Do đó, sự cải tiến này đã cung cấp cho bác sĩ lâmsàng nhiều sự lựa chọn trong thực hành mà vẫn đảm bảo sự dán ổn định và bềnvững với mô răng, nhờ những tương tác hóa học khi so sánh với
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Phương pháp nghiên cứu
Nghiên cứu in vitro và thử nghiệm lâm sàng ngẫu nhiên có nhóm chứng.
Đối tượng nghiên cứu
2.2.1 Hệ thống keo dán sử dụng
- Hệ thống keo dán tự xoi mòn hai bước Clearfil SE Bond (Kuraray Noritake
- Hệ thống keo thông dụng Scotchbond Universal (3M ESPE).
Bảng 2-1: Hai loại keo dán sử dụng trong nghiên cứu
Clearfil SE Bond Scotchbond Universal
MDP, HEMA, dimethacrylat đơn phân tử, nước, chất xúc tác
MDP, dimethacrylat đơn phân tử, HEMA, Vitrebond™ Copolymer, hạt độn, cồn, nước, silane
MDP, HEMA, dimethacrylat đơn phân tử, hạt độn nhỏ,chất xúc tác
Phần in vitro của nghiên cứu được tiến hành dựa vào nghiên cứu của Naoko MATSUI và cộng sự, 2015 88
50 răng lựa chọn trong nghiên cứu là các răng cối được nhổ, thân răng còn nguyên vẹn, không sâu hoặc có tổn thương khu trú khác, không được điều trị tuỷ trước đó và không có phục hồi nào trên răng Không ghi nhận thông tin của bệnh nhân.
Tuổi răng: chỉ thu thập răng ở các bệnh nhân trong độ tuổi từ 16 - 40 tuổi (dựa vào hồ sơ bệnh nhân).
Thời gian lưu trữ sau khi nhổ: dưới 3 tháng.
Sau khi nhận răng: xử lý và bảo quản mẫu trước khi sử dụng bằng cách làm sạch bằng máy cạo vôi siêu âm (Cavitron, Bobcat, Dentsply, Germany), đánh bóng bằng chổi với bột pumice không fluor, ngâm trong dung dịch Thymol 0,1% rửa sạch và bảo quản ở nhiệt độ 4-7 o C.
Không để bị mất nước từ thời điểm nhổ răng và trong suốt toàn bộ quá trình xử lý nghiên cứu, liên tục ngâm trong môi trường nước không có tác nhân kháng khuẩn hoặc bao bọc bằng một miếng gạc ẩm giữa các bước xử lý.
Hình 2-1: Bảo quản mẫu bằng dung dịch Thymol 0,1%
2.2.3 Thử nghiệm lâm sàng ngẫu nhiên có nhóm chứng
Nghiên cứu được thực hiện trên răng bệnh nhân đến khám và điều trị tại Khoa Răng Hàm Mặt Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh.
Cỡ mẫu: o Tham khảo nghiên cứu của Tsujimoto và cs, 2017 89 o Trong đó, trị số trung bình độ bền dán của nhóm M1 là μ1 và nhóm M2 là μ2, chúng ta có: μ1 = 48,1 Mpa, μ2 = 41,7 Mpa. o Do đó, Δ = 6,4 Mpa Độ lệch chuẩn là σ = 5,7 Mpa. o Như vậy, hệ số ảnh hưởng là: ES ≈ 1,12 Với power = 0,80 và α 0,05, hằng số C = 7,85. o Số cỡ mẫu cần thiết là:
Do vậy, cỡ mẫu trong nghiên cứu thử nghiệm lâm sàng có nhóm chứng là 13 răng.
- Răng cối có chỉ định nhổ.
- Răng có xoang sâu nhỏ phù hợp với chỉ định phục hồi với composite, không có phục hồi sẵn có.
- Không có tổn thương liên quan trên phim X-Quang.
- Bệnh nhân được lựa chọn là những người điều trị ngoại trú tại khoa Răng Hàm Mặt, Đại Học Y Dược Thành Phố Hồ Chí Minh, đồng ý tham gia nghiên cứu.
- Tiêu chuẩn loại trừ: o Bệnh nhân có tiền sử dị ứng với vật liệu sử dụng, vệ sinh răng miệng kém, tật nghiến răng hoặc không đồng ý tham gia nghiên cứu. o Có triệu chứng của bệnh lý tủy răng hoặc mô quanh chóp.
Đánh giá độ bền dán của giao diện dán - men răng và dán - ngà răng
2.3.1 Vật liệu và phương tiện nghiên cứu
- Đèn halogen quang trùng hợp QHL-75 (Dentsply, Konstanz, Germany)
- Composite Nanofill Filtek, Bulk Fill của hãng 3M, Hoa Kỳ
- Tay khoan siêu tốc NSK Pana Air
- Thước kẹp điện tử (Mitutoyo, Tokyo, Japan)
- Máy cắt IsoMet (Buehler Ltd., Lake Bluff, IL, Hoa Kỳ)
- Máy đo lực hiệu LLOYD LR30K (Ametek, Anh).
Hình 2-3: Máy thực hiện chu trình nhiệt
Hình 2-4: Composite Nanofill Filtek, Bulk Fill
Hình 2-5: Máy đo lực hiệu LLOYD LR30K
- Nghiên cứu được tiến hành tại Khoa Răng Hàm Mặt, Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh.
- Thực hiện chu trình nhiệt tại Khoa Dược, Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh.
- Quá trình cắt răng được thực hiện tại Phòng thí nghiệm Hóa Lý ứng dụng,Trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên thành phố Hồ Chí Minh Thử nghiệm đo lực được thực hiện tại Trung tâm nghiên cứu vật liệu Polyme,Trường Đại học Bách Khoa thành phố Hồ Chí Minh.
2.3.3.1 In vitro a) Chuẩn bị mẫu nghiên cứu
- 40 răng nghiên cứu được cắt ngang đường vòng lớn nhất thân răng bằng máy cắt IsoMet (Buehler Ltd., Lake Bluff, IL, USA) liên tục được làm mát Bề mặt diện cắt được chà nhám bằng giấy nhám để mô phỏng lớp mùn.
Hình 2-6: Răng sau khi được cắt lát b) Thực hiện phục hồi
- Lấy keo dán: o Hệ thống M1: mở nắp 2 lọ ngược chiều kim đồng hồ, dốc ngược bóp nhẹ phần thân vào 2 khay đựng khác nhau, không trộn lẫn lót và dán Sử dụng trong vòng 3 phút từ lúc lấy ra, che chắn keo dán trong khay với giấy cản sáng. o Hệ thống M2: cầm lọ keo dán theo chiều dọc trong lòng bàn tay, dùng phần thân ngón tay cái mở nắp theo chiều thẳng đứng hướng lên trên Dốc ngược lọ keo dán, bóp nhẹ ở phần thân để lấy vừa đủ lượng keo sử dụng vào khay, tránh tiếp xúc với ánh sáng.
- Phân mẫu thành 2 nhóm: o Nhóm 1 (20R): đặt lớp lót lên giao diện vừa tạo và để trong vòng 20 giây sau đó thổi nhẹ đặt lớp bond M1, thổi nhẹ, trùng hợp 10 giây với đèn halogen. o Nhóm 2 (20R): đặt lớp keo dán M2 lên giao diện vừa tạo và dùng cọ quét trong vòng 20 giây, sau đó thổi nhẹ 5 giây, trùng hợp 10 giây với đèn halogen.
- Đặt lớp composite dày 5 mm lên giao diện vừa bôi keo dán, trùng hợp trong vòng 40 giây.
- Bảo quản trong nước 37 0 C trong 24h. c) Thực hiện chu kỳ nhiệt:
- Các mẫu sau đó được cắt bằng đĩa cắt có đường kính 0,1 mm, đường cắt đi qua phần chứa cả mô răng và miếng trám tạo thành từng khối hình hộp thiết diện vuông có chiều dài mỗi cạnh 2 mm.
- Các khối răng được phân loại thành 2 nhóm theo 2 loại keo dán đã được sử dụng, mã hóa bởi 1 người khác.
- Thực hiện chu kỳ nhiệt: 5000 chu trình nhiệt 5 –55 o C, thời gian nhúng 30s, thời gian chuyển 5 giây Sau đó, mẫu sẽ được sử dụng để đo độ bền dán.
Hình 2-8: Các mẫu sau khi được cắt lát
Hình 2-9: Máy thực hiện chu trình nhiệt d) Đo độ bền dán:
- Đo bằng máy đo lực hiệu LLOYD LR30K (Ametek, Anh).
- Được thực hiện tại phòng thí nghiệm lý hóa Polyme, trung tâm nghiên cứu vật liệu Polyme, Đại học Bách Khoa thành phố Hồ Chí Minh.
Bảng 2-2: Thông số hoạt động của máy LLOYD LR30K
Tốc độ di chuyển 0,02 – 500 mm/phút Độ chính xác chung >0,5% Độ chính xác về lực Đọc 2 số lẻ sau dấu phẩy
- Một thanh kim loại hình dáng giống cây đục được thiết kế với các thông số kĩ thuật về độ cứng và độ mỏng phù hợp để đặt một lực lên phục hồi, đầu kia được cố định trên đĩa Người đo không biết mẫu đo thuộc loại composite nào.
- Ngưỡng bong dán được xác định là lực mà phức hợp răng - phục hồi bị bong sau cùng, tạo nên đỉnh của đường cong biến dạng lực.
