Tổng hợp một số dẫn xuất hydrazone của protocetraric acid và thử nghiệm hoạt tính Ức chế enzyme alpha glucosidase của các hợp chất này

14 Sơ đồ 6: Phản ứng tổng hợp dẫn xuất Mocetraric acid 15 Se 7: Ping ng nav pony Thằng và cộng 16 se 3 Phin ina rating s Phản ứng tạo thành một số hydraZone bởi Pham và cộng sự.. cdeps

TONG HOP MOT SO DAN XUAT HYDRAZONE

CỦA PROTOCETRARIC ACID VA THU’ NGHIỆM

HOAT TINH UC CHE ENZYME ALPHA-

GLUCOSIDASE CUA CAC HOP CHAT NAY

Chuyên ngành: Hóa Hữu cơ

NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC:

TS PHAM ĐỨC DŨNG

Thành phố Hồ Chí Minh - 2024

TONG HOP MOT SO DAN XUAT HYDRAZONE

CUA PROTOCETRARIC ACID VA THU NGHIEM

HOẠT TÍNH ỨC CHE ENZYME ALPHA—

GLUCOSIDASE CUA CÁC HỢP CHAT NAY Chuyên ngành: Hóa hữu cơ

NGƯỜI HƯỚNG ĐÀN KHOA HỌC:

LOI CAM ON

Đầu liên, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy Phạm Đức Dũng, giáng viên đã hướng dẫn đỀ ti khoá luận tốt nghiệp của em Thầy luôn tận tỉnh giúp đỡ, chỉ bảo em từ” những ngày đẳu đến với việc nghiên cứu của bộ môn Hóa hữu cơ, Em tắt biết ơn những lời động viên chỉa sẽ từ thầy, đỏ công là những lời động viên quý giá nhất mà em nhận được

trong suốt quá trình là sinh viên

các thẫy, cô trong khoa Hỏa học trường

Em cũng xin gửi lời cảm ơn chân thành đế:

"Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh đã truyền đạt những máng kiến thức lý thuyết,

kỹ năng thực nghiệm trong suốt những năm qua vả tạo cho em những điều kiện thuận lợi

để giúp em hoàn thành tố bãi khóa luận ốt nghiệp này

Em cũng xin gửi lời tì ân đến các anh, chị và các bạn trong phòng thí nghiệm Hóa Hữu

sơ đã giúp đỡ, hướng dẫn, chia sẻ những kính nghiệm học tập, nghiên cửu vả tạo động lực

để em hoàn thành bài khóa lun tốt nghiệp một cách thành công nhất

“Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình đã luôn bên cạnh, luôn ủng hộ và luôn

là chỗ đựa vũng chắc để em hoàn thành ốt quá trình học tập và thự hiện đ tải của mình

TP Hỗ Chí Minh, tháng 05 năm 2024

Trần Hữu Phước

CHONG 1 TONG QUAN, thn kphn hứa hye cha ci iil day Uo ia y Usenca 2 2 3

a et thee vệ depsidone va hoạt tính sinh học của đepsidone ari ai 8 °

“TL Teng quan prete ge của protetrai acid vi

18.3 Mott phan tg tong hyp din suit cba prvoetrare acd

Một số phản ứng tạo ứng tạo than hydrazone NGHIEM dẫn xuất với — irazine

CHƯƠNG trKẾT QUÁ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Định đanh sản phẩm

Khảo sắt cầu, trúc hoá học của hợp chí sim

Givoxe 4 KET LUAN VA DE XUAT

TÂ EU THÂN KHẢO,

"eons Mui ond

$a Mona obey Conentron

Mass

Minimum inhibitory concentrations

Proton Nuclear Magnetic Resonance

ars per milion

Thin Layer Chromatography

"Nông độ ác chế sự phát tiễn của 509,

số tế bào thử nghiệm, Thổ cộng hướng từ hạt nhân proton Phin gu Sắc ký lớp mong Tia eye tim Mũi đơn

