tóm tắt luận án nghiên cứu chỉ định và kết quả phẫu thuật cắt gan kết hợp phương pháp tôn thất tùng và lortat-jacob điều trị ung thư biểu mô tế bào gan

1 PHẦN MỞ ĐẦU Sự cần thiết luận án Dó trầm tên gọi chung cho lồi có khả sinh trầm thuộc họ Trầm hương Thymaelaeaceae, có Dó trầm (Aquilaria crassna Pierre ex Lecomte), tên phổ thơng Dó bầu Luận án này, sử dụng tên Dó bầu thay cho tên Dó trầm, lồi mà chiếm hầu hết diện tích trồng Dó nước ta Trong thân Dó bầu sống lâu năm thường có trầm hương, có kỳ nam Trầm hương có giá trị y học, công nghiệp mỹ phẩm, tín ngưỡng, đặc biệt người theo đạo Hồi Gần đây, nhà khoa học xác định trầm hương có chứa hợp chất Sesquiterpene dùng y học đại Ngồi ra, gỗ sử dụng làm cảnh nghệ thuật, loài có sợi (cellulose) nên sử dụng làm nguyên liệu giấy Do nhu cầu sử dụng lớn Dó bầu lại có tự nhiên, gây trồng cịn hạn chế, đặc biệt trình hình thành trầm hương tự nhiên địi hỏi phải có điều kiện định khoảng thời gian dài, nên trầm hương có giá trị thương mại cao Trước đây, tập trung khai thác rừng tự nhiên không kiểm soát, nên trầm hương tự nhiên ngày cạn kiệt trở nên khan Tuy nhiên, khoảng 15 năm trở lại đây, diện tích rừng trồng Dó bầu tăng nhanh, đến hết năm 2009 có 11.000 - 12.000 Hiện nay, giống có khả hình thành trầm, kỹ thuật nhân giống vơ tính, thời gian tác động tạo trầm, phương pháp tác động chất lượng trầm sao, tiêu thụ sản phẩm đâu, vấn đề cần phải làm sáng tỏ Đặc biệt, kỹ thuật tác động tạo trầm chất lượng trầm, chưa có sở khoa học chắn, nên có nguy dẫn đến rủi ro lớn cho người trồng rừng Ngoài việc tạo trầm, khai thác gỗ chưng cất lấy tinh dầu, Dó bầu cịn sử dụng cho ngành công nghiệp khác, chưa quan tâm nghiên cứu Để góp phần giải số tồn nêu trên, luận án “Nghiên cứu số đặc tính sinh học biện pháp kỹ thuật góp phần phát triển bền vững Dó trầm (Aquilaria crassna) Việt Nam” thực cần thiết Mục tiêu nghiên cứu luận án - Về lý luận: Xác định số sở khoa học góp phần đề xuất giải pháp kỹ thuật gây trồng, tác động tạo trầm khả sử dụng gỗ Dó bầu số vùng sinh thái Việt Nam - Về thực tiễn: + Xác định số đặc tính sinh học biện pháp kỹ thuật lâm sinh làm sở đề xuất kỹ thuật gây trồng Dó bầu + Xác định xuất xứ biện pháp kỹ thuật nhân giống vơ tính Dó bầu góp phần cải thiện giống cho suất cao chất lượng tốt 2 + Xác định biện pháp tác động tạo trầm, tính chất gỗ, cấu trúc tế bào gỗ chưa tác động, tác động khả làm bột giấy gỗ Dó bầu làm sở đề xuất hướng sử dụng Ý nghĩa khoa học thực tiễn luận án * Ý nghĩa khoa học: Cung cấp luận khoa học đặc điểm phân bố, sinh thái; kỹ thuật tạo con, khảo nghiệm xuất xứ, kỹ thuật trồng; kỹ thuật tác động tạo trầm, cấu tạo gỗ tính chất gỗ Dó bầu làm sở gây trồng, sản xuất phát triển Dó bầu số tỉnh phía Bắc, Bắc Trung Bộ Nam Trung Bộ * Ý nghĩa thực tiễn: Phát triển biện pháp kỹ thuật nhân giống, trồng, tác động tạo trầm, bước đầu chọn số xuất xứ có triển vọng khả sử dụng gỗ Dó bầu theo hướng bền vững kinh tế - xã hội môi trường Những đóng góp luận án - Xác định số đặc điểm phân bố, sinh thái lồi Dó bầu bước đầu xác định số xuất xứ tốt theo sinh trưởng cho vùng nghiên cứu - Bước đầu đánh giá hiệu số biện pháp kỹ thuật tạo trầm, xác định số