An Giang, ngày 15 tháng 05 năm 2023 Ngƣời thực hiện Trang 6 TÓM TẮT Nghiên cứu “Khảo sát khả năng kháng khuẩn và kháng oxy hóa của cao chiết cây dừa cạn Catharanthus roseus” đƣợc thực
ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƢỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP – TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN VÀ KHÁNG OXY HÓA CỦA CAO CHIẾT CÂY DỪA CẠN (Catharanthus roseus) TRƢƠNG THỊ MỸ CHI AN GIANG, THÁNG 05 NĂM 2023 ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƢỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NƠNG NGHIỆP – TÀI NGUN THIÊN NHIÊN KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC KHẢO SÁT KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN VÀ KHÁNG OXY HÓA CỦA CAO CHIẾT CÂY DỪA CẠN (Catharanthus roseus) TRƢƠNG THỊ MỸ CHI MSSV: DSH192418 GIÁO VIÊN HƢỚNG DẪN Ths BẰNG HỒNG LAM AN GIANG, THÁNG 05 NĂM 2023 CHẤP NHẬN CỦA HỘI ĐỒNG Khóa luận “Khảo sát khả kháng khuẩn kháng oxy hóa cao chiết dừa cạn (Catharanthus roseus)” sinh viên Trƣơng Thị Mỹ Chi thực dƣới hƣớng dẫn Ths Bằng Hồng Lam Phản biện Phản biện Ts Đoàn Thị Minh Nguyệt Ths Lê Hoàng Bảo Ngọc Giáo viên hƣớng dẫn Ths Bằng Hồng Lam i LỜI CẢM TẠ Sau trình học tập, nghiên cứu khoa Nông nghiệp - TNTN trƣờng Đại học An Giang, em tiếp thu đƣợc nhiều kiến thức, kinh nghiệm quý báu nhờ giảng dạy, hƣớng dẫn tận tình thầy mơn Em xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến Bằng Hồng Lam quan tâm, ủng hộ tận tình hƣớng dẫn, giúp đỡ truyền đạt kinh nghiệm, kiến thức vô quý báu cho em suốt thời gian thực khóa luận tốt nghiệp Em xin đƣợc gửi lời cảm ơn chân thành đến Ban Giám hiệu Trƣờng Đại học An Giang, Ban chủ nhiệm Khoa Nông nghiệp - Tài nguyên thiên nhiên, tạo điều kiện thuận lợi cho em học tập, học hỏi nhiều kinh nghiệm tạo điều kiện trang thiết bị, dụng cụ để em thực tốt đề tài nghiên cứu Đặc biệt, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến cha mẹ ln chăm sóc, quan tâm động viên suốt quãng đƣờng học tập để có thêm nghị lực tâm để thực ƣớc mơ Con xin gửi lời biết ơn sâu sắc đến cha mẹ Cảm ơn quý thầy cô Bộ môn Công nghệ sinh học ˗ chuyên ngành vi sinh tận tình giảng dạy, giúp đỡ em năm học vừa qua để em có đủ kiến thức kinh nghiệm bổ ích để em thực đề tài Cuối cùng, em xin chúc tất quý thầy cô bạn bè dồi sức khỏe thành công bƣớc đƣờng nghiệp Xin chân thành cảm ơn! An Giang, ngày 15 tháng 05 năm 2023 Ngƣời thực Trƣơng Thị Mỹ Chi ii LỜI CAM KẾT Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các số liệu kết có nguồn gốc rõ ràng Các kết luận khoa học đề tài chƣa đƣợc công bố tài liệu trƣớc An Giang, ngày 15 tháng 05 năm 2023 Ngƣời thực Trƣơng Thị Mỹ Chi iii TÓM TẮT Nghiên cứu “Khảo sát khả kháng khuẩn kháng oxy hóa cao chiết dừa cạn (Catharanthus roseus)” đƣợc thực nhằm thu nhận cao chiết từ dừa cạn định tính số hợp chất thiên nhiên có cao chiết dừa cạn, khảo sát khả kháng khuẩn kháng oxy hóa cao chiết dừa cạn Kết nghiên cứu cho thấy phƣơng pháp ngâm dầm với ethanol 70 có diện hợp chất flavonoid, steroid terpenoid hiệu suất trích ly trung bình cao chiết dừa cạn cao 8,82 Bên cạnh kết khảo sát khả kháng oxy hóa cao chiết dừa cạn phƣơng pháp DPPH cho thấy cao chiết dừa cạn có khả kháng oxy hóa đạt 95,30 nồng độ 500 μg/mL giá trị IC50 = 245,65 μg/mL Ngoài ra, việc khảo sát khả kháng khuẩn cao chiết dừa cạn với năm dòng vi khuẩn Escherichia coli (E coli), Salmonella sp., Staphylococcus sp., Vibrio sp Propionibacterium acnes (P.acnes) nồng độ từ 10 ˗ 50 mg/mL so với đối chứng âm (0 mg/mL) đối chứng dƣơng (kháng sinh Tetracyclin 30µg) cho thấy khả kháng khuẩn trung bình cao chiết dừa cạn với năm dịng vi khuẩn khác biệt có ý nghĩa thống kê mức với nhau, khả kháng E coli cao nhất, P.acnes, Vibrio sp., Staphylococcus sp thấp Salmonella sp với đƣờng kính vịng kháng khuẩn lần lƣợt 6,52 mm; 6,33 mm; 5,90 mm; 5,48 mm 4,50 mm Khả kháng khuẩn trung bình nồng độ cao chiết khác biệt có ý nghĩa mặt thống kê mức với thấp kháng sinh Tetracyclin (đối chứng dƣơng), khả kháng khuẩn cao nồng độ 50 mg/mL giảm dần theo t lệ giảm dần nồng độ, thấp nồng độ 10 mg/mL, không kháng nồng độ mg/mL Cụ thể, qua nồng độ 50; 40; 30; 20 10 mg mL đƣờng kính vịng kháng khuẩn giảm lần lƣợt 5,73 mm; 4,33 mm; 3,73 mm; 2,40 mm 1,33 mm kháng sinh 22,80 mm Từ khóa: Cao chiết dừa cạn, hợp chất tự nhiên, kháng khuẩn, kháng oxy hóa iv MỤC LỤC CHẤP NHẬN CỦA HỘI ĐỒNG i LỜI CẢM TẠ ii LỜI CAM KẾT iii TÓM TẮT iv MỤC LỤC v DANH S CH BẢNG ix DANH S CH H NH x DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT xiii CHƢƠNG GIỚI THIỆU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU 1.3 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 1.4 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 1.5 NHỮNG ĐÓNG GÓP CỦA ĐỀ TÀI CHƢƠNG TỔNG QUAN VỀ VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 2.1 GIỚI THIỆU VỀ CÂY DỪA CẠN 2.1.1 Phân loại theo khoa học 2.2 ĐẶC ĐIỂM CHUNG 2.2.1 Đặc điểm dừa cạn 2.2.2 Phân bố dừa cạn 2.2.3 Thành phần hóa học dừa cạn 2.2.4 Công dụng dừa cạn 2.3 HOẠT TÍNH CỦA C C BỘ PHẬN CÂY DỪA CẠN 2.3.1 Hoạt tính