Sự đồ Phản ứng tổng hợp dẫn xuất ester của protocetrarie aeïd 14

Sơ đồ 6: Phản ứng tổng hợp dẫn xuất Mocetraric acid 15

Se 7: Ping ng nav pony Thằng và cộng 16

se 3 Phin ina rating

s Phản ứng tạo thành một số hydraZone bởi Pham và cộng sự Quy trình thực hiện phản ứng giữa prolocearie acid và i

Sơ đồ 11: Quy trình thực hiện phản ứng git protocetrarie acid va 4-bromophenylhydrazine hydrochloride đồ 12: Sơ đồ tổng hợp Ib 2L 35 lợp,

“DANH MỤC HÌNH ẢNH

Mình 21 Sự đủ phân lập hợp chất từ cao OAC Hình 3.1: Cu trúc của sản hôm lạ

Hình 3.2: Cầu trúc của sản phar

Hình 3.3: Cau trúc hod hge, va m« se ong quan NC cua Ta Hinh 4.1; Cau tric hoá học của các hợp chất đã cô lập được

Phụ lục 1A Phd HNMR (DMSO-d, 500 MH) cia 1

My he IB: Pho "CNM DMSO 128 M2) at

Mh le 24 Pho HICESTMS Phụ lục 2B, (Acetone 300 Miz) của Tà Pre 20 Ps "CNM (Acetone 125 MIL) in tb Phu ge 2D Ph HMBC Acciona Phy Iue 3A Pho HR-ESI-MS cia hạ lục Bs Pho ESI (Acted 30 Si) ct

ue 3C Ph C-NMR (Aceonedy 125 MHz Ib Phụ lục 3D Pho HSQC (Acetone-d) cia

hợp chất này được phân loại thành các khung sườn depsidone, depside, Trong đó các hợp

chất thuậc khung sườn đepsidone được tìm thấy trong nhiễu loài diay thude chi Usnea

còn hạn chế ở Việt Nam

cdepsidone có nhigu trong dia y Usenea bailey,

Vì vậy, với mye dich nghiên cứu phân lập một số hợp chất từ địa y Usenea baileyi tit

đồ điều chế một số dẫn xuất của những hợp chất phân lập, nghiên cứu khả năng ức chế

enzyme alpha-glicosidase cha ning hợp chất này Đ tải “Tổng hop một số dẫn xuất

hydraZone của protocetraric aicd và thử ngiệm hoạt tính ức chế enzyme alpha-glucosidase

của các hợp chất này” được nghiên cứu thực hiện

1.1 Giới thiệu về địa y Usenea

Địa y là một dạng sinh vật đặc biết có được do sự cộng sinh giữa nắm và táo/vi khuẩn

lam, Địa y thường duge chia thinh ba dạng chính: dạng khảm (erustos) dang pt (folose) và dang gi điueticos© [3]: Chỉ Uonca là một rong những chỉ địay đạn fntieose

phổ biển nhất trê thể giới, với hơn 360 loài đã được báo cáo [4], Usnea li mt chi dia y

trên vỏ cây hoặc cành cây Một số loài địa y thuộc chi Usnea phé biến, gdm ed: Usnea

amblyoclada, Usnea antaretica, Usnea ceratina, Usnea hirta, Usnea intermedia, Usnea baileyi (Hind 1.1)

Usnea antarctica Usnea ceratina

Hinh 1.1: Hình ảnh các loài địa y thuộc chỉ Usnea Địa y Usnea li mot được liệu được sử dụng phổ biến trên thể giới Nhiều nơi trên thé tea như một thành phần của các loại thuốc tháo được điều trị cảm lạnh

giới ding dia y U

{5} Bia y Usnea da duge sir dung trong y học cổ truyền Ấn Độ và Trung Quốc để chữa tị sắc vẫn đề về phi, xuất huyết, bệnh hen suyễn, điều trị phát ban trên da, cằm mầu mũi, HT] Bên cạnh đỏ địa y côn được dùng làm thuốc giảm cân hoặc r giảm cân [4], Hiện nay

như kháng khuẩn, kháng virus, kháng nắm, kháng oxy hóa 4],[]