đặc điểm gỗ Dó bầu sau năm áp dụng biện pháp tác động tạo trầm Đối tượng địa điểm nghiên cứu 5.1 Đối tượng nghiên cứu luận án: lồi Dó bầu (Aquilaria crassna) 5.2 Địa điểm nghiên cứu Các điểm điều tra quần thể Dó bầu phân bố tự nhiên gồm: Hà Giang, Sơn La, Hà Tĩnh, Quảng Nam, Kon Tum Kiên Giang Khảo nghiệm xuất xứ kỹ thuật trồng Dó bầu tại: Vĩnh Phúc, Quảng Ninh, Hà Tĩnh Quảng Nam Thí nghiệm xác định biện pháp tác động tạo trầm, thực xã Sơn Kim xã Tây Sơn, huyện Hương Sơn, tỉnh Hà Tĩnh Giới hạn phạm vi nghiên cứu - Về đặc tính sinh học: luận án nghiên cứu phân bố tự nhiên, đặc điểm quần thể, khí hậu đất đai nơi Dó bầu phân bố tự nhiên; ảnh hưởng ánh sáng, hỗn hợp ruột bầu đến sinh trưởng giai đoạn vườn ươm; khả gây trồng Dó bầu tán rừng Keo lai Thông nhựa, giải phẫu cấu tạo thô đại hiển vi gỗ Dó bầu chưa tác động sau tác động tạo trầm; tính chất gỗ - Biện pháp kỹ thuật: kỹ thuật nhân giống, luận án nghiên cứu tạo giâm hom, nuôi cấy mô mô - hom; kỹ thuật trồng luận án nghiên cứu mật độ phân bón; kỹ thuật tạo trầm Bố cục luận án Ngoài phần lời cam đoan, lời cảm ơn, mục lục, danh mục từ viết tắt, danh mục bảng biểu, hình ảnh, luận án gồm có phần sau đây: - Phần mở đầu - Chương Tổng quan vấn đề nghiên cứu 3 - Chương Nội dung phương pháp nghiên cứu - Chương Kết nghiên cứu thảo luận - Kết luận, tồn kiến nghị Chương 1: TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Trên giới Phân loại thực vật phân bố có Irnayuli (2011); IUCN (2010); Chang Kadir (1997),… cho thấy có ý kiến khác số loài chi cho trầm hương, riêng chi Aquilaria phân bố phổ biến Bhutan, Campuchia, Ấn Độ, Lào, Malaysia, Indonesia, Philippine, Myanma, Thái lan, Việt Nam, Nam TQ Nghiên cứu gây trồng nhân giống có Atok Subiakto (2011), Beek Philips (1999), Chang Kadir (1997), cho biết nước có dó trầm phân bố có diện tích trồng Malaysia, Indonesia, Ấn Độ, Thái Lan… Nghiên cứu tác động tạo trầm có Robert Blanchette (2003), Kanwal Deep (2006), Irnayuli (2011), Cho thấy chế hình thành trầm hương dó trầm chưa có giải đáp xác rõ ràng Các tác giả cho tác động kích thích tạo trầm nhanh hơn, nhiều tác giả chấp nhận kết hợp tác động giới sinh học 1.2 Ở Việt Nam: Phạm Hoàng Hộ (1993), Lê Cơng Kiệt (2005) cho biết Việt Nam có lồi xác định Lã Đình Mỡi (2007), Đinh Xuân Bá, (2007b),…cũng cho thấy trầm hương có giá trị cao y học, công nghiệp mỹ phẩm tín ngưỡng Các nghiên cứu chọn giống theo sinh khối gỗ, hàm lượng chất lượng dầu tích tụ thân hạn chế Duy có Thái Thành Lượm (2009) chọn 2/94 thí nghiệm đảo Phú Quốc Nghiên cứu tác động tạo trầm có Nguyễn Hồng Lam (1987-2000), Đặng Ngọc Châu (1999), Ngô Thị Dơn (2006) cho thấy tác động cho khả hình thành trầm cao khơng tác động Nhưng, cơng trình chưa đưa số liệu định lượng, nhận biết cảm giác so màu ngửi mùi Chính cần nghiên cứu xác định định lượng Tóm lại: Trên giới Việt Nam Dó bầu nói riêng lồi dó tạo trầm nói chung nghiên cứu từ lâu, từ công dụng, giá trị đến nhân giống, gây trồng; tác động tạo trầm Tuy nhiên, số vấn đề chưa nghiên cứu đầy đủ chưa thống tác giả như: - Phân bố, sinh thái, cấu trúc quần thể lâm phần có Dó bầu phân bố tự nhiên Việt Nam; - Khảo nghiệm xuất xứ, chọn giống theo sinh