Công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh pdf

 Nhiều thập kỷ qua, thuốc hóa học bảo vệ thực vật BVTV đã phát huy được tác dụng tích cực trong việc phòng trừ sâu bệnh, bảo vệ cây trồng, tuy nhiên nó cũng gây ra những tác dụng không

Giảảng viên hướớng dẫẫn:

 Nhiều thập kỷ qua, thuốc hóa học bảo vệ thực vật (BVTV) đã phát huy được tác dụng tích cực trong việc phòng trừ sâu bệnh, bảo vệ cây trồng, tuy nhiên

nó cũng gây ra những tác dụng không mong muốn như ảnh hưởng xấu đến môi trường sống, ô nhiễm lương thực, thực phẩm, gây ngộ độc chết người Do vậy, việc sử dụng các tác nhân sinh học như virut, vi khuẩn, vi nấm hay các hợp chất tự nhiên có hoạt

tính sinh học mạnh để phòng trừ sâu bệnh cho cây trồng là rất hữu ích và cần thiết, trong đó thuốc trừ sâu vi sinh đã và đang được lựa chọn.

 Thuốc trừ sâu vi sinh chủ yếu được sản

xuất ra từ các chủng vi sinh vật (VSV) như virus, vi khuẩn, vi nấm được nuôi cấy trên môi trường dinh dưỡng khác nhau theo

phương pháp thủ công, bán thủ công hoặc lên men công nghiệp nhằm tạo ra những chế phẩm có chất lượng cao, có khả năng phòng trừ được các loài sâu bệnh hại cây trồng nông, lâm nghiệp.

Các vi sinh vật được sử dụng để sản xuất thuốc trừ sâu sinh học là vi khuẩn, virus và

vi nấm Cụ thể có:

 Chế phẩm vi khuẩn trừ sâu

 Chế phẩm virus trừ sâu

 Chế phẩm nấm trừ sâu

Vi khuẩn được sử dụng để sản xuất chế phẩm trừ sâu là những vi khuẫn có tinh thể protein độc ở giai đoạn bào tử Những tinh thể này rất độc đối với một số loài sâu bọ nhưng lại không độc với nhiều loài khác.

Tinh thể protein độc có hình quả trám hoặc hình lập phương Sau khi nuốt phải bào tử có tinh thể protein độc , cơ thể sâu bọ bị tê lệt

và bị chết sau 2 đến 4 ngày

Loài vi khuẩn được quan tâm nghiên cứu nhất là Baccillus

thuringiensis Từ loài vi khuẩn này người ta sản xuất ra thuốc trừ sâu Bt

Ở loài vi khuẩn diệt côn trùng Bacillus thuringiensis và Bacillus

sphaericus còn gặp tinh thể độc (parasoral body) hình quả trám, có

bản chất protein và chứa những độc tố có thể giết hại trên 100 loài sâu hại (tinh thể độc chỉ giải phóng độc tố trong môi trường kiềm do

đó các vi khuẩn này hoàn toàn vô hại với người, gia súc, gia cầm,

thuỷ hải sản- có hại đối với tằm)

Bacillus sphaericus Bacillus thuringiensis

Tinh thể protein tiền độc tố nằm trong bào tử Bt

Gây giống sản xuất

Ủ vả theo dõi quá trình lên men

52 – 54h, pH = 7, 30 O C

Thu hoạch và tạo dạng chế phẩm

_Nghiền lọc bổ sung phụ gia

_Sấy khô _đóng gói bảo quản

Đặc điểm

Yếu tố gây chết: tinh thể δ

Nhờ bộ men của côn trùng

Phá hủy ruột giữa

Tác động đường ruột Tổng hợp

Nhiễm trùng đường tiêu hóa

Cơ chế diệt côn trùng

Thực vật được chuyển gen BT

Bông vải

Các

loại rau

Thuốc

Chế phẩm BT

THUỐC TRỪ SÂU Vi-BT 32000WP

 Dùng những hạt cơ chất rắn đóng vai trò là nguồn chất dinh dưỡng hoặc chỉ là chất mang

vô cơ.