12 Thành phần hóa học cũa các loà

lay Usmea

Năm 1973, các hợp chất norstiete aeid (1), stiet aeid (2) và caperate acid (3) được

lip (Hinh 1.2) tir dia y Usnea alata & Venezuela bai Keeton vi Keosh [9] Năm 2006 Bảy hợp chất lần lượt là: (+)-usnic acid (4), 2-hydroxy-4-methoxy-3,6- dimethylbenzoie acid (8), ethyl 2,4-dihydroxy~

6-dimethylbenzoate (6), ethyl 2-hydroxy- 4-methoxy-3,6-dimethylbenzoate (7), evernic acid (8), barbatic acid (9) va diffractaie acid (10) duge Rawat va cộng sự đã cô lập từ địa y Usnea emidonteries [10],

"Năm 200f, cùng với 13 hợp chất đã biết được tìm thấy trong dia y Usnea articulate barbatc acid (9), atranorin (11), norstictic acid (1), stitie acid (2), famarprotocetraric acid (12), cons

Gunatilaka đã cô lập được herbarin (21) và I-hydroxydehydroherbarin (22) (Hình 1.3) từ

dia y Usnea cavernosa (12)

Năm 2014, Truong và cộng sự đã cô lập một hợp chất depside mới aciculifein A (23), cảng với 11 hợp chất đã được công bổ trước đó, (+)-usnie acid (4), methyl hematommate

‘6-methylphihalide (28), norsictic acid (1, stot acid (2), atranorin (11), barbatc acid (9)

‘va diffractaic acid (10) tir dia y Usnea acieulifera duge thu hai tai Việt Nam [13]

4 S008 HOLS covet, ad bom

Ngrliele sửá() _ Caper wid)

“ OH re Moo” 0H HoT On

ø (umes ° sectincn 2-Hydroxy-t-methory bo (8 encima) thy 2.4-tihyalrony we 0

teen beet) mo =— we Me tie) COOH e i

ve CHO OHd OOF

Methyl forelinae 28) Fay oelinte (26

(Cf trie mot sé chất phân lập từ địa y Usnew (tigp theo)

Hình 1

1.3 Thinh phần hos hge cia dja y Usnea baileyi

ia y Usnea baileyi thuộc chỉ Uwnea là một trong những loài phố biển nhất ở vùng rừng thưa Việt Nam [14] Tuy nhiên số lượng công trình nghiên cứu về loại địa y này ở

trung chủ yếu ở lĩnh vực y sinh cụ thé, dịch chiết từ dia y Usnea baileyi durge ching minh,

6 hoat tính kháng khuẩn [15], có khả năng kháng oxy hóa [16], khả năng chống lại virus

gây sốt xuất huyết [1],

Năm 1973, Yang và cộng sự cô lập được eumiuin A, (29), eumitrin A> (30) vi eumitrin

B (31) tir dja y Usnea baileyi thủ thập ở Yuriagehama [17] Năm 2010, Dín và Elix đã tìm

ra được (+) usnic acid (4), salazinic acid (32), norstictic acid (1) va atranorin (11) tir dia y

Usnea baileyi Auge thủ thập tại Malaysia [IS], Năm 2018, Nguyen và cộng sự tìm ra hai

hợp chất mới tir dia y Usnea baileyi được thu hái ở Việt Nam [14] lần lượt là: một đimeric

xanthone mới bailexanthone (33) vả một depsidone mới bailesidone (34)