- Máy đo được nối với một máy vi tính nhờ phần mềm chuyên biệt ghi nhận trị số lực và vẽ đồ thị tác dụng từng mẫu sau mỗi lần đo Ta có thể ghi nhận lực tải tối đa (max load) và lực tại thời điểm bong dán (break load). Độ bền dán (Mpa) = Lực đo (N) / Diện tích dán (S) (mm 2 )
Hình 2-10: Đầu tác dụng lực.
Hình 2-11: Đồ thị lực tác động lên mẫu thử e) Quan sát, đánh giá:
- Các số liệu (biến dạng trượt) được ghi lại khi sự bong dán xảy ra.
Tóm tắt quá trình in vitro:
Hình 2-12 Qui trình thực hiện In vitro
2.3.4 Xử lý và phân tích số liệu
- Dữ liệu được thu thập, ghi vào bảng số liệu.
- Mã hóa các dữ liệu và nhập vào phần mềm thống kê SPSS 20.0 Sử dụng thống kê mô tả xem trị số trung bình của độ bền dán (lực tối đa) tại thời điểm bong dán Kiểm định tính chuẩn của phân phối số liệu bằng phép kiểm Shapiro – Wilk Dùng phép kiểm phi tham số Mann - Whitney để so sánh giá trị trung bình của biến phụ thuộc trước và sau can thiệp nếu phân phối không chuẩn Với những số liệu có phân phối chuẩn, dùng phép kiểm T-test để xác định sự khác biệt về độ bền dán và sự khác biệt về độ bền kháng gãy giữa hai nhóm.
- Phép kiểm định có ý nghĩa khi P < 0,05 (độ tin cậy 95%).
Đánh giá giao diện dán sau thử nghiệm axit – bazơ
2.4.1 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu
- Đèn halogen quang trùng hợp QHL-75 (Dentsply, Konstanz, Germany)
- Composite Nanofill Filtek, Bulk Fill của hãng 3M, Hoa Kỳ
- Tay khoan siêu tốc NSK Pana Air
- Máy cắt IsoMet (Buehler Ltd., Lake Bluff, IL, Hoa Kỳ)
Chuẩn bị mẫu nghiên cứu
- 10 răng nghiên cứu được cắt ngang đường vòng lớn nhất thân răng, mỗi răng thành 2 lát có bề dày 1 mm bằng máy cắt IsoMet (Buehler Ltd., Lake Bluff, IL, USA) với dòng nước lạnh phun liên tục Bề mặt diện cắt được chà nhám bằng giấy nhám để mô phỏng lớp mùn.
- Lấy keo dán: o Hệ thống M1: mở nắp 2 lọ ngược chiều kim đồng hồ, dốc ngược bóp nhẹ phần thân vào 2 khay đựng khác nhau, không trộn lẫn lót và dán Sử dụng trong vòng 3 phút từ lúc lấy ra, che chắn keo dán trong khay với giấy cản sáng. o Hệ thống M2: cầm lọ keo dán theo chiều dọc trong lòng bàn tay, dùng phần thân ngón tay cái mở nắp theo chiều thẳng đứng hướng lên trên Dốc ngược lọ keo dán, bóp nhẹ ở phần thân để lấy vừa đủ lượng keo sử dụng vào khay, tránh tiếp xúc với ánh sáng. o Với 2 lát dày 1 mm của cùng một răng:
+ Lát thứ nhất: đặt lớp lót lên một mặt vừa xử lý và để trong vòng 20 giây sau đó thổi nhẹ đặt lớp bond M1, thổi nhẹ, trùng hợp 10 giây với đèn halogen.
+ Lát thứ hai: đặt lớp keo dán M2 lên một mặt vừa xử lý và dùng cọ quét trong vòng 20 giây, sau đó thổi nhẹ 5 giây, trùng hợp 10 giây với đèn halogen. o Đặt lớp composite dày 5 mm giữa 2 giao diện vừa bôi keo dán, ở cả 2 mặt lát cắt trùng hợp trong vòng 40 giây. o Mã hóa các răng này bởi một bác sĩ khác, bảo quản trong nước cất 37 0 C trong 24h. o Các mẫu sau đó được cắt bằng đĩa cắt có đường kính 0,1 mm, đường cắt đi qua phần chứa cả mô răng và miếng trám tạo thành thừng khối hình hộp thiết diện vuông có chiều dài mỗi cạnh 2 mm.
- Mỗi lát cắt sẽ được ngâm trong 100 ml dung dịch khử khoáng có2,2 mmol/L CaCl2, 2,2 mmol /L NaH2PO4 và 50 mmol/L axit axetic được điều chỉnh ở pH 4,5 trong 90 phút (kiểm tra bằng dung dịch thử pH của Công Ty Thủy Phước, TP Hồ Chí Minh, Việt Nam).
Hình 2-13: Độ pH được kiểm tra bằng dung dịch đo pH
- Sau đó lát cắt được ngâm trong dung dịch NaOCl 5% trong 20 phút để loại bỏ sợi collagen đã bị khử khoáng, rửa bằng nước trong 30s.
- Đánh bóng bề mặt mẫu bằng giấy nhám ẩm, với kích cỡ nhám lần lượt từ 600, 1000 và 1500 grit.
Hình 2-14: Quy trình thực hiện
Hình 2-16: Kính hiển vi được dùng (Hitachi S-4800 FE-SEM, Horiba)
2.4.2.2 Thử nghiệm lâm sàng ngẫu nhiên có nhóm chứng a Tạo xoang trám
- Đặt đê cao su cô lập răng cần trám.
Hình 2-17: Đặt đê cô lập răng cần trám
- Dùng mũi khoan kim cương đầu tròn (kích thước tùy vào răng), sửa soạn xoang loại II nằm phía gần và phía xa với tay khoan siêu tốc Mũi khoan thay mới sau mỗi răng trám.
Hình 2-18: Răng sau khi tạo xoang
- Kích thước của xoang: chiều ngoài - trong, chiều gần – xa 2x2x2 mm. Răng được trám ngay sau khi tạo xoang xong. b Trám răng
Chọn ngẫu nhiên loại keo dán sử dụng ở xoang trám phía Gần/Xa bằng cách bốc thăm.
- Lấy keo dán: o Hệ thống M1: Mở nắp 2 lọ ngược chiều kim đồng hồ, dốc ngược bóp nhẹ phần thân vào 2 khay đựng khác nhau, không trộn lẫn lót và dán Sử dụng trong vòng 3 phút từ lúc lấy ra, che chắn keo dán trong khay với giấy cản sáng. o Hệ thống M2: Cầm lọ keo dán theo chiều dọc trong lòng bàn tay, dùng phần thân ngón tay cái mở nắp theo chiều thẳng đứng hướng lên trên Dốc ngược lọ keo dán, bóp nhẹ ở phần thân để lấy vừa đủ lượng keo sử dụng vào khay, tránh tiếp xúc với ánh sáng.
- Xoang trám phía gần: o Dùng cọ quét đều lớp lót lên bề, mặt xoang trám mà chờ trong
20 giây, sau đó thổi với hơi nhẹ. o Dùng cọ quét đề lớp dán M1/M2 (theo bốc thăm) lên bề mặt xoang trám, thổi với hơi nhẹ, sau đó trùng hợp với đèn halogen trong 10 giây. o Đặt composite Nanofill Filtek, Bulk Fill điêu khắc và trùng hợp 40 giây. o Đèn trám được kiểm tra cường độ bằng cảm biến đặt trên đế đèn trong suốt quá trình nghiên cứu, bảo đảm cường độ đèn đúng như tiêu chuẩn của nhà sản xuất Trong quá trình trùng hợp, đầu dẫn sáng để gần tối đa nhưng không chạm vào răng hay vật liệu. o Sử dụng tay khoan chậm để đánh bóng bề mặt miếng trám bằng mũi silicon từ trung bình đến siêu mịn.
- Xoang trám phía xa: o Đặt lớp keo dán M1/ M2 (theo bốc thăm) lên giao diện vừa tạo và dùng cọ quét trong vòng 20 giây, sau đó thổi nhẹ 5 giây, trùng hợp 10 giây với đèn halogen. o Đặt lớp keo dán lên giao diện vừa tạo và để trong vòng 20 giây sau đó thổi nhẹ 5 giây, trùng hợp 10 giây với đèn halogen. o Đặt composite Nanofill Filtek, Bulk Fill điêu khắc và trùng hợp 40 giây. o Đèn trám được kiểm tra cường độ bằng cảm biến đặt trên đế đèn trong suốt quá trình nghiên cứu, bảo đảm cường độ đèn đúng như tiêu chuẩn của nhà sản xuất Trong quá trình trùng hợp, đầu dẫn sáng để gần tối đa nhưng không chạm vào răng hay vật liệu. o Sử dụng tay khoan chậm để đánh bóng bề mặt miếng trám bằng mũi silicon từ trung bình đến siêu mịn.
Hình 2-19: Hoàn tất trám răng c Nhổ răng
- Răng được nhổ sau 2-4 tuần.
- Răng sau khi nhổ được làm sạch, bảo quản sau đó được cắt bằng đĩa cắt có đường kính 0,1 mm, đường cắt đi qua phần chứa cả mô răng và miếng trám tạo thành từng khối hình hộp thiết diện vuông có chiều dài mỗi cạnh
2 mm và được đưa đi quan sát dưới KHV SEM.
Hình 2-20: Răng sau khi nhổ
2.4.3 Xử lý và phân tích số liệu
- Hình ảnh quan sát SEM sẽ được đo: độ dày lớp lai, đường kính và chiều dài đuôi nhựa với độ phóng đại từ thấp đến cao x500, x2500 và x6000 bằng phần mềm Adobe™Photoshop dựa trên thước đo tỷ lệ có sẵn trong mỗi hình Dữ liệu khoảng cách với đơn vị micromet được nhập vào bảng tính Microsoft®Excel.
