Công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng

Công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng, báo cáo hay về sản xuất kháng thể đơn dòng, dành cho sinh viên chuyên ngành sinh học, môi n trường nghiên cứu, tài liệu hay nhất, dành cho sinh viên công nghệ sản xuất kháng thể đơn dòng

Nhóm thực hiêên: H Công Di n ồ ễ

Tr ươ ng Đình Dũng

Đ ng Ng c Ti n ặ ọ ề

Tr n Đình Nam ầ

Lê Hoàng C nh H ng ả ư

Là các phân tử immunoglobulin (có bản chất là glycoprotein) do lympho B cũng như các tương bào tiết ra để hệ miễn dịch nhận biết và vô hiệu hóa các tác nhân lạ (vi khuẩn hoặc virus).

Kháng th (antibody) ể Kháng th (antibody) ể

Phân tử kháng thể cấu tạo từ

Vùng biến đổi với có các

CDR quyết định khả năng

kháng thể liên kết với kháng nguyên.

 Trên kháng nguyên có một

hoặc nhiều vị trí gắn với một

kháng nguyên, tương tự như

giữa enzyme và cơ chất.

 Trên kháng nguyên có một

hoặc nhiều vị trí gắn với một

kháng nguyên, tương tự như

giữa enzyme và cơ chất.

3 Ái lực giữa kháng nguyên

và kháng thể

3 Ái lực giữa kháng nguyên

và kháng thể

Có hai loại kháng thể:

 Kháng thể đơn dòng liên kết với một epitope đặc hiệu.

 Kháng thể đa dòng là một tập hợp các kháng thể đặc hiệu với các epitope khác nhau trên cùng một kháng nguyên.

Kháng th ể đơn dòng Kháng th ể đa dòng

4 Kháng thể đơn dòng và đa dòng

Năm 1975, hai nhà miễn nhiễm học César

Milstein - người Anh gốc Argentina và

Georges Köhle - người Đức đã khám phá một

kỹ thuật tạo ra một số lượng lớn các tế bào

bạch huyết, có khả năng sản xuất một dạng

kháng thể duy nhất Các kháng thể này chỉ

đáp ứng với một loại kháng nguyên chuyên

biệt, chẳng hạn với chỉ một độc tố hay một

siêu vi, vì thế chúng được đặt tên là kháng thể đơn dòng (Monoclonal Antibodies)

1.Kháng thể đơn dòng là gì ?

Các kháng thể chỉ đáp ứng với một loại kháng nguyên chuyên biệt (chẳng hạn với chỉ một độc tố hay một siêu vi)

Chỉ nhận biết một epitope trên một kháng nguyên cho sẵn.

Tất cả các kháng thể đơn dòng cùng một dòng thì giống hệt nhau và được sản xuất bởi cùng một dòng tương bào (biệt hóa từ lympho B)

2.Kỹ thuật lai tạo kháng thể đơn dòng

- Tiêm các tế bào khối u vào chuột để kích thích các tế

bào lympho B tạo ra các kháng thể.

-Hòa lẫn các tế bào myeloma bất hoại được chọn với các

lympho B

- Sự kết hợp sẽ tạo ra tế bào lai (hybridomas) có khả năng

sinh sản vô hạn (nhận từ tế bào myeloma) và tiết ra kháng thể đặc hiệu (nhận từ tế bào lympho B)

- Các tế bào lai sản xuất kháng thể được chọn lọc và nhân

bản để đưa vào quá trình tạo thành kháng thể đơn dòng.

3- Ưu điểm của kháng thể đơn dòng:

- Là những chế phẩm tinh khiết có tính đặc hiệu cao đối với một yếu tố quyết định duy nhất của kháng nguyên

-Khả năng nhanh, nhạy cảm trong chẩn đoán bệnh

- Hệ thống miễn dịch của con người nhận diện KTĐD (được sản xuất từ tế bào B của chuột) như là

protein lạ nên tạo ra các kháng thể chống lại chúng, thậm chí trung hòa chúng, làm hiệu quả của chúng suy giảm

đáng kể Hơn nữa, một số KTĐD khi tiếp cận và bám được vào các kháng nguyên, chúng không trung hòa hoặc phá hủy được các kháng nguyên gây bệnh

- Thành phần kết hợp với KTĐD được đưa vào cơ thể bệnh nhân có thể bị tách ra và đi khắp nơi, gây nên

các phản ứng phụ và hậu quả khó lường Ngoài ra, với

một số khối u được bao bọc chắc chắn bởi các lớp mạch máu nuôi dưỡng, KTĐD rất khó thâm nhập vào bên trong

để phá hủy.