Năm 2020, Nguyên và cộng sự đã tìm ra duge ba hep chit xanthone dimer mi bao

gồm cumitrin C (35), eumitrin D (36) và eumitrin E (37) cô lập từ cao acetone của địa y

Usnea baileyi ge thu hi tại Việt Nam [19]

Năm 2023, Nguyen và cộng sự đã công bỗ sự hiện diện của ba hợp chất xanthone địmer

mới, cumitrin F (38), cutrimin G (39) và cutrimin H (40), được cô lập từ địa y [/sned baileyi Hợp chất eumitin F có khả năng kháng khuẩn E cofi và 8 suởiis trung bình (ICs 62.5 với mỗi loại vi khuẩn) Hợp chất sumitn G cũng có khả năng chống lại vỉ

h kháng tgímL đ

lh (ICs0 62.5 pg/mL) Hợp chất eumitrin H có hoạt

khuẩn 8 subtilis trung

tyrosinase và alpha-glueosidase cao với giá trị ICạo 4.2 pg/mL [20] Cũng trong năm 2023, Nguyen và cộng sự tiếp tục công bố thêm ba hợp chất xanthone mới, eumitrin I (41), eutimin J (42) và euimin K (43) được cô lập từ địa y Usnea baileyi Cae hop chất có hoạt tính ức chế yếu đối với enzymme lpha-glueosidase và trosinase [21]

người (KB), ung thư vú (BC1), ung thư phổi tế bào nhỏ (NCI-HIB7) và năm dòng tế bảo

ung thư đường mật [25]

Nam 2010, salazinic acid (32) được báo cáo có thể được sử dụng như một chất kháng

‘oxy ha trong diễu trị bệnh Alzheimer [26] Bên cạnh đó, salazinic acid (32) đã được chứng,

là 39.02 và 35.67 pg/mL [27]

Năm 2015, Bellio và cộng sự đã nghiên cứu khả năng kháng khuẩn của a-collatolic acid ($5) một dẫn xuất depsidone được cô lập từ địa y được thu hái tại Chile, kết quá nghiên cứu cho thấy MICua 128 ygimL [28]

Năm 2020, một depsidone mới flavicansone (S6) được cô lập từ địa y Teloschistes flavicans bởi Sanjaya và công sự, nghiền cứu chỉ ra depsidone trên có hoạt ính gây độc tế bảo chống li bio ung thar mu UCD vi git ICs) 58.18 uM [29]

1.5.1, Tổng quan vỀ protocetrarie acid

Protocetraric acid (S7) là hợp chất cô khung sườn đepsidone, có công thức phần từ 'CisHiaOu, có tên khoa hge lb 4-Formyl-3 8-dihydroxy-9-(hydroxymethyl}-1,6-dimethyl-11- oxo LHLibenzo[h.e][1,4]sioxepine-7-carboxylie acid[14]dioxepine-7-carboxylic_ acid,

là chất bột màu trắng đục, tan kém trong methanol, acetone, chloroform vi tan nhigu hom

‘rong dimethyl sulfoxide được tìm thấy tong nhiều loại địa y khác nhau như Usnea bailey Parmelia sphaeraspora, Ramalina sp, Usnea albopunctata (30), 1.5.2 Hoạt tính sinh học của protocetrarie acid và dẫn xuất 'Năm 2004, protocearie acid (S7) được tách chiết tit dia y Ramalina farinacea dng thời thử nghiệm hoại nh sinh học bởi Tay và cộng sự Kết quả cho thấy protocetrarie acid

có khả năng kháng hai loại nắm Candida albicans vi Candida glabraia với giá trị MIC 3.9 g/75 wL [31] Cũng trong năm 2004, Bêzivin và cộng sự đã phân lập được hai dẫn xuất

‘convoluta Sau đó tiễn hành thử nghiệm hoạt tỉnh ức chế các dòng tế bảo ung thư LI210,

