Ủ nguyên liệu mùn cưa và cấy giống cấp 3 cấy giống meo lúa cấp 1 sang môi trường mùn cưa .... Cấy giống cấp 3 cấy giống meo lúa cấp 1 sang môi trường mùn cưa .... Các bước tiến hành Bước
Trang 1BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH
KHOA KHOA HỌC SINH HỌC
BÁO CÁO THỰC HÀNH QUY TRÌNH TRỒNG NẤM
Trang 2BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH
KHOA KHOA HỌC SINH HỌC
BÁO CÁO THỰC HÀNH QUY TRÌNH TRỒNG NẤM
Trang 3MỤC LỤC
DANH MỤC HÌNH iii
CHƯƠNG I: MỞ ĐẦU 1
1.1 Mở đầu 1
1.2 Mục tiêu 1
1.3 Nội dung thực hiện 1
CHƯƠNG II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2
2.1 Nấm bào ngư 2
CHƯƠNG III: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 3
3.1 Thời gian và địa điểm 3
3.2 Pha môi trường nuôi cấy 3
3.2.1 Vật liệu, thiết bị 3
3.3 Cấy nấm làm giống cấp 1 3
3.3.1 Vật liệu, thiết bị 3
3.3.2 Các bước tiến hành 4
3.4 Cấy giống cấp 2 (Cấy giống cấp 1 sang meo lúa) 6
3.4.1 Vật liệu, thiết bị 7
3.4.2 Các bước tiến hành 7
3.5 Ủ nguyên liệu mùn cưa và cấy giống cấp 3 (cấy giống meo lúa cấp 1 sang môi trường mùn cưa) 8
3.5.1 Ủ nguyên liệu mùn cưa 8
3.5.1.1 Vật liệu, thiết bị 8
3.5.1.2 Các bước thực hiện 8
3.5.2 Cấy giống cấp 3 (cấy giống meo lúa cấp 1 sang môi trường mùn cưa) 12
3.5.2.1 Vật liệu, dụng cụ 12
3.5.2.2 Các bước tiến hành 12
CHƯƠNG IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 14
4.1 Pha môi trường nuôi cấy 14
4.1.1 Kết quả 14
4.1.2 Thảo luận 14
Trang 44.2.1 Kết quả 14
4.2.2 Thảo luận 15
4.3 Cấy giống cấp 2 (Cấy giống cấp 1 sang meo lúa) 15
4.3.1 Kết quả 15
4.3.2 Thảo luận 16
4.4 Ủ nguyên liệu mùn cưa và cấy giống cấp 3 (cấy giống meo lúa cấp 1 sang môi trường mùn cưa) 17
4.4.1 Ủ nguyên liệu mùn cưa 17
4.4.1.1 Kết quả 17
4.4.2 Cấy giống meo lúa cấp 1 sang môi trường mùn cưa 17
4.4.2.1 Kết quả 17
4.4.2.2 Thảo luận 18
Trang 5DANH MỤC HÌNH
Hình 2.1 Nấm bào ngư trắng 2
Hình 3.1 Cấy giống cấp 1 5
Hình 3.2 Ống môi trường PDA 6
Hình 3.3 Ống sau khi cấy giống cấp 1 6
Hình 3.4 Meo lúa sau khi cấy 8
Hình 3.5 35 kg mùn cưa 9
Hình 3.6 Thêm cám bắp 10
Hình 3.7 Trộn đều và ủ 10
Hình 3.8 Cho cơ chất mùn cưa vào các bao nylon chịu nhiệt 11
Hình 3.9 Dùng nắp nhựa chụp đầu nút và cột bằng dây thung lại 11
Hình 3.10 Cho vào nồi hấp 8 tiếng với 105oC 12
Hình 3.11 Phôi nấm sau khi cấy 13
Hình 4.1 Môi trường PDA 14
Hình 4.2 Kết quả 1 tuần sau khi cấy giống cấp 1 15
Hình 4.3 Kết quả 1 tuần sau khi cấy giống cấp 2 16
Hình 4.4 Meo lúa bị nhiễm do lủng bịch 16
Hình 4.5 2 bịch phôi nấm 17
Hình 4.6 Kết quả 1 tuần sau khi cấy giống cấp 3 18
Trang 6CHƯƠNG I: MỞ ĐẦU 1.1 Mở đầu
Nấm là loại cây trồng rất nhạy cảm với các yếu tố môi trường như: nhiệt độ, độ ẩm, ánh sáng, sâu bệnh,…
1.2 Mục tiêu