trưởng theo hướng lấy trầm; - Cơ chế tạo trầm hương, tính chất lý, hóa học khả sử dụng gỗ Dó bầu Đây vấn đề cịn tồn tại, đề tài thực Kết Nghiên cứu xác định số sở khoa học góp phần đề xuất giải pháp kỹ thuật gây trồng, tác động tạo trầm khả sử dụng gỗ Dó bầu Việt Nam Chương 2: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu số đặc điểm phân bố sinh thái Dó bầu - Nghiên cứu kỹ thuật tạo con, khảo nghiệm xuất xứ kỹ thuật trồng - Nghiên cứu thử nghiệm số biện pháp kỹ thuật tác động tạo trầm, cấu tạo thô đại hiển vi tế bào gỗ Dó bầu chưa tác động sau tác động - Tính chất lý tiềm sản xuất bột giấy gỗ Dó bầu số vùng sinh thái - Đề xuất số giải pháp phát triển bền vững Dó bầu 2.2 Phương pháp nghiên cứu Điều tra đặc điểm lâm học sinh thái lồi Dó bầu theo OTC điển hình tạm thời, diện tích OTC 1000m2, tổng số 11 OTC Điều tra đất phương pháp đào phẫu diện kết hợp với phương pháp chuyên gia Phân tích tiêu lý - hóa tính đất phương pháp áp dụng phịng phân tích Nhân giống giâm hom: Với 30 mẫu/thí nghiệm, lặp lại lần; riêng thí nghiệm thăm dị chất kích thích nồng độ rễ lặp lại lần Nhân giống nuôi cấy mô mô - hom: Các bước nghiên cứu tiến hành theo sơ đồ sau: Chọn mẫu Cho bầu đất Tạo nhân nhanh chồi Khử trùng mẫu nuôi cấy Huấn luyện in vitro Tạo rễ in vitro Giâm hom chồi in vitro Chồi in vitro Khảo nghiệm xuất xứ theo Tiêu chuẩn ngành 04 TCN 147-2006, theo khối ngẫu nhiên đầy đủ với lần lặp (OTC định vị), 30 cây/lần lặp, mật độ 1100 cây/ha (3m x 3m) Nghiên cứu bổ sung số biện pháp kỹ thuật trồng ô tiêu chuẩn định vị theo phương pháp ngẫu nhiên lặp lại lần dung lượng mẫu ≥ 30 cây/lần lặp Thực trạng khả tạo trầm Dó bầu sử dụng phương pháp kế thừa 5 Nghiên cứu số biện pháp chế phẩm tác động tạo trầm: Sử dụng phương pháp khoan với đường kính mũi khoan 0,8cm - 1,0cm khoan sâu vào 1/3-1/2 đường kính thân Sau bố trí cơng thức chế phẩm Xác định hàm lượng hỗn hợp chứa tinh dầu phương pháp chưng cất nước, theo tiêu chuẩn ISO 6571 Nghiên cứu đánh giá chất lượng tinh dầu: phương pháp sắc ký khí - khối phổ (GC-MS) Nghiên cứu cấu tạo thô đại hiển vi gỗ Dó bầu phương pháp quan sát mơ tả đặc điểm cấu tạo gỗ mô tả theo danh sách IAWA Phương pháp nghiên cứu tính chất học, vật lý tiềm sản xuất bột giấy gỗ Dó bầu theo tiêu chuẩn Việt Nam (TCVN) Ứng dụng phương pháp phân tích thống kê tốn học Nơng Lâm nghiệp với trợ giúp phần mềm Excel, SPSS để xử lý số liệu Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Một số đặc điểm phân bố sinh thái Dó bầu 3.1.1 Kết nghiên cứu phân bố tự nhiên đặc điểm quần thể Dó bầu Hiện cịn gặp quần thể Dó bầu tự nhiên khu vườn hộ gia đình, vườn rừng khu rừng tự nhiên nhiều địa phương Ở địa điểm này, chủ rừng tác động để xúc tiến cho Dó bầu sinh trưởng phát triển 3.1.1.1 Vùng phân bố tự nhiên lồi Dó bầu Dó bầu phân bố tự nhiên nước ta rộng: - Từ Hà Giang đến Kiên Giang, - Độ cao từ 5m so với mực nước biển Hương Khê (Hà Tĩnh) đến gần 1.120m Konplong (Kon Tum) 3.1.1.2 Đặc điểm quần thể tự nhiên lồi Dó bầu Cấu trúc tổ thành tầng cao: - 6/11OTC lồi Dó bầu có hệ số tổ thành lớn 3/11OTC Dó bầu có hệ số tổ thành 8,1-10 - 5/11OTC Dó bầu có hệ số tổ thành thấp 0,3-1,7; - Như vậy, có 50% số OTC Dó