Hình 2-21: Cách đo đạc các thành phần của giao diện dán (x6000)
Vị trí đo độ dày lớp lai/ABRZ
Vị trí đo độ dài đuôi nhựa: từ trung điểm của gốc tới trung điểm của ngọn
Vị trí đo đường kính đuôi nhựa: đường thẳng kẻ từ giao điểm giữa cạnh ngắn đuôi nhựa và lớp lai, vuông dóc với đường đo độ
Nghiên cứu thử nghiệm lâm sàng được sự chấp thuận của Hội đồng đạo đức trong nghiên cứu y sinh học Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh số 761/ HĐĐĐ-ĐHYD, mã số 22510-ĐHYD cấp ngày 20/10/2022, xét duyệt theo quy trình đầy đủ.
Thông báo và giải thích cặn kẽ về mục tiêu và nội dung nghiên cứu cho bệnh nhân trước khi bệnh nhân tự nguyện ký tên vào phiếu đồng ý tham gia nghiên cứu.
Trong quá trình nghiên cứu, bệnh nhân có quyền từ chối hoặc không tham gia bất kỳ giai đoạn nào của nghiên cứu và không ảnh hưởng đến việc điều trị của họ.Bệnh nhân không phải chịu bất kỳ chi phí phát sinh nào liên quan đến nghiên cứu bao gồm vật liệu, dụng cụ dùng trong nghiên cứu
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
Kết quả nghiên cứu In vitro
3.1.1 Đánh giá độ bền dán của giao diện dán - men răng và dán - ngà răng
3.1.1.1 Độ bền dán ngà răng
Kiểm tra đặc điểm của phân phối số liệu bằng phép kiểm Shapiro - Wilk Số liệu của thử nghiệm có phân phối theo qui luật chuẩn (p > 0,05 ở tất cả các nhóm).
Sử dụng phép kiểm T bắt cặp cho thấy không có sự khác biệt về độ bền dán giữa các nhóm keo dán thử nghiệm (p > 0,05).
Bảng 3-1: Giá trị độ bền dán ngà răng hai nhóm Độ bền dán (± Đo lệch chuẩn)
* Khác biệt không có ý nghĩa thống kê về độ bền dán trung bình ngà răng giữa các nhóm thử nghiệm.
3.1.1.2 Độ bền dán men răng
Kiểm tra đặc điểm của phân phối số liệu bằng phép kiểm Shapiro - Wilk Số liệu của thử nghiệm không phân phối theo qui luật chuẩn (p < 0,05 ở tất cả các nhóm).
Sử dụng thống kê phi tham số Kruskal - Wallis cho thấy có sự khác biệt về độ bền dán men răng giữa các nhóm keo dán thử nghiệm (p < 0,05).
Bảng 3-2: Giá trị độ bền dán men răng hai nhóm Độ bền dán (± Độ lệch chuẩn)
* Khác biệt có ý nghĩa thống kê về độ bền dán trung bình men răng giữa các nhóm thử nghiệm.
3.1.1.3 Tỷ lệ các loại bong dán
Bảng 3-3: Tỷ lệ kiểu bong dán (trên men hoặc ngà) đối với từng loại vật liệu
Bong dán giao diện (%) Bong dán kết hợp (%)
Biểu đồ 3-1: Biểu đồ tỷ lệ kiểu bong dán trên men của 2 loại keo dán
Biểu đồ 3-2: Biểu đồ tỷ lệ kiểu bong dán trên ngà của 2 loại keo dán
Clearfil SE Bond Scotchbond Universal
Clearfil SE Bond Scotchbond Universal
3.1.2 Đánh giá giao diện dán sau thử nghiệm axit – bazơ
3.1.2.1 Giao diện nhựa – men răng của hai hệ thống dán
Các mẫu răng được cắt lát và trám theo hướng dẫn sử dụng của nhà sản xuất, được quan sát dưới kính hiển vi điện tử quét.
Hệ thống dán tự xoi mòn với đại diện là keo dán Clearfil SE Bond: đặt lớp lót lên giao diện vừa tạo và để trong vòng 20 giây sau đó thổi nhẹ đặt lớp bond, thổi nhẹ, trùng hợp 10 giây với đèn halogen.
Hệ thống keo dán thông dụng với đại diện là Scotchbond Universal: đặt lớp keo dán M2 lên giao diện vừa tạo và dùng cọ quét trong vòng 20 giây, sau đó thổi nhẹ 5 giây, trùng hợp 10 giây với đèn halogen.
Hình 3-1: Hình ảnh SEM giao diện keo dán – men răng của Clearfil SE Bond
C: composite, L: lớp lai, M: men răng
Hình 3-2: Hình ảnh SEM giao diện keo dán – men răng của Scotchbond Universal
C: composite, L: lớp lai, M: men răng
Nhận thấy cả hai loại keo dán tự xoi mòn Clearfil SE Bond và keo dán thông dụng Scotchbond Universal tạo ra giao diện dán không tốt trên men răng, lớp lai tạo ra không liền mạch, rất phẳng và có khe hở Không thấy nhiều liên kết vi lưu cơ học, các đuôi nhựa tạo ra không xâm nhập được vào lớp men.
3.1.2.2 Giao diện nhựa – ngà răng của hai hệ thống dán
Các mẫu răng được cắt lát và trám theo hướng dẫn sử dụng của nhà sản xuất, được quan sát dưới kính hiển vi điện tử quét.
Hệ thống dán tự xoi mòn với đại diện là keo dán Clearfil SE Bond: đặt lớp lót lên giao diện vừa tạo và để trong vòng 20 giây sau đó thổi nhẹ đặt lớp bond, thổi nhẹ, trùng hợp 10 giây với đèn halogen.
Hệ thống keo dán thông dụng với đại diện là Scotchbond Universal: đặt lớp keo dán M2 lên giao diện vừa tạo và dùng cọ quét trong vòng 20 giây, sau đó thổi nhẹ 5 giây, trùng hợp 10 giây với đèn halogen.
Hình 3-3: Hình ảnh SEM giao diện keo dán – ngà răng của Clearfil SE Bond
Hình 3-4: Hình ảnh SEM giao diện keo dán – ngà răng của Scotchbond Universal
C: composite, N: ngà răng, M: men răng, L: lớp lai
Nhận thấy cả hai loại keo dán tự xoi mòn Clearfil SE Bond và keo dán thông dụng Scotchbond Universal tạo ra giao diện dán khít sát liên tục trên ngà răng, lớp lai tạo ra liền mạch, không có khe hở tuy nhiên tương đối mỏng Thấy nhiều liên kết vi lưu cơ học, các đuôi nhựa tạo ra xâm nhập được vào lớp ngà Tuy nhiên đuôi nhựa mỏng ngắn, đường kính nhỏ được bao phủ bởi lớp mùn (hình 3-3, 3-4).
Hình 3-5: Hình ảnh SEM x6000 các đuôi nhựa keo dán – ngà răng của Scotchbond
C: composite, D: keo dán, L: lớp lai, N: ngà răng, Nh: đuôi nhựa,
Hình 3-6: Hình ảnh SEM x6000 các đuôi nhựa keo dán – ngà răng của Clearfil SE
D: keo dán, Nh: đuôi nhựa Ở độ phóng đại x6000, ở cả hai loại keo dán các đuôi nhựa có hình trụ với đường kính nhỏ, mật độ tương đối thưa, có nhiều đuôi nhựa chưa hình thành hoàn toàn. Toàn bộ đuôi nhựa bị đan xen trong lớp mùn.
Hình 3-7: Hình ảnh SEM giao diện keo dán – ngà răng.
C: composite, D: keo dán, N: ngà răng
Có sự hiện diện của các nút mùn bít kín ống ngà được quan sát thấy thường xuyên ở cả 2 loại keo dán.
Hình 3-8: Hình ảnh SEM giao diện keo dán – ngà răng.
C: composite, N: ngà răngKeo dán Scotchbond Universal có sự hiện diện của các nút mùn bít kín ống ngà.
Các đuôi nhựa không hình thành được, hoặc không chui sâu được vào ống ngà do sự tồn tại các nút mùn (hình 3-7, 3-8).
3.1.2.3 Đặc điểm giao diện nhựa – răng của hai loại keo dán a) Bề dày lớp lai
- Độ dày lớp lai trung bình của hai loại keo dán tự xoi mòn Clearfil SE Bond và keo dán thông dụng Scotchbond Universal khác nhau có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) (Bảng 3-4 và hình 3-9)
- Cụ thể, dữ liệu được kiểm tra bằng kiểm định Shapiro - Wilk để xác định tính chuẩn của phân phối, sau đó sử dụng kiểm định T bắt cặp để xác định sự khác biệt giữa hai nhóm (Bảng 3-4).
Bảng 3-4: Khác biệt có ý nghĩa thống kê về độ dày lớp lai trung bình giữa các nhóm thử nghiệm
Trung bình (± Độ lệch chuẩn) àm
Hình 3-9: Sự khác biệt về độ dày lớp lai của keo dán tự xoi mòn Clearfil SE Bond
(trái) và Scotchbond Universal (phải)
L: lớp lai b) Đường kính và chiều dài đuôi nhựa
- Đường kính đuôi nhựa trung bình của hai loại keo dán tự xoi mòn Clearfil
SE Bond và keo dán thông dụng Scotchbond Universal khác nhau không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) (Bảng 3-5 và hình 3.6)
- Cụ thể, dữ liệu được kiểm tra bằng kiểm định Shapiro - Wilk để xác định tính chuẩn của phân phối, sau đó sử dụng kiểm định T bắt cặp để xác định sự khác biệt giữa hai nhóm (Bảng 3-5).
