Nghiên cứu sẽ là nền tảng pháttriển các chế phẩm từ Tam thất chế.Đối tượng và phương pháp nghiên cứuĐối tượng: Tam thất chế Processed Panax notoginseng được cung cấp bởi đề tàicủa nhóm n
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Đối tượng nghiên cứu
Tam thất chế (Processed Radix et Rhizoma Panax notoginseng) (10 kg khô) được cung cấp bởi TS Lê Thị Hồng Vân, là kết quả của đề tài “Nghiên cứu bào chế dược liệu Tam thất chế”, Luận văn Thạc sĩ Dược học (Dương Diễm Mai, 2022) 67 Nguyên liệu đạt tiêu chuẩn cơ sở (Phụ lục 1) về các chỉ tiêu: Độ ẩm, độ tan, độ tro, định tính và định lượng thành phần saponin (G-Rg1, G-Rd, G-Rb1, N-R1 và G-Rg3) 66
2.2 Dung môi, hóa chất và thiết bị nghiên cứu
Dung môi và hóa chất được thực hiện trong nghiên cứu được sử dụng trong nghiên cứu được thể hiện qua Bảng 2.1
Bảng 2.1 Dung môi, hóa chất được sử dụng nghiên cứu.
Dung môi/ hóa chất Độ tinh khiết Xuất xứ
Nước cất hai lần Phân tích
Dung môi khác: Nước cất 1 lần, nước RO, và ethanol tuyệt đối
2.2.2 Trang thiết bị nghiên cứu
Trang thiết bị được sử dụng trong cứu đề tài được thể hiện qua Bảng 2.2
Bảng 2.2 Thiết bị, dụng cụ được sử dụng trong nghiên cứu
STT Thiết bị Thông số kỹ thuật/Nhà cung cấp Xuất xứ
1 Tủ sấy UML-500 UML-500 (Đức) Đức
2 Tủ sấy Memmert Memmert UN750 Đức
3 Máy ly tâm Hettich Hettich Đức
4 Máy sắc ký lỏng siêu hiệu năng UPLC/PDA Waters Mỹ
5 Cân phân tích 4 số lẻ CP-2250 Sartorius độ nhạy 0,01 mg Đức
6 Cân phân tích 5 số lẻ CP-2250 Sartorius độ nhạy 0,01 mg Đức
7 Máy cô quay Büchi 1 lít - 210S Nhật
8 Hệ thống chiết hồi lưu 3 vỏ, có áp suất, làm nóng bằng nước Hàn Quốc
9 Thiệt bị đo độ Brix Atago (45 – 93%) Nhật Bản
Dụng cụ khỏc: micropipet, pipet 5, 10, 25 ml; đầu tip, màng lọc milipore 0,22 àm; găng tay.
Nơi thực hiện: Khoa Dược – Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh
Các chất tinh khiết ginsenosid do nhóm nghiên cứu của TS Lê Thị Hồng Vân cung cấp với độ tinh khiết được thể hiện trong Bảng 2.3
Bảng 2.3 Chất chuẩn được sử dụng trong nghiên cứu
STT Tên chất chuẩn Độ tinh khiết (%)
2.3.1 Kiểm tra nguyên liệu Tam thất chế
Nguyên liệu đầu vào được kiểm tra các chỉ tiêu: Cảm quan, vi học, độ ẩm, độ tro, hàm lượng chất chiết được, định tính, định lượng theo TCCS (Phụ lục 1).
Dược liệu đạt TCCS sẽ được chuẩn bị thành 2 phần:
Phần 1 Nguyên liệu để tối ưu hóa quy trình chiết xuất cao đặc
Dược liệu được xay và rõy để lấy kớch thước < 355 àm.
Phần 2 Dược liệu sử dụng cho quy trình chiết xuất cao đặc
Dược liệu được xay thô để thu lấy kích thước < 1 cm.
2.3.2 Thiết kế mô hình tối ưu hóa quy trình chiết xuất cao đặc từ Tam thất chế 2.3.2.1 Các điều kiện khảo sát nghiệm thức
- Loại dung môi: nước, ethanol 45%, và ethanol 80%
- Tỷ lệ dung môi / dược liệu: 15:1, 10:1, và 8:1(tt/kl)
- Nhiệt độ của quá trình chiết: Tương ứng nhiệt độ sôi của dung môi.
- Thời gian chiết: 1 giờ, 2 giờ và 3 giờ
- Phương pháp chiết: Chiết đun hồi lưu.