bầu tham gia với hệ số tổ thành trung bình 50% chiếm ưu gần ưu lâm phần Dưới 50% số OTC Dó bầu có vai trị định quần thể rừng Các loài kèm với Dó bầu có khác vùng, thành phần loài chủ yếu Thanh thất, Sang máu, Thừng mực, Côm, Dẻ, Giổi, nhiều Trâm sau đến Bằng lăng Đây đối tượng cần quan tâm chọn lựa cần trồng hỗn lồi với Dó bầu 6 Tầng bụi thảm tươi gỗ tái sinh đa dạng Cho thấy Dó bầu có biên độ sinh thái rộng, chúng sống từ nơi đất khơ cằn tầng mỏng đất sâu ẩm thường xuyên Loài đặc trưng cho điều kiện đất đai khô cằn: Lành ngạnh, Thừng mực, Sịi tía, Ba soi, Mé cị ke, Loài đặc trưng cho điều kiện đất sâu ẩm thường xuyên như: Lá lốt, Bòng bong, Rau tàu bay, Ráy, Sa nhân, 3.1.2 Đặc điểm khí hậu nơi có quần thể Dó bầu phân bố tự nhiên Về chế độ nhiệt có biên độ lớn, nhiệt độ trung bình hàng năm biến động từ 21,0-27,60C, trung bình tháng cao từ 26,7-31,3 0C, trung bình tháng thấp từ 16,9-24,60C Về chế độ ẩm, lượng mưa có mức độ biến động lớn, từ 1.444mm đến 3.800mm/năm, phân bố từ 125-211ngày/năm Lượng nước bốc biến động từ 626-1.539,1mm/năm Theo hệ số K = lượng mưa/lượng bốc có biến động tương đối lớn từ 1,17-7,66 lần Chứng tỏ Dó bầu có biên độ sinh thái rộng thiên ưa ẩm Điều thể thông qua lớp bụi thảm tươi tán rừng có lồi chịu bóng ưa ẩm nêu 3.1.3 Đặc điểm đất đai quần thể tự nhiên có Dó bầu phân bố Dó bầu phân bố nhiều loại đất phát triển loại đá mẹ như: phiến mica, đá vôi, phiến clorit, Tầng đất từ mỏng đến dầy Hàm lượng mùn biến động 1,37-3,29%, mức trung bình đến Hàm lượng N, P, K tổng số mức TB đến Đây để chọn nơi trồng biện pháp tác động bón loại phân lượng phân trồng Dó bầu Tỷ lệ C/N tầng đất mặt phổ biến từ 10-13 chứng tỏ khả phân hủy chất hữu đất mạnh Tuy nhiên đất nơi Dó bầu phân bố chua, pHKCl biến động 3-4, phổ biến 3,54,0 3.2 Kết NC kỹ thuật tạo con, khảo nghiệm xuất xứ kỹ thuật trồng 3.2.1 Nghiên cứu kỹ thuật tạo 3.2.1.1 Kết nhân giống phương pháp giâm hom * Kết nghiên cứu chất kích thích nồng độ rễ thích hợp Chất kích thích rễ gồm IAA, IBA NAA với gam nồng độ (1000, 1500 2000ppm) Vật liệu giâm hom đoạn cành bánh tẻ tuổi Sau 12 tuần cho thấy khả rễ chất kích thích rễ khác rõ rệt (Ftính > F05), tốt chất kích thích IBA nồng độ 1500ppm (bảng 3.8) 7 Bảng 3.8 Ảnh hưởng chất kích thích nồng độ đến tỷ lệ rễ hom giâm sau 12 tuần Nồng độ chất kích thích 1000ppm 1500ppm 2000ppm Chất kích thích rễ Chỉ tiêu thống kê IAA IBA NAA Tỷ lệ rễ TB (%) 11,33 19,33 16,67 Sr 31,11 96,67 33,33 V (%) 49,23 50,86 34,63 Tỷ lệ rễ TB (%) 33,33 61,33 40,00 Sr 111,11 147,78 194,44 V (%) 31,63 19,82 34,86 Tỷ lệ rễ TB (%) 25,33 28,00 27,33 Sr2 47,78 36,67 63,33 V (%) 27,29 21,63 29,12 Ftính = 38,2 7,5; F05 tra bảng = 3,3 * Kết nghiên cứu tuổi lấy hom Vật liệu hom, cành mẹ tuổi, tuổi 10 tuổi, chất kích thích IBA, nồng độ 1500ppm Thời vụ lấy giâm hom vụ Hè-Thu (tháng - tháng 8) Kết nghiên cứu sau 12 tuần cho thấy hom lấy từ mẹ độ tuổi khác cho tỷ lệ rễ khác rõ rệt (F tính > F05), khả rễ, số lượng rễ chiều dài rễ hom lấy từ 10 tuổi (4,17%), cao từ mẹ tuổi (60,83%) tương đương mẹ tuổi (59,17%) Vì vậy, để nguồn vật liệu lấy từ mẹ 10 tuổi (cây trội) có sinh khối gỗ lớn, hàm lượng tinh dầu cao, giâm hom cho tỷ lệ rễ cao, trước lấy hom, cần trẻ hóa mẹ * Kết nghiên cứu loại hom Vật liệu giống gồm hom chồi vượt mọc từ thân hom đầu cành thứ cấp 10 tuổi, thời vụ lấy giâm hom vào vụ Thu-Đông (tháng - tháng 11), chất kích thích rễ IBA, nồng độ 1500ppm Kết nghiên cứu sau 12 tuần cho thấy có khác rõ rệt loại hom (Ftính >F05), hom chồi vượt mọc từ thân có tỷ lệ rễ (49,99%) cao hẳn so với hom đầu cành (30,41%) * Kết nghiên cứu thời vụ giâm hom Vật liệu giống hom chồi vượt mọc thân 10 tuổi, chất kích thích IBA, nồng độ 1500ppm, thời vụ giâm hom tiến hành theo mùa: Thu-Đông (T9 – T11); Đông-Xuân (T12-T2); Xuân-Hè (T3-T5) Hè-Thu (T6-T8), T: tháng Kết phân tích phương sai (Ftính >F05) cho thấy tỷ lệ rễ hom khác rõ rệt thời vụ giâm hom khác Vụ Thu-Đông thời gian giâm hom tốt năm với tỷ lệ rễ đạt 63% Từ thí nghiệm nghiên cứu trên, thấy nhân giống vơ tính phương pháp giâm hom có triển vọng để tạo giống chất lượng cao cho lồi Dó bầu với điều kiện phải trẻ hóa vật liệu giâm hom cách tạo chồi gốc để lấy hom, chất kích thích rễ IBA, nồng độ 1500ppm, giâm vào vụ Thu-Đông (T9 – T11) 8 3.2.1.2 Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống công nghệ mơ - hom * Quy trình cơng nghệ ni cấy mô: - Bước Tạo nguồn vật liệu vô trùng: Sau tuần tỷ lệ mẫu sống không nhiễm bệnh đạt 35%, tỷ lệ mẫu nẩy chồi đạt 25% - Bước Tạo chồi in vitro: Sau tuần, công thức MTBS + đường (30 g/l) nước dừa (10% v/v) có bổ sung tổ hợp 0,25 mg/l(BAP + kinetin + adenin) cho hệ số nhân chồi cao đạt 14,6 chồi phát triển khỏe mạnh Tách chồi riêng biệt - Bước Tạo rễ in vitro: Sau tuần theo dõi môi trường 3/4 WPM cho tỷ lệ rễ đạt 48,9% (cao nhất) Sau tuần thí nghiệm tiếp theo, kết môi trường chọn lọc 3/4 WPM bổ sung 0,1 mg/l BAP bổ sung tổ hợp nhóm auxin gồm 0,25mg/l IBA + 0,25mg/l NAA cho tỷ lệ rễ cao (đạt 60,23%) - Bước Giai đoạn đảm bảo tiêu chuẩn chuyển huấn luyện vườn ươm, kết phương pháp trồng bể cát phủ nilon trắng sau khoảng tuần in vitro phát sinh mầm rễ đem trồng vào bầu đất cho tỷ lệ sống sinh trưởng bình thường đạt 54,3% (cao nhất) * Quy trình cơng nghệ mơ - hom: - Kế thừa kết từ bước quy trình cơng nghệ ni cấy mơ, thí nghiệm công nghệ mô – hom: đưa in vitro giâm hom (chấm vào thuốc IBA nồng độ 1500ppm, cấy vào bể cát khử trùng), sau tuần tỷ lệ rễ trung bình đạt 67,30%; - Nhổ bể cát, cấy vào bầu đất đóng, xếp vào vườn ươm chăm sóc, kết tỷ lệ sống sinh trưởng bình thường đạt 72,4% Bằng cơng nghệ mơ - hom rút ngắn thời gian, kinh phí nhân cơng lao động so với thực hồn tồn cơng nghệ nuôi cấy mô 3.2.1.3 Ảnh hưởng ánh sáng đến sinh trưởng vườn ươm Bảng 3.6 Ảnh hưởng ánh sáng đến sinh trưởng Dó bầu sau 12 tháng tuổi vườn ươm Cơng thức Tỷ lệ Đường kính gốc Chiều cao che sáng sống (%) D00 (cm) Sd Vd (%) Hvn (cm) Sh Vh (%) 00% 88,89 0,35 0,10 28,57 17,38 2,25 12,95 25% 98,15 0,43 0,12 27,91 20,85 3,16 15,19 50% 98,15 0,51 0,21 41,17 26,70 5,63 23,76 75% 91,67 0,47 0,17 36,17 22,86 3,88 16,97 100% 00 Ftính = 99,23 Ftính = 10,79 F05bảng = 1,77 F05bảng = 1,77 Sau 12 tháng tuổi, tỷ lệ sống thấp công thức không che sáng, cao công thức che sáng 25% 50% (bảng 3.6) Riêng, công thức che sáng 100%, sau tháng, chết hồn tồn Khả sinh trưởng cơng thức có sống