Khóa luận tốt nghiệp Hóa học: Khảo sát thành phần hóa học của cây phèn đen phyllanthus reticulatus poir., họ thầu dầu (euphorbiaceae)

đa dang, Củng với sự phát triển của y học nói chung và v học dan tộc nói riêng, thi các sản phẩm thuốc có nguồn góc từ tự nhiên dan dan được các nha nguyên cứu khoa học quan tâm hơn.. tr

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHAM THÁNH PHO HO CHÍ MINH

KHOA HÓA HỌC « StL ÌC2ìs«<<<

9SP =a

TP HỒ CHÍ MINH

KHÓA LUẬN TOT NGHIỆP

KHAO SÁT THÀNH PHAN HÓA HỌC CUA

CAY PHÈN ĐEN PHYLLANTHUS

RETICULATUS POIR., HQ THAU DAU

EUPHORBIACEAE

GVHD: TS Nguyén Thi Anh Tuyet

SVTH: Bai Thao Nguyén

MSSV: 37106059

Lop: Hoa K37C

TP Hô Chi Minh, tháng Š năm 2015

LỜI CÁM ƠN

Luan vin được thực hiện tại phòng hóa hữu cơ thuộc khoa Hóa trường dai học Su

Pham thành phỏ Hỗ Chi Minh

Với tắm lòng trân trọng vả biết ơn sâu sắc, em xin chân thành cảm ơn cô Nguyễn

Thị Anh Tuyết người cỏ luôn hét long, tận tinh hướng dan, giúp đờ tạo mọi điều kiện

thuận lợi giúp em hoan thánh tốt khóa luận nay, Cô không những truyền đạt cho em

những tri thức khoa học những kinh nghiệm nghiên cứu quý báu ma còn là tắm lòng

nghiên cứu khoa học giúp cho em có những hành trang can thiết trên bước đường nghiên

cứu và học tắp.

lim xin hết long cảm ơn quý thay cô bộ môn hóa, khoa hóa - đại học sư phạm

Ip ICM, các thay cô đã het lòng hướng dan, giảng dạy, truyền thụ cho em nhiều kiến thức

khoa học quý báu trong suốt thời gian em học tại trường.

Cuốt củng em xin gửi lời cam ơn đến các anh chị, các bạn phòng thi nghiệm hoa

hữu cơ trường đại học sư phạm thành pho Hỗ Chi Minh đã tận tinh truyền đạt những kinh

nghiệm quý báu quan tâm, nhiệt tinh hưởng dain va tạo mọi điều kiện giúp đỡ em trong suốt quá trình thực hiện dé tài.

DANH MỤC CAC KÝ HIỆU VA CHỮ VIET TAT

Tiếng Anh Tiếng Việt

‘H-NMR Proton (1) Nuclear Magnetic Resonance Phỏ cộng hướng từ hat nhân

HSOC Heteronuclear Single Quantum Phd sie đị hat nhắn qua

Correlation mot lién ket

Phó tương tác di hạt nhân qua

HMBC Heteronuclear Multiple Bond Coherence Man.

nhiều liền ket

ý Singlet Mai don

d Doublet Mũi đôi

5 Chemical shift Độ dịch chuyền hoá học

J Coupling constant Hang sé ghép spin

ppm Par per million Một phan một triệu

Rp-18 Reversed Phase-18 Pha dao C-18

ED Ether Petroleum Ether dau hoa

MỤC LỤC

LOD MO ĐẢI: TH 0u ng mm sms 1

GHIUDNGE.TÔNG QUAI cases ccs A I SLED

1.1 ĐẶC DIEM THỰC VAT CAY PHEN ĐEN ooo ccsccscccssssssssssssssestsusesnnonsssseevsnnnnsvessnsonnenennnes 2

121:1:7MG 1B CN NTE<=šš1:cgt0:::C21 CC: oe zcag NGA REA SCORN as ALI eNO NNER 2

1.112: NDI phiên DỘ lan ae 06142100 664602671//065605111426626046351019096661660660/s34007 3