- Số lần chiết: 1 lần, 2 lần và 3 lần.
Số nghiệm thức khảo sát được thực hiện với thiết kế thủ công là 3 x 3 x 3 x 3 = 81 nghiệm thức.
3 loại dung môi × 3 tỷ lệ dung môi × 3 thời gian × 3 lần chiết = 81 công thức.
Bảng 2.4 Mô hình thực nghiệm khảo sát chiết xuất cao Tam thất chế
Chú thích: A: loại dung môi, B: tỷ lệ dung môi/dược liệu, C: thời gian chiết (giờ), D: số lần chiết (lần), W: nước, ET45 là ethanol 45%, ET80: ethanol 80%
- Cân chính xác khoảng 5 g bột dược liệu Tam thất chế (qua rây số 355) vào các erlen
100 ml, thêm dung môi cồn 80% hoặc cồn 45% hoặc nước (ứng với tỉ lệ dược liệu: dung môi 1:8, 1:10, 1:15), vặn chặt nắp, cân Mỗi thí nghiệm lặp lại 3 lần.
- Tiến hành chiết đun hồi lưu ở nhiệt độ sôi tương ứng với từng lọại dung môi chiết xuất trong 1, 2 và 3 giờ Để nguội, cân lại và bổ sung bằng dung môi chiết tương ứng để được khối lượng ban đầu.
- Lọc lấy dịch chiết lần 1, rút 10 ml dịch chiết cô dịch chiết thành cắn để xác định khối lượng Dịch chiết được lọc qua màng lọc 0,22 àm để phõn tớch định lượng ginsenosid bằng HPLC.
- Bã dược liệu được rửa qua dung môi chiết, tiếp tục bổ sung dung môi với tỉ lệ dược liệu : dung môi tương tứng (1:8; 1:10; 1:15) Chiết lần 2 với quy trình như lần 1.
- Lọc lấy dịch chiết lần 2, rút 10 ml dịch chiết cô dịch chiết thành cắn để xác định khối lượng Rỳt1 ml dịch chiết cũn lại và lọc qua màng lọc 0,22 àm để phõn tớch định lượng ginsenosid bằng HPLC.
Bã dược liệu sau khi rửa qua dung môi chiết sẽ tiếp tục được bổ sung thêm dung môi với tỷ lệ dược liệu : dung môi tương ứng là 1:8, 1:10 và 1:15 Sau đó, tiến hành chiết lần 3 với quy trình tương tự như lần chiết đầu tiên.
Lọc dịch chiết lần 3, lấy 10 ml cô dịch chiết thành cặn để xác định khối lượng Dịch chiết được lọc qua màng lọc 0,22 µm để phân tích định lượng ginsenosid bằng HPLC.
Khối lượng cao và hiệu suất chiết cao được tính theo công thức sau:
Công thức tính khối lượng cao chiết/5g bột dược liệu
Trong đó: m cao : khối lượng cao thực tế (g) m cắn : khối lượng cắn cân được (g) V: thể tích dung môi chiết (ml)
Công thức tính hiệu suất chiết tính theo khối lượng cao/5g bột dược liệu:
H: hiệu suất chiết (%) m cao : khối lượng cao thực tế (g) h: độ ẩm bột dược liệu (%).
Phân tích định lượng các thành phần ginsenosid chính bằng HPLC/PDA (Dựa trên quy trình định lượng được xây dựng từ đề tài “Nghiên cứu bào chế dược liệu Tam thất chế”, Luận văn Thạc sĩ Dược học (Dương Diễm Mai, 2022) Quy trình định lượng được thực hiện như sau:
Chuẩn bị các dung dịch:
- Dung dịch thử: Hỳt chớnh xỏc 200 àL dịch chiết hũa với 800 àL methanol 100%, siờu õm trong 30 phỳt và lọc qua màng lọc PTFE 0,45 àm trước khi tiờm vào HPLC.
- Dung dịch chuẩn: Hòa tan các chất chuẩn ginsenosid-Rg1, ginsenosid-Rb1, ginsenosid-Rd, 20(R)-ginsenosid-Rh1, 20(S)-ginsenosid-Rg3 trong methanol để được dung dịch chuẩn có nồng độ mỗi chuẩn chính xác khoảng 0,1 mg/ml.
+ Hệ thống sắc ký UPLC/PDA (Waters).