cịn lại khác rõ rệt đường kính gốc chiều cao (Ftính>F 05 tra bảng), công thức không che sáng; tốt công thức che sáng 50%, sau tháng đầu giảm xuống 40%, sau tháng giảm 30%, 3-4 tháng cuối giảm xuống 25%, dỡ bỏ hoàn toàn dàn che để huấn luyện trước trồng 1,5 tháng 3.2.1.4 Ảnh hưởng hỗn hợp ruột bầu đến sinh trưởng vườn ươm Sau 12 tháng tuổi, tỷ lệ sống cơng thức thí nghiệm 92,696,3% Khả sinh trưởng đường kính gốc chiều cao công thức khác rõ rệt (Ftính>F05bảng), đường kính gốc dao động từ 0,52-0,66cm chiều cao dao động từ 25,06-29,38cm, tốt công thức có hỗn hợp ruột bầu gồm 90% đất tầng mặt kết hợp 8% phân chuồng hoai 2% phân hữu vi sinh (bảng 3.7) Bảng 3.7 Ảnh hưởng hỗn hợp ruột bầu đến sinh trưởng Dó bầu sau 12 tháng tuổi vườn ươm Đường kính gốc Chiều cao Cơng thức thí nghiệm hỗn TLS hợp ruột bầu (%) D00 (cm) Sd Vd (%) Hvn (cm) Sh Vh (%) CT1 90%đ+8%m+2%VS 92,59 0,52 0,16 31,40 25,06 3,8 15,14 CT2 95,37 0,54 0,17 32,07 25,63 3,40 15,59 90%đ+8%m+2%NPK CT3 96,30 0,60 0,21 34,69 27,05 4,13 15,27 90%đ+8%pc+2%NPK CT4 90%đ+8%pc+2%VS 93,52 0,66 22,36 33,88 29,38 4,67 15,90 Ftính = 98,34 Ftính = 15,00 F05bảng = 1,77 F05bảng = 1,77 Ghi chú: đ đất tầng mặt đồi rừng; m mùn cưa trấu; pc phân chuồng hoai; NPK phân hóa học tổng hợp tỷ lệ 5:10:3; VS phân hữu vi sinh 3.2.2 Kết khảo nghiệm xuất xứ số vùng sinh thái trọng điểm 3.2.2.1 Đặc điểm điều kiện tự nhiên khu vực khảo nghiệm Đặc điểm khí hậu: Các trị số yếu tố khí hậu tương tự nơi phân bố tự nhiên Dó bầu, đáp ứng điều kiện gây trồng Riêng điểm thí nghiệm Phúc Yên (Vĩnh Phúc) nằm ngồi vùng phân bố Dó bầu, yếu tố khí hậu nằm giới hạn cho phép Đặc điểm đất đai: Kết phân tích mẫu đất cho thấy hầu hết địa điểm bố trí thí nghiệm có trị số biểu thị độ phì tự nhiên tương tự đất quần thể rừng tự nhiên có Dó bầu phân bố Riêng đất xã Sơn Long, Hương Sơn, Hà Tĩnh đất hoang hóa chăn thả gia súc nhiều năm nên có trị số biểu thị độ phì tự nhiên thấp hơn, hàm lượng mùn 0,3-0,8%, theo hàm lượng N đạt 0,03-0,06% 3.2.2.2 Kết khảo nghiệm Sau năm khảo nghiệm (Quảng Nam năm), kết so sánh thống kê toán học cho thấy sinh trưởng xuất xứ khác khác rõ rệt: 10 Tại Phúc Yên – Vĩnh Phúc: sinh trưởng D00, nhóm tốt Hịn Chơng – Kiên Giang Tiên Phước – Quảng Nam Sinh trưởng Hvn xuất xứ Hòn Chơng - Kiên Giang cao Tại Hồnh Bồ – Quảng Ninh: sinh trưởng D00 Hvn cao xuất xứ Tri Tôn–An Giang, thứ hai xuất xứ Hịn Chơng–Kiên Giang Tại Hương Sơn - Hà Tĩnh: sinh trưởng D00 Hvn cao là xuất xứ Hịn Chơng – Kiên Giang, thứ hai xuất xứ Hương Khê – Hà Tĩnh Tại Tiên Phước – Quảng Nam: sinh trưởng D00 Hvn cao xuất xứ Tri Tôn–An Giang, thứ hai xuất xứ Tiên Phước–Quảng Nam Tóm lại: Sau 3-4 năm, sinh trưởng D 00 Hvn xuất xứ Hịn Chơng – Kiên Giang tốt Vĩnh Phúc Hà Tĩnh cịn xuất xứ Tri Tơn – An Giang tốt Quảng Ninh Quảng Nam Điều chứng tỏ xuất xứ cực Nam đưa trồng miền Bắc miền Trung có xu sinh trưởng tốt ngược lại 3.2.3 Nghiên cứu bổ sung số biện pháp kỹ thuật trồng 3.2.3.1 Nghiên cứu khả gây trồng Dó bầu tán rừng Keo lai Thơng nhựa Luận án bố trí cơng thức (trồng Dó bầu tán rừng Keo lai Thông nhựa, trồng nơi đất trống) Sau năm trồng, sinh trưởng D00, Hvn Dt Dó bầu trồng Phúc Yên – Vĩnh Phúc phương thức