báo cáo thực hành vi sinh đại cương 2

Cách sử dụng pipetman và một số thiết bị trong phòngthínghiệmVisinhvật mứcđộantoàncấp1theotìnhhìnhthựctếthiếtbịcủaphòngthựchànhYêu cầu nội dung trình bày với pipetman và một số thiết bị

BÁOCÁOTHỰCHÀNH VISINHĐẠICƯƠNG

TP Hồ Chí Minh,2023

NGHIỆMVISINHVẬT1.1 Antoànphòngthínghiệmvisinhvậthọc

1.1.1 Cáccấpđộantoàncủaphòngthínghiệmvisinhvật(môtảvắntắt)

Phòng thí nghi m an toàn cệ ấp 1 (Biosafety Level 1_BSL-1): là phòng thí nghiệm sinh học đượctrang b máy móc thi t bị ệ ịởmứ ơ bc c ản để ụcvụ ảngdạytrunghph gi ọc,đạihọc.Trongđó,các

đố ượi t ng vi sinh v tậ được th ngườ được biết tr c và an toàn Điều ki n thướ ệ ực hành th ngườ

khôngđượctrangbị cấpcứu,thườngcóbồnrửavàtủ yt ế

Phòng thí nghiệm an toàn sinh học cấp 2 (Biosafety Level 2_BSL-2): được trang trị máy mócthiết bị ởmức cơ ản để ục vụb ph giảng dạy đại học và nghiên cứu Trang bị bảo vệ cá nhânđượ ăc t ng c ng chẳng hạn như t m chắn tia n c, bảo vệ mặt, áo choàng và g ng tay đểườ ấ ướ ă

giảm nguy cơnhiễm vi sinh vật qua khí dung, giọt bắnhoặctiếpxúctrự ếctipquada.Ngoàira,phòngthínghiệm đượ ắp đặtbồnrửatayvàxử lýchấtthải đểgiảmônhiễmmôitr ng.cl ườ

Phòng thí nghiệm an toàn sinh học cấp 3(BiosafetyLevel3_BSL-3):đượ ắ đặcl p ttrangthiếtbịphù hợpchoviệcchẩn đoán,nghiêncứucácvisinhvậtgâybệnhtrongđiềukiệnphòngngừaantoàn sinh học nh : qu n áo bư ầ ảo hộđặc biệt làm việc trongphòngcóhệ thốngki msoátthôngể

tin và luồng khôngkhítheoápsuấtâmđểtránhvisinhvậtgâyb nhthoátkhệ ỏivòngthínghi m.ệCác phòng còn được ngăn cách qua nhiề ớp phòng khácnhau.u l Điềunàygiúpgiảmthiểum cứ

độnhiễmquakhídung,giọtbắn…

Phòng thí nghiệm an toàn sinh học cấp 4(BiosafetyLevel4_BSL-4):đượ ắ đặcl p ttrangthiếtbịphù hợp cho việc chuẩn đoán, nghiên cứu vi sinh vật nguy hiểmcótínhtruyềnnhiễmcao(HIV,Covid-19,Ebola, ).…

1.1.2 QuytắcantoàncủaphòngthínghiệmVisinhvậthọcmứcđộantoàncấp1

-Khilàmviệctrongphòngthínghiệmvisinhvậthọcph ituyả ệt đốigiữ vệ sinh,tôntrọngtính

ngănn pvàtr ttắ ậ ự ủaphòngthínghi m.c ệ

-M icánhânhoỗ ặcm inhómlàmviỗ ệc độcl p,chậ ỉđượcsử dụngcácdụngcụ,trangthiếtbị

củanhóm,n uthi uphế ế ảihỏicánbộphụ tráchhoặcgiáoviênphụtráchkhôngđượctự ýsử

-HộpPetriđã đổmôitrườnghoặcsaunuôicấyVSV,khôngmở nắp,dùngtayđểsờ vàdùngm iũđểngửi.

