Khóa luận tốt nghiệp Hóa học: Nghiên cứu thành phần hóa học của nấm nuôi cấy địa y Nigrovothelium inspertropicum

Địa y là một dạng cộng sinh giữa nắm mycobionU và thé quang hợp photobionU có khả năng tạo ra nhiều hợp chất độc đáo với tiềm năng lớn trong trong sinh học và sinh thái, là đối tượng ngh

BỘ GIÁO ĐỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHAM THÀNH PHO HO CHÍ MINH

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SU PHAM THÀNH PHO HO CHÍ MINH

KHOA HÓA HỌC

Dương Gia Huy

NAM NUÔI CAY DIA Y NIGROVOTHELIUM

INSPERTROPICUM

Chuyên ngành: Hóa hữu cơ

KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP

NGƯỜI HƯỚNG DAN KHOA HỌC:

PGS.TS DƯƠNG THÚC HUY

Thành phố Hồ Chí Minh - 2024

LỜI CẢM ƠN Khóa luận tốt nghiệp này là sản phẩm nghiên cứu đánh dau điểm dừng cho chặng đường 4 năm đại học của em Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến giảng viên hướng dẫn khóa luận tốt nghiệp khóa luận của em — PGS.TS Dương Thúc Huy đã hướng dan và cho

em cơ hội được tìm hiệu thêm một lĩnh vực mới, điều mà em cho rằng nó sẽ giúp ich cho

ban thân em trên con đường sau này.

Em cũng xin bày tỏ sự trân trọng và biết ơn đến các thầy cô trong khoa Hóa học

trường Đại học Sư phạm Thành phô Hỗ Chí Minh đã luôn tạo điều kiện giảng dạy, truyền

đạt những tri thức quý báu về cá lý thuyết lẫn kỹ năng thực nghiệm trong suốt những năm qua, từ đó giúp em có thé tiễn hành thực hiện và hoàn thành khóa luận tốt nghiệp này.

Ngoài ra, em cũng xin gửi lời cám ơn chân thành đến những anh, chị, bạn bè va đàn

em trong phòng thí nghiệm Hóa Hữu cơ đã giúp đỡ hướng dẫn chia sẻ những kinh

nghiệm học tập, nghiên cứu và tạo động lực để em hoàn thành bài khóa luận tot nghiép

một cách thành công nhất.

Cuỗi cùng, em xin gửi lời cảm ơn đến tat cả bạn bẻ và gia đình đã luôn ủng hộ, luôn

sát cánh và hỗ trợ em trong những năm vừa qua, giúp em trên con đường học tập Nếu

không có sự giúp đỡ của mọi người, em sẽ không có được ngày hôm nay

Em xin cảm ơn tât cả mọi người

TP Hồ Chí Minh, 08 tháng 05 năm 2024.

Duong Gia Huy

MỤC LỤC

LỐI GAM ONGunsnranrnnnnsnrinnninniinnnniiiiigisiigNNEADEISNHINISIDHENHIDIENBIPINHED i

SU (co oiiniicoioioioeiooooirosnioslacag10830856120385563508583885888888265E ilDANH MỤC CÁC CHU VIET TAT VA KY HIỆU iii

DANH MỤC BANG, BIẾU VÀ SOIDO sscasssessscsssossssssscssssasssosssesssoasssasseasssesseanssesisen iv DANH MỤC HINH ANH - S232 S23 2211 1 211 1 11 111211217111 2111111 2c se V DANH MỤC CÁC PHY LỤC - 2 s2 E2 St SE E1 21122 11111112111 1211 2e e, vi MUHMIOIDAU o0 n2 00000110i61116662800011100e0002001221000030) I

CHƯƠNG 1 TONG QUAN secsssssssssssseseessseseesntesssssnseescunececeaneeccennseecsnneceeeaueeseneees 2

1.1 Mô tả về địa y Ši511E21013314321833614353851812303281324032142511146)8231E31813211424823212514822892403327832012357 2

1.2 Sơ lược về họ TrypetheliaCeae c0 110111 31.3 Tông quan về Nigrovothelium inSp€FLFOJDỈCLtN 56:56 5ssSsc2s 2s sveg 8

CHUONG 2 THUC NGHI NỈ (in inianninniiiiobiinogiditiiiitiiiiixi464613500410021088 11

