công nghệ lên men sản xuất rifamycin

TIỂU LUẬN MÔN HỌC CÔNG NGHỆ LÊN MEN CÁC HỢP CHẤT KHÁNG SINH ĐỀ TÀI CÔNG NGHỆ LÊN MEN SẢN XUẤT RIFAMYCIN... • Rifamycin là kháng sinh dùng tại chỗ hoặc tiêm• Điều trị các nhiễm khuẩn gram

TIỂU LUẬN MÔN HỌC CÔNG NGHỆ LÊN MEN CÁC HỢP CHẤT KHÁNG SINH

ĐỀ TÀI CÔNG NGHỆ LÊN MEN SẢN XUẤT RIFAMYCIN

Giới thiệu Rifamycin

Rifmapicin

 Rifamycin lần đầu tiên được

tách chiết vào năm 1957 từ

một canh trường lên men

Cơ chế tác động

• Rifamycin là kháng sinh dùng tại chỗ hoặc tiêm

• Điều trị các nhiễm khuẩn gram âm

và gram dương có nhạy cảm với thuốc các nhiễm khuẩn ngoài da

phong và nhiễm khuẩn

mycobacterium

thiết bị Lên men

Trích ly, Chưng cất, Tẩy màu, Kết tinh, Sấy

Nhân giống

Chọn giống Chọn môi

trường Nhân giống

Streptomyces mediterranei (Amycolatoposis mediterranei)

Loài: Streptomyces mediterranei

S mediterranei thuộc ngành xạ khuẩn (Actinobacteria)

là vi khuẩn nhân thật-Eubacteria phân bố rất rộng rãi

trong tự nhiên S mediterranei là vi khuẩn Gram

dương, khuẩn lạc hình phóng xạ (actino-) nhưng khuẩn thể có dạng sợi, phân nhánh như nấm (myces)

Môi trường

nấm men, 4g tinh chất mạch nha, 4g

glucose, 20g bột yến mạch, 20g agar,

Lên men

Quá trình lên men phải bổ sung

thêm glucose để hàm lượng

glucose tối thiểu còn lại trong dịch

lên men là 1-1,5%

-Nhiệt độ lên men: 28oC, pH 6,6

-Thời gian lên men: 9 ngày

-Tốc độ khuấy trộn: 130 rpm

Nocardiamed iterranei

Nhân giống

Lên men Môi

trường

Môi trường Môi trường

Có thể trích ly hai lần dung môi

-Chưng cất: thu hồi dung môi và

cô đặc dịch sau trích ly(nồng độ

trước kết tinh ≥70%)

- Tẩy màu bằng chất hấp phụ

- Kết tinh: bổ sung Natri acetat

0,1%, cô chân không ở nhiệt độ

thấp 28 o C, bổ sung mầm kết

tinh(bột sản phẩm)

- Sấy: sấy chân không thùng

quay đuổi hết dung môi và đạt

hàm ẩm chuẩn.

 Trong lên men batch và fed- batch truyền thống hơn 50% thời gian lên men là sd cho tế bào phát triển.

 Lên men sử dụng các tế bào tự do dễ nhiễm toàn bộ, thất thoát lớn

 kỹ thuật lên men sử dụng các TB cố định được cân nhắc

 Phương pháp sản xuất kháng sinh sử dụng các tế bào

cố định đã thành công, ứng dụng sản xuất nhiều loại kháng sinh khác nhau: Rifamycin, Neomycin, cephamycin, oxytetracycline

Ưu điểm

đến năng suất kháng sinh tạo thành

30 o C/200rpm

Chuẩn bị Gel

Gel alginate Canh trường VSV

Tác nhân làm cứng

Lên men

Lên men gián đoạn sử dụng các hạt gel có

cố định chủng VSV

 Nuôi lắc 48h/ 30 o C/200rpm.

  Thu tế bào sinh dưỡng để cấy vào các bình lắc trong

kỹ thuật cố định

Chuẩn bị các hạt gel alginate

trộn đều thanh trùng 121C/15’

 Định trước trọng lượng tế bào lấy

ra từ canh trường nuôi sau 96h/

30 0 C( phần nổi phía trên)+ 20ml

nước cất vô trùng

 Trộn 20ml canh trường với 80ml

dung dịch chứa gel ở trên

 Nhỏ hỗn hợp vào dung dịch CaCl2

3%

qua đêm/ 5 0 C

Môi trường cho sản xuất rifamycin

Nghiên cứu các yếu tố ảnh hưởng

Nồng độ alginate Đường kính hạt

Thời gian cố định các tế

bào trong gel

Thời gian cố định các tế

bào trong gel

Thời gian lên men

Khả năng tái sử dụng

các tế bào cố định

Khả năng tái sử dụng

các tế bào cố định

hơn 4% cho hàm lượng

Rifamycin cao hơn

Ảnh hưởng của đường kính hạt gel

Thời gian cố định tế bào trong gel

• Thời gian nghiên cứu 72h-

Tái sử dụng các hạt cố định

Kết luận

giữ vai trò quan trọng trong điều trị bệnh

điểm

phương pháp mới sản xuất kháng sinh

Tài liệu tham khảo

[1] El-Tayeb, Salama, Hussein, and El-Sedawy- Optimization of

industrial production of rifamycin B by Amycolatopsis mediterranei I The role of colony morphology and nitrogen sources in productivity-

African Journal of Biotechnology Vol 3 (5), pp 266-272, May 2004

[2] JIN Zhi-hua , LIN Jian-ping , CEN Pei-lin - Scale-up of rifamycin B

fermentation with Amycolatoposis mediterranei- Journal of Zhejiang

University SCIENCE

[3] Xuan-Tien Doan, Rajagopalan Srinivasan,Prashant M Bapat,

Pramod P.angikar- Detection of phase shifts in batch fermentation via statistical analysis of the online measurements: A case study

with rifamycin B fermentation- Journal of Biotechnology 132 (2007)

156–166

[4] Hesham A El- Enshasy , Usama I Beshay – Rifamycins

Production by Amycolatopsis mediterranei in Batch and Repeated Batch Cultures Using Immobilized Cells in Alginate and Modified

Alginate Beads, Journal of Applied Sciences 7 (10), 2007.

XIN CẢM ƠN THẦY VÀ CÁC BẠN ĐÃ CHÚ Ý LẮNG NGHE!