Bảng 3-5: Khác biệt không có ý nghĩa thống kê về đường kính đuôi nhựa trung bình giữa các nhóm thử nghiệm
Trung bình (± Độ lệch chuẩn) àm
- Chiều dài đuôi nhựa trung bình của keo dán tự xoi mòn Clearfil SE Bond nhỏ hơn chiều dài đuôi nhựa trung bình của keo dán thông dụng Scotchbond Universal, khác nhau có ý nghĩa thống kê (p < 0,05).
- Cụ thể, dữ liệu được kiểm tra bằng kiểm định Shapiro - Wilk để xác định tính chuẩn của phân phối, sau đó sử dụng kiểm định T bắt cặp để xác định sự khác biệt giữa hai nhóm (Bảng 3-6).
Bảng 3-6: Khác biệt có ý nghĩa thống kê về chiều dài đuôi nhựa trung bình giữa các nhóm thử nghiệm
Trung bình (± Độ lệch chuẩn) àm
Hình 3-10: Sự khác biệt về đường kính và độ dài đuôi nhựa giữa Clearfil SE Bond
(trái) và Scotchbond Universal (phải)
Thử nghiệm lâm sàng
3.2.1 Giao diện nhựa – men răng của hai hệ thống dán
- Hai xoang được tạo trên răng được cắt lát và trám theo hướng dẫn sử dụng của nhà sản xuất, được quan sát dưới kính hiển vi điện tử quét.
- Hệ thống dán tự xoi mòn với đại diện là keo dán Clearfil SE Bond: đặt lớp lót lên giao diện vừa tạo và để trong vòng 20 giây sau đó thổi nhẹ đặt lớp bond, thổi nhẹ, trùng hợp 10 giây với đèn halogen.
- Hệ thống keo dán thông dụng với đại diện là Scotchbond Universal: đặt lớp keo dán M2 lên giao diện vừa tạo và dùng cọ quét trong vòng 20 giây, sau đó thổi nhẹ 5 giây, trùng hợp 10 giây với đèn halogen.
Tương tự như thử nghiệm In vitro cả hai loại keo dán Clearfil SE Bond và keo dán thông dụng Scotchbond Universal tạo ra giao diện dán không tốt trên men răng, lớp lai tạo ra rất phẳng và có khe hở Không thấy nhiều liên kết vi lưu cơ học, các đuôi nhựa tạo ra không xâm nhập được vào lớp men (hình 3-11, 3-12).
Hình 3-11: Hình ảnh SEM giao diện keo dán – men răng của Clearfil SE Bond
C: composite, D: lớp dán, M: men răng
Hình 3-12: Hình ảnh SEM giao diện keo dán – men răng của Scotchbond Universal
C: composite, D: lớp dán, M: men răng
3.2.2 Giao diện nhựa – ngà răng của hai hệ thống dán
- Hai xoang được tạo trên răng được cắt lát và trám theo hướng dẫn sử dụng của nhà sản xuất, được quan sát dưới kính hiển vi điện tử quét.
- Hệ thống dán tự xoi mòn với đại diện là keo dán Clearfil SE Bond: đặt lớp lót lên giao diện vừa tạo và để trong vòng 20 giây sau đó thổi nhẹ đặt lớp bond, thổi nhẹ, trùng hợp 10 giây với đèn halogen.
- Hệ thống keo dán thông dụng với đại diện là Scotchbond Universal: đặt lớp keo dán M2 lên giao diện vừa tạo và dùng cọ quét trong vòng 20 giây, sau đó thổi nhẹ 5 giây, trùng hợp 10 giây với đèn halogen.
- Tương tự thử nghiệm In vitro: keo dán tự xoi mòn Clearfil SE Bond và keo dán thông dụng Scotchbond Universal tạo ra giao diện dán khít sát liên tục trên ngà răng, lớp lai tạo ra liền mạch, không có khe hở tuy nhiên tương đối mỏng Thấy nhiều liên kết vi lưu cơ học, các đuôi nhựa tạo ra xâm nhập được vào lớp ngà Tuy nhiên đuôi nhựa mỏng ngắn, đường kính nhỏ được bao phủ bởi lớp mùn.
Hình 3-13: Hình ảnh SEM giao diện keo dán – ngà răng của Clearfil SE Bond
C: composite, D: lớp dán , L: lớp lai, N: ngà răng
Hình 3-14: Hình ảnh SEM giao diện keo dán – ngà răng của Scotchbond Universal
C: composite, L: lớp lai, N: ngà răng
3.2.3 Đặc điểm giao diện nhựa – răng của hai loại keo dán
- Độ dày lớp lai trung bình của keo dán tự xoi mòn Clearfil SE Bond nhỏ hơn keo dán thông dụng Scotchbond Universal, khác nhau có ý nghĩa thống kê (p < 0,05)
- Cụ thể, dữ liệu được kiểm tra bằng kiểm định Shapiro - Wilk để xác định tính chuẩn của phân phối, sau đó sử dụng kiểm định T bắt cặp để xác định sự khác biệt giữa hai nhóm (Bảng 3-15)
Bảng 3-7: Khác biệt có ý nghĩa thống kê về độ dày lớp lai trung bình giữa các nhóm thử nghiệm
Trung bình (± Độ lệch chuẩn) àm
Hình 3-15: Sự khác biệt về độ dày lớp lai của keo dán tự xoi mòn Clearfil SE Bond
(trái) và Scotchbond Universal (phải)
C: composite, L: lớp lai, N: ngà răng
3.2.3.2 Đường kính và chiều dài đuôi nhựa
- Đường kính đuôi nhựa trung bình của hai loại keo dán tự xoi mòn Clearfil
SE Bond và keo dán thông dụng Scotchbond Universal khác nhau không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05)
- Cụ thể, dữ liệu được kiểm tra bằng kiểm định Shapiro - Wilk để xác định tính chuẩn của phân phối, sau đó sử dụng kiểm định T bắt cặp để xác định sự khác biệt giữa hai nhóm (Bảng 3-8)
Bảng 3-8: Khác biệt không có ý nghĩa thống kê về đường kính đuôi nhựa trung bình giữa các nhóm thử nghiệm
Trung bình (± Độ lệch chuẩn) àm
- Chiều dài đuôi nhựa trung bình của keo dán tự xoi mòn Clearfil SE Bond nhỏ hơn chiều dài đuôi nhựa trung bình của keo dán thông dụng Scotchbond Universal, tuy nhiên khác nhau này không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05)
- Cụ thể, dữ liệu được kiểm tra bằng kiểm định Shapiro - Wilk để xác định tính chuẩn của phân phối, sau đó sử dụng kiểm định T bắt cặp để xác định sự khác biệt giữa hai nhóm (Bảng 3-9)
Bảng 3-9: Khác biệt không có ý nghĩa thống kê về chiều dài đuôi nhựa trung bình giữa các nhóm thử nghiệm
Trung bình (± Độ lệch chuẩn) àm
Hình 3-16: Sự khác biệt về đường kính và độ dài đuôi nhựa giữa Clearfil SE Bond
(trái) và Scotchbond Universal (phải)
BÀN LUẬN
Bàn luận về quy trình nghiên cứu
Có rất nhiều yếu tố ảnh hưởng lên kết quả thử nghiệm đánh giá giao diện dán Vì vậy, mỗi vật liệu được sử dụng và từng bước nhỏ trong qui trình phải được suy xét kỹ lưỡng phù hợp với mục đích của nghiên cứu:
Chu trình nhiệt: Chu trình nhiệt làm cho vật liệu dãn nở và co, tạo ra ứng suất nội sinh liên tục và phức tạp tại giao diện dán Do vậy, mô phỏng sát nhất với môi trường miệng Darvell và cs cho rằng việc thực hiện 5000 và 10000 chu trình nhiệt tương ứng với 6 tháng và 1 năm tác động thực tế trên miệng của nhiệt độ và nước bọt 76 Đối với hệ thống dán xoi mòn – và – rửa vốn được coi là “chuẩn vàng”, độ bền dán ngà răng giảm đáng kể với 5000 hoặc 10000 chu kỳ nhiệt Hai loại keo dán trong nghiên cứu này chứa MDP trong thành phần giúp cải thiện liên kết dán với ngà răng, liên kết dán vẫn ổn định sau nhiều chu trình nhiệt Điều thú vị là độ bền dán thậm chí còn tăng sau chu trình nhiệt ở một số loại keo dán chứa MDP trong thành phần 90,91 , điều đó được cho là do sự trùng hợp thêm của các phân tử nhựa trong keo dán dưới tác động của nhiệt độ, ngoài ra MDP còn tạo ra một mạng lưới đa liên kết ở giao diện dán góp phần làm tăng tính chất cơ học của giao diện dán
