Tóm tắt: Nghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết Dengue

Do đó, việc nghiên cứu biểu hiện của các lncRNA trên có thể giúp hiểu biết thêm về cơ chế cũng như ứng dụng trong tiênlượng sớm nguy cơ tiến triển nặng ở người bệnh SXHD.. Xác định mức đNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết DengueNghiên cứu mức độ biểu hiện và giá trị tiên lượng của một số long non-coding RNA (LncRNA) ở người bệnh sốt xuất huyết Dengue

NGUY N MINH NAMỄ

NGHIÊN C U M C Đ BI U HI N VÀ GIÁ TR TIÊN L Ứ Ứ Ộ Ể Ệ Ị ƯỢ NG

C A M T S LONG NON-CODING RNA (LncRNA) Ủ Ộ Ố

CÔNG TRÌNH ĐƯỢC HOÀN THÀNH T I H C VI N QUÂN YẠ Ọ Ệ

Ngườ ưới h ng d n khoa h c:ẫ ọ

Đ T V N Đ Ặ Ấ Ề

B nh ệ sốt xuất huyết Dengue (SXHD) lưu hành ở trên 100 quốc

gia, với khoảng 70% số ca xảy ra tại khu vực châu Á Hàng năm ghinhận khoảng 500.000 người bệnh SXHD nặng với tỷ lệ tử vong khoảng10% Tuy nhiên, tỷ lệ này có thể được giảm xuống dưới 1% nếu ngườibệnh được chẩn đoán sớm và điều trị kịp thời RNA dài không mã hóa(LncRNA) là các phân tử RNA không mã hóa protein, có độ dài trên

200 nucleotide Nhiều lncRNA tham gia vào phản ứng kháng virus vàđóng vai trò trong nhiều tương tác giữa virus và vật chủ Khi tiến hànhnghiên cứu trên mô hình tế bào, kết quả cho thấy ở các tế bào bị nhiễmDENV thì các lncRNA EPB41L4A-AS1, IFI6lnc1, IFI6lnc2, HID1-AS1, ILK 4, OAS1 lnc102 đều tăng biểu hiện hơn so với các tế bàokhông bị nhiễm Do đó, việc nghiên cứu biểu hiện của các lncRNA trên

có thể giúp hiểu biết thêm về cơ chế cũng như ứng dụng trong tiênlượng sớm nguy cơ tiến triển nặng ở người bệnh SXHD

Do v y, chúng tôi ti n hành đ tài hai m c tiêu:ậ ế ề ụ

1 Xác định mức độ biểu hiện của một số lncRNA huyết tương ở

người bệnh sốt xuất huyết Dengue theo các mức độ bệnh khác nhau.

2 Phân tích mối liên quan giữa mức độ biểu hiện của một số lncRNA

huyết tương với đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và giá trị tiên lượng ở người bệnh sốt xuất huyết Dengue.

ĐÓNG GÓP M I C A LU N ÁN Ớ Ủ Ậ

1 Đã xác định được mức độ biểu hiện của các lncRNA AS1, IFI6lnc1, IFI6lnc2, HID1-AS1, Lnc-ILK-4 và OAS1 lnc102 ở

EPB41L4A-người bệnh sốt xuất huyết Dengue.

2 Kết quả nghiên cứu cho thấy biểu hiện của các lncRNA AS1, IFI6lnc1, IFI6lnc2, HID1-AS1, Lnc-ILK-4, OAS1 lnc102) có mốiliên quan với tình trạng xuất huyết, các xét nghiệm cận lâm sàng(creatinin máu; enzym gan AST, ALT) ở người bệnh sốt xuất huyết

(EPB41L4A-Dengue và có giá trị chẩn đoán, tiên lượng trong bệnh sốt xuất huyết Dengue.