-Khil taylàm VSVranỡ đổ ơilàmviệc,dùngkhănhaygiấytẩmcồn70%đểlauvàlausạchl iạ

-Tấtcả cácch tth ivàmôitrấ ả ườngchứahoặcnhi mVSVcễ ần đượchấpkhử trùngtrướckhi

đemđổvàothùngrác.Cácdụngcụ nhiễmVSVcần đượcngâmtrongdungdịchsátkhuẩntr cướkhir a.ử

-Khôngđổthạchvàobồnrửavàốngthoátn c.ướ

-Saukhilàmviệcxong,phảivệ sinhnơilàmviệccủamình,vệsinhcácdụngcụ máymóc,d ngụ

cụ thínghiệm.Rửataysạchvàsáttrùngbằngcồntr ckhirakhướ ỏiphòng

1.2.Cácdụngcụ thườngdùngtrongphòngthínghiệmVisinhv thậ ọcmức độantoàncấp1

(trìnhbàytheoth ctự ếđược đượchọcvàthựchànhtrênl p):ớ

Dụngcụ ằngthủytinh:b

Ốngnghiệm(testtubes): đượcdùngđểchứamôitr ngnuôic yvànuôiVSV.Môitrườngcóườ ấ

thể ở ạngl nghayr n.Mid ỏ ắ ệngốngnghiệmcóthểđược đậybằngnútbôngkhôngthấmn c,ướ

bằngsilicon,gi ynhômhaynấ ắpvặn.TrongtrườnghợpnuôicấyVSV,ngườitath ngsườ ử d ngụnútbôngthaychon pvắ ặn.KhiphântíchVSVthườngsử dụngốngnghiệmcónắ ặn để ạpv h n

ch viế ệcthoáth inơ ướclàmsailệchthể tíchtrongốngnghiệmphaloãngbậc10

ĐĩaPetri(Petridishes):Gồmnắplớn đậylênnắpnhỏ cóhìnhtròn,đườngkính6,8,10,12cm

ĐĩaPetriđượcgóilạ ằnggiấytrib ướckhiđemhấpkhửtrùngbằngnhiệt ẩmhaysấybằngnhiệt

khô.Hiệnnay,trênthịtrườngcócácloạiđĩaPetribằngnhựavôtrùngbánsẵn,rấttiệnlợivà

thườngđượcsử ụngtrongphòngphântíchVSV.Khácvới đĩathuỷ tinhcóthể táisử d ngd ụ

nhiềulần,đĩanhựa đượcchế ạo để ử ụng1l n.t s d ầ

Bìnhtamgiác(erlenmeyers):cònđượcgọilàbìnhnóndùngđểchứamôitr ngnuôicườ ấy(lòng

hayrắn)haydungmôi,hóachấttrongphachế môitr ng.ườ

Đènc n(Alcoholbunners):làloại đènđược được đốtbằngcồn90°,toànhiồ ệttạoramộtvùng

khônggianxungquanhvôtrùng.Đèncồncòncóthểđượcdùngđểkhử trùngcácloạiquec yấ

bằngcáchh hayơ đốttrênngọnlửa đènc n.ồ

3 Thực hành vi sinh vật học

Phiếnkính(lame)vàlákính(lamelle):Phiếnkínhlàmiếngthuỷ tinhhìnhchữnhật,cóđộtrongsuốtcao,dày2mmdùngể chứagiọtVSVở ạtrngtháisốnghaynhuộmmàukhiquansátchúng

bằngkínhhi nvi.ể

Lákínhlàmi ngthế ủytinhhìnhvuông,cóđộtrongsuốtcaodày0,1-0,2mmdùngđểđậylêngi tọVSVtrênphiếnkínhđểquansáttrạngtháisốngcủatế bàoVSV