D1) AG chất, HEBEBf scnssisassssisenssssaisnossoasinesssnssensississsassisvaisoasivassinssieatieasiesiiestiaaaiins il

2.1.1 Hóa SP da ai II 11

DU ECE DY ¡t5ii95415956185135581651655813840458190690883833808819i683384875899058188ã90680582895886599389838519808358 il

DZS INGUV SH MOO ss ssissasieaisrassnassisasssaaseaiscanseansnasssasspaasieaassanssassracssacsvaaiacanssasanasieararaataas li

2.2.1 Nguyên liệu thực vật địa y Nigrovothelium inSperIToĐICIUN 1]

2.2.2 Nguyên liệu thực vật nam nuôi cay từ địa y Nigrovothelium inspertropicum 11

2.3 Phương pháp tiền hành ¿2222222222121 2112112112117117111 711272112 12

2.4 Quy trình thực HIỆP saa:ssssgg2ztpz53022755315617051318307213409103433083085938808678885978S0883008789899858 12

CHUONG 3: KE T QUA VA THẢO LUAN cccccccecseessesseessesscessecssesssestesseeseteneeeses 15 3.1 Khao sát cấu trúc hoá học của hợp Oa 0 2-52 s22sc222Ezcxxccsrccv 15

3.1.1 Đặc điểm hợp chất NI6 - 2222222232 3 221122112211211211 211211711 21 15

3.1.2 Biện luận cau trúc hoá học của hợp chất NI&2 - 222 22z2c2zZccce2 15

3.2 Khao sát cau trúc hoá học của hợp chat NI62 - 2 s2 +2se2zzzEzz22z 2 18

3.2.1 Đặc điểm hợp chất NI62 © 22222223 12211221122112211221112111711711 711C e2 ce 18

3.2.2 Biện luận cau trúc hoá học của hợp chất NI62 - 22-22 2222222222223 212 18

3.3 Khảo sát cau trúc hoá học của hợp chất NI6 2-22 £E2Sc£22zt2zzcccz 203.3.1 Đặc điểm hợp GHHHN TẾ, c6) 051652 11922122210251022162360225162102340834022102210023621400E318E340334 203.3.2 Biện luận câu trúc hoá học của hợp SH ENTB ca 21

CHƯƠNG 4 KET LUẬN VÀ ĐÈ XUÁTT 22222 2221221122112 2112 2112 21121Xe2 24

4.1 Kết TAM ssecssccssscsssnsssscsnesssnssssessnssssassessssesssassneassncsssosssesssesseassnesssscsssossnssssnssnensons 24

4.2 De UUM Use scasascapvsancanscensvavenenveacuaeniasiseuaveuiseisssnrssawresqrseaiseosteanneoressmessnessnurentnensins 24

TAITIẾU THAM KHẢ kiaanieieoorroananinnaininoiidouinoiiitiiidiiaidaassnatea 25

Electronic Circular Dichroism

Half Maximal Inhibitory Concentration

Minimum Inhibitory Concentration

carbon 13

Phô tương tác proton

Phô tương tác dị nhân qua nhiều

DANH MỤC BANG, BIEU VÀ SƠ DO

DANH MỤC BANG, BIEU Bảng 3.1 So sánh dữ liệu phô NMR của hợp chất NH6 với aspermytin A 17

Bang 3.2 So sánh dữ liệu phô NMR của hợp chat NI62 với corynesidone A 20Bảng 3.3 So sánh dữ liệu phô NMR của hợp chat NI6 với (-)-semivioxanthin 22

DANH MỤC SƠ DO

Sơ đồ 2.1 Quy trình điều chế cao EtOAc, các phân đoạn cao tương ứng và phân lậpESEIHGDIEBAE sáicciiiciiisinciniiaatiiiiiiiii1i212111220122162212082228332544524582388598688335844553854328827g5288223852625432545 14

DANH MỤC HÌNH ẢNH

Hình 1.1 Một số loài nắm thuộc họ T EYPELHIIRCBE:tioniioeiboaooaoiobiooiiioiiioipoaooagaa.a 4