C U TRÚC LU N ÁN Ấ Ậ

Lu n án g m 123 trang (Không k tài li u tham kh o và ph l c),ậ ồ ể ệ ả ụ ụ

v i 4 chớ ương, 32 b ng, 24 hình, 12 tài li u tham kh o ti ng Vi t vàả ệ ả ế ệ

140 tài li u ti ng Anh Đ t v n đ 2 trang, t ng quan 33 trang, đ iệ ế ặ ấ ề ổ ố

tượng và phương pháp 25 trang, k t qu nghiên c u 31 trang, bànế ả ứ

lu n 29 trang, k t lu n 2 trang, ki n ngh 1 trang.ậ ế ậ ế ị

CH ƯƠ NG 1 - T NG QUAN Ổ 1.1 D ch t b nh s t xu t huy t Dengue ị ễ ệ ố ấ ế

1.5 Đặc điểm lâm sàng và cận lâm sàng bệnh sốt xuất huyết

1.7 Tổng quan lncRNA trong nghiên cứu và nghiên cứu về

lncRNA ở bệnh sốt xuất huyết Dengue

1.7.1 LncRNA trong nghiên cứu

LncRNA EPB41L4A-AS1 (EPB41L4A antisense RNA 1)nằm ở nhiễm sắc thể 5q22.2, ) có chiều dài 1.194 bp Các nghiên cứucho thấy EPB41L4A-AS1 có liên quan chặt chẽ với sự điều hòa chuyểnhóa tế bào LncRNA-IFI6 (IFI6lnc1) (còn được gọi lncRNA RP11–288L9.4; lnc-FAM76A-1:1) nằm trên nhiễm sắc thể số 1 (p36, 11) cóchiều dài 489 bp IFI6lnc2 còn gọi là LINC02574 nằm trên nhiễm sắcthể số 1 (chiều dài 441 bp) HID1-AS1 nằm trên nhiễm sắc thể số 17(có chiều dài 830 bp) Lnc-ILK4 nằm trên nhiễm sắc thể số 11 (chiềudài 380 bp) OAS1 lnc102 (còn gọi là lnc-RASAL1-1:1) nằm trênnhiễm sắc thể số 12 (có chiều dài 575 bp)

1.7.2 Tình hình nghiên cứu về lncRNA ở bệnh sốt xuất huyết Dengue

1.7.2.1 Một số nghiên cứu lncRNA ở bệnh SXHD trên thế giới

Trong nghiên cứu của Katz R và cộng sự, 2 dòng tế bào Huh7

và A549 được gây nhiễm DENV, thông qua phương pháp Real timePCR các tác giả đã nhận thấy 6 lncRNA (EPB41L4A-AS1, IFI6lnc1,IFI6lnc2, HID1-AS1, Lnc-ILK-4, OAS1 lnc102) đều tăng biểu hiệnkhi so sánh với các tế bào không nhiễm DENV Mức độ biểu hiện củacác lncRNA có thể tăng gấp từ 10 cho đến 100 lần

CH ƯƠ NG 2- Đ I T Ố ƯỢ NG VÀ PH ƯƠ NG PHÁP NGHIÊN C U Ứ 2.1 Đ i t ố ượ ng nghiên c u ứ

2.1.1 Nhóm b nh ệ : Gồm 377 người bệnh được chẩn đoán và điều trị

sốt xuất huyết Dengue tại Bệnh viện Quân y 103, bao gồm: 150 người bệnh được chẩn đoán sốt xuất huyết Dengue (SXHD); 159 người bệnh được chẩn đoán sốt xuất huyết Dengue có dấu hiệu cảnh báo (DCB); 68 người bệnh được chẩn đoán sốt xuất huyết Dengue nặng (DN) Trong

số 377 người bệnh có 59 người bệnh được theo dõi nồng độ cáclncRNA tại thời điểm ngày 2, ngày 5 và ngày 8 của bệnh