Phiếnkínhlõm:Phiếnkínhlõmđượccấut obạ ằngthủytinh,trongsuốt,phả ữa đượckhoétgi

sâuhìnhcầulõm.Khisử dụngphiếnkínhnàyphả ếthợpvớilákínhoặik cphiếnkính.Phiếnkínhlõmđượcsử dụngtrongtiêubảnphòng m.ẩ

Phiếnkínhvàlákínhkhim imuavớ ề ần đượclàmsạchbằngcáchngâmtronNaOH10%trongc10phút,r ab ngnử ằ ước,rửabằngHCl20%vàsaucùngrử ạchbằngnướas c.Phiếnkínhđãsử

dụng quansátđể đểnhuộmmàucần đượcsử lýbằngcácngâmtrongdungdịchsulfochromate

Quecấythẳng:dùngđểcấy đâmsâutrongốngnghiệmthạch ng.đứ

Quecấyvòng:dùngcấyriatrênmặtthạchhayphânlậpVSVtrênbề mặtthạchhoặ ấcc y

Làloại ốnghútmáy,cóđộchínhxácđếnµL(tuỳtheoloại)dùngđểđịnhlượngmộtth tíchể

chínhxácdungd chVSV,môitrị ườngnuôicấy(lòng)haydungdịchhóachất.Micropipette

(pipetman)cónhiềuloại,mỗiloại đềucódảigiớihạndungtích,như:0,110,0µL;1–20µL;20–200µL;100–1000µL;1000–5000µLvà1000–10.000µL(1000µL=1mL).Tùytheohãngs nảxuấtmàquycáchdungtíchcóthayđổi.Trongdảidungtíchchophép,ng itacóthườ ểđi uề

chỉnhdungtíchchínhxácnhư mongmu n.Mố ỗiloạimicropipetteđềucóloại đầutipt ngươ

ứng

Cầnb mcơ ủamicropipettecóhainấcnênkhisử dụngcầnlưuý:(1)nhấnnấc1tươngứngv iớ

dungtíchđượcch nkhihútdọ ịch;(2)nhấnnấchaiấnvượtquánấc1đểđuổihế ịchcònmaotd

quản ởđầutip;(3)Khôngdùngmicropipetteđểhútcácloạihóachấtdễ bayhơi,như:axetic,

của thiết bị thực tế được sử dụng.

Cân(labscale):Thườngsử ụngloạicânkỹd thuật(loại2số ẻ)cóđộchínhxácđế0,01g.Khicầlxácđịnhmộtlượngchínhxác,ngườitadùngcânphântích(loại4số lẻ)cóđộchínhxã nđế

0,0001g(0,1mg).Câncầnphải được đặttrênbề mặtphẳng,tránhgiólùa,khôngbị rungl c.ắ

T củ ấyantoànsinhhọc (Biosafetycabinet)

T củ ấyantoànsinhh chaycònọ đượcgọilàtủ cấyvôtrùng,đượcdùngđểbảotínhvôtrùng

khithaotácvớiVSV.Luồngkhíápsuấtd ngtrongtươ ủ cấyvôtrđượclọcbằngmàngthôvà

mànglọctinh0,2µm.Trongt cóủ đènUV(UltraVioletkhử trùngmôitrườngkhôngkhívàbề

mặttrongtủ ấy.Trướckhithc ựchiện,bậtUVtừ 15-60phút,bênngoàitủ phải đượcchel iạ

bằngmàntốimàu

Nồihấp (autoclave)

Nồihấpkhửtrùnglàthiếtbị ắtbu cphb ộ ảicótrongPTNvisinhchophéptiêut tcấ ả cácd ngạ

sốngcủaVSV(tế bàosinhdưỡng,bàotử).Nồihấpcóc utấ ạo2lớpnêncókhả ăngchn ịu được

ápsuấtcao.Buồngkhử trùngcógắnvalvethoátkhí,ápnhiệtkế.Nguồn:Hướngdẫ ử d ngns ụ

nồih pvôtrùngES-215,ES-315,TomySeHình1.19.Nấ ồihấpkhử trùngKhisử dụngnêndùngnướccấthaynướcvôkhoángchâmvàonồi,tránhbcặn.N cphướ ải đượcchâmđếnmứcquy