Hình 1.2 Một số hợp chất phân lập từ họ Trypetheliaceae 7

Hình 1.3 Một số hình ảnh vẻ Nigrov Othelium inspertrOPiCuUm, cccccseseesereeeeeee 9 Hình 3.1 Cau trúc hoá học và một sé tương quan HMBC, COSY, NOESY của NI16 "=1." 17 Hình 3.2.1 Cấu trúc hoá học của NI62 va corynesidone Á 19

Hình 3.2.2 Một số tương quan HMBC va NOESY của NI62 19

Hình 3.3.1 Phô ECD lần lượt của NI6 và (+)-semivioxanthin 22

Hình 3.3.2 Cầu trúc hoá hoc HMBC của NI6 và (+)-semivioxanthin 22

Hình 3.3.3 Một số tương quan HMBC của NĨ6 2: 22222EEE2EE122122212 c1 22 Hình 4.1 Cau trúc hoá học của các hợp chat đã cô lập được 24

DANH MỤC CÁC PHU LUC

Phụ lục 1 Pho MS của NIH6 222-2222 SS52S223S3221235 21575211 1121012 21171022117 22c 31

Phụ luc 2 Phô "H-NMR của NH6 trong Acetone-d6 cssseesssecssesseesnessteesterneenee 32 Phụ lục 3 Phỏ IMOD của NH6 trong Acetone-đi s-5525ccccssseceee 33 Phụ lục 4 PhO HMBC của NH6 trong Ácetone-đs 22-5222sc22222zSzxccscczcrcec 34

Phụ luc 5 Pho HSQC của NH6 trong Acetone-dk - Ăn sseieeeiereerre 35Phụ lục 6 Pho COSY của NH6 trong ChÌoroform-d - 5-5 5< <<<~< 36Phụ lục 7 Phô NOESY của NH6 trong ChÌoroform-¿ 5-55 << sex 37

Phụ lục 8 Pho 'H-NMR của NI62 trong CD:OD co 38

Phụ lục 9 Phô C-NMR củaNI62.rong'CĐ:GD, 39

Phụ lục 10 Pho HMBC của NI62 trong CD:OD SSSseieeiee 40

Phụ lục 11 Phô HSQC của NI62 trong CD:OD -Q SH«He 4]

Phụ lục 12 Pho NOESY của NI62 trong CD:OD . -. - 42

Php lege 15 PRG MS ictal NIG siiscsisssisesissssinssisesscossaseisssissasiasstsonisnisisavseaioaatiasiasasianaines 43

Phụ lục 14 Pho "H-NMR của NI6 trong Acetone-¿s - :- is 44 Phụ lục 1Š Phô "H-NMR cúa NI6 trong Chloroform-đ 5525:5252: TH)

Phụ lục 16 Pho JMOD của NIG trong Acetone-đi c si sec sia

Phụ lục 17 Phô HMBC của NIG trong Ácetone- óc Si uớo TH 7ýPhụ lục 18 Phố HSQC của NIG trong Acetone-4i - -c¿-c: 522 2222 225xvzscrves 48

LOI MỞ DAU

Từ xa xưa, các bài thuốc dân gian đã luôn được người dân trên khắp thé giới sử dụng một cách phổ biến nhằm điều trị những căn bệnh thường gặp như sốt, ho, viêm nhiễm, hay các vết thương ngoài da Đặc biệt ở những quốc gia có điều kiện khí hậu thuận lợi

cho các loài thực vật sinh trưởng, ngảnh y được cỗ truyền có nguồn gốc từ những bài

thuốc dân gian lại càng phát triển Việt Nam với vị trí địa lý nằm trong vành đai nhiệt

đới, có rừng già rậm rạp trải rộng, có biên độ nhiệt quanh năm ở mức cao, ôn định và khí

hậu am ướt kéo dai Hệ sinh thái vùng cao nguyên miền Bắc và miền Trung Việt Nam có nhiều loại rừng, từ rừng rụng lá đến rừng rụng lá hỗn hợp và rừng thường xanh, hau hết đều đã được phục hôi sau khi các khu vực nảy được công nhận là Vườn quốc gia [1] Điều kiện khí hậu như vậy đã giúp Việt Nam trở thành quốc gia có sự đa dạng thực vật

vô cùng lớn với số lượng lớn các loài cây, phân bố rộng rãi trên khắp cả nước Cũng vì lẽ

đó mà ngành khoa học nghiên cứu các hợp chất có nguồn gốc từ thiên nhiên đang ngay

càng phát triển mạnh mẽ.