2.1.1.1 Tiêu chu n l a ch n ẩ ự ọ

- Tu i ≥ 16ổ

- Ngườ ệi b nh được ch n đoán s t xu t huy t Dengueẩ ố ấ ế

* Tiêu chu n ch n đoán SXHD theo hẩ ẩ ướng d n c a B Y tẫ ủ ộ ế

- Người bệnh mắc các bệnh có thể gây xuất huyết như: xuấthuyết giảm tiểu cầu, bệnh Hemophilia, xơ gan…

2.1.2 Nhóm ch ng ứ : G m 128 ngồ ười tình nguy n tham gia nghiênệ

c u th a mãn tiêu chu nứ ỏ ẩ

- Tuổi ≥ 16; Không có triệu chứng lâm sàng của bệnh SXHD

- Tiền sử không mắc bệnh: viêm gan, ung thư, các bệnh tựmiễn, suy thận, các bệnh có thể gây xuất huyết (xuất huyết giảm tiểucầu, bệnh Hemophilia, xơ gan…)

- Các chỉ số huyết học và sinh hóa cơ bản trong giới hạn bìnhthường

2.3 Ph ươ ng pháp nghiên c u ứ

Đ a đi m ti n hành thí nghi m: Phòng An toàn Sinh h c,ị ể ế ệ ọ

Vi n nghiên c u Y Dệ ứ ược h c Quân s , H c vi n Quân y (YDHQS-ọ ự ọ ệHVQY)

2.3.5 Các b ướ c ti n hành ế

- Tri u ch ng lâm sàng l y các đ c đi m đi n hình nh tệ ứ ấ ặ ể ể ấ

c a b nh SXHD; Các k t qu xét nghi m đủ ệ ế ả ệ ượ ấc l y cùng ngày ho cặngày g n nh t v i ngày thu th p m u đ đo n ng đ lncRNA; M cầ ấ ớ ậ ẫ ể ồ ộ ứ

đ b nh là m c đ ra vi n c a ngộ ệ ứ ộ ệ ủ ườ ệi b nh SXHD

- 377 người b nh SXHD đệ ược thu th p 4ml máu giaiậ ở

đo n nguy hi m c a b nh (t ngày th 4 đ n th 6 c a b nhạ ể ủ ệ ừ ứ ế ứ ủ ệSXHD) 128 người tình nguy n đệ ượ ấc l y 4ml máu t i th i đi m t iạ ờ ể ạ

th i đi m vào nghiên c u.ờ ể ứ

2.5 Quy trình đ nh l ị ượ ng n ng đ các lncRNA huy t t ồ ộ ế ươ ng

T dung d ch DNA plasmid ban đ u, b ng cách pha loãngừ ị ầ ằ

v i nớ ước kh ion thu đử ược các m u chu n v i n ng đ ẫ ẩ ớ ồ ộ 5, 101, 102, 103, 104, 105, 106 copies/µl, đ xây d ng để ự ường chu n cho phẩ ươngpháp đ nh lị ượng real time PCR

2.5.2 Xây d ng đ ự ườ ng chu n ẩ

Dựa vào kết quả Ct trung bình sau năm lần chạy với các mẫu

có nồng độ chuẩn 5, 101, 102, 103, 104, 105, 106 copies/µl nghiên cứu đãxây dựng được đường chuẩn cho 6 lncRNA Đường chuẩn của cáclncRNA đều có hệ số tương quan R2 >0,99; hệ số khuếch đại >90%

2.5.3 Đ nh l ị ượ ng n ng đ các lncRNA huy t t ồ ộ ế ươ ng

2.5.3.1 Tách RNA huy t t ế ươ ng b ng h th ng tách RNA t đ ng ằ ệ ố ự ộ abGenix

2.5.3.2 T ng h p cDNA t các m u RNA t ng s ổ ợ ừ ẫ ổ ố

2.5.3.3 Th c hi n ph n ng Real-Time PCR xác đ nh giá tr Ct c a ự ệ ả ứ ị ị ủ các lncRNA

2.5.3.4 N ng đ c a lncRNA trong huy t t ồ ộ ủ ế ươ ng

N ng đ c a lncRNA trong huy t tồ ộ ủ ế ương (đ n v là copies/mlơ ịhuy t tế ương) được tính b ng công th c:ằ ứ