định

Kínhhi nviquanghể ọc (opticalmicroscope):làhệ thốngdùngđểphóngđạihìnhnhVSV

Thườngđộphóngđạic akínhhi nviquangh ccóthủ ể ọ ể ừ vàichụclần đến1000l n.t ầ

Lòviba

Lòvibahaycòng ilàlòvisóngọ đượcsử dụngtrongcácphòngthínghiệmvisinhvậtchovi cệ

nấumôitr ngnuôic ycóchườ ấ ứaagarkhicầnphânchiavàocácvậtch akhácnhau.ứ

(PP_polypropilene)

5 Thực hành vi sinh vật học

1.2.1 Chuẩnbịdungdịchcồn70%từcồn96%

Yêuc un idungtrìnhbàytầ ộ ốithiểu:mụcđíchsử dụng,cáchchuẩnb ị

Tínhtoánsố lượngmldungdịchcồn 96đ độ ể hòatanthànhcồn70đ bộ ằngcáchápdụngcông

thức:(70x100ml)/99=72,9ml.Như vậytacần72,9mldungdịchcồntinhkhiết96%vàthêmvào27.1mlnướ ấcc t.Tađượctổnglà100mlcồn70độ

1.2.2 Sát khuẩn khu vực làm việc trước và sau khi tiến hànhthínghiệm(viếtsơđồvắntắtcácbướcthựchiện)

- Làmnútbôngốngnghiệm,bìnhtamgiác:

Bảng 1.2 Hình kết qủa làm nút bông của từng sinh viên trong nhóm

8 Thực hành vi sinh vật học

9 Thực hành vi sinh vật học

- Baogóigiấynắpốngnghiệm,bìnhtamgiác:

Bảng 1.3 Hình kết qủa bao giấy nắp ống nghiệm/bình tam giác của từng sinh viên trong nhóm

10 Thực hành vi sinh vật học

1.2.5 Cách sử dụng pipetman và một số thiết bị trong phòngthínghiệmVisinhvậtmứcđộantoàncấp1(theotìnhhìnhthựctếthiếtbịcủaphòngthựchành)

Yêu cầu nội dung trình bày với pipetman và một số thiết bị trong phòng thí nghiệm Vi sinh vật mức độ an toàn cấp 1: (1) mục đích của việc sử dụng; kiểm tra thiết bị trước khi sử dụng; cách sử dụng thiết bị; vệ sinh và kiểm tra thiết bị sau khi sử dụng.

Bước1:Gi ithi uvớ ệ ề ấutạovàchứcnăngcủacácbộ phậntrênkínhhiểnviquangh cc ọ

Bước2:C pnguấ ồn đ ệnchokính,đ ều đìnhnguồnsáng,đ ềuchi i i ỉnhvị phùhợpvớingườiquansát.tríkínhcho