Địa y là một dạng cộng sinh giữa nắm (mycobionU và thé quang hợp (photobionU có khả năng tạo ra nhiều hợp chất độc đáo với tiềm năng lớn trong trong sinh học và sinh thái, là đối tượng nghiên cứu vô cùng đáng chú ý [2] Nigrovethelium inspertropicum, một loài địa y thuộc họ Trypetheliaceae được báo cáo lần đầu tiên bởi Lũcking và cộng

sự vào năm 2016 [3] nhưng cho đến nay vẫn chưa có báo cáo nào về thành phần hóa học cũng như hoạt tính sinh học liên quan đến loài này Nhận thấy tiêm năng của địa y nói chung và Nigrovothelium inspertropicum nói riêng, khóa luận tốt nghiệp “Nghién cứu thành phần hoá học của nắm nuôi cây địa y Nigrovothelium inspertropicum” được thực hiện với mong muốn làm rõ được thành phần hóa học của loài địa y này cũng như xây đựng cơ sở cho những nghiên cứu về hoạt tính sinh học có liên quan.

tự nhiên và trạng thái nuôi cấy, thông qua các con đường polymalonate, shikimate và

mevalonate [4] Trong mối quan hệ cộng sinh của địa y, mycobiont thiếu đi khả năng

quang hợp và phải lay nguồn carbon từ photobiont dé phát triển Đôi lại, chúng sẽ đảm bao cung cấp đủ nước, ánh sáng, muối khoáng và trao đôi khí cho photobiont Một số nhà địa y học có xu hướng xem moi quan hệ này là một kiểu ký sinh được kiểm soát bởi nắm hơn là

cộng sinh lẫn nhau Điều này một phan là do nam có thê hình thành haustoria - loại cấu trúc thường thay ở nắm gây bệnh, với khả năng xâm nhập vào các tế bào photobiont và hap thụ chất dinh dưỡng [2].

Hóa thạch được tim thay của địa y chỉ ra rang nam đã phát triển mỗi quan hệ cộng sinh

với các sinh vật quang tự dưỡng trước khi xuất hiện quá trình tiền hóa của thực vật có mach [5] Theo ước tính, đã có khoảng 19409 loài địa y được chấp nhận thuộc vào 1002 chỉ khác nhau, nhưng ước tính này chỉ chiếm 50-65 % mức độ phong phú thật sự của loài [6] [7] Riêng ở Ấn Độ đã có khoảng 2540 loài địa y được biết đến, trong đó có 1047 loài (chiếm 41.22 %) được tìm thấy ở phía Đông Day Himalaya [8].

Dựa trên cơ sở hình thái và môi trường sống địa y thường được chia thành ba nhóm

hình thái chính: crustose, foliose, và fructicose [9] Dạng hình thái được biết đến nhiều nhất

là foliose, trong đó mycobiont có thallus giống như chiếc lá được hình thành bởi các thùy dẹt có mức độ phân nhánh khác nhau và chỉ gắn một phan vào lớp nên Ngược lại với

những quan sát thông thường, hau hết địa y lại là crustose, ít phân hóa hơn, thiếu vỏ ở bề mặt dưới và được gắn chặt vào lớp nén Mặt khác, dia y fructose thé hiện nhiều hình dạng

khác nhau với thân, cành nhỏ và các cấu trúc giống như lá hướng lên thắng đứng [2].

Địa y có khả năng tạo ra nhiều hợp chất độc đáo với tiềm năng lớn trong trong sinh học va sinh thái, chăng hạn như kha năng kháng khuẩn [10] Tông cộng có hơn 1050 hợp

chất đã được phân lập và mô tả từ địa y [11], cho thấy nhiều hoạt tính sinh học khác nhau

[10], [12], [13] Hầu hết các chất chuyển hóa này đều được tạo ra bởi phần nam, dù ở trang

thái cộng sinh hay không cộng sinh Tuy nhiên, các nghiên cứu đã cho thay nam nuôi cấy địa y có khả năng tạo ra các chất chuyên hóa vô cùng đa dạng trong điều kiện khắc nghiệt

mà không thé phát hiện trong địa y tự nhiên, nhưng vẫn có cấu trúc liên quan đến các chat

chuyên hóa của nam [ 14] [15], [16].