C=Sq x (VcDNA/VPCR) x (1/Vext)Trong đó

- C là n ng đ c a trình t đích c n tính (copies/ml huy t ồ ộ ủ ự ầ ế

tương)

- Sq là s copies trình t đích xác đ nh đố ự ị ượ ừc t ph n ng Real ả ứtime PCR đ nh lị ượng

- VcDNA là t ng th tích cDNA thu đổ ể ượ ừc t quá trình tách chi tế

- VPCR là th tích cDNA tách chi t dùng cho m i ph n ng PCRể ế ỗ ả ứ

- Vext là th tích huy t tể ế ương s d ng đ tách chi t (ml)ử ụ ể ế

2.6 Phân tích th ng kê ố

Thu th p s li u b ng ph n m m Microsoft Excel 2016 Xậ ố ệ ằ ầ ề ử

lý s li u b ng SPSS 22.0, tuân theo các thu t toán th ng kê y sinh.ố ệ ằ ậ ố

CH ƯƠ NG 3 - K T QU NGHIÊN C U Ế Ả Ứ

3.1 Đ c đi m chung đ i t ặ ể ố ượ ng nghiên c u ứ

3.2 Bi u hi n c a các lncRNA huy t t ể ệ ủ ế ươ ng đ i t ở ố ượ ng nghiên c u ứ

B ng 3.7 N ng đ lncRNA EPB41L4A-AS1, IFI6lnc1, IFI6lnc2, ả ồ ộ HID1-AS1, Lnc-ILK-4 các nhóm nghiên c u trong giai đo n nguy ở ứ ạ

0,75 (0,33-1,45)

3,95 (1,64-7,04)

14,75 (6,71-26,94) p* p(1,2)<0,001; p(2,3)<0,001; p(3,4)<0,001; p(1,4)<0,001 IFI6ln

c1

Trung vị

(TPV)

0,11 (0,05-0,33)

0,40 (0,16-0,84)

1,60 (0,80-3,40)

10,50 (4,53-22,53) p* p(1,2)<0,001; p(2,3)<0,001; p(3,4)<0,001; p(1,4)<0,001

(0,20-0 29)

4,22 (2,28-7,49)

7,88 (4,13-15,78) p* p(1,2)<0,001; p(2,3)<0,001; p(3,4)<0,001; p(1,4)<0,001

0,23 (0,09-0,44)

1,31 (0,72-2,65)

2,98 (1,51-7,35) p* p(1,2)<0,001; p(2,3)<0,001; p(3,4)<0,001; p(1,4)<0,001

0,31 (0,13-0,66)

2,28 (1,23-3,77)

5,37 (2,65-10,56) p* p(1,2)<0,001; p(2,3)<0,001; p(3,4)<0,001; p(1,4)<0,001

* Ki m đ nh Mann Whitney, NC: nhóm ch ng, TPV: T phân vể ị ứ ứ ị

B ng 3.7 cho th y các lncRNA EPB41L4A-AS1, IFI6lnc1,ả ấIFI6lnc2, HID1-AS1, Lnc-ILK-4 đ u bi u hi n t t c các đ iề ể ệ ở ấ ả ố

tượng nghiên c u (c nhóm ch ng và nhóm b nh) N ng đ cácứ ả ứ ệ ồ ộlncRNA trên đ u tăng d n theo m c đ n ng c a b nh S khácề ầ ứ ộ ặ ủ ệ ự

bi t gi a các nhóm đ u có ý nghĩa th ng kê v i p<0,001.ệ ữ ề ố ớ

B ng 3.8 Bi u hi n OAS1-lnc102 các nhóm nghiên ả ể ệ ở

c u trong giai đo n nguy hi m ứ ạ ể

LncRNA (10 5 copies/ml) NC (1)

(n=128)