+ Cột HPLC C18 Phenomenex (150 mm ì 4,6 mm; 3 àm).
+ Detector PDA tại bước sóng 203 nm.
+ Tốc độ dòng: 1 ml/phút.
+ Pha động: Acetonitril- nước Tiến hành sắc ký theo chương trình dung môi như sau:
Căn cứ vào diện tích pic của dung dịch thử, dung dịch chuẩn và hàm lượng của các chất chuẩn ginsenosid-Rg1, ginsenosid-Rb1, ginsenosid-Rd, 20(R)- ginsenosid-Rh1, 20(S)-ginsenosid-Rg3, tính hàm lượng ginsenosid thu được/5g dược liệu:
Trong đó: X: Hàm lượng ginsenosid thu được (mg)
Sc: Diện tớch đỉnh thu được của chất chuẩn (àV x s) St: Diện tớch đỉnh thu được của mẫu thử (àV x s)
C c : Nồng độ lý thuyết của mẫu chuẩn (mg/ml) k: độ pha loãng của mẫu thử (ml) p: độ tinh khiết của chất đối chiếu (%)
2.3.2.3 Sàng lọc các yếu tố quy trình chiết cao đặc từ Tam thất chế
Thành phần chính có trong Tam thất chế là saponin (ginsenosid) Nhóm hoạt chất saponin tương đối bền ở nhiệt độ cao, do vậy phương pháp chiết xuất được đề xuất là chiết nóng bằng phương pháp đun hồi lưu tại nhiệt độ sôi của dung môi Ảnh hưởng của số lần chiết Ảnh hưởng của số lần chiết (1 lần, 2 lần và 3 lần) trên lượng chất chiết được và hàm lượng tổng các ginsenosid chính gồm (G-Rg1, G-Rd, G-Rb1, G-Rh1 và G- Rg3) được thực hiện trên các mẫu dược liệu Tam thất chế bằng phương pháp chiết xuất đun hồi lưu
Cơ sở để xác định số lần chiết phù hợp dựa vào hiệu suất chiết cao (tính trên khối lượng cao khô kiệt) và hàm lượng tổng các ginsenosid chính gồm (G-Rg1, G-
Rd, G-Rb1, G-Rh1 và G-Rg3) chiết được (tính bằng mg, n = 3) khi tiến hành chiết 1 lần, 2 lần so với tổng 3 lần chiết Ảnh hưởng của loại dung môi dùng trong chiết xuất
Phương pháp nghiên cứu
2.3.1 Kiểm tra nguyên liệu Tam thất chế
Nguyên liệu đầu vào được kiểm tra các chỉ tiêu: Cảm quan, vi học, độ ẩm, độ tro, hàm lượng chất chiết được, định tính, định lượng theo TCCS (Phụ lục 1).
Dược liệu đạt TCCS sẽ được chuẩn bị thành 2 phần:
Phần 1 Nguyên liệu để tối ưu hóa quy trình chiết xuất cao đặc
Dược liệu được xay và rõy để lấy kớch thước < 355 àm.
Phần 2 Dược liệu sử dụng cho quy trình chiết xuất cao đặc
Dược liệu được xay thô để thu lấy kích thước < 1 cm.
2.3.2 Thiết kế mô hình tối ưu hóa quy trình chiết xuất cao đặc từ Tam thất chế 2.3.2.1 Các điều kiện khảo sát nghiệm thức
- Loại dung môi: nước, ethanol 45%, và ethanol 80%
- Tỷ lệ dung môi / dược liệu: 15:1, 10:1, và 8:1(tt/kl)
- Nhiệt độ của quá trình chiết: Tương ứng nhiệt độ sôi của dung môi.
- Thời gian chiết: 1 giờ, 2 giờ và 3 giờ
- Phương pháp chiết: Chiết đun hồi lưu.
- Số lần chiết: 1 lần, 2 lần và 3 lần.
Các nghiệm thức khảo sát dựa trên thay đổi của loại dung môi (3 loại dung môi), tỷ lệ dung môi (3 tỷ lệ khác nhau), thời gian chiết (khảo sát trên 3 thời gian chiết khác nhau) và số lần chiết (khảo sát số lần chiết là 3) Vậy số nghiệm thức khảo sát được thực hiện với thiết kế thủ công:
3 loại dung môi × 3 tỷ lệ dung môi × 3 thời gian × 3 lần chiết = 81 công thức.