kháng khuẩn 2.3.2 Hoạt tính chống oxy hóa 2.3.3 Hoạt tính kháng nấm 2.4 TỔNG QUAN VỀ PHƢƠNG PH P HÕA TAN CHIẾT XUẤT THỰC VẬT v 2.4.1 Định nghĩa 2.4.2 Mục tiêu hòa tan chiết xuất 2.4.3 Các phƣơng pháp hòa tan chiết xuất 2.5 TỔNG QUAN VỀ TRÍCH LY 10 2.5.1 Định nghĩa 10 2.5.2 Dung mơi trích ly 10 2.6 TỔNG QUAN VỀ CAO CHIẾT (CAO THUỐC) 10 2.6.1 Định nghĩa 10 2.6.2 Đặc điểm phân loại 10 2.6.3 Yêu cầu chất lƣợng 11 2.6.4 Lợi ích cao chiết 12 2.7 CƠ CHẾ KH NG KHUẨN CỦA C C HỢP CHẤT CÓ NGUỒN GỐC THỰC VẬT 12 2.7.1 Định nghĩa 12 2.7.2 Cơ chế kháng khuẩn 12 2.8 PHƢƠNG PH P X C Đ NH HOẠT TÍNH KH NG KHUẨN 13 2.8.1 Phƣơng pháp khuếch tán đĩa thạch 13 2.8.2 Phƣơng pháp khuếch tán giếng thạch 13 2.9 GỐC TỰ DO VÀ HOẠT TÍNH KH NG OXY HĨA 13 2.9.1 Gốc tự 13 2.9.2 Chất chống oxy hóa 13 2.10 MỘT SỐ PHƢƠNG PH P Đ NH GI HOẠT TÍNH KH NG OXY HĨA 14 2.10.1 Phƣơng pháp khử gốc tự DPPH 14 2.10.2 Phƣơng pháp sử dụng TBA – đo lƣợng MDA 14 2.10.3 Phƣơng pháp đánh giá khả kết hợp với ion sắt II 15 2.10.4 Phƣơng pháp pha loãng 15 2.11 SƠ LƢỢC VỀ C C CHỦNG VI SINH VẬT GÂY BỆNH 16 2.11.1 Staphylococcus aureus 16 2.11.2 Escherichia coli 17 vi 2.11.3 Salmonella enterica 18 2.11.4 Propionibacterium acnes 19 2.11.5 Vibrio parahaemolyticus 20 2.12 T NH H NH NGHIÊN CỨU TRONG NƢỚC VÀ TRÊN THẾ GIỚI 21 2.12.1 Tình hình nghiên cứu nƣớc 21 2.12.2 Tình hình nghiên cứu giới 22 CHƢƠNG PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PH P NGHIÊN CỨU 24 3.1 PHƢƠNG TIỆN NGHIÊN CỨU 24 3.1.1 Thời gian địa điểm tiến hành thí nghiệm 24 3.1.2 Vật liệu thí nghiệm 24 3.1.3 Dụng cụ 24 3.1.4 Thiết bị 25 3.1.5 Hóa chất 25 3.1.6 Môi trƣờng phân lập 25 3.2 PHƢƠNG PH P NGHIÊN CỨU 25 3.2.1 Nội dung 1: Thu nhận cao chiết từ dừa cạn 26 3.2.2 Nội dung 2: Định tính số hợp chất thiên nhiên có cao chiết dừa cạn 26 3.2.3 Nội dung 3: Khảo sát khả kháng oxy hóa cao chiết dừa cạn phƣơng pháp khử gốc tự DPPH 28 3.2.4 Nội dung 4: Khảo sát khả kháng khuẩn cao chiết dừa cạn 31 3.3 PHƢƠNG PH P PHÂN TÍCH SỐ LIỆU 32 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 4.1.Trích cao dung môi ethanol 33 4.2 Kết định tính số hợp chất có hoạt tính sinh học cao chiết dừa cạn 34 4.3 Khả kháng oxy hóa cao chiết ethanol dừa cạn phƣơng pháp DPPH 36 4.4 Kết khảo sát khả kháng khuẩn cao chiết dừa cạn với vi khuẩn gây bệnh E Coli, Salmonella sp., Staphylococcus sp., vii Vibrio sp P.acnes 41 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGH 53 5.1 KẾT QUẢ 53 5.2 KIẾN NGH 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO 53 PHỤ LỤC CHƢƠNG 63 viii