3LL, DU145, MCEF7, K-562 và U251 Kết quả cho thấy fumarprotocetraric acid va 9'-O-

methylprotocetraric acid khéng có hoạt tính trên các dòng tế bào ung thư này với giá tị

ICs thu được trên 75 ug/mL lớn hơn rất nhiều so với chất chứng dương Etoposide có giá

Hình 1.8: Cấu trúc của protocetrarie acid (S7) và dẫn xuất

Năm 2008, Rankovié và cộng sự đã phân lập duge protocetrarie acid (87) và fumarprotocetrarc acid (12), tr diay Cladonia furcata, Ochrolechia androgyna, Parmelia

caperata và Parmelia conspresa Và chúng được thử nghiệm hoạt tính sinh học Kết quả

cho thấy fầmarprotocetrrde aeid có hoạttính khẩng khuẩn mạnh với giá trị MIC thấp nhất

được ghí nhận là 0.031 mg/mL, cén protocetraric acid có hoạt tính kháng nắm tốt [33]

Năm 2013, Brandão và cộng sự đã cô lập được protocetruie acid (57) từ địa y

Parmotrema dilatatum, Usnea subcavata Motyka, Usnea sp, Ramalina sp, Cladina confuse,

Dirinaria aspera vis Parmotrema lichexanthonicum và chẳng được tht hoa nh sinh học,

"

người (S1 93.3), Điều này cho thấy protoeetraie acid (S7) có ềm năng cho việc khng u

ác tính [34]

Năm 2015, protoeetnrie acid (S7) được cô lập từ Usnea albopunctata bai Nishanth vi

cộng sự Trong nghiên cứu nảy, protocetraric acid đã thể hiện hoạt tính kháng khuẩn mạnh

nhất đối với Sulnonella typhi va Klebsiella pneumoniae, vi gi tỉ MIC lần lượt là 05 và

là 4 và 2 gímL Đối với hoạt tính khẳng nắm, protocetrare acid a3 thể hiện khả năng

vị MIC 1 qgýmL, tốt hơn so với

kháng nắm tốt nhất đối với Trichophyton rubrum, v6i si

thuốc lâm sàng ampboteriein B, có giá trị MIC 4 ngýmL (30

Nam 2016, Rajan cùng cộng sự đã phần lập được protocetraric acid (87) te Parmotrema praesorediasamn, tiễn hành thử nghiệm khả năng khử gốc tự do DPPH Kết

“quả cho thấy protocetraric có hoạt động khử gốc tự do DPPH dat 63.98% [35]

1.5.3, Một số phản ứng tông hợp dẫn xuất của protoeetraric acid

Nim 1952, J Klosa đã tiến hành phản ứng của dẫn xuất phenylhydaZine và thiosemicarbazone véi protocetraric acid (57) Phan ứng được thực hiện thông qua quá trình phản ứng còn lại cũng được thực hiện với thiosemicarbazide tong 3 giờ với dung môi nitrobenzene (So dd 2) [36]

Sơ đồ 2: Phản ứng điều chế thiosemicarbazone tir protocetrarie acid

Năm 1984, Elix và Lajide đã thực hiện các phản ứng điều chế dẫn xuất của acid

protocetrarie vi potassium cabonate khan và lượng dy methyl iodide tong

dimethylacetamide tago sin phim methyl di-O-methylprotocetrarate (59) Ngoai ra, khi

thực hiện phản ứng giữa protocetrarie acid véi sodium hydrogen carbonate Khan vi bromide benzyl trong dimethylacetamide, thụ được sin phim benzyl protocetrarate (60)

{Sơ đồ 3) [37],

vs SA T yd on men chủ Keo Shes ocr

nơ Xe nể em —— bua oH nd ỳ-oo b

Pract ai)

‘Metiy! d-0-methytprotoceraate ($9) NGHCO,

Nam 1993, Blix và Yu đã thực hiệ

một số depsidone, bao gồm protocetraric acid (57) Prolocetrarie acid trong L2-