- Giá thành đắt

4- Hạn chế của kháng thể đơn dòng:

Để khắc phục những hạn chế trên, các nhà khoa

học đã nghiên cứu đưa tế bào lympho B của người vào cơ thể chuột, các tế bào B này sẽ tạo ra các

KTĐD mà hệ thống miễn dịch của bệnh nhân sẽ

chấp nhận như là của mình Các nghiên cứu mới

đây còn dùng công nghệ gene và thay thế chuột

bằng các vi khuẩn để tạo các KTĐD nhỏ hơn, hoạt động hữu hiệu hơn, gắn chặt các vật mang hơn,

thâm nhập các khối u dễ dàng hơn và đặc biệt là giá thành rẻ hơn.

5- Ứng dụng của kháng thể đơn dòng:

Có thể được dùng để chẩn đoán và chữa trị các bêênh nhiễm trùng, dùng để thử nghiêêm miễn dịch để phát hiêên các kháng nguyên với nồng đôê thấp

*Chữa trị ung thư máu bằng kháng thể

đơn dòng Alemtuzumab

- Bệnh ung thư máu CLL là bệnh lý ác tính của dòng limpho B tăng lên quá mức bình thường về

số lượng (chỉ dưới 2% là của dòng limpho T)

- Khi bị bệnh đa số các tế bào máu sẽ phát triển thành các tế bào bạch cầu limphocytes không

bình thường và không thể đảm nhiệm chức

năng của một bạch cầu chống lại bệnh tật

CDR của chuột thay thế CDR trên kháng thể của người

Quy trình sản xuất kháng thể đơn dòng Alemtuzumab

Tác động của Alemtuzumab tới các tế bào ung thư limpho B trong điều trị bệnh CLL:

Tủy xương trước (trên) và sau (dưới) khi điều tri bằng kháng thể Alemtuzumab

=> mật độ tế bào ung thư giảm

Alemtuzumab đã lk với CD52 => gây ra các phản ứng

đáp ứng miễn dịch trong cơ thể người bệnh tiêu diệt

các tế bào ung thư có CD52 trên bề mặt

- có thể gây viêm phổi, các cơn đau tim, các vấn đề về gan, thận, và các vấn đề về tiêu hóa

- Thử thai: Khi một người nữ mang thai, hormon HCG

(human chorionic gonadotropin) được bài tiết qua nước tiểu Cho dung dịch KTĐD liên kết với một enzym, sẽ biến đổi màu khi có sự hiện diện của HCG, vào ống nghiệm

đựng nước tiểu Nếu nước tiểu đổi màu thì có thai và

ngược lại Que thử thai ứng dụng công nghệ này đã giúp chị em phụ nữ tự xác định mình có thai hay không rất

nhanh chóng và tiện lợi

- Chẩn đoán bệnh Aids: Cũng với nguyên tắc trên, KTĐD

giúp các phòng thí nghiệm phát hiện sự hiện diện của HIV (human immunodeficiency virus) trong máu các bệnh nhân mắc bệnh Aids

- Ghép tạng: KTĐD giúp xác định mô người cho có tương

thích với người nhận hay không và ngăn ngừa hệ thống miễn dịch của bệnh nhân thải loại mô ghép

3- Các ứng dụng khác:

- Trong bệnh tim mạch: Một loại protein cơ có tên myosin hiện diện với số lượng lớn trong các cơ

bắp Một phần myosin ở cơ tim bị phá hủy sau cơn nhồi máu Bằng cách tiêm KTĐD đáp ứng với

myosin, người ta có thể xác định được số lượng

myosin mất đi để đánh giá tình trạng của tim bệnh nhân.

KTĐD cũng được dùng để xác định vị trí cục máu đông trong cơ thể bệnh nhân bằng cách gắn vào sợi huyết (fibrin) phát sinh khi có cục máu đông Việc này giúp các bác sĩ chẩn đoán và xử lý kịp

thời cho người bệnh.