Nuôi cấy in vitro Sâm Ngọc Linh

NUÔI CẤY IN VITRO RỄ BẤT ĐỊNH VÀ VI CỦ CÂY SÂM NGỌC LINH Nhóm: 1. Nguyễn Minh Hoàng 2. Trần Hiếu Nhân 3. Nguyễn Thị Kim Thoa NỘI DUNG I. Đặt vấn đề II. Giới thiệu về sâm Ngọc Linh (NL) III. Quy trình nuôi cấy invitro rễ bất định và vi củ sâm NL. IV. Một số nghiên cứu về sâm NL ở VN V. Kết luận I. Đặt vấn đề • Sâm Ngọc Linh thuộc 1 trong 5 loại sâm quý nhất thế giới. • Cây sâm tự nhiên sinh trưởng và phát triển rất chậm. • Nguồn nhân giống hữu tính vẫn chưa đủ khả năng cung ứng số lượng cây trồng. Nghiên cứu nhân giống vô tính và sản xuất sinh khối rễ cây sâm Ngọc Linh qua nuôi cấy in-vitro đã mở ra một hướng mới trong sản xuất nguyên liệu sâm Ngọc Linh. Mục $êu  Chủ động được nguồn nguyên liệu dồi dào, trong thời gian ngắn.  Phục vụ công tác nghiên cứu và sản xuất ra các sản phẩm thực phẩm chức năng, thuốc, v.v , phục vụ chăm sóc sức khỏe cộng đồng. SÂM NGỌC LINH II. SÂM NGỌC LINH 1.Nguồn gốc và lịch sử phát triển sâm NL  Sâm NL đã được các đồng bào Trung Trung Bộ dùng như một loại củ chữa bệnh.  Năm 1973, khu Y tế Trung Trung Bộ điều tra và phát hiện sâm NL.  Hơn 30 năm,sâm NL đã được thế giới biết đến với tên khoa học panax vietnamensis Ha et Grushv. II. SÂM NGỌC LINH 2.Đặc điểm sinh học cây sâm NL a. Phân loại khoa học: . Giới : Plantae . Nghành : Magnoliophyta . Lớp : Magnoliopsida . Bộ : Apiales . Họ : Araliaceae . Chi : Panax . Loài : Panax vietnamesis Ha et Grushy II. SÂM NGỌC LINH b.Đặc điểm hình thái  Thuộc loại cây thảo, cao 80 - 100 cm.  Thân rễ nằm ngang trên hoặc dưới mặt đất độ 1-3 cm, mang rễ con và củ.  Hoa mọc giữa các lá thẳng với thân.  Quả dài độ 0,8-1,0 cm, rộng khoảng 0,5-0,6 cm, màu đỏ khi chín. II. SÂM NGỌC LINH c.Đặc điểm sinh thái  Là cây ưa ẩm chịu bóng,sống lâu, sinh trưởng khá chậm.  Mọc dưới tán rừng già ẩm, nhiều mùn, ít ánh sáng,nhiệt độ ban ngày từ 20 0 C – 25 0 C, ban đêm từ 15 0 C – 18 0 C.  Bộ phận dùng làm thuốc chủ yếu là thân rễ củ. II. SÂM NGỌC LINH c.Phân bố  Thường mọc ở độ cao từ 1200 m trở lên.  Mọc ở chân núi Ngọc Linh thuộc các huyện Đăk Tô (Kontum) và Trà My (Quảng Nam).  Ở núi Ngọc Lum Heo thuộc xã Phước Lộc, huyện Phước Sơn, đỉnh Ngọc Am (Quảng Nam) [...]... dược khử trùng -Môi trường nuôi cấy được hấp và vô trùng -Các mẫu sau khi cấy được nuôi dưỡng đồng nhất III QUY TRÌNH NUÔI CẤY INVITRO RỄ BẤT ĐỊNH VÀ VI CỦ SÂM NL b Các bước thực hiện Chọn vật liệu nuôi cấy  Là những củ sâm Ngọc Linh 10 năm tuổi  Môi trường: MS có bổ sung 2,4 D, IBA, NAA và các chất dinh dưỡng cần thiết III QUY TRÌNH NUÔI CẤY INVITRO RỄ BẤT ĐỊNH VÀ VI CỦ SÂM NL Khử trùng -Phải được... mạch, chống xơ gan và giải độc gan, III QUY TRÌNH NUÔI CẤY INVITRO RỄ BẤT ĐỊNH VÀ VI CỦ SÂM NL 1 Kĩ thuật nuôi cấy invitro a Khái niệm Là phương pháp tách rời tế bào, mô được nuôi cấy trong môi trường thích hợp để chúng tiếp tục phân bào rồi biệt hoá thành mô, cơ quan và phát triển thành cây con mới III QUY TRÌNH NUÔI CẤY INVITRO RỄ BẤT ĐỊNH VÀ VI CỦ SÂM NL b.