SXHD (2) (n=150)

DCB (3) (n=159)

DN (4) (n=68)

0,16 (0,08-0,31)

0,50 (0,23-0,86)

nhóm ch ng; Cao nh t là nhóm DN S khác bi t gi a các nhómứ ấ ở ự ệ ữ

đ u có ý nghĩa th ng kê v i p<0,001ề ố ớ

Hình 3.1 N ng đ các lncRNA nhóm theo dõi d c ồ ộ ở ọ

Hình 3.1 cho th y n ng đ 6 lncRNA ngấ ồ ộ ở ườ ệi b nh SXHD

t i các th i đi m xét nghi m khác nhau đ u có giá tr cao h n so ạ ờ ể ệ ề ị ơ

ngườ ệi b nh SXHD không có s khác bi t (p>0,05).ự ệ

3.3 Liên quan gi a bi u hi n c a các lncRNA huy t ữ ể ệ ủ ế

t ươ ng v i m t s tri u ch ng lâm sàng, xét nghi m và m c ớ ộ ố ệ ứ ệ ứ

đ b nh s t xu t huy t Dengue giai đo n nguy hi m ộ ệ ố ấ ế ở ạ ể 3.3.1 M i liên quan gi a các lncRNA v i xét nghi m ch n ố ữ ớ ệ ẩ đoán DENV

B ng 3.11 N ng đ các lncRNA nhóm ng ả ồ ộ ở ườ ệ i b nh d ươ ng

tính và âm tính v i kháng th DENV-IgG ớ ể

LncRNA (10 5 copies/ml)

Anti DENV -IgG p*

Dương tính (n=228)

Âm tính (n=128) EPB41L4A-

AS1 (n=356)

Trung vị (TPV)

4,10 (1,41-9,30)

1,11 (0,40-3,51) p<0,01IFI6lnc1

(n=356)

Trung vị (TPV)

1,82 (0,68-5,65)

0,65 (0,22-1,85) p<0,01IFI6lnc2

(n=356)

Trung vị (TPV)

4,01 (1,34-8,06)

0,67 (0,27-3,21) p<0,01HID1-AS1

(n=356)

Trung vị (TPV)

1,30 (0,48-2,83)

0,35 (0,15-1,09) p<0,01Lnc-ILK-4

(n=356)

Trung vị (TPV)

2,32 (0,77-4,42)

0,43 (0,15-1,82) p<0,01

0,17 (0,07-0,4)

0,05 (0,02-0,16) p<0,01

* Ki m đ nh Mann Whitney, TPV: T phân v ể ị ứ ị

K t qu B ng 3.11 cho th y trung v n ng đ các lncRNAế ả ở ả ấ ị ồ ộEPB41L4A-AS1, IFI6lnc1, IFI6lnc2, HID1-AS1, Lnc-ILK-4, OAS1lnc102 ngở ườ ệi b nh SXHD có xét nghi m DENV-IgG dệ ương tính

đ u cao h n trung v n ng đ các lncRNA trên nhóm có xétề ơ ị ồ ộ ởnghi m DENV IgG âm tính (s khác bi t có ý nghĩa th ng kê v iệ ự ệ ố ớp<0,01)

3.3.2 Liên quan gi a n ng đ các lncRNA v i m t s tri u ữ ồ ộ ớ ộ ố ệ

ch ng lâm sàng và huy t h c ng ứ ế ọ ở ườ i b nh s t xu t huy t ệ ố ấ ế Dengue

B ng 3.14 N ng đ các lncRNA nhóm ng ả ồ ộ ở ườ ệ i b nh theo m c đ ti u c u trong giai đo n nguy hi m ứ ộ ể ầ ạ ể

LncRNA (10 5 copies/ml)

Mức độ tiểu cầu p**

<50G/L (n=186)

50≤TC≤100G/

L (n=57)

>100G/L (n=134) EPB41L4A

3,13 (0,90-7,88)