Có thêm những kiến thức cơ bản về nấm ăn và nấm dược liệu, nắm được các quy trình tạo ra các sản phẩm sinh học
1.3 Nội dung thực hiện
Pha môi trường nuôi cấy
Cấy giống cấp 1
Cấy giống cấp 2
Cấy giống cấp 3
Trang 7CHƯƠNG II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Nấm bào ngư
Nấm Bào Ngư (Pleurotus Florodanus) là một loài nấm thuộc họ Pleurotaceae rất
đặc trưng trong họ hàng nhà nấm Loài nấm này mang trong mình giá trị dinh dưỡng phong phú, giúp cơ thể bồi dưỡng, lợi hệ tiêu hóa và phòng ngừa nhiều loại bệnh trong cuộc sống
Nấm Bào Ngư có dạng hình phễu lệch, mũ nấm xòe ra, mặt trên mũ có màu trắng hoặc màu xám tượng trưng cho màu của 2 loại nấm này, chóp nấm lõm nhẹ, dưới mũ nấm có các cánh tơ mỏng và thân khá chắc
Nấm Bào Ngư hay mọc thành từng cụm với nhau, ít khi mọc đơn lẻ, nếu có mọc đơn lẻ thì chỉ có thể xảy ra 2 trường hợp, một là do dinh dưỡng không đủ hoặc hai là dinh dưỡng chỉ đủ nuôi 1 nhánh nấm và nhánh này cực to và khỏe
Hình 2.1 Nấm bào ngư trắng
Trang 8CHƯƠNG III: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 3.1 Thời gian và địa điểm
Thời gian thực hiện: Từ ngày 8 tháng 3 năm 2024 đến ngày 18 tháng 3 năm
Vật liệu: Khoai tây, agar, glucose,
Thiết bị: Cân điện tử, bếp, bông vải, ống nghiệm,
Lưu ý: Chọn khoai tây tươi và không có vết đen trên bề mặt Các ống nghiệm chứa môi trường phải được rửa thật sạch
3.2.2 Các bước tiến hành
Bước 1: Chuẩn bị 200 g khoai tây cắt nhỏ, 20 g argar, 20 g glucose
Bước 2: Cho 200 g khoai tây vào nồi và tiến hành đun sôi
Bước 3: Dùng phễu hoặc vải lọc để lọc lấy phần dịch khoai tây
Bước 4: Hòa tan 20 g argar và 20 g glucose vào dịch khoai tây, tiến hành đun đến khi tan hoàn toàn
Bước 5: Đổ môi trường PDA vào 1/3 ống nghiệm, dùng bông y tế làm nút đậy Bước 6: Hấp tiệt trùng các ống nghiệm ở 121oC trong 30 phút, sau khi hấp xong
để ống nghiêng 30o Tiến hành cấy sau 24 giờ
3.3 Cấy nấm làm giống cấp 1
3.3.1 Vật liệu, thiết bị
Trang 9Vật liệu: Ống nghiệm chứa nấm bào ngư trắng, ống nghiệm chứa môi trường PDA,
Thiết bị: Tủ cấy vô trùng, que cấy, đèn cồn,
Bước 3: Khử trùng tay bằng cồn 70oC trước khi cấy
Bước 4: Hơ que cấy đỏ đầu 3 s, để nguội sau đó đưa vào vào ống chứa mẫu nấm
đã được hơ lửa, cắt lấy phần môi trường có tơ nấm một khoảng 0,5 cm x 0,5 cm
Bước 5: Dùng ngón út lấy nút bông của ống môi trường PDA, hơ miệng ống trên đèn cồn
Bước 6: Tiến hành đặt mẫu nấm vừa lấy vào trong ống, hơ miệng ống trước khi đóng nút
Bước 7: Ghi tên, giống cấy, ngày cấy
Trang 10Hình 3.1 Cấy giống cấp 1
Trang 11Hình 3.2 Ống môi trường PDA
Hình 3.3 Ống sau khi cấy giống cấp 1 3.4 Cấy giống cấp 2 (Cấy giống cấp 1 sang meo lúa)
Trang 123.4.1 Vật liệu, thiết bị
Vật liệu: hạt lúa, cổ nhựa, bịch nylon,