Từ khi kĩ thuật “dán ướt” (kĩ thuật chúng tôi sử dụng trong nghiên cứu này) được giới thiệu Kĩ thuật này làm tăng độ bền dán lên ngà răng và cho phép bít kín ống ngà, giảm nguy cơ gây nhạy cảm sau trám Kể từ lúc này, độ bền dán lên ngà răng đã cao bằng hoặc thậm chí cao hơn độ bền dán lên men 92 Trong điều kiện ẩm ướt, các khoảng không gian giữa các sợi collagen trong ngà răng đã khử khoáng được bảo tồn, cho phép các đơn phân tử nhựa và các đơn phân tử chức năng (trong đó có MDP) thâm nhập hiệu quả hơn vào ngà răng bên dưới, trùng hợp và tương tác hóa học tại chỗ Nước có nhiệm vụ vận chuyển các đơn phân tử vào ngà răng và góp phần vào hỗ trợ khung collagen không bị “sập” Tuy nhiên, sự suy thoái liên kết dán trong kĩ thuật “dán ướt” dường như đã được tăng tốc bởi chu trình nhiệt Vì vậy, mặc dù tiêu chuẩn ISO/TR 11405 khuyến khích phác đồ chu trình nhiệt bao gồm
500 chu trình trong nước giữa 5-55°C nhưng chúng tôi thực hiện 5000 chu trình nhiệt để khảo sát đầy đủ phản ứng của liên kết dán với sự thay đổi của nhiệt độ trong một khoảng thời gian lâu dài tương tự như môi trường miệng
Có sự khác biệt đáng kể giữa các giá trị độ bền dán của răng ở hàm trên và hàm dưới 93 Để có được kết quả đồng nhất đáng tin cậy, trong nghiên cứu của chúng tôi, ưu tiên sử dụng răng cối lớn hàm trên
Ngà răng ở lớp sâu có có tính thấm cao hơn, ẩm hơn so với lớp nông 94 Do vậy, độ bền dán trượt của phục hồi giảm theo độ sâu của xoang trám theo hàm logarit 95,96 Thành phần keo dán ngày càng được cải tiến, lớp dán ngày càng ưa nước hơn khiến cho sự phụ thuộc của độ bền dán trượt với độ sâu ngà răng ít đi Ngoài ra, việc giữ lại một phần lớp mùn trong hệ thống dán tự xoi mòn và hệ thống dán thông dụng (sử dụng theo cách tự xoi mòn) cũng được chứng minh là có khả năng hạn chế sự phụ thuộc trên 96 Để có được kết quả đồng nhất đáng tin cậy, trong nghiên cứu của chúng tôi, những vùng ngà có độ sâu đồng nhất được lựa chọn để đưa vào máy đo độ bền dán trượt ( Hình 4-1)
Tuổi của người hiến răng: Ở những răng có độ tuổi người hiến lớn hơn, đường kính ống ngà giảm nên tính thấm của ngà răng cũng giảm 97 Mặc dù các đặc tính cơ học của ngà răng già khác với ngà răng trẻ 97 , độ bền dán trượt không có sự khác biệt 98 Vì vậy trong nghiên cứu của chúng tôi không khắt khe trong việc chọn lựa tuổi răng
Hình 4-1: Minh họa những vùng ngà răng được lựa chọn
Diện tích dán: rất ít nghiên cứu đánh giá ảnh hưởng của diện tích đến độ bền dán trượt Sano và cộng sự báo cáo rằng đối với các mẫu thử có diện tích dán trong khoảng 0,25-11,65 mm 2 , độ bền dán (kéo và trượt) với ngà răng được chứng minh là giảm theo hàm logarit khi diện tích dán tăng lên 99 Một kết quả tương tự cũng được nhận thấy ở độ bền dán trượt, trong đó diện tích bề mặt nhỏ hơn có giá trị cao hơn đáng kể khi so sánh với diện tích bề mặt dán lớn hơn 100 Tiêu chuẩn ISO/TR
11405 không xác định giá trị cụ thể cho diện tích liên kết nhưng nó đề cập đến việc phân định rõ ràng diện tích liên kết là một yêu cầu quan trọng và thử nghiệm độ bền dán trượt phải có diện tích dán lớn hơn 3 mm 2 Trong nghiên cứu của chúng tôi, để thuận tiện cho việc đo đạc, chúng tôi lựa chọn giao diện dán là hình vuông có kích thước mỗi cạnh là 2 mm
Loại vật liệu composite được sử dụng: việc sử dụng composite cứng hơn có thể làm tăng đáng kể giá trị độ bền dán Có mối tương quan yếu nhưng có ý nghĩa thống kê giữa độ bền liên kết ngà răng và đặc tính uốn composite 101,102 Do đó, khi đo đạc độ bền dán của keo dán, nên chọn vật liệu composite có mô đun đàn hồi tương đương mô răng tương ứng Trong nghiên cứu này, chúng tôi sử dụng Composite Nanofill Filtek có mô đun đàn hồi, Bulk Fill của hãng 3M, Hoa Kỳ gần với cấu trúc ngà răng (17 Gpa) 103 đáp ứng yêu cầu trên
Tạo xoang trám: xoang loại II được chọn cho nghiên cứu do có thể làm yếu cấu trúc răng còn lại Xoang loại II với sự di động ít hơn của các thành xoang làm ứng suất gia tăng, dễ dẫn đến thất bại của sự dán với sự hình thành vi kẽ Ứng suất co trùng hợp bị ảnh hưởng bởi yếu tố C của xoang Những xoang có yếu tố C cao, ứng suất được giải phóng do sự chảy bị giới hạn nghiêm trọng và ứng suất co có thể vượt quá độ bền dán 104 Mức độ chuyển đổi cũng như độ sâu trùng hợp của vật liệu dường như cũng ảnh hưởng sự phát triển ứng suất, có thể ảnh hưởng chất lượng dán ở giao diện phục hồi Tuy nhiên xoang loại II được tạo có kích thước khác nhau trong từng nghiên cứu, thường có chiều sâu 2 mm cho các composite không phải loại một khối, chiều ngoài-trong và gần-xa giống nhau Nghiên cứu chúng tôi tạo xoang loại II có chiều sâu 2 mm, chiều ngoài-trong 2 mm và chiều gần-xa là 2 mm.
Giao diện nhựa – men răng
Việc xử lý bề mặt ảnh hưởng đáng kể đến độ bền dán của composite với men Trên men thì lượng Hap cao hơn rất nhiều so với ngà Các nghiên cứu được thực hiện để tìm cách lý giải và đi đến kết luận rằng độ bền dán thấp trên men của các loại keo dán tự xoi mòn “nhẹ” và keo dán thông dụng có thể do sự hiện diện của lớp mùn sau quá trình mài sửa soạn 27 Đối với quy trình dán xoi mòn – và – rửa, tác nhân xoi mòn là axit phosphoric có nồng độ từ 35 - 37% khi tiếp xúc với bề mặt men răng đủ thời gian sẽ khử khoáng tinh thể Hap để tạo ra các lỗ rỗ trên bề mặt đã được khử Vì vậy, trong hệ thống keo dán xoi mòn – và - rửa truyền thống, có sự trộn lẫn giữa phân tử nhựa của lớp keo dán và lớp men, các đuôi nhựa này được vùi vào lớp men thông qua lực mao dẫn Thông qua quá trình trùng hợp chúng sẽ tạo ra những đuôi nhựa có dạng hình trụ đan xen sâu vào trong lớp men, tạo ra lớp liên kết vi lưu cơ học vững chắc khó bị thoái hóa Nhiều nghiên cứu cho rằng giao diện nhựa – men răng bền vững giúp bảo vệ toàn bộ lớp lai nói chung 105 Hình 4-4 cho thấy bề mặt men được sửa soạn bằng giấy nhám có độ nhám 600 grit, với một lớp mùn bao phủ toàn bộ bề mặt được xoi mòn bởi MDP Chất lót chứa MDP được sử dụng tạo nên bề mặt men được xoi mòn nông, có hình dạng lỗ rỗ tổ ong do sự khử khoáng các lăng trụ men (Hình 4-5) Khi bề mặt men được xử lý bằng chất lót có chứa Phenyl-P, bề mặt men bị ăn mòn sâu hơn với độ nhám tổng thể tăng lên rõ ràng dọc theo toàn bộ bề mặt trụ men, tạo ra những khoảng gian tinh thể lớn hơn
Kết quả quan sát dưới kính hiển vi điện tử cho thấy keo dán tự xoi mòn Clearfil