0,67 (0,31-1,42)

p<0,0 1

1,48 (0,40-4,01)

0,40 (0,16-0,84)

p<0,0 1 IFI6lnc2

(n=377)

Trung vị

(TPV)

5,24 (2,87-8,72)

2,99 (0,54-6,61)

0,46 (0,19-0,98)

p<0,0 1 HID1-AS1

(n=377)

Trung vị

(TPV)

1,69 (1,0-3,75)

0,96 (0,24-2,1)

0,24 (0,08-0,44)

p<0,0 1 Lnc-ILK-4

(n=377)

Trung vị

(TPV)

2,99 (1,76-5,42)

1,72 (0,32-3,34)

0,30 (0,12-0,64)

p<0,0 1

0,12 (0,03-0,27)

0,04 (0,02-0,10)

p<0,0 1

** Kruskal-wallis, TPV: T phân v , TC: Ti u c u ứ ị ể ầ

K t qu B ng 3.14 cho th y ngế ả ở ả ấ ở ườ ệi b nh SXHD m c ứ

đ ti u c u càng gi m thì trung v n ng đ các lncRNA càng tăng.ộ ể ầ ả ị ồ ộ

B ng 3.17 N ng đ các lncRNA nhóm ng ả ồ ộ ở ườ ệ i b nh có và

không có xu t huy t niêm m c ấ ế ạ

LncRNA (10 5 copies/ml) Xuất huyết niêm mạc p*

Có (n=148) (n=229)KhôngEPB41L4A -AS1

(n=377)

Trung vị (TPV)

5,58 (2,73-10,87)

1,26 (0,50-3,84) p<0,01IFI6lnc1 (n=377) Trung vị

(TPV)

2,20 (1,02-8,03)

0,70 (0,28-2,11) p<0,01IFI6lnc2 (n=377) Trung vị

(TPV)

4,67 (2,65-8,17)

0,99 (0,32-3,97) p<0,01HID1-AS1

(n=377)

Trung vị (TPV)

1,58 (0,92-3,01)

0,42 (0,16-1,36) p<0,01Lnc-ILK-4

(n=377)

Trung vị (TPV)

2,74 (1,73-4,93)

0,56 (0,19-2,24) p<0,01

OAS1-lnc102(n=362)

Số mẫu biểu hiện (n)

p<0,01 Trung vị

(TPV)

0,21 (0,09-0,46)

0,07 (0,03-0,19)

* Ki m đ nh Mann Whitney, TPV: T phân v ể ị ứ ị

K t qu B ng 3.17 cho th y ngế ả ở ả ấ ở ườ ệi b nh SXHD có tri uệ

ch ng xu t huy t thì trung v n ng đ các lncRNA tăng cao h n soứ ấ ế ị ồ ộ ơ

v i nhóm NB không có tri u ch ng xu t huy t S khác bi t gi a 2ớ ệ ứ ấ ế ự ệ ữnhóm có ý nghĩa th ng kê v i p<0,01ố ớ

B ng 3.19 N ng đ các lncRNA nhóm ng ả ồ ộ ở ườ ệ i b nh theo

m c đ enzym ALT ứ ộ

LncRNA (10 5 copies/ml)

Mức độ enzym ALT p**

<80U/L (n=233)

80≤ALT≤400U/

L (n=99)

>400U/L (n=42) EPB41L4A-

AS1 (n=374)

Trung vị

(TPV)

1,42 (0,56-4,4)

3,46 (1,41-7,04)

14,8 (7,79-27,44) p<0,01IFI6lnc1

(n=374)

Trung vị

(TPV)

0,77 (0,30-1,93)

1,66 (0,84-4,57)

12,0 (4,64-21,77) p<0,01IFI6lnc2

(n=374)

Trung vị

(TPV)

1,21 (0,37-4,04)

3,89 (1,32-7,29)

8,93 (5,93-18,84) p<0,01HID1-AS1

(n=374)

Trung vị

(TPV)