1.2 Sơ lược về họ Trypetheliaceae.

Trypetheliacease là một họ địa y crustose [17] được nhà thực vật học người Đức,Franz Gerhard Eschweiler, đặt tên vào năm 1824 Trong định nghĩa ban dau của mình,

ông đã xếp họ này gồm các chỉ: Arthonia Porothelium, Medusula, Ophthalmidium, Trypethelium, Astrothelium, Glyphis, Chiodecton, và Conioloma [18] Đa số các loài địa

y trong họ nảy đều là crustose với mức độ phân bố tập trung ở vùng nhiệt đới [19] Các

họ có tên tương đồng với Trypetheliaceae có thé kể đến như Arthopyreniaceae,

Astrotheliaceae, Cryptotheliaceae, Hyalophragmiaceae, và Laureraceae [20] Trong đó,

Arthopyrenia là một chi dién hình của họ Arthopyreniaceae đã được xếp vào họ

Trypetheliaceae vào năm 2021 {21] Và vào năm 2008, họ này được đề xuất thuộc vào bộ

Trypetheliales [22] Trong bản tóm tắt sửa đôi năm 2016 về Trypctheliaccac, André Aptroot va Robert Lũcking đã chấp nhận họ này gồm 418 loài phân bố trong 15 chỉ:

Aptrootia (3), Architrypethelium (7), Astrethelium (242), Bathelium (16), Bogeriella (29),Constrictolumina (9) Dictyomeridium (7), Distothelia (3) Marcelaria (3).Nigrovethelium (2), Novomicrothelia (1), Polymeridium (50), Pseudopyrenula (20),Trypethelium (16), va Viridothelium (10) [19]

Trypetheliaceae phân bố chủ yếu ở vùng nhiệt đới đến cận nhiệt đới, với số lượng

lớn các loài được báo cáo từ Trung và Bắc Nam Mỹ, An Độ, Đông Nam Á, và Úc Các

nghiên cứu đặc biệt là từ Costa Rica và Venezuela, đã chứng minh rang các loài xuất

hiện chủ yếu trên thân và cành cây trong bóng râm, cho đến các môi trường sông vi mô lộ thiên ở các vùng đất thấp hoặc rừng nhiệt đới vùng núi thấp (0-1000 m) và cả ở thảo

nguyên với mùa khô rõ rệt [23]

Hình 1.1 Một số loài nắm thuộc họ Trypetheliaceae [23].

Trypetheliaceae là họ có sự đa dang vẻ loài cao nhất, các dòng phân nhánh có khả

năng địa y hóa yêu hoặc không hình thành địa y trong họ này gồm Alloarthopyrenia,

Arthopyrenia, Bogoriella, Constrictolumina, Polypyrenula, và Pseudobogoriella; trongkhi đó, các nhánh chính luôn tôn tại ở trong tự nhiên ở trạng thái địa y với thallus có cau

trúc phức tạp hơn về mặt giải phẫu [24] Các nghiên cứu sâu hơn về mặt di truyền và giải

phẫu cũng đã cho thấy các loài thuộc Trypetheliaceae có tiềm năng lớn trong việc nghiên

cứu nam hình thành địa y, do việc phân lập cộng sinh tương đối dé dang [23].

“Cae nghiên cứu về thành phan hóa học và hoạt tính sinh học của họTrypetheliaceae:

Năm 1980, Mathey đã thành công phân lập từ loài địa y nuôi cấy Trypethelium spregel các hợp chất 1,2-naphthoquinone gồm có trypethelone (1) trypethelone methyl

ether (2), 8-methoxytrypethelone methyl ether (3) và 4'-hydroxy-8-methoxytrypethelonemethyl ether (4) Các hợp chất này được Mathey xác nhận là dan xuất của (+)-dunnione

với cơ chế sinh tông hợp polyketide của khung quinone Kết quả thực nghiệm còn cho

thay các hợp chat từ 1 — 4 có tác dụng ức chế vừa phải với vi khuẩn Bacillus subtilis [25].