SE Bond và keo dán thông dụng Scotchbond Universal khi sử dụng ở chế độ tự xoi mòn trên men tạo ra giao diện dán không tốt trên men răng Lớp lai tạo ra rất mỏng (lần lượt là 0,98 àm và 1,27 àm, rất thấp so với nhà sản xuất cụng bố lần lượt là 1,22 àm và 7,41 àm khi sử dụng ở chế độ xoi mũn – và - rửa hoặc xoi mũn men răng chọn lọc), lớp lai rất phẳng, không thấy nhiều liên kết vi lưu cơ học, các đuôi nhựa tạo ra không xâm nhập được vào lớp men Trái với hệ thống dán xoi mòn-và- rửa với axit phosphoric hoạt động rất tốt cho việc khử khoáng bề mặt, tạo điều kiện hình thành lớp lai, hệ thống tự xoi mòn sẽ xoi mòn men răng ở mức độ rất yếu, dựa trên độ giá trị pH của keo dán Trong đề tài này, keo dán tự xoi mòn hai bước Clearfil SE Bond có độ pH là 2 và keo dán thông dụng Scotchbond Universal có pH là 2,7 theo công bố của nhà sản xuất 106,107 nên so sánh về mức độ không thể nào sửa soạn bề mặt men răng thuận lợi cho sự đan xen của phân tử nhựa vào lớp men để tạo thành đuôi nhựa
Không có một loại keo dán tự xoi mòn nào dù là một bước hay hai bước có thể sửa soạn bề mặt men tốt hơn axit phosphoric 37% Sự khác biệt về hình thái của men giữa hai hệ thống tự xoi mòn và xoi mòn - và - rửa đã được nghiên cứu rất rõ Hình thái bề mặt của men răng khi xử lý bằng các loại keo dán tự xoi mòn có mức độ pH khác nhau, so sánh với giao diện được xử lý bằng axit phosphoric, đồng thời tìm mối liên hệ giữa các hình thái này và độ bền dán 29 Nhóm nghiên cứu kết luận rằng việc xử lý bằng axit phosphoric 37% trong 20 giây sẽ tạo ra một giao diện cực kì thuận lợi, nhiều lỗ rỗ bề mặt, bộc lộ trụ men và lấy sạch hoàn toàn lớp mùn Trong khi đó, keo dán tự xoi mòn có mức pH = 2 (Clearfil SE Bond) cho hình ảnh bề mặt men răng tương đối phẳng với bề mặt lỗ rõ nông, đồng thời lớp mùn vẫn còn hiện diện rõ Keo dán tự xoi mòn hầu như không tạo được các liên kết dán vi cơ học lên men Một số nghiên cứu trên răng thật ở lâm sàng đánh giá các phục hồi trực tiếp composite cũng cho kết quả keo dán tự xoi mòn có tỷ lệ thất bại trên men răng cao hơn so với các loại keo dán xoi mòn ba bước Thật vậy, khả năng khử khoáng men răng để tạo bề mặt dán có nhiều lỗ rỗ không phải là yếu tố duy nhất xác định hiệu quả của một loại keo dán Keo dán tự xoi mòn có mức “mạnh” tạo ra bề mặt men thuận lợi, tuy nhiên vẫn không lấy sạch lớp mùn, thua kém nhiều so với axit phosphoric 37% Vì thế với độ pH nhẹ của keo dán thông dụng Scotchbond Universal là 2,7 tạo ra liên kết dán rất yếu với men răng, phản ánh thông qua độ bền dán men răng là 22,43±10,84 thấp hơn rất nhiều so với khi xoi mòn bằng axit phosphoric 37% 108
Tuy nhiên, nghiên cứu này của chúng tôi đã xác nhận các nghiên cứu trước đây và chứng minh rằng keo dán tự ăn mòn nhẹ Clearfil SE Bond (Kuraray), có khả năng đạt được liên kết mạnh mẽ với men răng dù có hoặc không có bước xoi mòn chọn lọc 109 Điều này đặc biệt rõ ràng khi keo dán tự xoi mòn hai bước Clearfil SE Bond tạo ra độ bền dán trượt trung bình gần tương tự như nhóm xoi mòn – và – rửa Hiệu quả liên kết của Clearfil SE được cho là có liên quan đến việc tách các đơn phân tử axit trong lớp lót của nó khỏi lọ chất dán, cũng như thành phần cụ thể của nó bao gồm methacryloxydecyl phosphate (MDP) Các keo dán thông dụng bao gồm keo dán thông dụng Scotchbond Universal mà chúng tôi sử dụng trong nghiên cứu này cũng chứa MDP, tuy nhiên, do các thành phần xoi mòn, lót và dán được kết hợp với nhau nên độ bền dán cuối cùng có thể bị giảm đi Tác giả Sandra và cộng sự đã so sánh các hệ thống tự xoi mòn có độ pH khác nhau và xác định mối tương quan với độ bền dán trên men răng 29 Kết quả là mặc dù keo dán Clearfil™ SE Bond (pH = 2) hầu như chỉ tạo được rải rác các điểm vi lưu cạn trên bề mặt men, nhưng lại cho độ bền dán cao hơn có ý nghĩa thống kê (20,5 MPa) so với các loại keo dán tự xoi mòn có pH thấp hơn (pH = 1,5 và < 1) Vì vậy, ngoài khả năng thay đổi bề mặt men răng, các yếu tố khác như độ nhớt, sức căng bề mặt, cách thức tương tác hóa học của đơn phân tử với men răng, tỷ lệ nước… cũng cần được cân nhắc khi đề cập đến hiệu quả dán
Với chất nền ngà răng, ABRZ nằm bên dưới lớp lai đã được xác nhận quan sát được trong một số loại keo dán tự xoi mòn 10 Mặc dù cơ chế hình thành vẫn chưa rõ ràng, người ta cho rằng sự xâm nhập của các đơn phân tử vào mô răng bên ngoài lớp lai và tương tác hóa học giữa các đơn phân tử chức năng và Hap có thể góp phần hình thành ABRZ ABRZ quan sát thấy trên men răng trong nghiên cứu này có thể có bản chất tương tự như những gì được báo cáo đối với ngà răng Tuy nhiên, cần lưu ý sự khác biệt giữa ngà răng và men răng, lớp lót tự xoi mòn sẽ loại bỏ lớp mùn và khử khoáng nhẹ nhàng ở ngà răng bên dưới, để lại một số tinh thể Hap còn dư trong mạng lưới collagen ngà răng 9 Mặt khác, men răng có hàm lượng khoáng chất cao hơn với cấu trúc ma trận khác với mạng lưới collagen của ngà răng Các tinh thể Hap được phân bố khắp bề mặt vừa được khử khoáng Do đó, đối với ngà răng, ABRZ hình thành dưới lớp lai, trong khi đối với men răng, ABRZ không nằm dưới lớp lai mà nằm ở dao diện nhựa – mô răng, và nó không bị hòa tan sau thử thách axit-bazơ Việc chuẩn bị mẫu để quan sát với KHV SEM của ABRZ ngà răng đã được Inoue thiết lập và áp dụng thành công trong nhiều nghiên cứu 50 Tuy nhiên, liên quan đến sự khác biệt về cấu trúc giữa men và ngà, cần thiết lập các quy trình thí nghiệm mới để quan sát ABRZ trên men Trong nghiên cứu này, ABRZ trên men răng có thể được phát hiện rõ ràng trong nhóm keo dán Clearfil SE Bond (Hình 4-3), giúp bảo vệ lớp lai khỏi các tác nhân axit-bazơ có tính phá hủy Khu vực xoi mòn hình phễu đã được ghi nhận tại khu vực yếu dễ bị tấn công bởi axit-bazơ trên bề mặt lớp lai (Hình 4-2) Ngược lại, ABRZ được tạo thành ở men răng giúp bảo vệ giao diện dán khỏi sự tấn công của axit (Hình 4-3)
Hình 4-2: Lớp lai bị phá hủy khi không có ABRZ bảo vệ 8
Trong keo dán tự ăn mòn, các đơn phân tử nhựa thâm nhập vào men khử khoáng và bao bọc các tinh thể Hap, do đó bảo vệ các tinh thể này khỏi sự tấn công của axit Tuy nhiên, khi bề mặt men không được xử lý tốt, tinh thể ít được bảo vệ hơn và do đó dễ bị hòa tan nhanh hơn bằng axit MDP đã được phát hiện là tương tác hóa học với Hap mạnh mẽ và ổn định 4 Nó có khả năng hình thành liên kết ion mạnh với canxi, sản xuất muối MDP-canxi có độ hòa tan thấp hơn Tuy nhiên, nhược điểm lớn là hệ thống keo dán tự xoi mòn hoặc keo dán thông dụng (dùng phương pháp tự xoi mòn) với pH thấp xử lý bề mặt men ở một độ sâu thấp, làm cho các phân tử MDP không thâm nhập sâu vào được, kết quả là bề dày lớp ABRZ tạo được rất mỏng
Hình 4-3: ABRZ trên men răng
ABRZ được quan sát thấy ở men răng (mũi tên cam) giúp bảo vệ lớp lai khỏi sự tấn công của axit
Hình 4-4: Hình ảnh SEM bề mặt men được xử lý bằng axit phosphoric 37% trong
15s (trái) và prime của Clearfil SE Bond (phải) (x500).