 Vd: cám lúa mỳ, bột ngô, bánh hạt bông loại dầu…

 Lên men bề mặt

 Chọn môi trường dinh dưỡng tối ưu phù hợp với từng chủng BT.

 Quan tâm các thông số: nhiệt độ, pH, độ oxi hòa tan, tốc độ thông khí…

 Lên men chìm

Một số loại sâu mà BT có thể phòng trừ

1.Thuốc trừ sâu Xentari 35

- Thuốc an toàn đối với người sử dụng, môi trường và quần thể thiên địch, không độc với cá và ong, độc với tằm

- Thời gian cách ly: 5 ngày

- Thuốc có tính chọn lọc cao, diệt trừ rất hữu hiệu hơn 60 loài sâu hại thuộc bộ cánh phấn

(Lepidoptera) như sâu tơ, sâu xanh da láng, sâu ăn tạp, sâu

đo, sâu loang, sâu hồng, sâu đục bông, sâu đục trái…, trên rau cải, cà chua, dưa leo, đậu, hành tỏi, thuốc lá, bông vải, nho

- Liều lương sử dụng: pha 15-20 g/bình 8 lít Phun cho thuốc phủ đều trên bề mặt của các bộ

phận của cây rau cần được bảo vệ

- Phun thuốc sớm khi sâu còn ở tuổi nhỏ Nên phun vào chiều mát khi sâu hoạt động mạnh

- Không pha chung với thuốc có tính kiềm, thuốc có gốc đồng, phân hóa học, thuốc trừ bệnh kháng sinh

- Không sử dụng thuốc trên cây dâu tằm, tránh phun thuốc gần nơi nuôi tằm

Hiện nay người ta đã phát hiện hơn 250 bệnh virus ở 200 loài sâu bọ Ở giai đoạn sâu non, sâu bọ dễ bị nhiễm virus nhất Khi mắc bệnh , cơ thể sâu bọ bị mềm nhũn do các cơ bị tan rã Màu sắc và độ căng của cơ thể bị biến đổi

Để sản xuất ra chế phẩm virus trừ sâu, người ta gây nhiễm virus nhân đa diện (NPV) trên sâu non (Vật chủ) Nghiền nát sâu non đã bị nhiễm virus và pha với nước theo tỉ lệ nhất định, lọc lấy nước dịch thu virus đậm đặc Từ dịch này sản xuất ra chế phẩm thuốc trừ sâu N.P.V

Dùng để trừ sâu róm thông, sâu đo, sâu xanh………

Nuôi sâu giống Nuôi sâu hàng loạt

Nhiễm bệnh virus cho sâu

Pha chế thực phẩm : -Thu thập sâu bệnh.

-Nghiền, Lọc -Li Tâm

-Thêm chất Phụ gia

Sấy khô Kiểm tra chất lượng

- Trong các nhóm thì Baculovirus và CPV là 2 nhóm

có khả năng diệt sâu rất cao Vì vậy nhiều nước

trên thế giới đã tập trung nghiên cứu để sản xuất

ra thuốc trừ sâu virus Một đặc điểm quan trọng

của virus là tác nhân gây bệnh mang tính chuyên tính có phổ kí chủ riêng ví dụ virus sâu xanh chỉ có thể lây bệnh cho sâu xanh, virus sâu tơ chỉ lây bệnh cho sâu tơ, do đó tên virus gắn liền với tên kí chủ.

 NPV (Nuclear polyhedrosis virus - virus đa diện nhân): chứa nhiều hạt virus (virion) trong mỗi thể vùi đa diện nhân (polyhedral inclusion body)

SNPV (single nuclear polyhedrovirus): chỉ có 1

nucleocapsid trong mỗi hạt virus

MNPV (multiple nuclear polyhedrovirus): nhiều

nucleocapsid trong mỗi hạt virus

 GV (granulovirus - virus hạt): chỉ có 1 virion

trong mỗi thể vùi dạng hạt Mỗi virion chỉ chứa 1 nucleocapsid

nucleocapsid Virion

Thể vùi

GV

28

VD virus sâu xanh hại bông:

• Trong 2-3 ngày đầu là thời kỳ ủ bệnh Sâu

non không có biểu hiện gì rõ rệt và không thay đổi về sức ăn.