trồng khác có khác rõ rệt (Sig < 0,05), với độ tin cậy 95% Trồng nơi đất trống, cho sinh trưởng đường kính gốc, chiều cao vút đường kính tán cao 3.2.3.2 Ảnh hưởng mật độ trồng đến khả sinh trưởng Sau năm thí nghiệm sinh trưởng D00 Hvn Dó bầu trồng với loại mật độ khác (1.100cây/ha, 1.660cây/ha 2.500 cây/ha) chưa có khác 3.2.3.3 Ảnh hưởng phân bón đến khả sinh trưởng Sau năm thí nghiệm (Quảng Nam năm), sinh trưởng D 00, Hvn Dt cơng thức bón phân khác có khác rõ rệt: Cơng thức bón phân chuồng vùng Quảng Ninh, Hà Tĩnh Quảng Nam cho sinh trưởng cao Ở Vĩnh Phúc bón NPK tốt Kém vùng cơng thức khơng bón 3.3 Nghiên cứu thử nghiệm số biện pháp kỹ thuật tác động tạo trầm, cấu tạo thô đại hiển vi gỗ Dó bầu chưa tác động sau tác động 3.3.1 Thực trạng khả tạo trầm Dó bầu sản xuất 3.3.1.1 Các chế phẩm kích thích tạo trầm sản xuất nghiên cứu Luận án điều tra tiếp cận 10 sở sản xuất nghiên cứu, tương ứng 10 loại chế phẩm chia làm nhóm là: nhóm chế phẩm hố học có sở gồm: Doanh nghiệp tư nhân Hồng Ngọc, Dự án rừng Mưa, Chi nhánh CT Dó bầu hương, Trang trại Sơn Thuỷ, Ông Huỳnh Trừu Ông Phạm Quốc Nổi Nhóm chế phẩm sinh học có sở gồm: Công ty CP SX&DV Trầm hương Hà 11 Nội, Công ty TNHH Lâm Viên Hà Nội, Công ty TNHH Phùng Anh Sở KHCN Bình Phước + Viện KHLN Việt Nam Quan sát màu sắc gỗ xung quanh vị trí tác động cho thấy chế phẩm hoá học làm cho phạm vi biến đổi màu sắc gỗ rộng chế phẩm sinh học Tuy nhiên, để đánh giá xác cần phải phân tích hàm lượng chất lượng tinh dầu chưng cất từ mẫu gỗ 3.3.1.2 Hàm lượng hỗn hợp chứa tinh dầu mẫu gỗ Theo định nghĩa Bách khoa toàn thư “Tinh dầu loại chất lỏng tinh chế từ cây, thân cây, hoa, vỏ cây, rễ phận khác thực vật” Xét theo vùng sinh thái, kết cho thấy hàm lượng hỗn hợp chứa tinh dầu mẫu gỗ Dó bầu vùng sau: * Vùng Đông Bắc Bộ phụ cận (Hà Tây cũ): Từ mẫu số đến Trong đó, mẫu tác động chế phẩm sinh học sau 10-24 tháng, mẫu có HLHH chứa tinh dầu cao mẫu không tác động đạt 0,1% * Vùng Bắc Trung Bộ: Từ mẫu số đến 14 Kết chưng cất mẫu gỗ cho thấy biến động HLHH chứa tinh dầu mẫu gỗ khu vực Bắc Trung Bộ theo tuổi cây, theo chế phẩm kích thích theo thời gian tác động chưa rõ ràng Riêng HLHH chứa tinh dầu mẫu có sâu đục thân cao mẫu khơng có sâu đục thân, không nhiều * Vùng Nam Trung Bộ: Từ mẫu số 15 đến 22 HLHH chứa tinh dầu mẫu kích thích chế phẩm hóa học có xu hướng tăng cao mẫu không tác động Cao mẫu Tam Sơn, Núi Thành, Quảng Nam có HLHH chứa tinh dầu đạt 0,1445% * Vùng Đơng Nam Bộ: Từ mẫu số 23 đến 26 mẫu tác động chế phẩm sinh học sau 24 tháng, HLHH chứa tinh dầu cao hẳn so với mẫu không tác động * Vùng Tây Nam Bộ: Từ mẫu số 27 đến 29 Kết chưng cất, 7-8 tuổi với phương pháp giới + hóa học cho HLHH chứa tinh dầu cao (0,1734%) so với tất mẫu vùng sinh thái khác 3.3.1.3 Hàm lượng hỗn hợp chứa tinh dầu vị trí khác - Hàm lượng hỗn hợp chứa tinh dầu xung quanh vị trí tác động khơng tác động Kết chưng cất cho thấy HLHH chứa tinh dầu gỗ xung quanh vị trí tác động cao nơi gỗ trắng Như vậy, xung quanh vị trí tác động tích tụ hỗn hợp có chứa tinh dầu cao nơi không bị tác động - HLHH chứa tinh dầu thân, gốc rễ cây: Bảng 3.25 Hàm lượng hỗn hợp chứa tinh dầu thân, gốc rễ Dó bầu (Cây