Bảng 2.4 Mô hình thực nghiệm khảo sát chiết xuất cao Tam thất chế
Chú thích: A: loại dung môi, B: tỷ lệ dung môi/dược liệu, C: thời gian chiết (giờ), D: số lần chiết (lần), W: nước, ET45 là ethanol 45%, ET80: ethanol 80%
- Cân chính xác khoảng 5 g bột dược liệu Tam thất chế (qua rây số 355) vào các erlen
100 ml, thêm dung môi cồn 80% hoặc cồn 45% hoặc nước (ứng với tỉ lệ dược liệu: dung môi 1:8, 1:10, 1:15), vặn chặt nắp, cân Mỗi thí nghiệm lặp lại 3 lần.
- Tiến hành chiết đun hồi lưu ở nhiệt độ sôi tương ứng với từng lọại dung môi chiết xuất trong 1, 2 và 3 giờ Để nguội, cân lại và bổ sung bằng dung môi chiết tương ứng để được khối lượng ban đầu.
- Lọc dịch chiết lần 1, lấy 10 ml cô thành cặn để xác định khối lượng Dịch chiết được lọc qua màng lọc 0,22 µm rồi đem phân tích định lượng ginsenoside bằng phương pháp HPLC.
Sau khi rửa bã dược liệu qua dung môi chiết, bổ sung thêm dung môi với tỉ lệ tương ứng 1:8, 1:10 hoặc 1:15 Tiếp tục thực hiện quy trình chiết giống như lần đầu để đảm bảo chiết xuất toàn bộ các thành phần hoạt tính trong dược liệu.
- Lọc lấy dịch chiết lần 2, rút 10 ml dịch chiết cô dịch chiết thành cắn để xác định khối lượng Rỳt1 ml dịch chiết cũn lại và lọc qua màng lọc 0,22 àm để phõn tớch định lượng ginsenosid bằng HPLC.
- Bã dược liệu được rửa qua dung môi chiết, tiếp tục bổ sung dung môi với tỉ lệ dược liệu : dung môi tương tứng (1:8; 1:10; 1:15) Chiết lần 3 với quy trình như lần 1.
- Lọc lấy dịch chiết lần 3, rút 10 ml dịch chiết cô dịch chiết thành cắn để xác định khối lượng Dịch chiết được lọc qua màng lọc 0,22 àm để phõn tớch định lượng ginsenosid bằng HPLC.
Khối lượng cao và hiệu suất chiết cao được tính theo công thức sau:
Công thức tính khối lượng cao chiết/5g bột dược liệu
Trong đó: m cao : khối lượng cao thực tế (g) m cắn : khối lượng cắn cân được (g) V: thể tích dung môi chiết (ml)
Công thức tính hiệu suất chiết tính theo khối lượng cao/5g bột dược liệu:
H: hiệu suất chiết (%) m cao : khối lượng cao thực tế (g) h: độ ẩm bột dược liệu (%).
Phân tích định lượng các thành phần ginsenosid chính bằng HPLC/PDA (Dựa trên quy trình định lượng được xây dựng từ đề tài “Nghiên cứu bào chế dược liệu Tam thất chế”, Luận văn Thạc sĩ Dược học (Dương Diễm Mai, 2022) Quy trình định lượng được thực hiện như sau:
Chuẩn bị các dung dịch:
- Dung dịch thử: Hỳt chớnh xỏc 200 àL dịch chiết hũa với 800 àL methanol 100%, siờu õm trong 30 phỳt và lọc qua màng lọc PTFE 0,45 àm trước khi tiờm vào HPLC.
- Dung dịch chuẩn: Hòa tan các chất chuẩn ginsenosid-Rg1, ginsenosid-Rb1, ginsenosid-Rd, 20(R)-ginsenosid-Rh1, 20(S)-ginsenosid-Rg3 trong methanol để được dung dịch chuẩn có nồng độ mỗi chuẩn chính xác khoảng 0,1 mg/ml.
+ Hệ thống sắc ký UPLC/PDA (Waters).
+ Cột HPLC C18 Phenomenex (150 mm ì 4,6 mm; 3 àm).
+ Detector PDA tại bước sóng 203 nm.
+ Tốc độ dòng: 1 ml/phút.