Bước3:Đặttiêubảnlênbànmẫu,dùngốcdichuyểnmẫuvậtdichuyểnphiếnkínhđếnvùng

muốnquansátsaochovị trímẫuquansátnằmngaychùmsángxuyênquat quang.Bụ ước4;Hạ

tụ quang(quansátVSVtrạngtháisống),đóngbớtch nsáng,quansátắ ở vậtkính10X,dùng cố

chỉnhthônângbànmangvậtmẫuchạmtớivậtkính,đặtmắtvàoquansát,dùngốcchỉnhthô

hạ bànm uxu ngchoẫ ố đếnkhithấy ảnhVSVr idùngnútchồ ỉnhtinhvặnnhẹđểxemrõ nhả

VSV

Bước5:Đểquansátảnhcóđộphóngđạilớnhơn,chuy nsangvể ậtkính40Xvàđiềuchỉnh cố

chỉnhtinhđểtìmảnhrõ.Bước6.Ghinhậnhìnhảnhvàđặc điểmvisinhvật.Bước7.Saukhi

quansát,laus chbànmangvạ ậtvàvệ sinhđầ ậuv tkínhbằnggiấythấmdầuxylene.Bước8.T tắ

nguồn đ ện,chùmbaobảovệ vàtrả ạichonhânviênphòngthínghi m.i l ệ

3.3.4 Quy trình phân lập/làm thuầngiốngbằngkỹthuậtcấyđiểmtrênđĩathạch(sơ

Cẩnthậntrongthaotáctramẫu cần phải tra đúngnồng độ và đúng liềulượng,lắc thật đều ốngnghiệm.

Phải tuân thủ đúng quytắctramẫutrênngọn lửađèn cồn trong bán kính20cm để khôngbịnhiễmkhuẩn

Phải chú ý thao tác khửkhuẩntrênđèncồn khôngtramẫukhiđĩapetriởquá

xa hoặcquágầnngọnlửađèncồn

25 Thực hành vi sinh vật học

để quan sát và môtả

Lưu ý: có chú thích vào hình vẽ hoặc hình chụp các kết quả quan sát trên đĩa petri

bị nhiễm khuẩn

mốc ngoài ra 1đĩa còn bị cầythạchdođãcho

ít môi trường

mạnh tay,khiếnkhuẩnlạckhôngthể mọc lên tạinơibịcầythạch

- Hết sức chúýtrongthao tác khử khuẩntrênngọnlửađèncồn

- Cấytrảihếtsứcnhẹnhàngđểkhôngbịcầythạch đồngthờichúýcho đúng lượng môitrường vào đĩa khôngquá ít cũngkhôngquánhiều và nhớ sau khikhử khuẩn que trangphải đợi nónguộimớiđượcdùngđểtrảinếukhông xe làm tanthạch

26 Thực hành vi sinh vật học

có dấu hiệu bị

ngoài ra khuẩnlạc còn mọc rấtđều theo đúngnồngđộ

- Ở đĩa số 1 đường riathưa hơn nhưng vẫn cònbịcầythạch

Nên vẽ chữ T dướiđĩatrướckhiriađểkhiria

sẽ đẹp và chuẩn xáchơn Giữa các đườngria không quá xa hoặcquá gần, lấy mẫu thậtítkhi qua đường ria tiếptheo, cuối cùngkhiriaphải thật nhẹ nhàngkhông nên dùng quánhiều lực nếukhôngsẽbịcầythạch

Nên tập ria cho thànhthạo đểđườngriađược

ra nét và đẹphơn,phảiria đều ra 2 mép củaống nghiệm, đườngriacách đầu và đuôi ốngnghiệm 0,5cm, ria nhẹtay để thạch không bịcầylên

sẽdễdàngvàđẹphơn

Hình

chụp

35 Thực hành vi sinh vật học

Lưuýcáchđầuvà đuôiống nghiệm 0,5cmtrước khiria,đồngthờiriatrảiđềuracả 2 bênmép ống nghiệmvàriathật nhẹnhàngchỉdùng

cổ tay để ria khôngdùng lực của cả cánhtay

36 Thực hành vi sinh vật học

Lưu ý: chấm điểm kỹ thuật cá nhân

-SửdụngdungdịchSPWtrongmôi trường hợp cần pha loangc mẫu trước khi phân lậpbằngphươngphápcấyđổ,cấytrảivớimụcđích:

Thựchànhvisinhvậthọc

+ Pha loãng mẫu : Dung dịch SPWđượcsửdụngđểphaloãngmẫubanđầu,giúpgiảmnồngđộvisinhvậttrongmẫuvàtạođiềukiệnphù hợp cho quá trình phânlập

