Nuôi cấy in vitro Sâm Ngọc Linh

NUÔI CẤY IN VITRO RỄ BẤT ĐỊNHVÀ VI CỦ CÂY SÂM NGỌC LINH... Quy trình nuôi cấy invitro rễ bất định và vi củ sâm NL.. Nghiên cứu nhân giống vô tính và sản xuất sinh khối rễ cây sâm Ngọc Li

Trang 1

NUÔI CẤY IN VITRO RỄ BẤT ĐỊNH

VÀ VI CỦ CÂY SÂM NGỌC LINH

Trang 2

NỘI DUNG

I Đặt vấn đề

II Giới thiệu về sâm Ngọc Linh (NL)

III Quy trình nuôi cấy invitro rễ bất định và vi củ sâm NL.

IV Một số nghiên cứu về sâm NL ở VN

V Kết luận

Trang 3

I Đặt vấn đề

• Sâm Ngọc Linh thuộc 1 trong 5 loại sâm quý nhất thế giới

• Cây sâm tự nhiên sinh trưởng và phát triển rất chậm

• Nguồn nhân giống hữu tính vẫn chưa đủ khả năng cung ứng số lượng cây trồng

Nghiên cứu nhân giống vô tính và sản xuất sinh khối rễ cây sâm Ngọc Linh qua nuôi cấy in-vitro đã mở ra một hướng mới trong sản xuất nguyên liệu sâm Ngọc Linh

Trang 4

Mục tiêu

 Chủ động được nguồn nguyên liệu dồi dào, trong thời gian ngắn

 Phục vụ công tác nghiên cứu và sản xuất ra các sản phẩm thực phẩm chức năng, thuốc, v.v , phục vụ chăm sóc sức khỏe cộng đồng

Trang 5

SÂM NGỌC LINH

Trang 6

II SÂM NGỌC LINH

1.Nguồn gốc và lịch sử phát triển sâm NL

 Sâm NL đã được các đồng bào Trung Trung Bộ dùng như một loại củ chữa bệnh

 Năm 1973, khu Y tế Trung Trung Bộ điều tra và phát hiện sâm NL

 Hơn 30 năm,sâm NL đã được thế giới biết đến với tên khoa học panax vietnamensis Ha et Grushv

Trang 7

2.Đặc điểm sinh học cây sâm NL

a. Phân loại khoa học:

Trang 8

 Hoa mọc giữa các lá thẳng với thân

 Quả dài độ 0,8-1,0 cm, rộng khoảng 0,5-0,6

cm, màu đỏ khi chín

Trang 9

c.Đặc điểm sinh thái

 Là cây ưa ẩm chịu bóng,sống lâu, sinh trưởng khá chậm

 Mọc dưới tán rừng già ẩm, nhiều mùn, ít ánh sáng,nhiệt độ ban ngày từ 200C – 250C, ban đêm từ 150C – 180C

 Bộ phận dùng làm thuốc chủ yếu là thân rễ củ

Trang 10

c.Phân bố

 Thường mọc ở độ cao từ 1200 m trở lên

 Mọc ở chân núi Ngọc Linh thuộc các huyện Đăk Tô (Kontum) và Trà My (Quảng Nam)

 Ở núi Ngọc Lum Heo thuộc xã Phước Lộc, huyện Phước Sơn, đỉnh Ngọc Am (Quảng Nam)

Trang 11

II SÂM NGỌC LINH d.Thành phần hóa học

 Chiết xuất được 50 hợp chất, gồm26 hợp chất có cấu trúc đã biết và 24 saponin pammaran có cấu trúc mới

 Chứa chủ yếu các saponin triterpenic

 Có 14 acid béo, 16 acid amin,18 nguyên tố đa lượng, vi lượng

 Đặc biệt là chất Majonoside R2 (chiếm 50% hoạt chất saponin)

Trang 12

3.Tác dụng dược lý của sâm NL

a. Tính vị: có vị đắng kéo dài, không độc

b. Đối với sức khỏe:

.Làm thuốc cầm máu, lành vết thương, chữa bệnh: sốt rét, đau bụng, chảy máu,

.Tăng sức lực ,bồi bổ cơ thể, chống suy nhược, stress, lão hóa, điều hòa hoạt động tim

mạch, chống xơ gan và giải độc gan,

Trang 13

III QUY TRÌNH NUÔI CẤY INVITRO

Trang 14

RỄ BẤT ĐỊNH VÀ VI CỦ SÂM NL

b.Ý nghĩa

 Có thể nhân giống cây trồng ở quy mô công nghiệp

 Có hệ số nhân giống cao

 Cho ra các sản phẩm đồng nhất về mặt di truyền

 Nếu nguyên liệu nuôi cấy sạch bệnh thì sản phẩm nhân giống sẽ hoàn toàn sạch bệnh

Trang 15

c Các nhân tố đảm bảo thành công

 Bảo đảm điều kiện vô trùng

 Chọn đúng môi trường và chuẩn bị môi trường đúng cách

 Chọn mô cấy và xử lý mô cấy thích hợp trước và sau khi cấy

Trang 16

Trang 17

-Các mẫu sau khi cấy được nuôi dưỡng đồng nhất.