Hình 4-5: Hình ảnh men răng được xoi mòn bởi MDP
Giao diện nhựa – ngà răng
Hình 4-6: Cấu tạo hóa học phân tử MDP Độ dày lớp lai
Ngà răng là mô được đặc trưng bởi hàm lượng hữu cơ cao, bao gồm các sợi collagen và nguyên bào ngà trong ống ngà (chứa đầy dịch ngà luôn ẩm ướt) Quá trình ăn nhai, các lực sinh lý trong miệng có thể làm giảm độ bền liên kết của bề mặt tiếp xúc nhựa - ngà răng Dán trên nền ngà khó khăn hơn dán trên nền men do thành phần hữu cơ, tính thấm của ngà răng và cấu trúc hình ống Một số nghiên cứu đã chứng minh rằng keo dán thông dụng hiện đại sử dụng ở chế độ tự xoi mòn và keo dán tự xoi mòn có thể đạt được sự liên kết tốt với ngà răng Đối với hệ thống dán tự xoi mòn, độ dày lớp lai được quyết định bởi các đơn phân tử có tính axit trong thành phần keo dán Nhiều loại đơn phân tử được tổng hợp và gần đây được sử dụng trong keo dán tự xoi mòn của các hãng như: 10-methacryloyloxydecyl dihydrogen phosphate (10-MPD), 4-methacryloxyethyl trimellitic axit (4-MET) hoặc 2-methacryloxyethyl phenyl hydrogen phosphate (Phenyl-P) Chúng là những đơn phân tử chức năng lưỡng tính đa năng với một đầu là nhóm methacrylate kỵ nước (có khả năng liên kết hóa học với các chất trám và xi măng nền methacrylate) và đầu kia là nhóm photphat phân cực ưa nước (có khả năng liên kết hóa học với mô răng, kim loại, và zirconia) Chỉ riêng thuộc tính này đã khiến nó được sử dụng trong keo dán “thông dụng” Những nhóm chức năng này có thể khử khoáng Hap hoặc cũng có thể dính hóa học vào Hap theo quan niệm AD (Dán - Khử khoáng) Nếu các nhóm chức năng này khử khoáng Hap sẽ tạo được lớp lai dày vài micromét có khung sợi collagen và canxium phốt phát Nếu các nhóm chức năng dính vào Hap sẽ tạo lớp lai giàu Hap có độ dày nhỏ hơn 1 micromét và các sợi collagen không bị bộc lộ nhiều Bên cạnh các nhóm chức năng có tính axit thì cấu trúc hóa học của nhóm đệm cùng với chiều dài phân tử của nhóm cũng xác định tiềm năng phản ứng hóa học như thế nào với Hap và ngà răng Phân tử 10-MPD là một phát hiện mới, gần đây được sử dụng với vai trò là đơn phân tử chức năng có tính axit trong hệ thống keo dán tự xoi mòn Từ những hiểu biết về cơ chế phản ứng hóa học của 10-MDP với Hap người ta đã mô tả được tác dụng của đơn phân tử này trong việc bảo vệ liên kết dán 110 Nghiên cứu đi đến kết luận rằng muối MDP-Ca có độ hòa tan khá cao nên theo quan niệm AD sẽ đi theo kiểu 2: khử khoáng Canxi, tương tự như các đơn phân tử chức năng phenyl-P, 4-MET và GPDM Một yếu tố quan trọng khác liên quan đến MDP là nó có khả năng hình thành liên kết hóa học với Hap trong ngà răng Hap còn sót lại xung quanh các sợi collagen sau khi khử khoáng đóng vai trò là thụ thể cho tương tác hóa học với MDP và sau đó góp phần vào hiệu suất dán Đã có báo cáo cho rằng độ tinh khiết của MDP và nồng độ của nó trong chất kết dính ảnh hưởng đến khả năng liên kết hóa học 7 Có tác giả nghiên cứu trước đây đã báo cáo rằng nhà sản xuất keo dán tự xoi mòn Clearfil SE Bond sử dụng MDP có độ tinh khiết cao hơn các nhà sản xuất khác 7 , điều đó cũng lý giải một phần trong nghiên cứu này, độ bền dán của keo dán tự xoi mòn Clearfil SE Bond “có vẻ” tốt hơn keo dán thông dụng Scotchbond Universal Các nhà sản xuất không cung cấp thông tin chi tiết về nồng độ chính xác của MDP và cũng không báo cáo về độ tinh khiết của nó, do đó cần phải thực hiện thêm các nghiên cứu khác để đo các đặc tính này nhằm đưa ra tuyên bố rõ ràng về ảnh hưởng của nồng độ và độ tinh khiết của đơn phân tử này
Trong nghiên cứu của chúng tôi độ dày trung bình của lớp lai được hình thành từ keo dán tự xoi mòn Clearfil SE Bond và lớp lai được tạo thành từ keo dán thông dụng Scotchbond Universal tương đối mỏng (lần lượt là 0,98 àm và 1,27 àm) nhưng độ bền dán ngà răng in vitro sau khi thực hiện chu trình nhiệt vẫn rất cao (lần lượt là 22,43 Mpa và 20,89 Mpa), gần tương đương với độ bền dán ngà răng tức thời (29,9 ± 2,6 Mpa) của keo dánthông dụng OptiBond (Kerr, Hoa Kỳ) dùng ở chế độ xoi mòn - và - rửa Sự hình thành lớp lai đóng vai trò quan trọng trong quá trình dán ngà Trong nghiên cứu của chúng tôi, độ dày trung bình của lớp lai được hình thành từ keo dán tự xoi mòn Clearfil SE Bond mỏng hơn so với lớp lai được tạo thành từ keo dán thông dụng Scotchbond Universal, và sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê Lớp lai dày và đồng dạng được cho là sẽ tạo độ bền dán tốt, tuy nhiên, điều này lại không phải là quan hệ tuyến tính 111 Bề dày của lớp lai phụ thuộc nhiều vào độ pH của keo dán Các keo dán hiện nay có thể được phân loại là mạnh (pH <
1), nhẹ (pH = 2) hoặc siêu nhẹ (pH > 2,5), dựa trên độ axit của chúng Ozmen và cs,
2015 đánh giá độ bền dán ngà răng của keo dán tự xoi mòn với các giá trị pH khác nhau, đã phát hiện ra rằng keo dán có độ pH thấp hơn không có độ bền dán ngà răng cao hơn 112 Tsai và cs, 2011 cũng đã chứng minh rằng keo dán tự xoi mòn có độ pH tương đối cao mang lại độ bền liên dán ngà răng tốt 113 Nhiều nghiên cứu đã chỉ ra bề dày của lớp lai của keo dán thông dụng Scotchbond Universal dày hơn đáng kể các loại keo dán khác Tuy nhiên, không tìm thấy mối tương quan giữa độ dày lớp lai và giá trị độ bền dán của các loại keo dán được thử nghiệm 114 Thực sự độ bền dán giữa composite và ngà răng không phụ thuộc vào độ dày của lớp dán và/hoặc lớp lai Ngược lại, chất lượng của lớp lai mới là yếu tố quan trọng có thể ảnh hưởng đến độ bền liên kết ngà răng
Hơn nữa, chuỗi carbon dài của đơn phân tử khiến nó khá kỵ nước 10-MDP là chất kỵ nước nhất trong số tất cả các đơn phân chức năng thường được sử dụng trong keo dán nha khoa Điều này có thể quan trọng về tính bền, vì sự thủy phân của bề mặt dán theo thời gian được coi là một trong những nguyên nhân chính gây ra sự thất bại phục hồi Một khi chúng được trùng hợp, các đơn phân tử kết dính ngăn cản sự hấp thu của nước Bản chất kỵ nước của 10-MDP cũng làm cho nó tương đối ổn định trong dung dịch, điều này quan trọng về sự tồn tại lâu dài của phục hồi 38
Cả hai loại keo dán trong nghiên cứu này cho thấy hình ảnh các đuôi nhựa hình thành rải rác, ngắn, đường kính nhỏ, có thể quan sát thấy có nhiều đuôi nhựa hình thành không hoàn toàn và chúng đều chỉ có khả năng thâm nhập chỉ vài micron vào ống ngà Đặc điểm đường kính rất nhỏ, khó quan sát và tương đối ngắn có thể do nguyên nhân ở mức độ axit nhẹ của keo dán tự xoi mòn Mức axit nhẹ này không đủ để khử khoáng ngà cũng như làm rộng khoảng collagen, kết hợp với lớp mùn tạo ra trong quá trình sửa soạn ngà răng sẽ ảnh hưởng lên khả năng thấm nhập của các đơn phân tử keo dán vào sâu trong lớp ngà Ngoài ra, hình ảnh đặc biệt là các khoảng trống hay sự hình thành đuôi nhựa không hoàn toàn, quan sát được ở keo dán tự xoi mòn chứng tỏ có sự không đồng nhất khi thấm nhập keo dán vào ống ngà Một lý do khác có thể giải thích cho hiện tượng hình thành không hoàn toàn của các đuôi nhựa là do sự bay hơi không hoàn toàn của dung dung môi và nước khỏi bề mặt ngà răng Do đó, chúng tôi đưa ra giả thuyết rằng tất cả các loại keo dán tự xoi mòn tương tự như vậy có thể hòa tan đủ lớp mùn và cho phép chất nhựa đi vào ống ngà