+ Bảo vệ vi sinh vật : Dung dịch SPW cóchứacácthànhphầnnhưPhotphatvàmuốiphotphat, giúp bảo vệ vi sinh vật khỏi sựtácđộngcủacácyếutốmôitrườngbênngoàiduytrìtínhsốngcủachúngtrongquátrìnhphânlập

+ ĐiềuchỉnhpH:DungdịchSPWcópH7,2gần giống với pH tự nhiên của nhiềumôitrườngsống.ĐiềunàygiúpduytrìđiềukiệnpHphùhợp cho vi sinh vật trongquátrìnhphânlập

Câu 3 Sử dụng kỹ thuật pha loãng mẫu và cấy trải trên đĩa thạch để phân lập đối tượng vi sinh vật nào? với mẫu ban đầu có đặc điểm gì?

Sửdụngkỹthuậtphaloãngmẫuvàcấytrảitrênđĩathạchđểphânlậpđượcvikhuẩn

Sovớimẫubanđầucóđặcđiểm:

+ Làmôitrườngtựnhiênlấytừthựcphẩmhoặcngườibệnhchứanhiềuvisinhvậtkhácnhau

39 Thực hành vi sinh vật học

Câu 6 Tại sao phải sát khuẩn bàn tay và vị trí làm việc bằng cồn 70% trước và sau khi làm thí nghiệm với vi sinh vật?

Sátkhuẩnbàntayvàvịtrílàmviệcbằngcồn70%trướcvàsaukhilàm thí nghiệm

với vi sinh vật là một biệnphápquantrọngđểđảmbảovệsinhvàngănchặnsựlâylancủavi khuẩn và các tác nhân gây bệnh khác Dưới đây là một số lý do quantrọng:

- Giảmsựlâylanvikhuẩn

- Bảovệsứckhỏecánhân

- Đảmbảotínhchínhxáccủakếtquả

- Tuânthủquyđịnhvềantoànvàvệsinh

Câu 7 Loại que cấy được sử dụng trong kỹ thuật cấy trải, cấy ria, cấy điểm?

- Que cấy trải (Loop): Que cấy trải là một que kim loại có đầu được uốn cong thành hình vòng hoặc hình xoắn dùng để trải giọt sinh khối trên bề mặt thạch

- Que cấy vòng (Inoculating Loop): Que cấy điểm là một que kim loại có đầu hình vòng hoặc hình xoắn như que cấy trải, nhưng đầu que có một lỗ nhỏ ở giữa dùng

để cấy ria trên bề mặt thạch,cấy chuyền môi trường lỏng

- Que cấy móc: dùng để phân cấy các loại nấm mốc

Các loại que cấy này được sử dụng tùy thuộc vào mục đích và phương pháp cấy vi sinh vật cụ thể Que cấy trải thích hợp cho việc cấy mẫu vi sinh vật lên bề mặt agar, que cấy ria thích hợp cho việc cấy mẫu vi sinh vật vào trong agar, và que cấy điểm thích hợp cho việc cấy mẫu vi sinh vật vào một điểm duy nhất trên agar.

41 Thực hành vi sinh vật học

Câu 8 Tại sao trong kỹ thuật cấy ria trên đĩa thạch, sau mỗi đường cấy lại cần khử trùng que cấy?

Tuânthủquytrìnhvệsinhvàantoàn:Khửtrùngquecấysaumỗi đường cấy là một phần

quantrọngcủaquytrìnhvệsinhvàan toàn trong phòng thí nghiệm Điều này giúp đảmbảotuânthủcácquyđịnhvàquytrình an toàn, bảo vệ sức khỏe của người làm thí nghiệmvàngănchặnsựlâylanbệnhtrongcộngđồng

Câu 9 Tại sao trong kỹ thuật cấy ria/cấy điểm trên ống thạch nghiêng, không cấy sát đến phần thạch nghiêng ở trên?