1.2 CÁC NGHIÊN CỨU VE DƯỢC TÍNH 2 0000212250000 4 1.2.1 Dược tinh theo y học cố truyền Bi nnair" 4

1.3 CAC NGHIÊN CỨU VE THÀNH PHAN HOÁ HỌC Š

CHƯNG: THỰ RGHIỆN ¡b2 210 00006ccc6000c6cG0G0000/SG0Xssliiiekss- 10

2.1 HOÁ CHAT, THIET BỊ, PHƯƠNG PHÁP 2.2 2225522++ C22 0221272420212Xccexeee 10

rh ID LÊ “ sai vee eet uN i gOS lũ

2.1.3 Phương pháp tiến hành oan pene creer Bovey) eee ee 10

8:2NGUYÊN LIỆU sai cA aR Aa AN wld

PDAs Pinan tna nguyễn U41006025122222200002000GX2010L0NA(3/xáxdiiqdai 10

2.2.2 Xử ly mẫu nguyên liệu ee OR ER Tae nee TPO I 33:88UGECACHDMAEAD-=————Ẻ}Ƒ a behead Akemnieseeasse HH

2.4 CÔ LAP CÁC HỢP CHẤT HỮU CƠ TRONG CAO ETYL ACETAT, xa 12

2.4.1 Sắc kí cột silica gel trên cao etyÍ acetat ¬ eaten 12 2.4.2 Sắc ki cột sillica gel trên phân đoạn EAS của bang ?2 l2

2.4.3 Sắc ky cột sillica gel trên phan đoạn 5A của bang 3 1171127222517 13

2.4.4 Sắc kí cột sillica gel trên phan đoạn EA6 của bang 2 ees 13 2.4.5 Sắc ky cột sillica gel trên phan đoạn 6A cia bang 5 Re eer Reve TT eer lá

CHƯƠNG II: KET QUÁ VÀ THẢO LUẬN., —-05ccc2S S-~.E cceccee 16 3.1, KHAO SÁT CẤU TRÚC HỢP CHẤT PEA3 nan |

3.2 KHAO SÁT CẤU TRÚC HỢP CHẤT PEA4 Gases " 18

CÌIƯƠNG 4: KET LUẬN VÀ DE XUẤT, S002 — C02022 xl

4.1 KẾT LUẬN Sarai 08606664 TT TỰ ¡ieaz:i19

BF OE RU Gueeasaoree 0)8I&GG:1260099023000)036G)34GG(1072083400160000n0051/i24u660g 19

PUR DG nee eet oe a es 22

PHU LUC HÌNH

HIEN 1: CGäV:biiêHDêN RN 2 Hành 2 AG SAR Dò HE acc 10 tca0002G10000 22 GEEGi0(RGGaiidi6fkecsigesdtnei 3

Hình 3 Cay phén den được trong làm hàng ribo oe sees 2S2Z22Ssec2EEvczeecrzerreecrscerserrree Š

Hình 4 Cau trúc hợp chit PI:A3 Ib3/0)6642/x x41?

Hinh 5 Tương quan HMBC của hợp PÏEA3 -— c SecieeSenrreirreeie 17

Hình 6 Dữ liệu phd NMR cua ellagic acid và acid 1,3'.4`-tri-(2<metylellagie 18

PHU LUC BANG

Bang 1 Mỏi sé bop chat đã được cô lập tir cây Phén đen Phyllanthus reticulatus Poir 6

Bang 2 Sắc kí cật-silica pel trên cao etyl acetiat - - c6) c2 c6 022-216 12

Bang 3 Sắc ky cột sillicagel trên phan đoạn EAS (7,00 g) của bang 2 „13

Bang 4 Sắc ky cột sillicagel trên phản đoạn 5A (1.20 g) của bảng 3 13

Bang 5 Sắc ki cột sillicagel trên phản đoạn EA6 (23.7 g) của bang 2 lá

Bang 6 Sắc ki cột sillicagel trên phan đoạn 6A (Sg) của bảng Š l4

RE J- [ (Ìu lọ ¡|, L KỆ NNNAnsinua 17

PHU LUC SƠ DO

Sơ Đỗ 1 Quy trình điều ché cao eter dau hoa va ctyl acctat RSS 0g

Sơ Đồ 2 Quy trính có lập hai hợp chất PIEAB cccossecoreeecveeeeenncesvereseevvvesesoneneercnaniveesnvncenes 15

Khóa luận tit nghiệp Bui Thảo Nguyên

LỜI MỜ ĐÀU

Nước ta có khí hậu nhiệt đới gió mùa điều kiện mỏi trường tự nhiên thuận lợi tạo nên thảm thực vật rat phong phú đa dang, Củng với sự phát triển của y học nói chung

và v học dan tộc nói riêng, thi các sản phẩm thuốc có nguồn góc từ tự nhiên dan dan

được các nha nguyên cứu khoa học quan tâm hơn vita mang lại hiệu qua cao ma lại rat

it tác dụng phụ Chính vi điều đó nghiên cứu các hợp chat thiên nhiên phát triển mạnh

mẻ và đang đóng góp những thành tựu quý bau cho ngành hóa học cũng như ngành

sinh học vả y dược học.

Việt Nam có tỷ lệ nhiễm virus viêm gan cao [8], nó đã trở thành dé tải nguyễn cửu

cho nhiều ngành khoa học nhằm cham lo tt cho sức khỏe cộng đồng Y học dân gian

đã phát hiện khoảng 20 loại cây có có khả nang chữa trị viêm gan trong đó đáng chủ ý

là các loái thuộc chỉ /?u/fawrhux (họ Thâu dau, Euphorbiaceae), Các loài cây thuộc chi

Phylianthus được sử dung rộng rải trong y học dân tộc của nhiều nước như chữa bệnh

than, tiểu đường viêm gan B [5] Cây phén den (Pnildnthus reticulatus Poir.) làcây thuộc chi /?a/anzv Cay phèn den đã va dang được dùng trong Y học cô truyền

của Việt Nam và nhiều nước trên thé giới Các bộ phận của cây déu được sứ dung làmthuốc: rẻ phèn đen thường được dùng trị viêm ruột ruột kết hạch, viêm gan, viêm

thận Lá cây thường dùng chữa s6t phủ ứ máu máu nóng sinh mụn nhot, Vỏ thân

được dùng dé chữa lên đậu có mú vả tiểu tiện khó khan [3, 4| Phén đen thuộc loại cây

ở vùng nhiệt đới châu A nên có phân bỏ rat rong, có thẻ tìm thay ở vùng Đông Nam A.

Nam Trung Quốc Tay va Nam Phi Ở nước ta, Phén den mọc hoang ở ven rừng hay

bở bụi khắp mọi miễn hoặc được trong lam hang rao [4]

[uy nhiên các công trình nghiên cửu vẻ thánh phan hỏa học của cây phén đen còn

chưa nhiêu Chính vi vậy mà cây phèn den được chọn đẻ nghiên cứu trong đẻ tải này

với mong muốn lắm rò thêm thành phan hóa học từ đỏ hiệu thêm vẻ tác dụng chữa

bệnh của cay và đóng góp những chứng cử khoa học có giả trị vào kho được liệu của

Y học dan toc Việt Nam.

Khoa luận tôi nghiệp Bin Thao Nguyên

CHUONG I: TONG QUAN

1.1 DAC DIEM THUC VAT CAY PHEN DEN ||

Lén thong thương: Phen den

lén gọi Khác: Nó Sap trang thảo Tao phản di¢p Điệp ha chau mang co ranh

( That), may teng dam (Tay), che nộc

Ihuộc ho Thau dau (Euphorbiaceae)

Hình 1 Cay phén den

1.1.1 Mô ta chung (4|

*hen den la cay bụi mọc tự nhién ở bo bụi, ven đường, ven mma, cay cao 2-4m

canh gay manh den nhạt, doi khi họp ar 3 đến 3 cảnh trên củng mot dot dar 1-20 em

Lá có hình dane thay doi, hình trai xoan hinh bau dục hay hinh trứng ngược nhọn hay tú ơ hat dâu phiên la rat mony dai 1.5 — 3 cm rong 6 — [2 mm mặt trên có mau

sam hom mat dưới lá kém hình tam giác hep

Khóa luận tôi nghiệp Bui Thao Nguyên

Cum hoa hình chum moc duci nach lá riêng le hay xếp 2-3 cai một cham Qua hinh cau khi chín mau den dai Š mm rộng 3 mm Tat hình: 3 cạnh mau nau có

nhữne dom rat nho Cay ra hoa ket qua từ thang & -10 hàng nam

Hinh 2 Mé ta cay phen den

1.1.2 Vùng phan bỏ |4 |

Phen den thuộc loại cay ở vùng nhiệt đới châu A nén có phan bò rat rộng có the

tìm thay o Việt Nam, An Độ Mianma Xri Lanea, Trung Quốc Lao, Campuchia Thai Lan Malainia, Indonéxia, Oxtrav Hà