Ý nghĩa  Có thể nhân giống cây trồng ở... TRÌNH NUÔI CẤY INVITRO RỄ BẤT ĐỊNH VÀ VI CỦ SÂM NL Tạo rễ  Các mô sẹo đã đạt tiêu chuẩn -> môi trường tạo rễ  Môi trường nuôi cấy: môi trường MS, White & môi trường Gamborg được bổ sung chất điều tiết sinh trưởng , kinetin, nước dừa và dịch chiết hoài sơn ( củ mài), NAA, IBA =>Tế bào phát triển tốt hơn và thu sinh khối rễ sâm nhiều hơn III QUY TRÌNH NUÔI CẤY INVITRO RỄ BẤT ĐỊNH VÀ VI CỦ SÂM NL  Chất... truyền  Nếu nguyên liệu nuôi cấy sạch bệnh thì sản phẩm nhân giống sẽ hoàn toàn sạch bệnh III QUY TRÌNH NUÔI CẤY INVITRO RỄ BẤT ĐỊNH VÀ VI CỦ SÂM NL c Các nhân tố đảm bảo thành công  Bảo đảm điều kiện vô trùng  Chọn đúng môi trường và chuẩn bị môi trường đúng cách  Chọn mô cấy và xử lý mô cấy thích hợp trước và sau khi cấy III QUY TRÌNH NUÔI CẤY INVITRO RỄ BẤT ĐỊNH VÀ VI CỦ SÂM NL d.Dụng cụ, thiết... sinh sơ khởi  Môi trường MS được coi là môi trường thích hợp nhất trong nuôi cấy mô và tế bào thực vật III QUY TRÌNH NUÔI CẤY INVITRO RỄ BẤT ĐỊNH VÀ VI CỦ SÂM NL  Rễ bất định sâm NL được nuôi cấy trên môi trường cơ bản MS có bổ sung 2-4D (nồng độ 3mg/l)  Môi trường khoáng là môi trường Gamborg (B5), 30g sucrose/l, 8g agar/l  Mô sẹo bắt đầu hình thành sau khoảng 10 ngày nuôi cấy III QUY TRÌNH NUÔI... ĐỊNH VÀ VI CỦ SÂM NL  Chất điều hòa sinh trưởng có ảnh hưởng tốt đến sự hình thành rễ bất định ở mẫu cấy sâm NL là NAA ở nồng độ 3mg/l  Nồng độ đường tối ưu cho sự sinh trưởng rễ bất định và ảnh hưởng đến hợp chất saponin của sâm NLlà 50g/l III QUY TRÌNH NUÔI CẤY INVITRO RỄ BẤT ĐỊNH VÀ VI CỦ SÂM NL  Để tạo vi củ, các cụm mô sẹo có khả năng sinh phôi được nuôi cấy trong môi trường lỏng 1/2 MS có 1-3... trùng III QUY TRÌNH NUÔI CẤY INVITRO RỄ BẤT ĐỊNH VÀ VI CỦ SÂM NL Tạo mô sẹo  Sau khử trùng, mẫu được cắt thành từng khối có kích thước 1cm x 1cm x 0,25cm, sau đó cấy vào các đĩa petri để tạo mô sẹo  Là một khối tế bào không có tổ chức, hình thành từ các mô và các cơ quan phân hóa dưới các điều kiện đặc biệt III QUY TRÌNH NUÔI CẤY INVITRO RỄ BẤT ĐỊNH VÀ VI CỦ SÂM NL  Sự tạo mô sẹo invitro do 3 quá trình:...II SÂM NGỌC LINH d.Thành phần hóa học  Chiết xuất được 50 hợp chất, gồm26 hợp chất có cấu trúc đã biết và 24 saponin pammaran có cấu trúc mới  Chứa chủ yếu các saponin triterpenic  Có 14 acid béo, 16 acid amin,18 nguyên tố đa lượng, vi lượng  Đặc biệt là chất Majonoside R2 (chiếm 50% hoạt chất saponin) II SÂM NGỌC LINH 3.Tác dụng dược lý của sâm NL a Tính vị: có vị đắng... Sau 1-3 tháng, các cụm mô tăng sinh tạo nhiều cụm tế bào mới và tạo rễ, sau đó rễ tăng kích thước hình thành vi củ với nhiều rễ thứ cấp  Tiếp theo ta có thể nhân sinh khối tế bào rễ sâm NL trong bioreactor 5 lít/mẻ, 15 lít/mẻ và 100 lít/mẻ… IV.MỘT SỐ NGHIÊN CỨU VỀ SÂM NL Ở VN  Thành lập trại dược liệu Trà Linh nhân giống cây sâm NL  Sản xuất sinh khối tế bào sâm Ngọc Linh bằng hệ thống bioreactor ... thuật nuôi cấy bioreactor với quy mô lớn và tự động hóa trong vi nhân giống  Cần đầu tư hơn nữa về kinh phí, các trang thiết bị và máy móc, đào tạo nguồn nhân lực để các dự án về sâm NL có điều kiện được thực hiện tốt hơn  NGUỒN TÀI LIỆU  Kỷ yếu nghiên cứu KH-KT dược nǎm 1971-1975 Bộ Y tế Nxb Y học, Hà Nội, 1977  Nguyễn Ngọc Dung Nhân giống sâm Ngọc Linh (Panax vietnamesis) bằng con đường sinh học . NUÔI CẤY IN VITRO RỄ BẤT ĐỊNH VÀ VI CỦ CÂY SÂM NGỌC LINH Nhóm: 1. Nguyễn Minh Hoàng 2. Trần Hiếu Nhân 3. Nguyễn Thị Kim Thoa NỘI DUNG I. Đặt vấn đề II. Giới thiệu về sâm Ngọc Linh (NL) III. Quy. nuôi cấy invitro rễ bất định và vi củ sâm NL. IV. Một số nghiên cứu về sâm NL ở VN V. Kết luận I. Đặt vấn đề • Sâm Ngọc Linh thuộc 1 trong 5 loại sâm quý nhất thế giới. • Cây sâm tự nhiên sinh. Nghiên cứu nhân giống vô tính và sản xuất sinh khối rễ cây sâm Ngọc Linh qua nuôi cấy in- vitro đã mở ra một hướng mới trong sản xuất nguyên liệu sâm Ngọc Linh. Mục $êu  Chủ động được nguồn nguyên