Tuy nhiên, kết quả về độ dài đuôi nhựa không quá khác biệt đáng kể Những phát hiện này có thể được giải thích là do hai loại keo dán được thử nghiệm đều có độ pH nhẹ Do đó, chúng tôi giả thuyết cho rằng đường kính cũng như chiều dài đuôi nhựa không đóng vai trò quá quan trọng với độ bền của liên kết ngà răng Thật vậy, trong nghiên cứu của chúng tôi keo dán tự xoi mòn Clearfil SE Bond tạo ra những đuôi nhựa có đường kính và chiều dài nhỏ hơn các đuôi nhựa được tạo thành từ keo dán thông dụng Scotchbond Universal Tuy nhiên độ bền dán ngà răng vẫn tương đương, thậm chí độ bền dán men răng còn vượt trội, các giá trị này đều thống nhất với các nghiên cứu của các tác giả trước đó 89 Kết quả thống kê cũng cho thấy rằng sự khác biệt về độ dài đuôi nhựa trung bình đo được của hai loại keo dán là không có ý nghĩa Tuy nhiên, tất cả các nhóm đều có độ lệch chuẩn rất lớn, gợi ý sự phân tán của các giá trị chiều dài đuôi nhựa đo được Điều này có thể được giải thích rằng độ dài các đuôi nhựa quan sát được hoàn toàn phụ thuộc vào chiều hướng của lát cắt Khi lát cắt có chiều hướng thuận lợi, các đuôi nhựa xuất hiện sẽ rất rõ ràng và dài; ngược lại, các đuôi nhựa xuất hiện ít và ngắn Cũng chính vì lý do trên mà có rất ít nghiên cứu đặt mục tiêu xác định độ dài đuôi nhựa thấm nhập của các loại keo dán Tuy nhiên, những nghiên cứu mà chúng tôi tiếp cận được đều cho kết quả tương đối tương đồng với độ dài của đuôi nhựa được hình thành bởi hệ thống tự xoi mòn trong nghiên cứu của chúng tôi Các tác giả phát hiện 2-hydroxyethyl methacrylate 2-hydroxhethyl methacrylate (HEMA) và Bis-GMA được hòa tan trong dung môi hỗn hợp ethanol/nước, Hema dễ dàng xâm nhập vào các sợi collagen hơn Bis-GMA Hiraishi và cộng sự đã nghiên cứu sự tương tác liên kết của các đơn phân tử nhựa với atelocollagen và phát hiện ra rằng 10-MDP có tương tác kỵ nước tương đối ổn định với collagen Ngược lại, Hema không tương tác với collagen 115 Đối với keo dán có chứa 10-MDP, sự tương tác của MDP với Hema trong dung dịch có thể tạo ra các tập hợp làm giảm tính kỵ nước của MDP và làm ảnh hưởng đến tương tác MDP-collagen, khiến các sợi collagen không được thẩm thấu hoàn toàn bởi MDP hoặc Hema 116 Chúng tôi suy đoán rằng khi sử dụng keo dán thông dụng chứa 10-MDP này ở chế độ xoi mòn - và - rửa, sự xâm nhập của đơn phân tử chức năng vào mạng lưới collagen khử khoáng là không nhất quán, dẫn đến mức độ phân bố đơn phân tử chức năng khác nhau trong các sợi collagen
Một đặc điểm quan trọng khác là keo dán thông dụng chứa 10-MDP (All-Bond Universal, Clearfil Universal Bond và Scotchbond Universal) không thể hiện độ bền dán tốt hơn keo dán thông dụng không chứa 10-MDP Việc đưa 10-MDP vào keo dán khi dán ngà răng được cho là giúp độ bền liên kết tốt hơn 117 Do tính ổn định thủy phân của muối 10-MDP-Ca, lớp nano được cho là có khả năng kháng axit, bảo vệ collagen bị khử khoáng một phần từ sự suy thoái Chúng tôi không thể quan sát quá trình thủy phân lớp nano trong nghiên cứu hiện tại vì tính phức tạp của nó Đối với Scotchbond Universal, mức giảm độ bền dán theo thời gian không khác biệt đáng kể
Hình 4-6: Không có ABRZ, lớp lai bị phá hủy dưới tác động của axit – bazơ
Hình 4-7: ABRZ trên ngà răng (mũi tên cam)
Vùng kháng axit – bazơ Đã có báo cáo rằng MDP có khả năng hình thành liên kết ion mạnh với canxi do tốc độ hòa tan tương đối thấp của muối MDP-Ca MDP được đánh giá là đơn phân tử hứa hẹn nhất cho liên kết hóa học với Hap của ngà răng Tác dụng hóa học của MDP với mô răng tạo lớp nano ở giao diện MDP/Hap có thể cung cấp các đặc tính đa chức năng cho giao diện, đặc biệt là mang lại lợi ích trực tiếp cho độ bền của liên kết (Koshiro và cộng sự, 2006) Thật vậy, bản chất kỵ nước mạnh mẽ của cấu trúc lớp nano có thể giúp bảo vệ lớp lai được hình thành chống lại sự phân hủy sinh học (Breschi và cộng sự, 2008) Bên cạnh việc bảo vệ trực tiếp collagen chống lại sự thoái hóa sinh học, nó góp phần tạo ra ABRZ có khả năng chống lại sự hòa tan axit tốt hơn Quả thực, keo dán có chứa MDP cho thấy hiệu quả dán tốt và khá nhất quán trong nhiều nghiên cứu lâm sàng và trong phòng thí nghiệm, đặc biệt là về độ bền dán lâu dài
Keo tự xoi mòn hai bước chứa đơn phân chức năng khác nhau, MDP được sử dụng để đánh giá sự tạo thành vùng kháng axit-bazơ trên ngà răng (ABRZ) Người ta kết luận rằng MDP trong lọ chất lót và/hoặc lọ chất dán là cần thiết để tạo ra ABRZ ABRZ không được tạo ra trong hệ thống dán chỉ 2-methacryloyloxyethyl phenyl phosphate (Phenyl-P) mà không có MDP gây hiện tượng xói mòn hình phễu được tạo ra dọc theo bề mặt tiếp xúc giữa mô răng và keo dán MDP trong keo dán sẽ khử ion bằng cách sử dụng nước bên trong ngà răng và có tương tác với ngà răng mạnh hơn ở độ sâu lớn Hơn nữa, bằng cách bổ sung MDP, tính ưa nước của nhựa liên kết sẽ được cải thiện, cho phép sự xâm nhập của phân tử nhựa vào ngà răng đã được phủ lớp lót Do đó, MDP trong keo dán có thể củng cố ngà răng chống lại sự tấn công của axit và ngăn ngừa sự hình thành tổn thương ăn mòn hình phễu bằng cách tạo ra ABRZ (Hình 4-7)
Theo kết quả của nghiên cứu này, ABRZ chỉ quan sát được keo dán Clearfil SE được cho là có liên quan đến việc tách các đơn phân tử axit trong lớp lót của nó khỏi lọ chất dán, cũng như thành phần cụ thể của nó bao gồm methacryloxydecyl phosphate (MDP) Các keo dán thông dụng bao gồm keo dán thông dụng Scotchbond Universal mà chúng tôi sử dụng trong nghiên cứu này cũng chứa MDP, tuy nhiên, do các thành phần xoi mòn, lót và dán được kết hợp với nhau nên độ tương tác giữa MDP và mô răng có thể bị giảm đi, dẫn tới việc không hình thành được lớp ABRZ ABRZ chỉ được phát hiện trong nhóm keo dán tự xoi mòn, không được phát hiện trong nhóm xoi mòn – và - rửa Inoue và cộng sự 11 đã chứng minh rằng không thể phát hiện được ABRZ trong keo dán xoi mòn – và – rửa khi dán ngà răng Họ tin rằng điều này là do tính xoi mòn mạnh của axit phosphoric làm hòa tan chất nền ngà răng và không để lại tinh thể apatit còn sót lại ở ranh giới có thể phản ứng với các phân tử chức năng xâm nhập Mặt khác, họ đã chứng minh rằng trong chất kết dính tự xoi mòn, các đơn phân tử chức năng xâm nhập vào ngà răng đã khử khoáng và tác dụng “bao bọc”, “đóng rắn” các tinh thể Hap, tạo thành vùng kháng axit-bazơ do đó bảo vệ các tinh thể khỏi sự tấn công của axit Trong nghiên cứu này keo dỏn tự xoi mũn Clearfil SE Bond đó tạo ra vựng ABRZ dày khoảng 0,5 àm Kết quả này tương tự với nghiên cứu trước đây đã đánh giá giao diện dán của Clearfil
SE Bond 118 Độ dày của ABRZ được tạo ra trong hệ thống keo tự ăn mòn bị ảnh hưởng bởi các đơn phân tử chức năng, loại dung môi, độ pH của keo dán, sự tồn tại của thành phần giải phóng florua Tsujimoto và cộng sự 119 đã báo cáo rằng giá trị độ dày của ABRZ ngà răng do tạo ra là khoảng 0,6 àm ở phần giữa Hơn nữa, ABRZ ngà răng cho thấy độ dày tăng lên giống như có độ dốc bắt đầu từ phần tổn thương do axit, có thể là do nó giải phóng florua Sự hình thành độ dốc như vậy không được quan sát thấy trong nghiên cứu của chúng tôi, vì hệ thống dán thử nghiệm không chứa florua Lớp nano dường như ít nổi bật hơn đối với Scotchbond Universal (3M ESPE), quan sát cả trên SEM và TEM đều cho thấy mối tương quan như vậy
Sự khác biệt về thành phần thực tế và nồng độ MDP có thể khác nhau có thể giải thích sự khác biệt này trong lớp nano được ghi nhận cho hai loại keo dán được thử nghiệm Ngoài ra, chất đồng trùng hợp axit polyalkenoic trong Scotchbond Universal có thể đã cạnh tranh với MDP để giành được các vị trí liên kết Ca tương tự tại Hap Yoshihara và cộng sự, 2011 cho rằng cường độ phân lớp nano tỷ lệ thuận với nồng độ MDP Mặt khác, keo dán tự xoi mòn Clearfil SE Bond bao gồm quy trình hai bước, với lớp lót lỏng và linh hoạt hơn nhiều và do đó có thể có hoạt tính hóa học cao hơn Rất có thể, chính lớp lót đã tạo ra lớp nano góp phần tạo ra ABRZ Scotchbond Universal (3M ESPE) là keo dán một lọ và do đó chứa MDP ít hơn tương ứng Phân lớp nano được quan sát tương đối dễ dàng về mặt siêu cấu trúc khi quan sát lớp lai Đối với Scotchbond Universal (3M ESPE), lớp phủ nano được tìm thấy chủ yếu ở gần các ống ngà Yoshihara và cộng sự cũng cho rằng nồng độ HEMA cao trong Scotchbond Universal cản trở hoạt động của đơn phân tử MDP 120 Ở một góc nhìn khác, Tian và cộng sự, 2015 đặt câu hỏi liệu lớp nano tạo bởi muối 10-MDP-Ca có thực sự bảo vệ được lớp lai khỏi bị thoái hóa trong các tình huống lâm sàng hay không bởi vì chúng ít được quan sát thấy trên toàn bộ lớp lai mà chỉ ở một số điểm nhỏ Các muối 10-MDP-Ca chỉ sắp xếp trật tự và chặt chẽ trong phạm vi ngắn, nhìn tổng thể vẫn là vô tổ chức Hơn nữa, liên kết ion 10-MDP-
Ca nằm trong miền ưa nước có thể bị thủy phân chậm theo thời gian, đặc biệt là trong môi trường axit và trong điều kiện khắc nghiệt Điều này có thể giải thích tại sao lớp nano chưa bao giờ được quan sát bằng TEM trong các mẫu đã khử khoáng hoàn toàn 3