O nước ta, Phen den là loại mọc hoang ở ven rong hay bo bụi khắp mọi miễn hoặc

được trong lim hang ráo làm thuộc nhuộm hoặc lam thuốc trị bệnh nhớ giau được

tinh

Cay phen đen được trong bằng hat

Khoa luận tot nghiệp Bùi Tháo Nguyên

1.2 CÁC NGHIÊN CUU VE DUOC TINH

Các lồi cây thuộc chỉ Plyilanthus (Euphorbiaceae) được sử dụng rộng rãi trong y

học dân tộc của nhiều nước như chữa bệnh thận tiểu đường viêm gan B [5] [rong

đĩ các lội được dùng Lim thuốc nhiều hơn cả là Phyllanthus amarus Schum et Thonn

(cây Diệp hạ châu đăng) Phyllanthus urinaria L (cấy Điệp hạ chau ngọt) vàPhyllanthus reticulatus Poir (cây Phén den) [3].

1.2.1 Dược tính theo y học cơ truyền [3.4]

Phẻn den vị đẳng chát tinh mat cĩ tác dung làm se gidm đau sát khuẩn giải độc

Chủ trị làm thuốc cảm máu, chữa đậu mùa, chữa viêm cau than, chữa ly, tiêu chảy

Trong đỏ rẻ phén den cĩ vị chát tỉnh lạnh cĩ tác đụng tiêu viêm Lá Phén den cĩ tác

dụng thanh nhiệt giải độc, sat trùng, lợi tiêu

Cách ding: Bộ phận ding làm thuốc chú yếu là rẻ va lá Vỏ thân cũng được dùnglàm thuốc Thuốc được thu hai vào mia thu, đem nia sạch thái nhỏ phơi khơ cắt sử

dụng dân; lá được thu hái vào mùa hẻ phơi trong bĩng nim (dm can), vo thu hoạch

quanh nam,

Một số bài thuộc theo y học cơ truyền:

Chữa kiét ly: dùng ré cây Phén đen đây mơ lơng cỏ seo ga cĩ tranh bang nhau,

mơi vị 20 gam, gừng 2 lát 2 gam - sắc uống (Nam được than hiệu)

Chữa máu ty trong cơ thé: lá Phén đen giã nhĩ ché rượu vào va vắt lay nước uống

(Bach gia trần tang), hoặc dùng 40 gam sắc rồi chế thêm một chén rượu - uống.

Chữa nhọt độc mới phat: lá Phèn den vả lá Béo vin giả nát rồi dip (Bách gia trin

tang) Chữa nhiệt tả va ly: cây Phén den cả cảnh và lá đậu den sao moi thứ 40 gam.

đỏ 4 bát nước sắc lấy | bát, chia ra uống lam 3 ln (Hoạt nhân tốt yêu của Hoang ĐơnHiou}.

Chữa đại tiện ra máu: cấy Phèn den cá cảnh va lá thai nhỏ 3 bát sắc đặc uống

(Bách gia trần tảng).

Chita chảy máu nướu rang: lá Phén den phỏi hợp với la Long não và lá Xuyén tiêu

phơi khĩ chế thánh viên rồi ngậm.

Irj ran căn: la Phèn den tươi nhai nat nuốt hết nước roi lây bã dap lên chỗ rin căn

Chữa đĩn danh tr máu: lá phén den 40 gam, giả nát, thêm | chén rượi ép vat lấy

nước cho wong,

Khoa luận tốt nghiệp Bùi Thảo Nguyễn

Erị bệnh trĩ: Lay lá phèn den | nam, lá trắc bách diép | nắm lá huyết dụ 7 lá Sao

vàng hạ thé sau sắc lay nước uống 1 bát, nước còn lại dùng dé rửa vùng bị trĩ ngay 1

Erị chan thương: Lay lá phèn den giã nat đắp vào nơi sưng đau (theo Hải Thượng

| dn Ong trong “Bach gia trân tang”).

Trị vết thương sưng dau: Dũng lá phén den khô tan bột rắc vào vết thương ngày |

-3 lần sẽ chóng lành và nhanh lên da non,

Erị tiêu tiện khó khăn: Lấy vỏ than cây phèn đen 20 - 40 gam sắc lay nước uống

ngây | thang chia 2 - 3 lan trong ngay.