+ Pha động: Acetonitril- nước Tiến hành sắc ký theo chương trình dung môi như sau:
Căn cứ vào diện tích pic của dung dịch thử, dung dịch chuẩn và hàm lượng của các chất chuẩn ginsenosid-Rg1, ginsenosid-Rb1, ginsenosid-Rd, 20(R)- ginsenosid-Rh1, 20(S)-ginsenosid-Rg3, tính hàm lượng ginsenosid thu được/5g dược liệu:
Trong đó: X: Hàm lượng ginsenosid thu được (mg)
Sc: Diện tớch đỉnh thu được của chất chuẩn (àV x s) St: Diện tớch đỉnh thu được của mẫu thử (àV x s)
C c : Nồng độ lý thuyết của mẫu chuẩn (mg/ml) k: độ pha loãng của mẫu thử (ml) p: độ tinh khiết của chất đối chiếu (%)
2.3.2.3 Sàng lọc các yếu tố quy trình chiết cao đặc từ Tam thất chế
Thành phần chính của Tam thất chế là saponin (ginsenosid) Để chiết xuất hoạt chất này, phương pháp đun hồi lưu ở nhiệt độ sôi của dung môi được khuyến nghị do saponin khá bền ở nhiệt độ cao Nghiên cứu gần đây đã đánh giá ảnh hưởng của số lần chiết xuất (1, 2 và 3 lần) đến lượng chất chiết được và hàm lượng tổng của 5 ginsenosid chính (G-Rg1, G-Rd, G-Rb1, G-Rh1 và G-Rg3) trong mẫu dược liệu Tam thất chế bằng phương pháp chiết xuất đun hồi lưu.
Cơ sở để xác định số lần chiết phù hợp dựa vào hiệu suất chiết cao (tính trên khối lượng cao khô kiệt) và hàm lượng tổng các ginsenosid chính gồm (G-Rg1, G-
Rd, G-Rb1, G-Rh1 và G-Rg3) chiết được (tính bằng mg, n = 3) khi tiến hành chiết 1 lần, 2 lần so với tổng 3 lần chiết Ảnh hưởng của loại dung môi dùng trong chiết xuất
- Dung môi được sử dụng trong chiết xuất ở quy mô công nghiệp thường bao gồm nước, cồn hoặc hỗn hợp cồn - nước ở các tỷ lệ khác nhau Trong nghiên cứu này, các dung môi sàng lọc ban đầu gồm nước, ethanol 45%, ethanol 80%
KẾT QUẢ
Nghiên cứu tối ưu hóa quy trình chiết cao đặc Tam thất chế
3.1.1 Kết quả kiểm tra nguyên liệu Tam thất chế
Kết quả kiểm tra nguyên liệu Tam thất chế đầu vào được tóm tắt trong bảng sau:
STT Các chỉ tiêu Mức giới hạn Kết quả
1 Độ ẩm Không quá 10% Đạt
2 Độ tro toàn phần Không quá 6% Đạt
3 Chất chiết được trong dược liệu
4 Định tính SKĐ SKLM của dung dịch thử có các vết có màu sắc và Rf trùng với 20(R)-G-Rh1, 20(S)-G-Rg3, G-Rg1, N-R1, G-Rd và G-Rb1
SKĐ HPLC của dung dịch thử có pic có thời gian lưu ứng với G- Rg1, G-Rb1, 20(R)-G-Rh1, G-
5 Định lượng Dược liệu phải không chứa ít hơn
3,0% (mg/100 mg) ginsenosid- Rg1, ginsenosid-Rb1, 20(R)- ginsenosid-Rh1, ginsenosid-Rd và 20(S)-ginsenosid-Rg3 Đạt (4,52± 0,05%)
6 Giới hạn kim loại nặng Hàm lượng Pb < 5,0 mg/kg
Hàm lượng As < 2,0 mg/kg Hàm lượng Cd < 1,0 mg/kg Hàm lượng Hg < 0,2 mg/kg Đạt
7 Giới hạn nhiễm khuẩn Tổng số vi sinh vật hiếu khí < 10 2
CFU/g Tổng số nấm men nấm mốc < 10 CFU/g
Staphylococcus aureus : không được có Clotridium perfringens < 10 CFU/g Đạt
Nhận xét: So sánh kết quả kiểm nghiệm nguyên liệu Tam thất chế với tiêu chuẩn cơ sở Tam thất chế đã được xây dựng 67 có thể kết luận rằng quy trình chế biến đạt tính ổn định và phù hợp để nâng cấp cỡ lô (Kết quả kiểm nghiệm chi tiết tại Phụ lục 1)
Kết luận: Tam thất chế đạt tiêu chuẩn cơ sở để tiến hành chiết xuất
3.1.2 Kết quả khảo sát yếu tố ảnh hưởng quy trình chiết cao đặc
Đánh giá ảnh hưởng của 04 yếu tố (loại dung môi, tỷ lệ dung môi: dược liệu, thời gian chiết và số lần chiết) đối với quy trình chiết cao Đỗ trọng đã cho kết quả như trong Bảng 3.1 và Bảng 3.2.
