Chuẩn đoán bệnh dịch tả lợn cổ điển bằng phương pháp elisa nhóm 1

Trang 1 CHẨN ĐOÁN BỆNH DỊCH TẢ LỢN CỔ ĐIỂN BẰNG PHƯƠNG PHÁP ELISATRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP.. HỒ CHÍ MINHKHOA KHOA HỌC SINH HỌCGVHD: TS.. Huỳnh Văn Biết Trương Quang ToảnNhóm: 1Môn học :

CHẨN ĐOÁN BỆNH DỊCH

TẢ LỢN CỔ ĐIỂN BẰNG PHƯƠNG PHÁP ELISA

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ

MINH KHOA KHOA HỌC SINH HỌC

GVHD: TS Huỳnh Văn Biết Trương Quang Toản Nhóm: 1

Môn học : Thiết bị và KT CNSH Thứ sáu, ngày 27 tháng 10 năm 2023

1

Thành viên nhóm

Phan Bảo Vy

Thị Ngọc Tuyền

Lương Thảo Nhi

2

01 02

NỘI DUNG

thuật Elisa

Phương pháp

3

Giới thiệu

01

4

• Pestivirus là một chi

Flaviviridea

• CSF (Classical swine

fever) – dịch tả lợn cổ

điển gây ra bởi 1 loại

virus RNA sợi đơn

thuộc chi Pestivirus,

được bao bọc mã hóa

cho một polyprotein duy

nhất

Dịch tả lợn cổ điển

Hình 2: Virus CSF

5 Hình 1: Bệnh dịch tả lợn

cổ điển

Nguyên nhân:

▪ Nguồn lây chính của bệnh thông qua đường tiêu hóa hay đường hô hấp

▪ Chuồng trại không vệ sinh

▪ Lây truyền cơ học phổ biến qua ủng, quần áo,…

Triệu chứng:

• Biểu hiện đầu tiên sau 3-15 ngày, phổ biến

là gây sốt, bệnh tích trên da, co giật, xuất huyết và có thể diễn biến thứ cấp hoặc mãn tính Lợn con nếu mắc bệnh sẽ gây tử vong sau 15 ngày 6

Triệu chứng

Hình 3: Lợn buồn nôn,

Hình 5: Lợn xuất huyết Hình 6: Lợn da trắng chuyển sang màu đỏ

7

Tổng quan và nguyên lí về kỹ thuật

Elisa

02

8

Tổng quan về kỹ thuật Elisa

❑ Dựa trên sự kết hợp đặc hiệu giữa kháng thể- kháng nguyên, phát hiện bằng kháng thể đánh dấu khi cho thêm cơ chất, enzyme sẽ thủy phân cơ chất thành một chất có màu

❑ Phương pháp cho phát hiện và định lượng vật chất

Hình 7:

Elisa

9

Nguyên lí hoạt động của bộ kit

test

⮚ Bộ kit test này hoạt động dựa trên nguyên lý elisa sandwich

⮚ Elisa sandwich định lượng kháng nguyên giữa hai lớp kháng thể

Hình 8: Elisa sanwich trực

tiếp

10

Phương pháp nghiên cứu

03

11

Nguyên vật liệu

Mẫu : huyết thanh nghi ngờ chứa kháng nguyên

Anti-CSFV E2 ab coated plate

10X sample treatment buffer

10X washing buffer

Dilution buffer

20X whole blood treatment buffer

HRPO anti-CSFV conjugate

Strong positive control

Weak positive control

Negative control

TMB subtrate

Stop solution

12

Quy trình thực hiện

Đáy giếng gắn

kháng thể

kháng kháng

nguyên CSFV

E2

50 µl dilution buffer để pha loãng mẫu

50 µl mẫu, đối chứng âm, đối chứng dương (tỉ lệ pha loãng

1 :2)

Ủ 90 phút,

370C

Rửa 3-5 lần

100 µl HRPO anti-CSFV conjugate

Ủ 60 phút,

370C

Rửa 3-5 lần

100 µl TMB substrate

Ủ tối, 10 phút

50µl stop solution

Đọc kết quả

OD 450 nm

1 2 3 4 5 6 7

13

04 Kết quả dự kiến

14

Đọc kết quả

Sau khi có kết quả sử dụng

máy đo OD đọc kết quả ở

450nm

Sử dụng công thức trên để

tính và kết luận:

% SP ≥ 20% => dương

tính

% SP 15~20% => nghi

ngờ

% SP ≤ 15% => âm tính

15

Hình 9: Kết quả

Tài liệu tham khảo

16

1 Bệnh Dịch TẢ lợn cổ điển (CSF) Available

at:https://thuoctrangtrai.com/benh-dich-ta-lon-co-dien-csf-nd83603.html (Accessed: 25 October 2023)

2.file:///C:/Users/nguye/Documents/Zalo%20Received%20Files/A%CC%89nh%20ma

% CC%80n%20hi%CC%80nh%202023-03-23%20lu%CC%81c

%2016.44.41%20(1).pdf

3.Tổng Quan VỀ Bệnh dịch TẢ lợn cổ điển (CSF - classical swine fever) HappyVet

Available at: https://happyvet.vn/tin-tuc/benh-dich-ta-lon-co-dien-csf.html (Accessed:

25 October 2023)

4 MEDLATEC, B viện đa khoa (2020) Đối tượng và Cách thức thực hiện

xét nghiệm Elisa, Bệnh viện đa khoa MEDLATEC Available at:

https://medlatec.vn/tin-tuc/doi-tuong-va-cach-thuc-thuc-hien-xet-nghiem-elisa-s58-n16722 (Accessed: 25 October 2023)

5 Những điều cơ bản về kỹ Thuật Elisa (no date) Những điều cơ bản về kỹ thuật

ELISA Available at:

https://biomedia.vn/review/nhung-dieu-co-ban-ve-ky-thuat-elisa.html (Accessed: 25 October 2023)

CẢM ƠN

ĐÃ

LẮNG

NGHE

17