Thuốc cảm mau dùng tại chỗ: lá phén den 300 gam, cảnh lá non cay sim 500 gam

ngũ hội tử 100 gam xạ can 50 gam Sắc với nước, cô thành cao đặc ty lệ 1:1 Lamthuốc cảm máu khi cắt amidan, đứt chân tay va các vết xước nhỏ có chảy máu Nênđóng chai va hap tiệt khuẩn trong 30 phút

Ngà va đập sưng dau: Lay 30 gam lá phén đen giã nat đắp vao vùng bị ton thương

trong vòng 30 phút Lam 3 ngay lién đến khí hét sưng đau

Cây phén den được người dan Lao, Campuchia dùng chữa đậu múa giang mai: ởPhilippines dùng làm thuốc lợi tiểu, lọc máu lắm mát, chữa dau ring nước sắc chữa

ly và chữa hen: ở Malaysia dùng nước sắc trị viêm họng: ở Nam Phi dang hột ti khô

rắc lên vét thương giúp mau lành

1.2.2 Nghiên cứu về được tính

O Quang Tây rung Quốc cây Phyllanthus reticulatus Poir (Euphorbiaceae) là

một loại thuốc được sử dụng dé chống viêm khớp và điều trị bệnh thấp khớp {12|

Năm 1997, l: Omulokoki va cộng sự [7| đã sử dụng dich chiết từ la cia loài

Pjullanthus reticulatus Poir để khảo sát khả nang chống ky sinh trùng sót rét

Plasmodium falciparum cho kết quả ECsu< 10ug/ml

1.3 CAC NGHIÊN CUU VE THÁNH PHAN HOA HỌC

Chi Phyllanthus, ho Vhau dau (Euphorbiaceae) có trên 700 loài gdm từ những cây

thân thảo đến cay bụi hay cây gỗ nhỏ Ở Việt Nam có 44 loài các loài đáng được chú

Khóa luận tot nghiệp Bùi Thao Nguyên

ý nhiều hom cả là Phyllanthus amarus Schum et Thonn (cây Điệp hạ châu đẳng)

Phyllanthus wrinaria T (cây Diệp ha châu ngọt) và Phyllanthus reticulatus Polr (cây

Phen den) [6] Thanh phản hóa học của chỉ nay rất phong phú da dang

Các nghiên cứu vẻ thành phan hóa học của loài Phyllanthus reticulatus Poir đượctrình bay trong bang sau.

Bang 1 Một so hợp chat đã được cô lập tir cây Phén den, Phyllanthus reticulatus Poir,

laraxeron (19)

Sorghumol (20)

Sorghumol acetat (21)

Kokoonol (22)

Khóa luận tit nghiệp Bùi Thủo Nguyên

Khoa luận tốt nghié

Khoa luận tốt nghiệ Bùi Thảo Nguyên

A}

AS =Ÿ vw

tJ) ie —J

2-Acetamido-3-pheny|lpropyl -2- Stizmasterol (29) benzamido-3-pheny lpropanoat (28)

Khóa luận tốt nghiệp Bui Thao Nguyên

CHUONG Il: THUC NGHIEM

2.1 HOA CHAT, THIẾT BI, PHƯƠNG PHAP

2.1.1 Hoa chat

* Silica gel: silica gel 60 0.04-0.06 mm Merek dùng cho cột sắc ki.

* Silica gel pha dao, RP-18 Merck dùng cho sắc ki cột.

¢ Sac ki bang móng loại 25DC - Aflufolein 30-20, Kiesel gel 60F Merck.

® Sắc ki hang móng loại 252C RP-18, Merck

® Dung môi dùng cho qua trình thi nghiệm gêm: eter dau hoa etanol, cloroform

cty Lacetat accton metanol va nước cất

® Thuốc thir hiện hình các vết chất hữu cơ trên bảng mỏng: sử dụng H;SO, 20%,

2.1.2 Thiết bị

® Các thiết bị dùng đẻ giải ly dụng cu chứa mẫu

® Phiêu chiết long - long.

Sử dung kỳ thuật SKC silica gel pha thường, pha đảo Rp-18 két hợp SKLM Phát

hiện chat bang đèn tử ngoại ở hai bước sóng 254 nm và 365 nm hoặc dùng thuộc thử la

dung dich HạSO; 20%,

2.1.3.2 Phương pháp xác định cau trúc hoá học các hợp chat

Phd cộng hướng từ hạt nhân: H-NMR (500 MHz), ''C-NMR (125 MHz) tại Phòng NMR Viện Hóa Học, Viện KH-CN Việt Nam, số 18 Hoàng Quốc Việt, Cau Giáy, Hà