- Để đảm bảo tínhchínhxáccủakếtquả:Phầnthạchnghiêngởtrêncủaốngthạchthườngkhôngđượcsửdụngđểnuôicấyvikhuẩn,vàkhôngcấysátđốivới phần này giúp đảm bảotínhchínhxácvàđộtincậycủakếtquả,tránhsựảnh hưởng của vi khuẩnkhôngmongmuốn.Ngănchặnnhiễmkhuẩnchéo,dễdàngquansátvàđánhgiákếtquả

Câu 10 Tại sao trong kỹ thuật cấy đổ thì lượng mẫu sử dụng thường là 1 ml/đĩa còn trong kỹ thuật cấy trải thì lượng mẫu sử dụng thường là 0.1 ml/đĩa?

- Trongkĩthuậtcấyđổ,mụcđíchđíchchínhtạotra1lớpmỏngmàngvikhuẩntrên bề mặt của đĩa cầy, việc sử dụng một lượng mẫu lớn (1m1)gíupđảmbảo rằng mẫu vi khuẩn được phân bố đềutrênbềmặt.Điềunàygiúpquansátvàđếmcácđơnvịhìnhthànhtrênbềmặtđĩacấymộtcáchdễdàng,chínhxác

Câu 11 Tại sao khi ủ mẫu thì với mẫu nuôi cấy vi khuẩn, người ta thường úp ngược đĩa (đáy đĩa ở trên)? Với mẫu nuôi cấy nấm mốc, người ta thường để xuôi đĩa (nắp đĩa ở trên).

- Khiủmẫunuôicấyvikhuẩn\,vikhuẩnthườngpháttriểnvàsinhsảnởphầntrên

củamôitrườngnuôicấy.Bằngcáchúpngượcđĩa,vikhuẩncóthểtiếpxúctrựctiếp

vớikhôngkhívàcácchấtdinhdưỡngcótrongmôitrườngnuôicấy

42 Thực hành vi sinh vật học

Câu 13 Tại sao khi nuôi cấy vi sinh vật bằng phương pháp cấy đổ thì thấy có khuẩn lạc trên bề mặt thạch, có khuẩn lạc ở trong thạch?

- Vì môi trường nuôi cấy khôngđượctạoramộtcáchhoànhảo.Visinhvậtcóthể tồn tại trong không khí trên các dụng cụ và bề mặt không được làmlàmsạch hoàn toàn vàchúngcóthểtiếpxúcvớimôitrườngnuôicấytrongquátrình cấy đổ Điều này dẫn đến việc VSV có thể pháttriểntrênbềmặtthạch

và trong thạch gây rahiệntượngcókhuẩnlạctrênbềmặtthạchvàkhuẩnlạcởtrongthạch

Câu 14 Tại sao khi nuôi cấy vi sinh vật trên môi trường DRBC, không thấy khuẩn lạc nấm mốc ở trong thạch?

- Vì môitrườngDRBCchứacácthànhphầnchốngvikhuẩnnhưChloramphenicolđểngăn chặn sự phát triển của vi khuẩn, trong khi các thành phần khác như rosebengalagarvàdichloranđượcsửdụngđểứcchếsựpháttriểncủanấmmốc

Câu 15 Các lỗi thường gặp nào khi phân lập không được khuẩn lạc riêng biệt trên vi sinh vật? Vì sao? Bài học kinh nghiệm rút ra cho lần làm thí nghiệm kế tiếp.

- Cáclỗithườnggặp;lỗinhiễmkhuẩndokhôngđảmbảovệsinhvàsạchsẽtrong

qúatrìnhlàmviệchoặcdosửdụngmôitrườngnuôicấykhôngsạch;lỗicấykhông

đúng,khôngđặtđúnglượngVSVcầnphânlậplênmôitrườngnuôicấy;lỗitrộnlẫntrongquátrìnhlàmviệccóthểxảyralỗitrộnlẫngiữacácmẫuhoặcVSVkhác