0,44 (0,17-1,30)

1,32 (0,52-2,74)

3,10 (1,53-7,59) p<0,01 Lnc-ILK-4

(n=374)

Trung vị

(TPV)

0,66 (0,24-2,45)

2,08 (0,94-3,53)

6,21 (3,14-11,14) p<0,01

0,16 (0,08- 0,34)

0,50 (0,26- 0,80) p<0,01

** Kruskal-wallis, TPV: T phân v ứ ị

K t qu B ng 3.19 cho th y ngế ả ở ả ấ ở ườ ệi b nh SXHD m c đứ ộALT càng tăng thì trung v n ng đ các lncRNA càng tăng (s khácị ồ ộ ự

bi t gi a các nhóm có ý nghĩa th ng kê v i p<0,01).ệ ữ ố ớ

3.3.4 Giá tr ch n đoán, tiên l ị ẩ ượ ng c a các lncRNA trong ủ

b nh s t xu t huy t Dengue giai đo n nguy hi m ệ ố ấ ế ở ạ ể

B ng 3.21 Giá tr phân bi t 2 nhóm SXHD không n ng và ả ị ệ ặ

DN c a các lncRNA ủ

Độ nhạy (%)

Độ đặc hiệu (%)

Cut off (10 5 copies/ml)

Ngườ ệi b nh SXHD được chia thành 2 nhóm: nhóm 1 là SXHD không n ng (DKN) bao g m các ngặ ồ ườ ệi b nh được ch n ẩđoán SXHD và DCB; nhóm 2 g m các ngồ ườ ệi b nh được ch n ẩđoán SXHD n ng đ đánh giá kh năng phân bi t gi a ngặ ể ả ệ ữ ười

b nh SXHD n ng và không n ng c a các lncRNA K t qu b ng ệ ặ ặ ủ ế ả ả3.21 cho th y có th s d ng n ng đ các lncRNA trên đ phân ấ ể ử ụ ồ ộ ể

*Phân tích h i quy logistic đ n bi n ồ ơ ế

Phân tích h i quy logistic đ n bi n ngồ ơ ế ở ườ ệi b nh SXHDcho th y ngấ ười b nh có tu i≥50, xu t hi n tri u ch ng xu tệ ổ ấ ệ ệ ứ ấhuy t dế ưới da, Xu t huy t niêm m c, tràn d ch, gan to, ti n s cóấ ế ạ ị ề ử

b nh n n, xét nghi m BC ≥10G/L; HST≤120g/L; HC≤4,2 T/L;ệ ề ệTC≤50 G/L, HCT ≤0,4L/L; glucose≥10; creatinin ≥115µmol/L;enzym gan AST và ALT≥200U/L; IgM, IgG dương tính vàEPB41L4A-AS1≥5,71; IFI6lnc1≥3,45; IFI6lnc2≥5,11; HID1-AS1≥1,49; Lnc-ILK-4≥1,9; OAS1-lnc102≥0,19 (105copies/ml) làcác y u t liên quan t i m c đ n ng ngế ố ớ ứ ộ ặ ở ườ ệi b nh SXHD

B ng 3.23 Phân tích đa bi n, các y u t nguy c ả ế ế ố ơ

** Phân tích h i quy logistic đa bi n thoái tri n v i tiêu chu n so ồ ế ể ớ ẩ sánh d a vào Likelihood ratio ự

Khi đ a các y u t nguy c ti n tri n SXHD n ng vào phânư ế ố ơ ế ể ặtích h i quy logistic đa bi n cho th y ngồ ế ấ ườ ệi b nh có xu t huy tấ ếniêm m c, BC≥10G/L, Glucose≥10 creatinin≥115µmol/L, AST vàạALT≥200 U/L, Lnc-ILK-4≥1,9 và IFI6lnc1≥3,45 (105copies/ml) làcác y u t có liên quan v i ti n tri n SXHD n ng (v i p < 0,05).ế ố ớ ế ể ặ ớ