Nội và Phòng thí nghiệm Phản tích trung tam, Dai học Khoa học Tự nhién, sò 227

Nguyễn Van Cử, Q5, Tp.Hỗ Chi Minh,

2.2 NGUYEN LIEU

2.2.1 Thu hai nguyên liệu

Mau cay dung trong nghién cứu khoả luận lá lá than vả rẻ cay Phen den

(Phyllanthus reticulatus Poir.) được thu hai tại huyện Tan Uyén, Bình Duong, vào

10

Khóa luận tot nghiệp Bui Thảo Nguyễn

thang 6/2013 Mẫu cay da được GS.TS Võ Văn Chỉ nhận danh tén khoa học la

“Phyllanthus Reticulatus Đoir.”, họ Thau dau (Euphorbiaceae)

2.2.2 Xử lý mẫu nguyên liệu

Mẫu nguyên liệu được rita sạch loại bỏ phan sâu bệnh phơi khô trong bóng râm.roi xay thành bột mịn Sau đỏ tiên hành ngâm chiết va phan lập các hợp chat

2.3 DIEU CHE CÁC LOẠI CAO

Lá thân va rẻ cây Phén đen (Phyllanthus reticulatus Poir.) được phơi khó chat nhỏ

va nghiên thánh bột min, sáy khô đến khối lượng không đổi (m = 26.0 kg) Nguyễnliệu hột mịn được tận trích với etanol 96” bang phương pháp ngâm dam, lọc và côquay loại dung mỏi dưới áp suất thập thu được cao etanol thé (534.0 g)

Cao etanol thô được chiết lỏng — lỏng lần lượt với eter dau hoa, etyl acetat thu

được cao eter đâu hoa (52.0 g) cao etyl acetat (118.0 g), va cao côn lại (294.0) Quá

trình thực hiện được tom theo sơ đỏ Ì

Sơ Đà 1 Quy trình điều chế cao eter dau hoa va ety! acetat

Bột lá thân xó và rễ phen

den (m= 26.0 kg)

~ Ngâm dim trong etanol

— Có quay tho hội dung

~ Chiết long - long với eter dâu hoa, ety!

acetat

Cổ quay thu bor dụng mdi

Cao eter dấu hoa

(52.0 p)

Gia so từ

(2940p)

Khóa luận tốt nghiệp lùi Thảo Nguyễn

3.4 CÔ LAP CÁC HỢP CHAT HỮU CO TRONG CAO ETYL ACETAT

2.4.1 Sắc kí cột silica gel trên cao etyl acetat

Thực hiện sắc ki cột (SKC) silica gel trên cao ety! acetat (118.0 g) với hệ dung môi

rửa giải ED 100%, CH»CH: 100% và CH;CI;:CH:OH có độ phan cực tang dan tử 5%

đến 100% Metanol Dịch giải ly qua cột được hứng vao các lọ Theo dõi quả trính giải

ly bing sắc ki lớn móng (SKILM) Những lọ cho kết quả SKLM giống nhau được gop

chung thánh | phản đoạn Két quả thu được 9 phân đoạn (EA!-EA9), được trinh bảy

Ï EAL | CHSCI 05.0 Vệt dai Chua khao sat

2 EA3- | CHCl: CH,OH 191 030 Nhiều vét — | Chưa khảo sát |

3 BA3 | CH:CI;CH;:OH 19] O12 Nhiều vet | Da khao sat

-4 BAS | CH;CI;:CH/OH 19:1 | 25.-4 Nhiều vét | Đã khảo sát

S [BAS |ÍCH;CH:CHOHISIL - 07.0 —~ | Nhiều vết | Khảo sát

6 |EA6 | CH;CI:CH;OH9:1 27.3 Vật dai Khao sat

7 FAT | CHj)Cly:CH,OH17:33— |173 TNhiềuvết | Chưa khảo sat

& |EAR | CHyCh:CH,OH 4:1 08.9 Vẻt đài Chưa khảo sat

9 |EA9 | CH;Cl:CHÓH73 105 | Vadai Chưa khảo sát

|

4

2.4.2 Sắc kí cột sillica gel trên phân đoạn EAS của bang 2

Phản đoạn FAS cho SKLM nhiều vét nên phân đoạn EAS được thực hiện SKC sillica gel với hé dung môi rửa giải CHYC1;CH OH với độ phân cực tăng dan tir 5%

dén 20% Metanol Dich giải ly qua cột được hứng vào các lọ Theo dõi quá trình giải

ly bing SKLM Những lọ cho kết qua SKLM giống nhau được gom chúng thành |

phan đoạn Két qua thu được 3 phan đoạn (§A-ŠE) được trình bay trong bang 3.