Bảng 3.1 Kết quả hiệu suất chiết cao của các công thức khảo sát
Khối lượng trung bình cắn (g) n= 3
Hiệu suất chiết (%) LẦN 1 LẦN 2 LẦN 3 TỔNG 1 LẦN 2 LẦN
Chú thích: A: loại dung môi, B: tỷ lệ dung môi/dược liệu, C: thời gian chiết (giờ), D: số lần chiết(lần), W: nước, ET45: ethanol 45%, ET80: ethanol 80%
Bảng 3.2 Kết quả hiệu suất chiết các ginsenosid của các công thức khảo sát
STT A B C Hàm lượng trung bình các ginsenosid (mg), n=3
LẦN 1 LẦN 2 TỔNG Tổng 2 lần (%)
Chú thích: A: loại dung môi, B: tỷ lệ dung môi/dược liệu, C: thời gian chiết (giờ), D: số lần chiết (lần), W: nước, ET45: ethanol 45%, ET80: ethanol 80%
Nhận xét: Hiệu suất chiết cao dao động từ 22%-64% Hiệu suất chiết bằng ethanol thấp hơn so với hiệu suất chiết bằng nước (nguyên nhân do dịch chiết chứa lượng lớn tinh bột và polysaccharid khi chiết bằng dung môi là nước, từ đó làm tăng hiệu suất chiết) Hàm lượng chiết ginsenosid không có sự khác biệt thống kê
Tỷ lệ chiết của dung môi và dược liệu có ảnh hưởng không đáng kể đến hiệu suất chiết và hàm lượng ginsenoisid được chiết
Hiệu suất chiết trên thực tế ở lần chiết thứ 3 nhỏ hơn 5% Do đó, hiệu suất chiết được tính của lần 1 và lần 2
Thời gian chiết không ảnh hưởng đến hiệu suất chiết nhưng ảnh hưởng đến lượng ginsenosid chiết được Thời gian chiết càng tăng hiệu suất chiết ginsenosid càng cao
Kết luận: Dựa vào bản kết quả với các yếu tố ảnh hưởng quy trình chiết được khảo sát cho thấy loại dung môi, số lần chiết, và thời gian chiết có thể ảnh hưởng nhiều đến kết quả chiết suất
3.1.3 Kết quả tối ưu hoá quy trình chiết cao đặc bằng phần mềm
Bảng 3.3 Biến phụ thuộc trong thiết kế nghiên cứu
Mã hoá Biến thiết kế Đơn vị
Bảng 3.4 Biến độc lập trong thiết kế nghiên cứu
Mã hoá Biến thiết kế Đơn vị Loại biến Mức khảo sát
A Dung môi chiết % của ethanol Định lượng 0, 45, và 80
B Tỷ lệ dược liệu và dung môi - Định lượng 1:8,1:10 và 1:15
C Thời gian chiết Giờ Định lượng 1, 2 và 3 giờ
D Số lần chiết - Định lượng 1 và 2 lần
Các dữ liệu đã được thiết lập, khai báo và thực nghiệm bằng 54 thí nghiệm mô phỏng phần mềm Quá trình thực nghiệm và phân tích toàn bộ các mẫu đã cho ra các kết quả như Bảng 3.5 thể hiện.
Bảng 3.5 Không gian thực nghiệm và kết quả của từng thực nghiệm
STT A B C Hiệu suất saponin(%) Hiệu suất chiết (%)
Chú thích: A: loại dung môi, B: tỷ lệ dung môi/dược liệu, C: thời gian chiết (giờ),
W: nước, ET45: ethanol 45%, ET80: ethanol 80% Đồ thị biểu diễn biến thiên hiệu suất chiết cao theo biến số quy trình chiết được trình bày trong Hình 3.1
Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn biến thiên hiệu suất chiết cao theo biến số quy trình chiết
Nhận xét: Tổng hợp phân tích cho thấy X1 (Loại dung môi) có ảnh hưởng đến hiệu suất chiết có ý nghĩa thống kê (p