mọc tự nhiên Núi Thành-Quảng Nam) TT Vị trí lấy mẫu Đặc điểm mẫu gỗ Màu sắc Trạng thái vật lý HLHH chứa TD (% v/m) 12 Thân Gốc Rễ ∅= 30,5cm (Đoạn cách mặt đất từ 2,0-2,5m) ∅= 37,5cm (Đoạn cánh mặt đất từ 50-80cm) ∅=14,7cm (sát gốc) Cánh gián Đặc sáp 0,1163 Cánh gián Đặc sáp 0,1453 Vàng nhạt Đặc sáp 0,0291 Kết chưng cất cho thấy: Đoạn gỗ cách mặt đất từ 50-80cm có HLHH chứa tinh dầu đạt tới 0,1453%; đoạn thân từ 2-2,5m (tính từ mặt đất lên) đạt 0,1163%; thấp rễ (ngay sát gốc), đạt 0,0291% (bảng 3.25) Tóm lại: + Hầu hết chế phẩm sinh học (trong phạm vi nghiên cứu này) kết hợp với tác động giới cho kết rõ so với chế phẩm hóa học + Trên cây, HLHH chứa tinh dầu gỗ xung quanh vị trí tác động cao nơi gỗ trắng rõ, gỗ đoạn thân gần gốc có HLHH chứa tinh dầu cao gỗ thân cao cao nhiều so với gỗ rễ + HLHH chứa tinh dầu trầm sau chưng cất chưa phải tinh dầu + Lồi Dó bầu xuất xứ Can Lộc - Hà Tĩnh, xuất xứ Núi Thành - Quảng Nam xuất xứ Hà Tiên - Kiên Giang có hàm lượng hỗn hợp chứa tinh dầu cao, bước đầu chọn làm giống để mở rộng sản xuất Nhưng kết hợp với khả sinh trưởng nên chọn xuất xứ Kiên Giang 3.3.2 Nghiên cứu số biện pháp chế phẩm tác động tạo trầm huyện Hương Sơn, tỉnh Hà Tĩnh Từ kết điều tra thu thập, luận án lựa chọn kế thừa loại chế phẩm kích thích tạo trầm, có chế phẩm sinh học chế phẩm hóa học Ngồi ra, cịn sử dụng cơng thức tác động giới (đóng đinh sắt khoan vào thân không sử dụng chế phẩm) công thức không tác động biện pháp để làm đối chứng Đối tượng Dó bầu trồng Hương Sơn, Hà Tĩnh với cấp tuổi khác (5, 11 năm tuổi) 3.3.2.1 Ảnh hưởng chế phẩm tác động đến HLHH chứa tinh dầu Dó bầu Với 12 công thức tác động cỡ tuổi khác cho thấy: - HLHH chứa tinh dầu trầm mẫu gỗ kích thích chế phẩm sinh học nhìn chung có xu hướng cao chế phẩm hóa học, rõ tác động giai đoạn 11 năm tuổi - HLHH chứa tinh dầu trầm cỡ tuổi tương đối cao mẫu đối chứng, công thức không tác động biện pháp - Tuy nhiên, chưa phải hàm lượng tinh dầu, mà dạng sáp đặc Để làm rõ vấn đề này, luận án nghiên cứu chất lượng thành phần tinh dầu trầm 3.3.2.2 Chất lượng tinh dầu từ gỗ Dó bầu 13 Luận án đánh giá hàm lượng chất lượng tinh dầu thông qua thành phần tinh dầu hàm lượng hợp chất Sesquiterpene hỗn hợp tinh dầu * Thành phần hóa học hỗn hợp chứa tinh dầu từ mẫu gỗ Dó bầu tác động sản xuất Nhóm Các hợp chất Sesquiterpene Các mẫu tác động so với mẫu không tác động cấp tuổi điều kiện sinh thái, mẫu số (mẫu tác động) mẫu số (mẫu không tác động) có hàm lượng Sesquiterpene chênh lệch lớn (22,37 0,22%) Nhưng so sánh mẫu mẫu thấy khoảng cách chênh lệch không lớn (2,71 2,70%) Bước đầu cho thấy, mẫu tác động có hàm lượng Sesquiterpene cao mẫu khơng tác động Về tuổi cây, hàm lượng Sesquiterpene chưa thể tính quy luật, Quảng Nam mẫu số 15 tuổi có hàm lượng Sesquiterpene (22,37%) cao mẫu số tuổi (17,66%), Hà Tĩnh mẫu số tuổi có hàm lượng Sesquiterpene (2,71) nhỏ mẫu số tuổi (3,64%), nguyên nhân thời gian phương pháp tác động Bảng 3.28: Hàm lượng Sesquiterpene chất béo hỗn hợp chứa tinh dầu Hàm lượng chất Số thứ tự Mẫu 10 Số H.lượng H.lượng lượng Ses acid Ses (%) béo (%) 12 23 18 11 14 22 22,37 0,22 63,51 2,71 2,70 33,70 3,64 17,66 5,06 71,33 ≈21 ≈20