Thiết bị: đèn cồn, que cấy,
Bước 3: Bổ sung thêm các chất dinh dưỡng: 5 – 10% cám gạo, 5 – 10% cám bắp Trộn đều cho 100 g vào các bịch nylon, dùng bông làm nút đậy
Bước 4: Hấp tiệt trùng các bịch môi trường ở 121oC trong 21 phút
Bước 5: Dùng que cấy cắt thạch có chứa tơ nấm bào ngư trắng từ ống giống có kích thước 0,5 x 0,5 cm, cắt dọc từ hai bên rìa của thạch sau đó cắt theo chiều ngang để thu được miếng thạch được nguyên vẹn
Bước 6: Đặt miếng thạch đã được cắt từ ống nguồn vào meo lúa đã chuẩn bị Ủ trong 1 tuần để nấm phát triển, hơ miệng ống trước khi đóng nút
Bước 7: Ghi tên, giống cấy, ngày cấy
Trang 13Hình 3.4 Meo lúa sau khi cấy
3.5 Ủ nguyên liệu mùn cưa và cấy giống cấp 3 (cấy giống meo lúa cấp 1 sang môi trường mùn cưa)
3.5.1 Ủ nguyên liệu mùn cưa
3.5.1.1 Vật liệu, thiết bị
Vật liệu: mùn cưa, cám bắp, CaCO3, MgSO4, nút cổ nhựa, bao nylon,
Thiết bị: nồi hấp, cân,
Bước 4: Cho cơ chất mùn cưa vào các bao nylon chịu nhiệt
Trang 14Bước 5: Dùng tay vỗ đều lên thành bịch để cho khối cơ chất nén chặt xuống Bước 6: Dùng nắp nhựa chụp đầu nút và cột bằng dây thun lại
Bước 7: Chuyển các bịch mùn cưa vào nồi hấp thanh trùng (105oC trong 8 tiếng) Bước 8: Sau khi hấp tiến hành đưa các bịch mùn cưa vào phòng cấy
Hình 3.5 35 kg mùn cưa
Trang 15Hình 3.6 Thêm cám bắp
Hình 3.7 Trộn đều và ủ
Trang 16Hình 3.8 Cho cơ chất mùn cưa vào các bao nylon chịu nhiệt
Trang 17Hình 3.10 Cho vào nồi hấp 8 tiếng với 105oC
3.5.2 Cấy giống cấp 3 (cấy giống meo lúa cấp 1 sang môi trường mùn cưa)
3.5.2.1 Vật liệu, dụng cụ
Vật liệu: meo hạt, môi trường mùn cưa
Dụng cụ; đèn cồn, muỗng lấy meo, cổ nhựa,
Trang 18Hình 3.11 Phôi nấm sau khi cấy
Trang 19CHƯƠNG IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Pha môi trường nuôi cấy
4.2 Cấy nấm làm giống cấp 1
4.2.1 Kết quả
Sau 1 tuần cấy, 2 ống giống cấp 1 đã phát triển trên môi trường PDA
Trang 20Hình 4.2 Kết quả 1 tuần sau khi cấy giống cấp 1
4.2.2 Thảo luận
Cả 2 ống nghiệm đều xuất hiện nấm bào như trắng Tuy nhiên, xuất hiện tạp nhiễm ở cả 2 ống, nhiễm mốc xanh và vi sinh vật khác Chứng tỏ, thao tác chưa chuẩn, có thể trong quá trình cấy vệ sinh chưa sạch que cấy, không hơ kĩ đầu ống nghiệm,…
4.3 Cấy giống cấp 2 (Cấy giống cấp 1 sang meo lúa)
4.3.1 Kết quả
Sau 1 tuần, không xuất hiện tơ nấm
Trang 21Hình 4.3 Kết quả 1 tuần sau khi cấy giống cấp 2
Trang 224.4 Ủ nguyên liệu mùn cưa và cấy giống cấp 3 (cấy giống meo lúa cấp 1 sang môi trường mùn cưa)
4.4.1 Ủ nguyên liệu mùn cưa
Trang 23Hình 4.6 Kết quả 1 tuần sau khi cấy giống cấp 3
4.4.2.2 Thảo luận
Các tơ nấm đã bắt đầu phát triển nhưng vẫn chưa nhiều
Phôi không có dấu hiệu nhiễm do quá trình thao tác chuẩn, phòng cấy và tủ cấy
đảm bảo quy định phòng thí nghiệm