Trang 18

b Các bước thực hiện.

Chọn vật liệu nuôi cấy

 Là những củ sâm Ngọc Linh 10 năm tuổi

 Môi trường: MS có bổ sung 2,4 D, IBA, NAA và các chất dinh dưỡng cần thiết

Trang 19

Khử trùng

-Phải được rửa thật sạch, sau đó ngâm trong nước xà phòng loãng 10 phút

- Vô trùng sơ bộ bằng cồn 70% trong 1-5 phút

- Tiến hành khử trùng bằng Javen ở các nồng độ khác nhau

- Rửa lại bằng nước vô trùng cho thật sạch chất khử trùng

Trang 20

Tạo mô sẹo

 Sau khử trùng, mẫu được cắt thành từng khối có kích thước 1cm x 1cm x 0,25cm, sau đó cấy vào các đĩa petri để tạo mô sẹo

 Là một khối tế bào không có tổ chức, hình thành từ các mô và các cơ quan phân hóa dưới các điều kiện đặc biệt

Trang 21

 Sự tạo mô sẹo invitro do 3 quá trình:

-Sự phản phân hóa tế bào nhu mô

-Sự phân chia của các tượng tầng

-Sự xáo trộn của các mô phân sinh sơ khởi

 Môi trường MS được coi là môi trường thích hợp nhất trong nuôi cấy mô và tế bào thực vật

Trang 22

 Rễ bất định sâm NL được nuôi cấy trên môi trường cơ bản MS có bổ sung 2-4D (nồng độ 3mg/l)

 Môi trường khoáng là môi trường Gamborg (B5), 30g sucrose/l, 8g agar/l

 Mô sẹo bắt đầu hình thành sau khoảng 10 ngày nuôi cấy

Trang 23

Tạo rễ

 Các mô sẹo đã đạt tiêu chuẩn -> môi trường tạo rễ

 Môi trường nuôi cấy: môi trường MS, White & môi trường Gamborg được bổ sung chất điều tiết sinh trưởng , kinetin, nước dừa và dịch chiết hoài sơn ( củ mài), NAA, IBA

=>Tế bào phát triển tốt hơn và thu sinh khối rễ sâm nhiều hơn

Trang 24

Trang 26

Trang 27

IV.MỘT SỐ NGHIÊN CỨU VỀ

SÂM NL Ở VN

 Thành lập trại dược liệu Trà Linh nhân giống cây sâm NL

 Sản xuất sinh khối tế bào sâm Ngọc Linh bằng hệ thống bioreactor

 Ứng dung công nghệ biomass tạo sinh khối tế bào rễ cây Sâm NL.

 Ngoài ra, nghiên cứu cũng đã bào chế thành công viên nang sâm NLvà nước tăng lực từ tế bào sâm NL

Trang 29

KIẾN NGHỊ

 Cần ứng dụng rộng rãi kỹ thuật nuôi cấy bioreactor với quy mô lớn và tự động hóa trong vi nhân giống.

 Cần đầu tư hơn nữa về kinh phí, các trang thiết bị và máy móc, đào tạo nguồn nhân lực để các

dự án về sâm NL có điều kiện được thực hiện tốt hơn.



Trang 30

NGUỒN TÀI LIỆU

 Kỷ yếu nghiên cứu KH-KT dược nǎm 1971-1975 Bộ Y tế Nxb Y học, Hà Nội, 1977.

 Nguyễn Ngọc Dung Nhân giống sâm Ngọc Linh (Panax vietnamesis) bằng con đường sinh học Nxb Nông nghiệp Tp HCM 1995.

 Báo cáo điều tra trữ lượng, khoanh vùng cây sâm K5 Tỉnh Quảng Nam- Đà Nẵng Tháng 9.1979 của Ty

y tế Quảng Nam- Đà Nẵng.

 Báo cáo tóm tắt tổng kết đề tài khoa học áp dụng một số biện pháp kỹ thuật trong tạo giống gieo trồng nhằm bảo vệ, nuôi trồng và phát triển nguồn sâm K5 tại Trà Linh- Trà My (Quảng Nam ) của Công ty dược phẩm Quảng Nam-Đà Nẵng 1977.

Định dạng
Số trang	31
Dung lượng	717,52 KB