• Sau 5-7 ngày thấy các đốt thân sâu sưng

phồng lên, căng phồng và mọng nước.

• Cơ thể sâu chuyển sang mầu trắng đục, da

bở, dễ bị vỡ.

• Trước khi chết sâu thường leo lên ngọn cây,

bám chân vào cành cây, chúc đầu xuống dưới.

• Dịch trắng chảy ra ngoài và sâu chết → hiện

tượng sâu chết treo

• Dịch trắng tiếp tục chảy ra không có mùi hôi.

Virus ( Kiểm tra chất lượng Virus tb/ml) - Hỗn hợp tạo thuốc virus (thử sinh học lại trên sâu) – Hoàn thiện sản phẩm

Madex (Andermatt Biocontrol, Thụy Sỹ),

Granusal (Behring AG, Werke, Đức),

Spodopterin (National Plant Protection,

Pháp) Spodoptera littoralis Nucleopolyhedro Virus (SINPV)

33

Có rất nhiều nhóm nấm gây bệnh cho sâu Trong số này có hai nhóm: nấm túi và nấm phấn trắng dc ứng dụng rộng rãi trong phòng trừ dịch hại cây trồng.

Nấm túi ký sinh trên nhiều loại sâu bọ và rệp khác nhau Sau khi bị nhiễm nấm cơ thể sâu bị trương lên Nấm càng phát triển thì các hệ cơ quan của sâu bọ càng bị

ép vào thành cơ thể Sâu bọ yếu dần rồi chết

Rải mỏng để Hình thành Bào tử trong Tình trạng Thoáng khí

Thu sinh Khối nấm _sấy đóng gói

_bảo quản _sử dụng

Nấm bột Nomuraea

Rileyi (để sản xuất ra

chế phẩm sinh học nấm bột trừ sâu hại rau)

Nấm Beauveria, còn gọi là nấm cương tằm - hoạt động theo cơ chế:

Khi được phun vào rừng có sâu nấm Beauveria bào tử dạng tiềm sinh sẽ phát tán bám vào và ký sinh trên thân sâu, phát triển thành dạng sợi chọc thủng thân sâu làm cho sâu tê liệt rồi chết…

Nấm Beauveria

Ống nước nhựa có đường kính 2,5 cm cưa thành từng đoạn khoảng 2 - 2,5 cm.

Bịch nylon chịu nhiệt kích thước 22 x 32

Kỹ thuật làm môi trường thứ cấp:

Cho tấm gạo vào bịch nylon chịu nhiệt , 300g

 cho 150 - 180ml nước sạch vào mỗi bịch tùy theo độ dẻo của tấm.

 Dùng đoạn ống nước 2,5 cm tạo miệng bịch nylon

để có thể cấy nấm vào.

bông không thấm làm nút bông

Lấy giấy bịt kín đầu nút bông lại.

Lắc đều , cho vào nồi hấp tiệt trùng ở nhiệt độ 100 độ

C (nước sôi) trong thời gian 2 giờ.

 Sau khi hấp tiệt trùng môi trường thứ cấp đưa ra phòng sạch, để nguội,

 Đậy nút bông lại, đảo đều bằng cách lắc bịch nấm, rồi lấy bịch môi trường thô đã cấy ra khỏi tủ cấy.

 Dùng giấy báo bịt kín đầu bông

ráo thoáng mát cho nấm phát triển.

đa việc mất không khí

cho tới khi có thể sử dụng được (khoảng 15

ngày

 Nhược điểm  Ưu điểm

Ưu điểm và nhược điểm của việc sử dụng thuốc trừ sâu vi sinh

 Giáo trình Công nghệ vi sinh vật trong sản xuất nông nghiệp và sử lý ô nhiễm môi trường.

 Phạm Hữu Thương, Bài dự thi “công nghệ sinh học trên internet”.

 http://www.stankurtz.org/biomedical/comprehensi ve-antiviral-approach.html

 http://www3.imperial.ac.uk/people/d.wright/resear ch



http://maxreading.com/sach-hay/vi-sinh-vat/cau-truc-te-bao-vi-khuan-37150.html