giây)

φ: góc giữa đường thẳng biểu diễn sự phụ thuộc của khối lượng bột chảy theo thời gian và trục hoành (trục thời gian)

2.3.2.4 Xác định hàm ẩm theo phương pháp sấy khô

Tiến hành trên cân xác định độ ẩm nhanh SARTORIUS Cân chính xác khoảng 1g bột, rải đều vào đĩa cân, đặt nhiệt độ 1050C, theo dõi đến khi hàm ẩm không đổi

 Phương pháp HPLC pha đảo (áp dụng trong nghiên cứu độ ổn định):