Năm 2010, từ cao EtOAc thô của nam nuôi cay địa y Astrothelium sp, Sun và cộng

sự đã lần nữa phân lập thành công hợp chất trypethelone (1) và trypethelone methy! ether

(2) cùng với một hợp chất mới là 7-hydroxyl-8-methoxyltrypethelone (5) Cấu trúc của các hợp chất được xác định bằng các phương pháp phô cộng cộng hưởng từ hạt nhân kết hợp so sánh với các tài liệu Về hoạt tính sinh học, hợp chat (1) ngoài thé hiện khả năng kháng khuẩn chống lai Bacillus subtilis còn cho thay hoạt tính kháng khuân tương đối đôi

với vi khuẩn Staphylococcus aureus với giá trị ICswMIC khoảng 0.99/2.5 ug/mL Trong

khi đó, hợp chất (2) và (5) cho thấy hoạt tính yếu với hai chủng khuan Enterococcus

faecalis 850E va Staphylococcus aureus [26]

Năm 2013, Takenaka va cộng sự đã tién hành nghiên cứu thành phan hóa học của nam nuôi cấy có nguồn gốc từ bao tử của loài địa y crustose Trypethelium sp thu hái ở

Việt Nam Nhóm của ông đã báo cáo sự có mặt của bốn hợp chất: (+)-trypethelonemethyl] cther (6), (+)-§-hydroxy-7-methoxytrypcthelone (7), (+)-7,8-dihydro-6-hydroxy-

3-methoxy-1,7,7,8-tetramethyl-5H-furo[2’,3':5,6]naphtho| 1,§-be ]furan-5-one (8), và

(+)-sclerodin (9) Trong đó có (8) là một napthoquinone và (9) là một phenalenone lần đầu được tìm thay [27].

Năm 2019, Jarupinthusophon và cộng sự đã phan lập năm hợp chất napthoquinone:

(—)-2'S-trypethelone mcthyl ether (10) (—)-2'S-8-methoxytrypethelone methyl ether (11),(—)-(2'S,3'S)-4-hydroxytrypethelone (12), (—)-2'S-trypethelone (13), và (—)-(2'S,3'R)-4'-

hydroxy-8-methoxy trypethelone methyl ether (14) từ nắm nuôi cấy của loài địa y

Marcelaria cumingii Cau hình tuyệt đối của các hợp chất trên được xác định chính xác nhờ vào các phương pháp phô ECD và phân tích nhiễu xạ tia X đơn tinh thé Kết quả thử nghiệm hoạt tính gây độc tế bảo đối với một số dòng tế bào ung thư của các hợp chất được phân lập cho thấy (—)-2'S-trypethelone methyl ether (10) có hoạt tính ức chế chon lọc với các dòng tế bào HCT116 và A549 với các giá tri ICso lần lượt là 0.32 + 0.03 và

1.05 +0.12 pM [28]

Cùng năm 2019, bên cạnh ba hợp chat đã từng được công bố là

(+)-§-hydroxy-7-methoxytrypethelone (7), (+)-trypethelone (15), và (-)-trypethelone (13), Basnet và cộng

sự đã tìm thay hai hợp chat màu mới là trypethclonamide A (16) có màu vàng và hydroxytrypethelone (17) có màu tim sam từ cao ethyl acetate thô của nắm nuôi cay địa y Trypethelium eluteriae Ca năm hợp chất đều được đánh giá kha năng gây độc tế bào đối với các dòng tế bào A549, HepG2 và RKO cũng như tác dụng chống oxy hóa đối với

5’-DPPH [29]

Nam 2020, Srinivasan và nhóm của ông đã tiền hành khảo sát trên nắm nuôi cấy địa

y thuộc loài Trypethelium eluteriae và phân lập được chín hợp chất bao gồm bay

trypethelone và hai phenalenone: 8-methoxytrypethclone methyl cther (3), trypethelone

methyl ether (6), 8-hydroxytrypethelone methyl ether (7),

7,8-dihydro-6-hydroxy-3-methoxy-1,7,7,8-tetramethy]-5//-furo[2',3':5,6]naphtho[ 1 ,8-bc]furan-5-one (8), sclerodin

(9) trypethelone (15), 8-methoxytrypethelone (18), 4'-hydroxy-8-methoxytrypethelone

methyl ether (19), và 5'-hydroxy-8-ethoxytrypethelone (20) Sáu hợp chat (3, 8, 9, 15, 18,

va 19) đã được thử nghiệm hoạt tính chống lại trực khuân Mycobacterium tuberculosis